Sunteți pe pagina 1din 27

1

DESCRIEREA BIOREACTORULUI BIOSTAT A PLUS


Sistemul Biostat A PLUS
Acest sistem automat Biostat A Plus are n componena sa mai multe echipamente ce vor

fi descrise n urmtorul capitol.

FIGURA 1 Sistemul Biostat A Plus

1.1

Vasul de cultur
Una i cea mai important component a bioreactorului Biostat A Plus o reprezint vasul

de cultur n care se vor desfura practic toate experimentele.Acesta are un volum util de 5 L i
este realizat din sticl borosilicat (perete simplu nclzit cu manta electric).
Sterilizarea vasului ct i a celorlalte componente se realizeaz la o temperatur de
121C.
Capacul vasului este realizat din oel inoxidabil i prezint orificii de diferite diametre n
care sunt introduse sondele (pentru msurarea unor parametrii ai procesului pH, pO 2,
spum/nivel, temperatur) precum i alte componente pentru controlul procesului (agitator, tuburi
introducere substane, tuburi recoltate, tub evacuare, etc.)
FIGURA 2 Capacul vasului de cultur

1.2

Unitatea de comand
Unitatea de comand este caracterizat de un sistem de control integrat, pompe integrate,

controlere debit de gaz, control pH/pO2, spum/nivel i altele .


Este necesar utilizarea unui calculator extern pentru comandarea bioreactorului Biostat
A Plus, dar se ofer deasemenea posibilitatea atarii unui touch panel i dezvoltarea unui soft
pentru conducerea/monitorizarea procesului desfurat.
Opiunile de debit a gazelor, permit obinerea unui sistem specific nevoilor utilizatorului.
Se pot alege pn la patru pompe manuale pentru diverse debite de gaze (Aer, O 2, N2 i CO2).
De asemenea mai este prevzut cu trei pompe peristaltice fixe (20 RPM) ce pot fi legate
direct la sursele de acid, baz, spum, nivel.
n figura 3 se pot observa conectorii componentelor bioreactorului dintre care enumerm:
1. conexiuni pentru electrozii de pH/pO2, motor, sond de temperatur i spum/nivel;
2. conexiuni Touch Panel;
3. conexiuni imprimant / balan;
4. alimentare manta electric (nclzitorul vasului);
5. conectoare pentru ap (Water In/Out) ce permit ataarea/detaarea utilitilor;
6. conectori tub evacuare gaze proces;
7. conectori alimentare gaze (Gas in)
8.

conectori evacuare gaze (8 Gas out).

FIGURA 3 Unitatea de comand a bioreactorului

1.3 Agitatorul
Omogenizarea mediului de cultur este realizat cu ajutorul unei palete elicoidale ataate
unui ax, rotit prin intermediul unui motor.
Cel mai important lucru const n faptul ca nainte de utilizare, totalitatea ansamblului s
fie sterilizat.
Agitatorul este format din trei segmente care sunt dispuse coaxial acesta fiind special
conceput pentru versiunea CC (cell culture cultur de celule ) i asigur un amestec uor dar
foarte eficient totodat chiar i la viteze mici aplicnd fore de tiere de intensitate sczut asupra
celulelor.

mpreun cu instrumentul pentru barbotare cu micro bule, tuburile de alimentare cu gaz,


precum i coul de ventilaie, aceast component asigur circulaia pe vertical n vasul de
reacie.

FIGURA 4 (a) Motorul + modulul de alimentare/control;(b) Arborele agitatorului;


(c) Dispozitivul de amestecare;(d) Instrumentul pentru barbotare

1.4 Tubul de barbotare cu micro-orificii


Acesta este conceput special pentru culturile de celule care sunt sensibile la forele de
forfecare n medii de cultur ce au o tendin sczut de dezvoltare la spum. Conducta de
barbotare are n capt o frit microporoas din oel inoxidabil sinterizat ( Fig.24 d. ).
Aerul sau gazul /amestecul de gaze va fi introdus n mediul de cultur prin porii fritei
formndu-se astfel bule mici ce vor fi distribuite n amestecul lichid din vasul de cultur.
eava de gazare cu frita microporoas este o component standard a bioreactoarelor n
configuraia Cell Cultures. Poziionarea fritei trebuie realizat n concordan cu lungimea
arborelui agitatorului. Instrumentul de barbotare trebuie introdus la aproximativ 1 cm sub
agitator. nainte de sterilizare se va ataa tubului un furtun ce va avea conectat la capt un filtru
Midisart 2000.

De asemenea nainte de autoclavare, cu ajutorul unei cleme se ntrerupe furtunul dintre


adaptorul situat pe capacul vasului i filtrul Midisart 2000 folosit. n caz contrar ingrediente ale
mediului de cultur pot ajunge n interiorul fritei i pot bloca porii acesteia, prin urmare cantitatea
de gaz, precum i modul de distribuire al acestuia nu vor mai fi la parametrii optimi procesului.
Dup autoclavare, cnd vasul este montat din nou n spaiul de lucru se va conecta
cellalt capt al filtrului la sursa de alimentare cu gaz (situat pe laterala unitii de comand a
bioreactorului) i se va ndeprta clema ataat nainte de sterilizare.

1.5 Tubul pentru recoltare


Este folosit pentru luarea unor mostre din vasul de cultur i depozitarea acestora ntr-un
recipient special sau pentru ndeprtarea surplusului de lichid din interiorul vasului n
eventualitatea depirii nivelului prestabilit.
Mostrele pot fi transferate din vasul de reacie n recipientul pentru probe aplicnd o
uoar suprapresiune vasului sau cu ajutorul unei pompe peristaltice.
Suprapresiunea necesar pentru transferul lichidului din vasul de cultur n recipientul
pentru probe poate fi obinut prin deschiderea alimentrii cu gaz i blocarea evacurii pe
perioada recoltrii.

FIGURA 5 (a) Tubul pentru recoltare;(b) Setul pentrul prelevarea mostrelor;


n cazul folosirii unei pompe, funcionarea acesteia poate fi automatizat folosind funcia
pentru controlul nivelului n vasul de cultur, funcie disponibil n sistemul de monitorizare i
control al bioreactorului.
Setul de recoltare manual a probelor este prezentat n figura 5 .

Recipientele pentru recoltare pot fi sticle sau eprubete sterilizate sau nesterilizate, n
funcie de destinaia probelor. n general, mostrele trebuie luate n recipiente sterilizate, spre
deosebire de surplusul de lichid din vas care poate fi scos i depozitat n orice fel de recipient.

1.6 Sonda antispumant i sonda de nivel


Att sonda antispumant ct i sonda de nivel sunt electrozi conductivi singlepoint.
Principiul lor de msurare este reprezentat de msurarea conductivitii; pri din oel inoxidabil
ale vasului de cultur sunt folosite n calitate de electrod opus.
Mediul de spum sau cultur n contact cu sondele determin o modificare a intensitii
curentului i modificarea conductivitii sistemului de msurare.
Sondele prezint la exterior un strat izolator din ceramic. Acest strat are rolul de a
mpiedica scurtcircuitarea din cauza depunerilor de
reziduuri la nivelul senzorilor.
nlimea de inserare pentru sonda antispumant
este fix. n cazul sondei de nivel adaptorul n care aceasta
va fi montat permite ajustarea nlimii de inserare n
funcie de volumul mediului de cultur din vas. Sonda va fi
fixat la nivelul ce nu trebuie depit n interiorul vasului.
Trebuie luat n considerare faptul c n timpul folosirii
agitatorului la viteze mari, precum i n cazul introducerii
unui amestec gazos nivelul mediului de cultur din vas este
mai mare.
nainte de introducerea vasului pentru autoclavare
trebuie ndeprtat cablul ataat celor dou sonde.
Dac sonda este introdus prea mult n adaptor se
poate trage puin de ea chiar i dup sterilizare, ns trebuie
avut n vedere c niciodat dup sterilizare s nu se
procedeze la mpingerea sondei, deoarece acest lucru duce
la contaminarea mediului de cultur cu germeni de mediu.

FIGURA 6 Sonda antispumant i sonda de nivel

1.7 Senzorul de temperatur


Se monteaz n adaptorul special situat pe capacul vasului de cultur. Este un senzor tip
Pt-100 (termometru cu rezisten din platin), care exploateaz modificarea rezistenei electrice a
unor materiale n funcie de temperatur. Acest tip de senzor ofer o precizie mult mai mare dect
celelalte, fiind utilizat n procesele industriale n care temperatura nu depe te 600 C.
Adncimea de imersie este dat de arborele senzorului, aceasta neputnd fi reglat
ulterior. nainte de autoclavarea vasului de cultur, este necesar nvelirea mufei senzorului n
folie de aluminiu pentru a fi protejat de impactul direct al aburului n timpul procesului de
sterilizare. Dup autoclavare se poate ndeprta folia de aluminiu i se realizeaz conexiunea
senzorului la unitatea de comand a bioreactorului. Senzorul Pt-100 nu necesit calibrare.

1.8 Electrodul pentru msurarea pH-ului


Electrozii de pH sunt ansambluri combinate sterilizabile. n cazul vaselor de cultur tip
UniVessel sunt utilizai electrozi cu punte electrolit pe baz de past. Astfel de electrozi pH sunt o
alternativ la cei cu electrolit lichid, oferind mai multe avantaje:
-

electrozii pH cu electrolit sub form de past au un compartiment presurizat pentru

electrolit i pot fi utilizai n medii cu o presiune de funcionare de pn la 2,5 barg (circa 36


psig); presiunea maxim admis pentru bioreactoarele tip UniVessel este de 1 barg (14,5 psig).
- dei o cantitate mic de electrolit ptrunde continuu diafragma, cantitatea stocat este
suficient pentru ntreaga durat de via a instrumentului. Astfel, acest tip de electrod nu necesit
servicii de ntreinere .
FIGURA 7 Electrodul de pH

Pentru curare se cltete cu ap distilat dup fiecare utilizare. n cazul n care nu este
folosit pentru o perioad scurt de timp, se plaseaz ntr-un recipient cu ap demineralizat. Dac
perioada de stocare este una ndelungat, electrodul trebuie plasat ntr-un pahar cu soluie 3M
KCl (clorur de potasiu 3 molar).
n cazul n care o astfel de soluie nu este disponibil se poate opta pentru ataarea
cpcelului protectiv din plastic umplut cu soluie electrolit.
Datorit nclzirii n timpul sterilizrii, reaciilor chimice ntre mediu i diafragm sau
depunerilor diferitelor reziduuri, electrozii de pH se uzeaz n timp. O verificare funcional a
acestuia se face ntr-un mod destul de simplu i rapid. Se msoar pH-ul unei soluii etalon (face
parte din pachetul livrat mpreun cu instrumentul de msur) i se compar valoarea indicat
online cu valoarea nscris pe recipientul soluiei etalon folosite ( pH 4 / pH 7 / pH 9 ).
Pentru prima utilizare i dup depozitarea pe termen lung a electrodului de pH n stare
uscat, acesta trebuie s fie reactivat i recondiionat cu atenie; membrana de sticl a electrodului
formeaz un strat subire de gel apos, datorit unei reacii cu apa. Acest strat afecteaz calitatea
msurrilor efectuate efectuate cu ajutorul sondei (timpul de rspuns, panta, alcalinitatea) i, prin
urmare, ar trebui s se regenereze proprietile dup uscarea electrodului.
Reactivarea electrodului se face prin plasarea pentru aproximativ 10 min. ntr-un pahar cu
0,1 - NaOH 1M, apoi pentru aproximativ 10 min. n 0,1 - 1M HCl i, n final pentru aproximativ
15 min. n soluia de depozitare specificat de productor.
nainte de a fi introdus n vasul de cultur, electrodul de pH trebuie calibarat. Detalii
referitoare la acest operaie vor fi prezentate n capitolul urmtor (seciunea Calibrarea
senzorilor).

1.9 Electrodul pO2


Electrozii pO2 sunt folosii pentru msurarea oxigenului dizolvat ntr-o soluie.
Reprezint componente sterilizabile i folosesc metoda polarografic pentru analiz.
Electrodul este constituit dintr-un anod de Ag i un catod de Pt separai de soluia ce
urmeaz a fi msurat printr-o membran polimeric permeabil pentru gaze (principiul
CLARK). Anodul i catodul sunt conectai prin intermediul soluiei electrolit, care formeaz un
strat mic ntre membran i catod. La o tensiune de polarizare corespunztoare, oxigenul ptrunde
prin membran i vine n contact cu catodul. Are loc o reacie chimic n urma creia este produs
un curent electric de ordinul nA, care este direct proporional cu presiunea parial a oxigenului.

Permeabilitatea membranei depinde de temperatur. La creterea temperaturii,


intensitatea curentului va crete cu 3%/C. Acest efect este compensat de reglarea automat a
temperaturii prin intermediul unui termistor integrat n electrod. Dup fiecare utilizare se cltete
cu ap demineralizat.
n cazul n care nu este folosit pentru o perioad scurt de timp, se plaseaz ntr-un
recipient cu ap demineralizat.
Datorit efectelor termice (n timpul autoclavrii), reaciilor chimice ntre mediu i
membran sau depunerilor diferitelor reziduuri, electrozii pO2 se uzeaz n timp.
Electrodul poate fi verificat prin msurarea curentului zero i timpului de rspuns. Aceast
operaie poate fi realizat n afara bioreactorului. nainte de inspecie, electrodul trebuie polarizat
cel puin 2 ore. Se poate folosi un modul de polarizare pus la dispoziie de productor sau pur i
simplu se conecteaz electrodul la sistemul de msur i control, aceasta fiind pornit n prealabil.
Este inut electrodul n aer, se msoar nivelul oxigenului dizolvat, se ateapt pentru o valoare
stabilizat a msurtorii i se noteaz valoarea indicat. Se plaseaz apoi electrodul ntr-un mediu
lipsit de oxigen (de exemplu, azot puritate > 99.98 %). Se ateapt pentru o valoare stabilizat i
se noteaz aceasta. La schimbarea din mediul ambiental n mediul lipsit de oxigen, curentul zero
msurat trebuie s fie mai puin de 1,5 % din curentul n aer dup 5 minute.

FIGURA 8 Electrodul pentru msurarea concentraiei oxigenului dizolvat


Dup autoclavare se realizeaz conexiunea cu unitatea de comand a bioreactorului, i
este necesar calibrarea senzorului. Aceasta se realizeaz n dou etape, calibrarea zero-ului i
calibrarea pantei.
Zero -ul reprezint curentul electrodului n mediu lipsit de oxigen. Dup autoclavare,
n vasul de cultur ar trebui s fie indicat valoarea 0 % pO 2.
Pentru ajustarea pantei, se pornete sursa de aer (gaz coninnd oxigen) i se regleaz
viteza de agitare. n acest fel se obine o aerare optim a mediului de cultur (n funcie de

condiiile prestabilite n cadrul procesului).La un afiaj stabil al valorii msurate se poate calibra
aceast valoare astfel nct ea s reprezinte 100 % pO 2.

1.10

Dispozitivul pentru rcirea gazelor evacuate

Cooler-ul de evacuare poate, prin procesul de condensare, s reduc coninutul de vapori


de ap n gazele de evacuare. Acest lucru reduce pierderea de lichid prin intermediul gazelor
evacuate i previne blocarea filtrului steril din cauza umiditii. Dac filtrul de evacuare este
blocat, alimentarea cu aer a culturii poate fi redus sau blocat n totalitate. Acest lucru poate
duce la o suprapresiune inadmisibil. De asemenea, filtrele umede pot fi contaminate uor cu
germeni de mediu introdui prin partea de ieire a filtrului. n timp acetia pot penetra membrana
filtrului i pot contamina cultura. La fel ca i celelalte componente, tubul de evacuare este
sterilizabil. Este componenta care dicteaz nlimea autoclavei. n cazul vasului de cultur
UniVessel 5 L, nlimea interioar necesar este de 700 mm.

FIGURA 9 Dispozitivul pentru rcirea gazelor evacuate

Evacuarea asigur compensarea presiunii n interiorul vasului de cultur cu aer


ambiental.Vidul sau suprapresiunea pot cauza explozia vasului, de aceea sub nici o form nu se
va bloca calea de circulaie a aerului n timpul sterilizrii.
Furtunurile pentru alimentarea cu ap rece, precum i conectarea la scurgere pot fi
conectate cnd procesul de fermentaie este iniiat. Pornirea alimentrii cu ap se face simultan cu
alimentarea cu gaz. Debitul apei de rcire ce alimenteaz cooler-ul de evacuare trebuie s fie
meninut constant la o valoare presetat de productor.

1.11

Filtrele sterile pentru alimentarea cu aer/gaz i

evacuare
Acestea sunt filtre cu membrane speciale n carcase de plastic. Dimensiunea porilor
membranei este de 0,2 m i asigur alimentarea cu aer steril (sau gaz) a mediului de cultur.Au
o suprafa de 20 cm2 i permit un debit de ieire de 5 l/min la o presiune de 0,1 barg
Membranele filtrelor blocate din cauza umiditii pot fi uscate prin aerarea atent cu aer
curat presurizat. Dac la nivelul membranei a ajuns spum sau mediu de cultur, atunci filtrul
trebuie nlocuit.
Aceste filtre sunt autoclavabile (la o temperatur de 121 C) i pot fi sterilizate de mai
multe ori (aprox. 20 x).
Astfel de filtre sunt necesare pentru urmtoarele conexiuni:
-

Alimentarea cu gaz a tubului pentru barbotare;

Alimentarea cu gaz a coului de aerare;

Evacuarea gazelor prin cooler-ul de evacuare;

1.12

Alimentarea cu soluii corective

Pentru soluiile corective (acizi, baze, antispumani, soluii nutritive) vasele de cultur tip
Univessel 5 l includ recipiente de 500 ml, autoclavabile, realizate din sticl borosilicat.
La nivelul capacului bioreactorului este instalat un port cvadruplu de alimentare cu soluii
corective.
Ajustarea nivelului n interiorul bioreactorului se face prin intermediul celor trei pompe
peristaltice instalate n partea frontal a unitii de comand a bioreactorului.

Odat ncrcate cu soluii corective, recipientele se poziioneaz lng vasul de cultur,


pentru a fi autoclavate odat cu acesta.
Recipientele prezint capace speciale, cu dou orificii, unul pentru tubul de silicon ce va
fi trecut prin dispozitivul de pompare i ataat apoi portului de alimentare situat la nivelul
capacului vasului de cultur, i cel de-al doilea pentru compensarea presiunii n interiorul
recipientului. Acestuia i se va ataa un filtru steril, fiind nerecomandat blocarea acestei ci n
timpul procesului de autoclavare.

FIGURA 10 Alimentarea cu soluii corective (a) pompa peristaltic;


(b) recipientul pentru soluii corective;(c) adaptorul cvadruplu pentru alimentare

1.13

Mantaua electric

Reglarea temperaturii n cazul bioreactoarelor poate fi realizat n mai multe moduri.


Vasele cu perete dublu permit integrarea unui sistem de serpentine, prin care circul ap
realizndu-se n acest mod fie rcirea instalaiei, fie nclzirea acesteia.
Vasul de cultur folosit n cadrul acestui proiect este de tip UniVessel 5 L, i prezint un
perete simplu. Pentru astfel de cazuri, se folosete o mant electric pentru a crete temperatura n

interiorul bioreactorului. Este constituit dintr-o serpentin electric acoperit la exterior de un


strat de spum de cauciuc siliconic. Conexiunea de alimentare se realizeaz cu unitatea de control
a bioreactorului.
Controlul este de tip bipoziional, unitatea declannd procesul de nclzire, atunci cnd
temperatura scade sub pragul prestabilit n proces. Dezavantajul n acest caz este dat de
necesitatea unui sistem separat pentru rcirea bioreactorului. n cazul de fa, unitatea dispune de
un sistem de conectare la o reea de ap (presiune de operare max. 2 bar). Sistemul se numete
Cooling finger i este opional n cazul culturilor de celule, el fiind n pachetul standard pentru
culturile microbiene.

DESCRIEREA PACHETULUI SOFTWARE DE MONITORIZARE


I CONTROL
Interfaa Micro-DCU a fost dezvoltat de cei de la Sartorius BBI Systems ca o extensie a

sistemului de control DFC. Toate funciile de msurare i control sunt disponibile n acest pachet
software.
n funcie de modelul bioreactorului, interfaa este disponibil fie integrat n unitatea de
comand i control a bioreactorului, fiind accesat de operator prin intermediul unui touchscreen, fie disponibil pe un calculator extern, cum este i cazul bioreactorului folosit n cadrul
acestui proiect.
Funciile standard de msurare i control includ nregistrarea semnalelor msurate,
monitorizarea lor grafic, calibrarea sondelor i contoarelor de dozare i controlul parametrilor de
proces.
Sistemul de monitorizare i control este constituit din dou pri software distincte.
Aplicaia micro-DCU (prezentat n Fig. 11) reprezint prima component a sistemului i
este caracterizat de o interfa grafic ce asigur o imagine de ansamblu asupra procesului.

FIGURA 11 Interfaa micro DCU


Cea de-a doua component este MFCS/DA (MultiFermenter Control System Data
Acquisition), o aplicaie ce permite gestionarea datelor ntr-un mod batch-oriented. Aceasta a
fost conceput special pentru bioreactoarele BIOSTAT micro-DCU pentru a fi uor de folosit,
autoconfigurabil i autoexplicativ.
Modul batch-oriented este esenial pentru gestionarea datelor ntr-un astfel de proces,
ntruct ofer posibilitatea clasificrii informaiilor n funcie de lot.
MFCS/DA include chiar posibilitatea ncorporrii altor date de laborator (ex. Analize de
proces efectuate off-line) utiliznd funcia Sample Data Management.
Modulul de trasare grafic asigur opiunile complete pentru o evaluare ulterioar a
datelor msurate n proces. Aceast facilitate, mpreun cu funcia de export ofer un plus de
flexibilitate permind analizarea datelor off-line folosind alte medii de programare.
Sistemul MFCS/DA micro-DCU poate fi integrat n sistemele de automatizare ierarhice.

Un computer gazd, folosit pe post de server (centralizator), poate fi conectat la o reea


de 4 bioreactoare i s ofere funcii precum vizualizarea grafic a proceselor, achizi ii i stocare
de date, rutine de proces, etc.

Figura 3.2 Interfaa MFCS/DA (MultiFermenter Control System Data Acquisition)

2.1 Aplicaia micro-DCU


Aceast aplicaie este o interfa grafic simplist care ne pune la dispoziie meniuri,
respectiv submeniuri ce ne ajut n setarea bioreactorului Sartorius Biostat A Plus.
Specificaiile acestei interfee sunt urmtoarele:

Simbol

Etichet

Descriere

Buton albastru

Reprezint un submeniu sau o


funcie selectat.

Buton verde

Aceast cheie ne indic faptul


c submeniul este selectat

Fundal verde

Elementul de msur sau de


ieire este activ

Butonul ,,gol

Nu are submeniu atribuit

Cerc cu sgeata indicatoare

Indic
navigarea,stnga,
dreapta sus, jos n meniu sau
funcie

Pompa offon

Reprezint accesul direct la


submeniul pomp pentru a
selecta modul acesteia

Valv offon

Reprezint accesul direct la


submeniul valv pentru a
selecta modul acesteia

Funciile aplicaiei la care operatorul are acces n orice moment, indiferent de starea
procesului sau meniul n care acesta se afl sunt reprezentate dup cum urmeaz.

Funcia (Simbol/etichet)
MAIN

Scurt descriere
Prezentarea general a bioreactorului:
Aici sunt afiai parametrii de proces ,valorile msurate; totodat ne
ofer posibilitatea de a accesa submeniurile corespunztoare

TREND

operaiei.
Seciunea pentru reprezentare grafic a unor variabile de proces.
Avantajul acestui submeniu este c : ne poate furniza rspunsul a
mai multor parametrii msurai n proces.

CALIBRATION

CONTROLLER

Acest meniu are n componena sa submeniurile pentru calibrarea:


- senzorilor de pH i pO2;
- pompelor (acid, baz, antispumant, substrat, etc.);
- dozatoarelor pentru gaz;
- sistemelor de echilibrare
Seciune dedicat regulatoarelor folosite n cadrul procesului.
Monitorizarea i parametrizarea sistemele de control pentru:
-

temperatur;(TEMP)
viteza de rotaie a agitatorului;(STIRR)
nivelul pH-ului i al oxigenului dizolvat;

- pompele peristaltice;(AFOAM,LEVEL)
- dozatoarele de gaz.
Aceast funcie cuprinde setrile de baz ale sistemului, cum ar fi
MAINTENANCE

domeniile de msurare pentru variabilele de proces, setarea


parametrilor de comunicaie cu dispozitivele externe ( imprimant,
balan, server ), managementul configuraiilor de funcionare ale

REMOTE OPERATION

bioreactorului.
Permite operarea la distan. ( remote mode ).
Setrile pentru acest mod pot fi vizualizate i modificate din
seciunea Maintenance.
Afieaz alarmele active.

ALARM

n cazul apariiei unei alarme, fundalul butonului de acces la meniu


devine rou i este emis un sunet de avertizare. La activarea
meniului este afiat o fereastr cu mesajul informativ cu privire la
alarm.
Interfaa Main ofer o prezentare grafic general a configuraiei bioreactorului

folosind simboluri pentru vasul de cultur, elementele de alimentare cu gaze, valve, pompe,
dozatoare, sistemul de antrenare, senzori, balane, etc oferind totodat informaii cu privire la
poziionarea i starea acestor componente. Sunt afiate de asemenea valorile on-line ale
parametrilor ce trebuie urmrii.
Fiecare element funcional are asignat un buton ce permite accesul ntr-un meniu de
opiuni n care pot fi setate referine, se poate modifica modul de funcionare al elementului
respectiv ( oprit, automat, manual ) sau se pot reseta anumite variabile de proces.
n partea superioar a ferestrei sunt prezentate informaii generale (dat, configuraie,
submeniu), iar n partea inferioar sunt poziionate funciile principale ale programului.

Simbol

Etichet

STIRR

Viteza de rotaie
a agitatorului [rpm]

TEMP

Valoarea de msurare
a temperaturii n vasul
de cultur [TEMP]

pH

Valoarea de msurare
a ph-ului[pH]

Descriere
Acces direct la submeniu:
- Introducerea
referinei pentru
viteza de rotaie
- Selectarea modului de operare a
regulatorului pentru viteza de rotaie
Acces direct la submeniu:
Introducerea
temperaturii
nominale
- Selectarea modului de operare a
regulatorului pentru temperatur
Acces direct la submeniu:
- Introducerea referinei de pH
- Selectarea modului de operare a
regulatorului pentru pH

pO2

Valoarea de msurare
a pO2-ului[% pO2]

FO/LE

Starea de funcionare a Acces la submeniu pentru selectarea


regulatorului [on | off]
modului de funcionare.

WEIGH

Greutatea [kg]

ACIDT

Volumul de dozare al Accesul la sistemul de calibrare i de


pompei [ml]
resetare a valorii procesului

BASET

Volumul de dozare al Accesul la sistemul de calibrare i de


pompei [ml]
resetare a valorii procesului

FOLET

Volumul de dozare al Accesul la sistemul de calibrare i de


pompei [ml]
resetare a valorii procesului

SUBST

Volumul de dozare al Accesul la sistemul de calibrare i de


pompei [ml]
resetare a valorii procesului

Acces direct la submeniu:


- Introducerea referinei de pO2
- Selectarea modului de operare a
regulatorului pentru pO2

Acces
la
submeniu
pentru
introducerea valorii regulatorului de
referin i modul de selecie
operaional

Funcia Trend servete la monitorizarea i reprezentarea grafic a unei variabile de


proces alese, pe o anumit perioad de timp. Dezavantajul acestei funcii este c plotarea nu poate

fi salvat i totodat perioada de plotare ncepe cu momentul accesrii funciei i are o

durat prestabilit. (o or, 12 ore, 72 ore ). Pot fi vizualizate pn la ase variabile de


proces simultan.
FIGURA 12 Reprezentarea grafic a variabilelor de proces

Opiunea Calibration permite accesul la toate funciile de calibrare ale sistemului.


Sunt incluse submeniuri pentru calibrarea senzorilor, pompelor peristaltice, dozatoarelor de gaz i
balanei.
Toi parametrii de calibrare vor fi stocai permanent i disponibili dup restartarea
sistemului, sau nceperea unui nou proces, acetia fiind modificai doar n momentul efecturii
unei noi calibrri.

2.2 Calibrarea senzorului de pH


Se realizeaz nainte de montarea electrodului n vasul de cultur. Este o calibrare n dou
puncte. n timpul msurrii pH-ului sistemul calculeaz valoarea pH, pornind de la voltajul
electrodului utiliznd ecuaia Nernst i innd cont de factorii zero, pant i temperatur.
Calibrarea senzoriilor se face astfel:
- se selecteaz modul Calibrare
-se plaseaz instrumentul ntr-o soluie buffer cu pH=7. Calibrarea dureaz aproximativ 1
minut, apoi va fi afiat o fereastr n care va trebui introdus valoarea exact a pH-ului nscris
pe etichet recipientului cu soluia buffer folosit. Aceast etap a reprezentat calibrarea zeroului electrodului.
- se scoate apoi electrodul i se cltete cu ap distilat
- se introduce n cea de-a doua soluie buffer cu un pH=4 sau pH=9.
Dup care sistemul afieaz o fereastr unde se va completa cmpul SBuffer cu valoarea
pH corespunztoare celei de-a dou soluii etalon.
Sistemul va realiza a doua etap a calibrrii i anume calibrarea pantei (Slope
calibration).

La afiarea valorii stabilizate, se scoate din nou electrodul i se cltete cu ap

distilat, apoi se reintroduce n prima soluie cu pH=7 pentru verificare. Dac este indicat o alt
valoare pH se repet operaiile anterioare.

FIGURA 13 Calibrarea senzorului de pH

2.3 Calibrarea senzorului pO2

FIGURA 14 Calibrarea senzorului de pO2

Operaia este realizat n termeni procentuali de saturaie a oxigenului % pO 2. Se


consider referin zero valoarea ntr-un mediu fr oxigen i saturaie 100% pO 2 valoarea
msurat ntr-un mediu optim gazat (debitul dorit pentru proces) i amestecat .
La bioreactoare ale cror vase de cultur sunt sterilizate ntr-o autoclav electrodul pentru
msurarea nivelului oxigenului dizolvat este calibrat nainte ca procesul s fie iniiat. Calibrarea
dup sterilizare ia n considerare posibilele interferene rezultate ca urmare a impactului cldurii
asupra membranei electrodului sau reaciilor chimice cu electrolitul n timpul sterilizrii.
Calibrarea zero-ului se realizeaz nainte de alimentarea bioreactorului cu aer sau gaze
cu coninut de oxigen. n timpul procesului de sterilizare mediul de cultur este degazificat
aproape complet. Chiar dac rmn urme de oxigen dizolvat n mediul de cultur, eroarea dat de
zero-ul considerat se afl n marja de toleran a electrodului. Dac nu se poate msura referina
zero nainte ca aerul ( sau amestecul de gaze coninnd oxigen ) s fie introdus n vasul de cultur
, se poate conecta o surs de azot (sau un amestec de gaze lipsit de oxigen) gazndu-se vasul
pentru a nlocui oxigen dizolvat n mediu i considerndu-se valoarea astfel msurat ca referin
0% pO2 .
Panta poate fi msurat dup gazarea mediului cu aer (sau amestecuri de gaze care conin
oxigen), pn la saturaia cu oxigen, n condiiile de funcionare prevzute pentru proces.
Ca i n cazul electrodului de pH, n timpul procesului sistemul micro-DCU calculeaz
valoarea pO2, considernd referina zero, panta i temperatura .
La nceperea operaiei de calibrare a electrodului se poate introduce temperatura de
referin (temperatura mediului de cultur la msurare), manual sau se poate opta pentru o
calibrare automat, n acest ultim caz sistemul folosind temperatura indicat de senzor n vasul de
cultur.

2.4 Calibrarea totalizatoarelor


pompe
Fig. 3.5 Calibrareapentru
senzorului
pO2 i valve

Aceast funcie este disponibili n toate configuraiile. n funcie de modelul

FIGURA 15 Calibrarea dispozitivului de dozare antispumant


bioreactorului

sistemul micro-DCU asigneaz submeniuri pentru calibrarea tuturor totalizatoarelor disponibile .

Pompa pentru livrarea acidului n vasul de cultur ( ACID ).


Pompa pentru livrarea agentului alcalin n vasul de cultur (BASE).
Pompa pentru livrarea agentului antispumant (AFOAM).
Pompa pentru substrat (SUBST).
Pompa care asigur controlul nivelului n vasul de cultur (LEVEL), n modurile de

operare FEED (Alimentare) sau HARVEST(Recoltare).


Valva pentru dozarea oxigenului (O2_T).
Valva pentru dozarea azotului (N2_T).
Valva pentru dozarea dioxidului de carbon (CO2_T).
Funciile de calibrare ale totalizatoarelor sunt asemntoare i din acest motiv vor fi
prezentate n continuare modalitile de calibrare pentru o pomp i pentru o valv.

Pentru calibrarea uneia dintre pompele peristaltice disponibile este nevoie de dou
recipiente, unul plin cu ap, iar cellalt gol (este necesar ca acesta s fie gradat). Se va trece un
tub de silicon prin dispozitivul de pompare, iar extremitile acestuia vor fi introduse n interiorul
celor dou recipiente. La iniierea calibrrii, pompa va porni i va ncepe s livreze ap din
recipientul plin n paharul gradat. La oprirea calibrrii, sistemul afieaz o caset Quantum n
care trebuie introdus cantitatea total de ap livrat (citit cu exactitate de pe paharul gradat).
Folosind aceast valoare, precum i timpul de livrare sistemul calculeaz debitul pompei
respective i l afieaz n program.
Dac debitele specifice ale pompelor sunt cunoscute, ele pot fi introduse direct n meniul
de calibrare.
n cazul supapelor valorile corespunztoarelor cantitilor de gaz livrate pot fi citite direct
de la debitmetre (rotametre) i introduse apoi n meniul de calibrare. Sistemul calculeaz debitul
total de gaz livrat n timpul deschiderii a unei supape. Pentru efectuarea unui calcul corect setarea
debitmetrului trebuie s fie meninut constant.
n timpul procesului, toate contoarele de dozare pot fi resetate, n orice moment, prin
accesarea meniului de calibrare.

Seciunea Controller permite vizualizarea modurilor de control al parametrilor de


proces precum i parametrizarea regulatoarelor folosite.
Tabelul urmtor prezint tipurile de regulatoare folosite n proces, precum i elementele
de execuie aferente.

Mrimea

Tipul regulatorului
Regulator PID cu ieiri PWM ( pulse-width modulated ).
PWM (k+1) = PWM (k) + PID

Temperatura

Viteza agitatorului

Intrarea este reprezentat de semnalul primit de la senzorul


de temperatur.
Comut n funcie de faza procesului de la tip P la PID.
Pentru nclzire acioneaz asupra alimentrii pturii
termoelectrice, iar pentru rcire acioneaz asupra sistemului
Cooling finger.
Regulator tip PI.
Regulator PID cu ieiri PWM.

Nivelul pH-ului

Controleaz pompele de acid i agent alcalin, precum i supapa

Nivelul oxigenului dizolvat

pentru CO2 n configuraia Exclusive Flow


Sistem de reglare n cascad controlnd 1-2 mrimi din lista de mai
jos:

(pO2)

Viteza de agitare
Debitul de amestec de gaz
Substratul
Regulator PID cu ieiri PWM.
Debitul de gaz

Controleaz supapele pentru alimentarea cu aer i O 2 n


configuraia O2-Enrichment
Controleaz supapele pentru alimentarea cu aer, N 2 i O2 n
configuraia Exclusive Flow,
Regulator cu ieire tip impuls-pauz. Funcia sa este de a activa

Spuma

Nivelul
Substratul

Etichet

sistemul de dozare antispumant pentru o scurt perioad de timp


(durata impulsului), dup care urmeaz o pauz. Dup acest interval
regulatorul d un alt impuls activnd din nou sistemul de dozare.
Regulator bipoziional pentru pompa de dozare sau recoltare (n
funcie de modul de operare Feed sau Harvest).
Regulator PID.

Afiare

Off

Auto
Mode

Casc

Profile
Manual

Process Value

[PV]

Setpoint

[PV]

OUT

Param
PROFILE

Descriere
Modurile de operare ale regulatorului.
- Regulatorul (i servo controller-ele asignate) nu
opereaz n proces.
- Ieirea este n starea sa definit ( fr ca nici un
element de execuie s fie acionat.)
Regulatorul este activ i comand elementele de
execuie n funcie de referina presetat.
Servo controller-ele sunt trecute n modul
cascade.
- Regulatorul Master livreaz referina
(semnalul) ctre servo controller.
- Nu este permis accesul n meniul servo
controller-ului pentru setarea referinei.
- Reglarea n cascad nu este disponibil pentru
toate regulatoarele prezente.
Regulatorul opereaz dup un profil temporal.
Modul de acces la setarea manual a ieirilor.
Variabila de proces i valoarea sa actual n uniti
fizice (ex. C pentru temperatur, [rpm] pentru
viteza agitatorului, [pH] pentru valoarea pH-ului,
etc)
Referina setat pentru variabila de proces (n
uniti fizice).
Ieirea regulatorului.
Acces la parametrii controller-ului (folosind parola
19).
Meniul pentru definirea profilului de temporizare a

referinelor.
n toate configuraiile, regulatoarele sunt parametrizate astfel nct (n condiii normale de
funcionare) s asigure o comportare stabil a mrimilor de proces pe care le controleaz.
Pentru a adapta un regulator la comportamentul buclei controlate urmtoarele valori
caracteristice pot fi modificate n meniul de parametrizare al regulatorului:

MINimum, MAXimum Limitele ieirii regulatorului.


DEADB Stabilirea zonei neutre (deadband) - pentru regulatoarele PID.
Xp, TI, TD Parametrii legii de reglare PID.

Parametru

Valoare

Descriere
Limita inferioar a ieirii; referina minim pentru servo
controller.
Limita superioar a ieirii; referina maxim pentru servo
controller.
Deadband (zon moarta); Regulatorul rmne inactiv dac

MIN (Minimum)

MAX (Maximum)

DEADB

[PV]

diferena (eroarea) dintre valoarea actual i referin este

mai mic dect DEADB.


Banda de proporionalitate.Este proporional cu semnalul de
intrare.
Reset time;

Xp

Regulatorul acioneaz timp de TI sec apoi se oprete pn n


momentul n care este evaluat din nou diferena dintre
TI

valoarea actual a mrimii de interes i referina stabilit


pentru aceasta.
Dac regulatorul are

partea integratoare mai mare,atunci

timpul de rspuns al acestuia este mai lent (i invers)


Rate time;
TD

Cascade
Hyst. time

[Etichet]
m:s

Dup compararea valorii curente cu referina, regulatorul


ateapt TD sec i este activat numai dac EROAREA >
DEADB.
Controller-ul asignat pentru reglarea n cascad.
Timpul de ntrziere la comutare (pt. controllere on-off).

S-ar putea să vă placă și