Microbiologa ambiental IIS-15 26 de agosto de 2015

CARACTERIZACIN BACTERIANA MEDIANTE PRUEBAS QUE EVALAN SU ACTIVIDAD

METABLICA.
Dejongh Javier, Ospino Eugenia, Pardo Danay
Facultad de ingeniera, ingeniera ambiental y sanitaria, Santa Marta, Magdalena, Colombia
javidejongh@gmail.com, danayvanesaa@gmail.com, eugedejesus@gmail.com,
Para identificar una especie, se requiere un conocimiento detallado de su actividad bioqumica o
metablica, puesto que despus del mtodo molecular (ARN y ADN), otras tcnicas usadas no
permiten diferenciar un microorganismo de otro de forma precisa. [1]
A manera de ejemplo, encontramos la bacteria escherichia Coli, la cual no puede diferenciarse por
observacin microscpica de la salmonella typhosa, que es la responsable de la fiebre tifoidea; Sin
embargo, se pueden distinguir realizando las respectivas pruebas metablicas.[1]
Las pruebas bioqumicas se utilizan para distinguir entre las diversas vas energticas seguidas
por los microorganismos. Entre ellas estn: la reaccin de los microorganismos con el oxgeno, la
reaccin de xido-reduccin, reaccin de las oxidasas, reaccin de la catalasa, reduccin de
nitratos, etc.[2]
En el presente laboratorio, se identificar y clasificar 3 tipos de bacterias (Bacilos
gramnegativos), que se encuentra en medios de cultivos puros, utilizando las respectivas pruebas
enzimticas.
En la prctica experimental, las pruebas bioqumicas desarrolladas, fueron las siguientes: la
catalasa, en la cual se deposit un poco de perxido de hidrgeno en una placa, frotndose
inculo de la cepa correspondiente; la prueba de la oxidasa, en la que se frot cultivo A, B, y C
con la ayuda de palillos, y se impregn en las diferentes tirillas indicadoras de pH; la prueba de
TSI, dnde se inocul con la ayuda de un asa recta, en el fondo del cultivo mediante una puncin,
y en la superficie, a travs de zigzag; la prueba de SIM, que utilizando igualmente el asa recta, se
infundi el cultivo hasta la mitad; la prueba de Citrato, en dnde se tom un pequeo inculo
usando el anterior instrumento, para luego hacer un frote sin puncin en la superficie del tubo;
Finalmente, se tom con la ayuda de un asa redonda una muestra de cultivo bacteriano, para
luego introducirlo y agitarlo en los respectivos tubos de ensayos incubando a 35C. Esto se realiz
para las pruebas de Ureasa, Fructuosa, Rojo de metilo y Voges Proskauer.[3]

Microbiologa ambiental IIS-15 26 de agosto de 2015

TABLA 1.

VP

Xil

Fruc

Gal

bacilo

bacilo

G-

RM

Lactosa

Urea

H2 S

Movilidad

Indol

Gas

H2 S

Sacarosa

Glucosa

P. Oxidasa

P. Catalasa

G-

Gram

bacilo

Morfologa

Microorganismo

citrato

PRUEBAS BIOQUMICAS PARA LA IDENTIFICACIN DE LAS BACTERIAS

TSI
SIM

Al analizar los resultados se encontr que la bacteria A corresponde a una bacteria del gnero
Pseudomonaceae. En la prueba tanto de catalasa como oxidasa son positivas, igualmente la
prueba por la utilizacin de la glucosa y maltosa por oxidacin, ya que es un microorganimos
aerobio.[4]
La bacteria B corresponde a Enterobacter. Estas corresponden a una gran familia de bacilos o
cocobacilos los gram-aerobios y/o anaerobios facultativos, mviles (con flagelacin pertrica) o
inmviles. Se caracterizan por ser fermentadoras de glucosas con o sin produccin de gas
(metabolismo oxidativo-fermentativo)[4]
La bacteria C,
pertenece al gnero yersinia. Este se localiza dentro de la familia
enterobacteriaceae, se caracteriza por poseer bacilos pequeos o cocobacilos gram- con
flagelacin pertrica, mviles a 25C e inmviles a 37, son fermentadores de glucosa con la
consiguiente produccin de cido, no son fermentadores de lactosa, no forman esporas, solo
excepcionalmente presenta cpsula y son oxidasa negativo.[4]
Por ltimo, Gracias a la prctica se identific el procedimiento correcto de manipulacin que se
emplea para las pruebas bioqumicas en el laboratorio, con los cuales se pudo diferenciar y
clasificar los tres tipos de bacterias: enterobacter, yersinia y pseudomona.
BIBLIOGRAFA
1. Pelczar Michael J, Reid Roger .1966. Microbiologa. 2 edicin. Mcgraw- Hill, Madrid ,
Espaa. 650 p.
2. Prez Granados Raquel, Villaverde Peris Mara. 2002.Microbiologa tomo II. Paraninfo, S.A,
Madrid, Espaa. 364P.
3. Luna, F. 2012. Manual de prcticas de laboratorio: Microbiologa general y aplicada. 1
Edicin. Editorial Unimagdalena, Santa Marta, Colombia. 112 p.
4. Granados Prez Raquel, Villaverde Ma Carmen. 1997. Microbiologa 1. Paraninfo,
Madrid, Espaa.321P.