Biologie Celulara si Histologie

Curs 4 Nucleul. Acizi nucleici.

Notiuni de genetica moleculara

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Cuprins

Nucleul celular structura

Acizi nucleici

Transcriptia, translatia informatiei genetice;

sinteza de proteine
Ciclul celular

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Nucleul celular

Membrana de acoperire (anvelopa

nucleara) dubla, cu pori
Lamina nucleara retea de
filamente cu rol suportiv
(asemanator citoscheletului)
Interiorul nucleului:

Matricea nucleara = retea fibrilara, care contine proteine

Nucleoplasma = substanta fluida
Cromatina = materialul genetic
Corpi nucleari:

Nucleolul implicat in sinteza si asamblarea ribozomilor

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Nucleul celular

http://spectorlab.cshl.edu/domains.html

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Structura nucleului

Anvelopa nucleara

Membrana externa se continua cu

membrana RE
Membrana interna
intre ele spatiul perinuclear (10-50 nm),
se continua cu lumenul RE
Rol de separare a materialului genetic de
citoplasma

Pori nucleari

Structuri proteice complexe

Proteinele din alcatuire = nucleoporine
Diametrul total 100nm; diametru neobturat 10 nm
Roluri:

Difuzie pasiva a moleculelor mici, hidrosolubile

Transport activ al moleculelor mari (proteine, subunitati ribozomale, ARN)

Proteinele transportoare = kariopherine (exportine / importine)

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Mike Jones

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Structura nucleului

Cromatina materialul genetic celular

contine ADN, proteine (histone), ARN

Modul de organizare depinde de faza ciclului celular

Tipuri de cromatina:

Eucromatina zona mai putin compacta; contine gene exprimate frecvent de catre
celula

Heterocromatina zona mai compacta; gene exprimate rar

(1) ADN dublu spiralat.

(2) Lant de cromatina (ADN + histone).
(3) Cromatina in interfaza, cu centromer.
(4) Cromatina condensata, in profaza (sunt
prezente 2 copii ale moleculelor de ADN)
(5) Cromozom in metafaza

Magnus Manske

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Structura nucleului
Niveluri de baza de organizare a cromatinei:
ADN infasurat in jurul histonelor (modelul sirului de
margele); nucleozomii sunt conectatii intre ei prin
segmente de ADN de legatura (linker DNA)
Fibre compacte de cromatina condensata
Cromozomi (in metafaza) (23 de perechi; 46 crz); brat
scurt (p) si brat lung (q)

Definitii:

Nucleozom = unitatea structurala a cromatinei; miez

histonic + ADN infasurat

Histone = proteinele care intra in alcatuirea cromatinei;

histone care alcatuiesc miezul pe care se infasura
ADN-ul + histone de legatura H1

Telomer = secvente repetitive de ADN, situate la capetele

terminale ale cromozomilor liniari; compenseaza
pentru replicarea semiconservativa incompleta a
ADN-ului din zonele terminale ale cromozomilor

Centromer = zona de ADN situata spre mijlocul cromozomului, unde cele doua
cromatide vin in contact; la nivelul lui se ataseaza kinetocorul, cu rol in separarea
celor doua cromatide in timpul diviziunii celulare

Cromatida = una din cele doua copii identice de ADN dintr-un cromozom; sunt atasate
la nivelul centromerului

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Organizarea cromatinei

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Structura nucleului

Nucleolul zona in care este transcris ARN-ul ribozomal

Format in jurul unor locusuri genetice definite = Regiuni de Organizare Nucleolara

(NOR), care sunt repetari ale unor gene pentru ARN ribozomal si pot fi gasite pe mai
multi cromozomi

Alte exemple de corpi subnucleari:

Corpi Cajal contin coilina (prot); roluri in procesarea ARN-ului

Corpi gemeni similari ca functie si structura corpilor Cajal

Contine ADN, ARN, proteine

Domenii PIKA (polymorphic interphase karyosomal associations) functie neclara;

asociate ca locatie cu domenii PTF (rol promotor in transcriptia snARN)
Corpi PML probabil, rol regulator al transcriptiei

Speckles, paraspeckles compartimente in spatiul intercromatinian

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Codul genetic

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Baze azotate

Adenina (A)

Citozina (C)

Guanina (G)

Timina (T) / Uracil (U)

Formeaza perechi, unite intre ele prin

legaturi de hidrogen
A-T (A-U); C-G

Formarea de perechi este

mecanismul de la baza:

Cuplarii celor doua lanturi de ADN in

structura de dublu helix
Copierii ADN in ARN mesager

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Codoni. Aminoacizi

Codon = grupare de 3 baze azotate succesive, din structura unui acid

nucleic, si care codifica un aminoacid
Aminoacid = molecula care contine atat gruparea carboxil, cat si gruparea
amino; lanturile de aminoacizi formeaza peptide si proteine

20 aminoacizi standard, codificati de codul genetic:

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Codoni. Aminoacizi

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Acizi nucleici
Tipuri de acizi nucleici:

ADN = acid dezoxiribonucleic

ARN = acid ribonucleic

ARN cu rol in translatie

ARNm mesager
ARNt de transfer
ARNr ribozomal
ARNtm transfer-mesager
(bacterii)

ARN cu rol reglator:

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

miARN micro-ARN
siARN small interfering ARN
piARN piwi ARN
ARN antisens
ARN CRISPR sistem regulator
ARN lung non-cod

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Acizi nucleici

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Acidul dezoxiribonucleic

2 lanturi nucleotidice antiparalele, spiralate

1 nucleotid = 1 baza azotata + 1 molecula deoxiriboza
+ 1 grupare fosfat
Intre cele 2 lanturi exista legaturi de H, intre perechile
de nucleotide (fiecare lant reprezinta copia in oglinda a
celuilalt)

Sens de polimerizare opus al celor 2 lanturi

Structura de -helix

Zephyris

Date geometrice:

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Planul nucleotidelor este

perpendicular pe axul principal al
helixului
Diametrul: 2.2-2.4 nm
Lungimea unui nucleotid: 0.33 nm
Lungime variabila (poate ajunge la
zeci de milioane de baze azotate)

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Acizi ribonucleici

1 lant nucleotidic

1 nucleotid = 1 baza azotata + 1 molecula riboza + 1 grupare fosfat

Timina este inlocuita de uracil

Sintetizat prin copierea

unei regiuni de ADN (pe
baza complementaritatii
bazelor azotate); procesul
se numeste
TRANSCRIPTIE
Enzima care sintetizeaza
ARN-ul se numeste ARNpolimeraza

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Acizi ribonucleici
ARN implicat in transcriptie
ARN mesager (mRNA)

Sintetizat in nucleu
Transporta informatia genetica de la nucleu la ribozomi

ARN de transfer (tRNA)

Transfera un anumit aminoacid in continuarea lantului polipeptidic

care se sintetizeaza in ribozomi

ARN ribozomal (rRNA)

Sintetizat in nucleol
Componenta catalitica, in procesul de sinteza proteica ribozomala

ARN cu rol reglator

microARN (miRNA)

Actioneaza prin interferenta ARN; impreuna cu o enzima, se

cupleaza prin complementaritate de un ARN mesager, pe care il
poate degrada, poate bloca transcriptia acestuia etc.

Small interfering ARN (siRNA)

Sunt frecvent fragmente de ARN viral; actioneaza prin interferenta

ARN; pot influenta gradul de expresie al unei gene

ARN antisens

De obicei inhiba expresia unei gene, dar pot actiona si ca

activatori de transcriere

ARN lung, non-codant

Ex: Xist se infasoara in jurul cromozomului X si ii blocheaza

expresia

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Calea de traducere a informatiei genetice

O anumita gena este copiata in

mRNA = TRANSCRIPTIE
mARN este transportat la nivel
ribozomal
Pe baza matricii de mARN se
sintetizeaza proteina =
TRANSLATIE (TRADUCTIE)

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Transcriptia ADN

Gena = unitatea de baza a ereditatii unui organism

Structura: informatia utila = intron este marginita de doua zone nonsens = extroni

Etapele transcriptiei:

Initierea
= legarea ARN-polimerazei (RNAP) la secventa
promotor din ADN, prin intermediul unui complex
de transcriptie

Elongarea
= RNAP parcurge unul din lanturile ADN-ului si
sintetizeaza prin complementaritate lantul de
mRNA

Finalizarea
= incetarea transcriptiei; mecanismele nu sunt
inca elucidate complet, este cunoscut faptul ca
presupune poliadenilare (adaugarea la sfarsitul
secventei mRNA a unei succesiuni de A)

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Translatia mRNA

Reprezinta prima etapa a sintezei proteice traducerea informatiei genetice

din mRNA in lanturi polipeptidice
Are loc la nivelul ribozomilor
Pas premergator activarea tRNA: legarea covalenta aminoacizilor de
segmentul de tRNA corespunzator (conform codului trinucleotidic)
ETAPE:

Initiere: legarea subunitatii mici a ribozomilor de lantul mRNA; deplasarea acesteia pe lant,
pana cand intalneste codonul start; legarea subunitatii mari ribozomale de mRNA si a unui
tRNA promotor la nivelul zonei P a ribozomilor

Elongare: legarea unui nou tRNA in zona A ribozomala; crearea unei legaturi covalente

intre cei 2 aminoacizi invecinati (legati de moleculele de tRNA); desprinderea tRNA din zona
P; alunecarea ribozomului astfel incat zona A ramane din nou libera si continuarea ciclului

Fiecare etapa necesita prezenta unui factor de elongare si consuma energia

furnizata de o molecula de GTP

Finalizare: alunecarea ribozomului este oprita de intalnirea unui codon stop; legarea unui
factor de eliberare determina oprirea sintezei, desprinderea ribozomului si eliberarea in
citoplasma a peptidului nou sintetizat

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Translatia mRNA

http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/T/Translation.html

http://www.johnkyrk.com/DNAtranslat.swf

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Dogma centrala a geneticii

Crick, 1953

Informatia nu poate fi transmisa de la proteina inapoi la ARN/ADN sau de la

o proteina la alta proteina
SENS UNIC DE CIRCULATIE A INFORMATIEI:
ADN ARN proteina

S-au descoperit insa abateri de aceasta teorie:

Revers-transcriptia = transcrierea informatiei din ARN in ADN; prezenta la

retrovirusuri (ex: HIV), unele bacterii

Replicarea ARN = copierea ARN in alt ARN (virusuri, bacterii)

Situatii speciale:

Transcrierea directa a ADN-ului in proteine (in vitro)

Transmiterea informatiei prionice o proteina se autoreplica inducand

modificari conformationale unei proteine cu aceeasi secventa de aminoacizi

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Circuitul informatiei genetice

Daniel Horspool

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Ciclul celular

Reprezinta etapele prin care trece o celula, finalizate cu diviziunea

celulara

ETAPE:
1. Interfaza:

G1

G2

2. Faza de diviziune (mitoza)

Profaza

Metafaza

Anafaza

Telofaza

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

http://nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/2001/cellcycle_eng.jpg

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Interfaza

Perioada din ciclul celular in care celula creste in dimensiuni,

sintetizeaza acizi nucleici si proteine
Etape:
G1 (Gap 1)
Crestere in dimensiuni
Cresterea volumului
citoplasmatic
Sinteza proteica
Sinteza de organite

S (Synthesis)

Duplicarea ADN-ului
(replicare
semiconservativa)

G2 (Gap 2)

Celula isi reia cresterea

ca pregatire in vederea
mitozei

Daca celula nu se mai

divide, ramane definitiv in
aceasta faza
Unele celule pot intra din G1 in faza G0, care este tot o faza de crestere, insa are loc in afara ciclului celular
(celula nu se pregateste pentru diviziune). Ulterior, acestea:
Pot ramane indefinit in starea G0, pana la moartea organismului
Pot intra in procesul de apoptoza (moartea celulara programata)
Pot reintra in ciclul celular si reincepe a se divide
DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Mitoza (faza M)

Mitoza = procesul prin care celula isi imparte cromozomii in

doua seturi identice, pentru doua celule-fiice
Citokineza = procesul prin care celula imparte nucleul,
citoplasma, organitele etc in doua parti pentru doua celule-fiice
Etape:

PROFAZA
Prometafaza
METAFAZA
ANAFAZA
TELOFAZA

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Mitoza - Etape

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Meioza

Forma deosebita de diviziune

celulara; numarul de
cromozomi la celulele fiice
este redus la jumatate
Celulele rezultate sunt gameti;
se pot divide doar dupa
fecundare cu o alta celula
gametica

ETAPE:

Meioza I cromozomii homologi

se impart intre doua celule-fiice
Meioza II celulele-fiice se
subidivid (prin impartirea
cromatidelor) in 4 celule gametice
(este similara ca mecanism
mitozei)

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

http://www.harlem-school.com/10TH/sci_pdf/graphics/meiosis.gif

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Fazele meiozei I

Profaza

Pro-metafaza

Meioza I

DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Metafaza

Anafaza

Telofaza

Cariokineza

Meioza II

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara

Bibliografie suplimentara

http://spectorlab.cshl.edu/movies.html

http://www.genome.gov/Education/

http://learn.genetics.utah.edu/content/begin/dna/transcribe/

http://www.cellsalive.com/

Toate imaginile utilizate in curs (cu exceptia situatiilor unde este precizata alta sursa) sunt preluate din baza Wikimedia
Commons. Numele autorilor este precizat in dreptul imaginii. Imaginile unde nu sunt precizate numele autorilor apartin
domeniului public.
DBB Masterat Inginerie Medicala si Clinica

Biologie Celulara si Histologie 4. Genetica moleculara