SEP

DGEST

INSTITUTO TECNOLOGICO
NACIONAL

ASIGNATURA:

ANALISIS INTRUMENTAL
DOCENTE:

Q.F.B VICTOR MANUEL MONTALVO VALDEZ

TEMA:

NEFALOMETRIA Y TURBIDIMETRIA

ALUMNO:

CUEVAS CUEVAS SAUL

ESPECIALIDAD:

BIOQUIMICA

NEFELOMETRA Y TURBIDIMETRIA

NEFELOMETRA
CARACTERISTICAS:
Es la medida de la luz dispersada en ngulos distintos al de incidencia. Lo ms
frecuente es que sea entre los 15-19. La medida se realiza en aparatos
diseados con el sistema de deteccin situado a ngulos predeterminados.
Es un procedimiento analtico que se basa en la dispersin de la radiacin que
atraviesan
las
partculas
de
materia.
Cuando
la luz atraviesa
un
medio transparente en el que existe una suspensin de partculas slidas, se
dispersa en todas direcciones y como consecuencia se observa turbia. La
dispersin no supone la prdida neta de potencia radiante, solo es afectada la
direccin de la propagacin, porque la intensidad de la radiacin es la misma en
cualquier ngulo. La intensidad depende de: el nmero de partculas suspendidas,
su tamao, su forma, los ndices refractivos de la partcula y del medio
dispersante, y la longitud de onda de la radiacin dispersada. La relacin entre
variables y es ms factible un tratamiento terico, pero debido a su complejidad
raras veces se aplica a problemas analticos especficos.
El procedimiento generalmente es emprico y slo se consideran 3 factores:
La concentracin: cuanto mayor sea el nmero de partculas, mayor es la
dispersin.
Tamao de la partcula: factores como el pH, la velocidad y orden de la mezcla,
concentracin de los reactivos, duracin del estado de reposo y la fuerza inica.
Longitud de onda: generalmente las muestras se iluminan con luz blanca, pero si
estn coloreadas, se debe escoger una porcin del espectro electromagntico en
la que la absorcin del medio se reduzca al mnimo.
En las muestras se agregan agentes tensoactivos (como gelatina), para prevenir la
coagulacin del coloide. Slo se obtienen datos confiables si se controlan
escrupulosamente las variables que afectan el tamao de partculas.
Aplicacin
Generalmente, nefelometra y turbidimetra se utilizan en el anlisis de la calidad
qumica del agua para determinar la claridad y para el control de los procesos de
tratamiento. Estos mtodos pueden ser tambin apropiados para ensayos
cuantitativos que usan complejos antgeno-anticuerpo o para medir la cantidad de
protenas en fluidos. Las medidas turbidimtricas y nefelomtricas ocupan una
posicin destacada en los laboratorios clnicos. Se han aplicado para la
determinacin de inmunoglobulinas, protenas del complemento, protenas de fase
aguda, protenas de coagulacin entre otras.
VENTAJAS

o Es un examen para medir en forma rpida y precisa el nivel especfico de

ciertas protenas, llamadas inmunoglobulinas determina concentraciones de
pocas partes por milln (ppm), con una precisin de 1 al 5%.
o Rapidez en los resultados
o Velocidad de proceso de 100 resultados a la hora, obteniendo el primer
resultado a los 9 minutos.
o Alta capacidad
o Amplio surtido de parmetros en diferentes fluidos biolgicos.
o Seguridad Absoluta
o Elimina totalmente el riesgo de exceso de antgeno hasta ms de 50 veces
del margen de normalidad.

o
o
o
o

DESVENTAJAS
No puede distinguir anticuerpos
Solo se puede aplicar a microorganismos unicelulares.
Es afectada por burbujas y slidos no disueltos.
Es sensible en un rango acotado de concentracin (igualmente la muestra
se puede diluir).
Normalmente se usan longitudes de onda de aproximadamente de 540 nm.

EQUIPOS UTILIZADOS:
Nefelmetro
Un nefelmetro (del griego ,
nube,
y
,
medida) es
un instrumento para
medir
partculas
suspendidas en un lquido. Esto lo hace empleando
una fotocelda colocada en un ngulo de 90 con respecto a
una fuente luminosa. La densidad de partculas es
entonces una funcin de la luz reflejada por las partculas a
la fotocelda. Cuanta ms luz se refleje en una determinada
densidad de partculas depende de las propiedades de las
partculas como su forma, color y reflectividad.
Estableciendo a una correlacin de trabajo entre turbidez
y slidos suspendidos (que ms til, pero generalmente una ms difcil de
cuantificacin de partculas) debe ser establecido independientemente para cada
situacin.

TURBIDIMETRA

CARACTERISTICAS:
La Turbidimetra mide la reduccin de la transmisin de luz debido a partculas de
una suspensin y cuantifica la luz residual transmitida.
Estudios tericos y experimentales han mostrado que soluciones diluidas de
diferentes tipos de bacterias, independientemente del tamao celular, tienen casi
la misma absorbancia por unidad de concentracin de peso seco. Esto quiere
decir que, en soluciones diluidas, la absorbancia es directamente proporcional al
peso seco, independientemente del tamao celular del microorganismo.
Es la medida de la intensidad de un haz de luz incidente cuando ste pasa a
travs de una suspensin de partculas. La turbidimetra se mide a 0 grados del
haz incidente, es decir, en su misma direccin. La disminucin de la intensidad se
puede medir como %T o como A en cualquier espectrofotmetro o autoanalizador.
Cuando la radiacin electromagntica atraviesa una solucin, esta puede ser
absorbida o dispersada; depende de las propiedades de la solucin. Cuando la
radiacin es dispersada se usan la turbidimetra, que se basa en la medicin de la
intensidad de la luz trasmitida como una funcin de la concentracin de la fase
dispersa; esta tcnica se usa para determinar la cantidad de material slido en una
suspensin coloidal. En estos anlisis se tiene en cuenta que tan grande son las
partculas puesto que se desean medir aquellas que tienen un tamao entre 1 y
103 nanmetros; tenindose que agregar una solucin de etanol-glicerol que
ayuda a estabilizar la suspensin y tambin cloruro de sodio y cido clorhdrico en
solucin para inhibir el crecimiento de microcristales de BaSO4.

VENTAJAS:
El mtodo turbidimetrico puede realizarse tanto en el rango de luz visible, como el
de ultravioleta dando un gran espectro de accin
Se puede trabajar con densidades microbianas bajas, de microorganismos de
tamao de unos cuantos nanmetros.
DESVENTAJAS:
Las suspensiones con las que se trabajan no deben tener una absorbancia mayor
a 0.3, ya que valores mayores producen desviaciones de la ley de Beer.
El trabajar con suspensiones diluidas puede involucrar un mayor error de pipeteo
y menor sensibilidad por el bajo nivel de absorcin.

EQUIPOS UTILIZADOS:

Un turbidmetro es un instrumento porttil o de instalacin para medir las

partculas suspendidas en un lquido o un gas coloidal. Un turbidmetro mide las
partculas en suspensin con un haz de luz (fuente del haz) y un detector de luz
fijado a 90 del haz original. La densidad de las partculas est en funcin de la
luz reflejada por las partculas suspendidas en el detector. La cantidad de luz
reflejada para una densidad dada de partculas depende de las propiedades de
partculas como su forma, color y reflectividad. El turbidmetro se calibra con un
material particulado conocido, comnmente conocido como el polvo de la calle de
Arizona. Posteriormente, se utilizan los factores ambientales (los factores K) para
compensar por el polvo claro o ms oscuro. Los factores-K estn determinados
por el usuario activando el turbidmetro cerca de una bomba de muestreo de aire y
comparando los resultados.

Usos del turbidmetro

Los principales usos de un turbidmetro son en el anlisis de la calidad del aire
para vigilar la contaminacin, la vigilancia del clima y la visibilidad. Las partculas
suspendidas son habitualmente los contaminantes orgnicos, gaseosos y polvo.

Esta tabla muestra los tipos y los tamaos de las partculas de diversos
contaminantes. Esta informacin es til para comprender el carcter de la
contaminacin de partculas en el interior de un edificio o en el aire, tambin es til
para entender el nivel de limpieza en un ambiente controlado.

Los contaminantes biolgicos incluyen mohos, hongos, bacterias, virus, caspa de

animales, caros del polvo, polenes, clulas de piel humana, partes de cucarachas
y muchas otras cosas. Estos son los peores enemigos del especialista de la
calidad del aire y son contaminantes que causan problemas de salud. Los niveles
de contaminacin biolgica depende de la humedad y temperatura que permita la

supervivencia de los microorganismos. La presencia de animales, plantas,

insectos y roedores aumenta el nivel de contaminacin biolgica.

Un turbidmetro, tambin conocido como nefelmetro, es un instrumento que a

travs del anlisis ptico determina la cantidad de sustancia en un lquido. Un
turbidmetro, por ejemplo, se puede utilizar en el sector de aguas residuales y, en
particular, en los tanques de decantacin , para medir la cantidad de slidos
suspendidos en agua y luego establecer si se puede enviar al siguiente nivel de
purificacin , o si se bombear directamente en el ro / mar / canal.

A continuacin, se hace evidente por qu esta instrumentacin tiene que ser de

alta calidad con el fin de evitar la creacin de problemas ambientales y por lo tanto
a nosotros mismos.

Diferencia entre nefelometra y turbidimetra

La eleccin entre uno de ambos mtodos reside en la dispersin de luz, si es

extensa, es apropiado aplicar la turbidimetra, en cambio si es mnima es
apropiada la nefelometra. De la nefelometra se obtienen mejores resultados,
porque determina concentraciones de pocas partes por milln (ppm), con una
precisin de 1 al 5%.
La nefelometra se basa en la medicin de radiacin dispersa, en cambio la
turbidimetra en la medicin de la intensidad de un haz disminuido.
El instrumento usado en la nefelometra, el nefelmetro se asemeja al fluormetro.
En cambio en turbidimetra se utiliza el turbidemetro que es un fotmetro de filtro.