Replicacion

Biologa molecular I
Unidad 1. Replicacin
Biologa molecular I
1
Universidad Abierta y a Distancia de Mxico
Biologa molecular I
ndice
Unidad 1. Replicacin...3
Presentacin de la unidad3
Propsitos...3
Competencia especfica...4
1.1. Importancia de la replicacin en la divisin celular..4
1.1.1. Definicin de la Replicacin..7
1.1.2. Tipos de Divisin Celular.10
1.2. Replicacin en procariotas.15
1.2.1. Caractersticas del ADN de los procariotas.15
1.2.2. Pasos de la replicacin...20
1.3. Replicacin en eucariotas..27
1.3.1. Caractersticas del ADN de los eucariotas..27
1.3.2. Pasos de la replicacin34
Actividades...39
Autorreflexiones...39
Cierre de la unidad..39
Para saber ms40
Fuentes de consulta41
2
Biologa molecular I
A continuacin comenzaremos a desarrollar la Unidad 1 donde hablaremos sobre la
Replicacin. A continuacin encontrars las Actividades a realizar y finalmente la
bibliografa de apoyo.
Presentacin de la unidad
En esta primera unidad de la materia de Biologa Molecular vamos a analizar cmo las
clulas pueden realizar la Divisin Celular y de esta manera reproducirse. Para ello, las
dos clulas hijas deben contener el ADN completo por lo que es necesario obtener dos
molculas idnticas en la Replicacin. Analizaremos este proceso en clulas procariotas
y eucariotas viendo las semejanzas y diferencias entre ellas, debido principalmente, a la
diferencia en la estructura de sus respectivos cromosomas. As mismo, veremos la
importancia de todos estos procesos para un Ingeniero en Biotecnologa y como lo
podremos aplicar en la Ingeniera Gentica.
Propsitos
El propsito de esta primera unidad es que
el estudiante entienda cmo ocurre el
proceso de replicacin en clulas
procariotas y eucariotas y su importancia
en la divisin celular y su implicacin en la
evolucin. Por ello, se propone que
alcances los siguientes logros:
1. Identificar las clulas segn su
divisin celular.
2. Reconocer la cadena lder y la
cadena retardada durante la
replicacin.
3. Explicar la importancia de la
variabilidad gentica en la evolucin
4. Reconocer la importancia de la
evolucin
3
Biologa molecular I
Competencia especfica
La competencia especfica a alcanzar en esta primera

unidad es Explicar los mecanismos genticos
mediante el entendimiento de la replicacin en
procariotas y eucariotas como base para la divisin
celular
1.1. Importancia de la replicacin en la divisin celular

Comencemos entendiendo cmo hemos llegado a ser como somos, cmo a partir de una
clula procariota ocurri la evolucin hasta llegar a la raza humana y de esta manera
veremos cmo podemos utilizar esta informacin para obtener un bien o un servicio como
Ingenieros en Biotecnologa. Para ello, primero tenemos que entender que las protenas, y
especficamente, las enzimas son las encargadas de darnos la vida. Qu diferencia hay
entre un ser vivo y su cadver? Realmente, cuando una clula muere sigue teniendo las
cuatro biomolculas que estudiamos la materia de Bioqumica, es decir, polisacridos,
lpidos, protenas y cidos nuclicos, entonces, qu ocurre? La repuesta es muy
simple, lo que hace que estemos vivos son las actividades enzimticas que se encargan
de realizar todos los procesos bioqumicos que estudiamos en materias pasadas. Si las
enzimas (que son protenas) dejan de tener actividad entonces la clula deja hacer sus
funciones y por tanto muere. Aun as, hay que entender la importancia del resto de las
biomolculas: sin polisacridos no tendramos la materia prima para obtener energa
(entre otras funciones), sin los lpidos tampoco tendramos energa ni se formara la
membrana celular que delimita la clula, y sin los cidos nuclicos no tendramos la
informacin para poder sintetizar las protenas; as que todas las biomolculas son
importantes.
En la 2 unidad analizaremos cmo se sintetizan las protenas a partir de la informacin
que se encuentra en el ADN (gen), ahora nada ms quiero que entiendan este papel
fundamental para poder explicar cmo ocurre la evolucin y que un cambio en la
secuencia de ADN (mutacin) puede conllevar a un cambio en la protena que codifica.
4
Biologa molecular I
Hay muchas maneras de explicar la evolucin, especficamente la evolucin biolgica

est definida, segn la Real Academia Espaola, como Proceso contnuo de
transformacin a travs de cambio producidos en sucesivas generaciones. La
informacin que se hereda de una generacin a otra es la informacin gentica que est
en el ADN, por lo que la evolucin ocurre siempre y cuando se den modificaciones en
esta biomolcula y si stas pasan a la descendencia. Todo este proceso est explicado
segn la Teora de la Evolucin de Charles Robert Darwin, quien en 1859 public el
famoso libro El origen de las especies donde presenta su teora que explica que el
cambio dentro de una especie o la aparicin de una nueva especie ocurre con tres pasos
principales (Mermelada, 2009):
1. Variacin: los individuos de una especie poseen diferentes caractersticas que se
manifiestan en l y que son visibles (fenotipo), mismas que vienen determinadas
por las caractersticas genticas (secuencia de ADN) que poseen (genotipo). De
esta manera, y como hemos explicado anteriormente, un cambio en la secuencia
del ADN (mutacin) puede conllevar a un cambio en un gen determinado que se
manifestar en un cambio de su protena y por lo tanto de su fenotipo. Para que
ocurra la evolucin, es necesario que se una variacin y que sta sea positiva para
el entorno donde el individuo se desarrolle.
2. Competencia: en este sentido hay que entender que los individuos dentro y fuera
de una misma especie compiten unos con otros para su supervivencia y
reproduccin. Han visto alguna vez cmo los cachorros se pelean para poder ser
amamantados por su madre? Cmo los diferentes animales compiten entre s
para poder ser elegidos por las hembras y reproducirse? En este sentido, si las
variaciones que se han dado (mutaciones) son positivas, los seres que las hayan
tenido podrn tener alguna ventaja frente a sus semejantes.
3. Herencia: la ltima parte de esta teora es que, para que ocurra la evolucin,
todos los cambios que hemos visto y que son positivos para el individuo deben ser
transmitidos a la descendencia. Cuando los cambios son muy fuertes pueden
llegar a generar una nueva especie.
Hay un ejemplo clsico para entender este concepto, especficamente de
microevolucin por seleccin natural, y es el caso de las polillas moteadas (Bismo
betulia) en Inglaterra. Antes de la revolucin industrial, los rboles en Inglaterra eran
claros, y las polillas que all habitaban eran de este mismo color y as se podan camuflar
de sus depredadores. De repente, por cambios en el ADN, apareca una polilla negra ya
que produca una protena que le daba este color, sta era visible para los depredadores
de manera que la eliminaban antes de que se pudiera reproducir y la mayora de la
poblacin de polillas eran blancas. Cuando comenz la revolucin industrial y la
5
Biologa molecular I
contaminacin, los rboles en Inglaterra empezaron a cambiar de color como

consecuencia del holln de manera que las cortezas ennegrecieron.
As, las polillas negras que antes eran devoradas fcilmente, ahora se podran reproducir
ya que se camuflaban mejor; y la poblacin de polillas cambi de color. En 1952, el
Parlamento britnico aprob leyes para limpiar el aire de manera que se disminuy la
quema de carbn, la tecnologa cambi y se hizo ms limpia por lo que los rboles
volvieron a ser claros de nuevo, de qu color ser la poblacin de polillas en la
actualidad? Efectivamente, ahora son blancas. En la figura 1 pueden observar estas
polillas en un rbol oscuro y una explicacin ms detalladas de este proceso lo puedes
encontrar en el blog publicado en la pgina http://antropicos.blogspot.mx/2009/02/polillasmoteadas.html.
Figura 1. Polillas sobre un rbol oscuro; como pueden observar la polilla negra est mejor
camuflada por lo que es ms difcil que sea devorada, como ocurri durante la revolucin
industrial (foto tomada de http://antropicos.blogspot.mx/2009/02/polillas-moteadas.html)
Como pueden observar, los cambios en el ADN, cambian las protenas y pueden tener
consecuencias positivas de manera que den una ventaja selectiva y as se mantienen en
la descendencia. Cuando estos cambios sucesivos ocurren, aparecen nuevas especies.
Hay que entender que estos cambios (denominados mutaciones, de las que hablaremos
ms adelante) son totalmente al azar, si es un cambio negativo, el ser vivo no se
desarrollar o no se podr reproducir; en cambio, cuando el cambio es positivo, se
mantendr en la descendencia. Y todo ello, est relacionado con el ambiente donde se
desarrolle.
Una vez entendido este concepto, espero que veas la implicacin que tiene el ADN en
este proceso por que los cambios que se produzcan deben permanecer. Para ello, es
6
Biologa molecular I
necesario explicar cmo ocurre el proceso de replicacin (duplicacin de la molcula del

ADN).
As mismo, espero que veas la implicacin biotecnolgica de todo este proceso, cmo
podemos obtener una mejor especie? Simplemente, mutando a las clulas y analizando
cul de ellas tiene la caracterstica que estamos buscando. Esta mutacin puede ser al
azar (con diferentes compuestos qumicos) o dirigida (con la ayuda de la ingeniera
gentica) y en la materia de Biologa Molecular 2 analizaremos cmo obtenerlas.
1.1.1. Definicin de la Replicacin

La replicacin es el mecanismo que permite al ADN duplicarse, de manera que se
obtienen dos molculas idnticas de este cido nuclico (Berg y col., 2007; Griffiths y col.,
2008).
Recordemos que el ADN es una cadena de doble hebra (que analizaremos ms
adelante) por lo que el proceso de replicacin se podra llevar a cabo de tres maneras
(Figura 2, Griffiths y col., 2008):
- Semiconservativa: donde las cadenas hijas tendrn una hebra materna y una
hebra nueva.
- Conservativa: donde las cadenas hijas tendrn, una las dos hebras maternas y la
otra las dos hebras nuevas
- Dispersa: donde las cadenas hijas tendrn una mezcla de hebra materna y nueva
Figura 2. Tres formas alternativas de replicacin del ADN. Las lneas de color azul claro
representan las hebras sintetizadas de nuevo (Griffiths y col., 2008)
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Biologa molecular I
Para discernir entre este estos tres modelos, Meselson y Stahl, en 1958 realizaron un
experimento donde utilizaron dos istopos diferentes del nitrgeno (14N y 15N) que se
separan de manera diferencial cuando se realiza una centrifugacin con CsCl
apareciendo dos bandas: la superior corresponde al 14N y la inferior al 15N y cuando los
dos istopos estn presentes (modelo semiconservativo) se obtiene una banda
intermedia. Lo que hicieron fue incubar la bacteria Escherichia coli en un cultivo con 15N
de manera que todo su ADN tuviera este istopo; posteriormente transfirieron las clulas
a un cultivo con 14N y las dejaron dividirse una 1 y 2 generacin tomando muestra del
ADN, en cada caso, y analizndola por centrifugacin en gradiente de ClCs obteniendo
los resultados que se muestran en la Figura 3.
Figura 3. Esquema de los resultados de la centrifugacin de DNA en un gradiente de CsCl con los
resultados obtenidos por Mendelson y Stahl (Griffiths y col., 2008)
Este resultado slo puede ser explicado cuando el proceso ocurre de manera
semiconservativa como muestra la Figura 4 y es la teora que se acepta actualmente.
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Biologa molecular I
Figura 4. Slo el modelo semiconservativo de replicacin del ADN predice los resultados como los
de la Figura 3 por lo que se demuestra que el proceso de replicacin es semiconservativo
(Griffiths y col., 2008).
Con esta explicacin, adems de que veas que la replicacin del ADN es
semiconservativa es importante que analices cmo los conocimientos previos pueden
ayudarte a establecer experimentos que te permitan discernir entre varias opciones. El
uso de radioistopos de este tipo es muy importante y til en la investigacin biolgica y
en muchas aplicaciones industriales. Existen un par de lectura interesantes que habla de
este tema como Los radioistopos al servicio del hombre publicado por Kniseley
(disponible en
http://www.iaea.org/Publications/Magazines/Bulletin/Bull164/Spanish/16405800211_es.pdf
) o Tendencia futuras de las aplicaciones de los istopos y de las radiaciones publicado
por Glubercht en boletn No 19 del Organismo Internacional de Energa Atmica
(http://www.iaea.org/Publications/Magazines/Bulletin/Bull196/Spanish/19605093847_es.pd
f).
Volviendo a nuestro tema, la replicacin ocurre siempre y cuando la clula se vaya a
dividir ya que, como hemos explicado anteriormente, las clulas necesitan tener toda la
informacin gentica para sintetizar las protenas que necesitan para vivir. A continuacin
veremos los diferentes tipos de divisin celular que existen, segn el tipo de clula.
9
Biologa molecular I
1.1.2. Tipos de Divisin Celular

La divisin celular consiste en obtener dos clulas hijas a partir de una progenitora, y sta
ocurre una vez que su ADN se ha replicado.
Segn el tamao de las clulas hijas, la divisin de microorganismos, se pueden clasificar
en fisin binaria o gemacin (Figura 5) (Martinki, 2009).
Figura 5. Divisin por fisin binaria o gemacin segn el tamao de los productos de la divisin
celular (Martinki, 2009)
En el caso de la fisin binaria, las bacterias crecen hasta alcanzar el doble de su tamao
y luego se dividen por la mitad formando dos clulas hijas iguales (Figura 5). Durante el
ciclo de crecimiento todos los constituyentes celulares (incluyendo el ADN) aumentan de
manera que las clulas hijas obtengan un cromosoma completo y suficientes copias de
todas las macromolculas, monmeros e iones inorgnicos como para que la clula
pueda existir. Una vez que la clula ha crecido y repartido sus componentes se forma un
septo como resultados del crecimiento hacia dentro de la membrana plasmtica y la
pared celular.
10
Biologa molecular I
Figura 6. Proceso general de la fisin binaria de un procariota. Para simplificar el cromosoma se

representa como un crculo sencillo en verde (Martinki, 2009).
Esta divisin est modulada por unas protenas denominadas Fts (por sus siglas en ingls
filamentous temperature sensitive) que se han encontrado en procariotas (incluyendo
Archaea), cloroplastos y mitocondrias (que como veremos ms adelante comparten
muchas semejanzas con los procariotas por lo que respalda la teora endosimbitica que
dice que estos organelos derivaron de bacterias). Las protenas Fts forman un anillo
continuo en el divisoma (aparato de divisin procariota) donde se forma el septo que
vimos anteriormente con la accin de:
-
FstZ que es capaz de polimerizar y formar el anillo en el centro de la clula

FstA que es una enzima ATP hidrolasa, que al hidrolizar el ATP produce la energa
necesaria para que las protenas se puedan ensamblar en el divisoma
ZiaA que ancla a las protenas FstZ a la membrana citoplasmtica
FtsI que es una protena involucrada en la sntesis del peptidoglicano ya que es
necesario el crecimiento de la pared celular durante la divisin celular
La replicacin del ADN bacteriano ocurre antes de la formacin del anillo de FtzZ donde
estn involucradas otras protenas denominadas Min. La protena MinC inhibe la divisin
celular y previene la formacin de FtsZ hasta que el centro se encuentre formado, por su
parte la protena MinE es capaz de inhibir la accin del MicC y de algn modo
interacciona con los cromosomas duplicados. De esta manera, cuando la replicacin
11
Biologa molecular I
finaliza, el anillo FtsZ comienza a despolimerizarse disparando la sntesis de membrana y

el peptidoglicano al interior de la clula sellando la regin y obtenindose as dos clulas
hijas (Martinki, 2009). La relacin entre las protenas FstZ y la divisin celular se muestra
en la Figura 7.
Figura 7. Relacin entre protenas FstZ y la divisin celular de clulas procariotas. a) Corte de un
bacilo mostrando el anillo de molculas FtsZ; b) Microscopia de Escherichia coli durante el
proceso de divisin: primera fila: clula observada en un microscopio de contraste de fases;
segunda fila, tincin del ADN (en azul); tercera fila, tincin especfica de protenas FstZ (en rojo);
cuarta fila, combinacin de ADN y FstI. Primera columna, anillo FstI sin formar; segunda columna,
aparicin del anillo FstI cuando el nucleoide inicia la segregacin; tercera columna anillos FstI
completo durante la elongacin y cuarta columna, degradacin del anillo FstZ y divisin celular
(Martinki, 2009)
Una fotografa de E. coli en divisin por fisin binaria podemos observarla en la Figura 8
donde se observa el septo central donde ocurrir la divisin.
12
Biologa molecular I
Figura 8. Escherichia coli en divisin por fisin binaria (tomada de

http://www.sciencephoto.com).
Por su parte, la gemacin es un proceso tpico de levaduras aunque tambin existen

algunas bacterias que se dividen de esta manera como Pirella o Blastobacter. En el caso
de las levaduras, el proceso de gemacin est relacionado con la divisin celular y la
formacin de septos donde estn involucradas las protenas del citoesqueleto actina y
tubulina, tal y como se coment durante el desarrollo de la asignatura de Biologa Celular.
Una revisin completa de este tema lo puedes encontrar en el artculo de Herrero) y
colaboradores (1997) sobre El ciclo celular de las levaduras: un buen modelo
eucaritico?. Una fotografa sobre la gemacin la puedes observar en la Figura 9.
Divisin por
gemacin
Figura 9. Levadura dividindose por gemacin (modificada de

http://www.sciencephoto.com)
En el caso de los procariotas y las clulas unicelulares, este proceso de divisin se realiza
para reproducirse y aumentar as el nmero de individuos. En el caso de los organismos
pluricelulares, el proceso de divisin celular se puede llevar a cabo por dos motivos: el
13
Biologa molecular I
primero es para crecimiento o para sustitucin de clulas en los diferentes rganos, de

manera que el ncleo se divide por mitosis; y el segundo es para la obtencin de
gametos y la posterior reproduccin sexual dando lugar a un nuevo individuo, donde la
divisin nuclear ocurre por meiosis. En ambos casos, las clulas siguen el ciclo celular
(Figura 10) de la que hablamos anteriormente y cuyos detalles se estudiaron en Biologa
Celular (Banes, 2008).
Figura 10. Ciclo celular (Barnes y col., 2008)
De esta manera, la replicacin ocurre en todas las clulas pero el proceso difiere entre
clulas procariotas y eucariotas, bsicamente, como veremos a continuacin, por las
diferencias en sus cromosomas.
14
Biologa molecular I
1.2. Replicacin en procariotas

Comenzaremos hablando de la divisin en procariotas ya que el proceso es un poco ms
simple que en las clulas eucariotas aunque no por eso menos importante y hablaremos
tambin de su importancia para un Ingeniero en Biotecnologa.
1.2.1. Caractersticas del ADN de los procariotas

El ADN es una molcula bicatenaria formada por nucletidos unidos por enlaces
fosfodister. Recordemos su composicin (que es su da estudiamos en la 1 unidad de
Bioqumica) y observemos, en la Figura 11, que los nucletidos estn formados por un
azcar (en el caso del ADN es la desoxirribosa), un grupo fosfato (unido en el C3 de la
desoxirribosa) y una base nitrogenada (unida en el C1 de la desoxirribosa) que puede
ser adenina (A), timina (T), guanina (G) o citosina (C) (Lehningner, 2009).
Figura 11. Estructura general de un nucletido (Barnes y col., 2008)
Estos nucletidos se unen mediante enlaces fosfodister (Figura 11) entre el grupo
hidroxilo del C5 y el grupo fosfato unido al C3.
15
Biologa molecular I
Enlace
Figura 12. Enlace fosfodister entre el OH del C3 y el grupo fosfato el C5 (modificado de

http://biologiaebuc2012.blogspot.mx/2012/06/clase-7-acidos-nucleicos.html)
De esta manera se forman las hebras del ADN, mismas que se unen entre s por puentes
de hidrgeno entre las bases nitrogenadas (A-T con dos puentes de hidrgeno y G-C por
tres puentes de hidrgeno). Las hebras sern antiparalelas, como se observa en la
Figura 13 de manera que la hebra de la izquierda tiene direccin 5 3 y la derecha tiene la
direccin contraria, 3 5 (Lehninger, 2009).
Figura 13. Estructura del ADN (Barnes y col., 2008).
16
Biologa molecular I
Cuando una molcula de ADN se sintetiza, el fosfato del extremo 5 del nucletido libre
(que ser un nucletido trifosfato) siempre se unir al OH del extremo 3 del nucletido
terminal de la cadena que se sintetiza, de manera que esta extensin se realizar en
direccin 5 3 (Figura 14). Esta accin est mediada por una enzima denominada
polimerasa, ya sea ADN-polimerasa (que une deosinucletidos) o ARN-polimerasa (que
une ribonucletido) Es muy importante que concibas bien este proceso para poder
entender la replicacin y la transcripcin de las que hablaremos un poco ms adelante.
Nueva molde
Nueva hebra
pirofosfato
Deositrinucltido
trifosfato libre
Figura 14. La cadena nueva siempre se sintetiza en direccin 5 3 (modificado de

https://wikispaces.psu.edu/pages/viewpage.action?pageId=112526682&navigatingVersions=true)
Esta estructura y las uniones fosfodister son comunes en todos los ADNs conocidos
(procariotas, eucariotas y virus) as como el crecimiento en direccin 5 3 y cada una de
estas molculas se denomina cromosoma.
En el caso de las bacterias, sus cromosomas se caracterizan por ser molculas circulares
altamente empaquetadas como se observa en la Figura 15.
17
Biologa molecular I
Cromosoma
superenrrola
do
Cromosom
a laxo
Figura 15. Estructura de un cromosoma bacteriano. A representacin de una molcula laxa y

superenrollada. B. Fotografa de un cromosoma de Escherichia coli (modificado de
http://mariielfashionn.blogspot.mx/2012/03/3.html)
Este empaquetamiento est mediado por la accin de unas enzimas denominadas

Topoisomerasas de manera que el crculo de ADN se pliega y cuando las dos regiones
de la hlice entran en contacto la enzima rompe la cadena y la une tal y como se observa
en la Figura 16. (Martinki, 2009).
Figura 16. Accin de la enzima Topoisomerasa para superenrollar el cromosoma bacteriano

(Martinki, 2009).
En recientes aos, se han encontrado protenas con caractersticas parecidas a las

histonas eucariotas (cuya funcin consiste en unirse al ADN para empaquetarlo como
veremos ms adelante) por lo que se tiene la hiptesis que pueden tener una funcin
similar a stas (Tabla 1)
18
Biologa molecular I
Protena
Composicin
HU
H
IHF
Dmero con subunidades a y b de 9,000 D

Dmero con subunidades idnticas de 28,000 D
Subunidad a de 10,500 D y subunidad b de
9,500 D
Subunidad de 15,000 D
Monmero de 15,000 D
Subunidad de 3,000 D
H1
HLP1
P
Contenido por
clula
40,000 dmeros
30,000 dmeros
Desconocido
10,000 copias
20,000 copias
Desconocido
Tabla 1. Protenas bsicas detectadas en procariotas (modificado de

http://pendientedemigracion.ucm.es/info/genetica/grupod/Cromovibac/cromovibac.htm#nucleoide)
Adems del cromosoma, las bacterias pueden tener molculas de ADN de menor tamao
con replicacin autnoma (es decir, su proceso de replicacin no est coordinado con la
replicacin del cromosoma) y cuya informacin no es vital para la clula. Estas molculas
se denominan plsmidos y tiene una importancia vital para tanto para la clula como
para nosotros como biotecnlogos ya que son cruciales en la Ingeniera Gentica. En las
bacterias, estos plsmidos llevan informacin adicional para su vida como la resistencia a
los antibiticos pero su ADN no codifica para ninguna protena del metabolismo primario
(como lo que vimos en la asignatura de Bioqumica). En la Ingeniera Gentica nos sirve
para poder transmitir informacin de una clula a otra y es la clave para poder disear
Organismos Genticamente Modificados y realizar expresin de protenas en clulas
diferentes de la original (expresin heterloga). Por ponerles un ejemplo, les comentar
que hoy en da la insulina que usan la mayora de los pacientes diabticos proviene de
una cepa de E. coli que ha sido modificada incorporndole (con ayuda de un plsmido) el
gen de la insulina humano (Soto Pol y col., 2008). La importancia de este tipo de
molculas es tal que han sido objeto de proteccin intelectual como la patente espaola
2 229 492 otorgada en 2005 con ttulo Plsmidos bacterianos y cuyo contenido puedes
encontrar en la bibliografa complementaria.
Por otro lado, y antes de pasar a los pasos de la replicacin procariota como tal,
hablemos un poco sobre la estructura y la accin de las enzimas principales en este
proceso, las ADN-polimerasas. Estas enzimas fueron descubiertas, por primera vez, en
1950 por Arthur Kronberg y se caracterizan por parecerse a una mano derecha a medio
cerrar (Figura 17). Su accin es incorporar nucletidos a la cadena que se est
sintetizando siempre en direccin 5 3 como estudiamos anteriormente. Los dedos estn
formados por hlices por cuya parte superior entre la cadena molde (la que se va a
sintetizar), los nucletidos se incorporarn por la zona del pulgar y el enlace fosfodister
19
Biologa molecular I
tendr lugar en la palma de la mano de manera que la cadena sintetizada saldr por la
zona de la mueca.
Entrada de
desoxirribunocletidos trifosfato
pulgar
cadena
molde
hlice
s
dedos
cadena
sintetizada
palma
Figura 17. Estructura general de la ADN-Polimerasa (modificada de
http://www2.uah.es/biomolq/BM/Esquemas/imagenes/Transparencias%20Tema%203%20BM1/Dia
positiva16.JPG)
1.2.2. Pasos de la replicacin

El primer paso para comenzar la replicacin de cualquier molcula del ADN es reconocer
el sitio de inicio que viene determinado por una secuencia especfica de nucletidos
denominado Origen de Replicacin (ORI). En el caso de los cromosomas bacterianos,
este sitio es nico en toda la molcula al contrario de los cromosomas eucariotas donde
se pueden encontrar varios. La primera accin ser, nuevamente, la Topoisomerasa
para desenrollar la cadena de ADN y poder replicarla. El esquema general de este
proceso se presenta en la Figura 18 y cada uno de los pasos los iremos desarrollando a
continuacin.
20
Biologa molecular I
Figura 18. Esquema general del proceso de replicacin (Griffiths y col., 2008).
A continuacin, acta la enzima denominada Helicasa (Figura 19) cuya accin ser
romper los puentes de hidrgeno que unen las dos hebras de ADN.
Figura 19. Estructura de la helicasa. A) enzima en amarillo en una cadena de ADN, en rojo; B)
esquema de cmo acta la enzima para romper los puentes de hidrgeno, C) esquema de la
enzima (Alberts y col., 2010).
21
Biologa molecular I
Su funcin es reconocer el ORI y romper los puentes de hidrgeno formados entre la dos
hebras que forma el ADN (Figura 20).
ORI
ORI
3
5
5
3
helicasa
5
3
Figura 20. Reconocimiento del Origen de Replicacin (ORI) por la helicasa.
A continuacin debe comenzar la replicacin, para ello, sera necesario unir dos
deositrinuclotidos, ya que como vimos anteriormente los nucletidos libres siempre
tienen unidos 3 fosfatos en su molcula. No existe ninguna enzima conocida que sea
capaz de realizar esta unin a no ser de que hablemos de ribonucletido (es decir que su
azcar sea ribosa, no desoxirribosa), es por ello, que la enzima que acta se denomina
Primasa, que va a poner una pequea secuencia de ARN que se denomina cebador o
primer a partir de la secuencia ORI (Figura 21). En este proceso, siempre se pegar el
nucletido complementario, es decir, si la base es Adenina, se pegar un Uracilo
(recuerda que hablamos de ARN), y si la base es Guanina se unir una Citosina y
viceversa y la cadena ser antiparalela para que se puedan formar los puentes de
hidrgeno correspondientes.
ORI
3
5
3
Primasa
3
5
3
5
5
3
5
3
Figura 21. Accin de la primasa que sintetiza una molcula de ARN (primer o cebador que se
muestra de color rojo).
Una vez que se sintetiza el cebador acta la enzima ADN-Polimerasa III que ir
aadiendo deosinucletidos siempre en direccin 5 3 formando as una cadena de ADN.
Como se observa en la figura, ambas cadenas representadas no tiene problemas para
extenderse porque la direccin es 5 3 y forman lo que se denomina cadena lder (Figura
22).
3
5
5
3
3
5
5 ADN Polimerasa III

3
3
5
5
3
5
3
Figura 22. Accin de la ADN Polimerasa en la cadena lder
22
Biologa molecular I
Entonces, qu ocurre en el extremo 5? Como no es posible polimerizar nucletidos en

esa direccin, la Primasa da un salto y acta sintetizando un cebador, posteriormente
actuar la ADN Polimerasa III polimerizando los nucletidos en direccin 5 3 como se
observa en la Figura 23. Esta cadena se conoce como cadena retardada y los
fragmentos de ARN + ADN que se forman se denominan Fragmentos de Okasaki (en
honor a su descubridor). Quiz te preguntes porqu se denomina ADN Polimerasa III si es
la primera que acta, la respuesta es muy simple, lo que ocurri es que primero
descubrieron las enzimas y les pusieron el nombre segn el orden en el que fue
sucediendo, posteriormente se averigu cul era su funcin y descubrieron que la ltima
enzima descubierta (la ADN Polimerasa III) es la primera que acta.
Cadenas lder
3 5
3
5
3
5
3
5 3
Fragmento de Okasaki
Cadenas retardadas
Figura 23. Esquema de las cadenas lderes y retardadas presentes en la replicacin de
una molcula de ADN; se muestra el Fragmento de Okasaki.
Una vez formadas estas cadenas es el turno de la ADN-Polimerasas I cuya accin ser
eliminar los ribonucletidos (con la accin exonucleasa 53) de los cebadores para
polimerizar deosinucletidos (Figura 24). Esta enzima utiliza el extremo 3 de la cadena
anexa para la sntesis.
5 3 5 3 5
3
5
5 3 5 3 5
ADN Polimerasa I
5
3
3
5
5 3 5
3 5 3
5
3
5 3
5 3 5
Figura 24. Accin de la ADN Polimerasa I
23
Biologa molecular I
Finalmente, es necesario unir los extremos 5 y 3 de las cadenas accin que se lleva a
cabo mediante la enzima ADN-Ligasa (Figura 25).
5 3 5
3 5 3
3
5
ADN Ligasa
5
3
5 3
5 3 5
3
5
3
3
Figura 25. Accin de la ADN Ligasa
La comprensin de este proceso de replicacin, as como el descubrimiento de las ADNPolimerasas en algunas Archeas que actan a temperaturas elevadas (72C), como la
Taq-Polimerasa aislada de la procariota Thermus aquaticus, fue la clave para el
desarrollo de una de las tcnicas ms importantes de la Ingeniera Gentica, la reaccin
en cadena de la polimerasa, o PCR por sus siglas en ingls. Esta tcnica, fue
desarrollada en 1983 por Kary B. Mullis (ganador del premio Nobel de Qumica en 1993) y
permite realizar millones de copias de una secuencia gentica de inters utilizando
cebadores especficos y se basan en el hecho de que las Polimerasas necesitan esta
molcula para poder iniciar su replicacin. Cuando revises esta tcnica en la materia de
Biologa Molecular 2, por favor, no olvides que los cebadores son imprescindibles y que la
direccin de la replicacin es de 5 a 3, ello te permitir entender el proceso y disear
cebadores tiles para tus experimentos.
Tanto la ADN-Polimerasa III como la ADN Polimerasa-I tienen la capacidad de corregir
cualquier error cometido durante la replicacin. Este proceso es muy importante ya que
adems de las acciones que hemos estudiado (polimerizacin en direccin 5 3 y accin
exonucleasa 5 3 presente en la ADN Polimerasa I para poder eliminar los
ribonucletidos) estas enzimas tienes accin exonucleasa 3 5 de manera que si existe
algn error en la sntesis, pueden detectarlo, eliminar el nucletido y aadir el correcto
(Figura 26). Sin estas correcciones, las ADN-Polimerasa I de E. coli tiene una frecuencia
de error de 5x10-5 (es decir, comete un error cada 500,000 nucletidos) y despus de
corregir con la actividad exonucleasa 3 5 esta frecuencia disminuye a 5x10-7; la ADNPolimerasa III tiene una frecuencia de error sin correccin de 7x10-6 y con correccin de
5x10-9, esto quiere decir que de todas formas las polimerasas comenten errores y por lo
tanto mutaciones que, como vimos en la exposicin de la evolucin, pueden modificar el
microorganismo (Robertis, 2005).
24
Biologa molecular I
Figura 26. Actividad correctora de la ADN-Polimerasa a) una base es introducida incorrectamente

ya que debera ser una T en vez de una C; b) la accin exonucleasa 3`5`de la enzima acta para
romper el enlace fosfodister y eliminar as el nucletido; c) se incorpora el nucletido correcto, en
este ejemplo la T y prosigue la replicacin.
As mismo, el ADN puede que este daado por agentes fsicos y qumicos (luz
ultravioleta, compuestos mutagnicos) y, en este caso, la ADN-Polimerasa II es la
encargada de reparar esta accin.
Cmo afectan estas mutaciones a nosotros como Ingeniero en Biotecnologa? Una
accin positiva es la posibilidad de obtener microorganismos modificados que sean
mejores que los iniciales. Pero una accin negativa es la prdida de la viabilidad de las
clulas o su capacidad de producir un metabolito de inters. Por poner un ejemplo,
podemos poseer una bacteria que produce un antibitico que estamos explotando
industrialmente. Para ello, procedemos a su crecimiento y las clulas se replican
continuamente para incrementar su poblacin y que nosotros obtengamos nuestro
metabolito de inters. No debemos olvidar que, en cualquier momento, las clulas
mutarn y pueden perder su capacidad de producir el antibitico por lo que siempre es
conveniente, mantener la cepa original para que, en el momento que esto suceda,
podamos recuperar los microorganismos con la capacidad de inters.
Volviendo a la replicacin bacteriana, este proceso ocurre en toda la cadena de ADN
circular presente en los cromosomas bacterianos hasta que termina por formarse las dos
cadenas hijas como se observa la Figura 27.
25
Biologa molecular I
Figura 27. Replicacin de un cromosoma bacteriano (Martinki, 2009).
Por otro lado, debemos analizar cmo ocurre la replicacin del ADN plasmdico del que
hablamos anteriormente. Al igual que en ciertos virus se produce un mecanismo
denominado crculo rodante donde una nucleasa genera un extremo 3 OH libre en el
que se van aadiendo nucletidos gracias a la accin de una ADN-Polimerasa (Griffiths y
col., 2008). El esquema general del proceso se muestra en la Figura 28. La cadena ser
replicado en direccin 5 3 y la cadena complementaria tendr una replicacin discontinua
tal y como sucede en la cadena retardada que analizamos anteriormente.
26
Biologa molecular I
Figura 28. Replicacin mediante el crculo rodante (Griffiths y col., 2008).
1.3. Replicacin en eucariotas

Una vez analizado el proceso de replicacin en las clulas procariotas, pasemos a
analizar cmo ocurre este proceso en las clulas eucariotas ya que sus cromosomas no
tienen la misma estructura.
1.3.1. Caractersticas del ADN de los eucariotas

Existen dos diferencias principales entre el cromosoma procariota y el eucariota. La
primera es que los cromosomas eucariotas son lineales y esto tendr consecuencias en
su replicacin como veremos ms adelante. La segunda, es la organizacin ya que las
clulas eucariotas tienen histonas que le ayudan en el empaquetamiento de su ADN.
Las histonas son protenas de bajo peso molecular muy bsicas que se unen al ADN que,
recordemos que es una molcula cida. Existen varias protenas de este tipo numeradas
de la 1 a la 4, con dos H2 (H2A y H2B) tal y como puedes ver en la tabla 2 (Lehninger,
2009).
Histona
H1
H2A
H2B
No residuos
213
129
125
PM
21,000
13,900
13,774
% Lys
27.7
10.9
15.2
% Arg
1.4
9.3
6.1
27
Biologa molecular I
H3
H4
135
102
15,273
11,236
9.6
10.8
13.3
13.7
Tabla 2. Protenas histnicas presentes en las clulas eucariotas (Lehninger, 2009).
El empaquetamiento del ADN eucariota comienza con la formacin de un octmero

compuesto por 2H2A, 2H2B, 2H3 y 2H4 al que el ADN le da dos vueltas, formando el
nucleosoma y la H1 se ancla para dar soporte a la estructura. La hebra en este momento
parece una cuenta de rosario y tiene un ancho de 10 nm (Figura 29).
Figura 29. Estructura del nucleosoma, formando por el octmero (2 H2A, 2 H2B, 2 H3 y 2 H4) y el
ADN dando dos vueltas y la histona H1 que mantiene el ADN unido. Arriba se puede observar un
micrografa de las fibras de 10 nm en forma de cuentas de rosario (modificado de
http://www.departamentos.ulpgc.es/dbbf/medicina/bioquimicaI/DNA-genomas.pdf)
A continuacin la hebra de 10 nm gira sobre s misma de manera que las H1 que

mantienen la estructura forman un hexmero tal y como se muestra en la Figura 30, de
esta manera se obtienen las fibras de 30 nm.
28
Biologa molecular I
Figura 30 Formacin de la fibra de 30 nm. (modificado de

En este punto, se forman los que se denomina armazn nuclear, armazn del
cromosoma o Scaffold con protenas tipo MAR sobre las que se une la fibra de 30 nm tal
y como se observa en la Figura 31 formando la fibra de 300 nm.
29
Biologa molecular I
Figura 31. Formacin de la hebra de 300 nm. Se puede observar el armazn del cromosoma en la
fotografa y cmo se une la hebra de 30 nm a esta protena (modificado de
La fibra de 300 nm es la que forma la cromatina de todas las clulas eucariotas cuando
el ncleo se encuentra en interfase En la Figura 32 se puede observar la fotografa de un
ncleo en esta fase, la zona ms oscura pertenece al nucleolo (n) regin donde se
realiza la transcripcin del ARN ribosmico, por otro lado se observan zonas ms densas
denominada heterocromatina donde el ADN est un poco ms condensado y no se
realiza transcripcin mientras que en la zona ms clara est la eucromatina donde el
ADN se encuentra en fibras de 300 nm y la transcripcin tiene lugar.
30
Biologa molecular I
Figura 32. Imagen de un ncleo (N) donde se observa el nucleolo (n), las zonas ms oscuras
(Heterocromatina) y las zonas menos oscuras (eucromatina) (tomada de
http://biologiabcn2012.blogspot.mx/2013/01/organulos-celulares.html)
Slo cuando el ncleo se va a dividir la fibra de 300 nm gira sobre s misma para formar la fibra de
700 nm y el cromosoma queda totalmente condensado adquiriendo la forma que todos
conocemos, el cromosoma mittico (Figura 32A). Hay que recordar que en el ciclo celular (que
vimos anteriormente) primero ocurre la fase S donde el ADN se replica y despus la fase M donde
el ncleo se divide, esto quiere decir que los cromosomas mitticos cuentan con dos molculas de
ADN idnticas, cada una de ellas llamada cromtida, unidas por el centrmero (Figura 32). Como
cada cromtida del cromosoma est formado por una fibra de 700 nm, se dice que el cromosoma
mittico tiene 1,400 nm.
31
Biologa molecular I
Figura 33. Cromosoma mittico. A. Fotografa de los 23 pares de cromosomas humanos; B.

Partes del cromosoma, vase cmo cada cromtida est formada por ADN (modificado de
http://recursostic.educacion.es/ciencias/biosfera/web/estudiante/4ESO/genetica1/contenidos4.htm
y http://cienciaobjetiva.wordpress.com/2011/08/02/cromosoma-2-evidencia-de-evolucion/
En la Figura 34 se presenta un resumen de la condensacin del ADN eucaritico.
Figura 34. Fases de la condensacin del ADN eucaritica, desde la molcula de ADN que tiene 2
nm, hasta el cromosoma mittico que cuenta con 1,400 nm (Barnes y col., 2008).
32
Biologa molecular I
tamao del ADN

en pares de
bases
Qu implicaciones puede tener todo este desarrollo para un Ingeniero en Biotecnologa?

Adems de que es importante conocer la estructura que tiene el ADN eucaritico, esta
informacin tambin es relevante cuando se hacen estudios genticos, por ejemplo, para
diferenciar si una clula ha sufrido lisis o se ha suicidado. Cuando una clula detecta que
tiene algn error gentico, se produce lo que se denomina apoptosis o muerte celular
programada, para ello, la misma clula empieza a autodestruirse empezando por su ADN
donde unas nucleasas especiales, denominadas nucleasas micrococales, hidrolizan el
ADN entre los nucleosomas lo que da como consecuencia bandas de 200 pb. Este
fenmeno es diferente al que ocurre durante una lisis, ya que este caso la clula se
rompe liberando el contenido de los lisosomas (recordemos que son los organelos
encargados de la digestin) de manera que las nucleasas se liberan e hidrolizan el ADN
de manera inespecfica. En la Figura 35 les presento unas imgenes de ADN producto de
una muerte celular programada (Figura 35A) y un ADN producto de una lisis celular
(Figura 35B).
Figura 35. Imagen de ADN proveniente A) de una clula muerta por apoptosis y B) de
una clula muerta por lisis celular. Obsrvese cmo en el primer caso se observan
bandas de 200 pb y sus mltiples como consecuencia de la accin de una nucleasa
micrococal; en cambio en la lisis se observa un barrido del ADN sin bandas de tamao
definido.
33
Biologa molecular I
En las clulas eucariotas, adems existe el ADN mitocondrial y el ADN cloroplstico,

presente en las mitocondrias y cloroplastos respectivamente, que a diferencia del ADN
nuclear, es circular como se observa en el Figura 36.
Figura 36. Fotografa de ADN mitocondrial en replicacin. Obsrvese que es una molcula
circular, similar al ADN cloroplstico (tomado de
http://pendientedemigracion.ucm.es/info/genetica/grupod/Replicacion/Replicacion.htm)
Ahora que conocemos la estructura del ADN de las clulas eucariotas vamos a revisar
cmo ocurre la replicacin de las mismas.
1.3.2. Pasos de la replicacin

Las diferencias en la estructura de los cromosomas eucariotas hacen que existan
pequeas diferencias en el proceso de replicacin. Las enzimas involucradas tiene una
funcin parecida, existen helicasas, primasas y ADN Polimerasas. El listado de las ADN
Polimerasas de los eucariotas se observan en la Tabla 3.
Compartimiento
celular
Actividad
primasa
asociada
Funcin
biolgica
Ncleo
Ncleo
Mitocondria
Ncleo
Ncleo
Si
No
No
No
No
Replicacin
de la hebra
Reparacin
del ADN
Reparacin
del ADN
Replicacin
de la hebra
Desconocido
34
Biologa molecular I
retardada
mitocondrial
retardad
Tabla 3. ADN Polimerasas presentes en las clulas eucariotas.
Como se indic anteriormente, los cromosomas eucariotas tiene varios ORI por lo que la
replicacin comienza en diferentes puntos de la molcula (Figura 37).
Figura 37. Las clulas eucariotas poseen mltiples orgenes de replicacin (tomado de
http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Multipl.ori.euc.jpg)
Durante la replicacin es necesario desenrollar el ADN que recordemos que est unido a
los nucleosomas formados por 8 histonas, este proceso ocurre como se observa en la
Figura 38.
35
Biologa molecular I
Nucleosoma
Doble
cadena de
ADN
El nucleosoma se desenrolla y las histonas se
separan
Orquilla de replicacin
Se sintetiza la nueva cadena de ADN
Nueva cadena de ADN
Orquilla de
replicacin
El nucleosoma se enrolla de nuevo

Un nuevo nucleosoma se
formar en esta cadena
Figura 38. Durante el proceso de replicacin el nucleosoma se desenrolla para dejar libre la
molcula de ADN que podr ser duplicada (modificado de Lodish y col., 2005).
Finalmente, debemos analizar qu ocurre en los extremos de los cromosomas lineales ya

que el mismo proceso de replicacin conlleva a un acortamiento de los mismos. Si
recordamos, en la cadena retardada aparecen los fragmentos de Okasaki donde el
cebador es sustituido por ADN por la accin de la ADN Polimerasa I, todo ello gracias a
que existe un extremo 5 adyacente donde pegar los nucletidos. En los extremos de los
cromosomas eucariotas, estos extremos no existen por lo que no es posible sustituir el
cebador y el extremo 5 quedara ms corto que el extremo 3 perdiendo as informacin
gentica en cada replicacin (Figura 39) (Griffiths y col., 2008).
36
Biologa molecular I
Figura 39. En los extremos de los cromosomas eucariotas, el extremo 5 de la cadena retardada
queda ms corto que el extremo 3 (Griffiths y col., 2008).
Para evitar este efecto, existen los telmero, que son secuencias a ADN repetidas
presentes en los extremos de cada cromosoma que no tienen informacin para ninguna
protena y cuya funcin es evitar el acortamiento de los cromosomas. Durante la
replicacin, la cadena molde es alargada por la accin de una enzima denomina
Telomerasa, que contiene una pequea molcula de ARN que es usada como molde
para la adicin de secuencias complementarias al extremo 3 de la cada de ADN (Figura
40).
Figura 40. Accin de la telomerasa que contiene una secuencia de ARN que es utilizada como
molde (Griffiths y col., 2008)
37
Biologa molecular I
De esta manera, como puedes observar en la Figura 41, la telomerasa aade secuencias
repetidas al extremo 3 de la cadena molde, de manera que se puede realizar la
replicacin de la misma y evitar as el acortamiento.
Cromosoma
telmero
La telomerasa aade secuencia repetidas en

el extremo 3
Se adiciona el Primer ARN seguido de la

sntesis de la cadena
Ocurre la ligacin y se remueve el cebador
Figura 41. Accin de la telomerasa para evitar el acortamiento de los cromosomas (tomado de
Lodish y col., 2005).
An con la accin de la telomerasa, existen pruebas cientficas que indican que durante la
replicacin de las clulas, es inevitable el acortamiento de los cromosomas y sta es una
de las causas del envejecimiento celular (Griffiths y col., 2008), quiz en un futuro t
puedas descubrir cmo evitarlo y darnos la vida eterna, qu opinas?
As terminamos de desarrollar esta primera unidad, espero que haya sido interesante y
hayas entendido la evolucin y la replicacin as como la importancia de estos procesos y
sus aplicaciones para los Ingenieros en Biotecnologa. Te invito a revisar la bibliografa
que se anexa que te ayudar a reforzar tus conocimientos. A continuacin, realiza las
actividades programadas para evaluar esta unidad Suerte!
38
Biologa molecular I
Actividades
La elaboracin de las actividades estar guiada por tu docente en lnea, mismo que
te indicar, a travs de la Planeacin didctica del docente en lnea, la dinmica que t
y tus compaeros (as) llevarn a cabo, as como los envos que tendrn que realizar.
Para el envo de tus trabajos usars la siguiente nomenclatura: BBM1_U1_A1_XXYZ,

donde BBM1 corresponde a las siglas de la asignatura, U1 es la etapa de conocimiento,
A1 es el nmero de actividad, el cual debes sustituir considerando la actividad que se
realices, XX son las primeras letras de tu nombre, Y la primera letra de tu apellido
paterno y Z la primera letra de tu apellido materno.
Autorreflexiones
Para la parte de autorreflexiones debes responder las Preguntas de Autorreflexin
indicadas por tu docente en lnea y enviar tu archivo. Cabe recordar que esta actividad
tiene una ponderacin del 10% de tu evaluacin.
Para el envo de tu autorreflexin utiliza la siguiente nomenclatura:
BBM1_U1_ATR _XXYZ, donde BBM1 corresponde a las siglas de la asignatura, U1 es
la unidad de conocimiento, XX son las primeras letras de tu nombre, y la primera letra
de tu apellido paterno y Z la primera letra de tu apellido materno
Cierre de la unidad
Los cambios en el genoma que se transmiten a la descendencia y le confieren al
organismo una ventaja en el ambiente donde habita pueden modificar a la especie y de
esta manera ocurrir la evolucin. Es por ello, que est relacionado con el proceso de
replicacin donde las molculas de ADN se duplican y de esta manera se preparan para
el proceso de divisin celular.
La replicacin del ADN de todos los tipos celulares tienen semejanzas que hemos ido
analizando durante la unidad: la composicin del cido nuclico est formado por los
39
Biologa molecular I
mismos nucletidos, la polimerizacin de los mismos ocurre en direccin 5 3, existe el

origen de replicacin donde comienza el proceso, helicasas que reconocer este sitio y
rompe los puentes de hidrgeno, ADN polimerasas y ADN ligasas. As mismo, se forma la
cadena lder y la cadena retardada donde aparecen los fragmentos de Okasaki.
Aun as, el ADN de las clulas procariotas es circular y de menor tamao que el ADN de
las clulas eucariotas. Es por ello, que en la primera aparece un nico origen de
replicacin al contrario de las eucariotas. As mismo, las clulas eucariotas tienen
cromosomas lineales por lo que existen secuencias telomricas en sus extremos para
evitar el acortamiento de las secuencias durante la replicacin.
En esta unidad hemos analizado todos estos procesos y espero que hayan apreciado su
importancia en la vida celular.
Para saber ms
Para comprender mejor los temas que hemos expuesto te invito a revisar la siguiente
bibliografa:
1. Barnes, S.N., Curtis, E., Schnek, A. (2008) Biologa, 7a Edicin, Ed. Mdica
Panamericana, Argentina, pps 138-141. En este texto pueden recordar cmo ocurre el
Ciclo Celular de las clulas eucariotas.
2. Berg, J.M., Tymoczko, J.L., Stryer, L. (2007) Bioqumica. Ed Revert, Espaa, pps
108-119. En este texto se explica la estructura del ADN y los cromosomas
bacterianos.
3. Griffiths, A.J.F., Miller, J.H., Suzuki, D.T., Lewontin, R.C., Gelbart, W.M.(2008)
Gentica, 7a Edicin, Ed. Mc Graw Hill/Interamericana de Espaa, S.A. pps. 241-266.
En este captulo 8 encontrars informacin sobre la estructura del ADN y el proceso
de replicacin con una explicacin detallada del experiment de Meselson y Stahl
donde demuestran que la replicacin es un proceso semiconservativo.
4. Glubert, H. Tendencias futuras de las aplicaciones de los istopos y de las radiaciones
Boletn No 19 del Organismo Internacional de Energa Atmica,
http://www.iaea.org/Publications/Magazines/Bulletin/Bull196/Spanish/19605093847_es
.pdf. Este texto te habla sobre las aplicaciones de estas molculas en la agricultura, la
medicina, la industria y el medio ambiente.
5. Herrero E., Aldea M., Gallego, C. (2007) El ciclo celular de las levaduras: un buen
modelo eucaritico? III Simposio cientfico en Biologa Celular. En este texto se explica
detalladamente cmo ocurre el proceso de gemacin y su asociacin con el ciclo
celular.
40
Biologa molecular I
6. Kniseley, Los radioistopos al servicio del hombre,

http://www.iaea.org/Publications/Magazines/Bulletin/Bull164/Spanish/16405800211_es
.pdf. En este texto encontrars una explicacin detallada de las aplicaciones que tiene
los radioistopos en la biologa y la medicina.
7. Lehninger. (2009). Bioqumica. Mxico. Editorial Omega, pps 324-357. En este
Captulo 12, podrs recordar la estructura de los cidos nuclicos que vimos en la
materia de Bioqumica. Adems, en las pps. 881-885 se explica cmo se organiza el
ADN de los cromosomas eucariotas.
8. Martinki, J. (2009) Brock Biologa de los Microorganismos, 12a Edicin, Ed. AddisonWesley, EEUU En las pps. 137-142 encontrars una explicacin sobre el proceso de
divisin por fisin binaria mientras que en las pps 167-185 se explica el proceso de
replicacin en clulas procariotas y eucariotas de una manera didctica y sencilla.
9. Mermelada, C.A. (2009) Darwin y la teora de la evolucin. Es un texto que explica la
teora desarrollada por Darwin y su importancia para entender cmo las especies
evolucionan para desarrollarse mejor en el ambiente donde habitan.
10. Patente Espaola 2 229 492. Este documento muestra la importancia de los plsmidos
bacterianos y cmo han sido objetos de patente.
11. Soto Pol, V.R., Hernndez Guzmn, J., Morales Hernndez, Y., Dios de la Cruz, O.
(2008) Produccin de insulina a partir de organismos bacterianos: Revisin
bibliogrfica para la tcnica molecular. Kuxlvar 29-33. En este artculo se hace una
revisin muy amena y didctica sobre la produccin de insulina humano en bacterias,
es una buena introduccin para ver la aplicacin de los conocimientos adquiridos en
esta materia en la Ingeniera Gentica.
Fuentes de consulta
1. Alberts, Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., Walter, P. (2010) Biologa
Molecular de la Clula, 5a Edicin, Ed. Garland Publishing, New York.
2. Barnes, S.N., Curtis, E., Schnek, A. (2008) Biologa, 7a Edicin, Ed. Mdica
Panamericana, Argentina
3. Berg, J.M., Tymoczko, J.L., Stryer, L. (2007) Bioqumica. Ed Revert, Espaa.
4. De Robertis, E., Hib, J. (2005) Fundamentos de Biologa Celular y Molecular de De
Robertis. 4a Edicin, Ed. El Ateneo, Argentina.
5. Griddiths, A.J.F., Miller, J.H., Suzuki, D.T., Lewontin, R.C., Gelbart, W.M.(2008)
Gentica, 7a Edicin, Ed. Mc Graw Hill/Interamericana de Espaa, S.A.
6. Lewin, B. (2008) Genes IX, Ed. McGraw-Hill/Interamericana de Mxico.
7. Lodish, H., Berk, A., Zipursky, S.L., Matsudaira, P., Baltimore, D., Darnell, J. (2005)
Biologa Celular y Molecular, 5 Edicin, Ed. Mdica Panamericana, Argentina.
8. Martinki, J. (2009) Brock Biologa de los Microorganismos, 12a Edicin, Ed. AddisonWesley, EEUU.
41
Biologa molecular I
9. Singer, M., Berq. P. (1993) Genes y genomas. Una perspectiva cambiante, Ed.
Omega, Barcelona, Espaa.
10. Sobern, F.J. (1997). La ingeniera gentica y a nueva biotecnologa. Ed. Fondo de
Cultura Econmica, Mxico.
42

Replicacion

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La competencia especfica a alcanzar en esta primera

1.1. Importancia de la replicacin en la divisin celular

Hay muchas maneras de explicar la evolucin, especficamente la evolucin biolgica

contaminacin, los rboles en Inglaterra empezaron a cambiar de color como

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primero es para crecimiento o para sustitucin de clulas en los diferentes rganos, de

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1.2. Replicacin en procariotas

1.2.1. Caractersticas del ADN de los procariotas

Figura 11. Estructura general de un nucletido (Barnes y col., 2008)

Figura 12. Enlace fosfodister entre el OH del C3 y el grupo fosfato el C5 (modificado de

Figura 13. Estructura del ADN (Barnes y col., 2008).

Figura 14. La cadena nueva siempre se sintetiza en direccin 5 3 (modificado de

Figura 15. Estructura de un cromosoma bacteriano. A representacin de una molcula laxa y

Este empaquetamiento est mediado por la accin de unas enzimas denominadas

Figura 16. Accin de la enzima Topoisomerasa para superenrollar el cromosoma bacteriano

En recientes aos, se han encontrado protenas con caractersticas parecidas a las

Dmero con subunidades a y b de 9,000 D

Tabla 1. Protenas bsicas detectadas en procariotas (modificado de

1.2.2. Pasos de la replicacin

Figura 20. Reconocimiento del Origen de Replicacin (ORI) por la helicasa.

5 ADN Polimerasa III

Figura 22. Accin de la ADN Polimerasa en la cadena lder

Entonces, qu ocurre en el extremo 5? Como no es posible polimerizar nucletidos en

Figura 24. Accin de la ADN Polimerasa I

Figura 25. Accin de la ADN Ligasa

Figura 26. Actividad correctora de la ADN-Polimerasa a) una base es introducida incorrectamente

Figura 27. Replicacin de un cromosoma bacteriano (Martinki, 2009).

Figura 28. Replicacin mediante el crculo rodante (Griffiths y col., 2008).

1.3. Replicacin en eucariotas

1.3.1. Caractersticas del ADN de los eucariotas

Universidad Abierta y a Distancia de Mxico

Tabla 2. Protenas histnicas presentes en las clulas eucariotas (Lehninger, 2009).

El empaquetamiento del ADN eucariota comienza con la formacin de un octmero

A continuacin la hebra de 10 nm gira sobre s misma de manera que las H1 que

Figura 30 Formacin de la fibra de 30 nm. (modificado de

Figura 33. Cromosoma mittico. A. Fotografa de los 23 pares de cromosomas humanos; B.

En la Figura 34 se presenta un resumen de la condensacin del ADN eucaritico.

tamao del ADN

Qu implicaciones puede tener todo este desarrollo para un Ingeniero en Biotecnologa?

En las clulas eucariotas, adems existe el ADN mitocondrial y el ADN cloroplstico,

1.3.2. Pasos de la replicacin

Tabla 3. ADN Polimerasas presentes en las clulas eucariotas.

Nueva cadena de ADN

El nucleosoma se enrolla de nuevo

Finalmente, debemos analizar qu ocurre en los extremos de los cromosomas lineales ya

La telomerasa aade secuencia repetidas en

Se adiciona el Primer ARN seguido de la

Ocurre la ligacin y se remueve el cebador

Para el envo de tus trabajos usars la siguiente nomenclatura: BBM1_U1_A1_XXYZ,

mismos nucletidos, la polimerizacin de los mismos ocurre en direccin 5 3, existe el

6. Kniseley, Los radioistopos al servicio del hombre,

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