Biologie Celulara

Capitolul1.Unitateadebazaavietii:celula
1.1.Ceesteocelul?

elulele sunt uniti structurale care compun corpul unei plante sau al unui animal dar pot forma i
organisme unicelulare. Unul din caracteristicile comune tuturor celulelor este aspectul de saci care
cuprind ap". Acesti saci sunt delimitai de un dublu strat fosfolipidic, numit membran. Membrana
este semipermeabil, permind numai anumitor particule s treac n i din celul, blocnd trecerea altora.
Aadar, o celul este un "sac" membranar fluidic care nconjoar un spaiu cu coninut celular.
Fiecare component al acestui spaiu va fi discutat detaliat n cele ce urmeaz.
Celulele sunt n proporie de 90% fluide (citoplasm) care conin aminoacizi liberi, proteine,
carbohidrai i numeroase alte molecule. Mediul celular cum ar fi coninutul citoplasmei i al nucleului,
afecteaz expresia i reglarea genelor i sunt pri foarte importante ale motenirii genetice.
Procentual, o celul este constituit din urmtoarele elemente:
59% Hidrogen (H)
24% Oxigen (O)
11% Carbon (C)
4% Azot (N)
2% Altele - Fosfor (P), Sulf (S), etc.
Moleculele care constituie o celul sunt:
50% proteine
15% acizi nucleici
15% carbohidrai
10% lipide
10% altele
In interiorul celulei gsim citoplasma format din:
Citosol n principal apa ca soluie vscoas totul cu excepia organitelor celulare.
Organite celulare (care sunt delimitate de membran) prezente numai n organismele eucariote evoluate
(superioare):
Nucleu (n eucariote) n care este localizat materialul genetic ADN i produsul acestuia de
transcriere, ARN.
Reticul endoplasmic (RE) important n cursul sintezei proteice. Este o reea de transport
pentru molecule destinate unor modificri i localizri speciale (cum ar fi suprafaa celular
extern). Sunt de dou feluri:
RE rugos prezint ribozomi i este grupat sub form de teancuri plate. La nivelul lor are
loc sinteza de proteine destinate compartimentelor delimitate de membrane.
RE neted nu are ribozomi i se prezint ca o reea tubular.
Aparat Golgi cu rol n maturarea proteinelor prin glicozilare urmat de secreie.
Lizozomi Saci digestivi principalele structuri care diger componentele celulare i se
ntlnesc numai n celule animale.
Peroxizomi La nivelul lor oxigenul este utilizat pentru realizarea unor reacii catabolice
att la animale cat i la plante.
Ribozomi particule nucleoproteice (compuse din acizi nucleici i proteine); circa jumtate dintre ei sunt
grupai pe RE, iar cealalt jumtate noat liber n citosol. La nivelul lor ARN ajunge pentru a servi
la translaia (traducerea) proteinelor.
Microtubuli filamente proteice, formate din tubulin; constituie "centrul" celular, cilii, flagelii, etc
1

Citoschelet structura de susinere a celulei; format din microtubuli, filamente de actin i filamente
intermediare.
Mitocondrii Bateriile celulare, convertesc hrana n energie utilizabil (producie de adenozin trifosfat,
ATP). La nivelul mitocondriilor conversia energetic se realizeaz prin respiraie aerob. Ele sunt
delimitate de 2 membrane: intern i extern. Membrana intern poate varia ca forma la diferite tipuri
de celule iar ele formeaza prelungiri numite criste. Mitocondria are aproximativ mrimea unei
bacterii i contine propriul material genetic precum i ribozomi particulari.
Vacuole Sunt cel mai adesea prezente la plante iar n general, plantele au vacuole voluminoase. Vacuolele
sunt absente din celulele animale
Cloroplaste convertesc lumina i hrana n energie utilizabil (ATP) i la nivelul lor are loc procesul de
fotosintez.
Plastide structuri n care se depoziteaz substane de rezerv. Sunt prezente n celulele vegetale.
Perete celular prezent la organisme procariote i celule eucariote vegetale; asigur suport i protecie.
MATERIAL SUPLIMENTAR
Simbolurile, greutile i rolurile lor biologice ale elementelor chimice sunt prezentate n tabelul de
mai jos:
Tabel 1.1. Lista elementelor, simbolurilor, greutilor i rolurilor biologice
Element

Simbol

Azot (nitrogen)
Calciu
Carbon
Clor
Cupru
Fier
Fluor
Fosfor

N
Ca
C
Cl
Cu
Fe
F
P

Greutatea
atomica
14,0
40,1
12,0
35,5
63,5
55,8
19,0
31,0

Hidrogen
Iod
Magneziu

H
I
Mg

1,0
126,9
24,3

Mangan
Oxigen

Mn
O

54,9
16,0

Potasiu

39,1

Seleniu
Siliciu

Se
Si

79,0
28,1

Sodiu

Na

23,0

Sulf

32,1

Zinc

Zn

65,4

Rol biologic
Constituent al proteinelor i acizilor nuceici
In componenta oaselor, n contractia musculara
In structura moleculelor organice
In digestie i fotosinteza
Parte a pigmentilor purttori de oxigen din sangele molustelor
Parte a hemoglobinei, molecula purtatoare de oxigen
In dezvoltarea normala a dintilor
In componenta acizilor nucleici; formeaza legaturile purtatoare
de energie din structura ATP
Component al apei i a moleculelor organice
In componenta hormonilor (ex. tirozina)
Component al clorofilei, pigmentul fotosintetic; esenial n buna
functionare a unor enzime
Esenial n buna functionare a unor enzime
In respiraie; component al apei i al majoritatii compuilor
organici
In generarea impulsurilor nervoase ; echilibrul electrochimic al
membranelor
In buna functionare a multor enzime
Intra n structura cochiliilor diatomeelor i a peretelui cellular
vegetal
In generarea impulsurilor nervoase; echilibrul electrochimic i
osmotic al membranelor
Constituent al unor proteine i polizaharide; n realizarea
structurii spatiale a proteinelor prin legaturile disulfidice;
compuii redusi ai sulfului sunt sursa de electroni
Esenial pentru unele enzime (ex. ce oxideaza alcoolii)

Mrimeacelulelor
Celulele eucariote (cu nucleu propriu i organite delimitate de membrane) sunt de circa 10 ori mai mari
dect celulele procariote (lipsite de nucleu i membrane interne). Celulele unor plante sunt printre cele mai
mari celule i aceasta se datoreaz vacuolelor pline cu ap pe care la conin.

Biologie Celulara

Mrimile aproximative ale moleculelor biologice i celulelor sunt:

Categoriausoara:
0.1 nm (nanometri) diametru a atomului de hidrogen
0.8 nm diametru un aminoacid
2 nm diametru a unei molecule de AND sub forma de alfa helix
4 nm, o protein globular
6 nm, microfilamentele de actin
10 nm grosime a membranelor celulare
11 nm diametru are un ribozom
25 nm, microtubulii
50 nm, porii nucleari
100 nm, un virus mare
200 nm, centriolul
200 nm (200 - 500 nm), lizozomii
200 nm (200 - 500 nm), peroxizomii
Categoriamijlocie:
1 m (micrometru)
(1 - 10 um), marimea medie a celulelor procariote
1 m diametrul celulei umane neuronale
2 m, celula bacteriana de E.coli
3 m, mitocondria
5 m lungimea unui cloroplast
6 m (3 10 m), nucleul
9 m celula rosie (hematia) umana
Categoriagrea:
10 m
(10 - 30 m) cele mai multe celule eucariote
90 m, amibele
100 m, ovulul uman
Categoriasupergrea:
1 mm (1 milimetru, 1/10 dintr-un centimetru)
0,75 mm diametrul exceptional al celei mai mari bacterii cunoscute: Thiomargarita namibiensis
1 mm diametrul unei celule nervoase de sepie
2 mm diametrul unui ou de broasca

1.2.Ceesteviaa?
Definirea vieii a fost un subiect intens disputat att n plan filozofic ct i n cel tiinific. Cteva
definiii au fost totui elaborate iar pe scurt aceastea ar fi:
1. Calitatea care deosebeste un lucru viu i funcional de un corp mort sau o materie pur chimic.
2. Starea unui complex material sau individual caracterizat de capacitatea de a realiza cteva activiti
funcionale precum metabolismul, creterea i reproducerea.
3. Secvena de experiene fizice i mentale care constituie existena unui individ.
In viziunea acestor definiii un lucru viu poate fi sau nu un virus care "triete" doar atunci cnd
insereaz material genetic ntr-o celula vie.
Din cele de mai sus putem schia o definitie rezonabil pentru "viu": substana vie interacioneaz
cu mediul su, crete, se dezvolt i se reproduce.
3

Obiectulbiologieicelulare
Biologia celular este una dintre cele mai dinamice domenii ale tiinelor vieii. Studiul biologic al
celulei pleac de la premiza c celulele sunt sisteme complicate prin ele nsele iar n plus au o relatie
complicat cu mediul nconjurtor. Un organism precum omul are acelasi material genetic n toate celulele iar
n acelai timp, un individ uman posed peste 200 de tipuri de celule ce variaz ca form, mrime i rol.
Toate aceste celule au originea ntr-o singur celul : celula ou.
Biologia celular studiaz:
Complexitatea
Inter-relaiile i
Intra-relaiile celulelor
Unitatea celular i relaiile cu mediul su.
Abilitatea celulei de a vieui i reproduce.
Capacitatea s de a crete, a se dezvolta i transforma.
Biologia celular este o stiin interdisciplinar, nelegerea complexitii structural-functionale a
celulei implicnd cunostinte de chimie (chimie organic i anorganic, biochimie), fizic (electronic, optic,
termodinamic) i biologie.
n cursul de fa, destinat studenilor chimiti de la secia de
Inginerie Biochimic (anul IV), vom prezenta aspecte ale structurii
celulare, cu accent asupra relaiilor funcionale i metabolice dintre
organitele celulare. n parcurgerea acestui curs vom face apel la
cunotine de Biochimie, Biofizic i Microbiologie dobndite n anii
Populatie
anteriori de studiu, anticipnd n acelai timp cursul de Genetic
Molecular din anul V de studiu. Descrierea complexitii celulelor va
Organism
face referire n mod predominant la celule eucariote de tip animal
deoarece considerm c studenii au deja cunotine de biologia celulelor
procariote (Microbiologie, anul III) iar detalierea biologiei celulei
Sisteme de organe
vegetale este de un mai mic interes pentru specializarea de Inginerie
Biochimic. Totui, anumite structuri i procese de interes major ntlnite
Organ
la plante (conservarea energiei i fotosinteza) vor fi detaliate la
momentul potrivit.
Tesut

Niveluriledeorganizarealematerieivii
Materia vie este organizata de la simplu la complex iar aceasta
aranjare poate fi reprezentat ca n Fig. 1.1. Celula este considerata a fi
unitatea de baza a viului iar nivelurile subcelulare aparin n general
neviului. Desi viruii i fagii nu sunt considerati a fi "vieuitoare", ele
neurmand un model celular de organizare, au capacitatea de a se
reproduce n prezenta "viului".

Celula

Organite celulare

Molecule

Exist niveluri de organizare suprapopulaional: comuniti de

populaii (consorii), ecosistem, biom (ecosisteme caracterizate de
acelai tip de clim) i biosfer.

Atomi

Particule subatomice

Fig. 1.1. Nivelurile de organizare ale materiei.

Biologie Celulara

1.3.Tipuridecelule
Diferena major dintre celulele de tip procariot i cele de tip eucariot const n faptul c procariotele
nu au nucleu i doar n mod excepional prezint organite celulare delimitate de membran (cazul bacteriilor
cu vacuole). Ambele tipuri celulare conin ns ADN ca material genetic, membran extern (celular),
particule ribozomale, dezvolt funcii similare i sunt foarte diversificate.
Procariotele:
Sunt celule fr nucleu. Materialul lor genetic nu este dispus ntr-un sac membranar ci mai degrab
grupat sub forma unui nucleoid. Procariotele includ bacterii i cianofite (cianobacterii sau alge albastreverzi). Prezint un ADN circular dispus n citoplasm. Recombinarea (cale de diversificare genetic)
decurge prin transferal de plasmide (ADN circular scurt) care trec de la o bacterie la alta. Procariotele nu
pot inghii particule solide i nu au centrioli sau astre (centru celular sau centru de iniiere a diviziunii). O
reprezentare schematic a unei celule procariote este nfiat mai jos. Procariotele au un perete celular
constituit din peptidoglicani.
Pili
Ribozomi

ADN
Motor
rotativ
Flagel

Capsula
Perete celular
Membrana
plasmatica

Fig. 1.2 Organizarea celulelor procariote.

Eucariotele:
Sunt celule cu nucleu n care materialul genetic este inconjurat de o membran asemntoare membranei ce
delimiteaz celula. Celulele eucariote alctuiesc corpul uman dar i a multor altor organisme (protozoare,
fungi, plante i animale). Materialul genetic este grupat sub forma mai multor cromozomi liniari i
complexai (asociai) cu proteine ce servesc la mpachetare i reglarea transcrierii informaiei genetice.
Reticul
endoplasmic
rugos

Reticul
endoplasmic
neted

Nucleu

Flagel
Absenti la
majoritatea
plantelor

Lizozom
Centriol
Ribozomi

Peroxizom
Citoschelet:
microtubuli,
filamente intermediare si
microfilamente

Aparat Golgi
Membrana
plasmatica
Mitocondrie

Fig. 1.3 Organizarea unei celule eucariote.

5

Eucariotele pot fi celule animale sau vegetale. Celulele vegetale se deosebesc de cele animale prin
prezenta vacuolelor, peretelui celular, a cloroplastelor i lipsa lizozomilor, centriolilor, pseudopodelor, cililor
sau flagelilor, care sunt n schimb prezeni n diferitele tipuri de celule animale.
Diferenele dintre celulele procariote i eucariote sunt rezumate n tabelul de mai jos.
Tabel 1.2. Principalele deosebiri la nivel celular dintre organismele procariote i cele eucariote

Caracteristic Procariote

Eucariote

Nucleu

Au nucleu (eu-karyos, gr.= nucleu adevrat)

delimitat de membrana nucleara i coninnd
nucleol
Materialul genetic este dispus sub forma liniara,
n filamente de cromatina care, n decursul
diviziunii, se condenseaza n mai multi
cromozomi.
Dispuse sub forma unor clustere (asociatii).
Produsul de expresie a mai multor gene poate fi o
singura proteina.

Material genetic

Genele

Ribozomi
Membrana
celular

Alte organite
celulare
Perete celular
Metabolism
Diviziunea
celular

Nu au nucleu distinct, materialul genetic fiind

dispus sub forma unui nucleoid. Nu au
nucleol.
Cromozom circular unic, de tip bacterian;
Contin plasmide ca material genetic
suplimentar
Dispuse sub forma unui operon (constituit din
promotor, gena reglatoare i gene structurale).
n general produsul de expresie a unei gene
este o proteina.
Ribozom de tip procariot cu greutatea de 70 S,
format din 2 subuniti: una de 30 S iar
cealalt de 50 S
Prezenta i delimiteaza intreaga celula,
incapabila de endo- i exocitoza. Nu contine
carbohidrati i steroli (cu unele exceptii care
contin molecule asemanatoare sterolilor
Nu au ; unele bacterii conin vacuole. Nu au
citoschelet. Flagelul bacterian nu este
nconjurat de membrana i are structura
diferita de cel eucariot.
Prezent la unele bacterii, format din
peptidoglicani.
Respiraie aerob (oxigenic) sau anaerob
(anoxigenic). Fosforilarea oxidativ are loc la
nivelul membranei celulare.
Asexuat, prin fisiune binar (diviziune
simpl) prin intermediul unui inel de
diviziune.

Ribozom de tip eucariot dispus n citoplasma sau

atasat de reticulul endoplasmic, cu marimea de 80
S avand dou subuniti: de 40 S i 60 S
Prezenta, delimitand celula i contribuind la
compartimentarea celulei formand un sistem de
endomembrane. Membrana celular participa la
endocitoza i exocitoza. Contine steroli i
carbohidrati.
Vacuole i cloroplaste n celulele vegetale;
lizosomi, cili i flageli n celulele animale;
mitocondrii, reticul endoplasmic, aparat Golgi n
ambele tipuri de celule prezint citoschelet.
Prezent numai la celulele vegetale, format din
celuloza ; absent n celulele animale
Respiraie exclusiv aerob. Fosforilarea oxidativ
are loc n mitocondrii.
Diviziune simpl prin mitoz, respectiv sexuat
prin meioz, diviziunea celular implic
participarea unui aparat de diviziune, a
centriolilor i fusului de diviziune

Bibliografie
CRCIUN, C., Citologie general, Editura Risoprint, Cluj-Napoca, 2005, p. 15-18;

Biologie Celulara

Probleme:
1. Care dintre urmtoarele lucruri nu este viu dar necesita viaa pentru a se reproduce?
A. Bacterii
B. Fungi
C. Protozoare
D. Virui
2. Care propozitie descrie corect funcia RE rugos?
A. Transport specific i sisteme de semnalizare
B. Sinteza i asamblarea membranelor i proteinelor de secreie
C. Producerea de energie n timpul fotosintezei
D. Procesarea membranelor i a proteinelor de secreie, incluzand glicozilarea
3. Care propozitie descrie corect funcia aparatului Golgi?
A. Transport specific i sisteme de semnalizare
B. Sinteza i asamblarea membranelor i proteinelor de secreie
C. Producerea de energie n timpul fotosintezei
D. Procesarea membranelor i a proteinelor de secreie, incluzand glicozilarea
4. Care este locul de sinteza i asamblare a proteinelor ce constituie receptorii celulari?
A. Nucleul
B. Mitocondriile
C. Reticulul endoplasmic
D. Lizozomii
5. Urmatorul organit este intalnit n celula procariot dar nu i n cea eucariot animala:
A. Mitocondriile
B. Cloroplastele
C. Nucleul
D. Peretele celular
6.Mitocondriile i cloroplastele:
A. Funcioneaz pentru a furniza celulei sursa de energie
B. Sunt prezente la plante
C. Conin ADN
D. Toate variantele de mai sus

MATERIAL SUPLIMENTAR

GiantBacteriaDiscovered
http://www.accessexcellence.org/WN/

By Sean Henahan
Washington, DC (4/16/99)- Thiomargarita namibiensis, a giant bacterium discovered off the coast of
Namibia, has a repertoire of survival techniques that would be the envy of any
extremophile.
left Light-photomicrograph of three cells of Thiomargarita.
The prokaryote, measuring up to 0.75 mm wide, is 100 times larger than its nearest
competitor n the bacterial size contest. An international team of biologists were
stunned to discover the organism while studying the sediments n the coastal waters
of Namibia. The "Sulfur Pearl of Namibia" has adapted to an environment low n
oxygen and high n hydrogen sulfide that would be toxic to most life forms.
"When I told them, my colleagues at first didn't believe me because the bacteria were
so big. But I've been working with exotic bacteria for a while now and I knew
immediately that these were sulfur bacteria," said Heide Schulz, of the Max Planck
Institute for Marine Microbiology.
Microscopic analysis revealed that much of the volume of the cell is taken up by a
vacuole. The bacteria uses the vacuole to store the nitrates that it uses to oxidize sulfide. The researchers
noted that nitrate concentraions within the cell could be up to 10.000 times higher than n the surrounding
sea water This combination of the oxidation of sulfide with the reduction of nitrate provides the bacteria with
an energy source which is not accessible for most bacteria n the absence of oxygen. The massive vacuole
allows Thiomargarita to "hold its breath" until the appropriate nutrients become available.
Dr. Schulz was part of a team of scientists who were looking for two other kinds of sulfur bacteria, Beggiatoa
and Thioploca, which they had found off the Pacific coast of South America. Both areas feature the
hydrographic similar features, particularly an upsurgence of deep ocean water rich with the nutrients on which
phytoplankton and other marine organisms depend. But the scientists found only minor levels of Beggiatoa
and Thioploca, but quite a lot of Thiomargarita.
The genetically similar Thioploca and Thiomargarita, have evolved separate adaptations to the same
ecological challenge of surviving n the high sulfide environment. While nitrate is found n sea water, it does
not penetrate the oxygen-poor, sulfide-rich sediment where these bacteria are found. Thioploca cells form
filaments that cling to each other and secrete a sheath of mucous film. This sheath provides a vertical tunnel
through the sediment up to the overlying water, allowing the Thioploca filaments to 'commute' between their
food source and the nitrate they need to metabolize it. Thiomargarita, n contrast, do not commute. Rather,
they form strands of single, unattached cells evenly separated by a mucous sheath, and wait for nutrients to
pass by.
The discovery of these organisms should stimulate research into the origins of life on planet Earth. The
biosphere depends on the constant recycling of key elements including carbon, nitrogen, and sulfur.
Microorganisms are major contributors to this recycling as they facilitate reduction and oxidation. This turn
facilitates the transfer of elements to the oceans, sediments, and atmosphere, and to other organisms.
The appetite of these bacteria for sulfide and nitrate also suggest another role for them. It might be possible
to utilize the bacteria to remediate coastal waters polluted by excess nitrates from agricultural runoff.
The research appears n the April 16, 1999 issue of Science.

Biologie Celulara

Capitolul2.Origineavietiiibiodiversitatii
2.1.Cespunteoriileclasice?

roblema originii vietii este probabil subiectul cel mai dezbatut n istoria gandirii umane. Definindu-si
locul i rolul, incercand sa-si prezica viitorul din perspectiva apariiei sale, omul a apelat inca din zorii
civilizatiei la explicatii dintre cele mai diverse pentru chestiunea originii sale i a vietii n general. Primele
idei privind provenienta lumii inconjuratoare au avut o baza mistica, metafizica, care la vremea lor erau
importante, asigurand un confort psihic omului inspaimantat de fortele naturii. Cu timpul, odata cu progresul
civilizatiei, acest confort a fost inlocuit de curiozitatea rebela a oamenilor, alaturi de fateta mistica,
emotionala a gandirii facandu-si loc i o fateta rationala, stiintifica. Pe baza acumularii unor informatii
concrete, palpabile, a observarii obiective a naturii inconjuratoare, au fost elaborate i teorii stiintifice care s
explice originea vietii i omului. Dintre teoriile stiintifice unele includ interventia Divinitatii iar altele sunt
total materialiste Exceptand teoria creationista care face obiectul teologiei, vom incerca s prezentam pe
scurt cele mai importante ipoteze clasice i moderne ale originii vietii pe Pamant.

Ipotezageneraieispontane.
Viaa a aparut ca urmare a aciunii fortelor mecanice ale naturii.
Exprimata pentru ntia oar de Democrit, n Antichitatea elen, aceast idee susinea apariia
vieuitoarelor n mod spontan din apa, aer, foc i pamant, cele patru elemente primordiale. Geniala este ns
incercarea lui Democrit de a explica formarea materiei vii prin "unirea celor mai mici particule de pamnt
umed cu atomii focului". Continund n aceeasi tem, Aristotel susinea apariia larvelor, capuselor,
licuricilor i a altor vieuitoare marunte din roua, lemn uscat, par, sudoare i din carne.
Ulterior alti cunoscuti oameni de stiinta precum W. Harvey (descoperitorul circulatiei sangvine), F.
Bacon (intemeietorul experimentului stiintific i utilizrii gandirii metodice) sau matematicianul R. Descartes
au imbratisat teoria generatiei spontane. Aceasta ipoteza a supravieuit pn la mijlocul secolului al XIX-lea
cand, prin experimentele sale chimistul Louis Pasteur a demonstrat c bacteriile nu pot lua natere direct din
infuzii i solutii organice.

Ipotezapanspermiei
Viaa exista pretutindeni n Univers i ca urmare Pamantul a putut fi "insamantat" cu germenii vietii.
Anaxagoras, filozof grec, a explicat ca germenii ("spermata") existenti pretutindeni ("pan") au
fecundat pamantul umed, neinsufletit. Naturalistul L. Buffon a preluat aceasta idee a circulatiei "embrionilor
de viaa" peste mari distante n spatiu. n prezent ipoteza panspermiei este considerata viabila de multi oameni
de stiinta dar sub forma mai nuantata, mai stiintifica astfel :
1. Litopanspermia este ipoteza conform creia materia vie provine din meteoritii care strabat spaiul
cosmic. Mai exact este vorba de compui organici (prebiotici) care pot exista pe corpurile ceresti. n
sprijinul acestei ipoteze vin descoperirea multor compui chimici care intra n alctuirea unei celule :
aminoacizi (alanina, glicina, valina), acizi grasi, hidrocarburi cu lanturi lungi de carbon, zaharuri
(arabinoza, glucoza, manoza), compui azotati ciclici (adenina, guanina). La rndul lor originea
acestor compui organici prebiotici este discutata: pe de o parte exista susinatori ai originii biogene,
provenind din activitatea unor organisme care au trait pe aceste corpuri ceresti din care au provenit
meteoritii, iar pe de alta parte compuii prebiotici din cosmos ar avea origine abiogena, rezultate din
combinatii pur chimice.
2. Radiopanspermia ca ipoteza a fost elaborata de laureatul Premiului Nobel (1904) S. Arrhenius. El
susinea ca "viaa e eterna" iar sporii vii, formati pe corpurile ceresti i ajunsi accidental n cosmos, ar
fi purtati radiatiile cosmice pe alte corpuri ceresti. Experimente efectuate cu spori bacterieni precum
i descoperirea unui microorganism (Deinococcus radiodurans) au aratat capacitatea acestora de a
rmne viabili sub aciunea unor doze imense de radiatii UV, n tranzitii bruste de temperatura i la
temperaturi aproape de zero absolut.
3. Panspermia dirijata este o ipoteza care include o inteligenta ce ar fi trait cu mult inainte de apariia
Terrei i care ar fi "dirijat insamantarea cu forme vii, elementare, de tipul microorganismelor, planete
sterile precum Pamantul". Unul din partizanii acestei ipoteze a fost F. Crick, la rndul sau laureat al
9

Premiului Nobel, iar argumentele sale n favoarea insamantarii inteligente se rezuma la constatarea
uniformitatii codului genetic (fapt greu de explicat n condiiile n care viaa ar fi aparut simultan n
multiple locuri pe Pamant) i a timpului relativ scurt dintre formarea Terrei (acum 4,7 miliarde de
ani) i apariia bacteriilor albastre-verzi (sub forma asociatiilor de stromatolite, acum 3,7 miliarde de
ani), mult prea scurt pentru a explica apariia lor.

2.2.Ipotezemodernealeoriginiivietii
Am vzut anterior c n viziunea susinatorilor generatiei spontane i panspermiei, procesul apariiei
primelor molecule biogene, respectiv a unor organisme gata formate, este fie o miscare magica a naturii, fie
un dar facut de extraterestri, fara a explica ns cum au aparut acestia. Ipotezele asa-numite moderne incearca
s aplice experimentul stiintific n demonstrarea apariiei primelor biomolecule, treapta de organizare a
materiei precursoare celei celulare. Din acest punct de vedere, ipotezele apariiei vietii pot fi grupate n
ipoteze ale formrii moleculelor biogene i ipoteze ale apariiei primei celule.

Teoriaevoluieibiochimice(OpariniHaldane)
Pe scurt aceast teorie explic apariia moleculelor biogene ca urmare a unor reacii chimice sub aciunea
unor factori fizici favorabili.
In mod independent, biochimistul rus A.I. Oparin (1922) i cel englez, J.B.S. Haldane (1928) au
formulat ipoteze similare privitoare la biogenez. n viziunea lor au existat trei etape de dezvoltare de la
materia anorganic la materia vie :
1. Etapa anorganic a apariiei hidrocarburilor primare. Este o etap pur chimic ce a avut ca rezultat
generarea metanului, apei, amoniacului etc. n primele momente ale existenei sale ca planeta de sine
stttoare, Pmntul avea foarte probabil o atmosfer reductoare bogat n metan, vapori de ap,
hidrogen, amoniac. Oxigenul sub form liber nu exista sau era n cantiti infime.
2. Etapa organic a apariiei moleculelor organice de tipul aminoacizilor. Condiiile fizico-chimice
existente pe Terra tanara cum ar fi lipsa oxigenului, temperaturile inalte i bombardamentul cu
radiatii UV ar fi cauzat generarea de aminoacizi. Reproducerea posibilelor condiii fizico-chimice ale
atmosferei primitive n laborator a permis lui W. Loeb (1913), J. Haldane (1926) i S. Miller (1953)
s obtina aminoacizi i alte molecule organice. Astfel Stanley Miller i Harold Urey a supus timp de
o sptamn descrcrilor electrice generatoare de raze UV un amestec de H2 (13%), CH4 (26%),
NH3 (26%) i vapori de ap (35%), inchis ntr-un balon de sticl de 5 l, la temperatura de 60oC. Ei au
reusit s obtin un numr remarcabil de compui : CO, CO2, HCN, acid formic, aldehida formica,
glucide, grasimi, acid acetic, uree i numerosi aminoacizi. Miller i Urey au concluzionat ca primii
compui care se sintetizeaza n prezenta descarcarilor electrice sunt acidul cianhidric i aldehidele i
ca reaciile au loc n absenta oxigenului, confirmand astfel caracterul chimic reducator al atmosferei
primitive.
Pastrandu-se aproximativ aceleasi condiii din experimentele lui Miller i Urey, ulterior au
fost obtinute i alte molecule organice de interes biologic : baze purinice i pirimidinice, pentoze
precum riboza i dezoxiriboza (C. Ponnamperuma i C.Sagan), acizi nucleici (A. Kornberg, 1958),
iar n prezenta esterilor polifosfatici, lanturi de nucleotide i adenozin-monofosfat (Schramm, 1962;
Ponnamperuma, 1965). Aceste descoperiri au evideniat posibilitatea ca Pamantul primitiv s
adaposteasca o cantitate apreciabila de molecule organice cu potential biogen.
3. Etapa biologica a formrii unor sisteme capabile de metabolism. n 1932 s-a reusit obtinerea n
laborator a unor agregate lipidice sferice cu diametre cuprinse intre 1 i 100 m, agregate formate
spontan pe baza interaciunilor hidrofobice ale coloizilor n soluii slab organice (Fig. 2.1). Ele au
fost botezate coacervate (coacervare, lat= a se aduna la un loc) i vzute de Oparin ca precursoare
ale membranelor celulare. Asemenea picturilor de ulei ntr-o farfurie de sup, coacervatele se pot
"divide" atunci cnd ating un volum critic. Mai mult, s-a constatat ca aceste agregate au o
permeabilitate selectiv pentru anumiti compui organici. Este posibil ca n interiorul coacervatelor
aparute spontan n Oceanul Primar s se acumuleze o serie de substane precum aminoacizi i
nucleotide. O etap ulterioara ar fi contat n "selectia naturala" a celor mai stabile coacervate,
capabile s reziste multa vreme. Suprafaa imensa a Oceanului care adapostea "supa primara" precum
10

Biologie Celulara

i timpul scurs ar fi putut fi suficiente pentru apariia a unui numr imens de combinatii, adica o baza
larga de selectie a coacervatelor stabile.

Fig. 2.1 Coacervate obtinute de Oparin din interaciunea spontana a gelatinei cu guma
arabica
Cu toate rezultatele pozitive obtinute n favoarea teoriei Oparin-Haldane, problemele apariiei
biopolimerilor gigantici de tipul proteinelor, a asocierii dintre acestea i acizii nucleici pentru a forma
substratul informaional al reproducerii i metabolismului, raman fara raspuns. n anii urmatori
experimentelor lui Miller, biochimistul american S. Fox a facut la rndul sau cateva descoperiri neasteptate,
evidente ca l-au facut s elaboreze ipoteza protenoidelor.

Ipotezaproteinoidelor(Fox,1959).
Pornind de la constatarea ca acidul glutamic i acidul aspartic sunt cei mai abundenti dintre cei 20 de
aminoacizi eseniali, S. Fox i colaboratorii sai (1956, 1959) au incalzit un amestec din cei doi aminoacizi,
timp de 3 ore la 180oC obtinand un polimer asemanator proteinelor, structura denumita "proteinoid"
(cunoscute n prezent drept "proteine termale"). S-a constatat ca aceste proteinoide pot atinge greutati
moleculare de 3000 pn la 10000 si, surprinzator, n condiii experimentale identice, folosind aceleasi
amestecuri de aminoacizi, se obtine o succesiune regulata i reproductibila de aminoacizi. Ca i cnd aceste
rezultate nu ar fi indeajuns de spectaculoase, n urma racirii suspensiei de proteinoide, n apa sarata, se obtin
niste sferule microscopice (1-2,5 m diametru) mult mai stabile decat coacervatele, numite "microsferule".
Aceste microsferule pot creste prin aditia altor proteinoide sau substane din mediu i se pot divide. n plus,
sub presiuni usoare, microsferulele se pot alinia n lanturi asemanatoare algelor coloniale microscopice. n
sectiune, microsferulele prezint chiar un invelis dublu de proteinoide, invelis care are o permeabilitate
selectiv.
Obinerea proteinelor termale i microsferulelor l-au determinat pe Fox s afirme c acestea din urm
ar reprezenta o form de protocelul. Deosebirea esenial dintre coacervate i microsferule const n faptul
ca primele iau nastere prin separarea unor formatiuni sferice dintr-un amestec de apa i macromolecule, n
timp ce microsferulele apar prin condensarea proteinelor termale deindata ce ele se formeaza din aminoacizi.
Provenienta pe cale chimica a macromoleculelor sau biopolimerilor fiind intrucatva verificata
experimental, la aceasta adaugandu-se i cele cateva ipoteze privind formarea unui "invelis" protector,
rmne n discutie asocierea dintre acizii nucleici (polinucleotide) i proteine (polipeptide) pentru a forma un
metabolism coerent. n acest sens au fost elaborate dou grupe de teorii, una vizand rolul primordial al ADN
iar cealalt clamand intaietatea ARN n stabilirea unui metabolism primitiv.

Teoriialegenotipului
Cuprind o suma de ipoteze referitoare la capacitatea moleculelor de ADN, aparute spontan n supa
primara, de a se replica i a suferi mutatii (sub aciunea radiatiilor UV). Experimente efectuate cu ADN au
aratat ca acesta poate servi ca matrita pentru formarea unor copii ale sale, e adevarat cu mari erori (Orgel,
11

1971). Un intreg scenariu a fost imaginat pornind de la cateva constatari experimentale. Astfel, n anumite
condiii fizico-chimice (temperatura, prezenta unor ioni metalici cu rol catalizator), polinucleotidele ar fi
putut lega nucleotide complementare (adenina-timina, citozina-guanina) rezultnd macromolecula dublu
catenara de ADN, mai stabil. La rndul su, ADN s-ar fi putut replica, chiar i cu o acuratee redus.
Mutaiile rezultate sub aciunea UV ar fi asigurat o mare heterogenitate intre moleculele de ADN. Saracirea
Oceanului Primar n substane organice n general i n nucleotide n particular, ar fi determinat apariia unei
"competitii" nemiloase intre molecule rivale. Doar cele mai stabile, posibil cele care au reusit sa-si asocieze
unele polipeptide (viitoare proteine stabilizatoare sau chiar enzime) i protejate n coacervate sau
microsferule, s fie capabile s supravieuiasca.
In felul acesta, ca urmare a unei lupte pentru existenta la nivel molecular, ar fi aparut prima celula.

Teoriaribotipului(Barbieri,1981)
Aceste teorii pleaca de la constatarea ca ribozomii, structuri ribonucleoproteice, sunt universal
raspandite la procariote i eucariote. La nivelul acestor organite are loc translaia, adica asamblarea
aminoacizilor n proteine. Mai mult, secvena de nucleotide din ARN ribosomal (ARNr) este una dintre cele
mai conservate secvene din acizii nucleici. Sinteza abiotica a uracilului, nucleotid care substituie timina din
ADN, a fost de asemenea demonstrata (S. Miller i M.P. Robertson, 1995).
Teoria ribotipului, formulata de Barbieri (1981), afirma ca viaa a aparut odata cu stramosii primelor
ribotipuri actuale, ribotipul fiind considerat sistemul ribonucleoproteic al fiecrei celule, adica suma
ribozomilor dntr-o celula. Conform acestei teorii, formele de viaa ar fi aparut n trei etape : precelular,
protocelular i celular.
1. Evolutia precelular a fost initiaa de asocierea polinucleotidelor cu polipeptide pentru a forma
ribozomii primitivi (ribozoizi). Exista diverse date experimentale care susin rolul acidului
ribonucleic n aceasta asociere, iar cea mai importanta este capacitatea ARN de autocataliza
replicarea (si de aceea ARN a mai primit numele de "ribozima") (T.R. Cech i S. Altman, Premiul
Nobel n 1989). n primele momente ale asocierii ARN-polipeptide ar fi existat o diversitate foarte
mare de ribozoizi. Unii dintre acestia, posedand ARN capabil de o replicare eficienta s-ar fi perpetuat
n dauna altor ribozoizi. Secvene similare de ARN ar fi fost asociate cu polipeptide similare.Ulterior
un avantaj competitive l-ar fi constituit capturarea acestora n coacervate sau microsferule, formand
nucleozoizi. Nucleozoizii ar reprezenta asadar coacervate cu ribozoizi i alti compui, foarte
heterogene ca dimensiune, forma i proprietate. Etapa mai avansata nucleozoizilor ar fi reprezentat
de inglobarea moleculelor de ADN dublu catenar, acizi nucleici mai stabili decat ARN monocatenar.
2. Evolutia protocelular ar fi fost initiate din nucleozoizi cu ADN (heterozoizi) n care ribozoizii ar
fi devenit mai mari, devenind ribozomi cu capacitate crescuta de replicare. Ei s-ar fi grupat specific
ntr-o anumita zona ale heterozoidului (similara nucleolului). n prezent se stie ca la nivelul
nucleolilor are loc transcriptia informaiei genetice de pe ARN la ARN mesager. Heterozoizii,
protejati de un invelis asemanator membranei i capabil de replicarea informaiei continute n acizii
nucleici ar fi reprezentat protocelule sau "microcariote". n acest punct rmne totusi nelamurita
problema apariiei codului genetic, a transferului de informatie ADN-ARN-proteine care constituie
dogma centrala a biologiei.
3. Evolutia celular a urmat dou cai importante i anume microcariotele au dat nastere la procariote
(arhebacterii i eubacterii) respectiv microeucariotelor care prin endocitoza (incorporarea) unor
procariote au dobandit mitocondrii i cloroplaste devenind eucariote.
Apariia celulelor de tip eucariot, posesoare ale unor organite celulare delimitate de o membrana lipidic
proprie a fost explicata prin mai multe teorii dintre care cea endosimbiotica a lui Lynn Margulis, este cea mai
larg acceptata.

Ipotezaendosimbiozeiseriale(Margulis,1981)
Asemanarea dintre bacterii i organitele celulare, plastide i mitocondrii din eucariote, a fost semnalata cu
mai bine de un secol n urma de Schimper (1883) respectiv Altman (1890). Dintre argumentele pentru
originea procariot a mitocondriilor i plastidelor (cloroplaste) amintim : marimea relativa asemanatoare cu
cea a bacteriilor, prezenta la suprafaa acestora a dou membrane bistratificate, prezenta enzimelor din lantul
respirator n membrana intern a acestor organite, desfurarea fosforilrii oxidative exclusiv n interiorul
12

Biologie Celulara

mitocondriilor i cloroplastelor, material genetic propriu (ADN i ARN mitocondrial i plastidial) alaturi de
ribozomi de tip procariot, codul genetic mitocondrial i plastidial este usor diferit de cel nuclear, capacitatea
acestora de automultiplicare.
Sintetiznd datele avute la dispozitie, L. Margulis (1981) a elaborat ipoteza originii endosimbiotice a
plastidelor, mitocondriilor, flagelilor, centriolilor, citoscheletului, fusului de diviziune i a altor structuri ce
caracterizeaz celula eucariot.
In conceptia lui Margulis, o prima simbioz ar fi avut loc ntre un organism amoeboid heterotrof (cu
nutritie organic) i o bacterie aerob autotrofa (capabila de sinteza propriilor substane organice pornind de
la nutrienti anorganici). Bacteriile aerobe ar fi aparut abea dupa achizitionarea aparatului fotosintetic de ctre
procariote, adica dupa apariia cianobacteriilor. Acestea sunt considerate la ora actuala cele mai vechi forme
de viaa de pe planeta noastra. Ele ar fi format asociatii numite stromatolite (ce pot fi inca vazute n marile
australe) i ar fi contribuit la cresterea continutului de oxigen liber n atmosfera. Consecinta acestui fapt a fost
disparitia atmosferei primitive, reducatoare i apariia organismelor capabile s utilizeze oxigenul ca acceptor
final de electroni (aerobe). Revenind, rezultatul primei etape endosimbiotice a fost un protoeucariot
amoeboid, aerob. Acesta se multiplica dupa atingerea unei mase critice, prin diviziune simpla.
O a dou simbioza ar fi constat n asocierea protoeucariotelor amoeboide cu bacterii aerobe de tipul
spirochetelor sau spirililor, fapt finalizat cu apariia flagelului. Spirilii i spirochetele contin structuri
microtubulare cu rol contractil i de mobilitate. Organizarea similara a aparatului flagelar (a corpusculului
bazal) i centriolilor vin n sprijinul originii monofiletice a acestora. Ulterior microtubulii ar fi constituit
aparatul de diviziune mitotica, specifica eucariotelor. Rezultatul celei de a dou simbioze a fost un
amoeboflagelat heterotrof asemanator protozoarelor actuale. Acest tip de organism ars ta la baza
organismelor animale i fungale actuale.
Un alt avantaj evolutiv l-ar fi constituit apoi endosimbioza cu o cianobacterie, celula eucariot
devenind astfel capabila de nutritie dubla: heterotrofa i autotrofa (nutritie mixotrofa ca de ex. la speciile
genului Euglena). Pierderea capacitatii de nutritie heterotrofa, prin dezvoltarea sistemului fotosintetic a dus la
apariia organismelor vegetale, fotoautotrofe.
Subordonarea diferitelor organite intregului celular a fost cauzata de un schimb de informatie
genetica intre materialul ereditar al organitelor i cel din nucleu, care devine astfel centrul coordonator al
activitatilor celulare.
Teoria endosimbiozei seriale emisa de Margulis are la rndul ei puncte slabe, controversate mai ales
n ceea priveste achizitionarea citoscheletului, centriolilor, fusului de diviziune i a flagelilor. Ea explica ns
relativ bine apariia organitelor celulare de tipul mitocondriilor i cloroplastelor
Optimizarea diviziunii mitotice odata completa a avut drept consecinta explozia evolutiva (radiatia
adaptativa) a protistelor (eucariotelor unicelulare) i urmata la scurt timp de apariia metazoarelor (plante
i animale) i fungilor.

Teoriileapariieiievolutieicoduluigenetic
O problema spinoasa a biologiei moleculare moderne este explicarea modului n care s-a ajuns la codul
genetic actual, universal raspandit la vieuitoarele de pe planeta noastra.
Caracteristica principala a codului genetic este organizarea s sub forma de gene formate din
"codoni" alcatuiti din trei nucleotide, codoni care codific un anume aminoacid. Mai simplu spus, putem s
facem o paralela intre informatia genetica i dictionarul unei limbi: informatia genetica "spune" ce anume
trebuie s execute o celula la fel cum cuvintele unei limbi ne permite s comunicam i s interactionam cu
mediul. Informatia genetica este formata din codoni, cuvinte ale dictionarului. Fiecare codon este format din
3 nucleotide (triplet de nucleotide), adica sunt niste cuvinte alcatuite din 3 litere. n total alfabetul genetic are
4 litere: A, T (inlocuit de U n ARN), C. G care trebuie s alcatuiasca 20 de cuvinte (cei douzeci de
aminoacizi eseniali). Succesiunea cuvintelor alcatuiesc fraza dupa care celula funcioneaz, adica
succesiunea de aminoacizi care formeaza lantul polipeptidic sau proteinele.
Informatia biologica urmeaza calea ADNARNProteina.

13

ADN este transcris n ARN mesager (copie n oglinda, deci purtatoare de anticodoni) iar fiecarui
anticodon de pe ARNm i se ataeaz un ARN de transport purttor de codon complementar i de aminoacid.
Astazi cunoastem n detaliu organizarea codului genetic asa cum a fost descris mai sus dar acum 50
de ani mesajul ADN-ului era inca nedescifrat. Iar daca ne intoarcem acum un secol, proteinele erau
considerate a fi detinatoarele informaiei ereditare. Tot atunci acizii nucleici, a caror existenta era cunsocuta,
nu erau considerati eseniali n ereditate. Experimentele ulterioare au aratat rolul acizilor nucleici, n speta a
ADN n transmiterea informaiei (exemplul transmiterii caracterului patogenic al unor bacterii de la un tip
patogen mort la unul inofensiv, viu). Dupa clarificarea rolului ADN n transmiterea informaiei (ereditare) s-a
pus intrebarea "Care este legtur dintre macromolecula, formata din succesiunea celor 4 nucleotide (adenine,
timina, citozina i guanine) i proteine?. Respectiv modalitatea n care cele 4 litere pot codific cei 20 de
aminoacizi eseniali ? Un caz ar fi codificrea unui aminoacid (un cuvant) de ctre un nucleotid (o litera), iar
din aceasta ar rezult doar 4 combinatii (41); un alt caz ar fi imprerecherea nucleotidelor, adica o pereche de
nucleotide ar codific un aminoacid esenial : numrul maxim de combinatii ar fi fost 4 la puterea 2 (42) adica
16 combinatii, numr insuficient pentru a justifica cei 20 de aminoacizi. A treia optiune ar fi existenta
tripletilor : 43, adica 64 de combinatii, numr mai mult decat suficient, aparent chiar prea mare. Intr-adevr, n
experimente care utilizau un lant polinucleotidic de tipul poli-(U) creat artificuial, a permis sinteza n vitro a
lantului polipeptidic poli-fenilalanina. S-a demonstrat apoi ca un aminoacid poate fi codifict de mai mult de
1 codon (caraterul "degenerat" al codului genetic). Exista o serie de codoni care codific informatii de tipul
START (AUG) sau STOP (UGA, UAG i UAA) al informaiei genetice, fara a fi exprimate ca aminoacizi. Pe
scurt, "spargerea" codului genetic s-a realizat prin translaia n vitro a ARN sintetic n lanturi polipeptidice.
Tabel 2.1. Codul genetic

UUU
UUC
U UUA
UUG

Phe
Phe
Leu
Leu

(F) UCU
(F) UCC
(L) UCA
(L) UCG

Ser
Ser
Ser
Ser

(S) UAU
(S) UAC
(S) UAA
(S) UAG

Tyr
Tyr

CUU
CUC
CUA
CUG

Leu
Leu
Leu
Leu

(L) CCU
(L) CCC
(L) CCA
(L) CCG

Pro
Pro
Pro
Pro

(P) CAU
(P) CAC
(P) CAA
(P) CAG

AUU
Ile
(I) ACU
AUC
Ile
(I) ACC
AUA
Ile
(I) ACA
AUG Met(M) START ACG

Thr
Thr
Thr
Thr
Ala
Ala
Ala
Ala

GUU
GUC
G GUA
GUG

Val
Val
Val
Val

(V) GCU
(V) GCC
(V) GCA
(V) GCG

G
(Y) UGU
(Y) UGC
STOP UGA
STOP UGG

Cys
Cys
Trp

(C)
(C)
STOP
(W)

His
His
Gln
Gln

(H) CGU
(H) CGC
(Q) CGA
(Q) CGG

Arg
Arg
Arg
Arg

(R)
(R)
(R)
(R)

(T) AAU
(T) AAC
(T) AAA
(T) AAG

Asn
Asn
Lys
Lys

(N) AGU
(N) AGC
(K) AGA
(K) AGG

Ser
Ser
Arg
Arg

(S)
(S)
(R)
(R)

(A) GAU
(A) GAC
(A) GAA
(A) GAG

Asp
Asp
Glu
Glu

(D) GGU
(D) GGC
(E) GGA
(E) GGG

Gly
Gly
Gly
Gly

(G)
(G)
(G)
(G)

Ne intrebam totusi cum s-a ajuns la o asemenea organizare universala, eficienta pentru transmiterea
informaiei ereditare cu minimum de erori?

14

Biologie Celulara

Fig. 2.2. Relatiile stuctural-functionale dintre aminoacizi/proteine i nucleotide/acizi nucleici

Mai multe ipoteze au fost emise pn n prezent :

Ipotezeleasocieriistereoifizicochimicedintreaminoacidicodon
Pot fi rezumate astfel :
Pentru fiecare aminoacid exista o secvena de codificre pentru care manifesta cea mai mare tendinta de
asociere. Asocierea dintre aceste secvene i aminoacizi au influentat forma i continutul codului genetic.
Interaciunile stereochimice ar putea de exemplu explica asocierea dintre aminoacidul glicina i codonul
GGG.
Dovezile de asociere fizicochimica sunt observatiile ca exista o legtur clara intre tipul de polaritate
(hidrofobicitate sau hidrofilicitate) a aminoacizilor i prezenta unui anume nucleotid n codon. Aminoacizii
cu nucleotid U n a dou pozitie a codonului sunt hidrofobici (Ile, Leu, Met, Phe, Val) n timp ce cei cu A
sunt hidrofilici (Asn, Gln, Glu, His); aminoacizii care au C sunt intermediari, iar cei cu G sunt amestecati.
Mai mult, codonii care au n comun un dublet impartasesc aceeasi preferinta pentru polaritate (e.g. His i Gln;
posibil Cys i Trp).
O problema fundamentala nerezolvata de ipotezele asocierii stereo- i fizicochimice este faptul ca n
translaia moderna aminoacizii nu sunt direct legati de nucleotidele din codoni sau anticodoni. A avut loc un
salt evolutionar n decursul caruia asociatiile directe s-au pierdut dar logica a fost transmisa pn n prezent.
Dovezile experimentale n favoarea acestor ipoteze sunt ns limitate iar originea codului genetic nu poate fi
corelata univoc cu asocierea chimica dintre trinucleotide i aminoacizi.

Ipotezaminimizariieroriiprinmutatiiintamplatoare(randomizate)
Asocierea dintre aminoacizi i ARN purttori de codoni este optimizata n urma unui indelung proces de
selectie, adica eliminarea celor mai instabile asocieri aminoacid- ARN.
Este posibil mai multe "coduri genetice" initiale s fi presupus asocieri (intamplatoare sau nu) intre
aminoacizi i dubleti de nucleotide. Aceste coduri genetice ar fi fost extrem de ineficient n translatie, erorile
ar fi fost foarte mari iar rezultatul, un amestec haotic de polipeptide produse ntr-o maniera nereproductibila.
Codul genetic cu tripleti ar fi minimizat erorile iar unii aminoacizi ar fi putut fi inca inserati n proteine fara
s modifice substantial funcia acestora. Un cod genetic cu cuadrupleti ar fi n schimb prea complicat i mare
consumator de energie.
Ipoteza minimizarii erorilor de expresie nu ofera solutii pentru logica asocierii aminoacid-ARN.
Ca de obicei adevarul nu poate fi decat undeva la mijloc. Prin combinarea ipotezelor enuntate mai sus
se poate descrie un scenariu plauzibil :
15

Cel mai probabil, n supa primara, cnd existau deja molecule (dublu catenare) de ARN, au aparut
mai multe cai de prin care s-a stabilit o relatie intre diversi aminoacizi i diversele secvene de nucleotide.
Asocierile stereo- i fizicochimice dintre nucleotide i aminoacizi au evoluat spre asocieri cu molecule de
ARN mai mari. Finalmente ARN a fost inlocuit ca material purttor de informatie ereditara de ADN dublucatenar, o macromolecula mult mai stabila (fizic i chimic). O parte din ARN s-a format ca o copie n oglinda
a catenei ADN devenind ARN mesager (cu codoni) n vreme ce alte molecule ARN (de transfer, cu
anticodoni) au ramas asociate (stereo- sau fizicochimic) cu anumiti aminoacizi iar n mediul oferit de
ribozomi (cu ARN ribosomal) s-a putut optimiza procesul de translatie sau sinteza proteinelor. Unele proteine
s-au dovedit a fi utile formelor de viaa incipiente (de ex. devenind enzime care ar fi favorizat achizitia unor
anumite lipide, a unor enzime care ar fi favorizat replicarea corecta a ADN sau transcriptia de mare acuratete
a ADN n ARN mesager, etc).
Mai mult, o conservare a mecanismelor de transcriptie i translatie ar fi putut fi eficienta doar n
masura n care, n paralel cu perfectionarea aparatului genetic, au aparut primele cai metabolice, n principal
cele care asigurau sursa de energie pentru protocelula (sinteza ATP) i protectia s prin formarea membranei
lipidice. Forta selectiei naturale a avut de ales dintre un numr enorm (se apreciaza 1020) de protocelule pe
acelea care, accidental sau nu, au achizitionat cele mai favorabile schimbari.

2.3.Diversitatealumiivii
Pe baza caracteristicilor morfologice i structurale organismele vii au fost pn recent grupate n 5
regnuri : Plantae, Animalia, Fungi, Protista i Bacteria (Monera). De la specificam faptul ca termenul de
"organism evoluat" trebuie folosit cu moderatie. Conceptul de evolutie poate include i modul n care
organismul raspunde cel mai bine provocarilor mediului ambiant, pe langa complexitatea s structurala.
Astfel o bacterie este capabila s supravieuiasca unor condiii de viaa ce ar fi fatale omului (temperaturi de
peste 100oC, medii extrem de acide sau bazice, n lipsa totala a oxigenului etc).
La rndul lor aceste regnuri pot fi grupate n funcie de complexitatea structurala n Eucariote (care
cuprinde primele 4 regnuri enumerate) i Procariote (in care sunt incluse bacteriile).
Incepand cu anii 80, pe baza dovezilor de biologie moleculara i filogenie (stiinta care studiaza
originea i inrudirea dintre organisme), s-a stabilit o alta clasificare a organismelor n trei domenii :
Eubacteria, Arheea (Arhebacteria) i Eukarya. Aceasta clasificare se bazeaza pe descoperirea unui grup
"stravechi" de procariote: arhee (arhebacterii), cu caracteristici mixte, de eucariote i bacterii propriu-zise
(eubacterii). Arheele sunt i ele procariote deoarece nu au nucleu adevarat ns au o multime de aspecte
structurale similare eucariotelor, n special n privinta aparatului genetic.
Bacteriile (eubacteriile i arheele) reprezint de departe cel mai numeros grup de vieuitoare cu mii
de specii clasificate i probabil alte milioane necunoscute. Se considera ca la ora actuala Planeta Albastra
adaposteste cea mai mare biodiversitate din istoria de 4,76 miliarde de ani, cu circa 1,5 milioane de specii
cunoscute. Dintre acestea o mica parte este reprezentat de mamifere (4000 specii), pasari i pesti (circa 9000
specii), mai mult de 800 de mii de specii de insecte. Regnul vegetal numra circa 240 de mii de specii de
plante superioare (angiosperme) i alte 34 de mii de specii de alge, muschi, ferigi i conifere. Fungii
(ciupercile) cuprind circa 69 de mii de specii (Fig. 2.3). Numrul total de specii ca vieuiesc n prezent este
estimat cu o larga marja intre 3 i 30 milioane. Stim de asemenea ca de-a lungul perioadelor geologice Terra
a suferit 5 extinctii n masa, unele dintre ele finalizate cu eliminarea definitiva a 60 pn la 90% din totalul
speciilor existente. Astfel, putem realiza imensa putere creatoare a naturii, imaginatia s aproape nelimitata
care a explodat din momentul n care a avut loc stabilizarea unui cod genetic i cu ea apariia unei populatii
de celule primitive capabile de reproducere i metabolism propriu.

16

Biologie Celulara
Alte nevertebrate Reptile Pasari
(corali, stele de
1%
0,4 %
mare etc)
1%
Viermi
Alge si plante
2%
inferioare
2%
Protozoare

Pesti
1%

Mamifere
0,3 %

Amfibieni
0,3 %
Procariote
(eubacterii, arhee)
0,4 %

3%
Moluste
3%
Fungi
5%

Insecte
53%

Crustacei, paianjeni
13%

Angiosperme
16%

Fig. 2.3 Diagrama reprezentand ponderea principalelor grupe de organisme din totalul speciilor clasificate
n prezent. De notat faptul ca, desi bacteriile sunt considerate cel mai cuprinzator grup de organisme,
datorita dificultatilor de cultivare, doar un mic procent de bacterii este cunoscut.
In viziunea actuala, originea tuturor vieuitoare ar fi fost nu dntr-o celula unica, un ancestor unic (progenot)
ci mai degraba dntr-o populatie de celule primitive care au reusit sa-si edifice un cod genetic relativ uniform
i ntre care existau schimburi de informatie genetica. Prin cresterea numrului de indivizi, o parte din celule
aflate la periferia populatiei, au ntlnit condiii de via diferite fata de populatia centrala, de origine. Ele
si-au readaptat metabolismul pentru a rspunde noilor provocri. Probabil, primele organisme au fost de
tipul arheelor actuale din care s-au desprins bacteriile i (proto)eucariotele.

Bibliografie
CRUCE, M., Biologie celular i Molecular, Editura Aius, Craiova, 1999, p. 14-23;
VOICULE, N., PUIU, L., Biologia molecular a celulei, Editura ALL, Bucureti, 1997, p. 8-21, 22-27

17

Probleme:
1.PlanetasausatelitulcuceamaireducatoareatmosferadinSistemulSolareste:
A. 96,5 % CO2, 3,5% N2, 0,005% SO2, 0,007% Ar (Venus)
B. 86% H2, 14% He, 0.1% CH4, 0,1% H2O, 0,02%NH3 (Jupiter)
C. 98,4% N2, 1,6% CH4 (Titan/Saturn)
D. 91% vapori de H2O, 4% N2, 3,2% CO2, 1,7% CH4 (Enceladus/Saturn)
2.Privindnfigura2.2.putemadaugaofunciesuplimentara:
A. Functia catalitica a nucleotidelor
B. Functia informaionala a proteinelor
C. Functia autocatalitica a polinucleotidelor
D. Functia informaionala a aminoacizlor
3.LoculiratadesintezaaADNntrocelulapoatefiurmaritaprinadaugaredetimidinamarcatacutritiu
(3HTd)nmediuldecrestere.Dece?
A. Timina marcata radioactiv poate fi detectata prin autoradiografie
B. Timidina este incorporata mai rapid n ADN decat adenozina
C. Deoarece 3H-Td este mai radioactiv (60-90 Ci/mmol) decat 14C-Td (40-60 mCi/mmol); 1 Ci= 1 Curie
D. Timina nu se regaseste n structura ARN
4.DecetiminaesteutilizatnloculuraciluluinmoleculadeADN?
A. Timina este mai uor de sintetizat dect uracilul
B.

Uracilul rezultat prin dezaminarea citozinei, poate forma o legtur U-A n locul unei legaturi C-G corecte, existand
riscul de alterare a informaiei genetice din ADN

C.

Uracilul este forma de-metilat a timinei, fiind un compus mai ieftin din punct de vedere energetic, fiind preferat n
sinteza ARN ce are durat scurt de via

D. n decursul evoluiei uracilul a aprut mai devreme dect timina

5.ConsiderndocalebiochimicipoteticGHIJKL,caredintreetapeesteceamairecentdinpunctde
vedereevolutiv?
A. G-H
B. H-I
C. K-L
D. J-K

6.Mitocondriileicloroplastele:
A. Provin din procariote anaerobe
B. Provin prin endosimbioza unor bacterii autotrofe cu o gazda heterotrofa
C. Provin din cianobacterii primitive, incorporate i retinute de un organism protoeucariot
D. Au origine arhebacteriana

18

Biologie Celulara

MATERIAL SUPLIMENTAR

From Primordial Soup to the Prebiotic Beach

An interview with exobiology pioneer, Dr. Stanley L. Miller, University of California San Diego
By Sean Henahan
http://www.accessexcellence.org/WN/NM/miller.html

In 1953, a University of Chicago graduate student named Stanley Miller working n Harold Urey's lab flipped a
switch sending electric current through a chamber containing a combination of methane, ammonia, hydrogen
and water. The experiment yielded organic compounds including amino acids, the building blocks of life, and
catapulted a field of study known as exobiology into the headlines. Since that time a new understanding of
the workings of RNA and DNA, have increased the scope of the subject. Moreover, the discovery of prebiotic
condiions on other planets and the announcement of a bacterial fossil originating on Mars has brought new
attention to the study of life's origins. I spoke with Dr. Miller n his lab at UCSD about the field he has helped
to make famous, exobiology.
Let start with the basics. Can you give a simple definition of exobiology?
The term exobiology was coined by Nobel Prize winning scientist Joshua Lederberg. What it means is the study of life
beyond the Earth. But since there's no known life beyond the Earth people say its a subject with no subject matter. It
refers to the search for life elsewhere, Mars, the satellites of Jupiter and n other solar systems. It is also used to describe
studies of the origin of life on Earth, that is, the study of pre-biotic Earth and what chemical reactions might have taken
place as the setting for life's origin.
Some 4.6 billion years ago the planet was a lifeless rock, a billion years later it was teeming with early forms of
life. Where is the dividing line between pre-biotic and biotic Earth and how is this determined?
We start with several factors. One, the Earth is fairly reliably dated to 4.55 billion years. The earliest evidence for life was
3.5 billion years based on findings at the Apex formation n Western Australia. A new discovery reported n the journal
Nature indicates evidence for life some 300 million years before that. We presume there was life earlier, but there is no
evidence beyond that point.
We really don't know what the Earth was like three or four billion years ago. So there are all sorts of theories and
speculations. The major uncertainty concerns what the atmosphere was like. This is major area of dispute. n early
1950's, Harold Urey suggested that the Earth had a reducing atmosphere, since all of the outer planets n our solar
system- Jupiter, Saturn, Uranus and Neptune- have this kind of atmosphere. A reducing atmosphere contains methane,
ammonia, hydrogen and water. The Earth is clearly special n this respect, n that it contains an oxygen atmosphere
which is clearly of biological origin.
Although there is a dispute over the composition of the primitive atmosphere, we've shown that either you have a
reducing atmosphere or you are not going to have the organic compounds required for life. If you don't make them on
Earth, you have to bring them n on comets, meteorites or dust. Certainly some material did come from these sources. n
my opinion the amount from these sources would have been too small to effectively contribute to the origin of life.
So while these are potential sources of organic compounds they are not essential for the creation of life on
Earth?
As long as you have those basic chemicals and a reducing atmosphere, you have everything you need. People often say
maybe some of the special compounds came n from space, but they never say which ones. If you can make these
chemicals n the condiions of cosmic dust or a meteorite, I presume you could also make them on the Earth. I think the
idea that you need some special unnamed compound from space is hard to support.
You have to consider separately the contributions of meteors, dust and comets. The amount of useful compounds you are
going to get from meteorites is very small. The dust and comets may provide a little more. Comets contain a lot of
hydrogen cyanide, a compound central to prebiotic synthesis of amino acids as well as purines. Some HCN came into the
atmosphere from comets. Whether it survived impact, and how much, are open to discussion. I'm skeptical that you are
going to get more than a few percent of organic compounds from comets and dust. It ultimately doesn't make much
difference where it comes from. I happen to think prebiotic synthesis happened on the Earth, but I admit I could be wrong.
There is another part of the story. n 1969 a carbonaceous meteorite fell n Murchison Australia. It turned out the
meteorite had high concentraions of amino acids, about 100 ppm, and they were the same kind of amino acids you get n
prebiotic experiments like mine. This discovery made it plausible that similar processes could have happened on primitive
Earth,
on
an
asteroid,
or
for
that
matter,
anywhere
else
the
proper
condiions
exist.

19

Meteorite Photomicrograph
This meteorite was found in Allende,
Chihuahua, Mexico. It is a type of meteorite
known as a carbonaceous chondrite and it has
several extremely interesting qualities. It
appears to be older than the solar system over 4.5 billion years. In addition, meteorites of
this type contain many of the same amino
acids that are found in living tissue. Recently,
microscopic diamonds were found in this type
of meteorite. These diamonds are thought to
have formed when carbon in the material was
compressed by a nearby exploding supernova.
This photomicrograph is part of a series of
photographs documenting all of the various
types of meteorites found on Earth, including
some that are thought to be pieces of the
planet Mars.
Doesn't the Panspermia theory looks at the question of ultimate origins of life n a slightly different way?
That's a different controversy. There are different versions of the theory. One idea is that there was no origin of life, that
life, like the universe, has always existed and got to the Earth through space. That idea doesn't seem very reasonable
since we know that the universe has not always existed, so life has to happen some time after the big bang 10 or 20
billion years ago.
It may be that life came to Earth from another planet. That may or may not be true, but still doesn't answer the question of
where life started. You only transfer the problem to the other solar system. Proponents say condiions may have been
more favorable on the other planet, but if so, they should tell us what those condiions were.
Along these lines, there is a consensus that life would have had a hard time making it here from another solar
system, because of the destructive effects of cosmic rays over long periods of time.
What about submarine vents as a source of prebiotic compounds?
I have a very simple response to that . Submarine vents don't make organic compounds, they decompose them. Indeed,
these vents are one of the limiting factors on what organic compounds you are going to have n the primitive oceans. At
the present time, the entire ocean goes through those vents n 10 million years. So all of the organic compounds get
zapped every ten million years. That places a constraint on how much organic material you can get. Furthermore, it gives
you a time scale for the origin of life. If all the polymers and other goodies that you make get destroyed, it means life has
to start early and rapidly. If you look at the process n detail, it seems that long periods of time are detrimental, rather than
helpful.
Can you review with us some of the history and basic background of your original prebiotic experiments?
In the 1820's a German chemist named Woeller announced the synthesis of urea from ammonium cyanate, creating a
compound that occurs n biology. That experiment is so famous because it is considered the first example where
inorganic compounds reacted to make a biological compound. They used to make a distinction between organic, meaning
of biological origin, and inorganic- CO2, CO and graphite. We now know that there is no such distinction.
However, it remained a mystery how you could make organic compounds under geological condiions and have them
organized into a living organism. There were all sorts of theories and speculation. It was once thought that if you took
organic material, rags, rotting meat, etc, and let it sit, that maggots, rats etc. would arise spontaneously. It's not as crazy
as it seems, considering DNA hadn't been discovered. It was then reasonable to hold those views if you consider living
organisms as protoplasm, a life substance. This all changed n 1860 when Pasteur showed that you don't get living
organisms except from other living organisms. This disproved the idea of spontaneous generation.
But spontaneous generation means two things. One is the idea that life can emerge from a pile of rags. The other is that
life was generated once, hundreds of millions of years ago. Pasteur never proved it didn't happen once, he only showed
that it doesn't happen all the time.
A number of people tried prebiotic experiments. But they used CO2F, nitrogen and water. When you use those chemicals,
nothing happens. It's only when you use a reducing atmosphere that things start to happen.

20

Biologie Celulara
Who came up with the idea of the reducing atmosphere?
Oparin, a Russian scientist, began the modern idea of the origin of life when he
published a pamphlet n 1924. His idea was called the heterotrophic hypothesis: that the
first organisms were heterotrophic, meaning they got their organic material from the
environment, rather than having to make it, like blue-green algae. This was an important
idea. Oparin also suggested that the less biosynthesis there is, the easier it is to form a
living organism. Then he proposed the idea of the reducing atmosphere where you
might make organic compounds.
He also proposed that the first organisms were coacervates, a special type of colloid.
Nobody takes that last part very seriously anymore, but n 1936, this was reasonable
since DNA was not known to be the genetic material..
In 1951, unaware of Oparin's work, Harold Urey came to the same conclusion about the
reducing atmosphere. He knew enough chemistry and biology to figure that you might
get the building blocks of life under these condiions.
Tell us about the famous electrical discharge experiment.
The experiments were done n Urey's lab when I was a graduate student. Urey gave a
lecture n October of 1951 when I first arrived at Chicago and suggested that someone do these experiments. So I went
to him and said, "I'd like to do those experiments". The first thing he tried to do was talk me out of it. Then he realized I
was determined. He said the problem was that it was really a very risky experiment and probably wouldn't work, and he
was responsible that I get a degree n three years or so. So we agreed to give it six months or a year. If it worked out fine,
if not, on to something else. As it turned out I got some results n a matter of weeks.

In the early 1950s Stanley L. Miller, working n the laboratory of Harold C. Urey at the University of Chicago, did the first
experiment designed to clarify the chemical reactions that occurred on the primitive earth. n the flask at the bottom, he
created an "ocean" of water, which he heated, forcing water vapor to circulate through the apparatus. The flask at the top
contained an "atmosphere" consisting of methane (CH4), ammonia (NH3), hydrogen (H2) and the circulating water vapor.
Next he exposed the gases to a continuous electrical discharge ("lightning"), causing the gases to interact. Water-soluble
products of those reactions then passed through a condenser and dissolved n the mock ocean. The experiment yielded
many amino acids and enabled Miller to explain how they had formed. For instance, glycine appeared after reactions n
the atmosphere produced simple compounds - formaldehyde and hydrogen cyanide. Years after this experiment, a
meteorite that struck near Murchison, Australia, was shown to contain a number of the same amino acids that Miller
identified and n roughly the same relative amounts. Such coincidences lent credence to the idea that Miller's protocol
approximated the chemistry of the prebiotic earth. More recent findings have cast some doubt on that conclusion.
Taken from Leslie Orgel's Scientific American article
"The Origin of Life on Earth" (Scientific American, October, 1994)
You must have been excited to get such dramatic results so quickly, and with what, at the time, must have
seemed like an outlandish hypothesis?
Oh yes. Most people thought I was a least a little bit crazy. But if you look at methane/ammonia vs CO2/nitrogen there
was no doubt n my mind. It was very clear that if you want to make organic compounds it would be easier with methane.
It's easy to say that but it is quite a bit more difficult to get organized and do the experiment.
The surprise of the experiment was the very large yield of amino acids. We would have been happy if we got traces of
amino acids, but we got around 4 percent. Incidentally, this is probably the biggest yield of any similar prebiotic
experiment conducted since then. The reason for that has to do with the fact that amino acids are made from even
simpler organic compounds such as hydrogen cyanide and aldehydes.
That was the start. It all held together and the chemistry turned out to be not that outlandish after all.
What was the original reaction to your work n the science community?
There was certainly surprise. One of the reviewers simply didn't believe it and delayed the review process of the paper
prior to publication. He later apologized to me. It was sufficiently unusual, that even with Urey's backing it was difficult to
get it published. If I'd submitted it to "Science" on my own, it would still be on the bottom of the pile. But the work is so
easy to reproduce that it wasn't long before the experiment was validated.
Another scientist was sure that there was some bacterial contamination of the discharge apparatus. When you see the
organic compounds dripping off the electrodes, there is really little room for doubt. But we filled the tank with gas, sealed
it, put it n an autoclave for 18 hours at 15 psi. Usually you would use 15 minutes. Of course the results were the same.
Nobody questioned the chemistry of the original experiment, although many have questioned what the condiions were on
pre-biotic Earth. The chemistry was very solid.
How much of a role did serendipity play n the original setup?

21

Fortunately, Urey was so adamant at the time about methane that I didn't explore alternate gas mixtures. Now we know
that any old reducing gases will do. CO2/hydrogen and nitrogen will do the trick, although not as well.
There was some serendipity n how we handled the water. If we hadn't boiled it and run it for a week, we wouldn't have
gotten such good yields of amino acids. We knew right away that something happened rather quickly because you could
see a color change after a couple of days.
The fact that the experiment is so simple that a high school student can almost reproduce it is not a negative at all. That
fact that it works and is so simple is what is so great about it. If you have to use very special condiions with a very
complicated apparatus there is a question of whether it can be a geological process.
The original study raised many questions. What about the even balance of L and D (left and right oriented) amino
acids seen n your experiment, unlike the preponderance of L seen n nature? How have you dealt with that
question?
All of these pre-biotic experiments yield a racemic mixture, that is, equal amounts of D and L forms of the compounds.
Indeed, if you're results are not racemic, you immediately suspect contamination. The question is how did one form get
selected. n my opinion, the selection comes close to or slightly after the origin of life. There is no way n my opinion that
you are going to sort out the D and L amino acids n separate pools. My opinion or working hypothesis is that the first
replicated molecule had effectively no asymmetric carbon
You are talking about some kind of pre-RNA?
Exactly a kind of pre-RNA. RNA has four asymmetric carbons n it. This pre-RNA must have somehow developed into
RNA. There is a considerable amount of research now to try and figure out what that pre-RNA compound was, that is,
what was the precursor to the RNA ribose-phosphate.
Peter E. Nielsen of the University of Copenhagen has proposed a polymer called peptide nucleic acid (PNA) as a
precursor of RNA. Is this is where PNA comes in?
Exactly, PNA looks prebiotic. Currently that is the best alternative to ribose phosphate. Whether it was the original
material or not is another issue.
Can you clarify one thing? Have all of the amino acids been synthesized n pre-biotic experiments, along with all
the necessary components for making life?
Just turning on the spark n a basic pre-biotic experiment will yield 11 out of 20 amino acids. If you count asparagine and
glutamine you get thirteen basic amino acids. We don't know how many amino acids there were to start with. Asparagine
and glutamine, for example, do not look prebiotic because they hydrolyze. The purines and pyrimidines can alos be
made, as can all of the sugars, although they are unstable.
Your original work was published only a month apart from Watson and Crick's description of the DNA molecule.
How has the field of molecular biology influenced the field of exobiology?
The thing that has probably changed the outlook the most is the discovery of ribozymes, the catalytic RNA. This means
you can have an organism with RNA carrying out both the genetic functions and catalytic functions. That gets around the
problem of protein synthesis, which is this incredibly complicated thing. There is a problem with RNA as a prebiotic
molecule because the ribose is unstable. This leads us to the pre-RNA world.
The idea of the pre-RNA world is essentially the same as the RNA world, except you have a different molecule that
replicates. Another thing worth remembering is that all these pre-biotic experiments produce amino acids. To have these
amino acids around and not use them n the first living organism would be odd. So the role of amino acids n the origin of
life is unknown but still likely.
Tell us about your recent work and the lagoon idea.
The primitive Earth had big oceans, but it also had lakes, lagoons and beaches. Our hypothesis is that the condiions may
have been ideal on these beaches or drying lagoons for prebiotic reactions to occur, for the simple reason that the
chemicals were more concentrated n these sites than n the middle of the ocean.
Is this because of the temperatures and also the presence of minerals as well?
Temperature is an important factor. Minerals have been thought by some to play a role n the origin of life, but they really
haven't done much for us so far. People talk about how minerals might have helped catalyze reactions, but there are few
examples where the mineral makes any difference.
Our most recent research tackled the problem of making pyrimidines- uracil and cytosine, n prebiotic condiions. For
some reason it just doesn't work very well under dilute condiions. We showed that it works like a charm once you get
things concentrated and dry it out a bit. This changed my outlook on where to start looking for prebiotic reactions.
Another example is our work with co-enzyme A. The business end of co-enzyme A is called pantetheine. We showed you
could make this under these kind of pre-biotic "dry beach" condiions. We found that you didn't need it to be very hot, you
can make it at 40 degrees C. This indicates the ease with which some of this chemistry can take place.
Temperature seems to be a talking point regarding prebiotic hypotheses.
We know we can't have a very high temperature, because the organic materials would simply decompose. For example,
ribose degrades n 73 minutes at high temperatures, so it doesn't seem likely. Then people talk about temperature
gradients n the submarine vent. I don't know what these gradients are supposed to do. My thinking is that a temperature
between 0 and 10 degrees C would be feasible. The minute you get above 25 degrees C there are problems of stability.

22

Biologie Celulara
How does the discovery of the Martian meteorite factor n to the discussion? Are you convinced these are the
fossilized remains of extraterrestrial microorganisms?
I think the data is interesting and suggestive, but not yet conclusive. Let's accept that the meteorite does come from Mars.
You have apparently got very small bacterial fossils also iron sulfide and magnetite sitting next to each other. Then there
are these PAHs (polycyclic aromatic hydrocarbons). All of this is suggestive but not compelling.
There are just two possibilities. Either there was life on Mars or there was not. I have no problem with the idea of life on
Mars, the question remains whether this evidence is adequate. If it is correct, it has an implication for one of the big
questions of prebiotic research. That is, is it easy or difficult to produce life from prebiotic compounds n prebiotic
condiions? It seems that it would be difficult on Mars. If it turns out to be the case on Mars, where the condiions do not
look very favorable, then it should apply to anywhere n the universe, or any planet with a suitable atmosphere and
temperature.
Can you tell us about the field of exobiology today n context of the world of science research?
It is a very small field. There is a society, the International Society for the Study of the Origin of Life. It has only 300
members, a rather small society. My own lab is part of program called NSCORT (NASA Specialized Center of Research
and Training). This program is conducted n close cooperation with NASA and supports five researchers along with
graduate students, post-docs and undergraduate students.
The more important research are the experiments these days, rather than the trading of ideas. Good ideas are those that
when reduced to an experiment end up working. Our approach is to do experiments and demonstrate things, not just talk
about possibilities.
What advice do you have for students interested n pursuing studies n exobiology?
Well we are talking about solving chemical problems. Therefore a background n basic chemistry is essential along with
knowledge n the fields of organic chemistry, biochemistry and some background n geology and physics. Exobiology is a
small field with a lot of interaction. It is one of few fields where an undergraduate would be able to work with top people n
the field almost immediately.
This interview was conducted n October, 1996

23

Capitolul3.Membranacelular
3.1.Structuramembraneicelulare

embrana celular (sau plasmatic) este n esenta formata din lipide, proteine i carbohidrati, acestia din
urma atasati fie de lipide, fie de proteine. Raportul molar dintre lipide i proteine variaza intre 1:4 i 4:1.

3.1.1.Lipidelemembranare
Principalele lipide ale membranei eucariote sunt fosfolipidele, glicolipidele i colesterolul.
Colesterolul lipseste din membrana procariot cu exceptia unui grup restrans de bacterii, paraziti intracelulari,
numite micoplasme (care provoaca, de exemplu, unele forme de pneumonii). Lipidele membranare sunt
molecule amfipatice, adica au capat polar, hidrofil i unul nepolar, hidrofob (Fig. 3.1).

Fig. 3.1 Structura lipidelor membranare

Proprietatile lipidelor membranare sunt :

a) In solutii apoase, membranele lipidice se grupeaza n mod spontan n micelii sau n bistrat. Spre
interiorul bistratului se dispun capetele hidrofobe iar spre exterior, cele hidrofile (Fig. 3.2).

Miceliu

Lipozom

Bistrat lipidic
Fig. 3.2 Dispunerea spontana a lipidelor n micelii, lipozomi sau lame bistratificate.
b) Lipidele din membrana nu sunt imobile ci executa mai multe tipuri de miscari: de difuzie laterala sau
translatie (foarte rapide, ele schimbandu-si locul cu vecinii lor n mai puin de 1s); de rotatie
n jurul propriei axe; de flexie a capetelor hidrofobe, respectiv a lanturilor de acizi grasi (cu o
mobilitate ridicata pentru acizii grasi saturati n timp ce lanturile de acizi grasi nesaturati, avand
duble legaturi cu orientare cis, sunt mai rigide) i miscari de flip-flop sau de difuzie
24

Biologie Celulara

transversala (trecerea unei molecule de pe o fata a bistratului pe alta; este o miscare foarte lenta,
putand dura ore). Prezenta colesterolului n diverse concentraii poate reduce mobilitatea
translationala i de flexie (Fig. 3.3).
Difuzie laterala (10-6 s)

Flip-flop
(difuzie transversala, 105 s)

Flexie (10-9 s)

Rotatie

Fig. 3.3 Miscarile lipidelor n membrane plasmatic

c) Lipidele sunt distribuite asimetric pe cele dou fete ale membranei. Membrana prezint o fata extern (de
regula bogata n fosfolipide cu colina: fosfatidilcolina) i una interna, citoplasmatic (mai bogata
n lipide cu amine: fosfatidiletanolamina). Tot n aceasta idee, glicolipidele sunt dispuse pe fata
extern a membranei, cu gruprile glucidice proiectate n afara celulei, aceste glicolipide avand
un rol importand n comunicarea celular.

3.1.2.Proteinelemembranare
Gruparea proteinelor membranare se poate face n funcie de interaciunea lor cu lipidele :
a) Proteine integrale. Sunt greu de disociat de lipidele inconjuratoare deoarece interacioneaz puternic cu
capetele lor hidrofobe, unele dintre proteine formand adevarate retele n profunzimea membranei. Proteinele
transmembranare sunt proteine integrale care sunt expuse atat la exteriorul membranei cat i pe fata
citoplasmica, cu alte cuvinte strabat membrana pe toata grosimea ei (Fig. 3.4). Aceste proteine pot prezenta
capetele C (carboxi, -COOH) respectiv N (amino, -NH2)
orientate spre aceeasi fata a membranei sau spre fete
opuse.
b)
Proteinele
periferice
(proteine
solubile)
interacioneaz prin legaturi de hidrogen sau forte
electrostatice cu capetele polare ale lipidelor sau cu
partea care proemineaza n afara membranei a
proteinelor integrale (Fig. 3.4).

Fig. 3.4 Dispunerea proteinelor n membrana lipidic

3.1.3.Miscareaproteinelornmembrane
25

La fel ca lipidele, proteinele nu sunt imobilizate n bistratul lipidic ci executa o serie de miscari. Cea mai
improbabila miscare este cea de flip-flop care este puternic restrictionata. Din aceast cauza, membrana
lipidic manifesta de asemenea o tendinta de polarizare (distributie inegala) a proteinelor pe cele dou fete.
In 1972, Singer i Nicholson au propus modelul "mozaicului fluid" al membranei n care proteinele
executa miscari laterale, aceste miscari fiind influentate de fluiditatea membranei (Fig. 3.5). Modelul
"mozaicului fluid" este n mare parte valabil cu exceptia faptului ca proteinele nu se misca haotic. Cauzele
pentru care miscarile proteinelor n fluidul membranar sunt limitate sunt: cantonarea n anumite domenii
membranare, jonctiunile celulare, agregarea i cresterea masei, stabilizarea prin legarea de elemente externe,
pe fata citoplasmica unele proteine sunt legate de componente ale citoscheletului.
Miscarea glicoproteinelor este la rndul lor limitata de necesitatea ca resturile glucidice s proemine
pe fata extracelular a membranei.

Fig. 3.5 Reprezentarea modelului "mozaicului fluid" al membranei celulare.

3.1.4.Fluiditateamembranei
Este o proprietate fundamentala a membranelor plasmatice i a celor care delimiteaza organitele celulare,
permitand deplasarea proteinelor n bistratul lipidic, miscari care sunt importante pentru indeplinirea multor
functii celulare. Fluiditatea membranelor este influentata de urmatorii factori:
a) Natura mpachetarii i a interaciunilor dintre lanturile de acizi grasi (AG) aparinand fosfolipidelor
membranare. Lanturile lungi ale acizilor grai interacioneaz mai puternic intre ele rezultnd o
mpachetare strans, deci o fluiditate mai redus decat n cazul portiunilor membranare cu lanturi scurte
de AG. Prin creterea temperaturii se poate de asemenea crete fluiditatea membranei (legaturile duble
trans se rotesc cu 120o). Exist, de asemenea, o relaie direct proportional ntre temperatura de topire
(Tm) i lungimea lanurilor acil. Lanturile AG nesaturai cu legturi duble cis nu se impacheteaz strans,
rezultnd o cretere a fluiditii i scdere a Tm. Cu ct este mai mare numrul de legturi duble, cu att
Tm este mai scazut iar fluiditatea mai ridicat.
b) La animale, colesterolul se insinueaza intre lanturile de AG reducandu-le mobilitatea i crescand
rigiditatea membranei. Aceasta este o adaptare a membranei animale n lipsa peretelui celular (cu rol
protector la plante i bacterii). Cercetari recente arata ca efectul colesterolului asupra mobilitatii
moleculelor membranare este diferit, n funcie de distanta fata de suprafaa membranei i de temperatura.
La temperaturi ridicate (peste temperatura de tranzitie a fosfolipidelor), colesterolul miscoreaza
fluiditatea membranei datorita scheletului rigid al inelelor sterolice, n timp ce la temperaturi joase,
colesterolul mentine distanta dintre capetele hidofope ale lipidelor, diminuand interaciunile dintre
acestea i contribuind la ridicarea gradului de fluiditate a membranei
26

Biologie Celulara

3.2.Rolulmembraneicelulareprocesedetransport
Membrana plasmatic are trei proprietati fundamentale:
1. Este un mozaic fluid (vezi la 3.1.) permitand miscarea limitata a proteinelor;
2. Este polarizata (vezi 3.1.) avand o distributie diferita de lipide i proteine de o parte i alta a ei;
3. Are permeabilitate selectiv, permitand trecerea unor substane i blocand tranzitul altora.
Membrana plasmatic indeplineste mai multe roluri, vitale pentru celula :
9 Compartimentalizarea celulelor eucariote (aspect ce va fi discutat n capitolele urmtoare) ;
9 Suport pentru desfurarea unor reacii biochimice
9 Bariera de protectie cu permeabilitate selectiv
9 Transportul nutrientilor (ioni, molecule organice);
9 Mediaza raspunsul la semnalele din mediul extern sau intern
9 Participa la comunicarea intercelular

3.2.1.Permeabilitateaselectivamembraneipentruneelectrolitiiioni
Membrana lipidic bistratificata nu este o structura inerta, impenetrabila ci este un sistem dinamic, care
permite trecerea activa sau pasiva a unor categorii de compui. n general prin permeabilitate se pot intelege
fenomenele de difuzie simpla, nefacilitata de alte structuri decat de cea a membranei propriu-zise.
Difuzia simpla
Proprietatea prin care membranele lipidice bistratificate permite trecerea unor substane i blocheaza tranzitul
altor substane se numeste permeabilitate selectiv. Aceasta proprietate a fost descoperita experimental, mai
intai n modele artificiale, n bistraturi lipidice, apoi n modele naturale, n membranele plasmatice.
Primul care a enuntat o regula privind permeabilitatea bistratelor lipidice a fost Overton (1900):
coeficientii de permeabilitate se coreleaza cu coeficientii de partitie ulei/apa ai diferitelor substane. Cu alte
cuvinte, cu cat o substanta este mai hidrofob cu atat patrund n celula cu o viteza mai mare.
Termeni utilizati n relatie cu permeabilitatea bistratelor lipidice :
Coeficientul de permeabilitate este raportul dintre fluxul (J, cantitatea de substanta ce
traverseaz suprafaa membranei n unitatea de timp, molcm-2s-1) i diferenta de concentraie (c, a
substanei de pe ambele fete ale membranei, molcm-3) astfel :

P=

J
(cm/s) ;
c

Coeficientul de difuzie D este direct proportionala cu coeficientul de permeabilitate P i cu

grosimea membranei x : D = P x (cm2/s)
Coeficientul de partitie (Kp) reprezint raportul de distributie a substanei intre membrana
(cm) i solutie (c) : K p =

cm
c

Daca integram cele trei ecuatii de mai sus pentru a le aplica unei membrane lipidice
bistratificate, obtinem urmtoarea relatie : P =

Kp D
x

, coeficientul de permeabilitate fiind

produsul dintre coeficientii de partitie i difuzie n membrana, impartit la grosimea membranei

Cea mai importanta substanta neelectrolitica cu molecula mica este apa. Membranele biologice sunt
partial permeabile pentru apa care traverseaz bistratul lipidic prin difuzie libera (avand un coeficient de
permeabilitate de 10-3-10-4 cm/s). Difuzia libera este un proces pasiv, care nu necesita consum de energie.
Exista cazuri n care circulatia apei de o parte pe alta a membranei este controlata de ctre celula, prin
intermediul aquaporinelor (proteine-canal pentru apa) din membrana eritrocitelor (hematii sau globule rosii
din sange).
27

In ceea ce priveste electrolitii, masuratorile au evideniat gradul ridicat de impermeabilitate a

membranelor lipidice artificiale pentru cationi (cu coeficienti de permeabilitate de cca 10-12-10-13 cm/s).
Prezenta proteinelor n membranele naturale determina o crestere considerabila (de pn la 1000 de ori) a
permeatiei ionilor. Acest lucru dovedeste implicarea proteinelor n transportul electrolitilor, transport care nu
se mai realizeaz n mod dominant prin difuzie pasiva ca n cazul apei, ci prin transport activ. Principala
bariera n calea difuziei pasive a ionilor o constituie cel mai probabil interiorul hidrofob al bistratului lipidic.
Cresterea temperaturii urmata de o fluidizare mai pronuntata a membranelor lipidice artificiale determina i o
crestere a permeabilitatii pentru ioni.
Pe de alta parte, anionii sunt mult mai permeanti decat cationii datorita potentialului de dipol care
este pozitiv i care favorizeaza trecerea prin scaderea energiei de transfer al anionilor. Cel mai permeant
anion anorganic este Cl- din motive inca discutate.
In privinta protonilor (H+) respectiv a ionilor hidroxil (HO-), s-a constatat ca n membranele
artificiale acestia prezint proprietati de permeare apropiate cu ale apei (P=10-4-10-6 cm/s) n funcie de
compozitia lipidic. n schimb, membranele naturale prezint o permeabilitate i mai mare (10-3 cm/s) fapt
care indica din nou implicarea proteinelor n transportul acestor ioni.
Ioni
Na+, K+, H+
Ca++, Mg++,
Cl-, HCO3-

Molecule mari,
polare, neutre

Molecule mici,
polare, neutre

Zaharuri:
Glucoza
Sucroza

H2O, CO2,
Uree

Liposolubile
O2, N2,
Gaze
anestezice

Fig. 3.6. Difuzia simpla la nivelul membranei lipidice

Difuzia simpla (a apei) are o contributie eseniala la realizarea izotonicitatii celulelor n raport cu mediul
extern.

3.2.2.Transportulmediatdestructurispeciale
Transportul diferitelor substane prin membrana celular poate fi mediat de o serie de molecule numite canale
i transportori. Daca transportul nu necesita consum de energie, decurge n sensul gradienilor electrochimici,
atunci se numeste transport pasiv (ex. difuzia simpla i difuzia facilitata). n schimb daca transportul reclama
consum de energie, i se desfasoara impotriva gradientului chimic sau electric, se numeste activ.
Difuzia facilitata
Am vazut anterior ca unii compui precum apa dar i alti compui neelectrolitici precum glicerolul
sau ureea, protonii, ionii hidroxil i ntr-o foarte mica masura anionii i cationii, pot difuza liber prin bistratul
lipidic. Exista ns i alte cai pasive, neconsumatoare de energie, prin care se realizeaz transportul
substanelor de o parte i alta a membranei, n sensul gradientilor de concentraie, i anume prin intermediul
ionoforilor i a proteinelor-canal.
Ionoforii sunt polipeptide din categoria antibioticelor capabili de a realiza trecerea selectiv a unor
ioni prin membrane lipidice. Ionoforii incapsuleaza de obicei ionii printr-un proces de ciclizare sau
semiciclizare i transporta prin membrana conform gradientului electrochimic, printr-un proces de dute-vino
intre fetele membranei. Exemple de ionofori ciclici i ionii transportati sunt : valinomicina (K+) (Fig. 3.7) i
nigericina (K+ i H+).
28

Biologie Celulara

Valinomicina
H3C
N

CH3
CH O
CH C

H
C
CH

H3C
L-valina

O
C

H
C

CH

D-valina

O
O

3
Acid lactic

O
K

H CH
CH3
CH3 H3C

Acid D-hidroxi
izovaleric

Miez
hidrofi

CH3 O

O
O

Exterior hidrofob

Fig. 3.7 Relatia structura-funcie a valinomicinei. Valinomicina este o molecula circulara constituita din 3
repetitii ale secvenei prezentate, inelul fiind stabilizat de legaturi de hidrogen. Ionul de potasiut este strans
infasurat de inel, fiind legat de cei sase atomi de oxigen care inlocuiesc atomii de oxigen din apa de hidratare.
Alti ionofori sunt capabili de transportul ionilor prin asamblarea lor sub forma de canale sau pori
membranari (gramicidina, nistatina, amfotericina). Ionoforii sunt ns substane de origine artificiala i au
semnificatie experimentala, n studiul fenomenelor de transport la nivelul membranelor. O aplicatie practica,
direct resimtita de noi este efectul antibiotic al acestor ionofori, prin permeabilizarea totala a celulelor
bacteriene patogene, cu consecinte letale pentru acestea (dezechilibru ionic poate fi fatal celulei).
O alta categorie de molecule implicate n difuzia facilitata a ionilor i apei este cea a proteinelorcanal. Ei sunt transportori naturali prezenti n membrane i care poti fi operati n cateva moduri :
a) Canale operate de voltaj (voltage-gated channels), se deschid sau inchid ca raspuns la o schimbare a
potentialului electric transmembranar. n aceasta categorie intra canalele de Na+, K+
i Ca+ din membranele excitabile (din muschi i sistemul nervos) si
b) Canale operate chimic care raspund unui stimul chimic (hormoni sau neurotransmitatori). Aceste canale
se gasesc la nivelul membranelor postsinaptice din jonctiunile neuromusculare.
c) Canale care nu sunt reglate de un factor anume i canale care sunt operate fizic (de exemplu sub aciunea
presiunii osmotice). Unii cercetatori le incadreaza n categoria porilor deoarece nu
sunt considerate canale propriu-zise.
In concluzie, functia majora a canalelor ionice este de a facilita si de a regla pentru o foarte scurta
perioada de timp, miscarea ionilor in sensul gradientului de concentratie stabilit initial de o parte si alta
a membranei plasmatice (celulare) sau membranei organitelor intracelulare; aceasta disipare temporara
a gradientului ionic determina o perturbare a functiilor celulare sau apare ca o necesitate de folosire
predominanta a canalelor ionice pentru traducerea semnalelor si transferul de informatie (ex. la nivelul
sinapselor nervoase).
O a treia categorie de molecule care mediaza transportul pasiv al substanelor este cea a proteinelortransportor (carriers sau "carausi"). Ele realizeaz trecerea unidirectionala n sensul gradientului chimic
(pentru o specie neutra) sau electric (ioni) a unei singure substane (transport uniport).
Din punct de vedere enzimatic, difuzia facilitata mediaa de transportori are o cinetica de tip MichaelisMenten, fiind caracterizata de o viteza maxima (Vmax) i o constanta Michaelis (KM) spre deosebire de difuzia
simpla care are o cinetica liniara (Fig. 3.8 a)
Exemple de transportori pasivi de tipul proteinelor-caraus sunt transportorul glucozei din membrana
eritrocitara (Fig 3.8 b) i transportorii unor aminoacizi din membrana bacteriana.

29

Fig. 3.8 Cinetica difuziei simple i facilitate (a) i difuzia facilitata a glucozei n care proteina-caraus adopta
mai multe stari conformaionale (b)

3.2.3.Transportulactiv
Cand transportul unei substane este dependent de transportul altei substane, afirmam ca transportul
este cuplat. Exista dou categorii de transport cuplat: antiport (contratransport sau difuzia de schimb,
substanele sunt transportate n sens opus) i simport (cotransport, ambele specii chimice sunt transportate n
acelasi sens) (Fig. 3.9)
Teoretic, transportul cuplat poate fi pasiv ca n cazul unor ionofori care realizeaz de exemplul
contratransportul K+/H+ (nigericina). n realitate, n membranele naturale vii, diferenta (gradientul)
electrochimic este mentinut prin procese consumatoare de energie iar simportul sau antiportul unor compui
n sensul gradientului electrochimic este posibil numai n condiiile n care celula mentine activ acest
gradient. n acest caz putem spune ca transportul este cuplat secundar cu energia (transport activ secundar).
Pe de alta parte, o serie de transportori proteici realizeaz procese de transport cuplate direct cu consumul de
energie (in speta cu hidroliza legaturilor macroergice ale ATP). n acest caz transportorii sunt cuplati primar
cu energia (transportori activ primar sau pompe primare)
Transport cuplat

Uniport

Antiport

Simport

Fig. 3.9 Trei tipuri de transport mediat de proteine carausi: uniport, simport i antiport.

3.2.3.1.Transportulactivprimar
In transportul activ primar sunt implicate proteine care cupleaza translocarea unei substane (ioni sau
molecule), impotriva gradientului chimic, cu o sursa de energie. Aceste surse de energie pot fi :
1. Hidroliza ATP, iar n acest caz transportorii proteici se numesc "pompe (ionice) activate de ATP". Astfel
de pompe cuplate cu activitatea ATP hidrolazica (ATPazica) sunt exemplificate cel mai bine de Na+K+-ATPaza, care funcioneaz ca transportor activ al ionilor de Na+ dintr-un compartiment intracelular
30

Biologie Celulara

(cu concentraie mica de Na+) spre compartimentul extracelular (cu concentraie ridicata de Na+) la
schimb cu ionii de K+ care sunt translocati dinspre o concentraie redusa din fluidul extracelular spre o
concentraie de K+ ridicata din compartimentul intracelular (citosolic). Aceasta pompa este una dintre
sursele majore de mentinere a potentialului electrochimic transmembranar.
2. Razele luminoase. Proteinele a caror funcie transportoare este energizata sub aciunea luminii se numesc
pompe (ionice) activate de lumina. Pompele activate de lumina se intalnesc n membranele unor
bacterii (de exemplu proteinele numite halorodopsina i bacteriorodopsina).
Pompele ATPazice
Transportorii primari de tipul ATPazelor indeplinesc roluri vitale pentru celula i sunt raspanditi n toate
organismele vii (procariote i eucariote: celule vegetale i animale deopotriva). Pompele activate de ATP pot
fi impartite n patru clase n funcie de caracteristicile lor structural-functionale: P-ATPaze, V-ATPaze, FATPaze i proteine de tip ABC.
A. P-ATPazele sunt o clasa de transportori inruditi genetic i structural. Ele includ antiportorul Na+-K+ATPaza (al carui rol a fost explicat mai sus), antiportorul K+-H+-ATPaza (implicat n generarea aciditatii
din stomac prin transportul de protoni spre exteriorul celulei, n cavitatea stomacala, la schimb cu ionii de
K+ care patrund n celula) i Ca2+-ATPaza (prezenta n membrana celular i membrana reticului
endoplasmic, transporta ionii de Ca2+ din citosol spre exteriorul celulei sau spre interiorul RE, mentinand
concentraia Ca2+ din citosol la un nivel redus, astfel ca acesti ioni pot actiona ca semnale celulare).
P-ATPazele sunt astfel denumite (P) deoarece translocarea ionilor de o parte pe alta a membranei implica o
modificare temporara, covalenta, a proteinei, cu transferul fosfatului de pe ATP la gruparea carboxilica a
acidului glutamatic (Glu) sau aspartic (Asp) din situsul activ. Se formeaza o legtur cu energie inalta. ntr-o
etap ulterioara, fosfatul anorganic (Pi) este eliberat, la fel i ionul, proteina revenind la starea initiala. Pentru
ca aceste proteine adopta dou stari conformaionale diferite (denumite E1 i E2), ele au mai fost numite i
E1.E2.ATPaze.
Mai jos va fi detaliaa structura i functionarea antiportorului Na+-K+-ATPaza:
Na+-K+-ATPaza
Este un complex proteic membranar larg raspandit n celulele eucariote. Se estimeaza ca circa 25% din totalul
ATP citosolic din celulele umane n repaus este consumat de pompele de sodiu n vreme ce n celulele
nervoase acest procent atinge 70% din ATP total.
Na+-K+-ATPaza este un tetramer compus din patru subuniti, dou subuniti alfa (~113 kD) care
sunt responsabile pentru transportul propriu-zis al ionilor i de legarea ATP, continand situsul de fosforilare,
i dou subuniti mai mici, beta (~35 kDa). Subunitile beta sunt glicoproteine necesare activitii
complexului, facilitand localizarea membranara i activarea subunitilor alfa (Fig. 3.10).
Transportul cationilor decurge prin intermediul unui ciclu de modificri conformaionale (Fig. 3.10 b)
datorate fosforilarii de la nivelul situsului activ din subunitatea alfa:
Pompa cu ATP legat (starea conformaionala E1), capteaza 3 ioni de Na+ de pe fata citosolic.
ATP este hidrolizat, fosfatul este transferat unei grupri carboxil din situsul de fosforilare aflat pe fata
citosolic a pompei, cu eliberare de ADP.
Prntr-o modificare conformaionala (starea E2) a carui mecanism este inca incert, pompa expune
ionii de Na+ pe fata extracelular, unde ei sunt eliberati.
Pompa leag 2 ioni de K+ din mediul extracelular, iar subunitatea alfa este defosforilata.
ATP se leag din nou iar pompa se reorienteaza eliberand ionii de K+ n citosol.
Cu ATP legat de subunitatea alfa, pompa (E1~ATP) este pregatita s lege ionii de Na+ iar ciclul se
repeta.

31

oligozaharide

Na+

3Na+
exterior

citosol

K+

2K+
ATP

ADP+Pi

A
Fata extracelulara
E2~P[2Na+]

2Na+

2K+
E2~P

E2~P[2K+]

Na+

Pi
+

E2[2K ]

E1~P[3Na+]

ATP

ADP

E1~ATP[3Na+]
Fata citosolica

E2~ATP[2K ]

E1~ATP[2K+]

E1~ATP
2K+

Fig. 3.10 Reprezentarea schematica a pompei Na+-K+ ATPaza (A) i a mecanismului de transport activ al
ionilor de Na+ i K+ (B)
B. V-ATPazele au fost initial identificate la eucariote i mai exact, n membrana vacuolelor (V) din
celulele vegetale. Ulterior V-ATPazele au fost descrise i la bacterii. Ele funcioneaz ca pompe primare
ce transporta protoni (in majoritatea cazurilor) sau ioni de Na+. Ele contribuie la realizarea gradientilor
transmembranari de protoni.
C. F-ATPazele se deosebesc de celelalte pompe ATPazice prin faptul ca sunt capabile nu numai de
hidroliza ATP ci i de sinteza ATP, reprezentand enzime care contribuie la procesul de fosforilare (F)
oxidativ (sinteza ATP cuplata cu respiratia). F-ATPazele sunt prezente la eucariote, exclusiv n
membrana mitocondriala i cloroplastidiala interna, n membranele bacteriilor i arhebacteriilor (unde
poarta numele de A-ATPaze). Desi funcia principala este de a genera ATP pe seama gradientului
32

Biologie Celulara

telectrochimic transmembranar susinut n urma respiraiei, la unele bacteriui funcia s este predominat
hidrolazica, generand potential electrochimic pe baza consumului de ATP. n laborator (in vitro) FATPazele pot functiona n ambele directii depinzand de condiiile experimentale. Majoritatea FATPazelor sunt pompe de protoni dar exista i F-ATPaze dependente de Na + descoperite exclusiv la
unele bacterii patogene, anaerobe. Mai jos vom exemplifica F-ATPazele cu complexul F1F0-ATP
sintetazic prezent n membrana mitocondriala intern la celulele eucariote
Desi prezint o anumita diversitate de izoforme, F-ATPazele cuprind complexe multimerice compuse din
dou parti:
Complexul F1- hidrofil, orientat spre citosol i constituit din 3 subuniti alfa i 3 beta (33), cate o
subunitate gama (), delta () i epsilon ();
Complexul F0 (zero) hidrofob, puternic atasat membranei lipidice, cu 1 subunitate a, una b i un
numr variabil (10-13) de subuniti c.
Fiecare dintre aceste subuniti au un rol bine definit n complexul F-ATPazic astfel :
subunitile i contin situsurile catalitice de legare a ATP/ADP i Pi ;
subunitile , i constituie suportul subunitilor catalitice, cu rol de legare a complexului
hidrosolubil F1 de complexul membranar F0;
subunitile a i b ale complexului F0 constituie un canal pentru scurgerea ionilor de H+ (sau Na+) ;
subunitile c ancoreaza intreg complexul ATPazic n membrana i constituie motorul" acestuia, avand
capacitatea de a se roti n curul unui ax central imaginar.
Elucidarea functionarii complexului F1F0-ATP sintetazic (sau ATPazic) a reprezentat una dintre cele mai
mari provocari i surprize din istoria biologiei celulare. S-a constatat ca el reprezint o masinarie rotativa,
asemenea unei mori de apa. Curgerea de protoni n sensul gradientului de pH (analoaga curgerii apei)
determina rotirea subunitilor c care, la rndul lor conduc la rotirea subunitilor catalitice din complexul F1,
miscare intermediaa de subunitile de sprijin, , i . Rotirea subunitilor catalitice i provoaca
modificri conformaionale la nivelul acestora i adoptarea a trei stari: T, L i O. n starea T, subunitatea beta
leag slab ADP i Pi, n starea L, legarea devine mai puternica iar n final, n starea O este sintetizat ATP care
este ulterior eliberat
Exista un raport intre numrul de
protoni ce traverseaz complexul i numrul
F-ATPaza
de molecule de ATP formate. n principiu,
cu cat este mai mare gradientul de pH
(pH), cu atat sinteza de ATP decurge mai
eficient. Pe de alta parte, n absenta unui
gradient de pH (parte a potentialului
electrochimic transmembranar) F-ATPaza
va functiona n sensul hidrolizei ATP cu
exportul protonilor din citosol i generarea
diferentei de pH (acid la exterior).

Fig. 3.11 Structura F1F0-ATP sintetazei

33

D. Proteinele transportoare de tip ABC ("ATP-binding Cassette) au fost relativ recent descoperite i
reprezint o clasa de proteine localizate atat n membrana plasmatic cat i n membranele organitelor
celulare. Ele mediaza translocarea unor substrate variate: ioni, molecule organice (lipide, acizi biliari,
conjugati glutationici i glucuronici, peptide mici), compui de sinteza (medicamente, droguri).
Majoritatea proteinelor ABC utilizeaz energia furnizata de hidroliza ATP (transport activ) ns unele
pot forma canale membranare specifice (de exemplu proteina CFTR, reglatorul de conductanta
transmembranara al fibrozei cistice care este un canal de clor).
Aceste proteine sunt prezente la toate organismele vii, de la bacterii la om (din cele peste 1000 de
proteine ABC identificate, 48 sunt tipic umane). Mutatii ale genelor ce codific aceste proteine ABC au
fost asociate cu numeroase maladii genetice (ex. fibroza cistica). Avand posibilitatea de a lega i
transporta medicamente din i inspre interiorul celulei, proteinele ABC sunt raspunzatoare pentru esecul
majoritatii tratamentelor medicale asupra bolnavilor de cancer care manifesta rezistenta la o serie de
substane citotoxice (utilizate n chimioterapie), n rezistenta unor forme de malarie, n dificultatea tratarii
SIDA. Aceste proteine ABC capabile de transportul medicamentelor i apariia rezistentei la tratamentele
medicamentoase se numesc proteine MDR (Multi-drug resistance).
Un alt rol atribuit transportorilor de tip ABC este de facilitare a miscarii flip-flop (difuzie
transversala) a lipidelor membranare i de aceea aceste grup de proteine ABC se mai numesc flipaze
dependente de ATP. n general, aceste translocaze de lipide transporta lipide din stratul intern, pe fata
extern a bistratului membranei cuplat cu transportul altor compui (acizi biliari, medicamente).
MATERIAL SUPLIMENTAR
Mecanismul de baza al rezistentei la medicamente (MDR) n tratamentul cancerului
Mecanismul general acceptat al rezistentei la medicamente multiple este ca proteinele de tip MDR expulzeaza
activ medicamentele citotoxice din celule, mentinand nivelul acestora sub pragul toxic pentru celule. Exportul
medicamentelor din aceste celule se face cu consum de energie prin hidroliza ATP. Cea mai intriganta caracteristica prin
care proteinele MDR se deosebesc de alti transportori de la mamifere este larga lor specificitate de susbtrat. Spre
deosebire de alte proteine de transport clasice (care sunt selective), transportorii MDR recunosc i transporta o mare
varietate de substrate. Acest caracter explica rezistenta multipla la cateva medicamente de sinteza, nenrudite,
proprietate intalnita la asa-numitul fenotip cu rezistenta multipla pe care il posed unii oameni.
Diferitele tumori cu proteine MDR supraexprimate (ex. hepatoamele, carcinoamele de plamani i stomac)
prezint adesea o rezistenta primara (sau intrinseca) la chimioterapia cancerului. Mai mult, chimioterapia insasi poate
induce supraexprimarea acestor proteine, astfel incat noile clone (celule nascute din celulele tumorale initiale) devin mai
puin sensibile la chimioterapie (rezistenta secundara la medicamente). Esecul tratamentelor n cazul rezistente la
medicamente multiple este de asemenea evideniaa i n cazul altor maladii cum sunt bolile autoimune i cele
infectioase.

Structura tipica a unei proteine de tip ABC const din cel puin 2 domenii transmembranare (TMD,
Transmembrane domains) i minimum 2
domenii de legare a ATP (ABC). Regiunile TMD
ancoreaza proteina n membrana formand un por
prin care trec o varietate remarcabila de substane
Domeniul de legare al ATP este orientat spre fata
citoplasmica i la nivelul ei se elibereaza energia
ATP (Fig. 3.12). Nu se cunoaste modalitatea prin
care energia este convertita de situsul ABC pentru a
fi utilizat n transport i nici mecanismul exact al
transportului
Fig. 3.12 Structura transportorilor de tip ABC
n sectiune transversala (A) i dispunerea
peptidelor n spatiu (B)

CITOSOL

Domenii de legare a ATP

34

Biologie Celulara

3.2.3.2.Transportulactivsecundar
Transportorii activi secundari cupleaza miscarea unei substane impotriva gradientului de
concentraie la schimb cu transportul altui ion n sensul gradientului sau de concentraie. Transportul activ
secundar este intotdeauna un proces de co-transport: fie de tip simport (ex. simportorii de Na+/glucoza i
Na+/aminoacizi) sau antiport (ex. antiportorul Na+/H+). Activitatea acestor transportori nu este, asadar, direct
energizata de ATP ci indirect, prin functionarea unor pompe primare de ATP care genereaza gradienti
electrochimici. Acesti gradienti constituie apoi motorul pentru transportorii secundari.
Cinetica transportului activ secundar este similara cu cea a difuziei facilitate. La concentraii foarte mari de
substrat, transportul este franat de lipsa unui numr suficient de proteine capabile s lege substratul existent.
Dou exemple importante merita s fie amintite aici:
Simportorul Na+/glucoza
Transportorii secundari ai hexozelor sunt proteine transmembranare localizate n principal n celulele
intestinale i renale.
O semnificatie deosebita o au transportorii hexozelor (glucoza, galactoza) de la polul apical al celulelor
din invelisul inestinal intern. Simportorul Na+/glucoza (prescurtat, SGLUT) faciliteaza preluarea specifica a unei
molecule de glucoza (si galactozei) din lumenul (cavitatea) intestinal(a) unde monozaharidele apar ca urmare a
procesarii digestive a hranei. Glucoza este transportata din exteriorul celulei spre interior, unde concentraia
acesteia este mult mai mare (impotriva gradientului de concentraie) la schimb cu 2 ioni de sodiu. Acest transport
este posibil numai cu consum de energie iar forta motrice a functionarii simportului este gradientul chimic de Na+
stabilit n urma functionarii pompelor primare dependente de ATP (Fig. 3.13). Glucoza este ulterior descarcata
n sange de unde ajunge la toate celulele organismului, asigurand nutritia lor.

Lumenul
intestinal

Vas de
sange

Glucoza

Glucoza

Glucoza

Na+

Na+

Na+
K+

ATP
Na+

K+
ADP

Polul bazal
al celulei
intestinale

Na+

ATP

K+

Na+

K+

ADP

Cotransportorul
Na+/glucoza
Transportorul
(carausul)
de
glucoza (difuzie
facilitata)

Pompa Na+-K+
ATPaza
Jonctiuni
celulare

Polul apical
al
celulei
intestinale

Fig. 3.13 Transportul cuplat (simport) al glucozei cu ionii de Na+, n sensul gradientului de concentraie al
ionilor de sodiu, gradient generat prin activitatea pompei primare Na+-K+ ATPaza. Glucoza patrunsa n
35

celula intestinala este transportata ulterior prin difuzie facilitata de ctre proteina-caraus pentru glucoza, n
sensul gradientului de concentraie, spre lumenul vasului de sange.
+
+
Antiportorul Na /H
O parte din echilibrul ionic al celulelor este mentinut i cu ajutorul unei clase de proteine care transporta ionii de
sodiu la schimb cu protoni. Acestia sunt antiportorii Na+/H+ (sau prescurtat Nha) care sunt prezenti n membrana
plasmatic a celulelor bacteriene, la celulele vegetale i animale. Forta motrice pentru functionarea acestor
antiportori il reprezint gradientul de pH generat n urma activitii lantului respirator sau n urma functionarii unor
pompe primare de H+. Astfel, 2 protoni sunt introdusi n citosol (in sensul gradientului de concentraie) la schimb
cu 3 ioni de sodiu care sunt expulzati impotriva gradientului de concentraie. Acest antiport are o semnificatie
deosebita n cursul adaptarii la condiii saline, cnd concentraia de saruri (NaCl sau NaHCO3/Na2CO3) din mediul
extern este foarte mare. Celula bacteriana i vegetala au tendinta de a mentine concentraia intern de ioni de sodiu
n limite normale tocmai prin activitatea intensa a acestor antiportori.
In celulele animale, antiportorii de Na+/H+ sunt distribuiti predominant la nivelul polului apical al celulelor
renale implicate n formarea urinei. Aceste celule au capacitatea de a recupera Na+ din urina (la nivelul
membranei apicale) printr-un mecanism activ secundar de simport Na+/H+. Preluarea sodiului este posibila datorita
aciditatii mediului intern celular care constituie motorul de deplasare a ionilor de sodiu spre interior (impotriva
gradientului de concentraie) Ionii de sodiu sunt mai departe transportati spre sange pentru a se asigura tonicitatea
acestuia prin polul bazal printr-un antiportor secundar Na+/HCO3-. Mecanismele de transport ale Na+, K+, H+, apei,
glucozei sunt ns mult mai subtile la acest nivel, celulele renale avand capacitatea de a orienta migrarea acestor
compui pentru asigurarea unui echilibru chimic, electric i de pH intre sange i urina (Fig. 3.14).
Orice dezechilibru genetic i metabolic la acest nivel declanseaza boli ale rinichiului numite
nefropatii i boli ale sistemului cardiovascular (ex. hipertensiune).
Vas
sange

celula din tubul renal

Lumen
tubular
3Na+

Antiportorul
Na+/H+
2H+

Anhidraza
carbonica

de

Na+
3HCO3-

Pompa Na+-K+
ATPaza
3Na+
ATP

membrana
bazala

2K+

membrana
apicala

CO2+H2O

ADP + Pi

K+

K+

Fig. 3.14 Transportul cuplat (antiport) al ionilor de Na+ i protonilor la nivelul celulei renale. Acidificarea
sangelui este urmata de acidificarea celulei renale i tendinta de eliminare a excesului de protoni n lumenul
tubular (acidificarea urinei). Ionii de sodiu sunt astfel recuperati din urina i transportati spre sange. O alta
cale de transport al ionilor i apei o reprezint calea paracelular.
36

Biologie Celulara

IMPORTANT
In concluzie, prin procesele de transport la nivel membranar sunt asigurate urmatoarele functii majore:
1. Stabilirea si mentinerea un gradient electrochimic transmembranar al anionilor si cationilor cu
importanta fiziologica (ex. Na+-K+ ATPaza);
2. Generarea energiei prin cuplarea potentialului electrochimic transmembranar cu sinteza ATP (ex.
F1Fo-ATP sintetaza);
3. Asigurarea izotonicitatii celulare cu cea a mediului extern prin controlul distributiei apei si
moleculelor osmotic active (ex. difuzia simpla, difuzia facilitata);
4. Nutritia celulara prin transportul unor molecule organice in interiorul celulei, molecule care vor
intra ulterior in ciclurile metabolice celulare (ex. transportul glucozei);
5. Detoxificarea prin asigurarea unei concentratii intracelulare scazute al unor compusi toxici de tipul
drogurilor, medicamentelor, metalelor grele si a metabolitilor ca urmare a exportului lor in afara
citoplasmei (ex. proteinele MDR, V-ATPazele);
6. Secretia unor compusi de importanta fiziologica pentru organism (ex proteinele ABC care
transporta acizii biliari);
7. Semnalizarea intra- si intercelulara prin eliberarea unor mesageri cu rol in medierea unor
raspunsuri la stimuli externi (ex. Ca2+-ATPaza din RE, proteinele-canal activate de voltaj de la
nivelul sinapselor neuronale si jonctiunilor neuromusculare, etc)

3.3.Adeziuneacelular
3.3.1.Asociereacelulelorntesuturiiorganelaorganismelepluricelulare
Majoritatea celulele organismelor pluricelulare (plante i animale) sunt organizate n structuri
cooperative numite esuturi, care la rndul lor se asociaz n diverse combinaii n uniti funcionale de
dimensiuni mari numite organe. Frecvent, celule aparinnd unui anumit tip celular se agreg i formeaz un
esut, pentru a coopera n ndeplinirea unei funcii comune: muchii se contract; esutul nervos conduce un
impuls electric; esutul xilem n plante transport ap. Diferite esuturi se pot organiza ntr-un organ cu scopul
realizrii unor funcii specifice. De exemplu, muchii, valvele i vasele sangvine ale inimii funcioneaz
corelat pentru a pompa sngele prin organism (organul numit inima).
Funciile coordonate ale multor tipuri de celule din esuturi, ct i a multiplelor esuturi specializate,
permit organismului s:
i)
funcioneze ca un tot unitar;
ii)
se mite;
iii)
metabolizeze hrana;
iv)
se reproduc;
v)
desfoare alte activiti eseniale.
Diversitatea i complexitatea morfologic a plantelor i animalelor sunt exemple ale faptului c
organismul ca ntreg este mai important dect suma prilor individuale. De exemplu, la plante, organizarea
rdcin tulpin - frunze le permite obinerea simultan de energie (de la lumina solar) i carbon (din
CO2), din aerul atmosferic, ap i din nutrienii din sol. Proprietile mecanice distincte ale oaselor tari,
ncheieturilor flexibile, i ale muchilor contractili permit vertebratelor s se mite eficient i s prezinte
dimensiuni substaniale. Straturi de celule epiteliale ataate foarte compact, pot aciona ca bariere reglabile,
cu permeabilitate selectiv, care permit generarea unor compartimente distincte chimic i funcional n
structura unui organism (exemplu stomacul, circuitul sangvin). Din acest motiv, ntr-un organism se pot
desfura simultan funcii complementare cum sunt digestia i sinteza.
De asemenea, compartimentalizarea permite o reglare mai sofisticat a diverselor funcii biologice. n
multe privine, rolul esuturilor complexe i al organelor ntr-un organism, este analog cu cel al
organitelor i al membranelor ntr-o celul individual.

37

3.3.2.Moleculeledeadeziune
Asamblarea esuturilor distincte i organizarea lor n organe este determinat de interaciuni moleculare, la
nivel celular, i nu ar fi posibile fr expresia, reglat temporal i spaial, a unui spectru larg de molecule de
adeziune. Prin intermediul lor, celulele pot interaciona fie cu alte celule (adeziune celul-celul) fie ramn n
contact cu o reea complex de macromolecule extracelulare, matricea (sau matrixul) extracelular (adeziune
celul-matrice). Interaciunile intercelulare pot fi temporare (de exemplu, ntre celulelor sistemului imunitar
din snge, permind alunecarea i trecerea acestora prin peretele vaselor de snge, n timpul unui rspuns
imun) sau stabile (ca n cazul celulelor epiteliale care ader strns unele de altele). Interaciunile stabile au
rol foarte important n dezvoltarea i integrarea anatomic a esuturilor.
Adeziunea celul-celul se realizeaz prin intermediul unor proteine membranare specializate numite
molecule de adeziune celular (CAMs Celular Adhesion Molecules), care adesea se organizeaz sub forma
unor jonciuni celulare specializate. Celulele din esuturile animale ader indirect (adeziune celul-matrice) i
la componente ale matricei extracelulare prin intermediul unor receptori de adeziune din membrana
plasmatic. Aceste dou tipuri de interacii mediaz agregarea i organizarea celulelor n esuturi distincte i
susin transferul bidirecional al informaiei ntre exteriorul i interiorul celulei.
CAM pot fi grupate n patru mari familii:
- caderinele,
- superfamilia imunoglobulinelor (Ig),
- integrinele, i
- selectinele.
Mai exist i alte tipuri de proteine implicate n procesul de adeziune celular n anumite esuturi dar
care nu aparin nici unei clase majore de CAM.
Adeziunea asigurat de caderine, integrine i selectine este dependent de prezena ionilor de Ca2+, n
timp ce superfamilia imunoglobulinelor un necesit prezena calciului pentru funcia de adeziune. n general,
selectinele, integrinele i imunoglobulinele mediaz interaciuni temporare celul-celul (ca de exemplu cele
dintre leucocite i celulele endoteliale n timpul migraiei leucocitelor spre locul inflamaiei tisulare) sau
particip la interaciunile dintre celul i matricea extracelular (integrinele). Caderinele asigur n mod
specific interaciuni intercelulare stabile, facnd parte din structuri moleculare numite jonciuni celulare.
n figurile 3.15 i 3.16. sunt prezentate topologiile (poziiile spaiale) i structurile schematice a unor
CAM. Ele sunt formate prin mbinarea mai multor domenii distincte, unele dintre aceste domenii aparinnd
mai multor tipuri de CAM. O caracteristic a unora dintre aceste proteine sunt domeniile repetate (care se
gsesc n mai multe exemplare n aceeai molecul). Unele din aceste molecule sunt responsabile de
specificitatea de legare caracteristic anumitor proteine.
Adeziune celula-celula
Proteine de fixare
intracelulara

Molecule de
adeziune
celulara

Proteinele citoscheletului

Adeziune
celulamatrice
celulara

Membrana
plasmatica

Fibre de
colagen
Glicozaminoglicani Proteoglicani ai
suprafetei
celulare

Proteoglicani
din matrice

Proteine
multiadezive

Fig. 3.15. Relatiile dintre moleculele de adeziune celular, celula i matrice extracelular
38

Biologie Celulara

Moleculele de adeziune pot fi considerate un fel de receptori, adic proteine transmembranare

capabile s fixeze un ligand. n general, liganzii care interacioneaz cu moleculele de adeziune sunt
insolubili.
Prin intermediul domeniilor extracelulare, moleculele CAM mediaz interacii de adeziune ntre
celule de acelai tip (adeziune homotipic) sau ntre celule diferite (adeziune heterotipic). O molecul CAM
poate s se lege de acelai tip de molecul aparinnd unei celule adiacente (interacie homofilic), sau se
poate lega de o alt clas de molecule CAM (interacie heterofilic).
Moleculele CAM pot fi localizate la nivelul regiunilor membranei plasmatice care vin n contact cu
alte celule, sau pot fi comasate n regiuni discrete numite jonciuni celulare.

Fig. 3.16. Structurile schematizate ale celor patru familii de molecule de adeziune celular

Caderinele
Caderinele sunt molecule-cheie n procesul de adeziune i semnalizare celular, i joac un rol critic
n diferenierea tisular. Sunt glicoproteine care leag ioni de calciu i asigur o separare spaial a celulelor
dnd form organismului. Exist mai multe tipuri de caderine. Unele dintre acestea asigur jonciunile de
aderen i situsurile punctiforme de contact dintre celulele bogate n molecule de aderen. La mamifere, se
disting trei tipuri majore de caderine:
i) caderina epitelial (E-caderina);
ii) caderina placentar (P-caderina);
iii) caderina neural (N-caderina)
Celulele care posed aceleai caderine pot adera unele la altele, dar nu ncruciat.
Caderinele au rol important n recunoaterea selectiv a celulelor embrionare i stabilesc polaritatea
lor celular. Sunt molecule de adeziune a cror caten peptidic traverseaz membrana o singur dat.
Molecula unei caderine are trei pri:
1) n regiunea proximal (captul amino- al proteinei) are un situs de legare homofilic adic
recunoate un situs identic al unei alte caderine care asigur contactul ntre celule (Figura 7.2.).
2) Un domeniu transmembranar care se continu cu
3) domeniul terminal, citoplasmatic care interacioneaz cu alte tipuri de proteine (cateninele) ce
asigur jonciunea cu reeaua citoplasmatic a microfilamentelor de actin.
39

n interiorul celulei, caderinele sunt conectate cu citoscheletul prin doi intermediari: -catenina i
dimerul de actin F. Fixarea la citoschelet consolideaz legarea celul-celul.
Caderinele clasice E, P, N sunt cele mai abundent exprimate, n special n diferenierea timpurie.
Straturi de celule epiteliale polarizate, asemntoare celor care cptuesc intestinul subire i tubulii renali,
conin E-caderina pe suprafaa lor lateral. Dei E-caderina este concentrat n jonciunile aderente, ea este
prezent pe toat suprafaa lateral i se asociaz cu membranele celulelor adiacente. Creierul exprim cel
mai mare numr de caderine, probabil datorit nevoii de a forma numeroase contacte specifice celul-celul
necesare stabilirii reelei complexe de conexiuni.

3.3.3.Jonciunilecelulare
Structura tisular este activ susinut de afinitatea dintre celule. Moleculele de adeziune formeaz
baza acestei afiniti specifice. esutul conjunctiv i cel epitelial reprezint dou extreme n care matricea i
sistemele de adeziune intercelular au roluri structurale complet diferite.
n esuturile conjunctive, matricea extracelular este abundent i suport cea mai mare parte a
tensiunilor la care sunt supuse esuturile. Interaciunile ntre celule sunt limitate. n epiteliile care cptuesc
toate cavitile i suprafeele externe ale corpului, celulele sunt strns asociate n straturi. Matricea
extracelular estemai puin abundent, formnd un strat fin, numit membran bazal, subiacent celulelor.
Cea mai mare parte a tensiunilor este suportat de ctre celule. Graie jonciunilor celulare specializate,
epiteliul i endoteliul sunt suficient de rezistente pentru a constitui o barier capabil s separe dou
compartimente.
Jonciunile celulare prezente n epiteliile animale pot fi clasificate, dup structur i funcie, n:
i) jonciunile nguste, strnse sau dense (tight), formeaz bariere capabile s limiteze
permeabilitatea epiteliului (sau endoteliului);
ii) jonciunile de ancorare sau aderente (adherens) i desmozomii, care permit ataarea
mecanic a celulelor ntre ele;
iii) jonciunile de comunicare (gap), care permit pasajul semnalelor chimice sau electrice ntre
celule.
Dintre cele trei tipuri de jonciuni prezente n celulele epiteliale, dou particip la adeziunea celulcelul, iar a treia, la adeziunea celul-matrice.

1.Jonciunilenguste
Etaneitatea la molecule i ioni a epiteliuliilor i endoteliilor este asigurat de jonciunile nguste
sau etane (tight). Ele realizeaz o apropiere strns i localizat a membranelor dintre dou celule
vecine fapt ce limiteaz considerabil trecerea solviilor prin spaiul intercelular (constituind, aadar, o barier
paracelular). Aceast barier oblig solvitul s tranziteze stratul celular prin intermediul transportorilor
membranari selectivi (transport transcelular). Aadar, jonciunile nguste separ domeniul apical de cel
bazolateral al membranei plasmatice. Jonciunile nu sunt n totalitate etane. n funcie de tipul de esut,
anumii solvii pot sau nu s o traverseze. Jonciunile nguste se formeaz datorit interaciilor homofile
dintre lanuri proteice paralele, dispuse pe ntreaga circumferin a celulei. Fiecare lan al acestei reele este
format din CAM cu mar fi ocludina, care se leag de proteine similare de pe celule adiacente, sigilnd asfel
spaiul dintre membranele plasmatice. Numeroasele posibiliti de combinare ale acestor molecule pot explica
diferenele de permeabilitate ale jonciunilor nguste din diferite esuturi.

40

Biologie Celulara

Microvili

Jonctiune
stransa

Membrana
apicala

Jonctiune
stransa
Spatiu
intercelular
Conexiune dintre
proteine ale unor
celule invecinate

Cale
transcelulara

Cale
paracelulara

Membrana
bazolaterala

Sir de
proteine
jonctionale

Figura. Schema unei jonciuni strnse (A) si a rolului i poziiei jonciunilor stranse n epitelii (B).

2.Jonciuniledeancorareidesmozomii
Sunt localizate aproape de suprafaa apical, imediat sub jonciunile dense.
Jonciunile de ancorare sau aderente conecteaz membranele laterale ale celulelor epiteliale adiacente i
permit grupurilor de celule s acioneze ca uniti structurale solide n asociere cu elementele citoscheletului (la
nivelul anumitor celule). La nivelul jonciunilor de aderare exist situsuri de legare pentru filamentele de actin.
Desmozomii au situsuri de legare pentru filamentele intermediare (de exemplu keratina din celulele epiteliale).
Cele dou tipuri de jonciuni sunt conectate cu citoscheletul i formeaz centura de aderen circumfereniar n
stratul epitelial, funcionnd ca un cablu de tensiune care controleaz forma celulei..
Centura circumferentiara
Actina F

Keratina
Proteine adaptoare

CITOSOL
Cadherine

CITOSOL

Jonctiuni
aderente

Desmozomi

Fig. 3.18. Alctuirea jonciunilor de ancorare i a desmozomilor

Principalele molecule CAM din jonciunile de ancorare i dezmozomi aparin familiei caderinelor.
41

Celulele epiteliale i de alte tipuri, precum celule musculare netede, sunt legate strns mpreun prin
intermediul desmozomilor punctiformi. Hemidesmozomii, poziionai de obicei pe faa bazal a celulelor
epiteliale, ancoreaz epiteliul la componentele matricei extracelulare adiacente. Forma i rigiditatea celulei
dar i a ntregului epiteliu sunt conferite de mnunchiuri de filamente intermediare, dispuse paralel cu
suprafaa celular sau care strpung i interconecteaz desmozomii punctiformi i hemidesmozomii. Aceste
jonciuni sunt foarte importante n meninerea integritii epiteliului pielii.

3.Jonciuniledecomunicare(gap)
n unele regiuni intercelulare membranele plasmatice sunt conectate punctiform prin canale de
comunicare realizate prin cuplarea fizic a mai multor celule. Prin aceste canale pot trece ioni i molecule
mici de tipul metaboliilor cu mai puin de 1000 Da (glucide, aminoacizi, nucleotide) (Fig. 3.19). Prin aceste
jonciuni nu trec proteine sau acizi nucleici. Jonciunile de acest tip sunt importante pentru comunicarea
intercelular.
Celulele din esuturi excitabile, cum este muchiul cardiac, sunt cuplate printr-un flux rapid de ioni
care traverseaz jonciunile de comunicare i care asigur un rspuns rapid i sincron la stimuli. Jonciunile
de comunicare sunt eseniale i pentru hrnirea celulelor situate la distan de vasele de snge cum sunt cele
din cristalin i din os. De asemenea, canalele de comunicare sunt importante n dezvoltare i difereniere.
Capacitatea anumitor celule de a forma jonciuni de comunicare ntre ele i nu cu alte celule duce la formarea
ansamblurilor celulare cu proprieti fiziologice omogene. Aceast proprietate este important n coordonarea
dezvoltrii embrionului.
Jonciunile de comunicare sunt formate din proteine transmembranare numite conexine (Fig. 3.20).
ase conexine se asambleaz formnd un cilindru (conexon), ca un por apos deschis median. Un astfel de
conexon al unei celule se aliniaz cu un conexon al celulei nvecinate formnd un canal deschis (ON) ntre
cele dou celule. n funcie de anumite semnale intracelulare (determinate, de exemplu, de saturarea celulei
cu ioni sau molecule difuzate) conexonii se pot nchide (stare OFF) ca rezultat al unor modificri
conformaionale ale conexinelor.

Spatiu
extracelular
Membrana
plasmatic
Jonciune de comunicare ntre
celule animale

Canal de
conexiune

Interior
celul 1

Interior
celul 2

42

Biologie Celulara

Fig. 3.19. Rolul jonciunilor de comunicare n facilitarea transportului dintre celule

Membrane celulare adiacente

Canal de 1,5 nm
diametru

Spatiu de
2-4 nm
intre
membrane
Doi conexoni cap la cap
formeaza un canal apos
deschis intre celule
adiacente

Conexon compus
din 6 subunitati

Canal de 1,5 nm
diametru

Homomerice

Heteromerice

Conexine

Conexoni

Homotipice

Heterotipice

Canale intercelulare

Fig. 3.20. Topologia (A) i structura (B) jonctiunilor de comunicare

3.3.4.Adeziuneacelulmatrice
Spaiul extracelular conine un amestec complex de macromolecule care constituie matricea
extracelular. Anumite celule sunt specializate n producerea matricei extracelulare. De exemplu,
fibroblastele sunt implicate n construcia esuturilor conjunctive, condroblastele elaboreaz cartilajul hialin,
osteoblastele produc osul i sinoviocitele sunt responsabile de producerea lichidului sinovial n articulaii.
La animale matricea extracelular susine organizarea celulelor n esuturi i coordoneaz funciile lor
celulare, prin activarea cilor de semnalizare care controleaz creterea celular, proliferarea i expresia
genic. Multe din funciile matricei necesit receptori de adeziune transmembranar, care se leag direct de
componentele complexului matricial i care interacioneaz i cu citoscheletul prin intermediul proteineloradaptor. Principala clas de receptori de adeziune care mediaz adeziunea celul-matrice sunt integrinele. n
anumite esuturi non-epiteliale exist i alte tipuri de molecule care, de asemenea, funcioneaz ca receptori
de adeziune importani. Matricea extracelular este compus dintr-un ansamblu de polizaharide i proteine.
Polizaharidele sunt glicozaminoglicani (GAG) conectai cu o protein pentru a forma proteoglicani.
n structura proteic a matricei se disting urmtoarele componente:
i)
o prima grup, constituit din colagen i elastin, responsabile esenial de structura matricei;
ii)
o a dou grup, mai puin abundent , constituit din fibronectin i laminin. Aceasta este
implicat mai ales n organizarea structurii i adeziunea celul-matrice.
Constituenii se asambleaz ntr-o reea, membrana (lamina) bazal, care poate fi lax, reticulat (ca o
plas), dac e bogat n colagen, sau suficient de dens, cu aspectul unui film continuu, dac este bogat n
glicoproteine de aderen. La animale, epiteliul i majoritatea grupurilor organizate de celule sunt susinute
sau nconjurate de lamina bazal care este organizat diferit n funcie de esut. n epiteliul columnar sau alt
43

tip (epiteliul intestinal, piele), lamina bazal este un fundament pe care st doar o fa a suprafeei celulelor.
n alte tipuri tisulare, cum ar fi muchi sau esutul adipos, lamina bazal nconjoar fiecare celul. Lamina
bazal joac un rol important att n regenerarea esuturilor deteriorate ct i n dezvoltarea embrionar. De
exemplu, lamina bazal ajut aderarea celulelor embrionare n embrionii timpurii (embrioni de patru pn la
opt celule). Astfel, lamina bazal este important pentru:
i)
organizarea celulelor n esuturi;
ii)
procesul de reparare tisular;
iii)
ghidarea migrrii celulelor n timpul formrii esuturilor.
(a) Strat epitelial
LUMEN

Tesut conjunctiv

Lamina bazala

(b) Tesut muscular

Lamina bazala

Celula musculara

Tesut conjunctiv

Membrana plasmatica

Fig. 3.21. Alctuirea esutului epitelial (a) i muscular (b) cu participarea laminei bazale n stabilizarea
celulelor din interiorul esuturilor

44

Biologie Celulara

Nume
Jonctiuni
stranse
Actina
Complexe
junctionale

Jonctiuni
aderente

Filamente
intermediare

Desmozomi
Jonctiuni de
comunicare

Hemidesmozomi

Lamina bazala

Fig. 3.22. Rezumatul tipurilor de jonctiuni

Tabel rezumativ
Jonciunile celulare i rolurile lor
Numele jonciunii
Jonciuni strnse (tight)
Jonciuni aderente (adherens)
Desmozomi
Jonciuni de comunicare (gap)
Hemidesmozomi

Funcia ndeplinit
Unete celulele dintr-un strat epitelial pentru a preveni
difuzia moleculelor i ionilor printre celule
Unete filamentele de actin dntr-o celul cu actina din
celula nvecinat
Unete filamentele intermediare dntr-o celul cu
filamentele intermediare din celula nvecinat
Permite trecerea ionilor hidrosolubili i a moleculelor
mici
Ancoreaz filamentele intermediare ale unei celule cu
lamina bazal

Plasmodesmele
Dei fiecare celul vegetal este ncadrat ntr-o cuc rigid, de natur celulozic (perete celular),
s-a constatat c exist o comunicare permanent ntre celule. Dintr-o celul, prelungiri fine de citoplasm,
numite plasmodesme, se extind prin pori ai peretelui celular, conectndu-se cu citoplasma celulei nvecinate.
Plasmodesmele ofer o cale de deplasare a ionilor, moleculelor mici (zaharuri, aminoacizi) i chiar a
macromeloculelor (ARN, proteine) ntre celulele unui esut vegetal. Moleculele mari traverseaz
plasmodesmele cu ajutorul microfilamentelor de actin. Structural, plasmodesmele sunt mrginite de
membran plasmatic ce prezint astfel o continuitate ntre celulele conectate prin plasmodesme. Studiul
microscopic a mai relevat i continuitatea RE dintre celulele conectate, sub forma unei structuri membranare
derivate din RE i care strbate puntea de citoplasm din plasmodesme (Fig. 3.23)

45

Membrana plasmatic
Perete celular

Nucleu

RE cu
ribozomi

RE
Plasmodesm

Fig. 3.23. Comunicarea celulelor vegetale (delimitate de perete celular rigid) prin plasmodesme
Bibliografie
TARBA, C., Biomembrane, transport i energetic celular, Editura Academiei Romne, Bucureti, 1996, p.
39-46, 72-78, 83-97, 169-210
MIXICH, F., Biologie celular i molecular, Editura Sitech, 1997, p. 66-73, 74-88

46

Biologie Celulara

Capitolul4.Compartimentareacelularitraficulvezicular
1.Introducerenorganizareacelular

elulele eucariote, vegetale i animale se deosebesc esenial de celulele procariote prin faptul ca prezint
o compartimentare, adica exista o serie de zone celulare separate unele de altele prin membrane
lipidice, de aceeasi natura chimica cu membrana celular. n primal rand materialul genetic este delimitat de o
membrana proprie alcatuind astfel nucleul. n afara nucleului, citoplasma adaposteste alte organite celulare
delimitate de membrane lipidice: reticulul endoplasmic, aparatul Golgi, lizozomii, peroxizomii,
mitocondriile, cloroplastele etc.
Compartimentarea celulelor eucariote (asadar, cresterea complexitatii strucurale) a parut ca o necesitate
pentru separarea unor procese biochimice ca urmare a cresterii complexitatii functionale, rolurile indeplinite
de celulele eucariote fiind extrem de diversificate. Fiecarui compartiment distinct ii revine o funcie
particulara, fara de care viaa celulei intregi nu ar fi posibila.
Nucleul adaposteste informatia genetica necesar multiplicarii celulei i bunei desfurari a intregului
metabolism celular, este sediul sintezei ADN i ARN, a coordonarii activitii i mentinerii integritatii tuturor
celorlalte organite celulare.
Citoplasma care inconjura nucleul este compusa din citosol i citoschelet. Ea cuprinde organitele
celulare. Este sediul sintezei proteinelor la nivelul ribozomilor liberi, adaposteste majoritatea reaciilor
metabolismului intermediar. Ocupa mai mult de jumtate din volumul celular.
La nivelul reticulului endoplasmic neted (REN) i rugos (RER), organit ramificat, detinator a mai mult
de jumtate din totalul suprafetelor membranare dntr-o celula, are loc sinteza lipidelor i a multor proteine cu
destinatie membranara i extracelular.
In aparatul Golgi, organizat sub forma unor cisterne membranare, lipidele i proteinele provenite de
la RE sufera procese de maturizare.
Mitocondriile i cloroplastele sunt sediul fosforilarii oxidative generatoare de molecule de ATP.
In lizosomi are loc degradarea resturilor celulare etc.
In afara nucleului i compartimentului citoplasmic, exista un set minim de organite celulare, prezente atat n
celule animale cat i n cele vegetale (RE, aparat Golgi, mitocondrii) n timp ce alte organite sunt specifice
celulelor animale (lizozomi) sau vegetale (vacuole, plastide - dintre care cloroplastele sunt sediul
fotosintezei). La rndul lor, organitele celulare de acelasi tip indeplinesc cam aceleasi roluri la plante sau
animale insa, n funcie de specificul fiecrei celule, abundenta organitelor celulare poate varia. n celule cu
functii metabolice i secretorii intense (asa cum sunt celulele hepatice i pancreatice) suprafaa totala a RE
este de 12-25 de ori mai mare decat suprafaa membranei plasmatice. n tabelele de mai jos sunt prezentate
volumele, respectiv suprafetele totale ale membranelor diferitelor organite celulare din celulele hepatice i
pancreatice.
Tabel 4.1.
Volumele relative ocupate de compartimentele majore din interiorul unei celule hepatice
Compartimentul intracelular
Citosol
Mitocondrii
Reticulul endoplasmic rugos
Reticulul endoplasmic neted i aparatul Golgi
Nucleu
Peroxizomi
Lizozomi
Endozomi

Procentul din volumul

total al celulei (%)
54
22
9
6
6
1
1
1

47

Tabel 4.2.
Suprafetele relative ocupate de membranele compartimentelor majore din interiorul celulelor hepatice
(cu rol metabolic intens) i a celor pancreatice (cu rol secretor)

Tipul membranei
Membrana plasmatic
Membranele RER
Membranele REN
Membranele aparatului Golgi
Membrana mitocondriala extern
Intern
Membrana nucleara (interna)
Membranele lizozomale
Membranele peroxizomale
Membranele endozomale

Procentul din totalitatea membranelor celulare (%)

Celula hepatica
2
35
16
7
7
32
0,2
0,4
0,4
0,4

Celula pancreatica
5
60
<1
10
4
17
0,7
Nedeterminata
Nedeterminata
Nedeterminata

2. Relatiile topologice, genetice i functionale dintre compartimentele

celulare
2.1.Localizareadiferitelorcompartimentenspaiulintracelular
Distributia diverselor compartimente n interiorul celulelor eucariote un este intamplatoare. Ele sunt
fixate n pozitii stabile n raport cu rolurile lor astfel incat comunicarea dintre ele i functionarea lor s fie
optime, necesitand un consum energetic minim. Imobilizarea organitelor celulare este realizata de citoschelet,
un sistem ramificat de microtubuli (polimeri de natura proteic) care ancoreaza diversele structuri
membranare i care, la rndul sau este ancorat prin structuri particulare de membrana plasmatic, Distrugerea
experimentala a citoscheletului cu ajutorul unor medicamente ce impiedica polimerizarea microtubulilor este
urmata de dezintegrarea aparatului Golgi i a reticulului endoplasmic.
Deoarece exista o continuitate structurala intre diverse compartimente (nucleu, reticul endoplasmic,
aparat Golgi, vezicule intracelulare precum lizozomii, endozomii etc), sistemul de membrana intracelulare
este practic distribuit n tot volumul celular. Cu toate acestea, de exemplu aparatul Golgi este cel mai adesea
localizat n apropierea nucleului la fel i reticulul endoplasmic neted. n schimb, reticulul endoplasmic rugos
(cu ribozomi atasati) este dispus predominant spre periferia celulelor, n imediaa vecinatate a membranei
plasmatice n directia carora vor fi exportate lipidele i proteinele de secreie. De altfel, n funcie de
abundenta s (vezi tabelul de mai sus), RE poate fi dispersat n aproape toata masa celulei. n multe celule
vegetale, plastidele detinatoare de substane de rezerva sunt distribuite tot la periferia celulei, la fel i
cloroplastele, care sunt astfel mai aproape de sursa de lumina.

2.2.Subordonareageneticadintrediferitecompartimente
Totalitatea materialului genetic al unei celule se mai numeste genom. n funcie de localizarea
diferitelor parti ale sale, n celulele eucariote distingem un genom nuclear, un genom mitocondrial i unul
cloroplastidial. Intr-adevr, nucleul nu este singurul organit care adaposteste material genetic n celulele
eucariote. Mitocondriile i cloroplastele detin la rndul lor un echipament genetic minimal, cu gene specifice
care codific proteine destinate exclusiv bunei functionari a acestor organite. Mai mult, aceste organite se pot
multiplica oarecum independent de nucleu, acesta fiind i motivul pentru care echipamentul lor genetic este
cel mai conservat (vechi i relativ puin modificat) din totalitatea genomului celular.
Cu toate acestea, genomul detinut de nucleu este cel mai important din totalitatea genomului celular
i el are capacitatea de a subordona activitatea tuturor celorlalte organite celulare, mitocondriile i
cloroplastele neputand functiona complet independent de nucleu.

48

Biologie Celulara

Descoperirea genoamelor mitocondriale i cloroplastidiale a dus, alaturi de alte argumente amintite n

capitolul de teorii i ipoteze ale evolutiei materiei vii, la concluzia ca aceste organite celulare ar avea
origine bacteriana.
Subordonarea mitocondriilor i cloroplastelor fata de informatia genetica existenta n nucleu const
n esenta in:
(A) Subordonarea directa prin codificrea nucleara a unei serii de proteine de importanta vitala pentru
aceste organite. Aceste proteine cu destinatie mitocondriala i cloroplastidiala, sintetizate la nivelul
ribozomilor liberi din citosol, sunt ulterior transportate spre organitele celulare corespunzatoare.
(B) Dependenta acestor organite mai este data indirect, prin utilizarea unor compui chimici a caror
sinteza are loc exclusiv citosolic (de exemplu glicoliza, biosinteza de novo a acizilor grasi, unele
etape ale ureogenezei, biosinteza bazelor purinice i pirimidinice) sau n reticulul endoplasmic
(biosinteza acizilor grasi nesaturati).
La rndul lor mitocondriile sunt detinatoare exclusive ale capacitatii de fosforilare oxidativ (sinteza ATP
cuplata cu respiratia), ale echipamentului enzimatic necesar ciclului acizilor tricarboxilici (ciclul Krebs), a
sintezei corpilor cetonici, a degradarii AG prin -oxidarea lor etc. n cloroplaste, organite particulare
plantelor, are loc procesul fotosintetic care const n fotoliza apei, fosforilarea ADP la ATP i fixarea
(reducerea) CO2 n glucide, lipide, aminoacizi etc. Detinand exclusivitatea acestor procese biochimice,
practic, mitocondriile (la toate celulele eucariote) i cloroplastele (la organismele vegetale) supun la rndul
lor viaa intregii celule eucariote.
Celelalte componente ale sistemului de endomembrane (RE, aparatul Golgi, lizozomii, peroxizomii,
endozomii etc) nu detin informatie genetica, ele fiind extensii, ramificatii, prelungiri sau fragmente ale unei
vaste retele de membrane ce delimiteaza spatii, canale, cisterne, vezicule ce adapostesc proteine proaspat
sintetizate, enzime specifice, diversi produsi metabolici de sinteza sau de degradare (glucide, lipide,
aminoacizi).

2.3.Legaturilestructuraleifunctionaledintrecompartimente
Membranele care delimiteaza celula i organitele celulare au n esenta aceeasi compoziie chimica,
fosfolipidic, formata din 2 straturi (bistratificata) (vezi capitolul 3). n aceasta membrana lipidic sunt
incorporate proteine cu functii structurale (de fixare a citoscheletului de exemplu), de comunicare (proteinele
care formeaza receptorii celulari) sau enzimatice (transportori, catalizatori a unor reacii biochimice). Pentru
membrana care delimiteaza celula se foloseste denumirea de membrana plasmatic. Membranele
compartimentelor intracelulare primesc denumirile organitelor pe care le delimiteaza: membrana nucleara,
membrana RE, membrana aparatului Golgi, membrana lizozomala, etc. Ele sunt compatibile chimic, astfel
ca se pot recunoaste i pot fuziona.
Deoarece exista o continuitate structurala i functionala intre aceste membrane intracelulare, totalitatea
lor a fost denumita sistemul de endomembrane. Din sistemul de endomembrane fac parte:
- membrana (anvelopa) nucleara,
- membranele RER i REN,
- membrana aparatului Golgi,
- membranele lizozomale i endozomale.
Intre aceste membrane exista o continuitate structurala i functionala, comunicarea dintre ele fiind
directa sau indirecta, realizata prin intermediul veziculelor membranare desprinse din unele organite (de ex,
din aparatul Golgi) i capabile de fuzionare cu alte membrane.
ATENTIE ! Mitocondriile i cloroplastele (plastidele) sunt oarecum diferite de organitele de mai sus,
fiind structuri de sine statatoare, de origine diferita (posibil bacteriana) i delimitate de cate 2 membrane
bistratificate. Membrana lor extern este foarte asemanatoare sistemului de endomembrane i asadar,
compatibila cu acestea. Membranele interne mitocondriale i plastidiale sunt n schimb diferite, cu
compoziie asemanatoare cu a membranelor bacteriene (vezi Fig. 4.1.).

49

Anvelopa nucleara cu
pori nucleari

ADN

Ribozomi
atasati de
membran

RE cu
ribozomi

Celula procariota
straveche

Celula
procariota

Internalizarea membranei
celulare

Internalizarea
procariotului odata cu o
parte a membranei

Celula eucariota
straveche

Mitocondria cu membrana
interna (de origine
procariota) si externa
derivata din celula eucariota
gazda

Fig. 4.1. Relatiile istorice (filogenetice) dintre diferitele organite delimitate de membrana proprie.
Odata importate o serie de substane strict necesare sintezei lipidelor, proteinelor i glucidelor, este
nevoie de o coordonare exacta a distributiei lor intre compartimente.
50

Biologie Celulara

Sinteza lipidelor are loc la nivelul RE. Ele sunt produse i se incorporeaza n membrana RE dupa care
veziculele care se desprind prin inmugurire din aceasta structura fuzioneaza cu toate celelalte structuri
membranare compatibile (membrana plasmatic, aparat Golgi, anvelopa nucleara), membranele externe ale
mitocondriilor i plastidelor.
Sinteza proteinelor cu plecare de la aminoacizi (fie sintetizati de novo, fie importati din mediul extracelular) are
loc la nivelul ribozomilor liber sau atasati de RE. n funcie de destinatia lor, proteinele poarta secvene de
recunoastere (secvene-semnal) care permite transportul directionat al acestora spre compartimentul de destinatie. n
funcie de natura spatiala i chimica, transportul proteinelor intre diferite compartimente poate fi de 3 feluri:
A. Transport de poarta, cnd traficul proteinelor se realizeaz intre spatii topologic asemanatoare, prin
intermediul unor porti selective (numite pori). Acest transport este continuu i are loc numai intre
nucleu i citosol.
B. Transport transmembranar, cnd traficul de proteine se realizeaz intre spatii topologic diferite,
izolate. Este mediat de proteine translocatoare inserati n membrana i care recunosc i transporta specific
o proteina sau alta. Acesti translocatori faciliteaza transferul proteinelor de o parte pe alta a membranei
prin desfacerea (despachetarea) lor. Proteinele trec prntr-o miscare de serpuire n spaiul de destinatie.
Transportul transmembranar are loc n cazul proteinelor care trec n din citosol n lumenul RE i cele care
trec din spaiul citosolic n spaiul mitocondrial/plastidial.
C. Transport vezicular, cnd traficul proteinelor se face ca o incarcatura tip "cargo" n interiorul unor
vezicule membranare. Proteinele acumulate intr-un spatiu sunt invelite de o membrana lipidic,
incarcatura care se desprinde de compartimentul respectiv, circula prin citosol apoi la destinatie
fuzioneaza cu compartimentul-tinta. Acest transfer se face intre spatii topologic echivalente i nu necesita
prezenta translocatorilor. Proteinele sunt apoi descarcate n spaiul de destinatie. Acest transport are loc
intre RE i aparatul Golgi, intre aparatul Golgi i membrana plasmatic.
Diferitele tipuri de transport intre compartimentele celulare sunt schematizate n figura 4.2.

CITOSOL
NUCLEU

PEROXIZOMI

MITOCONDRII

PLASTIDE

RETICULUL ENDOPLASMIC
AP. GOLGI
ENDOLIZOZOM

VEZICULE
SECRETOARE

LIZOZOM
ENDOZOM

SUPRAFATA CELULEI / MEMBRANA PLASMATICA

Fig. 4.2. Traficul celular al proteinelor: traficul de poarta (sageata hasurata), transmembranar (sageti
negre) i vezicular (sageti albe)

51

In toate variantele de transport, proteinele trebuie s prezinte un pasaport, adica o secvena de

aminoacizi care este recunoscuta de receptorii din porii nucleari, membranele RE sau mitocondriale sau de
receptorii din vezicule. Aceste secvene se numesc secvene-semnal iar dupa ce si-au indeplinit rolul de
semnal, vor fi clivate i indepartate astfe ca proteina matura sa-si indeplineasca funcia.

3.Nucleulitransportulnuclear.
Materialul genetic sub forma ADN este dispus n mod caracteristic n celula eucariot, predominant
la nivelul nucleului. Continutul celular (nucleoplasma) este topologic echivalenta cu citoplasma, existand cai
directe de comunicare intre aceste compartimente. Nucleoplasma este inconjurata de anvelopa nucleara, un
invelis membranar dublu. Se numeste asadar, anvelopa deoarece are un invelis extern (membrana nucleara
extern) i unul intern (membrana nucleara interna), intre care se afla un spatiu perinuclear (Fig. 4.3.).
Curios, spaiul perinuclear se continua cu lumenul reticulului endoplasmic deoarece memrana nucleara
extern se ramifica inspre citoplasma sub forma unor canale labirintice care constituie ansamblul reticulului
endoplasmic. Mai mult, la fel ca i membrana RE, membrana nucleara extern poate fi pigmentata cu
ribozomi atasati.
In compartimentul nuclear au loc o serie de procese de
importanta deosebita pentru viaa celulei. Acestea sunt:
replicarea ADN (sinteza ADN) n cursul diviziunii celulare,
sinteza ARN i formarea ribozomilor, ultimele dou procese
fiind eseniale n sinteza proteinelor care are loc n citosol. Apare
asadar, necesitatea ca intre spaiul nuclear i citosol s existe o
comunicare (permanenta practic) n care ARN i robozomii
tineri sunt exportati n citosol iar proteinele, nucleozidele i alte
molecule necesare asamblarii i functionarii genomului nuclear
s fie importante din citosol n spaiul nuclear. Asa cum am
amintit anterior, transportul moleculelor intre nucleu i citosol se
face prin porti sau pori nucleari - este un transport de poarta.
Fig. 4.3. Reprezentarea relatiei topologice dintre
anvelopa nucleara, spaiul perinuclear i nucleoplasmei cu RE i citosolul
Structuraporilornucleari
Porii nucleari sunt complexe proteice care perforeaza anvelopa nucleara, astfel ca, vazuta la
microscopul electronic, anvelopa nucleara apare ca o sita, cu nenumrate orificii structurate (Fig. 4.4. A).
Intr-adevr, porii nucleari nu sunt niste simple orificii, ci sunt ansambluri de proteine care formeaza o poarta
cu mai multe grade de permeabilitate. Proteinele porilor nucleari pot fi de multe zeci de feluri (50) iar n
totalitatea lor sunt grupate n clasa nucleoporinelor.
Un por nuclear are, n ansamblu, diametrul de 50 nm, cu un canal apos dispus central dar al carui
orificiu este de doar 9 nm. Canalul apos este marginit de nucleoporine anulare, acestea la rndul lor
sprijinindu-se anterior, spre membrana nucleara, de nucleoporine columnare. Proteinele columnare i intreg
complexul porului este ancorat de membrana nucleara de proteine lumenale. Proteinele lumenale traverseaz
membrana nucleara asemanator unor capse. n sfarsit, de o parte i alta a anvelopei nucleare, porul nuclear
prezint proteinele inelare dispuse circular, i de la care protrud fibrile, atat pe fata citosolic cat i pe cea
nucleara. Pe fata nucleara, fibrilele (nucleare) converg formand un ansambul asemanator unui cos (Fig. 4.4.
B, C).

52

Biologie Celulara

A
B

Fig. 4.4. Microelectronofotografie a anvelopei nucleare (A), reprezentarea n spatiu a complexului poral (B)
i categoriile de molecule care pot traversa porul prin difuzie sau prin transport activ (C)
La nivelul complexului poral, membrana nucleara este continua, adica membrana nucleara extern se
continua cu cea interna.
Diametrul foarte redus al canalului apos permite circulatia pasiva a moleculelor mici, inclusiv a
mileculelor lipidice mici, a peptidelor,si altor compui cu diametrul redus. n schimb majoritatea proteinelor,
unele avand mase moleculare de peste 100 kDa se gasesc n imposibilitatea de a difuza liber prin acesti pori.
Ca urmare a selectivitatii porilor nucleari, citosolul i spaiul intranuclear posed echipamente diferite de
proteine. Totusi, procesele de replicare, transcriptie, asamblarea acizilor nucleici care necesita diverse
proteine de stabilitate, formarea complexelor ribozomice (nucleoproteice) sunt posibile datorita trecerii
proteinelor mari sintetizate n citosol sau a ARN i robozomilor formati n nucleu, prin porii nucleari, n
ambele directii.
Transportulnuclearalmacromoleculelor

Secveneledelocalizarenuclearanecesarepentruimportuinuclear
Extragerea experimentala a proteinelor nucleare (specifice nucleului) i reintroducerea lor n citosol,
a pus n evidenta reacumularea lor n nucleu. Acest fapt indica prezenta la aceste proteine a unor secvenesemnal de localizare nucleara (NLS Nuclear localization signals). n majoritatea proteinelor nucleare
aceste secvene (1 sau 2) constau ntr-o succesiune de aminoacizi incarcati pozitiv precum lizina i arginina,
secvena exacta variind de la o proteina la alta. Prin atasarea unei astfel de secvene de localizare nucleara de
particule de aur de diferite dimensiuni a permis vizualizarea procesului de import nuclear. S-a constatat de
exemplu ca porul nuclear nu este o structura rigida ci se poate dilata pn la 26 nm pentru a permite trecerea
moleculelor mari. Structura-canal din miezul porului pare s functioneze ca o diafragma, permitand dilatarea
exact pn la diametrul necesar pentru transport. Aceasta modalitate unic de transport (de poart) este unic
pentru nucleu i este complet diferita de transportul proteinelor prin membrana sau prin vezicule.
53

Receptoriideimportnuclearrecunoscnucleoporinele
Prezenta NLS este necesar dar nu suficienta pentru asigurarea importului proteinei n nucleu. n
citosol exista o serie de proteine care au rol de ghizi, adica sunt receptori ai importului nuclear (NIR).
Acestea se leag de proteinele cu destinatie nucleara pe baza NLS i le aduc n apropierea porilor. Asa cum
am aratat anterior, porii prezint fibrile citosolice, care sunt prelungiri proteice formate din secvene FGrepetate de aminoacizi (Fenilalanina-Glicina). Aceste fibrile recunosc i leag receptorii de import nuclear.
Odata adusa proteina la nivelul porului, aceasta nu este direct importata ci sufera o serie de modificri
(legare, disociere, re-legare de secvenele FG ale fibrilelor ) n urma carora se scurge practic prin porul
nuclear. n interiorul nucleului, secvenele NLS i proteinele NIR se cliveaza respectiv, disociaza de proteina
nucleara. NIR sunt transportate din nou n citosol unde i vor relua funcia.
Fenomenul este ns mai complicat, celula a dezvoltat i alte molecule cu rol n importul nuclear, i
anume molecule adaptoare, care se intercaleaz n unele cazuri, ntre NIR i NLS de pe proteina nuclear.
Exportulnuclearreversulimportuluinuclear
Moleculele produse n interiorul nucleului precum ARN mesager i subunitile ribozomale, trebuie
s ajung n citosol pentru a intra n procesul de sinteza proteic. Aceste molecule prezint la rndul lor
secvene-semnal de export nuclear, secvene recunoscute i legate specific de receptorii de export nuclear
(NER). La rndul lor, acesti receptori recunosc fibrilele de pe fata intern a porilor i faciliteaza transferul
moleculelor cu destinatie citosolic.
S-a constatat ca NIR i NER sunt nrudite genetic, fiind codificte de gene care codific aceeasi clasa
de receptori nucleari, clasa carioferinelor (karyos, gr. nucleu; forensis, gr. transport).
ActivareatransportuluinuclearrolulRanGTPazelor
Transportul directionat al proteinelor n i dinspre nucleu este un proces activ, cu consum energetic.
Deoarece este un transport de poarta ci nu unul transmembranar (care ar fi decurs prin intermediul unui
translocator ce ar cupla hidroliza ATP cu transportul proteinelor), energizarea trecerii proteinelor prin pori nu
se face la nivelul porilor. El se realizeaz prin intermediul legarii NIR i NER de proteine Ran care
hidrolizeaz GTP (Ran GTPaze). Proteinele Ran pot adopta dou stari conformaionale n funcie de natura
chimica a moleculei macroergice GTP sau GDP. Hidroliza GTP din Ran este stimulata n prezenta unei
proteine reglatoare, numita proteina de activare a GTPazei (GAP GTPase activating protein) cu
localizare exclusiv citosolic. Legarea GTP n locul GDP la Ran este activata n prezenta unei proteine
exclusiv nucleare: factorul de schimb al guaninei (GEF Guanine exchange factor). Astfel Ran-GTP se
schimba n Ran-GDP n citosol i invers, n nucleu. De aici rezult localizarea predominanta a Ran-GDP n
citosol, repectiv a Ran-GTP n nucleu.
Acest gradient al celor dou stari conformaionale Ran este cea care direcioneaz transportul nuclear.
A. In cazul importului nuclear, NIR se leag de NLS a proteinei destinate nucleului. Recunoaste
secvenele FG-repetate ale fibrilelor i finalmente ajunge n spaiul nuclear. n nucleu, NIR
ntlneste Ran-GTP, se disociaz de proteina nuclear i leag Ran-GTP. Complexul NIR-RanGTP este exportat n citosol. n citosol Ran-GTP este imediat recunoscut de o proteina de legare la
Ran (Ran-binding protein) i desprins de pe NIR. Ran-GTP liber este transformat de proteina RanGAP n Ran-GDP. Ran-GDP este ulterior transportat n nucleu pentru a fi transformata n Ran-GTP
n prezenta Ran-GEF.
B. In cazul exportului nuclear, lucrurile decurg similar. De aceasta data ns NER (receptorul de
export nuclear) se leag de molecula de export, n prezenta Ran-GTP. Acest complex este legat
de secvenele FG-repetate ale fetei nucleare a complexului poral. Odata ajuns n citosol, molecula
elibereaza NERsi Ran-GTP. n prezenta acelorasi proteine de legare i a proteinei Ran-GAP,
molecula de Ran-GTP hidrolizeaz GTP la GDP, devenind Ran-GDP.

54

Biologie Celulara

Pentru a intelege acest mecanism, schema activrii transportului direcionat de la nivelul nucleului este
prezentat mai jos (Fig. 4.5.)

Fig. 4.5. Schema prin care hidroliza GTP asigur direcionalitatea transportului nuclear.
Fenomenul de transport nuclear const ntr-o multime de procese reglatoare, de marire sau
micsorarea numrului de pori (in funcie de necesar), de sinteza sau degradare a diferitelor molecule
receptoare, a proteinelor lor reglatoare. Exista mecanisme subtile de reglare a numrului, cantitatii i calitatii
proteinelor necesare nucleului n anumite momente. Unele proteine regleaz expresia genelor iar transportul
lor este permanent modulat: uneori prezena lor n nucleu este necesar, alteori nu. Aceste proteine au
localizare citosolic i ele sunt activate n momentul n care celula primeste semnale din exterior.
Mecanismul de activare i transport n nucleu a proteinelor reglatoare a expresiei genelor sunt subiectele
domeniului de semnalizare celular.
Rolul anvelopei nucleare nu este numai n asigurarea unui mediu intim (izolator) materialului genetic
sau n facilitarea transportului diferitelor molecule n i dinspre nucleu, dar i n iniierea, realizarea i
finalizarea optim a procesului de diviziune celular. Aceste aspecte vor fi discutate n cursul destinat
diviziunii celulare.

55

4. Reticululendoplasmic
CITOSOL
NUCLEU

PEROXIZOMI

MITOCONDRII

PLASTIDE

RETICUL ENDOPLASMIC
AP. GOLGI
ENDOLIZOZOM

VEZICULE
SECRETOARE

LIZOZOM
ENDOZOM

SUPRAFATA CELULEI / MEMBRANA PLASMATICA

Reticulul endoplasmic (RE) este un compartimend de
endomembrane organizat sub forma unei retele tubulare
(cilindrice sau aplatizate ca niste cisterne), raspandita
aproape n toata masa celulei eucariote. Membranele RE pot
atinge pn la 50-60 % din totalul membranelor celulare n
vreme ce spaiul intern al RE poate atinge 10% din volumul
total al celulei.
Din punct de vedere al compoziiei chimice,
membranele RE sunt similare cu cele ale anvelopei
nucleare (cu care exista o continuitate structurala), a
veziculelor secretoare, a aparatului Golgi, a lizozomilor i
endozomilor. Spaiul intern al RE se mai numeste lumenul
RE sau spaiul cisternal al RE.
Rolul central al RE consta in:
- sinteza majoritatii lipidelor celulare;
- sinteza proteinelor de secreie (destinate spaiului
extracelular), a proteinelor transmembranare a
majoritatii organitelor celulare i membranei
plasmatice, i n preluarea unor proteine
hidrosolubile sintetizate n citosol i destinate
spatiilor echivalente (lumenului RE, aparatui
Golgi, lizozomilor).

Un al rol al RE este de rezervor de ioni Ca2+, care sunt capturati sau eliberati ca raspuns la anumite semnale
(chimice, electrice, mecanice) din mediul extern.

56

Biologie Celulara

In funcie de prezenta sau absenta ribozomilor de pe suprafaa sa, RE poate fi de dou feluri: RE rugos (RER), cu
ribozomi atasati de suprafaa citosolic, i RE neted (REN), lipsit de ribozomi.

4.1.Ribozomii
Ribozomii sunt structuri ribonucleoproteice cu rol n biosinteza proteinelor. Ribozomii se ataeaz de
moleculele de ARN mesager (ARNm) produs n nucleu i initiaza sinteza proteinelor, fenomen numit translatie.
Din punct de vedere istoric, ribozomii au fost evideniati pentru intaia oara de un roman, George Emil Palade (n.
1912), profesor la Yale University. El a ramas singurul om de stiinta de origine romana care, n 1974, a fost laureat
cu Premiul Nobel n Medicina i Fiziologie, pentru aceasta descoperire.
Ribozomii sunt prezenti atat la bacterii (procariote) cat i la eucariote.
La bacterii, ribozomii sunt atasati de fata citoplasmica a membranei celulare.
La eucariote o parte din ribozomi sunt suspendati n fluidul citosolic, liberi sau asociati de-a lungul unei
singure molecule de ARNm, aparand ca un sirag de margele insiruite pe o sfoara (=poliribozomi) . O alta parte din
ribozomi se gasesc atasati de membrana RE unde indeplinesc practic aceeasi funcie de sinteza a proteinelor.
Factorul care determina starea libera sau atasata a unui ribozom este existenta unei secvene de nucleotide
(respectiv peptidice) care s indice necesitatea directionarii n RE a proteinei. Cu alte cuvinte, prezenta n
peptidul nascent al unei secvene-semnal de localizare n RE. Ribozomii liberi sunt identici cu cei atasati, doar
prezenta acestei secvene-semnal RE determina migrarea ribozomilor pe RE. Odata ce proteina destinata RE este
sintetizat, ribozomii se desprind de membrana RE i isi reiau locurile n citosol. n absenta secvene-semnal RE,
ribozomii raman liberi n citosol i intervin n sintetza proteinelor cu localizare exclusiv citosolic (cum ar fi de
exemplu enzimele implicate n reacii biochimice din citosol). n majoritatea lor, proteinele citosolice sunt
hidrosolubile.
Ribozomii sunt formati din dou subuniti, una mare i alta mica. Subunitile mare i mica au compoziie
ribonucleoproteic diferita la eucariote i la procariote. Aceasta diferenta a permis catalogarea ribozomilor n
ribozomi de tip eucariot i ribozomi de tip procariot. n schema de mai jos sunt redate principalele caractere
structurale ale celor dou tipuri de ribozomi.
Ribozomul de tip procariot
- estre mai mic decat cel eucariot, avand greutatea
totala de 70 S (unitati de sedimentare Svedberg);
- subunitatea mare are 50 S si contine 2 tipuri de
ARN ribozomal (ARNr), de 5S si de 23S;
- subunitatea mica are 30 S si contine ARNr de 16S.

Procariote
70 S
Mr 2.7 x 106

Ribozomul de tip eucariot

- are greutatea totala de 80 S;
- subunitatea mare are 60 S si contine un amestec de
3 tipuri de ARNr, de 5S, 28S si 5,8S;
- subunitatea mica are 40 S si contine ARNr de 18S.

Eucariote

50 S

60 S

30 S

40 S

50 S

30 S

Mr 1.8 x 106

Mr 0.9 x 106

5S ARNr
16S ARNr
(120 nte)
(1,540 nte)
23S ARNr
(3,200 nte) 21 proteine
36 proteine

60 S
Mr 2.8 x 106
5S ARNr
(120 nte)
28S ARNr
(4,700 nte)
5.8S ARNr
(160 nte)
~49 proteine

80 S
Mr 4.2 x 106

40 S
Mr 1.4 x 106
18S ARNr
(1900 nte)
~32 proteine

57

O unitate de sedimentare Svedberg exprima viteza de sedimentare a unei particule i este echivalenta cu un coeficient de
sedimentare de 10-13 secunde (S = 10-13 s). Subunitile mici ale ribozomilor procarioti i eucarioti au coeficienti de
sedimentare de 30x10-13 s respectiv 40 x 10-13 s, ceea ce corespunde la 30 respectiv 40 unitati S.

In celula eucariot, n afara ribozomilor de 80S (de tip eucariot) localizati citosolic, mai exista i
ribozomi de 70S (de tip procariot) cu localizare n matricea mitocondriilor i cloroplastelelor. Acesti ribozomi
intervin n translaia proteinelor n interiorul spaiului mitocondrial i plastidial, proteine codificte de
genomul celor dou organite.
O celula eucariot tipica posed milioane de ribozomi. Subunitile ribozomale sunt asamblate n
nucleu, ntr-o regiune speciala numita nucleol. Aici, ARNr, sintetizat pe baza informaiei genetice din ADN,
este mpachetat impreuna cu proteinele ribozomale care sunt importate n nucleu dupa ce au fost la rndul lor
sintetizate n citosol. Subunitile ribozomale sunt apoi exportate n citosol printr-un mecanism de transport
de poarta care a fost discutat n cursul anterior.
Legarea subunitilor ribozomale de ARN este posibila deoarece contin 4 situsuri specifice de legare a
acestor molecule de ARN:
- un situs specific de legare a ARNm, purttor de informatie genetica sub forma anticodonilor;
- trei situsuri de legare a ARN de transfer (situsurile A, P, E) care aduce aminoacidul la locul de
sinteza a proteine;
La situsul A se ataeaz aminoacil-ARNt. La situsul P, gruparea aminoacil de pe ARNt proaspat atasat se
leag de aminoacilul lantului polipeptidic n crestere. La situsul E, ARNt lipsit de aminoacil este eliberat. Pe
masura ce lantul de ARNm este citit de situsul de legare a ARNm, ribozomul se deplaseaz de-a lungul
acestuia iar n acelasi timp lantul polipeptidic este sintetizat.

Subunitatea mare

Situsurile A, P, E

Subunitatea mic

ARNm

Situsul de legare al ARNm

AminoacilARNt

ARNt

Fig. 4.6. Situsurile de legare ale ARN din ribozomi i modul n care are loc translaia ARNm n proteine
la nivelul subunitilor ribozomale.

4.2.Rolulreticululendoplasmicrugos
Am vzut anterior ca la nivelul ribozomilor are loc sinteza lanturilor polipeptidice prin translaia
(traducerea) informaiei continute de ARNm. n absenta unei secvene-semnal de RE de pe polipeptidul
nascent (in stare de nastere), ribozomii se localizeaz citosolic iar produsul de sinteza sunt proteine cu
localizare citosolic n principal. Daca secvena-semnal de RE este citita, ribozomii se orienteaza spre RE,
atasandu-se de acesta. S-a constatat c ribozomii nu se ataeaz la ntmplare, n orice domeniu al RE, ci
58

Biologie Celulara

dimpotriv exista o preferin a ribozomilor pentru anumite arii ale RE. Aceste zone sun mai bogate n
anumite tipuri de proteine i se deosebesc astfel de ariile RE care rmn netede, nelegnd niciodat
ribozomi. Intr-adevr, analiza biochimic a RER i REN au evideniat diferene de compoziie lipidic i
proteic intre acestea fapt confirmat i de rolurile oarecum diferite pe care le indeplinesc acestea:
- RER are un rol dominant n sinteza proteinelor, prin cuplarea sintezei cu importul acestora n
lumenul RE;
- REN are un rol predominant n biosinteza lipidelor respectiv n preluarea proteinelor din spaiul
lumenal i formarea de vezicule membranare (aadar, rol n transportul vezicular al proteinelor i
lipidelor).
MecanismuldedirectionarealribozomilorspreRER
Membranele RER posed o serie de receptori proteici capabili s lege un ansamblu de peptide numite
particule de recunoastere a secvenei-semnal (SRPs) care la rndul lor se ataeaz specific de secvenasemnal RE din peptitul nascent. Secvena-semnal RE al proteinei n curs de formare const n principal dntro succesiune de 8 aminoacizi hidrofobi (Leu, Ile, Val, Phe etc) iar mediul hidrofob al SRP este capabil s lege
aceasta succesiune de aminoacizi nepolari. Pentru o scurta perioada de timp, translaia este oprita, suficient
ns ca ribozomii s se apropie de RE i s fie atasati prin intermediul receptorilor de SRP.
Ataarea ribozomilor de membrana RE se face n aa fel nct canalul de ieire al peptidului din
subunitatea mare, s fie suprapus cu un canal existent deja n membrana RER. Acest canal este format din
cteva proteine transmembranare ale RE (complexul Sec61) i poate fi asemnat unui por umplut cu mediu
apos. Odat ataat ribozomul, SRP se desprinde de secvena-semnal i de receptorul de SRP. Secvenasemnal RE este cea care, la rndul ei, iniiaz deschiderea porului din membrana RE. Putem vorbi astfel de o
dubl cale de recunoatere a unei proteine cu destinaie n RE; mai nti SRP recunoaste secvena-semnal n
citosol, iar apoi aceast secven este recunoscut de complexul poral din membrana RE.

SRP

SRP se leag de
secvena-semnal RE
i aduce ribozomul
aproape de RE

SRP
este
recunoscut
de
receptoprul SRP din membrana
RE. Ribozomul se ataeaz de
membrana RE. Ulterior SRP se
desprinde i ajunge n citosol

Ribozomul se
orienteaz spre porul
care se deschide
recunoscand secventasemnal RE. Proteina
trece in lumenul RE.

Secventa-semnal RE

Citosol

Por blocat Receptorul SRP

Lumenul RE

Fig. 4.7. Mecanismul atarii ribozomului de membrana RE i iniierea transferului cotranslaional al

proteinelor n lumenul RE.

59

TransferulcotranslaionalalproteinelornlumenulRER
Procesul prin care proteina n stare nascent este transferat n lumenul RE n timp ce este sintetizat
se numete transfer cotranslaional, spre deosebire de transportul proteinelor gata sintetizate n membrana
altor organite celulare (mitocondrii, plastide, peroxizomi), care se numete transfer posttranslaional. Exist
ns cazuri n care unele proteine ajung n lumenul RE prin transfer posttranslaional, proteine care sunt
sintetizate citosolic dar care trebuie s ajung n lumenul RE pentru a suferi anumite ajustri structurale.
In funcie de natura (hidrofil, hidrofob) i de rolul pe care l vor indeplini (proteine de secreie
extracelular, proteine transmembranare, integrale, periferice), proteinele pot fi transferate cotranslational
spre lumenul RE n mod diferit astfel:
- proteinele de natura hidrofil (hidrosolubile) ajung fara modificri n lumenul RE; ele sunt transferate n
intregime i isi vor indeplini functiile ca atare fie n lumenul RE, fie n spatiile echivalente din aparatul Golgi,
lizozomi, endozomi i chiar n spaiul extracelular unde ajung prin transport vezicular;
- proteinele periferice i integrale (care au o parte integrata n membrana lipidic) posed o secvena
hidrofobe care le ancoreaza n bistratul lipidic, fie la capatul C (carboxi-) terminal, fie la cel N (amino-)
terminal;
- proteinele transmembranare i mai ales cele care au regiuni multiple ce traverseaz membrana (loop-uri
transmembranare sau regiuni alfa-helix) posed secvene hidrofobe care permit ancorarea multipla a lor n
bistratul lipidic. n acest caz proteina traverseaz inainte i inapoi membrana pe masur ce este sintetizat, pe
masura ce are loc sinteza secvenelor de integrare n membran.
CITOSOL

COOH

LUMENUL RE
COOH
Proteina lumenal hidrosolubil

H2N

Proteina integral

H2N

H2N

Proteine transmembranare

Fig. 4.8. Proteinele a caror sintez are loc la nivelul RE i care trec cotranslaional fie n ntregime n
lumenul RE (proteine hidrosolubile), fie parial (proteine integrale i transmembranare).
mpachetareaiglicozilareaproteinelorfenomeneimportantedinlumenulRE
Odat ajunse n lumenul RE, unele proteine hidrosolubile destinate spaiilor echivalente ale RE,
aparatului Golgi, lizozomilor etc, sunt asamblate i/sau mpachetate pentru a fi pregatite pentru rolul lor.
mpachetarea proteinelor n lumenul RE are loc sub aciunea unor proteine speciale numite chaperonine.
Chaperoninele sunt complexe proteice care asigura modificarea formei unei proteine cu consum de energie,
ele utilizand GTP n acest scop.
In plus, asimetria distributiei proteinelor la nivelul membranelor este data i de glicozilarea
proteinelor, un proces major care are loc n lumenul RE. Glicozilarea din lumenul RE este nespecific i se
realizeaz sub aciunea enzimelor glicoziltransferaze. O glicozilare specific a proteinelor va avea mai trziu,
n complexul Golgi.
Proteinele glicozilate (glicoproteinele) sunt destinate transportului spre aparatul Golgi, lizozomi,
membran plasmatic i spaiul extracelular. n membrana plasmatic, resturile glicozil emerg spre exteriroul
celulei servind n fenomenul de comunicare i recunoatere celular.
Dac n timpul transferului cotranslaional survin erori, proteinele incorect sintetizate, impachetate sau
asamblate din lumenul RE sunt retranslocate prin acelai complex poral (Sec61) i expulzate n citosol unde sunt
deglicozilate i capturate de proteazomi, organite membranare purttoare ale unui echipament de liza proteic.

60

Biologie Celulara

4.3.Rolulreticululuiendoplasmicneted.Sintezalipidelor.
i n cadrul RE exist o adevarat diviziune a muncii. Dac RER are ca funcie dominant sinteza
i transferul cotranslaional al proteinelor n lumen sau n membrana lipidic, REN posed enzime specifice
care particip la o serie de reacii de biosinteza a lipidelor. n plus, REN este capabil de formare a veziculelor
membranare, prin inmugurirea capetelor sale, vezicule n care proteinele i lipide ajung la alte organite
celulare (transport vezicular).
Deoarece majoritatea substanelor necesare sintezei lipidelor se gasesc n citosol (AG, glicerol,
aminoacizi), o parte consistenta a enzimelor implicate n acest proces se gasesc pe fata citosolic a REN.
Fosfatidilcolina (lecitina) este formata din metaboliti precum 2 AG, glicerol-fosfat i colina n trei etape,
fiecare catalizata de o alta enzima. Prima etap const n transferul AG pe glicerol-fosfat cu formarea acidului
fosfatidic, proces catalizat de acil-transferaza. Acidul fosfatidic este suficient de hidrofob pentru a rmne n
membrana. Ulterior gruparea fosfat este indepartata de o fosfataz, iar colina adaugat de o colinfosfotransferaza. n mod asemanator sunt sintetizate fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina i
fosfatidilinozitolul. Sinteza fosfolipidelor pe fata citosolic a membranei RE nu rezult ntr-o crestere neta a
suprafeteelor membranelor RE deoarece, pe masura ce noi lipide se formeaza, altele sunt transferate pe
diverse cai celorlalte organite celulare. Odata formate, fosfolipidele trebuie distribuite echilibrat intre cele
dou fete. Fosfolipidele noi ajung pe fata lumenala a RE ntr-o mica masura prin prin miscari de flip-flop
spontane ci mai mult ajutate de interventia unor translocaze specializate numite scramblaze. n principiu
diferitele tipuri de fosfolipide sunt egal distribuite pe ambele fete ale bistratului lipidic.
In membrana plasmatic, n afara de scramblaze, exista o serie de translocaze specifice, numite flippaze,
proteine care aparin clasei transportorilor de tip ABC (vezi Capitolul 3). Flippazele realizeaz translocarea
specifica a fosfolipidelor cu grupri aminice libere (fosfatidilserina i fosfatidiletanolamina) din stratul
extracelular spre fata citosolic a membranei celulare. Aceast translocare se face cu consum energetic, prin
hidroliza ATP. n urma activitii flippazelor, membrana plasmatic are un caracter asimetric n privinta
distributiei fosfolipidelor.
Colesterolul i ceramidele sunt de asemenea produse n membrana RE. n ceea ce privesc ceramidele,
odata ajunse n membranele aparatului Gogi, devin precursori ai glicolipidelor i sfingomielinelor. Deoarece
sinteza acestor molecule lipidice este tarzie i are loc exclusiv pe fata lumenala a aparatului Gogi, localizarea
membranara a acestora este predominant pe fata lumenala (noncitosolic).
Transferullipidelorspreorganitecarenuaparinsistemuluideendomembrane
Mitocondriile,
plastidele
i
Membrana
peroxizomii sunt organite care nu aparin
Membrana
mitocondriala externa
sistemului de endomembrane. Cu toate
RE
acestea ele nu sunt capabile sa-si sintetizeze
lipidele necesare constituirii propriilor
membrane. Este astfel necesar o
comunicare intre ele i fabrica de lipide
reprezentat de RE. De asemenea, o mare
parte a proteinelor necesare acestor organite
sunt sintetizate n citosol. n ambele cazuri
este nevoie de mecanisme speciale de
transport. De transportul proteinelor n
aceste organite ne vom ocupa n cursul
Fig. 4.9. Transferul de lipide mediat de proteine de schimb
dedicat mitocondriilor, plastidelor i
fosfolipidic intre membrana RE i membranele organitelor
peroxizomilor.
care nu fac parte din sistemul de endomembrane.
Intr-adevr, exista o modalitate de
transport al lipidelor sintetizate n
membranele RE care nu implica formarea de vezicule membranare ci transferul specific al fosfolipidelor de
ctre proteine de schimb fosfolipidic. Acestea recunosc un anume fosfolipid din membrana generatoare de
fosfolipide, leag compusul i il transporta aleatoriu prin celula, dar odata ce ntlnete o membran a crei
61

compoziie n lipidul respectiv este saraca, proteina de schimb descarca fosfolipidul n acea membrana.
Fosfatidilcolina este transferata n stare intact n vreme ce fosfatidilserina ajuns n mitocondrie poate fi
decarboxilat la fosfatidiletanolamina.
Transferul specific de lipide este facilitat n unele cazuri i de strnsa apropiere spaial dintre mitocondrii i
membrana RE.
MATERIAL SUPLIMENTAR
George E. Palade Autobiography
I was born n November 1912 n Jassy (Iasi), the old capital of Moldavia, the eastern province of
Romania. My education was started n that city and was continued through a baccalaureate
(continental style) at the "Al Hasdeu" Lyceum n Buzau. My father, Emil Palade, was professor of
philosophy and my mother, Constanta Cantemir-Palade, was a teacher. The family environment
explains why I acquired early n life great respect for books, scholars and education.
My father had hoped I was going to study philosophy at the University, like himself, but I preferred to
deal with tangibles and specifics, and - influenced by relatives much closer to my age than he was I entered the School of Medicine of the University of Bucharest (Romania) n 1930.
Early n my student years I developed a strong interest n basic biomedical sciences by listening to,
and speaking with, Francisc Rainer and Andr Boivin, professors of Anatomy and Biochemistry,
respectively. As a result, I started working n the Anatomy laboratory while still n medical school. I
went, nonetheless, through six years of hospital training, mostly n internal medicine, but I did the work for my doctorate thesis n
microscopic anatomy on a rather unusual topic (for an M.D.): the nephron of the cetacean Delphinus delphi. It was an attempt to
understand its structure n terms of the functional adaptation of a mammal to marine life.
I graduated n 1940 and, after a short period as an assistant n internal medicine, I went back to Anatomy, since the discrepancy
between knowledge possessed by, and expected from, the medical practitioners of that time made me rather uneasy.
During the second world war, I served n the medical corps of the Romanian Army, and after the war - encouraged by Grigore Popa,
Rainer's successor - I came to the United States n 1946 for further studies. I worked for a few months n the Biology Laboratory of
Robert Chambers at New York University and, while there, I met Albert Claude who had come to give a seminar on his work n
electron microscopy. I was fascinated by the perspectives opened by his findings and extremely happy when, after a short discussion
following his seminar, he asked me to come to work with him at The Rockefeller Institute for Medical Research n the fall of the same
year. This was truly a timely development, since Chambers was retiring that summer.
At The Rockefeller Institute, Claude was working n the department of Pathology of James Murphy with George Hogeboom and
Walter Schneider as direct collaborators; Keith Porter was n the same department but had developed his own line of research on the
electron microscopy of cultured animal cells. At the beginning, I worked primarily on cell fractionation procedures, and I developed
with Hogeboom and Schneider the "sucrose method" for the homogenization and fractionation of liver tissue. This first "Rockefeller
group" had a rather short existence: Schneider returned to the University of Wisconsin, Hogeboom moved to the National Cancer
Institute, and Claude went back to Belgium n 1949 to assume the directorship of the Jules Bordet Institute. Only Porter and I
remained at The Rockefeller Institute; two years later, upon Murphy's retirement, we became "orphans" and were adopted by Herbert
Gasser then the director of the Institute, since none of us had the rank required to head a laboratory.
Around that time, I started working n electron microscopy with the general aim of developing preparation procedures applicable to
organized tissue. This line of research had been tackled before by a few investigators, Claude included, but there was still ample
room for improvement. Taking advantage of whatever techniques were already available, Porter and I worked out enough
improvements n microtomy and tissue fixation to obtain preparations which, at least for a while, appeared satisfactory and gratifying.
A period of intense activity and great excitement followed since the new layer of biological structure revealed by electron microscopy
proved to be unexpectedly rich and surprisingly uniform for practically all eukaryotic cells. Singly, or n collaboration with others, I did
my share n exploring the newly open territory and, n the process, I defined the fine structure of mitochondria, and described the
small particulate component of the cytoplasm (later called ribosomes); with Porter, I investigated the local differentiations of the
endoplasmic reticulum and with Sanford Palay I worked out the fine structure of chemical synapses. With all this activity, our
laboratory became reasonably well known and started functioning as a training center for biological electron microscopy. The
circumstances that permitted this development were unusually favorable: we didn't have to worry about research funds (since we
were well supported by Herbert Gasser), we had practically complete freedom n selecting our targets, strong competitors who kept
us alert, and excellent collaborators who helped us n maintaining our advance.
In the middle 1950's, I felt that the time was ripe for going back to cell fractionation as a means of defining the chemical composition
and the functional role of the newly discovered subcellular components. The intent was to use electron microscopy for monitoring cell
fractionation. I was starting from structural findings and morphological criteria seemed appropriate for assessing the degree of

62

Biologie Celulara
homogeneity (or heterogeneity) of the cell fractions. Philip Siekevitz joined our laboratory n 1955 and together we showed that
Claude's microsomes were fragments of the endoplasmic reticulum (as postulated by Claude n 1948) and that the ribosomes were
ribonucleoprotein particles. To find out more about the function of the endoplasmic reticulum and of the attached ribosomes, we
started an integrated morphological and biochemical analysis of the secretory process n the guinea pig pancreas.
In 1961, Keith Porter who had been the head of our group since 1953 joined the Biological Laboratories of Harvard University and,
with his departure, the history of the second "Rockefeller group" came to an end. It was during this period that cell biology became a
recognized field of research n biological sciences and that the Journal of Cell Biology and the American Society for Cell Biology were
founded. Our group participated actively n each of these developments.
In the 1960's, I continued the work on the secretory process using n parallel or n succession two different approaches. The first
relied exclusively on cell fractionation, and was developed n collaboration with Philip Siekevitz, Lewis Greene, Colvin Redman, David
Sabatini and Yutaka Tashiro; it led to the characterization of the zymogen granules and to the discovery of the segregation of
secretory products n the cisternal space of the endoplasmic reticulum. The second approach relied primarly on radioautography, and
involved experiments on intact animals or pancreatic slices which were carried out n collaboration with Lucien Caro and especially
James Jamieson. This series of investigations produced a good part of our current ideas on the synthesis and intracellular processing
of proteins for export. A critical review of this line of research is presented n the Nobel Lecture.
In parallel with the work on the secretory process n the pancreatic exocrine cell, I maintained an interest n the structural aspects of
capillary permeability, that goes back to the early 1950's when I found a large population of plasmalemmal vesicles n the endothelial
cells of blood capillaries. Along this line of research, Marilyn Farquhar and I investigated the capillaries of the renal glomeruli and
recognized that, n their case, the basement membrane is the filtration barrier for molecules of 100A diameter or larger; a byproduct
of this work was the definition of junctional complexes n a variety of epithelia. Visceral (fenestrated) capillaries were investigated with
Francesco Clementi, and muscular capillaries with Romaine Bruns and Nicolae and Maia Simionescu.
The capillary work has relied primarily on the use of "probe" molecules of known dimensions detected individually or n mass (after
cytochemical reactions) by electron microscopy. It led to the identification of the passageways followed by large water-soluble
molecules n both types of capillaries and by small molecules n visceral capillaries. The pathway followed by small, watersoluble
molecules n muscular capillaries is still under investigation.
In the middle of the 1960's our laboratory began a series of investigations on membrane biogenesis n eukaryotic cells using as
model objects either the endoplasmic reticulum of mammalian hepatocytes (with P. Siekevitz, Gustav Dallner and Andrea Leskes), or
the thylakoid membranes of a green alga (Chlamydomonas reinhardtii) (With P. Siekevitz, Kenneth Hoober and Itzhak Ohad). These
studies showed that "new" membrane is produced by expansion of "old" preexisting membrane (there is no de novo membrane
assembly), and that new molecules are asynchronously inserted, and randomly distributed throughout the expanding membrane.
Asynchrony also applies to the turnover of membrane proteins n the endoplasmic reticulum as shown by work down with P.
Siekevitz, Tsuneo Omura and Walter Bock.
In 1973, I left the Rockefeller University to join the Yale University Medical School. The main reason for the move was my belief that
the time had come for fruitful interactions between the new discipline of Cell Biology and the traditional fields of interest of medical
schools, namely Pathology and Clinical Medicine. Besides, my work at the Rockefeller University was done: when I left there were at
least five other laboratories working n different sectors of cell biology.
At present I am investigating, together with my collaborators, the interactions which occur among the membranes of the various
compartments of the secertory pathway, namely the endoplasmic reticulum, the Golgi complex, the secretion granules, and the
plasmalemma.
I have been a member of the National Academy of Sciences (U.S.A.) since 1961, and I have received n the past a number of awards
and prizes for my scientific work, among them: the Lasker Award (1966), the Gairdner Special Award (1967), and the Hurwitz Prize shared with Albert Claude and Keith Porter (1970).
Since my high school years I have been interested n history, especially n Roman history, a topic on which I have read rather
extensively. The Latin that goes with this kind of interest proved useful when I had to generate a few terms and names for cell
biology.
I have a daughter, Georgia Palade Van Duzen, and a son Philip Palade from a first marriage with Irina Malaxa, now deceased. n
1970 I married Marilyn Gist Farquhar who is a cell biologist like myself.
From Les Prix Nobel en 1974, Editor Wilhelm Odelberg, [Nobel Foundation], Stockholm, 1975
This autobiography/biography was written at the time of the award and later published n the book series Les
Prix Nobel/Nobel Lectures. The information is sometimes updated with an addendum submitted by the Laureate.

63

5.AparatulGolgi

CITOSOL
NUCLEU

PEROXIZOMI

MITOCONDRII

PLASTIDE

RETICUL ENDOPLASMIC
AP. GOLGI
ENDOLIZOZOM

VEZICULE
SECRETOARE

LIZOZOM
ENDOZOM

SUPRAFATA CELULEI / MEMBRANA PLASMATICA

Aparatul
Golgi
este
un
alt
sistem
endomembranar cu rol central n elaborarea
numeroaselor proteine i trierea lor n funcie de
destinaia final. Se prezint sub forma unei reele sau
saci arcuii care constituie dictiozomii. Fiecare
dictiozom prezint o fa convex, de formare sau cis, n
relaie topografic strns cu RER, i o fa concav, de
maturare, sau faa trans. Ansamblul dictiozomilor unei
celule constituie aparatul sau complexul Golgi (vezi
maginea alturat).

64

Biologie Celulara

5.1.GlicozilareaproteinelornaparatulGolgi
Proteinele concentrate n RER sufer un proces
de glicozilare nespecific. Restul glicozidic specific este
adugat n aparatul Golgi. Transformrile finale ale
glicozilrii depind de destinaia proteinelor. Proteinele
lizozomale sufer doar modificri minore, n timp ce
proteinele de secreie sufer transformri complexe i
variate. Din catena oligozaharidic achiziionat n RER
sunt eliminate unele resturi glucidice, n timp ce altele
sunt adugate ntr-o ordine minuios aleas. Fiecare
adugare sau eliminare furnizeaz un produs care va fi
substratul specific al unei alte enzime care va produce o
alt modificare. Astfel se obin mai multe oligozaharide.
Ele sunt subdivizate n dou tipuri diferite:
i)
Oligozaharide bogate n manoz provenite din
mrirea catenei achiziionat n RE sub aciunea
glucozidazelor i manozidazelor din Golgi.
ii)
Oligozaharidele complexe rezult din eliminarea
glucozei i manozei i nlocuirea lor cu alte
resturi glucidice al cror numr i natur
determin
diversitatea
glicoproteinelor.
Adugarea secvenial a acestor resturi este
determinat de natura enzimelor numite
glicoziltransferaze i localizarea lor n
dictiozomi.
n principiu, rennoirea membranelor golgiene se face
graie transferului de proteine i lipide de la RE.
Transferul se realizeaz pe calea veziculelor netede ctre
partea cea mai apropiat a feei de formare. ntr-o etap
ulterioar, alte vezicule transfer o parte a materialului
ctre regiuni din ce n ce mai apropiate de faa de
maturare.

Fig 4.10. Glicozilarea proteinelor n ap. Golgi (prelucrat

dup Biology, N. A. Campbell, J. B.Reece, William
Barstow, Ed, International Edition, Benjamin Cummings,
6th Edition, 2002)

65

5.2.TriereaproteinelornaparatulGolgi
Trierea proteinelor destinate mediului extracelular sau organitelor intracelulare este una din funciile
aparatului Golgi. Se realizeaz prin veziculele care se formeaz de pe faa de maturare a dictiozomilor.
Aceste vezicule au pe faa lor luminal receptori pentru recunoaterea proteinelor de transportat i pe fata
extern proteine pentru ghidarea ctre destinaia lor (Fig. 4.11)

Fig. 4.11. Eliberarea proteinelor destinate mediului extracelular

(prelucrat dup http://www.cbc.umn.edu/~mwd/courses.html)

5.3.Lizozomii
Lizozomii sunt organite intracelulare care conin enzime care provoac liza (fosfataze, proteaze,
lipaze, glicozidaze, nucleaze, etc.). Acestea sunt hidrolaze acide capabile s degradeze toate tipurile de
macromolecule. Echipamentul enzimatic le permite lizozomilor s asigure numeroase funcii, mai ales
digestia produilor nutritivi ingerai de celul. Prezeni n celule specializate ca macrofagele, ei particip la
aprarea fa de microorganismele strine (Figura 4.19). Impermeabilitatea membranei lizozomale protejeaz
celula fa de propriile sale enzime. Enzimele lizozomale sunt glicozilate i sunt elaborate dup un proces
similar altor glicoproteine. n cursul sintezei lor de ctre ribozomi, secvenele peptidice sunt transferate n
RER unde vor suferi primele glicozilri. Dup migrarea n Golgi cis, ele achiziioneaz specificitatea
glucidic. Mai nti are loc ndeprtarea resturilor terminale, mai ales glucoza, apoi fosforilarea unuia sau mai
multor resturi de manoz prin dou reacii succesive: legarea N-acetilglucozaminei fosfat la C6 din manoz i
eliminarea gruprii N-acetilglucozamin de ctre o fosfodiesteraz.
66

Biologie Celulara

Manoza-6-fosfat astfel format este caracteristic proteinelor lizozomale. Proteinele lizozomale sunt
apoi transferate n compartimentul trans. Graie markerului lor, manoz-6-fosfat, ele se fixeaz la receptorii
situai pe faa luminal a cavitilor golgiene. Una din etapele cheie ale transportului proteinelor lizozomale,
pornind de la Golgi, este separarea de toate celelalte proteine i segregarea lor n vezicule de transport (Fig.
4.12). Astfel veziculele care conin numai enzime lizozomale se detaeaz de aparatul Golgi. Acestea sunt
acoperite de o reea proteic numit clatrin. pH acid al veziculelor de transport al proteinelor lizozomale
favorizeaz separarea proteinelor lizozomale de receptorii lor. O etap de defosforilare a resturilor de manoz
este efectuat adesea pentru prevenirea unei eventuale reasocieri a proteinelor cu receptorii lor. Veziculele de
transport pierd nveliurile de clatrina i vor constitui dou compartimente eseniale: unul va recicla receptorii
liberi i altul, care conine proteinele lizozomale, va fuziona cu lizozomii.

Fig. 4.12. Eliberarea proteinelor destinate mediului extracelular

(prelucrat dup http://www.cbc.umn.edu/~mwd/courses.html)

67

6.Transportulvesicularprinendocitozaiexocitoza
CITOSOL
NUCLEU

PEROXIZOMI

MITOCONDRII

PLASTIDE

RETICUL ENDOPLASMIC
AP. GOLGI
ENDOLIZOZOM

VEZICULE
SECRETOARE

LIZOZOM
ENDOZOM

SUPRAFATA CELULEI / MEMBRANA PLASMATICA

Transportorii transmembranari nu pot vehicula macromolecule de tipul proteinelor, sau particule ca
bacteriile sau resturile celulare. Mecanismele folosite de celula implic formarea de vezicule. Transportul
ctre citoplasma se numete endocitoz, n timp ce transportul de la citoplasm ctre mediul extracelular se
numete exocitoz. n interiorul celulei, un flux de vezicule permite transportul macromoleculelor ntre
diferite compartimente. Pornind de la fiecare organit, mecanisme specifice permit mpachetarea selectiv, n
vezicule, a proteinelor i lipidelor destinate altui compartiment. O ipotez adevrat ar fi c vezicula de
transport posed la suprafaa s dou categorii de proteine: i) una capabil s recunoasc moleculele
transportate de vezicul; ii) cealalt pentru recunoaterea organitului int. Formarea veziculei este asigurat
prin asamblarea clatrinei. Procesul se numete endocitoz dependent de clatrin i presupune organizarea
acestei proteine sub forma unei reele poliedrice.
Endocitoza - desemneaz formarea veziculelor prin includerea membranei plasmatice care nconjoar o
particul sau lichid extracelular. Se disting trei forme de endocitoz care difer prin mrimea veziculelor i
specificitatea pentru moleculele transportate (Fig. 4.14).
(1) Pinocitoza, cu vezicule care nu depesc 150 nm n diametru, nglobeaz lichid extracelular i eventual
molecule mici.
(2) Fagocitoza corespunde mecanismelor de ingestie a microorganismelor i resturilor celulare, graie
veziculelor de mrime mare, peste 250 nm, fagozomii. La vertebrate, ea se limiteaz la celule
specializate cum sunt granulocitele i macrofagele.
(3) Endocitoza mediat de receptori este un proces specific. Intervin proteine membranare care recunosc i
fixeaz liganzii determinai specific. Legturile ligand-receptor induc o regrupare localizat a
complexului i formarea unei invaginri a membranei tapetat pe faa s citoplasmatic cu proteine
fibroase care formeaz o manta n jurul veziculei. Cele mai bine caracterizate dintre proteinele mantalei
sunt clatrina i adaptina (Fig. 4.13). Dup interaciile dintre receptori i adaptine, clatrinele se fixeaz
progresiv la adaptine. Rearanjamentele ntre clatrina i adaptine duc la deformarea membranei i la
68

Biologie Celulara

formarea ulterioar a unei vezicule acoperit de o manta de clatrin (endozom). Vezicula pierde rapid
proteinele din manta i migreaz ctre destinaia sa. Un astfel de mecanism de endocitoz este cunoscut
pentru internalizarea colesterolului sub forma lipoproteinelor de densitate mic (LDL) i pentru
transferul fierului fixat de transferin. Pentru c endocitoza este un proces permanent i induce
dispariia receptorilor de la suprafaa membranei, o reciclare a receptorilor este realizat de vezicule
nencrcate permind compensarea pierderii de componente de pe suprafaa membranar provocat de
endocitoz.

Fig. 4.13 Aspectul electronomicroscopic al mantalei de

clatrin i adaptin (A) respectiv structura de tripod al
clatrinei i contribuia adaptinei la organizarea
mantalei i ataarea ei de vezicule..

Exocitoza
Veziculele de transport conduc ctre membrana plasmatic a celulelor eucariote molecule care, dup
natura lor, sunt fie integrate n membran pentru a asigura rennoirea, fie sunt eliberate n mediul extracelular
(hormoni, enzime, nutrieni, deeuri celulare, etc.). Modificrile structurale i trierea proteinelor nainte de
ieirea lor se efectueaz n aparatul Golgi. Faza de migrare care conduce vezicula ctre membrana, este sub
dependena microfilamentelor citoscheletului i microtubulilor. Membranele se unesc prin fuziunea stratului
extern al veziculei cu stratul intern al membranei plasmatice. O deplasare lateral a proteinelor
intramembranare din zona de fuziune provoac deschiderea veziculei i excreia. Exocitoza necesit prezena
ATP i Ca2+ (Fig. 4.14).
Se disting dou ci de exocitoz:
i) calea constitutiv care funcioneaz n toate celulele. Veziculele de transport duc n mod continuu
moleculele nou sintetizate ctre membrana plasmatic (Fig. 4.13);
ii) calea reglat care funcioneaz n celulele specializate doar ca rspuns la un stimul, de exemplu un
mesager chimic care se fixeaz la suprafaa membranei plasmatice.

69

Fig 4.14. Transport cu ajutorul veziculelor i sintez de proteine

(prelucrat dup http://www.cbc.umn.edu/~mwd/courses.html)

70

Biologie Celulara

7.Mitocondriileicloroplastele.Conservareaenergieicelulare.
CITOSOL
NUCLEU

PEROXIZOMI

MITOCONDRII

PLASTIDE

RETICUL ENDOPLASMIC
AP. GOLGI
ENDOLIZOZOM

VEZICULE
SECRETOARE

LIZOZOM
ENDOZOM

SUPRAFATA CELULEI / MEMBRANA PLASMATICA

n acest subcapitol ne vom focaliza asupra mitocondriei i cloroplastului pentru a studia morfologia,
membranele i rolul lor primordial n producia de ATP necesar derulrii funciilor celulare (furnizor
universal de energie).
Pentru producerea ATP de ctre mitocondrie este necesar o aprovizionare susinut cu metabolii de
tipul glucozei i acizilor grai. Metaboliii vor fi convertii n NADH i FADH2 (plus CO2) n procese precum
glicoliza, -oxidarea acizilor grai i ciclul acizilor tricarboxilici (Krebs), pentru a alimenta n final lanul
respirator i a determina producerea de ATP. Procesele se desfoar la nivelul unor situsuri bine definite i
trecerea metaboliilor de la un situs la altul este asigurat de numeroi transportori. Pe lng rolul de
productor de energie, mitocondria intervine i n sinteza steroizilor, moarte celular programat (apoptoz)
i homeostazia celular a calciului.

7.1.Mitocondriile
Mitocondria a luat probabil natere prin fuziunea (acum cteva miliarde de ani) a dou bacterii, o
bacterie anaerob (gazd) i o protobacterie aerob (simbiont) pentru a da un eucariot primitiv din care au
derivat toate eucariotele actuale. Cuvntul mitocondrie deriv din grecescul mitos, filament, i chondros,
smn datorit aspectului acestui organit n microscopie (optic i electronic). De exemplu, n celulele
care elaboreaz hormoni steroidieni (corticosuprarenale i gonade) mitocondriile sunt filamentoase, n timp
ce n hepatocite (ficat) sunt granulare. Mitocondriile au un diametru de aproximativ 1 m. Celulele conin
numeroase mitocondrii (n hepatocitul de obolan aproximativ 1000). Mitocondriile nu sunt organite statice.
Ele se scindeaz sau pot fuziona, aceste procese explicnd polimorfismul evideniat n aceeai celul (Fig.
4.14).

71

Fig. 4.15 Forma i structura mitocondriei

7.1.1.Organizareamitocondriei
Mitocondria este delimitat de un nveli format din dou membrane: membrana extern i
membrana intern (Fig. 4.15). Membranele sunt foarte diferite n compoziie i funcii. ntre cele dou
membrane exist un spaiu intermembranar al mitocondriei.
Membrana extern este permeabil pentru orice molecul de 5 kDa sau mai puin datorit prezenei
porinelor. De asemenea conine i translocaze, transportori proteici, implicai n importul proteinelor
(exemplu, translocaza membranei externe, TOM).
Membrana intern delimiteaz spaiul matricial i este impermeabil pentru cei mai muli compui.
Membrana intern se pliaz pentru a forma numeroase criste avnd drept consecin creterea suprafeei
totale. Cristele au diferite forme: tubulare, saculare, laminare i triunghiulare, pot coexista n aceeai
mitocondrie i pot evolua n timp. Baza unei criste este adesea constituit dntr-o structur tubular ngust
numit tubul de jonciune al crestei care stabilete o comunicare ntre spaial interior al cristei i spaiul
intermembranar periferic al mitocondriei (Fig. 4.14). Compoziia lipidic a membranei interne este
particular deoarece conine majoritar fosfatidilcolin i cardiolipin. n aceast membran se gsete lanul
respirator al transportorilor de electroni, F1F0-ATP sintetaza i numeroi transportori care asigur pasajul
unor metabolii precum piruvat, acizi grai, ATP, ADP i AMP, compui necesari producerii ATP. Membrana
intern conine i translocaze (Translocaze ale membranei interne, TIM), implicate n importul de proteine.
n spaiul matricial se afl un amestec concentrat de numeroase enzime necesare oxidrii
piruvatului, acizilor grai i ciclului acidului citric (Krebs). De asemenea, conine ADN (genom mitocondrial)
i proteine necesare transcrierii sale i apoi traducerii ARNm n proteine. Proteosinteza mitocondrial este
72

Biologie Celulara

relativ restrns fiind sintetizate aproximativ 13 proteine, marea majoritate a proteinelor mitocondriale (n jur
de 300 proteine diferite) fiind importate din citoplasm.
MATERIAL SUPLIMENTAR
Genomul mitocondrial
ADN mitocondrial este o molecul bicatenar circular. Este un ADN bogat n citozin i guanin, adesea
prezent n mai multe copii n aceeai mitocondrie. La om, mrimea materialului genetic este de 16569 perechi de
baze (pb), secvena nucleotidic fiind cunoscut n totalitate. Codific ARNr, ARNt i cteva proteine. n
mitocondriile umane au fost descoperite 37 de gene din care 22 codific ARNt, 2 codific ARNr i 13 codific
subunitile polipeptidice care intr n constituia proteinelor lanului respirator mitocondrial. Astfel citocrom C
oxidaza (complexul IV din lanul respirator) este constituit din 7 subuniti, din care 3 de origine mitocondrial.
F1F0-ATP-aza are 2 catene polipeptidice de origine mitocondrial. Aproximativ 5-10% din proteinele mitocondriale
sunt sintetizate n mitocondrie. Altele sunt codificte de genomul nuclear i sintetizate n citosol. Astfel, cele dou
genomuri, mitocondrial i nuclear, intervin pentru biosinteza proteinelor mitocondriale active. Codul genetic utilizat
de mitocondrie, n timpul traducerii, este diferit de codul genetic universal (vezi Tabelul de mai jos). Codonul de
iniiere codific pentru N-formil metionina, ca la bacterii.
Tabel cu diferenele dintre codul genetic universal
i codul genetic din mitocondriile mamiferelor i plantelor
Codon
UGA
AGA
AGG
AUA, CUA

Cod universal
Stop
Arg
Ile
Leu

Cod mitocondrial la
mamifere
Trp
Stop
Met
Leu (Trp la drojdii)

Cod mitocondrial la
plante
Stop
Arg
Ile
Leu

7.1.2Biogenezamitocondriiloritransportulproteinelornmitocondrii
ntr-o celul, mitocondriile sunt rennoite adesea pentru a compensa eliminarea mitocondriilor mai
btrne de ctre lizozomi, fenomen cunoscut sub numele de autofagie. Noile mitocondrii deriv din
mitocondriile preexistente prin diviziune. Materialul genetic este duplicat i se sintetizeaz noi constitueni
(proteine i lipide). Numai cteva proteine sunt sintetizate graie informaiei genetice mitocondriale. Restul
sintezei proteice are loc n citosol prin expresia genelor nucleare.
Proteinele mitocondriale sintetizate n citosol sunt produse sub forma de precursori avnd o
secven peptidic adiional, peptid (secven) semnal, situat la extremitatea N-terminal care le permite
recunoaterea i direcionarea ctre mitocondrie. Peptida semnal are 15-30 aminoacizi majoritar hidroxilai.
Proteinele mitocondriale sunt importate n stare nepliat. Ele recunosc receptori situai n membrana
extern i se integreaz n compartimentul de destinae (membrana extern sau intern, spaiul
intermembranar sau matricea) prin transfer posttranslaional. Cu excepia proteinelor membranei externe,
toate celelalte transporturi de proteine consum energie. Integrarea n diferite compartimente mitocondriale se
face la nivelul regiunilor de contact ntre membrana extern i intern, numite situsuri de adeziune. n timpul
transportului, proteinele pierd secvena-semnal datorit interveniei unei semnal peptidaze specifice.
Lipidele sunt importate din RER de ctre mitocondrie graie proteinelor de transfer (proteinele de
schimb fosfolipidic). n mitocondrie este sintetizat numai cardiolipidul numit difosfatidilglicerol care se
obine prin conversia precursorului su, fosfatidilglicerolul.

7.1.3.Funciilemitocondriei
Mitocondriile au mai multe funcii:
9 producerea ATP i NADH;
9 sinteza de hormoni steroizi;
9 turnover-ul monoaminelor (neurotransmitori);
9 sechestrarea Ca2+;
9 moartea celular programat (apoptoz) prin eliberarea citocromului c n citoplasma;
9 furnizarea de energie la nou nscui.
73

7.1.4.ProducereaATPnmitocondrii
Molecula de ATP (adenozin trifosfat) este furnizorul universal de energie
Mitocondriile constituie centrala energetic a celulei. Le putem considera i organitele n care
energia coninut n legturile moleculare ale metaboliilor provenii din alimentele ingerate, este convertit
n ATP. Hidroliza ATP n ADP i Pi (HPO42-) este necesar unui numr mare de procese celulare cum sunt:
9 transportul activ de ioni prin membran (ATP-aze);
9 deplasarea proteinelor motoare i polimerizarea filamentelor de actin;
9 rol esenial n producerea altor nucleotide i n derularea numeroaselor procese metabolice;
9 intervenia n reglarea cascadelor de semnalizare intracelular.
Pentru a estima importana acestor procese se poate spune c n fiecare zi un adult utilizeaz (i
recicleaz) o cantitate de ATP echivalent cu 75% din greutatea sa. Se estimeaz c, n repaus, o treime
aceast energie este utilizat pentru funcionarea pompelor membranare ca Na+-K+ ATP-aza. n repaus,
organele cele mai consumatoare sunt inima i ficatul. Un procent mic din energia celular provine din
glicoliz. Pentru o molecula de glucoz, glicoliza produce 2 molecule de ATP, n citosol, n absena
oxigenului.
n mitocondrii, n prezena oxigenului se obin 36 de molecule de ATP. Energia moleculei de ATP
este coninut n legturile macroergice dintre fosfai i furnizeaz 7,3 kcal/mol. ntr-o celul, proteinele,
glucidele i lipidele, provenite din alimente, particip la producerea de energie n mitocondrii. n citosol, au
loc primele etape ale degradrii lor n uniti glucidice, aminoacizi i acizi grai care stau la originea
producerii unei molecule strategice numit acid piruvic. Ulterior este generat un produs comun prin
transformarea tuturor monomerilor precursori n acetil coenzima A (acetil CoA), o molecul care ocup un rol
central n producerea de energie n mitocondrie. Acetil-CoA este obinut prin dou ci majore:
i) decarboxilarea acidului piruvic n prezena coenzimei A i NAD+ (Niacinamid Adenin Dinucleotid oxidat)
graie, aciunii complexului enzimatic al piruvat dehidrogenazei;
ii) oxidarea acizilor grai dup un ciclu de reacii cunoscut sub numele de ciclul Lynen.
n matricea mitocondrial, acetil-CoA sufer o serie de transformri, prin decarboxilare i
dehidrogenare enzimatic n prezena de coenzime oxido-reductoare, definind ciclul acidului citric sau ciclul
Krebs. Derularea complet a unui ciclu conduce la reducerea coenzimelor NAD+ (Nicotinamid-adenindinucleotid, forma oxidat) i FAD+ (Flavin-adenin-dinucleotid, forma oxidat):
NAD+ + 2H+ + 2e- => NADH + H+
FAD+ + 2H+ + 2e- => FADH2
Coenzimele reduse (NADH i FADH2) se reoxideaz cednd electronii transportorilor membranei interne
mitocondriale organizai n complexe polipeptidice i regrupai sub numele de lanul (sau catena) respirator
mitocondrial. Este un ansamblu de proteine n care are loc transferul de electroni, ntr-o ordine precis, cu
eliberare de energie la fiecare etap de trecere ntre doi transportori consecutivi (Fig. 4.15).
Complexul I: NADH dehidrogenaza, conine peste 25 de polipeptide. Situsul de legare al NADH este
orientat ctre matrice. Acceptorul final al acestui complex este ubiquinona oxidat (UQ) care se reduce la
ubiquinol dup reacia urmtoare:
NADH + H+ + UQ => NAD+ + UQH2
Complexul II: succinat dehidrogenaza, este constituit din cel puin 4 polipeptide. Transfer electronii de la
succinat la ubiquinon prin intermediul FAD.
Complexul III: ubiquinol-citocrom c oxidoreductaza, este compus din 10 subuniti. Ubiquinolul produs
de complexele I i II difuzeaz n membrane pn la complexul III cruia i va ceda electronii pentru a ajunge
n forma s oxidat. Transferul de electroni duce la reducerea citocromului c.
74

Biologie Celulara

Ultimul complex care conduce electronii pn la oxigen este complexul IV: citocrom c oxidaza. El transfer
electronii acceptorului final, oxigenul, care se reduce la ap.
Energia furnizat prin transferul de electroni este utilizat pentru expulzarea protonilor prin
membrana intern i creeaz un gradient electrochimic de protoni, numit for proton-motorie (PMF). Faa
matricial a membranei devine ncrcat negativ, n timp ce faa citosolic are o sarcin net pozitiv. F1F0ATP sintetaza (ATP-aza) sau complexul V, numit i complexul F0F1 utilizeaz un gradient electrochimic de
protoni pentru a cataliza reacia de fosforilare a ADP n ATP. Conform teoriei chimiosmotice acestea sunt
reacii cuplate trecerii inverse a protonilor prin ATP sintetaza. Fosforilarea este oxidativ pentru c este
cuplat cu reaciile de oxidare ale transportorilor lanului respirator. Energia electrochimic poate fi
utilizat pentru a ndeplini alte procese celulare. Transportul fosfatului i ADP utilizeaz gradientul
electrochimic de protoni ca surs de energie.

ADP + Pi ATP

Matricea
H+ + NADH NAD + + 2H+

2H+ + O2 H2O

2e
I

III

IV

Fo
++

4H

F1

4H

cit c

2H

3H+

Spatiul intermembranar
Fig. 4. 16 Localizarea i componentele lanului respirator mitocondrial

75

7.2.Plastidele
Plastidele sunt organite celulare care, la fel ca i mitocondriile i peroxizomii, nu aparin sistemului
de endomembrane, avnd origine i compoziie membranar diferit. Plastidele se ntlnesc numai la
organismele de tip vegetal (alge, plante verzi) i au roluri diverse.
Rolurile plastidelor se pot rezuma ns la dou mai importante:
9 funcie de stocare (organite de rezerv) i
9 n generarea ATP i fixarea carbonului anorganic (CO2) sub forma de molecule organice
(glucide)
Pentru c sunt extrem de diverse ca form, compoziie de pigmeni i roluri, plastidele se pot mpri astfel:
Dup culoarea lor, dat de diveri pigmeni:
- plastide incolore (albe sau leucoplaste);
- plastide colorate, cu rol n asimilaia carbonului anorgani (roii - rodoplaste, brune feoplaste i
verzi - cloroplaste) sau fr rol n asimilaie (cromoplaste).
n general, plastidele incolore (leucoplastele) pot depozita diferite substane:amidonul (amiloplaste),
uleiuri (oleoplaste) sau proteine (proteoplaste).
n continuare ne vom focaliza doar asupra cloroplastelor, plastide coninnd pigmeni verzi,
clorofilieni, i care au funcie energetic.

7.2.1.Structuracloroplastelor
n celulele eucariote fotosintetice, energia celular poate s provin i din activitatea cloroplastelor. Sunt
organite delimitate, ca i mitocondriile, de dou membrane (extern i intern). n stroma (analoag matricei
mitocondriale) intern, structuri membranare n form de saci, numii tilacoizi, sunt ancorate i formeaz
agregate (grane). Membrana tilacoidal are echipamentul enzimatic responsabil de transferul electronilor
dinspre stroma ctre lumenul tilacoidal (Fig. 4.16). O ATP sintetaz, numita C0C1 ATP-aza, este prezent n
membran i cupleaz returul protonilor ctre strom cu sinteza de ATP

Membrana externa

Granele

Membrana interna

(teancuri
de
tilacoizi)
tilacoizi)

Tilacoid
Tilacoizi stromatici

Spatiul intermembranar
Lumenul tilacoidului

Tilacoizi

Granele
(teancuri
de
tilacoizi)
tilacoizi)

Tilacoizi stromatici

Fig 4.17. Organizarea intern a unui cloroplast, a granelor i tilacoizilor.

76

Biologie Celulara

n cursul fotosintezei au loc numeroase reacii, clasificate n dou categorii:

A. Reacii de transfer de electroni, numite i reaci la lumin. Energia luminoas activeaz un electron al
unui fotosistem n care particip clorofila. Electronul este transmis unui lan transportor de electroni
din membrana tilacoidal. Principiul de transfer este similar celui din lanul respirator mitocondrial.
Duce la conversia NADP+ n NADPH. Acest proces pompeaz protoni prin membrana tilacoid
crend un gradient electrochimic de protoni. Fora proton-motorie format este responsabil de
sinteza ATP, n strom, de ctre C0C1 ATP sintetaza;
B. Reacii de fixare ale carbonului, numite i reacii la ntuneric. n cursul acestor reacii, ATP i NADPH,
produi cu ocazia transferului de electroni, servesc ca sursa de energie i agent reductor pentru a
favoriza, printr-un mecanism ciclic, transformarea CO2 n glucide.
Transferuldeelectroni
n cursul fotosintezei producerea ATP i NADPH utilizeaz lumina solar ca energie iniial. Cnd o
molecul de clorofil este excitat de ctre un foton, un electron este deplasat de pe un orbital molecular pe
altul cu energie mai mare. O astfel de molecul excitat este instabil i va avea tendina s revin la starea
iniial cednd un electron cu energie mare unei alte molecule acceptoare de electroni. n acelai timp va
preleva un electron cu energie sczut de la o alta molecul donoare de electroni cum este apa. Cele dou
fotosisteme (PSII i PSI) funcioneaz simultan pentru a produce ATP i NADPH utiliznd energie
luminoas. Fosforilarea ADP la ATP se numete fotofosforilare.
Fotosistemul II (PSII) preia electroni de la ap pentru a umple golurile create de lumin (fotoni)
ntr-o molecul de clorofil din centrul reactiv P680 (centru care are o molecul de clorofil ce absoarbe
lumina la 680 nm). Electronii cu energie mare din P680 excitat sunt recuperai de moleculele de quinon care
i transmit unei pompe de protoni, complexul b6f. Acest complex transport protonii n lumenul tilacoidal i
creeaz un gradient electrochimic care favorizeaz sinteza ATP de ctre ATP sintetaza.
Fotosistemul I (PSI) accept electronul pentru a umple golul lsat n propria molecul de clorofil
din centrul reactiv P700 excitat de ctre ali fotoni. Fiecare electron care intr n PS I este adus la un nivel de
energie foarte ridicat care i permite s fie transmis ferredoxinei, i apoi NADP+ pentru a produce NADPH
(Fig. 4.17).
Fotofosforilarea este neciclic cnd cele dou fotosisteme sunt implicate n transferul unui electron
de la ap la NADP+. Cloroplastele anumitor specii vegetale pot face s funcioneze fotosistemul I n mod
ciclic, fotofosforilare ciclic. Electronii cu energie mare provenii din ferredoxin sunt cedai complexului
b6f n locul NADP+ i deci reciclai n fotosistemul I. Rezultatul acestui mod de funcionare este acumularea
de protoni n lumenul tilacoid i n consecin disponibilitatea energiei necesare sintezei ATP.
Fotofosforilarea neciclic utilizeaz cele dou fotosisteme i produce oxigen, ATP i NADPH, n timp ce
fotofosforilarea ciclic utilizeaz doar fotosistemul I i genereaz ATP fr a forma nici NADPH, nici
oxigen.

77

Foton

Moara
produce
ATP

Foton

Fig. 4. 18. Localizarea i componentele fotosistemelor i a lanului transportor de electroni din

membrana tilacoidala a cloroplastelor

Fotosistemul I

Fotosistemul II

Fig. 4. 19. Diagrama fotoreaciilor care au loc n cloroplast

78

Biologie Celulara

Fixareacarbonului
Reacia principal de fixare a carbonului este cea dintre CO2 provenit din atmosfer, ribulozo 1,5bifosfat i ap cu formare a dou molecule de 3-fosfoglicerat. Reacia este catalizat n strom de ctre o
enzima abundent, ribulozo bifosfat carboxilaza. Producerea de ribulozo 1,5-bifosfat necesit o serie de
reacii care consum NADPH i ATP. n ciclul de fixare a carbonului (ciclul Calvin-Benson), 3 molecule de
ATP i 2 molecule de NADPH sunt consumate pentru fiecare molecul de CO2 transformat. n strom, acest
ciclu duce la formarea de gliceraldehid-3-fosfat. Acesta se va acumula n strom sau va fi exportat n citosol
pentru a fi transformat ntr-un dizaharid numit zaharoz, care reprezint principala form de transport a
glucidelor n celulele vegetale.

H2O

CO2

Energie solara

Fotoreactii

Cloroplast

O2

Ciclul
Calvin

[CH2O]
zaharuri

Fig. 4. 20. Relaia dintre fotoreaciile ce au loc n tilacoizi i ciclul

Calvin care are loc n stroma cloroplastului

MATERIAL SUPLIMENTAR
Genomul cloroplastului
Este un ADN circular, cu mrime de 120-200 kpb. Codific molecule de ARNr, 30 molecule de ARNt,
aproximativ 20 de proteine ribozomale cloroplastice, subuniti ale ARN polimerazei, mai multe proteine ale
fotosistemelor I i II, subuniti ale ATP sintetazei i subunitatea mare a ribulozo difosfat carboxilazei. Ca i
mitocondria, cloroplastul nu este niciodat sintetizat de novo.
Provine mereu din cloroplaste preexistente. Multe subuniti proteice sunt produse n citosol (sunt proteine
codificte de genomul nuclear) i importate n diferite compartimente cloroplastice.

79

8.Peroxizomii
Peroxizomii sunt structuri membranare mici, de aproximativ
0,2-1 m diametru i care au o localizare citosolic, unde plutesc
liberi (Fig. 4.21). Ele se gsesc exclusiv n celulele eucariote de tip
animal i vegetal. Spre deosebire de mitocondrii i plastide,
peroxizomii sunt nconjurai de o singur membran lipidic n care
exist numeroase proteine membranare importante, i care
delimiteaz un spaiu (lumen) peroxizomal umplut cu enzime
oxidative

Importulproteinelorperoxizomale
Peroxizomii nu conin ADN, ARN sau ribozomi proprii.
Toate proteinele peroxizomale sunt codificte n ADN din nucleu i
sunt sintetizate fie n ribozomii liberi din citosol, fie n cei ataai de
RER. Toate proteinele destinate lumenului peroxizomal prezint
dou secvene-semnal: de tipul 1 (PTS1) sau de tipul 2, PTS2. PTS1
Fig. 4.21. Aspectul
este,
de departe, cel mai comun peptid-semnal, fiind prezent n
electronomicroscopic al peroxizomilor.
aproximativ 95% din enzimele destinate peroxizomilor. Secvenelesemnal sunt recunoscute de receptori (peroxine). Peroxinele recunosc i transport acele proteine ce prezint
secvena-semnal adecvat. Odat ajunse la nivelul membranei peroxizomale, primul set de peroxine cedeaz
ncrctura de proteine unui al doilea set de peroxine care le transport n lumenul peroxizomal.

Rolulperoxizomilor
Peroxizomii sunt organite vitale celulelor animale deoarece particip n beta-oxidarea acizilor grai,
genernd energie i precursori pentru unele ci biosintetice. Dei n mitocondrii au loc procese de betaoxidare a AG, acolo sunt metabolizai doar AG cu lanuri scurte (cu mai puin de 20C). n peroxizomi sunt
degradai AG cu lanuri lungi i unii AG ramificai utilizndu-se oxigen molecular prin intermediul
oxidazelor (D-aminoacid-oxidaze i ureat-oxidaza). Din aceste procese rezult compui cu molecul mic,
energie dar i peroxid de hidrogen (H2O2). Dar peroxizomii au echipamentul enzimatic necesar (catalaze)
pentru conversia peroxidului la ap i oxigen molecular. n urma ruperii secveniale a unei perechi de atomi
de C, din beta-oxidarea AG rezult acetil CoA (coenzima A) care este apoi eliberat n citosolPeroxizomii degradeaz molecule toxice la compui netoxici.
Au rol n formarea colesterolului, acizilor biliari, plasmalogenilor i fosfolipidelor.
La plante, peroxizomii realizeaz dou funcii eseniale:
9 n germinarea seminelor, cnd peroxizomi speciali numii glioxizomi convertesc AG i lipide n
zaharide prin intermediul ciclului acidului glioxilic. Aceast cale permite seminelor s utilizeze AG
(stocai sub forma picturilor de ulei n plastide precum oleoplastele) ca surs de cretere pn cnd
planta devine capabil de fotosintez i asimilaia carbonului.
9 n decursul fotosintezei, adpostind reacii biochimice n urma crora se recicleaz carbonul
asimilat.
Bibliografie
VOICULE, N., PUIU, L., Biologia molecular a celulei, Editura ALL, Bucureti, 1997, p. 56-164
MIXICH, F., Biologie celular i molecular, Editura Sitech, 1997, p. 232-271

80

Biologie Celulara

Capitolul5.Citoscheletulimotilitateacelular

itoscheletul formeaz o retea complex de filamente i tubuli

care se ntinde n toat citoplasma (Fig. 5.1.). Fa de
scheletul osos care este rigid, citoscheletul este o structur foarte
dinamic. El se reorganizeaz continuu n timpul diferitelor
evenimente celulare (micarea celular, diviziune, etc.). Toate
elementele citoscheletului (filamente de actin, filamente
intermediare i microtubuli) sunt structuri proteice alungite care
rezult prin polimerizarea structurilor monomere.
Trei tipuri principale de structuri proteice constituie
citoscheletul:
1. Filamentele de actina (microfilamente),
2. Filamentele intermediare i
3. Microtubulii.

200 nm

Fig. 5.1. Aspectul electronomicroscopic al citoscheletului.

Funciile ndeplinite de citoschelet sunt:
a) Asigur forma celulei i forele necesare micrii acesteia, constituind un suport, proprietate
important mai ales pentru celula animal care nu prezint perete extern. n unele celule
specializate, elemente ale citoscheletul asigur forma prelungirilor celulare (de exemplu n cazul
microvililor, prelungiri ale celulele intestinale);
b) La mobilitatea organismelor unicelulare prevzute cu cili sau flageli, elemente ale
citoscheletului alctuind structurile de micare;
c) Particip la fixarea organitelor celulare n poziii favorabile exercitrii funciilor lor;
d) Servete ca mijloc de transport pentru veziculele secretoare, asemntor cablurilor de funicular
sau inelor de tren;
e) Particip n diviziunea celular.
n continuare prezentm o schem simplificat a rolurilor citoscheletului n viaa celulei eucariote.
Diviziunea celular
(n alctuirea fusului de diviziune)

CITOSCHELET
(filamente de actin,
intermediare, microtubuli)

Motilitatea celular
(n alctuirea cililor i flagelilor)

Suport pentru organitele celulare

Cele 3 tipuri de componente ale citoscheletului sunt poziionate diferit i ndeplinesc funcii diferite
n cadrul celulei. Astfel, filamentele de actin sunt localizate la periferia celulei, sub nveliul celular
(membrana plasmatic). Filamentele intermediare au localizare dubl, o parte sunt distribuite n interiorul
nucleului, pe faa nuclear a anvelopei, iar o alt parte ocup aproape tot volumul celular. Microtubulii au
aspectul unei reele radiare cu originea ntr-un punct al celulei, originea fiind ntr-un organit numit
centrozom (Fig. 5.2.)
81

Fig. 5.2. Localizarea celular i aspectul n microscopie de fluorescen al diferitelor structuri

citoscheletice: filamente de actin (A), intermediare (B) i microtubulii (C)

5.1.(Micro)filamenteledeactin
5.1.1.Structuraactinei
n numeroase celule animale actina este proteina cea mai abundent (contribuind cu cel puin 5% la
masa proteic total). Filamentele de actin formeaz structuri dinamice care sunt mai mult sau mai puin stabile
prin asociere cu alte proteine. De exemplu, formele stabilizate se gsesc n microvili (Fig. 5.3) i celulele
musculare. Actina este o protein care leag ATP i are dou extremiti numite poli (pozitiv i negativ).
S-au identificat trei clase de actine:
a) -actina n celulele musculare (striate i netede);
b) -actina (patru forme);
c) -actina.
Ultimele dou clase se gsesc n celulele ne-musculare. Diversitatea molecular dintre diferitele
tipuri de actin este foarte mic, acestea avnd peste 90% identitate de secven. Proteinele de legatur, cu rol
important n polimerizare i stabilizarea filamentelor de actin, pot permite cuplarea filamentelor ntre ele i
iniierea micrii.
5.1.2.Polimerizareaactinei
Actina polimerizeaz (n prezenta ATP) ntr-o elice strns de 5-9 nm diametru, formnd un filament
flexibil i polar (Fig. 5.3.a). Microfilamentele de actin sau actina F (7 nm n diametru) rezult din
polimerizarea actinei G, cea mai abundent dintre proteinele citoscheletice n numeroase celule eucariote.
Filamentele de actin prezint o extremitate (+) cu cretere rapid i o extremitate (-) stabil.
Polimerizarea actinei pure n vitro necesit prezena ATP, a cationilor monovaleni (K+) i divaleni
2+
(Mg ). Filamentele de actin se constituie n trei faze (Fig. 5.3.b):

82

Biologie Celulara

1) O perioad latent, (de nucleaie) n care actina G se agreg lent n oligomeri scuri i
instabili. Un oligomer care a atins o anumit lungime devine centru de nucleaie. S-a constatat
c structura care acioneaz ca centru de nucleaie este un trimer de actin G.
2) n faza urmtoare nucleaiei, noi monomeri se adaug cu o rat exponenial centrelor de
nucleaie. Filamentul de actin crete concomitent la ambele capete. Faza de elongare este
amplificat i de clivarea ntmpltoare i spontan a filamentelor care cresc, genernd mai
multe extremiti de filamente, care se comport la rndul lor ca centre de nucleaie pentru
elongare.
3) n ultima faz, filamentele de actin intr n starea de echilibru dinamic. Pe durata elongrii,
concentraia de monomeri de actin G scade pn cnd atinge un echilibru cu filamentele.
Starea de echilibru este dinamic deoarece masa filamentului de actin nu se schimb deorece
la un capt are loc adugarea de monomeri iar la cellalt, monomerii se desprind. Concentraia
de echilibru a monomerilor de actin se numete concentraie critic (Cc). n vitro, Cc este de
0,1 M; peste aceast valoare o soluie de actin va polimeriza, sub aceast valoare va avea loc
depolimerizarea actinei F.

(a) Filament de actin

Centru de
nucleaie

Centru de nucleaie

Centru de nucleaie

Actina F
Actina G

Elongare
Elongaie

Nucleaie

Pol (-)

Pol ( - )

Actina F

Pol ( + )

Stare de echilibru

(b)

Pol (+)

Protein de acoperire
Pol (-)

Pol (+)

Protein de acoperire

(c)

Fig. 5.3. Aspectul helicoidal al filamentului de actin (a), principalele etape ale polimerizrii actinei (b) i
creterea inegal la cele dou extremiti a filamentului de actin (c)
Polimerizarea actinei este favorabil monomerilor legai de ATP. Odat adugai filamentului n
cretere, monomerii hidrolizeaz lent ATP la ADP i fosfat anorganic (Pi). Detaarea actinei G se face n
paralel cu eliberarea ADP i Pi din situsul de legare. Totui, hidroliza ATP un este necesar pentru
polimerizare deoarece s-a constatat experimental c i monomeri legai la ADP sau la un analog
nehidrolizabil, poate polimeriza.

83

Polaritateastructuralafilamentelordeactin
Aa cum s-a menionat anterior, filamentele de actin prezint o extremitate (cap, pol) negativ, cu o
rat de polimerizare mult mai mic (5-10 ori) dect cea de la extremitatea pozitiv. Aceast diferen n viteza
de elongare a extremitilor opuse ale filamentelor de actin este determinat de o diferen ntre
concentraiile critice caracteristice fiecrui pol. n mod normal, n celule capetele filamentelor de actin un se
gasesc n stare liber ci sunt blocate de prezena unor proteine de acoperire (caping proteins). Dac
proteina de acoperire este prezent la extremitatea (-), alungirea filamentului se face la extremitatea (+) i
invers. Dispunerea proteinelor de acoperire la cele dou capete este n fun. de concentraia critic specific
fiecrei extremiti astfel: dac Cc este ntre 0,1 i 0,6 M, proteina de acoperire se localizeaz la captul (-)
iar polimerizarea are loc la cel (+). Dac Cc excede valoarea de 0,6 M (sau 0,8 M dup unele surse),
filamentul crete la ambele capete. Dac Cc este sub 0,1 M actin G, filamentul nu mai crete (Fig. 5.3.c).
Diferena ntre concentraiile critice de la extremitile filamentelor de actin conduce la un
comportament dinamic cunoscut sub numele de covor rulant (Fig. 5.4.). Cnd concentraia critic de actin
G este ntre Cc specific polului (+) i cel (-), monomerii desprini de la captul (-) se vor aduga la cel (+).
Apoi, monomerii adugai la captul (+) vor strbate filamentul pe toat lungimea lui pn la extremitatea
opus unde se disociaz.
(-)

(+)

Fig. 5.4. Comportamentul de covor rulant al filamentului de actin atunci cnd

Cc (+) < concentraia de actin G < Cc (-)
n celul, fenomenal covorului rulant este diminuta de prezena proteinelor de acoperire care
blocheaz tranzitoriu extremitile filamentelor de actin, mpiedicnd ataarea sau disocierea actinei G.
Proteinereglatoarealepolimerizriiactinei
Asamblarea filamentelor de actin n celule un este un proces ntmpltor. Dac prin experimentele
n vitro, polimerizarea actinei se produce spontan n condiii propice de concentraie de monomeri i
compoziie ionic, n vivo exist mecanismo care controleaz procesal de polimerizare a actinei, n fun. De
necesitile celulei. Aceste mecanisme sunt realizate n principal sub controlul a dou proteine: timozina 4 i
profilina.
Timozina 4 este o protein mic (5 kDa) i formeaz un complex 1:1 cu actina G care devine astfel
incapabil de polimerizare. Complexul 1:1 se gsete n echilibru cu timozina liber, cu actina G liber i cu
actina F. Mecanismul de sechestrare a actinei G de ctre timozin ar putea const fie n blocarea situsului de
legare la actina F, fie prin legarea de ADP ataat la actin, inhibnd schimbul ADP-ATP necesar asamblrii
monomerilor.
Profilina (15 kDa) se ntlnete n toate celulele eucariote, n concentraii mai mici dect timozina. Ea
formeaz de asemenea, un complex 1:1 cu actina G, dar spre deosebire de timozin, un blocheaz situsul de
legare a ATP. Profilina concureaz timozina pentru complexarea actinei G, iar complexul profilin-actin GATP este favorabil polimerizrii. n condiii staionare, o mare parte a profilinei se afl n stare legat de
fosfatidil inozitol trifosfat (PIP2), precursor al inozitol trifosfatului (IP3) care este un mesager secundar cu
localizare membranar. Ca rspuns la un stimul extern, PIP2 este hidrolizat la IP3, elibernd profilina. Ca
urmare, profilina scoate monomerii de actin G din complexele timozin-actin G i permite polimerizarea lor.
84

Biologie Celulara

Aadar, ca urmare a unui semnal extern, n celul se poate declana formarea (polimerizarea) filamentelor
de actin, a cror capete (+) se afl n apropierea feei citosolice a membranei plasmatice (Fig. 5.5).
Faa
citosolic a
membranei
plasmatice

Stimul extern

(+)

(-)

-ATP

-ADP

ADP

ATP

Legend:
PIP2
Monomer liber de actin G
Timozin:actin G

IP3
Profilin:actin G

Fig. 5.5. Iniierea polimerizrii actinei la nivelul membranei plasmatice, ca urmare a unui stimul extern
Proteinedefragmentareiacoperireafilamentelordeactin
Filamentele de actin pot fi clivate n fragmente mai scurte de ctre gelsolin. n urma fragmentrii,
gelsolina rmne ataat la extremitatea (+) a filamentului i mpiedic polimerizarea acestuia. Polul (-)
rmne liber n acest caz. Mecanismul de activare al gelsolinei i a altor proteine de acoperire se realizeaz pe
cile de semnalizare celular, prin intermediul ionilor de Ca2+ i a PIP2. S-a observat de exemplu, c
depirea nivelelor de repaus ale calciului, activeaz fragmentarea i acoperirea filamentelor de actin.
Prin fragmentarea microfilamentelor, citoplasma celulelor eucariote poate trece dntr-o stare mai
vscoas ntr-una mai fluid, cu apariia curenilor citoplasmatici. Rolul curenilor citoplasmatici este acela
de distribuire uniform a organitelor celulare i a metaboliilor. Mai mult, lichefierea citoplasmei din
apropierea membranelor permit fuziunea acestora, cu rol important, de exemplu la celulele macrofage din
sistemul imunitar. Fagosomii rezultai prin ingerarea unui microorganism de ctre macrofag sunt iniial
nconjurai de microfilamente de actin cu rol stabilizator. Pentru ca fagosomii s fuzioneze cu lizosomii,
filamentele de actin sunt fragmentate, probabil ca urmare a unor creteri locale ale concentraiei de Ca2+.
O alt categorie de proteine nu fragmenteaz actina F ci blocheaz polimerizarea s prin ataarea la
extremitatea (+). Aceste proteine se numesc de acoperire i funcioneaz independent de concentraia Ca2+.
Proteine precum CapZ intermediaz stabilizarea actinei pe membrana plasmatic a celulelor. CapZ a fost
pentru prima oar identificat n celulele musculare, unde are rol de ancorare a filamentelor de actin la
nivelul membranei Z a sarcomerului din muchi. Ulterior a fost evideniat i n celule nemusculare.
Tropomodulina este tot o protein ce acoper extremitatea (-) a filamentelor de actin att n celulele
musculare ct i reeaua membranar a celulelor roii sangvine. Prin proprietile prezentate mai sus,
proteinele de acoperire au rolul de a stabiliza reeaua de actin acolo unde este necesar ca organizarea
citoscheletului s rmn neschimbat.

85

Proteinedelegareaactinei:organizareafilamentelordeactinnfasciculeireele
Filamentele individuale de actin sunt asamblate n dou tipuri de structuri numite fascicule,
respectiv reele de actin (Fig. 5.6).

Domeniu de
legare a Ca2+

A
ABD

ABD
Domenii de
dimerizare

ABD

Monomer de fimbrin
Dimer de -actinin

Dimer de filamin

C
Fig. 5.5. Asocierea actinei sub form de fascicule (prin intermediul unor legturi transversale datorate de
exemplu,- actininei) (A) sau reele (prin intermediul filaminelor)(B)
Pentru a forma fascicule, filamentele de actin sunt strns legate prin puni transversale proteice,
dispuse paralel (Fig. 5.5.A). n reele, filamentele de actin sunt dispuse n zig-zag, adesea n unghiuri drepte
i sunt legate mai lax, prin legturi proteice transversale (Fig. 5.5.B). Prezena reelelor de actin induce
starea de gelificare a citoplasmei. Formarea legturilor dintre filamentele de actin este intermedat de
proteine de legare a actinei (actin cross-linking proteins). Aceste proteine aparin la dou clase majore:
proteine ale fasciculului de actin i proteine de gelificare (ale reelei de actin). Ambele tipuri de proteine
prezint domenii similare de legare la actin.

(1)Dintreproteinelefascicululuideactincelemairspnditesuntfimbrinaiactinina.
Fimbrina este o protein de legare mic, cu dou domenii de legare la actin (ABD, actin-binding
domain) apropiate, situate pe acelai lan polipeptidic (fig. 5.5.C). Este rspunztoare de formarea unor
fascicule dense n microvilii celulelor intestinale (Fig. 5.6), n stereocili (microvili specializai) i plci de
adeziune.
-actinina se ntlnete sub form de dimeri, domeniile de legare la actin fiind situate opus. Este
rspunztoire de formarea unor fascicule mai laxe, cu fun. contrctil. Este abundent n pseudopode (de tipul
filopodiilor i lamelipodiilor, n fibrele de stress, plci de adeziune.
Alte proteine care contribuie la formarea fasciculelor de actin sunt vilina, spectrina i distrofina.

(2)Dintreproteinelecareparticiplaformareareelelordeactinamintimfilamina.
Filamina este un dimer proteic fexibil care promoveaz formarea unei citoplasme laxe, gelificate prin
capsarea mpreun a dou filamente de actin, ntr-un unghi aproape drept (Fig. 5.5.B i C). ABD sunt
dispuse la extremitile opuse domeniilor de dimerizare, molcula de filamin avnd forma literei V.
Starea de gel determinat de reelele de actin cu filamin este necesar extinderii membranelor celulere sub
86

Biologie Celulara

forma unor proiecii laminare (lamelipodii). Lamelipodiile ajut la deplasarea prin trre a celulelor pe
suprafee solide. Pierderea de exemplu a filaminelor n unele celule canceroase (precum celulele de melanom)
mpiedic migrarea acestora n alte regiuni, deci un risc mai mic de metastazare.

Regiune
Regiune
amorfa,
dens
amorfa,
colorata
dens
colorata
Capatul (+) al
filamentului de
actina

Microvili

Membrana plasmatica

Membrana
plasmatica

Filamente de actina
Brate de ancorare
laterala (miozina
I, calmodulina)

Filamente intermediare
Legaturi din
Figure 6.26
fimbrina si vilina

0.25 m

Fig. 5.6. Fasciculele dense de actin rigidizeaz microvilii, prelungiri apicale din celule intestinale, cu rol n
creterea suprafeei de absorbie a nutrienilor.

Asociereaactineicumiozina:contraciamusculariinelulcontractil
n muschiul scheletic, filamentele de actin sunt asociate cu filamentele de miozin. Miozinele sunt o
familie de proteine care convertesc energia ATP pentru a-i schimba conformaia pentru a se deplasa prin
alunecare n lungul filamentelor de actin.
Structura miozinelor
Miozinele sunt proteine motorii care cupleaz hidroliza ATP cu deplasarea.
Exist mai mai multe tipuri de miozine din care trei, I, II i V sunt mai bine caracterizate. Miozinele I
i V sunt implicate n interaciunile dintre citoschelet i membran n timp ce miozina II face posibil
contracia muscular. Toate miozinele prezint trei domenii diferite structural i funcional:
- domeniul capului, cu situsuri de legare a ATP i actinei, generator al forei de micare, se mai
numete lanul greu al miozinei;
- gtul, cu form -helical, regleaz activitatea capului. La nivelul ei se ataeaz o alt protein
capabil s lege calciul, calmodulina i o protein de reglare a calmodulinei. Aceste subuniti
formeaz aa-numitul lan uor al miozinei.
- domeniul cozii care intermediaz ataarea la membran sau la alte miozine. Coada este rsucit sub
forma unui model -helical. (Fig. 5.7).
Miozina I este un monomer cu un domeniu motor (cap) unic i un domeniu caudal scurt, de legare de
membran.

87

Miozina V se prezint ca un dimer, la fel ca miozina II, cu dou capete (lanuri grele) dar cu un gt mai
lung i cu o regiune caudal mai scurt dect cea a miozinei II. Domeniul cozii se termin cu o regiune
globular.
Domeniul cozii

gt

cap

Domeniul cozii, rasucit -helical

Miozina II
Lanturi usoare
Domeniu motor
unic

Miozina I

Lanturi grele,
domeniul motor

Miozina V
Lanturi usoare

Fig. 5.7. Structura miozinelor II, I i V

Domeniul motor al miozinelor se deplaseaz de-a lungul filamentului de actin, spre captul plus, excepie
fcnd miozina VI. Micarea este dependent de ATP.
Miozinele I, V i VI se asociaz cu membranele organitelor
celulare i membrana plasmatic avnd un rol n transportul
vezicular.

Organit delimitat
de membrana

(-)

(+)

Fig. 5.8. Deplasarea miozinei V de-a lungul filamentului de

actin, spre polul (+) al acestuia. Domeniile globulare ale
miozinei V sunt asociate cu o structur membranar, n timp
ce domeniile motoare (capetele) interacioneaz cu actina.

Miozina II, molecula prezent n muchi, se asociaz n dimeri (Fig. 5.7) care apoi interacioneaz la
nivelul cozilor cu ali dimeri de miozin II (Fig. 5.9). Dimerii de miozin II se grupeaz n celula muscular
n filamente miozinice numite filamente groase. Capetele miozinice interacioneaz cu filamente de actin
(filamente subiri) fixate cu extremitatea (+) pe o structur de ancorare denumit discul Z. n acest fel
rezult o structur unic, specific celulei musculare, sarcomerul. Sarcomerul (totalitatea filamentelor groase
i subiri dintre dou discuri Z) este o unitate repetat a unei structuri numite miofibril (Fig. 5.10).
Miofibrilele sunt dispuse liniar i paralel ntre ele, pe toat lungimea fibrei musculare. O miofibril poate fi
format din pn la 100 de mii de sarcomere i are un diametru de 1-2 m.
Contracia este rezultatul alunecrii capetelor miozinei n urma hidrolizei ATP pe filamentele subiri
de actin (Fig. 5.11 i 5. 12). Datorit faptului c actinele sunt ancorate n discul Z, prin flexia capetelor
miozinice, ele sunt obligate s se mite, fenomen evideniat de apropierea discurilor Z din miofibrile
(respectiv procesul de scurtare a sarcomerelor).

88

Biologie Celulara
Capetele miozinei II
Cozile miozinei II

Zona clar

Fig. 5.9. Asocierea dimerilor de miozin II la nivelul cozilor pentru a forma filamentele groase ale
sarcomerului.

Sarcomer

Fig. 5.10. Organizarea celulei musculare cu miofibrile (A), respectiv aspectul electronomicroscopic al
miofibrilei i sarcomerelor (B).
Filament subtire

Relaxare

Filament gros

Miozina

Actina

Banda I

Disc Z

Banda A

Actina

Banda I
Disc Z

Contractie

Banda A

Fig. 5.11. Aspectul schematic al unui sarcomer relaxat i n contracie: filamentele groase de miozin se
asociaz cu filamentele subiri de actin care sunt ancorate la nivelul discului Z..

(+)

()

actina

miozina II

()

actina

(+)

Fig. 5.12. n urma hidrolizei ATP, capetele miozinice tind s se deplaseze spre polul (+) al actinelor
determinnd deplasarea filamentelor de actin i apropierea discurilor Z
89

Mai jos redm un tabel cuprinznd o serie de proteine ntlnite n muchii sceheltici.
Tabel.5.1. Proteinele majore din muchiul scheletic al vertebratelor
Proteina
Actina
Miozina
Tropomiozina
Troponina

Masa molecular
(kDa)
42
510
64
78

Titina
Nebulina
Miomezina

2500
700
185

-actinina
Ca2+- ATPaza

190
115

CapZ
Tropomodulina

68
41

Funcie
Componenta major a filamentelor groase
Componenta major a filamentelor subiri
Se leag de-a lungul filamentelor subiri
Poziionat la intervale regulate de-a lungul filamentelor
subiri; mediaz reglarea contraciei de ctre Ca2+
Leag filamentele groase de discul Z
Leag filamentele subiri de discul Z
Protein legat de miozin i prezent la nivelul liniei M a
filamentelor groase
Leag transversal filamentele i le ataeaz de discul Z
Protein major n reticulul sarcoplasmic (RS) i intervine
n relaxarea muchiului prin transportul Ca2+ n lumenul
RS
Ataeaz filamentele de actin la discul Z
Menine lungimea i stabilitatea filamentelor subiri

Rolulactineincitocinez
La sfrsitul mitozei, dup ce cromozomii s-au separat graie microtubulilor (telofaza), filamentele de
actin se asociaz cu miozina II i formeaz la periferia celulei i perpendicular pe axul fusului mitotic un
fascicul contractil numit inel contractil. Cnd inelul se contract, el separ celula mam n dou celule fiice
(citocineza).
Funciilefilamentelordeactin:
- stabilizeaz membranele celulare (plasmatic, nuclear, etc);
- realizeaz polarizarea celulei;
- n formarea i stabilizarea microvililor, axonilor i altor prelungiri celulare;
- n ancorarea organitelor celulare;
- n transportul vezicular n asociaie cu miozina I i V;
- n fagocitoz, endo- i exocitoz;
- n mobilitatea celular, participnd la formarea pseudopodelor;
- n contracia muscular n asociaie cu miozina II
- n diviziunea celular, n asociaie cu miozina II;

5.2.Filamenteleintermediare
Structurafilamentelorintermediare
Filamentele intermediare sunt polimeri proteici rezistenti i durabili
cu un diametru de 10 nm, prezeni n citoplasma majoritii celulelor. Se
numesc intermediare pentru c diametrul lor aparent este cuprins ntre cel al
filamentelor de actin (microfilamente) i microtubuli (Fig. 5.13). n
majoritatea celulelor, o reea extensiv de filamente intermediare nconjoar
nucleul i se ntinde pn la periferia celulei. Sunt legate i cu desmozomii i
hemidesmozomii.
Polimerizareafilamentelorintermediare
Fa de actin i tubulin, care sunt proteine globulare, tipurile
proteice din constituia filamentelor intermediare sunt molecule fibroase

FA

FI

Microtubuli

Fig. 5. 13. Comparaie a

dimensiunilor celor 3
tipuri de filamente
90

Biologie Celulara

foarte alungite. Secvena lor de aminoacizi favorizeaz formarea dimerilor superrsucii (Fig. 5.14.B). n
timpul asamblrii, doi dimeri foarte rsucii se asociaz antiparalel pentru a forma o subunitate tetramer
numit protofilament (3 nm n diametru) (C). Tetramerii se alatur unui filament intermediar n curs de
alungire (D) i opt astfel de protofilamente formeaz filamentul intermediar cu diametrul de 10 nm (E)
Componentele filamentelor intermediare se gsesc rar n stare liber (monomeri). Procesul de asamblare sau
disociere a filamentului este un proces lent care poate avea loc ntr-un interval de cteva minute, n timp ce
actina i tubulina necesit pentru asociere numai cteva secunde.

Regiunea helicala a monomerului

Dimer superrasucit

Tetramer asamblat din doi dimeri superrasuciti

Doi tetrameri asamblati: filament intermediar in curs de alungire

Opt tetrameri rasuciti pentru a forma un filament intermediar

Fig. 5.14. Structura filamentelor intermediare

Funciilefilamentelorintermediare
Roluri importante sunt realizate de filamentele intermediare, i anume:
a) Rol n ciclul i diviziunea celular
b) Susinerea nveliului nuclear
c) Rol structural
Reeaua de filamente intermediare dubleaz faa intern a nvelisului nuclear i formeaz lamina
nucleara, un strat protector intern al anvelopei nucleare. Lamina susine nvelisul nuclear i d nucleului o
form stabil, n general, globular. n timpul mitozei, lamina nuclear se dezorganizeaz datorit fosforilrii
componentelor (fosforilare realizat de ctre un complex kinazic ciclinB / Cdk1). Dezintegrarea s permite
91

intrarea n aciune a unui alt tip de elemente citoscheletice, microtubulii, care particip la formarea fusului i
separarea cromozomilor.
Foarte stabile n celul, filamentele intermediare au un rol structural i sunt frecvent asociate cu
microtubulii. Proteinele din constituia lor sunt toate molecule fibroase cu un domeniu central cilindric.
Aceste proteine formeaza homo- sau heterodimeri care se asambleaza elicoidal. Expresia genica depinde de
tesut, i de aceea aceste proteine sunt divizate n mai multe clase precum n Tabelul de mai jos :
Tabel 5.2. Principalele grupe de filamente intermediare, localizarea i funciile lor
Clasa
I i II

Proteina
Keratine (acide, I i
bazice, II)

III

Neurofilamente (uoare
NF-L, medii, NF-M i
grele NF-H)
Vimentine

IV

Desmine
Filamente gliale
V

Lamine (A, B i C)

VI

Nestina

Localizare i rol
piele i fanere (pr, unghii, etc.) unde este majoritar; particip la
formarea desmozomilor i hemidesmozomilor, formeaz o reea
flexibil i rezistent furniznd suportul structural al epiteliului
axonii celulelor neuronale ; rol de susinere mecanic i asigur
calibrul axonilor din nervii periferici
celule endoteliale ale vaselor sanguine, fibroblaste i leucocite ;
fibrele de vimentin se termin adesea pe membrana nuclear i pe
desomozomii i hemidesomzomii membranei plasmatice (rol n
ancorarea organitelor celulare)
Celule musculare; rol n legarea fibrelor musculare n fascicule i
n stabilizarea sarcomerului n timpul contraciei musculare
Neuroni i astrocite.
Nucleu (formnd lamina nuclear); cu rol n meninerea
integritii anvelopei nucleare n decursul ciclului celular
Celulele stem ale sistemului nervos central

5.3.Microtubulii
Structuramicrotubulilor
Microtubulii sunt bine reprezentai n celulele eucariote, i mai ales n celulele nervoase unde
reprezint 10-20% din proteinele totale. Microtubulii sunt structuri extrem de dinamice, formate din molecule
de tubulin, heterodimeri rezultai prin asocierea a dou polipeptide globulare, -tubulina i -tubulina.
Un microtubul este o structur cilindric, goal n interior, constituit din 13 protofilamente.
Protofilamentele sunt compuse dntr-o alternan de subuniti de i -tubulin, asamblate cu
aceeai polaritate (Fig. 5.15.).

Heterodimerul , tubulin

(-)

(+)

Protofilament

Fig. 5.15. Structura heterodimeric a tubulinei i asocierea n protofilamente cu capete (+) i (-)
Subunitile i au situsuri de legare ale GTP () respectiv GTP i GDP (). Subunitatea cu GTP
legat, tinde s se ataeze de o molecul de tubulin. Dup ataare, are loc hidroliza GTP la GDP +Pi. GTP
legat la tubulin nu poate fi hidrolizat din cauza unor constrngeri structurale ale . tubulinei
Asamblareamicrotubulilor
Microtubulii rezultati prin asamblarea paralela a protofilamentelor sunt structuri polare cu o
extremitate (+) capabil de cretere rapid i o extremitate (-) care tinde s disocieze dac nu este stabilizat.
Stabilizarea extremitilor (-) se efectueaz graie ancorrii n centrozom, situat n proximitatea nucleului.
92

Biologie Celulara

Extremitatea (+) este acum liber s se lungeasc prin adugarea tubulinei (Fig. 5.16). Aceste structuri sunt
extrem de labile i ntr-o celul funciile microtubulilor depind n parte de aceast stabilitate.
(+)

-GTP

-GTP

GTP-

GDP

(-)
GTP

24 nm
-GDP
-GDP

(A)

-GDP

(B)

Fig. 5.16. Structura (A) i asamblarea (B) microtubulului. Microtubulul are capete (+) i (-) i este
format din 13 protofilamente care delimiteaz un spaiu interior, gol. La captul dinamic (+) are loc
ataarea tubulinei cu GTP n ambele subuniti, n vreme ce la captul (-), are loc desprinderea tubulinei
care conine subunitatea cu GDP,
Un alcaloid de tipul colchicinei mpiedic polimerizarea microtubulilor (este utilizat pentru a bloca
celulele n diviziune n metafaz), n timp ce taxolul i stabilizeaz.
Extremitatea cu crestere rapid (plus) este liber, n timp ce extremitatea minus este, cel mai adesea,
prins ntr-un centru de organizare microtubular (MTOC). Un astfel de MTOC este i centrozomul celular.
Centrozomul este un complex proteic organizat n jurul a dou structuri numite centrioli (Fig. 5.17). Centriolii
conin mai multe forme de tubulin (, , , i ). Ei sunt formai din dou structuri cilindrice, scurte, dispuse
perpendicular una pe cealalt. Fiecare cilindru este format din 9 triplete de microtubuli. n jurul centriolilor se
afl dispersate tubuline , i , necesare nucleaiei microtubulilor. Fiecare celul conine un centrozom format
dntr-o singur pereche de centrioli. La nceputul diviziunii celulare, centriolii se replic rezultnd dou perechi
de centrioli cu rol n formarea polilor fusului de diviziune i organizarea fusului mitotic.
Triplet de
microtubuli

Fig. 5.17. Aspectul svhematic i electronomicroscopic al centriolilor

n general, centrozomul se gsete aproape de nucleu iar numele su provine de la faptul c reprezint
aproximativ centrul celular. Plecnd de la centrozom se adauga dimerii de tubulin (alfa i beta) ncrcai cu
GTP (alfa la polul minus, beta la polul plus) i se elaboreaz protofilamente, care se asambleaz unele cu altele
lateral, formnd straturi. Acestea se pliaz progresiv pentru a forma microtubulul, cilindric i rigid.
93

Funciilemicrotubulilor
Microtubulii ndeplinesc 3 funcii eseniale:
1) Transportul organitelor i veziculelor membranare
2) Micarea cililor i flagelilor
3) n diviziune prin formarea aparatului de diviziune
n realizarea funciilor, microtubulii sunt nsoii de o serie de proteine, dintre care unele cu
proprieti motorii iar altele cu roluri stabilizatoare i de intermediere a contactelor cu ali compui celulari
(proteine asociate cu microtubulii, MAP - microtubule associated proteins).
1.Deplasareaorganitelorpemicrotubuli.
Dou familii de proteine motorii (vezi, de asemenea, miozinele) interacioneaz cu microtubulii :
kinezinele care se deplaseaz spre extremitatea plus i dineinele care se deplaseaz spre extremitatea minus
(directia centrozomului) (Fig. 5.18.A).
Capete globulare

Rasucire in -helix
Lant greu

Directia de miscare

Lant usor

Vezicula
Regiune
intermediara
Situs de legare a ATP

Kinezina
Microtubul

Dineina
Vezicula

A.

Piciorul din fata se

leaga de o noua
subunitate betatubulinica

Regiune
intermediara

Piciorul
din spate

Directia de miscare

Piciorul
din fata

Microtubul
Piciorul din spate se muta
in fata

B.
Fig. 5.18. Proteine motrice care
interacioneaz cu microtubulii.
(A) Kinezina se deplaseaz anterograd iar
dineine, retrograd.
(B) Alctuirea (a) i modalitatea de
deplasare (b) a kinezinei.
(C) Alctuirea dineinei citosolice i a
complexului dinactinic
Kinezina este o protein format din 4
lanuri polipeptidice, 2 lanuri grele i 2
uoare.
Structural,
kinezinele
sunt
asemntoare miozinelor: lanurile grele
sunt rsucite n -helix i terminate n
capete globulare (domenii motorii). La
nivelul acestor capete se afl situsul de
hidroliz a ATP respectiv cel de legare la
tubulin. Asocierea cu organite sau vezicule
membranare se realizeaz la nivelul
lanurilor uoare (cozile kinezinei).

Dineina citosolica
Lanturi grele

Complex
dinactinic
Lanturi
intermediare

C.

Lanturi
usoare

Dinactina

Spectrina
Membrana
cargo

Ankrina

94

Biologie Celulara

Kinezina se deplaseaz ntotdeauna n direcia extremitii (+) a microtubulului, fenomen denumit transport
anterograd (Fig. 5.18.B).
Dineinele sunt o clas de proteine cu localizri diverse: citosolic, axonal, flagelar i ciliar.
Dineina citosolic este activ sub forma unui complex proteic multimeric (complex dinactinic) asociat cu
dinactina, o protein nrudit cu actina (Fig. 5.18.C). Acest complex permite fixarea organitelor i transportul
lor n sens retrograd, adic spre captul (-) al microtubulului. Dineina are activitate ATP-azic.
Dineina i kinezina se ataeaz cu ajutorul cozii la structuri celulare precum neurofilamentele, RE,
aparatul Golgi, membrana plasmatic, cromozomi (kinetocori) i veziculele de secreie (Fig. 5.19).

Vezicule membranare

Mitocondrie

Lizozom

Lizozom
Dineine citosolice

Kinezine citosolice

Kinezine fusale

Fig. 5.19. Rolul proteinelor motrice n transportul veziculelor membranare,

fixarea i deplasarea organitelor celulare
Proteinele motorii asociate asigur transportul intracelular dea lungul microtubulilor sau
microfilamentelor
O vezicul membranar poate fi transportat de o protein motorie asociat microtubulului sau unui
microfilament de actin. n endocitoz, de exemplu, se transport vezicule nvelite n poriuni din membrana
plasmatic, iar n procesul de secreie celular se transport spre exterior vezicule care provin din RE i
aparatul Golgi. n ambele procese veziculele trebuie s traverseze regiuni ale citoplasmei srace n
microtubuli, dar bogate n microfilamente i invers.
Rezultate experimentale sugereaz c att proteinele motorii asociate microtubulilor ct i cele asociate
microfilamentelor se leag la aceleai vezicule membranare i coopereaz pentru transportul lor. n esen,
datorit distribuiei microtubulilor n miezul citoplasmei, ele intermediaz transportul veziculelor n aceast
regiune, n timp ce microfilamentele de actin, abundente la periferia (corticala) citoplasmei, preiau funcia
de transport atunci cnd veziculele ajung n apropierea membranei plasmatice. Pentru ca transportul s aib
loc, pe aceeai vezicul sunt legate att miozina ct i dineina sau kinezina.

95

2.Micareacililoriflagelilordelaeucariote
Cilii i flagelii sunt prelungiri ale membranei plasmatice, constituite dintr-un miez de microtubuli.
Flagelul bacteriilor este diferit de cel al eucariotelor deoarece este o prelungire de filamente proteice ale
suprafeei celulare, fr a fi delimitat de o membran.
Cilii i flagelii eucariotelor sunt structuri asemntoare, fiecare cu un diametru de aproximativ 0,25
m. Multe celule sunt acoperite de numeroi cili care au aproximativ 10 m lungime, dar flagelii, mult mai
puini la num. (1-4/celul) pot atinge 200 m. Parameciul are pe suprafaa s mii de cili, folosii att pentru
locomoie ct i pentriu ingerarea hranei. La mamifere, un num. Mare de cili se afl la nivelul epiteliilor din
mucoasa nazal i traheal. Flexia fasciculelor de microtubuli permite micarea cililor i flagelilor. La
suprafaa epiteliului respirator (bronhii i trahee), regiunile cu cili se onduleaz coordonat, permind
deplasarea unidirecional (ctre exterior) a mucusului bronhic. Micarea este un fenomen activ, aprut dntro recuperare pasiv, n care cilul revine la pozitia iniial. Micarea unui cil se produce prin flexia prii
centrale, axonema.
Axonema este constituit dntr-o armtur de microtubuli aranjai n nou dublete periferice care
nconjoar un dublet central (o pereche de singlete). Fiecare dublet periferic este format prin asamblarea a
doi microtubuli (A i B) care pun n comun trei protofilamente. n fiecare dublet un microtubul este asociat cu
dinein. Dineina interacioneaz cu dubletul adiacent pentru a determina o micare de alunecare a unui dublet
pe altul. Dineina ciliar are un domeniu motor care hidrolizeaz ATP pentru a se deplasa pe microtubul ctre
extremitatea minus (Fig. 5.9. i 5.10).
Dubletele periferice sunt stabilizate unele fa de altele de brae de nexin, protein de legare. De la
dubletele periferice pornesc spre centrul axonemei alte brae, ca nite spie radiare. n mijlocul axonemei,
dubleta central este format din doi microtubuli care nu au n comun protofilamente (singlete de
microtubuli). Cele dou singlete sunt stabilizate de puni proteice i nconjurate de un scut proteic, a crui
suprafa intr n contact cu capetele spielor radiale.
ntreg ansamblul axonemal este delimitat de prelungirea membranei celulare. El este astfel organizat
pentru a fi asigurat o maxim flexibilitate n condiiile unei rezistene sporite.

Brat intern de
dineina

Membrana
plasmatica

Nexina

Punte de conectare a
singletelor centrale
Pereche centrala de
singlete microtubulare

Brat extern de
dineina

Scut proteic
Spita radiala
Capul spitei

Microtubul A

MicrotubulB

Dublet de microtubuli

Fig. 5.19. Structura schematic a axonemei (a), respectiv imaginea electronomicroscopic a unei
seciuni transversale prin cili (b)

96

Biologie Celulara

Axonema cililor i flagelilor se ancoreaz n celul prin

corpusculii bazali. Similare centriolilor, corpusculii bazali sunt
structuri cilindrice ce conin 9 triplete de microtubuli. Fiecare triplet
conine un microtubul complet cu 13 protofilamente )microtubul A)
i care fuzioneaz cu ceilali microtubuli (B i C) incomplei.
Microtubulii A i B se continu n axonem, pe cnd microtubulul C
se termin la zona de tranziie ntre corpusculul bazal i axonem.
Perechea de microtubuli centrali este caracteristic numai axonemei
i se termin la zona de tranziie ntre axonem i corpusculii bazali.

Fig. 5.21. Seciune transversal printr-un corpuscul

bazal n care se observ cele 9 triplete i absena dubletei centrale.
Micrile cililor i flagelilor de la eucariote rezult prin alunecarea relativ a dubletelor de
microtubuli externi unii printre alii, datorit activitii motorii a dineinei ciliare. Orientarea microtubulilor n
cil este cu polul (+) spre vrf. Alunecarea braelor dineinei de pe microtubulul A pe microtubulul B din
dubletul adiacent se face spre extremitatea (-), adic spre baza acestuia. Fora care produce alunecarea activ
necesit consum de ATP. Aceast for este generat prin formarea i ruperea succesiv a legturilor dintre
braele dineinei i microtubulul adiacent (B).
O schem succint privind declanarea i modul de micare a axonemei este prezentat n Fig. 5.20:
Dublete
de microtubuli

ATP

Brat de
dineina

Energizat de ATP, braele de dinein a

unui dublet de microtubuli, trage
dubletul adiacent, l mpinge n sus, se
elibereaz apoi se prinde din nou. Dac
cele dou dublete nu ar fi ataate la
corpusculul bazal, ele ar aluneca unul
fa de cellalt.

ATP
Dubletele externe

Intr-un cil sau flagel, dou dublete

adiacente nu pot aluneca prea mult
deoarece sunt limitate fizic de proteine
de legtur, astfel nct dubletele se
ndoaie.
Anorare
in celula

Activarea sincron, localizat, a

braelor de dinein cauzeaz ndoirea
cilului sau flagelului ncepnd de la
baz spre vrf. ndoirile succesive ale
cilului se manifest finalmente ca o
micare ondulatorie a acestuia.

Fig. 5.21 Diagram reprezentnd micarea cilului sau flagelului

97

Bibliografie:
CRUCE, M., Biologie celular i molecular, Ed. Aius, Craiova, 1999, p. 161-190
CRUCE, M., MIXICH, F., ZAHARIA, C., CRUCE, R., ARDELEAN, A., Citoscheletul i motilitatea
celular, Ed. Aius, Craiova, 1998.

Capitolul6.Ciclulcelularidiviziuneacelular

forismul lui Rudolf Virchow (patolog german, 1821-1902) omnis cellula e cellula (orice celul
provine dntr-o celul) ilustreaza conceptul de multiplicare celular prin diviziune. Diviziunea celulei
include diviziunea nucleului i replicarea informaiei genetice (mitoza) i diviziunea citoplasmei i a intregii
celule (citochineza).
Decesedivideocelul?
Mitoza asigura ndeplinirea mai multor fenomene:
i)
dezvoltarea embrionara;
ii)
cresterea generala a organismelor, de la nastere pna la stadiul adult;
iii)
cresterea continua a anumitor organisme si/sau organe (arborii, parul, dintii la rumegatoare,
unghiile, etc.);
iv)
rennoirea celulelor moarte (celulele cutanate, hematiile, etc.);
v)
asigura cicatrizarea diferitelor rani;
vi)
conserva identitatea celular n timpul dezvoltarii i rennoirii celulelor din aceleasi organe,
tesuturi, etc.;
vii)
apariia dereglarilor de proliferare la nivelul celulelor somatice de tip cancer.
Cedeclaneazmecanismuldiviziunii?
Diferite ipoteze:

un factor ereditar de mrime: fiecare tip celular are o talie ereditar care, odat atins i depit,
provoac diviziunea;

raportul nucleu/citoplasm: nucleul nu ar putea controla eficient dect o cantitate limitat de

citoplasm; reducerea la jumtate a volumului de citoplasm ar restabili un control eficient aducnd
raportul n favoarea nucleului care este ntotdeauna neschimbat ca numr de cromozomi;

raportul membran/citoplasm: suprafaa membranei citoplasmatice nu ar putea asigura schimburi

eficace dect pentru o cantitate limitat de citoplasm; reducerea la jumtate a citoplasmei ar aduce raportul
n favoarea membranei plasmatice;

existena semnalelor citoplasmatice: s-a demonstrat c un nucleu care se divide normal ntr-un anumit
tip celular, transplantat n alt citoplasm nu se mai divide.

6.1.Fazelecicluluicelular
Filmarea celulelor n diviziune arat c mitoza i citochineza reprezint un ansamblu de modificri
continue. Ciclul celular este subdivizat n 2 faze mari: pregatitoare (interfaza) i de diviziune (mitoza care se
termina cu citochineza).
Faza pregtitoare, interfaza, este o faz de repaus care reprezint 90% din ciclul celular, este invizibil n
microscopie optic i a crei durat variaz ntre 10 i 24 de ore la mamifere;
Faza de diviziune, mitoza (faza M), formata din patru etape funcionale, vizibile la microscopul optic:
profaza, metafaza, anafaza i telofaza, cu o durat de aproximativ o or.
n timpul acesteia nucleul i citoplasma vor fi divizate, procesele respective fiind numite
cariochinez (diviziunea nucleului) i citochinez (diviziunea citoplasmei). n esen, studiul mitozei este
axat pe cariochinez i n cadrul acesteia, pe modificrile suferite de cromozomi.

98

Biologie Celulara

6.2.Interfaza
Mult timp s-a considerat ca n celulele aflate n aceasta faz nu se ntmpla nimic. Analiza cantitii
de ADN n celulele cu o rat de diviziune crescuta a demonstrat c acesta se dubleaza rapid nainte de fazele
vizibile. Procesul este asigurat de enzima ADN polimeraza care copiaz catenele parentale-matri i
sintetizeaz, pe baza de complementaritate (adenin - timin i citozin - guanin) dou catene noi omologe.
La sfritul interfazei, nucleul, care conine unul sau mai multi nucleoli (zone speciale din nucleu, cu functii
de producere a ribonucleoproteinelor), este bine definit i nconjurat de un nvelis nuclear. Centrozomul, unic,
este replicat i microtubulii pornesc din centrozom ntr-o structur radiar numita aster.
Analitic, interfaza se subdivide n trei perioade distincte:

faza G1 (gap = interval) care se ntinde ntre faza M i nceputul fazei de sintez a ADN. Durata sa
variaz de la cteva ore la cteva zile. Condiioneaz durata ciclului celular i constituie o perioad
critic. Celulele care nu pot trece de aceasta etap intr n stare quiescent, faza G0. n faza G1 are loc
activarea tuturor elementelor necesare sintezei ADN, graie unui proces susinut de transcripie;

faza S n timpul creia continutul ADN al unei celule trece de la 2n (2n cromozomi, fiecare cu o
cromatid pe cromozom) la 4n (2n cromozomi ramne, fiecare cu dou cromatide identice). Duplicarea
cromatinei depinde de starea sa de condensare. Eucromatina, care corespunde regiunilor de ADN
frecvent transcrise sub form de ARN, este duplicat prima n timp ce heterocromatina (corespunztoare
regiunilor represate) este duplicat tardiv;

faza G2, n general foarte scurt, se caracterizeaz printr-o cretere mare a volumului celular.
Celulele embrionare precoce posed toate elementele necesare unei sinteze rapide de ADN i diviziunii.
n acest caz, interfaza se reduce la faza S, i determin diminuarea dimensiunilor celulei n timpul
numeroaselor diviziuni caracteristice acestui stadiu de dezvoltare (Fig. 6.1)
Celula creste iar
organitele se divid

interfaza

Au loc mitoza
si citocineza

Celula creste dar in acelasi timp

se pregateste sa se divida

ADN se replica odata cu

duplicarea cromozomilor

Fig. 6.1. Etapele ciclului celular cu evidentierea interfazei i mitozei

6.3.Mitoza
Mitoza nu se poate derula dect dac cromatina se condenseaz n entiti distincte (cromozomii)
destinate s asigure o buna repartiie a materialului genetic ntre cele dou celule fiice.
Cesuntcromatideleicromozomii?

99

ADN prezint, n funcie de stadiul n care se afla celula, mai multe nivele de condensare. Un nivel
mai relaxat este cel de cromatida, n care ADN este despachetat precum sfoara desirata de pe un ghem.
Cromozomii sunt cromatide condensate la maximum, intocmai ca sfoara mpachetata intr-un ghem. n acest
proces de condensare intervin o serie de proteine numite histone. La inceputul diviziunii cromatidele contin o
singura copie a ADN (2n). n urma replicarii apare o copie identica a ADN parental i, ca urmare, prin
condensarea cromatidelor surori rezult cromozomii duplicati (care se mai numesc 4n)
Cromatide
surori

Cromozom
constituit
dintr-o singura
cromatida

Duplicare

Cromozom
duplicat
Centromer

Fig. 6.2 Alctuirea i duplicarea unui cromozom

Repartiia informaiei genetice duplicate se realizeaz n urma activarii fusului mitotic indispensabil
segregarii i n paralel cu condensarea cromozomilor. Succesiunea etapelor mitozei este urmtoarea:

a) Profaza este o faza de organizare. Membrana citoplasmatic si modifica permeabilitatea i schimburile cu

exteriorul sunt diminuate. n nucleu, nucleolii se deplaseaza la periferie i dispar. Fibrele de cromatina se
condenseaza n spirala. Exista trei nivele de condensare care conduc la formarea de cromozomi vizibili la
microscopul fotonic. Fiecare cromozom duplicat are dou cromatide identice reunite printr-un centromer. n
citoplasma, se formeaza fusul de diviziune compus din microtubuli i proteine care se dispun ntre cei doi
centrozomi. Centrozomii se ndeparteaza unul de celalalt i microtubulii formeaza un fus care nconjoara
nucleul plecnd de la o pozitie polara.
b)Metafaza este un punct cheie al mitozei. nceputul sau, pro-metafaza, se caracterizeaza prntr-o ruptura brusca
a nvelisului nuclear. n acest stadiu, cromozomii devin accesibili unei clase de microtubuli ai fusului mitotic
(microtubuli kinetocorici) care se leag la cromozomi la nivelul kinetocorilor (structuri specializate de la nivelul
centromerilor care ghideaza migrarea cromozomilor). n urmtoarea etap nvelisul nuclear este distrus n
ntregime; lamina nucleara este dezorganizata i centrozomii se pozitioneaza la polii celulei. Cromozomii
formeaza placa metafazic n urma alinierii pe placa ecuatoriala, situata la distanta egala de cei doi poli ai fusului.
Se stabileste un echilibru ntre cele dou cromatide ale cromozomului mentinute i orientate ctre polii opusi ai
fusului mitotic.
c) Anafaza nu dureaza dect cteva minute i ncepe cnd centromerul dedublat al fiecarui cromozom se
separa n dou, elibernd astfel cromatidele surori. Fiecare cromatida devine din acest moment un cromozom
ntreg, condus de fus ctre polii celulei. Cromozomii sunt atrasi ctre poli ca urmare a contractiei
microtubulilor. Mitocondriile se concentreaza la nivelul placii ecuatoriale iar polii se ndeparteaza unul de
altul.
d) Telofaza marcheaz sfrsitul mitozei (telos = fin). Microtubulii polari alungesc celula i la poli se
formeaz noii nuclei. Cele dou noi nvelisuri nucleare se constituie din nvelisul nuclear al celulei mam i
regiuni din membrana reticulului endoplasmatic. Reapar nucleolii, fiecare cromozom si pierde organizarea
spatiala compacta i reia forma cromatinei initiale. Mitocondriile, ca i celelalte organite sunt redistribuite.
Mitoza, adica diviziunea unui nucleu n dou nuclee identice genetic, s-a terminat. Citochineza (diviziunea
100

Biologie Celulara

citoplasmei) este deja bine conturat deoarece cele dou celule fiice se vor individualiza la puin timp dupa
mitoza.

Interfaza

Profaza timpurie

Metafaza

Profaza tarzie

Anafaza

Telofaza + citochineza
Sfarsitul citochinezei
101

e)Citochineza ncepe la sfrsitul anafazei cu formarea unei linii de diviziune prin invaginarea membranei la
ecuatorul membranei celulare, perpendicular pe axul longitudinal al fusului mitotic. Diviziunea n dou celule
fiice se realizeaz gratie elaborarii unui inel contractil, compus dintr-un fascicul de filamente de actina i
miozina, asociate pe fata intern a membranei plasmatice. O data cu invaginarea liniei, are loc o pierdere
progresiva a filamentelor la nivelul inelului contractil pna se ajunge la un punct strns ntre cele dou celule
fiice. Procesul se ncheie cu ruperea acestui punct cnd celula pare s sufere o ntindere centripeta care separa
complet celule fiice. n celulele vegetale, care au un perete celulozic, citochineza apare ca un mecanism
centrifug. O structura dubla, numita placa celular se constituie n timpul telofazei la ecuatorul celulei mama,
plecnd de la centru i fuzionnd cu peretele celulei-mama astfel nct cele dou celule vegetale noi sunt
formate.
Diviziunea celular este rezultanta cariochinezei (diviziunea mitotic a nucleului) dirijat de fusul mitotic
i citochinezei (diviziunea citoplasmei) cauzat de formarea i restrngerea inelului contractil. Aceste
dou entiti, fusul mitotic i inelul contractil apar prin rearanjarea citoscheletului care confer celulei
interfazice arhitectura s intern.

6.4.Formareafusuluimitotic
`
In cea mai mare parte a celulelor, asterii se organizeaza n jurul centrozomilor, care constau ntr-o
pereche de centrioli i materialul pericentriolar asociat acestora. Fiecare aster acioneaz ca un veritabil
centru organizator de microtubuli sau MTOC (pentru Microtubule Organizing Center) nainte de sfrsitul
profazei, fusul mitotic este constituit din doi asteri legati prin ctiva microtubuli interpolari.
In profaza tardiva, timpul de njumatatire al unui microtubul scade brusc de la 5 minute la 15
secunde, iar numrul de microtubuli ce pornesc din centrozom creste considerabil. Astfel se explica de ce
nceputul fazei M este marcat de trecerea rapida a microtubulilor interfazici relativ lungi i puin numerosi la
un numr mare de microtubuli mici care nconjoara fiecare centrozom i participa la elaborarea fusului
mitotic.
Pentru a discuta asamblarea fusului mitotic este necesar descrierea organizarii sale. Fusul mitotic
metafazic matur este o structura cu simetrie bilaterala n centrul creia sunt localizati cromozomii flancati de
aranjamente formate din microtubuli care iradiaza spre poli. Structura fusului este determinata prin aciunea a
aproximativ sapte tipuri deferite de kinezine i a dineinei citoplasmatice. Adesea, aceste proteine motrice au
functii diferite.
Deci, fusul este o structura foarte dinamica a carui morfologie se modifica permanent.
Fusul mitotic este constituit din trei clase de microtubuli:
I. microtubuli polari care interacioneaz ntre ei la centrul fusului i asigura apoi ndepartarea polilor
la fiecare extremitate a fusului;
II. microtubuli kinetocorici, purttori ai cromozomilor;
III. microtubuli interpolari sau astrali situati la exteriorul fusului i a caror raspndire din centrozom
mentine organizarea intracelular n mitoza i orienteaza fortele necesare separarii polilor.
Placa metafazica, structura tipica aparent imobila, rezult dintr-un proces de asamblare complex a carui
stabilitate este asigurata printr-un schimb continuu de subuniti de tubulina cu tubulina libera din celula.
Legaturile ntre microtubulii polari i celelalte structuri cum sunt kinetocorii i centrozomii se realizeaz prin
intermediul proteinelor motrice microtubulare.
Cu toate ca lungimea medie a microtubulilor kinetocorici este aproximativ constanta n cursul
metafazei, microtubulii se modifica continuu prin trei modalitati:
i)
adaugare constanta de noi subuniti de tubulina (aproximativ 10 unitati pe secunda) la nivelul
extremitatii plus prin care sunt atasati de kinetocori;
ii)
un numr echivalent de subuniti de tubulina se disociaza lent la extremitatea minus de la
nivelul polilor fusului. Deci, subunitile de tubulina migreaza permanent de-a lungul
microtubulilor kinetocorici, de la kinbetocori la poli.
102

Biologie Celulara

iii)

toti microtubulii atasati la fiecare kinetocor si modifica lungimea n mod coordonat n urma
oscilatiilor cromozomiale.
Segregarea cromozomilor ntre cele dou celule fiice este un proces foarte precis. Pentru a atinge acest
nivel de precizie, majoritatea celulelor ntrzie intrarea lor n anafaza pna cnd toti cromozomii au o
orientare bipolara. Acesta reprezint punctul de control al metafazei la nivelul caruia se detecteaza daca
alinierea cromozomilor i asamblarea fusului au fost corect realizate n timpul metafazei.
Remodelareamicrotubulilornanafaz
nceputul anafazei care corespunde separarii cromatidelor surori este unul dintre evenimentele cele
mai impresionante din ntreg ciclul celular. Cromatidele surori se orienteaza ctre polii fusului (anafaza A) i
apoi polii se separa (anafaza B). De asemenea, anafaza este faza n care fusul mitotic activeaza regiunea
periferica a celulei pentru prepararea citochinezei. Deci, anafaza este dominata de miscarea ordonata a
cromatidelor surori ctre polii opusi ai fusului, care rezult din aciunea combinata a proteinelor motoare i
din modificrile de lungime ale microtubulilor.
Miscarea cromozomilor ctre polii opusi rezult din dou mecanisme independente. Primul se
desfasoara n anafaza A, i si are originea n micsorarea microtubulilor kinetocorici a caror depolimerizare la
nivelul kinetocorilor se efectueaza cu viteza mare.
Al doilea mecanism se observa n anafaza B i corespunde separarii polilor prin cresterea distantei de
separare. Are loc o polimerizare la nivelul extremitatilor distale ale microtubulilor polari, i o alunecare ctre
poli ajutata de proteinele motrice din familia kinezinei.
Microtubulii astrali se alungesc n toate directiile plecnd de la poli n timpul anafazei B. n asocierea
cu proteinele motrice, ca dineina, genereaza o forta care permite separarea polilor fusului.

Fig. 6.3. Remodelarea

microtubulilor in
anafaza.

6.5.Mecanismebiochimicedecontrolalcicluluicelular
Procesele moleculare care regleaz cele dou evenimente cheie ale ciclului celular, replicarea
cromozomilor i segregarea celular sunt fundamental similare n toate celulele eucariote. Tehnicile de
103

biochimie, genetica i biologie moleculara au scos n evidenta ca replicarea celular este primordial
controlata de realizarea corecta a replicarii ADN i mitozei. Controlul suprem al acestor evenimente l au
mai multe protein kinaze heterodimere mici care sunt compuse dntr-o subunitate reglatoare (ciclina) i o
subunitate catalitica (CDK, kinaza dependenta de ciclina). Aceste kinaze regleaz activitatile mai multor
proteine implicate n replicarea ADN i n mitoza asigurnd fosforilarea la nivelul unor situsuri specifice.
Procesul are drept rezultat activarea unor proteine i inhibarea altora astfel nct s se realizeze coordonarea
activitatilor.
Ciclul celular se articuleaza n jurul a patru faze cu durata inegala (Fig. 6.1). n cea mai mare parte a
timpului, celula se afla n faza G1; n cursul fazei S se realizeaz replicarea ADN; se trece apoi n faza G2 i
apoi se realizeaz mitoza. Faza G1 este cea mai lunga i o putem defini ca o faza control n care celula se
asigura ca mediul sau i permite s se divida. Aceasta etap este extrem de controlata. Un anumit control se
manifesta i n faza G2 unde celula se asigura ca replicarea ADN s-a realizat corect. Concentraiile ciclinelor,
subunitile reglatoare ale protein kinazelor heterodimere care controleaza evenimentele ciclului celular, cresc
i descresc pe durata derularii acestuia. Subunitile catalitice (kinazele ciclin dependente) nu prezint
activitate kinazica daca nu sunt asociate cu diferite cicline. Ciclinele asociate determina care dintre proteine
vor fi fosforilate de ctre un anumit complex ciclina- CDK. Cnd celulele sunt stimulate s se replice,
complexele cicline-CDK din faza G1 sunt primele exprimate. Acestea pregatesc celula pentru faza S prin
activarea factorilor de transcriptie care promoveaza transcriptia genelor care codific enzimele necesare
sintezei ADN i genelor care codific ciclinele i kinazele ciclin dependente din faza S. Activitatea
complexelor cicline-CDK din faza S este initial controlata de inhibitori. Mai trziu, n faza G1, complexele
cicline-CDK ale fazei G1 induc degradarea inhibitorilor din faza S prin fosforilarea acestora i prin
stimularea cuplarii lor cu ubicuitina determinata de ctre un complex multiproteic.
Complexele cicline-CDK mitotice sunt sintetizate n timpul fazelor S i G2, dar activitatile lor sunt
tinute sub control prin fosforilare la nivelul situsurilor inhibitoare pna ce sinteza ADN este completa. Odata
activate prin defosforilarea situsurilor inhibitoare, complexele cicline-CDK mitotice fosforileaza mai multe
proteine care promoveaza condensarea cromozomilor, retragerea anvelopei nucleare, asamblarea aparatului
fusului mitotic i alinierea cromozomilor condensati la nivelul placii metafazice. n timpul mitozei,
complexul de promovare a anafazei APC, (n engleza Anaphase Promoting Complex), care contine multe
subuniti de ubicuitin ligaza, poliubicuitineaza proteinele reglatoare cheie marcndu-le pentru degradarea
proteozomala. Un substrat important al APC este securina, o proteina care inhiba degradarea proteinelor care
asigura legarea cromatidelor surori.

104

Biologie Celulara

Fig. 6.4. Reglarea ciclului celular

MATERIAL SUPLIMENTAR
Ciclinele - contin cel puin dou domenii functionale. Primul, ntlnit la toate clasele de cicline, este cyclin
box, regiune conservata de 100 aminoacizi care asigura dou functii:
recunoaste i favorizeaza legarea ciclinei la kinaza CDK corespunzatoare; variatiile de secvena n aceasta
regiune responsabila de recunoasterea unei cicline particulare, permite clasificarea ciclinelor n subfamilii;
activeaza domeniul catalitic (kinazic) al proteinei CDK. Al doilea domeniu prezent doar la ciclinele de tip A
i B, localizat n regiunea N terminala a proteinei, corespunde unei regiuni numita destruction box.
Aceasta regiune contine un motiv din aminoacizi bine conservati (secvena consens RALGDIGN) urmat
de o regiune bogata n lizina cu un situs de recunoastere pentru legarea mai multor molecule de
ubiquitina (proteina mica termostabila de 76 aminoacizi). Astfel modificata, ciclina va fi degradata de un
complex multienzimatic, numit proteazom.

6.6. Punctele de control - Mecanisme de supraveghere a ciclului celular

Mecanismele specifice de supraveghere detecteaza erorile i induc blocarea ciclului celular la puncte
cheie de tranzitie. Astfel, n celulele de mamifere, arestarea ciclului n faza G1 consecutiva unei alterari a
ADN este controlata de genele ATM i p53 (gena supresoare tumoral eseniala n controlul integritatii
ADN). Debutul anafazei este ntrziat daca n celula cromozomii nu sunt toti perfect aliniati pe fusul mitotic.
Punctele de control ale ciclului celular au fost considerate etape n care toate evenimentele
specifice ale fazei precedente trebuiesc ndeplinite. Aceste puncte de control pot fi i puncte de oprire,
blocnd tranzitia ctre faza urmtoare. Intrarea n mitoza depinde de starea de fosforilare a complexului MPF

105

(eng. Maturation Promoting Factor sau Mitosis Promoting Factor). Fosfatazele i kinazele care controleaza
procesul sunt i ele supuse unei reglari care funcioneaz dupa acelasi principiu.
Factorii de crestere sunt necesari pentru stimularea proliferrii. Legarea unui factor de crestere la
receptorul sau membranar initiaza o cascada de evenimente (transducerea semnalului) care stimuleaza celula
s ndeplineasca faza G1 i s se angajeze n faza S. Factorii de crestere induc transcriptia a numeroase gene,
dintre care cele precoce codific factori de transcriere. Astfel, o familie de factori, numiti E2F, este necesar
pentru transcrierea unor gene care codific numeroase proteine implicate n sinteza deoxiribonucleotidelor i
ADN n timpul tranzitiei G2/S.

Fig. 6.5.
Punctele de control ale
ciclului celular

Diferitele tranzitii G1/S, S/G2, G2/M depind de protein kinaze, asociate cu ciclinele lor si/sau
fosfataze. Etapele cheie ale ciclului celular evita catastrofe genetice care ar putea surveni daca celula
depaseste inopinat un punct de control. De exemplu, daca anafaza ncepe nainte ca toti cromozomii s se
fixeze la microtubulii kinetocorici, vor fi celule fiice n care anumiti cromozomi vor lipsi si/sau cu
cromozomi supranumerari. Cnd acest proces, numit non-disjunctie, se produce n timpul diviziunilor care
genereaza gameti femeli i masculi, pot aparea trisomii care au drept consecinte anomalii de dezvoltare i
retardare mentala.
Punctele de control permit evitarea numeroaselor erori ca:
9 Replicarea partiala a ADN nainte de intrarea n mitoza;
9 Defecte de asamblare a fusului mitotic care antreneaza o distributie incorecta a cromozomilor;
9 Anomalii la nivelul structurii ADN care ar putea genera mutanti care scapa de controlul proliferrii
(carcinogeneza).

6.7.Diviziuneacelulelorsexuate(meioza)
Celulele somatice (soma-gr=corp), care constituie corpul plantelor i animalelor, se multiplic prin
mecanismul descris anterior, prin mitoz. Informaia genetic (ADN condensat n cromatide i cromozomi) se
gsete sub form de perechi de cromozomi (cromozomi 2n sau celule diploide), cte unul provenit de la
fiecare printe. Prin mitoz, o celul somatic, diploid, d natere la dou celule fiice identice, fiecare
coninnd o copie a ADN parental, ele fiind diploide (2n) la rndul lor.
Exista ns i o alt categorie de celule, implicate n nmulirea sexuat a organismelor, i anume
gameii sau celulele sexuale. La om aceste celule sunt ovulele (celule sexuale de tip femel) i spermatiile
(celule sexuale de tip mascul). Fenomenul prin care are loc fuziunea unui gamet femel cu unul mascul se
numete fecundatie sau fertilizare, iar rezultatul este un zigot (Fig. 6.6.).

106

Biologie Celulara

Celulele sexuale conin doar o singur replic a informaiei genetice (celule haploide, n) iar acestea
se combin prin fertilizare, rezultnd zigotulo cu garnitur dubl de cromozomi, 2n, caracteristica celulelor
somatice (diploide). Astfel putem spune c zigotul este prima celul somatic aprut n urma fecundaiei.
Din zigot, prin mitoz, procese de crestere i diferentiere celular vor lua natere toate celelalte tipuri
celulare i n final ntregul organism uman aa cum l vedem la natere.

Fig. 6.6. Rolul mitozei i meiozei n viaa organismelor multicelulare sexuate.

Datorit situaiei particulare a gameilor, diviziunea i multiplicarea acestor celule (care au loc n
zone specializate din organele reproductive, ex. n ovare, respectiv n testicule) este oarecum diferit de
multiplicarea celulelor somatice (de ex. celulele din piele). Fenomenul de diviziune a celulelor sexuate se
numeste MEIOZ. Spre deosebire de mitoz, meioza are ca rezultat divizarea unei cellule diploide n
descendeni haploizi. Reducerea numrului de cromozomi de la 2n la n are loc n dou etape de diviziune
nuclear i celular (numite meioza I i meioza II), care urmeaz dup o singur replicare a ADN.
MeiozaI
ncepe, ca i mitoza, imediat ce faza S a luat sfrit, cnd cantitatea de ADN este dublat. n acest
moment fiecare cromozom este format din dou cromatide surori. Spre deosebire de aranjarea cromozomilor
n mitoz, n profaza I meiotic, cromozomii omologi se asociaz sub form de perechi formnd tetrade care
se dispun ulterior n placa metafazic. n metafaza I meiotic aceste tetrade sunt orientate cu braele paralel
cu planul plcii metafazice i cu cte un cromozom spre un pol al celulei. n anafaza i telofaza I meiotic,
spre fiecare pol al celulei va migra cte un cromozom avnd cele dou cromatide surori. Rezultatul meiozei
I este formarea a dou celule fiice cu un numr de cromozomi redus la jumtate (n cromozomi) (Fig. 6.7).
n timpul profazei I meiotice, datorit apropierii spaiale i omologiei structurale, secvene de ADN
de pe cromozomii pereche vor fi schimbate prin procesul de crossing-over, rezultnd cromozomii
recombinai. Procesele de schimb de secvene de gene omoloage din timpul profazei I meiotice sunt
eseniale n asigurarea variabilitii genetice a descendenilor.

107

MeiozaI
Profaza I

Tetrada (perechi omoloage

de cromozomi)

Fusul de diviziune

centrioli

aster

Metafaza I

sau

Placa metafazica

Placa metafazica

Anafaza I

Telofaza I

Citochineza I

Fig. 6.7. Derularea meiozei I, cu formarea a dou celule fiice haploide, coninnd cromozomi recombinai cu
cromatide surori.

108

Biologie Celulara

MeiozaII
Urmeaz meiozei I i se deruleaz similar unei mitoze. La nceputul profazei II meiotice nucleele se
destram iar cromatina nuclear se condenseaz n cromozomi.. n metafaza II meiotic, cromozomii cu
cromatidele surori se dispun n planul ecuatorial al celulei, n placa metafazic. La nceputul anafazei II
meiotice, cromozomii se scindeaz n cte o cromatid iar n telofaza II meiotic, la fiecare pol al celulei va
migra cte un cromozom monocromatidic. Rezultatul mitozei II va fi formarea de cellule fiice cu n
cromozomi (haploide).
Bilanul meiozei va fi formarea a 4 celule fiice haploide: celulele sexuale.

MeiozaII
Profaza II

Metafaza II

Placa metafazica

Placa metafazica

Anafaza II

Telofaza II

Citochineza II

Fig. 6.8. Desfurarea meiozei II, cu formarea a patru celule fiice haploide, celulele sexuale coninnd
cromozomi recombinai monocromatidici.
109

Principaleleasemnriideosebiridintremitozimeioz
Caracteristicile comune i diferentele dintre cele dou tipuri de diviziune celular sunt rezumate n tabelul de
mai jos.
Tabel 6.1. Tabel comparativ ntre mitoz i meiz
Asemnri ntre mitoz i meioz
Ambele sunt precedate de o duplicare a informaiei
genetice, adic de formare unei perechi de cromatide
surori n fiecare cromozom pe durata interfazei

Meioza II este practic o mitoza, profaza II, metafaza

II, anafaza II i telofaza II fiind identice n
desfurare cu o mitoza obisnuita.

Telofazele I i II meiotice se termina cu o

citochinez asemntoare cu cea existent n mitoz.

Deosebiri dintre mitoz i meioz

Cu plecare de la 2n cromozomi, meioza are ca finalitate
formarea unui numr n de cromozomi, n timp ce din mitoza
rezult tot 2n cromozomi
Cu alte cuvinte: rezultatul meiozei este formarea a 4 celule
fiice cu din numrul total de cromozomi. La sfritul mitozei
apar 2 celule fiice cu acelasi numr 2n de cromozomi.
Meioza este format din dou diviziuni succesive: meioza I i
meioza II
In metafaza I, perechile de cromozomi parentali se dispun n
tetrade n placa metafazic. n mitoza n placa metafazic cte
un singur cromozom este aliniat n planul plcii.
In anafaza I meiotic, spre polii fusului sunt direcionai cte
una din perechile de cromozomi, fiecare cu 2 cromatide surori.
In mitoz, spre polii fusului se deplaseaz cate una din cele
dou cromatide surori.
Rezultatul telofazei I este obtinerea unor celule fiice cu
jumtate din numrul iniial de cromozomi.
Dupa apariia celor 2 celule fiice n urma meiozei I, acestea
intr ntr-o nou diviziune dup tiparul mitozei.

6.8.Proliferarea,difereniereaimoarteacelularprogramat
Creterea corpului la organismele eucariote pluricelulare este consecina proliferrii i diferenierii
celulelor pronind de la stadiul de zigot i parcurgnd fazele embrionare, apoi de organism tnr pn la
atingerea maturitii. La acest stadiu, proliferarea celulelor se diminueaz, un numr de celule oprindu-i
multiplicarea, stagnnd n faza G0. Alte celule ns pstreaz capacitatea de proliferare avnd rol n
nlocuirea celulelor moarte sau distruse. Proliferarea celulelor n organismele adulte este contrabalansat de
moartea fiziologic (programat) a altor celule.

Proliferareacelular
Celulele adulte au capaciti proliferante diferite, n funcie de gradul lor de difereniere (specializare).
(1) Celule neproliferante
Astfel o serie de celule difereniate precum celulele cristalinului, cele din muchiul cardiace sau
celulele nervoase, odat ce au dobndit funcia lor specific, i pierd capacitatea proliferativ. Teoretic, pe
tot parcursul vieii un individ trebuie s triasc cu aceleai celule difereniate iar distrugerea lor nu mai poate
fi compensat (de aici i creterea riscului de infarct miocardic pe msura naintrii n vrst).
(2) Celule slab-proliferante
A doua categorie de celule sunt cele care intr n faza G0 i din care fac parte majoritatea celulelor
adulte. Ele re-intr n diviziune atunci cnd este nevoie de nlocuirea altor celule moarte sau lezate. Aa sunt,
de exemplu, celulele din epiteliile i endoteliile organelor interne, celulele fibrelor musculare netede,
hepatocitele, etc.
(3) Celule care prolifereaz continuu
O serie de celule, cum sunt celulele epiteliului pielii sau ale tractului digestiv, trebuie nlocuite foarte
des. Celulele adulte difereniate nu se pot divide, aceast funcie revenind celulelor stem, nedifereniate.
Celulele stem se divid i produc celule care se difereniaz ulterior. O parte din celulele fiice ale celulelor
stem, rmn la rndul lor celule stem, constituind un rezervor de noi celule. Un exemplu edificatory de
110

Biologie Celulara

proliferare a celulelor stem pe toat durata vieii unui individ este cel al celulelor stem pentru ceulele
sangvine. Eritrocitele (care transport O2 i CO2), granulocitele i macrofacele (care particip la fagocitoza
intruilor bacterieni sau a celulelor moarte), trombocitele (care intervin n coagulare) i limfocitele (care
induc rspunsul imun) au o durat de via scurt. (zile-luni). Ele sunt produse prin diviziunea repetat a unei
celule stem comune, celula stem-pluripotent, din mduva osoas. Descendenii celulei stem pluripotente
urmeaz diferite ci de difereniere. Capacitatea de proliferare a descendenilor scade pe msur ce devin tot
mai specializate.

Difereniereacelular
Imensa majoritate a vieuitoarelor pluricelulare au n componena lor tipuri variate de celule, grupate
n esuturi, respectiv organe i sisteme de organe. Heterogenitatea unui organism adult este vizibil la nivel de
organe (inim, ficat, creier) constituite din tipuri celulare extrem de diverse (celule musculare, hepatocite,
neuroni, etc). Aa cum s-a amintit deja, ntreaga diversitate i complexitate a unui organism adult provine
prin diviziunea repetat a unei singure celule iniiale (zigot). Procesul de constituire a unor tipuri celulare
diverse, specializate, pornind de la o singur celul celula ou, se numete difereniere celular.
Diferenierea celular este ireversibil i are la baz o serie de mecanisme, n principal genetice. Din
punct de vedere genetic, zigotul i primele celule descendente sunt pluripotente (sau multipotente) deorece
ntreg setul lor de gene din nucleu este derepresat. n acest stadiu, toate genele lor sunt active iar ele pot urma
orice traseu evolutiv de difereniere celular. Ulterior, n cursul dezvoltrii embrionare (embriogenezei), sub
aciunea unor semnale interne i externe, exprimarea unor gene este represat (inhibat), celulele fiind silite
s urmeze un anumit traseu de difereniere. Celulele care au suferit aceast transformare se numesc celule
determinate.
Caracteristicilecelulelordifereniate:
1. Funcie specific (specializare). Celulele difereniate sunt strict specializate funcional;
2. Cooperare (joncionare). ntre celulele difereniate se stabilesc interrelaii i intercomunicare ca
urmare a formrii jonciunilor celulare;
3. Structur specific. Celulele specializate au form i structur caracteristice, necesare ndeplinirii
funciei specifice (de exemplu, celulele destinate secreiei de enzime digestive, au un RER bine
dezvoltat, celulele musculare prezint miofibrile, etc);
4. Compoziie chimic specific, dat de acumularea unor seturi de proteine (structurale i enzime)
specifice;
5. Adezivitate de substrat. Pe aceast proprietate se bazeaz formarea esuturilor i organelor prin
suprapunerea straturilor celulare caracteristice esutului sau organului respectiv;
6. Inhibiia capacitii de diviziune (sau de proliferare). Celulele difereniate au un ritm variat de
diviziune, aa cum a fost discutat anterior (vezi Proliferarea celular);
7. Inhibiia de contact, proprietate strns asociat joncionrii i adezivitii de substrat. Atunci cnd
densitatea celulelor dintr-un esut atinge un anumit nivel, celulele se opresc din diviziune. De
exemplu, n urma lezrii unui epiteliu, regenerarea lui are loc dinspre cele dou laturi ale plgii, pn
n momentul n care celulele ajung n contact. nhibiia de contact lipsete celulelor tumorale (vezi
6.9. Dereglarea ciclului celular: Cancerul) din cauza unor modificri metabolice particulare.

Moarteacelularprogramat
Moartea celular programat sau sinuciderea celular, este un process fiziologic normal prin care
sunt eliminate celulele n decursul dezvoltrii embrionare i pentru meninerea dimensiunilor i funciilor
normale ale esuturilor. La organismul adult, apoptoza echilibreaz proliferarea celular meninnd un numr
constant de celule n esuturile cu un ritm rapid de nlocuire a celulelor.
n decursul dezvoltrii organismului numeroase celule motenite din stadiile tinere de via sunt
eliminate prin moarte celular programat. Astfel circa 50% din celulele neuronale aprute n timpul
111

maturizrii organismului sunt eliminate, rmnnd doar cele mai specializate, apte pentru ndeplinirea
funciilor nervoase complexe.
Moartea celular programat este un proces prin care sunt eliminate nu numai celule normale ci i
celule lezate sau celule n care exist anomalii de expresie genic i de metabolism. De exemplu, celulele
infectate cu virusuri intr n moarte celular pentru a se mpiedica propagarea virusului.
Totalitatea modificrilor morfologice care nsoesc moartea celular programat se numete
apoptoz. Ea se deosebete de moartea neprogramat (accidental) care se manifest ca o necroz celular.
Pe durata apoptozei ADN cromozomial este fragmentat ca urmare a clivajului ntre nucleozomi.
Cromatina se condenseaz iar anvelopa nuclear se dezintegreaz n fragmente mici. n final celula se
micoreaz i se fragmenteaz n corpusculi nvelii n membran, numii corpi apoptotici. Corpii apoptotici
sunt recunoscui de macrofage i fagocitate. n necroz, celulele urmeaz o alt cale, se umfl , plesnesc i
i elibereaz coninutul n spaiul extracelular determinnd inflamaia.
Tabel 6.2. Tabel comparativ ntre apoptoz i necroz
Apoptoza
Fiziologic i patologic
Dependent de energie
Fragmentarea celulei
Integritatea membranei meninut
Fr scurgerea enzimelor lizozomale
Activarea unor protease specifice
Clivajul ADN
Modificri nucleare caracteristice
Participarea mitocondriilor i citocromilor c
Corpi apoptotici
Conservat din puct de vedere evolutiv
Celulele moarte sunt ingerate de celulele vecine

Necroza
Patologic
Independent de energie
Umflarea celulei
Integritatea membranei nu este meninut
Are loc scurgerea enzimelor lizozomale n citosol
Fr participarea proteazelor
Nu are loc clivajul ADN
Dezintegrarea complet a nucleului
Fr participarea mitocondriilor i citocromilor c
Corpi necrotici (fragmente celulare)
Neconservat
Celulele moarte sunt ingerate de neutrofile i macrofage

6.9.Dereglareacicluluicelular:cancerul
Originea cuvntului cancer este latina, el insemnand crab sau rac i a fost atribuita acestei clase
de maladii datorita aspectului multiramificat i modului de propagare multidirectional al celulelor i
tesuturilor canceroase.
Cancerul apare ca urmare a dereglarii ciclului celular, n urma creia celulele sunt arestate n faza
de diviziune, continua s se multiplice i nu mai devin celule specializate pentru o anumita funcie. .
Dereglarea ciclului celular cauzatoare de cancer apare n urma unor mutatii genetice. Ca rezultat al acestei
multiplicari scapate de sub control, apar aglomerari de celule canceroase numite tumori sau neoplazii.

6.9.1.Cesunticumseformeazatumorile(neoplaziile)?
In funcie de aspectul anatomic i consecintele asupra starii organismului, tumorile pot fi:
A. Benigne
1. Sunt tumori localizate i contin celule care provin din aceeasi celula initiala, celule care la
rndul lor sunt foarte asemanatoare cu celulele tesutului din care au aparut. Ex: negii
2. Pot fi relativ usor indepartate chirurgical deoarece sunt izolate de tesutul n care se
formeaza.
3. Devin o problema atunci cnd masa tumoral interfereaza cu functionarea normala a
corpului.
B. Maligne
1. Celulele se divid extraordinar de repede, cu mult mai rapid decat celulele tesutului
inconjurator.
2. Celulele isi pierd identitatea i devin nediferentiate, pastrand doar o parte din proteinele
existente n tesutul de origine.
112

Biologie Celulara

Pentru a se putea afla originea metastazei, n laboratoarele clinice se identifica filamentele

intermediare din celulele metastazice, filamente care raman neschimbate ca structura i care
sunt de mai multe tipuri, caracteristice fiecarui tesut.
Cancerele se clasifica n funcie de tesutul n care apar i de tipul de celula din care deriva, astfel :
a. adenoame tumori provenite din epitelii glandulare
b. carcinoame tumori provenite din epitelii (tesuturi care acopera suprafetele - intern i
extern -a organelor)
b. sarcoame - tumori derivate din tesuturi de lagatura sau musculare.
c. leucemii tumori care afecteaza celulele sangvine.
[Circa 90% din totalul cancerelor umane sunt carcinoame, iar cele mai fecvente sunt
afectiunile plamanilor, stomacului, sanilor, colonului/rectului i a cervixului uterin]
3. n urma unor mutatii genetice suplimentare, care permit desprinderea lor de tesutul de
origine, unele celule canceroase pot invada tesuturile invecinate i chiar cele indepartate,
unde se fixeaza pentru a produce noi tumori (numite secundare sau metastaze)
a. Pentru a metastaza, celulele canceroase trebuie s evadeze din adeziunea cu
celulele tesutului de origine. Este un proces neobisnuit care necesita alterari ale proteinelor
implicate n adeziunea dintre celule. Celulele metastatice au suprimata expresia unor
molecule proteice (de ex. E-cadherinele) implicate n adeziunea celulelor
b) Pe de alta parte celulele metastatice au supraexprimate proteine (integrine) cu rol
n legarea de lamina bazala (structura care impiedica desprinderea celulelor de tesut) i a
enzimelor colagenaza IV i plasmina cu rol n digestia laminei bazale (bogate n colagen, care
confera suport i rezistenta tesutului). Odata penetrata lamina bazala, celulele tumorale ajung
n circulatia sangvina i limfatica de unde se raspandesc, invadeaza i colonizeaza noi
tesuturi.
4. Cresterea tumorilor necesita formarea unor noi vase de sange care s alimenteze continuu
celulele ce se multiplica.
a. n lipsa unui supliment de sange, metastazele pot creste doar foarte puin pn
cnd celulele din interiroul lor incep s moara.
b. Majoritatea tumorilor pot induce formarea unor noi vase de sange, adica stimuleaza
procesul numit angiogeneza. Stimularea angiogenezei de ctre tumori este posibila datorita
secreiei de factori de crestere angiogenica (precum bFGF) i a factorilor de crestere endoteliala
(VEGF).
Posibilitatea de a incetini cresterea tumorilor prin inhibarea angiogenezei este
un o directie noua de cercetare a cancerului. n diverse faze de testare (de laborator sau
clinice) se afla o serie de agenti antiangiogenici capabili de reducerea angiogenezei prin
legarea i blocarea factorilor proangiogenici (legarea VEGF de ctre endostatina) sau
prin inhibarea secreiei lor ca urmare a aciunii la nivel genomic sau prin blocarea
receptorilor celulari pentru factorii proangiogenici (hormoni corticosteroizi)
5. Celulele tumorale trebuie s evite moartea celular programata (apoptoza) i atacul
celulelor din sistemul imunitar. Aceste piedici sunt contracarate prin activarea unor
oncogene- gene ale caror expresie suprima genele implicate n apoptoza celulelor tumorale
(gena p53), stimuleaza formarea i diferentierea vaselor de sange tumorale, sunt
responsabile pentru exprimarea unor molecule de recunoastere (citokine) pentru a nu fi
recunoscute ca celule straine, pacalind astfel celulele sistemului imun (macrofage)

6.9.2.Caresuntcauzeleapariieicancerului?
113

Declansarea cancerului (dereglarii ciclului celular) se produce n urma mutatiilor genetice. O singura
mutaie a unei gene este o condiie necesar dar nu suficienta pentru a converti o celula sanatoasa n una
canceroasa. Este nevoie de producerea simultana sau n timp a catorva mutatii rare. Procesul inducerii starii
de cancer se numeste oncogeneza.
Mutatiile genetice se produc regulat (spontan) n celule la o rata de 10-6 per gena per diviziune
celular. [Prezenta agentilor mutageni (raze UV, diversi compui chimici) cresc rata mutatiilor genetice!].
Odata cu inaintarea n varsta creste riscul de apariie a cancerelor din cauza acumularii mutatiilor genetice.
A. n laborator, ADN izolat dntr-o celula tumoral, cnd este introdus ntr-o celula normala poate
cauza transformarea acesteia . Celulele transformate prezint alterari ale ratei de crestere i ale morfologiei
(aspectului). Spre deosebire de celulele normale care cresc pn cnd epuizeaza nutrientii din mediu sau se
ating unele pe altele (conflueaza), celulele transformate isi pierd inhibitia de contact, cresc exagerat i incep
s se aglomereze unele peste altele.
B. Transformarea celulelor n laborator este o tehnica folosita pentru a izola i identifica genele
implicate n oncogeneza.

In celule izolate de soarece se introduc fragmente mici de ADN (cu 1-2 gene), izolat din tumori umane.
Celulele de soarece care prezint o crestere neobisnuita sunt apoi izolate iar ADN-ul celulelor transformate
este extras.
In continuare este izolat un fragment i mai mic de ADN i transformarea este repetata pentru a restrange aria
de cautare n ADN.
ADN care produce cea de-a dou transformare este clonat apoi intr-un bacteriofag (virus bacterian) care este
utilizat pentru a infecta bacterii.
Bacteriile transformate cu ADN uman cauzator de cancer sunt cultivate pentru a obtine o biomasa suficienta
pentru izolarea unei cantitati detectabile de ADN bacteriofagic.
In final ADN-ul este izolat i secventiat pentru identificarea genei umane.

Prin metoda descrisa mai sus s-au izolat cateva gene precum cea pentru proteina Ras. S-a constatat ca
aceasta gena avea o mutaie n urma creia proteina Ras anormala rmnea blocata ntr-o stare legata de
GTP. n aceasta stare proteina Ras rmne activata fiind un permanent semnalizator pentru cresterea celular,
chiar i n absenta semnalelor reale date de factorii de crestere. n aceast situaie celula devine canceroasa
deoarece nu se mai opreste din multiplicat. Proteina Ras mutanta este intalnita n circa 30% din cazurile de
cancer i mai ales n cancerul pancreatic i cel de vezica urinara .
Genele care codific factori de declansare a cancerului se numesc oncogene. Ele sunt prezente n
genom ca proto-oncogene exprimand proteine normale, implicate n desfurarea functiilor celulare. Protooncogenele n urma unor mutatii, pot declansa anomalii ale ciclului celular.
C. Cancerul progreseaza ntr-o maniera multifazica. Ipoteza multifazica a declansarii cancerului susine
ca:

I. ntr-o prim etap o mutaie confer unei celule un uor avantaj n cretere, rezultnd o clon de
celule

II. in a dou etap, una din celulele acestei aglomerri sufer o a dou mutaie care ii permite o cretere
i mai puin controlat formnd tumoarea benign
III. a. treia mutaie care apare ntr-una din celulele tumorii benigne ii permite s depeasc rata de
cretere a celorlalte celule atingndu-se stadiul de tumoare pre-canceroas
IV. a patra etap const ntr-o mutaie a unei celule din tumoarea pre-canceroas care ii permite
evadarea din esut, ptrunderea n circulaia sangvin i limfatic i metastazarea.
n timp, odata cu acumularea mutatiilor, o tumoare benigna poate deveni maligna.

114

Biologie Celulara

O dovad experimental n sprijinul ipotezei multifazice este obsevaia c oarecii care supraexprim
proto-oncogena myc prezint un risc usor crescut de e dezvolta cancer n timp. Prin ncruciarea a doi oareci
transgenici, unul cu proto-oncogena myc supraexprimat iar cellalt cu proto-oncogena ras mutant,
descendenii dezvolt cancer n 100% din cazuri.
Exista dou tipuri de gene implicate n apariia strii de cancer: proto-oncogenele (de care am amintit
anterior) i genele de supresie tumoral). Spre deosebire de oncogene a cror exprimare este cauzat de o
mutaie, genele de supresie tumoral induc starea de cancer atunci cnd expresia lor este inhibat ca urmare a
mutaiei.
Proto-oncogenele care sufera mutatii devin oncogene i supraexprima proteine mutante
cauzatoare de cancer. Genele de supresie tumoral care sufera mutatii, sunt inhibate iar factorii supresori ai
tumorii nu mai sunt exprimati, permitand dereglarea ciclului celular.
In afara mutatiilor spontane care pot aparea la un moment dat n proto-oncogene, apariia oncogenelor poate
fi cauzata de aducerea ei de ctre un virus (oncogene virale). Astfel unii retrovirui i adenovirui contin
material genetic care includ i oncogene. De exemplu virusul sarcomului Rous este un retrovirus care
infecteaza puii. El contine o oncogena numita v-Src, altfel inutila pentru multiplicarea virusului. n genomul
puilor exista ns o proto-oncogena c-Src ce codific un receptor tirozin-kinazic. Oncogena v-Src, fiind foarte
apropiaa (omoloaga) ca structura de c-Srcse incorporeaza usor n genomul cazda i acioneaz ca oncogen,
declannd boala.
In cazul cancerelor umane se cunosc att adenovirusuri (papilomavirusul uman responsabil de
cancerul de col uterin, virusul hepatitei B, virusul herpetic Epstein-Barr) cat i ribovirusuri (virusul hepatitei
C, virusul leucemiei limfocitelor T).
Genele de supresie tumoral codific proteine care funcioneaz pentru a stopa proliferarea celular.
Pierderea funciei acestora contribuie la declanarea cancerului prin eliminarea activitii de frnare a
proliferrii. n multe cazuri genele surpesoare de tumori codific proteine de control al ciclului celular (vezi
Capitolul 6. Ciclul i diviziunea celular). proteinele de supresie tumoral pot fi:
a) proteina care inhiba sau regleaz progresia ciclului celular;
b) receptori pentru proteine de secreie care inhiba proliferarea celular (ex TGF-beta);
c) proteine implicate n adeziunea celular (ex: cadherinele) [90% din carcinoamele umane prezentand
o descrestere a expresiei E-cadherinelor];
d) Proteine de control care aresteaza ciclul celular n cazul n care ADN este replicat incorect sau
cromozomii nu se formeaza normal (ex: proteina p53);
e) Proteine care declanseaza moartea celular programata (apoptoza);
f) Enzime implicate n repararea ADN.
O singura copie a genei (care se afla n dublu exemplar) este suficienta pentru exprimarea proteinei ce
controleaza ciclul celular. Dereglarea ciclului celular are loc numai daca ambele gene (alele) de supresie
tumoral sunt inhibate.
Canceruldesanereditaresteoboalamostenitancaredescendentiimanifestaopredispotitiemarita
pentru cancer mamar. El apare datorita unei mutatii a genei de supresie tumoral BRCA1. femeile care
mostenescosinguracopiemutantaageneiBRCA1au60%probabilitatedeadezvoltacancermamarpnla
varstade50deani.OsinguramutaiengenaalelaBRCA1poatesuprimantotalitateexpresiaproteinei
codificte.FemeilecaremostenescdougenenormaleBRCA1audoar2%probabilitatedeadezvoltacancer.

Alte forme de cancer cu posibile cauze ereditare este cancerul uman colorectal i polipoza
adenomatoasafamiliala(FAP)cufrecventadepnla1/7000nS.U.A.Cauzaacesteiformedecanceresteo
mutaie n gena de supresie tumoral APC. Gena APC mutanta poate fi transmisa urmasilor. Gena APC
codificoproteinacareinhibafactoruldetranscriptieBetacatenina.Betacateninaseleagistimuleazala
115

rnduleidiversifactorideclansatoriaimitozei.nabsentaproteineicodifictedeAPC,mitozasedesfasoara
necontrolat. Ca urmare a proliferrii celulare apar polipii (tumori precanceroase). O mutaie ulterioara (a
uneiprotooncogeneras)determinatransformareapolipilornadenomdeclasaII.Dacaunadintrecelulele
adenomului format sufera o noua mutaie (la nivelul unor gene codifictoare de proteine de adeziune),
descendentii acesteicelulevorpierdeinhibitiadecontactformandunadenomdeclasaIII(incabenign).O
nouamutaiecareafecteazagenadesupresietumoralp53determinaapariiatumoriimaligne(carcinom).
Mutatiaimediaturmtoarepoatedeclansametastaza.
Canceruldecolonpoatefiprevenitprinverificariregulateiindepartareachirurgicalaapolipilor.

6.9.3.Depistareaitratareacancerului
Identificareatimpurieapredispozitieilacancer
Metodele moderne de identificare i depistare precoce a riscului de cancer constau n principal n
descoperirea markerilor de boala. Unul dintre acesti markeri este integritatea genei pentru proteina p53.
S-a constatat ca un marker (compus al crei prezenta sau absenta indica o anumita stare patologica a celulei)
frecvent intalnit n celulele canceroase este proteina p53. p53 este un reglator al ciclului celular,
monitorizand trecerea de la faza G1 la S i contribuind la procesele reparatorii ale ADN. De asemenea p53
este implicat n cascada de evenimente ce precede moartea celular programata.
Mutatia ambelor gene alele (omoloage) pentru p53 este observata n numeroase cazuri de cancer. O
forma de observare a predispozitiei pentru cancer este prelevarea de celule de la pacient i secventierea genei
p53 pentru urmarirea mutaiei. Daca o copie a genei p53 este mutanta atunci riscul pacientului testat de a
dezvolta diferite forme de cancer (cancer mamar, pulmonar, al ochilor etc) este mare.
Cancerulcoluluiuterinesteputernicasociatcupapilomavirusuluman(HPV).90%dincazurilede
cancer de col uterin sunt provocate de acest virus. Celulele infectate cu acest virus manifest o proliferare
sporit i invadeaz suprafaa intern a uterului (fenomen numit displazie). Ele se insereaz intre celulele
dermice, bogate n keratin i bine difereniate. Ulterior aceste celule anormale se grupeaz formnd polipi
(tumoriprecanceroase).
Testul de laborator Papanicolaou (sau PAP) const n prelevarea de celule de pe suprafaa
cervixuluiuterin,colorareaianalizalorsubmicroscop.Punctuldeinterespentruinvestigatoresteaspectul
matur sau imatur al celulelor precum i dimensiunea nucleului. Celulele normale sunt difereniate, au
dimensiunimariinucleimici,foartecondesai.nschimbceluleletumoraleprezintunaspectimatur,sunt
nedezvoltate,aucitoplasmapuininucleufoartemare,pregtitpentrudiviziune.naceststadiudisplazia
(arii cu celule tumorale) poate rmne localizat sau poate regresa. Uneori ns displazia poate evolua
periculos spre carcinom in situ n acest caz ntregul epiteliu al cervixului uterin este acoperit de celule
neoplazice. Indepartarea chirurgical a polipilor i a uterului este recomandat pentru scderea riscului de
metastaz.
Tratamentulcancerului
In unele cazuri, indepartarea chirurgicala a tumorilor maligne nu este suficienta pentru inlaturarea
completa a riscului de metastaza. n funcie de gravitatea cazurilor se recomanda aplicarea de tratamente
combinate (radioterapie - raze UV scurte, chimioterapie medicamente care tintesc diverse componente
celulare, molecule implicate n caile de declansare a proliferrii celulare etc).
Radioterapia cu radiatii ionizante (UV scurte, X, gamma) are ca efect denaturarea ADN din celulele
proliferante. n aceste condiii celulele tumorale a caror ADN este mai susceptibil la distrugere sunt stopate n
proliferarea lor. Dezavantajul este ca nu numai celulele neoplazice sunt distruse ci i celulele normale care
prolifereaza.
Chimioterapia const n utilizarea unor medicamente capabile de :
stoparea formrii fusului mitotic (citostatice precum: taxolul, colchicina etc);
116

Biologie Celulara

[Dezavantajul utilizrii acestor medicamente este apariia rezistentei primare i secundare la

medicamente datoritat activitii pompelor de tip ABC, a caror structura a fost discutata n Capitolul 3]
- stimularea celulelor sistemului imunitar (limfocite) care ataca celulele tumorale (ex. citokine
precum interleukina IL-12)
- inhibarea angiogenezei (ex.hormoni corticosteroizi, interferoni)
- inhibarea factorilor de crestere
- inhibarea pompelor de eflux de tip ABC (MDR) (ex. Verapamil, diferiti analogi ai ciclosporinei)
- inducerea apoptozei celulelor tumorale ( interleukina IL-13)
Terapia cu anticorpi monoclonali const n utilizarea unor anticorpi specifici anti-antigene asociate
membranelor celulelor tumorale (ex anticorp anti-gangliozid GD3 asociat cu suprafaa celulelor de
melanom).
Terapia genic const n transferul de material genetic n celule cu scopul de a transforma fenotipul
celular canceros n fenotip celular normal sau de a suprima funcia oncogenelor. Materialul genetic
este introdus fie prin diferite sisteme de transport de natura viral (capsul viral sau virusuri
atenuate) sau de natur non-viral (diferii polimeri, liposomi).
Aspirina are aciune inhibitoare asupra ciclooxigenazei, enzim implicat n calea sintezei
prostaglandinelor, compui lipidici care intervin n multiple evenimente celulare (mitoza, adeziune celular,
apoptoza). Ciclooxigenaza are concentraii ridicate n tumorile colorectale astfel c inhibarea ei de ctre
aspirina este asociaa cu scaderea de pn la 50% a riscului de cancer metastazat de colon.

Bibliografie
CRCIUN, C., Citologie General, Ed. Risoprint, Cluj-Napoca, 2005, p. 161-163
MIXICH, F., Biologie celular i molecular, Editura Aius, Craiova, 1999, p. 253-275, 277-300

7.Semnalizareacelular

oate celulele, indiferent dac aparin unor organisme unicelulare sau triesc ntr-un sistem pluricelular,
sunt permanent bombardate de o multitudine de semnale. Una dintre proprietile eseniale ale viului este
de a detecta i de a rspunde semnalelor din mediu, cu consecine cruciale pentru supravieuire. Principiile i
componentele de baz ale semnalizrii celulare sunt similare n tot spectrul de organisme: bacterii, fungi,
plante sau animale.
Semnalizarea celular nu este important doar pentru nelegerea funcionrii unei celule normale ci
i pentru nelegerea creterii i activitii unei celule aberante sau a supuse unor factori perturbatori.

Principiiledebazalesemnalizriicelulare
Evenimentul declanator al mecanismului de semnalizare celular este sosirea la nivelul celulei a
unui stimul care oblig celula s rspund. Acest stimul poate fi un foton ca n cazul celulelor din retina
ochiului. Stimulul poate avea i o natur chimic, un compus eliberat fie de un alt organism, fie de o alt
celul aflat n acelai organism. Cele mai multe semnale sau stimuli sunt percepui la nivelul membranei
plasmatice, dup un scenariu prezentat n Fig. 7.1.

117

NUCLEU
Expresie
genic

Traducerea
semnalului

PLASMATIC

Stimul
primar
MEMBRANA

Fig. 7.1. Principalul eveniment n

semnalizarea celular, sosirea
semnalului la suprafaa celulei, este
urmat de o cascad de evenimente
n urma crora mesajul este
purtat la destinaia final, fie n
nucleu, fie n citoplasm.

Proteine noi

Metabolism
(contracia
muscular, etc)

Sosirea semnalului este succedat de

urmtoarele evenimente:
CITOPLASM
recepia semnalului, de
obicei realizat de ctre
proteine denumite receptori;
transmiterea semnalului de ctre receptor n interiorul celulei;
traducerea mesajului prin intermediul unor componeni ai semnalizrii celulare, de regul grupai
n cascada de semnalizare celular sau n traducerea semnalului (Fig. 7.1);
sosirea mesajului la destinaia final n celul;
rspunsul celulei, o aciune realizat n concordan cu semnalul recepionat. n figura de mai sus,
un semnal iniial declaneaz modificri ale activitilor metabolice din citoplasm respectiv ale
expresiei genice din nucleu.
Cteva aspecte generale privind semnalizarea i rspunsul celular sunt de reinut.
(1) Un stimul unic poate declana mai multe rspunsuri simultan, datorate activrii mai multor cascade de
semnalizare. Aceste cascade de semnalizare pot avea componente comune cu a altor cascade.
De exemplu, hormonii care declaneaz activarea fosfolipazei C iniiaz att cascada inozitol
trifostaului ct i cascada kinazic
(2) O cantitate redus de stimul poate sensibiliza celula pentru a declana un rspuns consistent.
De exemplu, rspunsul la un numr mic de molecule de hormoni ajunse la suprafaa celulei necesit
activarea unui mare numr de enzime i de aceea prezena unor elemente de amplificare este
necesar n sistem.
(3) Celulele trebuie s fie selective cu stimulii, fiind n permanen asaltate de mii de astfel de semnale
chimice. Celulele nu-i permit luxul de a accepta toate semnalele n acelai timp. Ele nu rspund tuturor
semnalelor prezente n mediu ci mai degrab unui numr limitat. Anumite semnale sunt percepute doar
de un anumit tip de celule, n timp ce celulele nvecinate pot rmne pasive.
De exemplu, doar celulele sistemului imun la mamifere rspund unui atac al germenilor patogeni, iar
nu toate celulele corpului.

Caracteristicileunuistimul
n natur existo o varietate enorm de stimuli, de la molecule proteice de diverse dimensiuni, la
compui gazoi. O proprietate esenial a unui stimul este specificitatea sa. Celula care detecteaz stimulul
trebuie s fie capabil s primeasc i s rspund la mesajul corect purtat de acel stimul.
118

Biologie Celulara

Pentru a fi efectiv, semnalul trebuie s aib dimensiuni mici, capabil de a circula cu uurin de la
locul de sintez la locul de destinaie. Semnalele extracelulare sunt purtate, de exemplu, cu ajutorul
sistemului vascular. Semnalele intracelulare ns trebuie s fie suficient de mici pentru a difuza (pe cale
simpl sau facilitat) prin membranele care nconjoar diversele organite celulare. Unele semnale de mari
dimensiuni (proteine mari, lipide) nu sunt capabile de a circula pe distane lungi.
Semnalele, fie extra- sau intracelulare trebuie s fie rapid i uor de produs, mobilizat i degradat,
astfel nct rspunsul celular s fie pornit sau oprit cu rapiditate.
Exist dou ci majore de producere rapid a unui semnal: (a) pe cale enzimatic un semnal poate
fi sintetizat de regul dintr-un substrat larg rspndit, uor accesibil (de exemplu din ATP); (b) cu pornire de
la o molecul precursoare (pre-semnal) care este produs permanent i depozitat n anumite structuri de
unde este eliberat la nevoie.

sau

(a)

(b)

Fig. 7.2. Cile majore de sintez rapid a semnalelor. (a) calea enzimatic, din substrate accesibile (de
exemplu sinteza cAMP din ATP), respectiv (b) sinteza sau sechestrarea unor pre-semnale ce vor fi eliberate
sub form de semnale atunci cnd situaia o cere (de exemplu, eliberarea ionilor de Ca2+ din RE n citosol)
n general, prima cale de sintez a semnalelor este des ntlnit n cazul semnalizrii intracelulare iar
cea de a doua, n cazul semnalizrii extracelulare.
La fel de important precum sinteza este i degradarea sau sechestrarea semnalului. n celul exist
un echipament enzimatic capabil de activarea-inactivarea semnalelor, iar n general enzimele implicate n
aceste procese fac parte din grupa fosfatazelor i kinazelor. Alte aspecte ale opririi rspunsului celular pot
implica diminuarea sintezei receptorilor i inhibarea expresiei genelor ce declaneaz rspunsul.

Ciledesemnalizarecelular
n funcie de distana dintre celula generatoare de semnal i int exist mai multe clase de
semnalizare aa cum sunt prezentate n tabelul de mai jos.
Tabel 7.1. Tipurile de semnalizare ce au loc ntr-un organism i distanele la care semnalele pot fi efective
Clasa de semnalizare
Electric

Intervalul de semnalizare
ntr-un organism
Distan lung

Endocrin
Paracrin
Contact celul-celul

Distan lung
Distan scurt
Celule nvecinate

Autocrin

Aceeai celul

Observaii
Propagarea unui potenial electric de-a lungul
unei celule (ex. celula nervoas)
Eliberarea i recepia hormonilor
Eliberarea i recepia semnalelor extracelulare
Fie prin semnalizare mediat de receptori fie
prin jonciuni de comunicare (animale) sau
plasmodesme (plante)
Utilizarea semnalelor difuzibile

119

Semnalizarea electric sau sinaptic

Este o modalitate rapid i eficient de semnalizare pe distane lungi. Ea are loc prin modificarea
potenialului electric transmembranar i este utilizat de celulele neuronale din sistemul nervos. Celulele
neuronale prezint prelungiri (axoni i dendrite) care sunt n contact cu prelungirile altor celule neuronale
prin intermediul sinapselor. Transmiterea electric are loc de-a lungul suprafeei prelungirilor neuronale, pn
la nivelul sinapselor. Aici transmiterea semnalului se face fie pe cale electric fi pe cale paracrin (vezi mai
jos).
Semnalizarea endocrin
Se bazeaz pe sinteza de molecule-semnal de ctre celule specializate, transportul moleculelor pe
distane lungi i recepia semnalelor de ctre celule-int. Este o modalitate de control la distan a activitii
unor esuturi i organe de ctre esuturi specializate (de ex. glande hormonale). Deoarece circulaia prin
sistemul vascular (snge, la animale sau sev, la plante) este relativ lent i nespecific, semnalizarea
endocrin realizeaz un control de durat, determinnd rspunsuri ntrziate i prelungite. Reglajul hormonal
la plante si animale are la baz semnalizarea endocrin.
Semnalizarea paracrin
n acest caz semnalele elaborate de anumite celule sunt detectate de celule-int apropiate.
Transportul moleculelor-semnal n semnalizarea paracrin este puternic limitat de degradri enzimatice, de
imobilizarea sau preluarea lor de alte celule nvecinate. Transmiterea semnalelor la nivelul sinapselor (unde o
celul nervoas elibereaz molecule numite neurotransmitori, preluate rapid de celula neuronal adiacent)
i rspunsul imun (n care o varietate de celule sangvine albe elibereaz citokine i chemokine care
moduleaz activitatea altor celule albe i a unor celule locale) sunt dou exemple de semnalizare paracrin.
Semnalizarea autocrin
Este asemntoare celei paracrine dar n acest caz, celula productoare de semnal este celul-int n
acelai timp. Comportamentul autocrin este ntlnit la celulele n curs de cretere i difereniere care produc
hormoni sau factori de cretere. Odat ce a fost stabilit direcia de specializare, un sistem autocrin este
declanat iar celula se autostimuleaz pentru a urma acea direcie. Semnalizarea autocrin este, de asemenea,
ntlnit i la celulele tumorale care produc hormoni de cretere ce stimuleaz creterea i proliferarea
necontrolat.
Semnalizarea direct celul-celul
Este prezent la celulele care se gsesc n contact fizic i se realizeaz fie prin sinteza de molecule de
recunoatere cu localizare pe suprafaa celulei (markeri moleculari), fie prin comunicarea direct prin arii
specializate (cum ar fi jonciunile de comunicare, la animale, respectiv plasmodesmele, la plante).

Amplificareacascadeidesemnalizare
Mecanismul traducerii semnalului de la o celul la alta i apoi n interiorul celulei-int necesit
formarea unui lan de molecule semnal, fiecare trecnd mesajul urmtoarei molecule din lan. Un semnal
extracelular (numit mesager primar) recepionat de o celul, conduce la apariia temporar a unor molecule
mai mici n interiorul celulei, numite mesageri secundari. Mesagerii intracelulari activeaz sau altereaz
activitatea urmtorului component al cii de traducere, de exemplu, o kinaz.
Mesageri secundari bine studiai sunt cAMP (AMP ciclic), IP3 (inozitol trifosfat), DAG
(diacilglicerol) i ionii de Ca2+.
O caracteristic important a cascadei de semnalizare este capacitatea de amplificare a semnalului
original, astfel nct rezultatul final este un rspuns eficient al celulei-int.

120

Biologie Celulara

Receptori

Ligand

Receptor

Cu alte cuvinte, legarea unei

molecule de hormon (ligand) de un receptor
membranar va duce la activarea unui mare
numr de molecule enzimatice (Fig. 7.3)
declannd o cascad de semnalizare
amplificat. Astfel este cazul concret al
activrii proteinelor G de ctre hormonii
hidrofili. n continuare proteinele G vor
activa cteva adenilil-ciclaze. Fiecare
enzim ciclazic va cataliza formarea a
numeroase molecule de cAMP (mesager
secundar) cu pornire de la ATP. cAMP la
rndul lor vor activa mai multe kinaze care
vor fosforila un mare numr de proteine,
cauznd amplificarea n continuare a
semnalului. Astfel, legarea unei singure
molecule hormonale de suprafaa celular
poate activa sute sau chiar mii de enzime de
molecule enzimatice care, fiecare, pot
cataliza mai multe reacii.
Cascadele de semnalizare celular
nu formeaz, de regul, ci izolate, cu rute
definite, mergnd de la un stimul la un
singur rezultat final. Cele mai multe
molecule semnal au efect asupra mai multor
cascade de semnalizare, stimularea unui
alement dintr-un lan de traducere poate
activa elementele uneia sau mai multor
cascade de semnalizare (Fig. 7.4).

Amplificare

Enzim
Amplificare

Mesager secundar

Mesager
secundar

Mesager secundar

Amplificare
Kinaz

Kinaz

Kinaz

Amplificare

Fosforilare

Fosforilare

Fosforilare

Amplificare

Enzim activat
care produce multe Enzim activat
care produce
molecule
multe molecule

Enzim activat
care produce multe
molecule

Fig. 7.3. Exemplificarea modului n care are loc

amplificarea n cascada de traducere a semnalului

Efect

Efect
Efect

Fig. 7.4. Reeaua cascadelor de semnalizare

Semnaleleextracelulare
Comunicarea dintre celule aflate la o distan oarecare se realizeaz prin intermediul unor semnale de
natur chimic. Din aceast categorie fac parte hormonii (prezeni att la animale ct i n plante), citokinele,
factorii de cretere, neurotransmitorii, etc. Natura i proprietile lor fizico-chimice le oblig s urmeze
anumite ci de transmitere i semnalizare celular (endocrin, paracrin sau autocrin). Adeseori, disfuniile
datorate absenei sau excesului de semnale extracelulare sau deficitului de receptori pot declana stri
patologice n organism.
Hormonii
Hormonii animalelor au fost primele molecule-semnal extracelulare studiate i, totodat sunt cele mai
bine cunoscute. Hormonii sunt produi n permanen de anumite organe specializate (glande), ptrund n
121

sistemul circulator i inund practic ntreg organismul, ajungnd pn la cele mai ndeprtate celule
(semnalizare endocrin). Chiar dac aproape toate celulele vin n contact cu hormonii, doar cele care posed
receptori specializai pot traduce mesajul purtat de hormon i pot emite un rspuns adecvat semnalului.
n funcie de natura chimic i localizarea receptorilor, hormonii pot fi mprii n cteva clase:
- hormoni mici hidrosolubili;
- hormoni peptidici;
- hormoni lipidici cu receptori pe suprafaa celular i
- hormoni lipidici cu receptori intracelulari
Din categoria hormonilor mici hidrosolubili fac parte histamina i epinefrina (adrenalina) i ei nu
pot strbate membrana plasmatic datorit ncrcturii lor electrice la pH-ul fiziologic.
Hormonii peptidici sunt hidrosolubili. De obicei eliberarea lor este rapid deoarece n celul sunt
depozitai n interiorul vacuolelor de unde, la nevoie, sunt externalizai prin exocitoz. Un exemplu cunoscut
de hormon peptidic este insulina.
Hormonii de natur lipidic pot fi recunoscui de receptori aflai la suprafaa celulei (ca n cazul
hormonilor hidrosolubili) sau ptrund prin bistratul lipidic pentru a ajunge la receptorii intracelulari
specializai. Principalul grup de hormoni lipofilici cu receptori extracelulari sunt prostaglandinele iar
hormonii cu receptori intracelulari fac parte din clasa hormonilor steroidici (estrogeni, progesteron,
androgeni, glucocorticoizi, cortizol i vitamina D), tiroidieni (tiroxina) i precursorilor retinoidici (vitamina A
sau retinolul).
Hormonii plantelor (fitohormonii sau factorii de cretere ai plantelor)
Denumirea de hormoni n cazul plantelor este relativ deoarece diversitatea chimic a compuilor
implicai n creterea, fototropismul (micarea n funcie de direcia luminii) i rspunsul la stress al plantelor
este foarte mare. Din aceast categorie amintim auxina (avnd un nucleu indolic), citokininele (cu nucleu
adenilic), giberelinele, acidul abscisic i etilena (compus gazos).
Citokinele i chemokinele
Sunt un grup extrem de divers de molecule peptidice cu mas molecular mic (6-60 kDa) i cu
efecte dintre cele mai variate i profunde. Citokinele i chemokinele sunt produse de un mare numr de celule
i au efect doar asupra celulelor nvecinate sau a celor care le sintetizeaz (semnalizare paracrin i
autocrin). Dintre citokinele mai cunoscute amintim interleukinele, interferonii, factorii de necroz tumoral.
Chemokinele sunt o superfamilie de peptide grupate pe baza unui caracter chimic comun: prezena unei
secvene conservate coninnt patru resturi de cistein.
Factorii de cretere
Sunt compui care au funcie specific n reglarea creterii i diferenierii celulare. Peste 50 de
proteine sunt cunoscute ca avnd proprietile unui factor de cretere (de exemplu, PDGF, factorul de cretere
derivat din plachete, EGF factorul de cretere epidermal, FGF factorul de cretere al fibroblastelor).
Neurotransmitorii
Sunt compui specifici terminaiilor neuronale unde exercit o funcie paracrin. Acest grup include
acetilcolina, acidul gamma-aminobutiric (GABA) i dopamina.
Alte molecule semnal extracelulare sunt:
- feromonii , molecule secretate de un individ i avnd efect asupra unui alt individ din aceeai
specie; feromonii sunt semnale folosite n comunicarea dintre bacterii, mucegaiuri, nevertebrate
i vertebrate. Structura chimic a feromonilor este divers, incluznd derivai ai aminoacizilor,
peptide, proteine i acizi grai.
- ATP este produs n principal prin procesul de fosforilare oxidativ n mitocondrii. Prezena sa n
mediul extracelular este accidental, rezultnd n urma lezrii sau morii celulelor. Apariia ATP
n fluidele extracelulare este perceput de o serie de celule cu receptori de suprafa specializai
(purinoceptori), aa cum sunt trombocitele (plachetele sangvine), neutrofilele, fibroblastele
(celule stem ) celule musculare netdede i celulele din pancreas.

Deteciasemnalelorextracelulare:rolulreceptorilor
122

Biologie Celulara

Detecia unei molecule-semnal la suprafaa sau n interiorul celulei poate fi realizat de un receptor
(molecul proteic, de regul cu localizare membranar) caz n care molecula-semnal joac rolul de ligand.
Concentraia moleculelor-semnal n mediul extracelular este n general foarte mic (10-8 M). Celulele
trebuie s fie capabile s detecteze i s rspund unor astfel de concentraii reduse. n plus, suprafaa celular
este permanent i simultan asaltat de o multitudine de semnale dintre care numai o parte prezint interes
pentru celul. Abilitatea de discriminare i legare a moleculelor-semnal importante pentru viaa celulei se
realizeaz prin exprimarea receptorilor specializai, att pe suprafaa celulei ct i n mediul intracelular
(citoplasm i nucleu).
Pentru a fi eficieni, receptorii ndeplinesc trei criterii cruciale:
- specificitate,
- afinitate de legare ajustat n asemenea msur nct s detecteze molecula-semnal la
concentraia cea mai probabil s existe n preajma celulei;
- capacitate de transmitere a mesajului pentru care semnalul este desemnat, de regul prin
modularea unor componente care intr n cascada de semnalizare.

Tipuridereceptori
n discordan cu diversitatea semnalelor extracelulare, majoritatea receptorilor celulari se grupeaz
n cinci clase:
- receptori legai de proteine G;
- receptori legai de canale ionice;
- receptori cu activitate enzimatic intrinsec;
- receptori legai de tirozin-kinaze i
- receptori intracelulari.
Primele patru clase sunt receptori cu localizare pe faa extern a membranei plasmatice (receptori
extracelulari).
Avnd n vedere diversitatea de molecule-semnal, a cilor de transmitere a semnalelor, natura i
localizarea receptorilor, exist numeroase modaliti de semnalizare celular. Dac anterior am amintit n
principal aspectele comune semnalizrii celulare la diferite organisme, n cele ce urmeaz vom prezenta
procesul de semnalizare celular n cteva exemple concrete.

1. Cascade de semnalizare mediate de nucleotide ciclice (AMPc i GMPc)

n 1971, premiul Nobel pentru medicin a fost atribuit lui E.Sutherland pentru identificarea AMP
ciclic (AMPc) ca mesager secundar n semnalizarea hormonilor hidrofilici (peptidici i catecolaminici).
Hormonul nsui constituie mesagerul primar ntr-un proces n care legarea sa de un receptor membranar
declaneaz o cascad de semnalizare amplificat.
S-a constatat experimental c legarea unui hormon hidrofilic de un receptor membranar este urmat
n scurt timp de creterea concentraiei de AMPc i un rspuns celular constnd, de exemplu, n accelerarea
glicogenolizei.
Etapele cascadei de semnalizare celular amplificate cu participarea AMPc ca mesager secundar pot fi
rezumate astfel:
a) Un complex proteic cu activitate GTPazic (guanozin trifosfat hidrolazic), numit proteina G este
activat ca urmare a legrii hormonului de receptorul membranar.
n stare inactiv, proteina G este un trimer constituit din trei subuniti, , i , n care subunitatea
cu aciune catalitic, , este legat de GDP. Proteina G inactiv este ataat pe faa citoplasmic a
receptorului membranar. Forma activ a proteinei G este reprezentat de
AMPc
monomerul legat de GTP.
b) Proteina G activat va determina activarea adenilat-ciclazei, o
enzim cu localizare pe faa citosolic a membranei plasmatice.
c) Adenilat-ciclaza utilizeaz ca substrat ATP pentru a genera
molecule de AMPc.
123

d) Odat generat, AMPc funcioneaz ca un mesager secundar, transmind informaia hormonului

unei cascade de semnalizare celulare. AMPc activeaz la rndul ei o serie de protein kinaze
dependente de AMPc. Un exemplu cunoscut de protein kinaze este protein kinaza A.
e) Protein kinaza A poate declana rspunsuri la nivel citosolic sau nuclear.
Citosolic, protein kinaza A (PKA) intervine de exemplu n reglarea metabolismului glicogenului
(forma de stocare a glucozei). PKA activ fosforileaz simultan dou enzime cheie: glicogen fosforilaza i
glicogen-sintetaza. Fosforilarea glicogen-fosforilazei duce la degradarea glicogenului la glucozo-1 fosfat n
timp ce fosforilarea glicogen-sintetazei determin inhibarea acesteia, deci incetarea sintezei glicogenului.
O schem a cascadei de semnalizare cu implicarea AMPc este redat n Fig. 7.5..
Hormon

Exteriorul celulei

Receptor

GDP

Adenilatciclaza

Citosol

GTP

ATP
PPi
AMPc
R

Protein kinaza A inactiv

cu 2 subuniti reglatoare (R) i
2 catalitice (C)

Protein
ATP

ADP

Protein kinaza A activ

Protein (P)
RSPUNS CELULAR (de ex.,
activarea glicogenolizei)
Fig. 7.5. Mecanismul de aciune al unui hormon activator al adenilat-ciclazei
La nivel nuclear, o parte a PKA active (subuniti catalitice desprinse de pe cele reglatoare) pot
fosforila un factor de transcripie numit CREB. Aceast protein se va lega la o secven reglatoare a unei
gene numit element de rspuns la AMPc sau CRE influennd expresia mai multor gene specifice. CREB
joac roluri importante n creterea i proliferarea celular, n nvare i memorare, etc.
AMPc are o via scurt n celul iar transformarea ei n AMP prin deciclizare este catalizat de o
enzim citosolic, fosfodiesteraza AMPc.
Un mesager secundar asemntor AMPc este GMPc, produs de guanilat-ciclaze. Stimularea acestor
guanilat-ciclaze de ctre semnale precum NO (oxid nitric) sau liganzoi peptidici poate declana diverse
rspunsuri celulare.

2. Cascade de semnalizare mediate de fosfolipide i Ca2+

Una din cile de semnalizare cele mai rspndite n celulele animale se bazeaz pe utilizarea
mesagerilor secundari provenii din fosfolipidul membranar fosfatidil inozitol 4,5 difosfatul (PIP2). Numeroi
hormoni i factori de cretere stimuleaz hidroliza PIP2 de ctre fosfolipaza C, o reacie din care rezult doi
124

Biologie Celulara

mesageri secundari: diacilglicerol (DAG) respecitiv inozitol 1,4,5-trifosfat (IP3). DAG i IP3 stimuleaz ci
de semnalizare diferite determinnd activarea proteinkinazei C respecttiv mobnilizarea Ca2+ din RE.
Hidroliza PIP2 este iniiat:
a) fie prin activarea fosfolipazei C (PLC) ca urmare a legrii hormonilor de receptori cuplai cu
proteine G,
b) fie prin activarea unei alte PLC (PLC) de ctre receptori cu activitate tirozin-kinazic specific.

Inozitol 1,4,5-trifosfat

Clivajul
fosfolipazei C
PIP2
(fosfatidil inozitol 4,5bifosfat)

Diacilglicerol

Diacilglicerolul (DAG) rezultat n urma hidrolizei PIP2, rmne ataat de membrana

plasmatic i activeaz kinaze serin/treonin specifice numite protein kinaze C (PKC). PKC au roluri
n rspunurile imune, n creterea i diferenierea celular, etc. Unele PKC activeaz o cascad de
proteine kinazice numite MAP kinaze, care prin fosforilarea factorilor de transcripie produc
schimbri n expresia genelor i stimularea proliferrii celulare. Calea MAP kinazic este o cascad
de semnalizare comun tuturor celulelor eucariote.
Hormon

GDP

Exteriorul celulei

GTP

PIP2

DAG

Protein kinaze C

Fosfolipaza
C

IP3

Protein
ATP

Reticul endoplasmatic

Protein-(P)
ADP

RSPUNS CELULAR
(ex, rspuns imun)

Ca2+

RSPUNS CELULAR
(ex, contracia muscular)
125

Fig. 7.6. Mecanismul de aciune al unui hormon activator al fosfolipazei C

Cellalt mesager secundar, inozitol trifosfatul (IP3), va fi eliberat n citosol. IP3 stimuleaz eliberarea
Ca2+ din RE prin legarea sa la receptori din membrana RE, care sunt n acelai timp i canale de Ca2+. Ca
urmare, nivelurile Ca2+ citosolic cresc foarte mult influennd activitile protein kinazelor i fosfatazelor.
Unele protein kinaze necesit pentru activare att prezena DAG ct i cea a Ca2+, astfel c aceste protein
kinaze sunt reglate n comun pe ambele ramificaii ale cii. Multe din efectele Ca2+ sunt mediate de
calmodulin, o protein care devine activ prin legarea acestui ion. Complexul Ca2+/calmodulin se leag de
o protein kinaz care realizeaz fosforilarea unuia din lanurile uoare ale miozinei, iniiind contracia actinmiozin. Alte protein kinaze activate de complexul Ca2+/calmodulin fosforileaz enzime metabolice, canale
ionice i factori de transcripie.
Una din modalitile de semnalizare, prin care se realizeaz controlul creterii i polarizrii
celulare a fost deja discutat la capitolul despre citoschelet (rolul PIP2 n medierea dinamicii
microfilamentelor de actin).
O schem comun privind mecanismul de semnalizare prin intermediul fosfolipidelor este
prezentat n Fig. 7.6.
Cile de semnalizare amintite pn acum sunt tipice moleculelor-semnal care se leag de un receptor
membranar, urmat de traducerea mesajului n interiorul celulei. Mai jos vom reda cteva informaii
privitoare la semnalele recepionate n citosol.

3. Alte ci de semnalizare
n general hormonii hidrofobi sunt transportai prin plasma sangvin de ctre proteine specifice de
care se disociaz la nivelul membranei celulei-int. Unii hormoni liposolubili au receptori membranari ca n
cazul prostaglandinelor i a factorului de activare plachetar (PAF). Ali hormoni lipidici au receptorii situai
n citosol sau n nucleu, ca n cazul hormonilor steroidici, a tiroxinei i acidului retinoic.
Fiind lipofili hormonii steroidici i tiroxina sunt solubili n membranele lipidice, difuznd cu uurin
n interiorul celulelor int unde interacioneaz cu receptorii lor. Receptorii hormonilor tiroidieni au
localizare nuclear iar cei ai hormonilor steroidici, localizare citosolic.
Receptorii citosolici ai hormonilor steroidici se gsesc n stare inactiv, fiind legai de o protein
inhibitoare. n prezena hormonilor steroidici, receptorii citosolici se disociaz de proteina inhibitoare i se
leag de molecula-semnal. Complexul hormon-receptor este activat i ptrunde n nucleu unde i exercit
aciunea similar unui factor de transcripie. Legarea complexului ligand-receptor la intensificator conduce la
activarea genei promotoare pe care se fixeaz ARN polimeraza iniiind transcripia.

Bibliografie:
CRUCE, M., Biologie Celular i Molecular, Editura Aius, Craiova, 1999, p. 225-240, 241-243;
HANCOCK, J. T., Cell Signalling, 2nd Edition, Oxford University Press, 2005, p. 1-15, 37-58, 61-73;
PETRESCU, I., Biochimie, vol. I, Editura Presa Universitar Clujean, Cluj-Napoca, 1998, p. 147-157

126