CONTEO DE

MESFILOS,
TERMFILOS,
PSICRFILOS,
HONGOS Y
COLIFORMES
TOTALES.
Prctica No. 1

Yessica Iras Escobedo Flores

Kevin Francisco Chacn Garca
Nancy Paola Grajeda Nieto
Yanira Ivonne Snchez Garca

Conteo de mesfilos, termfilos,

psicrfilos, hongos y coliformes
totales.
PRCTICA NO. 1

RESUMEN
Los alimentos aun estando en ptimas condiciones de higiene contienen una
carga microbiana ya sea intrnseca, propia del alimento, o externa proveniente
de alguna fuente de contaminacin, por eso la mayora de los alimentos se
refrigeran para poder conservarlos por mayor tiempo, las bacterias se pueden
subdividir en 3 grandes grupos segn su rango de crecimiento optimo,
psicrofilas, msofilas y termfilas, dentro de estas las ms importantes para la
salud humana sol las coliformes, que son patgenos causantes de diversas
enfermedades. Adems los alimentos tambin pueden contener otro tipo de
microorganismos como los hongos y las levaduras, causantes de la formacin
de micotoxinas que pueden perjudicar al consumidor. En esta prctica se
abunda en el tema del conteo en placa de este tipo de microrganismos
tomando como parmetros las normas establecidas en Mxico, se realizaron
conteos de diferentes tipos de alimentos lquidos y slidos, (frutos, jugos,
comida), comparando los resultados con los lmites establecidos.

OBJETIVOS
Realizar adecuadamente la tcnica de cuenta en placa para diversos grupos
microbianos de importancia en alimentos.
Interpretar adecuadamente los resultados de la cuenta en placa y sus
implicaciones en la calidad del alimento.
INTRODUCCIN
Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de
microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias
artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que
crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de
cultivo diferentes.
Para que los microorganismos crezcan adecuadamente en un medio de cultivo
artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura,

grado de humedad y presin de oxgeno adecuadas, as como un grado

correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los
nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de
todo microorganismo contaminante.
La mayora de los organismos patgenos requieren nutrientes complejos
similares en composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso,
la base de muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de carne y
Peptona a la que se aadirn otros ingredientes. El agar es un elemento
solidificarte muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se
lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al
enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el
crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales
de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis,
etc.
Los
hidratos
de
Carbono
se
adicionan
por
dos
motivos
fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para
detectar reacciones de fermentacin de los microorganismos que ayuden a
identificarlos. El suero y la sangre completa se aaden para promover el
crecimiento de los microorganismos menos resistentes.
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve
afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en
algunos casos, son ajenos por completo al propio medio.

1. disponibilidad de nutrientes adecuados: Un medio de cultivo

adecuado para la investigacin microbiolgica ha de contener, como
mnimo, carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. En
muchos casos sern necesarias ciertas vitaminas y otras sustancia
inductoras del crecimiento. Siempre han de estar presentes las
sustancias adecuadas para ejercer de donantes o captadores de
electrones para las reacciones qumicas que tengan lugar.
2. consistencia adecuada del medio: Partiendo de un medio lquido
podemos modificar su consistencia aadiendo productos como
albmina, gelatina o agar, con lo que obtendramos medios en estado
semislido o slido. Los medios solidificados con gelatina tienen el
gran inconveniente de que muchos microorganismos no se
desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto de
fusin de este solidificante y de que otros tienen la capacidad de
licuarla.
3. presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases: Gran cantidad de
bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de oxgeno
normal. Algunas pueden obtener el oxgeno directamente de variados
sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos slo se
desarrollarn adecuadamente
en
una
atmsfera
sin
oxgeno
ambiental.
En
un
punto intermedio,
los
microorganismos
microaerfilos crecen mejor en condiciones amosfricas parcialmente

4.

5.
6.

7.

8.

anaerobias (tensin
de oxgeno
muy
reducida), mientras los
anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse a
cualquiera de las citadas condiciones.
condiciones adecuadas de humedad: Un nivel mnimo de humedad,
tanto en el medio como en la atmsfera, es imprescindible para un
buen desarrollo de las clulas vegetativas microbianas en los cultivos.
Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mnimas en las
estufas de cultivo a 35-37C proporcionando una fuente adecuada
de agua que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los
cultivos y evitar as que se deseque el medio.
Luz ambiental: La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor
en la oscuridad que en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes
como sera el caso de los microorganismos fotosintticos.
pH: La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el
crecimiento de los microorganismos. La mayora de ellos se desarrollan
mejor en medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren
medios ms o menos cidos. No se debe olvidar que la presencia de
cidos o bases en cantidades que no impiden el crecimiento
bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos
metablicos normales.
Temperatura: Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a
temperaturas entre 15 y 43C. Otros como los psicrfilos crecen a
0C y los termfilos a 80C o incluso a temperaturas superiores
(hipertemfilos). En lneas generales, los patgenos humanos crecen
en rangos de temperatura mucho ms cortos, alrededor de 37C, y
los saproftos tienen rangos ms amplios.
Esterilidad del medio: Todos los medios de cultivo han de estar
perfectamente estriles para evitar la aparicin de formas de vida que
puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano
normal del o de los especmenes inoculados en dichos medios. El
sistema clsico para esterilizar los medios de cultivo es el
autoclave (que utiliza vapor de agua a presin como agente
esterilizante)

MATERIALES Y MTODOS
PREPARACIN DE DILUCIONES (NOM-110-SSA1-1994)

Materiales

Fosfato de sodio monobsico 34,0 g

Agua destilada 1 L

Hidrxido de sodio 1,0 N

Pipetas

Tubos de 16 x 150 mm con tapn de rosca.

Autoclave

Bao de agua con control de temperatura y circulacin mecnica

Homogeneizador peristltico (Stomacher)

Bolsas estriles para homogeneizador peristltico

Balanza granataria con sensibilidad de 0,1 g.

Solucin buffer de fosfatos.

Se prepar una solucin concentrada reguladora de fosfatos con 34,0 g de

fosfato de sodio monobsico en un litro de agua, se ajust el pH a 7.2. Se
esteriliz durante 15 minutos a 121 1,0C. Se conserv en refrigeracin. De
sta solucin concentrada se tom una alcuota de 1.25 ml y se afor a un litro
para utilizarla como solucin de trabajo.

Preparacin de la dilucin primaria.

Para muestras lquidas: Se agit la muestra manualmente con 25 movimientos

de arriba a abajo en un arco de 30 cm efectuados en un tiempo de 7 segundos.
Se tom un 1 ml de la muestra y se diluy en uno de los tubos con 9 ml del
diluyente. (Solucin 1x10-1)
Para muestras slidas o semislidas: Se pesaron 10 g de la muestra por
analizar en un recipiente estril. Se adicion un volumen de 90 ml del diluyente
llevado a una temperatura similar a la de la muestra. Se homogeniz en el
equipo Stomacher (homogenizador peristltico) durante 2 minutos para
obtener una suspensin completa y homognea. (Solucin 1x10 -1)

Preparacin de las diluciones decimales adicionales.

A partir de la solucin de trabajo se tomaron 9 ml y se depositaron en tubos de

tapn de rosca para hacer las diluciones, segn la cantidad de muestras y
repeticiones. De la solucin 1x10 -1 se tom 1 ml y se transfiri a otro tubo para
obtener una dilucin 1x10-2, de esta dilucin se tom 1 ml y se deposit en otro
tubo para obtener una dilucin 1x10-3, as sucesivamente hasta llegar a la
dilucin 1x10-5.La solucin de trabajo y los tubos con diluyente sin muestra
tambin se esterilizaron a 121 1,0C durante 15 minutos. (Figura 1)

Figura 1. Preparacin de las diluciones

decimales.

MTODO PARA LA CUENTA DE BACTERIAS AEROBIAS EN PLACA PARA

MESFILOS, TERMFILOS Y PSICRFILOS (NOM-092-SSA1-1994).
La tcnica se basa en contar las unidades formadoras de colonias o
UFC presentes en un gramo o mililitro de muestra. Se considera que cada
colonia que desarrolla en el medio de cultivo de eleccin despus de un
cierto tiempo de incubacin a la temperatura adecuada, proviene de un
microorganismo o de un agregado de ellos, de la muestra bajo estudio;
ese microorganismo o microorganismos son capaces de formar la colonia, es
decir una UFC. Las colonias puedan contarse de manera confiable, se
hacen las diluciones decimales necesarias de la muestra, antes de ponerla en
e l medio de cultivo. Se reporte como UFC/ unidad de volumen o peso.

Materiales
10 de muestra de naranja y zanahoria
Agar Triptona-Extracto de Levadura (agar para cuenta estndar)

Incubadora con termostato

Contador de colonias de campo obscuro, con luz adecuada, placa

de cristal cuadrculada y lente amplificador.

Bao de agua con o sin circulacin mecnica con termmetro

calibrado

Cajas Petri

Preparacin del medio de cultivo

Se prepar Agar Triptona-Extracto de Levadura (agar para cuenta estndar). Se

pesaron g del agar, y se disolvieron en
ml de agua destilada y se hirvieron
hasta disolucin total. Se esteriliz a 121C durante 15 min.
Se deposit 1 ml de cada una de las diluciones preparadas en cada caja Petri,
luego se aadieron 15 ml del medio preparado. Se mezcl y se dej solidificar.
Se incluyeron cajas sin inculo como control o testigo de esterilidad. (Figura 2)
Las cajas se incubaron en posicin invertida bajo los siguientes parmetros:
Termoflicos aerobios 55 2C 48 2 h
Mesoflicos aerobios* 35 2C 48 2 h
Psicrotrficos 20 2C 3 - 5 das
Psicroflicos 5 2C 7 - 10 das

Posteriormente se contabilizaron las colonias con un equipo contador de

colonias.

Figura 2. Vaciado en placa

MTODO PARA LA CUENTA DE MOHOS Y LEVADURAS EN ALIMENTOS

(NOM-111-SSA1-1994)

Materiales

10 g de muestra de manzana y cscara de naranja

Agar papa dextrosa
Solucin reguladora de fosfatos (solucin concentrada)

Acido tartrico 10,0 g

Agua destilada 100,0 ml

Incubadora con termostato

Contador de colonias de campo obscuro, con luz adecuada, placa

de cristal cuadriculada y lente amplificador.

Bao de agua con o sin circulacin mecnica con termmetro

calibrado

Cajas Petri

Homogeneizador peristltico (Stomacher)

Bolsas estriles para homogeneizador peristltico

Balanza granataria con sensibilidad de 0,1 g.

Preparacin del medio de cultivo

Se utiliz Agar papa - dextrosa, se pesaron g y se disolvieron en

ml de agua
destilada. Se esteriliz a 121C durante 15 min. Se enfri a bao mara y se
acidific con cido tartrico (aproximadamente 1,4 ml de cido tartrico por
100 ml de medio) hasta pH 3.5. Despus se colocaron en las cajas Petri 1 ml de
la muestra lquida directa o de la dilucin primaria, luego las diluciones
decimales.
Se vertieron 15 a 20 ml de agar papa dextrosa acidificado y fundido. Se mezcl
y se dej solidificar. Se incluyeron cajas sin inculo como control o testigo de
esterilidad. Las cajas se incubaron en posicin invertida a 25 C durante 5 das.
Luego se realiz el conteo de las colonias de cada placa.
MTODO PARA LA CUENTA DE MICROORGANISMOS
TOTALES EN PLACA (NOM-113-SSA1-1994)

COLIFORMES

Materiales
10 g de muestra de manzana y cscara de naranja
Agar-rojo-violeta-bilis-lactosa (RVBA),
Solucin reguladora de fosfatos (solucin concentrada)
Acido tartrico 10,0 g
Agua destilada 100,0 ml
Incubadora con termostato
Contador de colonias de campo obscuro, con luz adecuada, placa
de cristal cuadrculada y lente amplificador.
Bao de agua con o sin circulacin mecnica con termmetro
calibrado
Cajas Petri
Homogeneizador peristltico (Stomacher)
Bolsas estriles para homogeneizador peristltico
Balanza granataria con sensibilidad de 0,1 g.

Preparacin del medio de cultivo

Se utiliz Agar-rojo-violeta-bilis-lactosa (RVBA), se pesaron g y se disolvieron

en
ml de agua destilada. Se esteriliz a 121C durante 15 min. Se enfri a
bao mara. Despus se colocaron en las cajas Petri 1 ml de la muestra lquida
directa o dilucin primaria, luego las diluciones decimales.

Se vertieron 15 a 20 ml de agar papa dextrosa acidificado y fundido. Se mezcl

y se dej solidificar. Se incluyeron cajas sin inculo como control o testigo de
esterilidad. Las cajas se incubaron en posicin invertida a 35 C durante 24
horas. Luego se realiz el conteo de las colonias de cada placa.
DISCUSIN Y RESULTADOS.
MTODO PARA LA CUENTA DE BACTERIAS AEROBIAS EN PLACA PARA
MESFILOS, TERMFILOS Y PSICRFILOS (NOM-092-SSA1-1994).
El cuadro 1 contiene los resultados obtenidos de mesfilos en las muestras de
agua de meln y jugo de zanahoria, con un promedio de 6,675 UFC/g y 84,420
UFC/g respectivamente. Los mesfilos aerobios son los microorganismos
capaces de desarrollarse a 30C en condiciones establecidas. Este recuento
estima la microflora total sin especificar tipos de microorganismos. Segn la
NOM-093-SSA1-1994, de Prcticas de higiene y sanidad en la preparacin de
alimentos que se ofrecen en establecimientos fijos, en el apndice informativo
B.1.2.9 para aguas preparadas y zumos de frutas, la cuenta total permitida de
mesoflicos aerobios es 150 000 UFC/g o ml y 100 000 UFC/g respectivamente,
por lo que ambas muestras se encuentran en los lmites permisibles en donde
la salud del consumidos no se ve afectada. Esto refleja la calidad sanitaria del
alimento, las condiciones de manipulacin y las condiciones higinicas de la
materia prima. Un recuento bajo de aerobios mesfilos no implica o no asegura
la ausencia de patgenos o sus toxinas, de la misma manera que un recuento
elevado no significa presencia de flora patgena, salvo en alimentos obtenidos
por fermentacin, donde no es recomendable recuentos elevados. Pero si es un
parmetro a seguir para asegurar la inocuidad alimentaria.
Cuadro 1: Conteo de mesfilos en muestras de agua de meln y jugo de
zanahoria (UFC/g)
Dilucin
1:10
1:100
1:1000
1:10000
1:100000
Promedio

Agua de meln
3,300
4,400
5,000
10,000
0
5,675

Jugo de zanahoria
19,500
98,600
94,000
110,000
100,000
84,420

Despus de analizar nuestras muestras que se presentan en el cuadro 2, se

encontr que si haba presencia de bacterias termfilos, por lo que es
necesario un tecnologa para la destruccin de estos microorganismo, se
recomienda aplicar un estricto control de calidad en el manejo higinico de
este tipo de jugo de zanahoria y meln y ser sometidos a esterilizacin,
iniciando desde la cosecha, almacenamiento y manejo previo.

Cuadro 2: Conteo de termfilos en muestras de agua de meln y jugo de

zanahoria (UFC/g).
Dilucin
1:10
1:100
1:1000
1:10000
1:100000

Agua de meln
10,400
10,000
23,000
80,000
600,000

Jugo de zanahoria
8,700
52,200
406,000
2,900,000
5,000,000

Despus de analizar nuestras muestras se encontr que no haba presencia de

bacterias psicrfilas, lo que denota que el almacenamiento y distribucin de
productos que requieren refrigeracin o congelacin se realiz en instalaciones
limpias, desde los equipos que tenan contacto directo con los alimentos hasta
el encargado de manipular el producto, evitando el crecimiento de
microorganismos psicrfilos. Para ello adems de mantener en buenas
condiciones higinicas el rea, se debi de haber llevado un control de
temperatura y humedad en el almacn que permitiera la conservacin
adecuada del producto despus de 5 das a 5C.

Cuadro 3: Conteo de psicrfilos en muestras de agua de meln y jugo de

zanahoria (UFC/g)
Dilucin
1:10
1:100
1:1000
1:10000
1:100000

Agua de meln
0
0
0
0
0

Figura 3. Agar cuenta estandar

para la deteccin de term filos de
las m uestras de agua de meln y
jugo de zanahoria, incubadas a
55C durante 48 horas.

Jugo de zanahoria
0
0
0
0
0
Figura 4. Agar cuenta estandar
para la deteccin de m esfilos de
las m uestras de agua de m eln y
jugo de zanahoria, incubadas a
55C durante 48 horas.

Cuadro 4: Conteo de hongos en muestras de manzana y naranja, resultados en UFC/g.

Dilucin
1:10
1:100
1:1000
1:10000
1:100000
Promedio

Manzana
220
300
0
0
0
260

Naranja
20
0
0
0
0
0

Debido a que no se encontr una norma especfica para la fruta fresca sin
procesar, se tom como referencia la norma NMX-F-045-1982. ALIMENTOS.
FRUTAS Y DERIVADOS. JUGO DE MANZANA, donde se establece que el lmite
mximo de campos positivos por cada 100 campos en hongos es de 10. En el
cuadro 4 se observa que la muestra de manzana analizada el nmero de
campos positivos era mayor a 10, con 220 UFC/ml, sin embargo este valor no
es muy alto considerando que la norma se especifica para jugo pasteurizado,
por lo que se puede decir que representa menor riesgo a la salud y refleja un
manejo adecuado de este producto. Sin embargo, un recuento bajo no asegura
la ausencia de patgenos o sus toxinas, de la misma manera que un recuento
elevado no significa presencia de flora patgena. De los microorganismos ms
frecuentes en la manzana y que disminuye su vida til, est el hongo del
gnero penicillium, principalmente la especie penicillium expansum. La
presencia del moho azul, representa un riesgo para la salud por la produccin
de un metabolito secundario conocido como patulina. El hongo pencillium
expansum contamina tanto en el exterior como en el interior del fruto, siendo
en ocasiones difcil identificar que una manzana est contaminada, por lo que
los derivados de la manzana, como son los jugos y papillas, tambin presentan
patulina.
Para el caso de la naranja se compar con la norma NMX-F-464-1984.
ALIMENTOS PARA HUMANOS. BEBIDAS NO ALCOHLICAS JUGO DE NARANJA
CONCENTRADO PARA MANUFACTURA, ya que tampoco se encontr una norma
especfica para la fruta fresca. Esta norma marca como lmite mximo 75
UFC/ml para hongos, por lo que el resultado del conteo est por debajo de este
lmite, con 20 UFC/ml en la primera dilucin, lo que implica que se tuvo un
manejo adecuado de este producto.

Figura: Muestra de manzana para

la determinacin de hongos y
levaduras.

Figura: Muestra de tortilla para la

determinacin de hongos y
levaduras.

MTODO PARA LA CUENTA DE MICROORGANISMOS

TOTALES EN PLACA (NOM-113-SSA1-1994)

COLIFORMES

En el cuadro 5 se puede observar el conteo para las coliformes totales en

muestras de barbacoa y guisado de carne, donde se muestra un promedio de
5463.63 UFC/gr y 0 respectivamente. La dilucin 1:10,000 de la primera
muestra fue descartada, ya que se sale del rango de de 4 cifras de las
diluciones previas, se sabe que la dilucin 1:10 es la ms confiable, por esta
razn fue nuestro patrn a seguir. Segn la NOM-093-SSA1-1994, de Prcticas
de higiene y sanidad en la preparacin de alimentos que se ofrecen en
establecimientos fijos, en el apndice informativo B.1.2.4 Para alimentos
cocidos, nicamente se permiten < 10 UFC/g, por lo que en la muestra de
barbacoa sobrepasa los lmites permisibles de coliformes totales, esto puede
deberse a un mal manejo de la materia prima o del producto procesado, ya que
la presencia de de coliformes totales es un indicador de prcticas higinicas
inadecuadas y que el consumidor podra estar expuesto a patgenos entricos
cuando ingiere el alimento.
Cuadro 5: Conteo de coliformes totales en muestras de barbacoa y burrito (UFC/g)

Dilucin
1:10
1:100
1:1000
1:10000
1:100000
Promedio

Barbacoa
4590
4800
7000
10000
0
5463.63 UFC/gr

Guisado de carne
0
0
0
0
0
0

Fig u ra : A g a r ro jo v io le t a b ilis
p a ra la d e t e c c i n d e c o lif o m e s
t o t a le s . D ilu c io n e s 1 :1 0 y
1 :1 0 0 d e m u e s t r a d e
b a rb a c o a , in c u b a d o a 3 5 C
d u ra n te 2 4 h o ra s.

Fig u ra : A g a r ro jo v io le t a b ilis
p a r a la d e t e c c i n d e
c o lif o rm e s t o t a le s . a . M u e s t r a
d e b a rb a c o a . b . M u e s tra d e
g u is a d o d e c a rn e , , in c u b a d o a
3 5 C d u r a n t e 2 4 h o ra s .

CONCLUSIN.
El control sanitario en la preparacin de alimentos que se ofrecen en
establecimientos fijos, es el conjunto de acciones de orientacin, educacin,
muestreo y verificacin que deben efectuarse con el fin de contribuir a la
proteccin de la salud del consumidor, mediante el establecimiento de las
disposiciones sanitarias que se deben cumplir tanto en la preparacin de
alimentos, como en el personal y los establecimientos, en los puntos crticos
presentes durante su proceso; que permitan reducir aquellos factores que
influyen durante su preparacin en la transmisin de enfermedades por
alimentos (ETA). Esta prctica tiene el propsito de conocer la tcnica de
vaciado en placa, para que con esto podamos asegurar la calidad alimentaria
de los productos.

REFERENCIAS
NMX-F-464-1984. ALIMENTOS PARA HUMANOS. BEBIDAS NO ALCOHLICAS
JUGO DE NARANJA CONCENTRADO PARA MANUFACTURA. FOODS FOR HUMANS.
SOFT DRINKS. CONCENTRATED ORANGE JUICE FOR MANUFACTURING. NORMAS
MEXICANAS. DIRECCIN GENERAL DE NORMAS.

NMX-F-045-1982. ALIMENTOS. FRUTAS Y DERIVADOS. JUGO DE MANZANA.

FOODS. FRUITS AND DERIVATIVES. APPLE JUICE NORMAS MEXICANAS.
DIRECCIN GENERAL DE NORMAS.
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-093-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS.
PRACTICAS DE HIGIENE Y SANIDAD EN LA PREPARACION DE ALIMENTOS QUE SE
OFRECEN EN ESTABLECIMIENTOS FIJOS
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-110-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS.
PREPARACIN Y DILUCIN DE MUESTRAS DE ALIMENTOS PARA SU ANLISIS
MICROBIOLGICO.
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-113-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS.
MTODO PARA LA CUENTA DE MICROORGANISMOS COLIFORMES TOTALES EN
PLACA.
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-092-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS.
MTODO PARA LA CUENTA DE BACTERIAS AEROBIAS EN PLACA.
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-111-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS.
MTODO PARA LA CUENTA DE MOHOS Y LEVADURAS EN ALIMENTOS.
RODRIGUEZ, H.R., CALIDAD INTEGRAL DE LOS ALIMENTOS Y ECOLOGIA
MICROBIANA, 2006, ACADEMIA NACIONAL DE AGRONOMIA Y VETERINARIA,
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA, ARGENTINA.