METABOLISMUL PROTEINELOR

DE RECAPITULAT
1. Structura i proprietile aminoacizilor
2. Structura i proprietile i rolul proteinelor
Aminoacizii nu sunt depozitai n organism (nu exist o protein a crei
funcie s fie de rezerv de aminoacizi). n consecin, aminoacizii din organism
provin din :
- alimente
- sintez endogen,
- degradarea proteinelor endogene
Aminoacizii n exces sunt degradai rapid.
Aminoacizii liberi sunt prezeni n tot organismul (celule, mediul
extracelular, snge). Aceti aminoacizi formeaz rezerva de aminoacizi.
Proteinele alimentare, din cadrul unei diete echilibrate, asigur 10-15% din
aportul caloric necesar organismului. Valoarea energetic a proteinelor este de 4
kcal/mol.
DIGESTIA I ABSORBIA PROTEINELOR ALIMENTARE
Digestia proteinelor alimentare ncepe n stomac. Celulele mucoasei gastrice
secret acid clorhidric i pepsinogen (inactiv). Pepsinogenul este o proenzim care
d natere pepsinei (activ). Pepsina hidrolizeaz proteinele la un pH cuprins ntre 2
i 4. Ea scindeaz catena peptidic n principal la nivelul unuia din aminoacizii
tirozin sau fenilalanin legate de aminoacidul precedent prin gruparea amino.
n intestin pepsina devine inactiv datorit creterii pH iar enzimele care
continu hidroliza proteinelor provin din sucul pancreatic i sunt chimotripsina,
tripsina, elastaza. Acestea sunt secretate sub form de chimotripsinogen i
tripsinogen care sunt inactive. Ele sunt activate de o endopeptidaz secretat n
duoden.
Tripsina sindeaz lanul proteic dup un aminoacid bazic iar chimotripsina
scindeaz lanul proteic dup un aminoacid aromatic sau dup leucin. Elastaza
scindeaz lanul proteic dup un aminoacid neramificat cu caten scurt.
Digestia i absorbia intestinal a proteinelor poate fi mprit n 3 etape:
- etapa intaluminal unde sub aciunea endopeptidazelor (chimotripsina,
tripsina) i exopeptidazelor (carboxipeptidaze, aminopeptidaze) se formeaz
peptide i aminoacizi liberi. Carboxipeptidazele, formate n pancreas,
scindreaz aminoacidul din captul C-terminal iar aminopeptidazele,
secretate de mucoasa intestinal, scindeaz aminoacidul din captul Nterminal.
- etapa membranar unde are loc hidroliza peptidelor sub aciunea
oligopeptidazelor pn la dipeptide, tripeptide i aminoacizi liberi.

- n etapa citoplasmatic are loc finalizarea hidrolizei di- i tripeptidelor sub

aciunea di- i tripeptidazelor pn la aminoacizi.
Transportul aminoacizilor la nivelul enterocitelor
Absorbia peptidelor se face prin intermediul unui transportor comun pentru
di- i tripeptide.
Aminoacizii sunt transportai printr-un mecanism activ cuplat cu transportul
ionilor de sodiu, la nivelul pompei membranare pentru sodiu.
Unii aminoacizi au sisteme proprii de transport:
- aminoacizii cu caracter neutru
- cisteina i aminoacizii bibazici (lizina, arginina)
- aminoacizii cu caracter acid (acidul aspartic, acidul glutamic)
- prolina
- alii sunt transportai prin intermediul ciclului gama-glutamil asigur
transportul transmembranar al glutaminei, metioninei i a aminoacizilor
neutri pe baza uni ciclu de transformri. Este activ n rinichi, creier, ficat i
intestin.
Glutationul fixeaz aminoacidul pe faa extern a membranei celulare.
Traversarea membranei se face datorit interveniei -GT (gama-glutamiltranspeptidazei). Dup ptrunderea n celul, aminoacidul este eliberat iar
glutationul este degradat. Pentru transportul aminoacidului urmtor se sintetizeaz
o nou molecul de glutation.
Glutation

aminoacid

GT

3 ATP
resinteza
Glutationului

aminoacid

Majoritatea aminoacizilor sunt molecule mici hidrosolubile care

circul liber n snge, constituind rezervorul extracelular de aminoacizi. Acesta
provine din alimente dar i din metabolismul proteinelor endogene. Acesta
cuprinde aminoacizii standard dar i aminoacizi care provin din metabolismul
intermediar (citrulina, ornitina, taurina, homocisteina). Glutamina i alanina
reprezint 45% din rezervorul extracelular de aminoacizi.
Transportul intracelular al aminoacizilor
2

Se realizeaz prin intermediul unor transportori specifici i prin intermediul

ciclului gama-glutamil. Insulina activeaz transportul intracelular al aminoacizilor.
Concentraia aminoacizilor n lichidele extracelulare este mai mic dect
concentraia lor n lichidele intracelulare. Acest gradient de concentraie este
meninut prin intervenia unor sisteme de transport activ, consumatoare de energie.
Transportorii membranari specifici acioneaz cu consum de energie,
majoritatea fiind sisteme de co-transport cu ionii de sodiu.
- sistemul A este specific pentru aminoacizii aromatici precum i pentru
alanin, serina i glicina.
- sistemul ASC este specific aminoacizilor neutri
- sistemul B+ este specific aminoacizilor bazici
- sistemul X- este specific aminoacizilor cu caracter acid
- sistemul N este prezent numai la nivelul hepatocitelor, asigur transportul
aminoacizilor bogai n N
- sistemul L funcioneaz independent de pompa de sodiu i intervin n
transportul aminoacizilor ramificai.
Transportul intramitocondrial sau intralizozomal depinde de prezena unor
sisteme de transport la nivelul membranelor respective.
SINTEZA I DEGRADAREA PROTEINELOR
Proteinele au o durat de via limitat determinat de natura fiecrei
proteine ( apo B100 cteva ore; factorul XIII al coagulrii cteva sptmni).
Rennoirea proteinelor presupune stabilirea unui echilibru ntre sinteza
ribozomal a proteinelor i degradarea proteinelor mbtrnite. Aceast dinamic
reprezint turn-over-ul fiecrei proteine.
Ficatul deine rolul principal n sinteza i degradarea proteinelor plasmatice.
De asemenea ficatul recunoate, capteaz i degradeaz proteinele mbtrnite
aflate n circulaie, elibereaz aminoacizii componeni care sunt reutilizai.
Rata diferit a degradrii proteinelor depinde de mai muli factori printre
care:
- proprietile fizico-chimice ale proteinei
- esutul unde proteina este activ (ficatul, muchiul, intestinul, esutul cutanat
prezint un turn-over accelerat al proteinelor)
- situaii fiziologice deosebite: perioade de cretere, sarcin, alptare
- stri patologice: boli infecioase, reacia de faz acut, neoplazii, afeciuni
degenerative etc.
Sinteza proteinelor are loc n ribozomi prin traducerea informaiei genetice.
Secvena aminoacizilor este specific i este dat de secvena nucleotidelor n
ADN, respectiv ARN mesager. Sinteza proteinelor necesit o cantitate mare de
energie ( cca 6 ATP pentru fiecare legtur peptidic).
Degradarea proteinelor are loc n citoplasm sau n lizozomi:
- proteoliza citoplasmatic este activ, n special, n muchi
3

- proteoliza intralizozomal este activ n special n ficat i n sistemul reticuloendotelial.

Ambele mecanisme se desfoar cu consum de energie (hidroliza ATP).
Echlibrul dintre sinteza i degradarea proteinelor este meninut prin
intervenia hormonilor reglatori.
n perioadele post-prandiale sau n perioadele de cretere este accentuat
biosinteza proteinelor sub aciunea insulinei sau a unor aminoacizi cu rol de
semnale (glutamina, acidul glutamic, leucina). Concomitent este diminuat
proteoliza.
n perioadele de inaniie prelungit este activat proteoliza sub aciunea
adrenalinei i cortizolului. Creterea nivelului acestor hormoni are loc n paralel cu
inhibarea secreiei de insulin i cu scderea rezervorului extracelular de
aminoacizi.
CATABOLISMUL FUNCIILOR AZOTATE
Reacii de dezaminare i de transaminare
Constau n detaarea gruprii amino a aminoacidului cu formarea unui
cetoacid. n cazul dezaminrii NH3 este eliberat n mediul celular iar n cazul
transaminrii NH3 este fixat pe un alfa-cetoacid.
n organismul uman, lizina i treonina particip numai la reacii de
dezaminare, acidul glutamic i glutamina particip i la reacii de dezaminare. Se
formeaz amoniac care poate intra n ciclul ureei la nivel hepatic sau poate fi
eliminat sub form de ioni de amoniu la nivel renal.

Glutamat dehidrogenaza
Glutamat + H2O
NAD+
NADH + H+

Alfa ceto-glutarate + NH3

n ficat i n rinichi aceast reacie se desfoar n sensul dezaminrii. n

celelalte celule, nclusiv n muchi, aceast reacie se desfoar ntotdeauna n sens
invers (alfa-ceto-glutarat glutamat)
Reaciile de transaminare constau n transferul gruprii amino de la un aminoacid
donor (Ala, Asp, Ser, Fen, Tyr, Cys, Arg, Lys) la un cetoacid acceptor (alfa-cetoglutarat,
piruvat, oxalacetat).
Reaciile de transaminare sunt catalizate de transaminaze (aminotransferaze) care
acioneaz n prezena coenzimei piridoxal-fosfat (PLP sau PALPO).
Mecanismul acestor reacii este :
- legarea cofactorului PLP de un rest de lizin al enzimei
- PLP reacioneaz cu aminoacidul-1 formnd o baz Schiff care se desprinde de enzim
- deplasarea dublei legturi i eliberarea cetoacidului-1
- formarea piridoxamino-fosfatului
4

- reacia piridoxamino-fosfatului cu cetoacidul-2 cu formarea unei noi baze Schiff

-deplasarea dublei legturi si eliberarea aminoacidului-2
- regenerarea PLP legat de molecula enzimei, capabil s iniieze o nou succesiune de
transformri.
Principalele reacii de transaminare sunt catalizate de glutamat-piruvattransaminaza (GPT) sau alanin-aminotransferaza (ALT sau ALAT) i glutamatoxalacetat-transaminaza (GOT) sau aspartat-aminotransferaza (AST sau ASAT).
Aceste dou transaminaze sunt prezente n toate celulele (inclusiv n eritrocite).
GPT
Glutamate + pyruvate

alpha cto glutarate + alanine

GOT

Glutamate + oxaloactate

alpha cto glutarate + aspartate

Aceste enzime por trece n cantiti mici n plasm. Orice leziune (citoliz)
tisular va determina creterea concentraiei plasmatice a acestor transaminaze (hepatit,
infarct etc).
UREOGENEZA
Ureogeneza se desfoar n ficat, att intramitocondrial ct i
intracitoplasmatic pornind de la dou substraturi: amoniac i acid aspartic.
Eliminarea ureei se face pe cale renal. Cca 25 -30 g de uree sun eliminate
zilnic.
Valori fiziologice
Snge 4 - 6 mmol/1
Urin 37 g/l
Transpiraie 5 - 20 mmol/1
Saliv 0.5 - 4.5 mmol/1

Reaciile au loc n mitocondrie i n citosol.

1. Formarea de carbamil-fosfat sub aciunea carbamil-fosfat sintetazei I este o
reacie cu consum de energie. N-acetilglutamatul este activator alosteric al acestei
enzime. (carbamil sintetaza II catalizeaz biosinteza pirimidinelor este localizat
n citosol i nu necesit prezena N-acetilglutamatului). Amoniacul rezultat din
dezaminri oxidative este primul donor de N din uree.
6

2. Formarea de citrulin sub aciunea ornitin-trans-carbamilazei. Eliminarea

fosfatului macroergical carbamil-fosfatului sub form de fosfat anorganic
stimuleaz desfurarea reaciei. Citrulina este transportat n citosol.
3. Sinteza arginino-succinatului sub aciunea arginino-succinat-sintetaza. Gruparea
amino a aspartatului doneaz al doilea atom de azot al ureei. Se realizeaz cu
consum de energie.
4. Scindarea arginino-succinatului sub aciunea arginino-succinat-liaza. Se
formeaz arginina care servete de precursor imediat a ureei i fumarat care d
natere la malat. Malatul poate urma mai multe ci de transformare: poate fi
transformat n oxalacetat n citosol sau poate intra n mitocondrie i intr n ciclul
Krebs etc.
5. Scindarea argininei n uree i ornitin sub aciunea arginazei. Aceast enzim
este prezent aproape exclusiv n ficat. Astfel, n timp ce alte esuturi, precum cel
renal, pot sintetiza arginina pe calea acestor reacii, numai ficatul are capacitatea de
a scinda arginina i implicit de a forma uree. Ornitina reintr n mitocondrii i reia
ciclul de reacii.
Urea este transportat pe cale sanguin la rinichi unde este filtrat i
excretat prin urin. O parte din uree difuzeaz din snge n intestin unde este
transformat n CO2 i NH3 de ctre ureaza bacterian. Acest amoniac este parial
reabsorbit n snge i parial eliminat prin scaun.
Reacia general
Aspartat +NH3 +CO2 +3ATP uree +fumarat +2ADP +AMP +2Pi +PPi +3H2O
Reglarea ciclului ureogenetic
N-acetilglutamatul este un activator esenial pentru carbamil-fosfat-sintetaza I
etap limitant de vitez. N-acetilglutamatul este sintetizat din acetilCoA i
glutamat sub aciunea N-acetil-glutamat-sintetazei (arginina are rol activator). De
aceea concentraia intrahepatic de N-acetilglutamat crete dup ingestia unei mese
bogate n proteine deoarece este furnizat att substratul (glutamatul) ct i factorul
activator al sintezei N-acetilglutamatului. Consecina este creterea ratei de sintez
a ureei.
METABOLISMUL GLUTAMINEI
Glutamina este cel mai abundent aminoacid din organism (50% din totalitatea AA
liberi si cca 1/3 din rezervorul extracelular de AA).
Sinteza glutaminei se realizeaza sub aciunea glutamin-sintetazei (citoplasma).
Catabolismul glutaminei este realizat sub aciunea glutaminazei (mitocondrie).
Cele 2 enzime sunt localizate diferit n celul. Aceast compartimentalizare
contribuie la reglarea difereniat a lor. Referitor la localizarea tisular sinteza
glutaminei se realizeaz preponderent n muchiul scheletic iar catabolismul
7

glutaminei se realizeaz preponderent n celulele intestinale i renale; n ficat

ambele procese se desfoar ntr-un ritm activ.
glutamat dehidrogenaza
glutamat + NAD
-cetoglutarat + NH3 + NADH
+

ATP

ADP

glutamina
glutamat + NH3
glutamin-sintetaza

glutamina + H2O

glutaminaza
glutamat + NH3

Rolurile glutaminei:
- biosinteza proteinelor
- - captarea amoniacului (glutamine sintetaza) meninerea unui nivel sczut
al azotemiei
- Meninerea homeostaziei acido-bazice prin eliberarea amoniacului n
rinichi amoniacul poate fi eliminate direct sub forma de ioni amoniu
mpreun cu protonii prezeni n filtratul primar
- Substrat energetic
- Donor de grupri azotate (biosinteza asparaginei, coenzimelor
nicotinamidice etc)
- Donor de acid glutamic (ex. Biosinteza glutationului)
- Imunomodulator
- Activator al sintezei proteinelor
n ficat
- n acidoz predomin glutaminogeneza permite neutralizarea excesului de
protoni concomitent cu inhibarea ureogenezei (ureogeneza are nevoie de
bicarbonat)
- n alcaloz predomin hidroliza glutaminei concomitent cu activarea
ureogenezei
Sinteza ureei are loc n hepatocitele periportale iar sinteza glutaminei are loc n
hepatocitele peri-venoase.
n rinichi
- predomin caatabolismul glutaminei. Amoniacul difuzeaz liber spre
interiorul tubilor renali unde reacioneaz spontan cu protonii rezultai din
disocierea acizilor din filtratul primar (acid lactic, acid fosforic, corpi
8

cetonici). Ionul amoniu format se elimin prin urin. Eliminarea protonilor

odat cu amoniacul contribuie la reglarea echilibrului acido-bazic
n intestin
- este captat glutamina din circulaie i mpreun cu glutamina rezultat din
digestia alimentelor este catabolizat
- amoniacul este preluat de vena port i captat de ficat (biosinteza uree si mai
puin glutamin)
n esutul muscular
- glutamina reprezint 60% din AA prezeni n muchi
- sinteza activ de glutamin care este eliberat n circulaie n condiii de
efort prelungit sau perioade interalimentare