BIOCHIMIE MEDICAL

LUCIANA DOBJANSCHI

I. Introducere
Scopul principal al biochimiei de astzi este s determine cum interacioneaz grupele de
molecule nevii din organismele vii pentru a constitui, menine i perpetua starea vie.
Biochimia este o tiin foarte tnr. Pn acum cteva zeci de ani puine universiti o
recunoteau ca tiin n toate drepturile ei. Exist dou izvoare distincte n genealogia biochimiei
actuale. Unul provine din medicin i fiziologie i este rezultatul unor vechi preocupri de a
cunoate compoziia chimic a sngelui, a urinii, i a esuturilor, precum i modificrile acestora n
stare normal i patologic. Cellalt deriv din chimia organic, din vechi studii asupra compuilor
organici naturali. Mult vreme, biochimia a fost privit pur i simplu, fie ca o ramur a fiziologiei,
fie ca o ramur a chimiei. Pn la nceputul ultimului sfert de secol, ea nu a fost o tiin bine
conturat, de sine stttoare, cu o solid metodologie experimental i cu posibilitatea de
aprofundare a fenomenelor biologice.
Dou descoperiri mai nsemnate au contribuit la schimbarea situaiei. Una a fost
recunoterea sistemelor multienzimatice ca uniti catalitice pentru majoritatea cilor metabolice i
dezvoltarea unei ipoteze unitare pentru transferul de energie n celula vie. Cealalt, a avut o inflen
mult mai adnc i mai puternic, a fost recunoaterea faptului c ereditatea, unul din aspectele cele
mai importante ale biologiei, are o baz real, molecular. Biochimia de astzi face investigaii
spectaculoase ntr-o serie de ramuri fundamentale ale biologiei diferenierea celulelor i a
organismelor, originea vieii i evoluia, comportamentul i memoria, patologia uman cercetri
ce au demonstrat c aceste probleme fundamentale pot fi eficient abordate prin metode biochimice.
ntr-adevr, succesul biochimiei n explicarea multor procese celulare a fost att de mare
nct muli oameni de tiin au ajuns la concluzia c biologia este chimie. Unii biologi nu accept
acest punct de vedere, ei susin c esena sau caracterul complex al organismelor vii nu poate fi
redus, acum i niciodat, la nivelul moleculelor sau al interaciilor moleculare. Astzi este probabil
mai logic s presupunem, ca o filozofie curent, c toate fenomenele biologice au n cele din urm o
baz molecular i s abandonm aceast idee numai atunci cnd nu va mai fi util pentru
proiectarea experimentelor cheie sau pentru explicarea datelor experimentale. Nu trebuie totui s
privim biologia numai ca pe o ramur a chimiei clasice, cum este chimia organic, chimia fizic sau
chimia anorganic. Dac biologia este chimie, ea este un fel de suprachimie care include, dar n
acelai timp depete chimia clasic. Aceasta deoarece moleculele din organismele vii nu numai c
se supun principiilor fizice i chimice obinuite, care guverneaz comportarea tuturor moleculelor,
dar interacioneaz i ntre ele conform altui grup de principii pe care l vom numi logica
molecular a strii vii. Aceste principii nu includ n mod necesar fore sau legi fizice noi,
nedescoperite nc. Mai curnd ele trebuie privite ca un grup de reguli fundamentale care
guverneaz natura, funcia i interaciile tipurilor specifice de molecule din organismele vii,
proprieti ce confer acestora capacitatea de a se autoorganiza i autoreplica. Pn n prezent nu au
fost identificate nc toate principiile cuprinse n logica molecular a strii vii, iar unele dintre ele
sunt vag nelese. De fapt, este probabil mult mai potrivit s considerm aceste principii ca axiome,
deoarece unele dintre ele sunt intuitive i nu pot fi demonstrate nc.
Biochimia studiaz procesele chimice care condiioneaz viaa i structurile ce i corespund.
Biochimia apare i dezvolt ca tiin de grani ntre chimie i biologie, fr a se putea realiza ns
o demarcaie net ntre cele dou.
nceputurile Biochimiei ca tiin dateaz din sec.XVIII, dar empiric unele procese
biochimice se cunosc cu mult timp nainte.
Contibuii din domeniul chimiei, biologiei i medicinei se afl ntr-o relaie de reciprocitate
cu dezvoltarea biochimiei. Astfel a aprut biochimia modern care studiaz procesele biochimice
care se desfoar la nivel celular i molecular.
n ceea ce privete profesia de farmacist, Biochimia este o disciplin indispensabil,
deoarece ea ne ofer bazele moleculare pentru studiul medicamentului n ceea ce privete aciunea
principal, efectele secundare, biotransformarea medicamentului i toxicitatea sa.
Deasemenea n terapie sunt cunoscute un numr mare de produi biologici cum ar fi:
2

vitaminele, hormonii, enzimele, aminoacizii, glucidele, compuii purinici i pirimidinici precum i

derivaii lor de sintez.
Prin inginerie genetic se obin : hormoni, enzime, anticorpi, interferon, antitripsina.
Deci, se poate concluziona c Biochimia studiaz totalitatea proceselor biochimice din
organism (procese catabolice i anabolice), precum i procesele de biotransformare a
medicamentelor ajunse n organism.

II. Compoziia chimic a organismului uman

1. Compoziia elementar a organismului uman
Au fost identificate un numr de peste 60 de elemente care intr n compoziia chimic a
organismului uman. Acestea au fost clasificate n funcie de proporia n care se gsesc n
organism. Dintre acestea majoritatea se gsesc n urme. Astfel ele au fost clasificate n:
macroelemente, oligoelemente i microelemente.
Tabelul 1. Repartiia elementelor n organismul uman.
Element
carbon
oxigen
hidrogen
azot
calciu
fosfor

Procent ( %)
50
20
10
8,5
4
1

Element
sulf
sodiu
clor
magneziu
fier
iod

Procent (%)
0,8
0,4
0,4
0,1
0,01
0,00005

Dintre acestea primele patru (C,O,H i N) reprezint peste 95% i sunt considerate
macroelemente. Ele sunt principalele bioelemente ale majoritii biomoleculelor datorit
tendinei lor mrite de a forma legturi covalente. Oligoelementele se gsesc n proporie mai
mic n organism i la fel ca i macroelementele intr n structura biomoleculelor.
Microelementele se gsesc n urme, dar cu toate astea ele au un rol esenial pentru via.
2. Compoziia fundamental a organismului uman
Bioelementele enumerate mai sus se gsesc n organism grupate n categorii de componeni
i anume: componeni organici i componeni minerali.
Componenii organici care intr n compoziia organismului uman sunt: proteinele,
glucidele, lipidele i acizii nucleici. Aceti compui sunt molecule complexe, care sunt alctuite
din molecule simple. Astfel, proteinele se formeaz prin policondensarea aminoacizilor,
glucidele sunt formate din monozaharide, lipidele sunt formate din acizi grai i ali
componeni, iar acizii nucleici sunt formai din ribonucleotide i dezoxiribonucleotide.
Tabelul 2. Principalele biomolecule din organismul uman
Biomolecula
ADN
ARN

Uniti strucurale
dezoxiribonucleotide
ribonucleotide

Proteine
Glucide
Lipide

aminoacizi
monozaharide
Acizi grai i
componeni

Funcii
Material genetic
Model pentru sinteza
proteinelor
Funcii multiple
Rezerv de energie
ali Funcii multiple

Componenii minerali prezeni n organismul uman sunt apa i electroliii.

Apa este constituientul major al tuturor organismelor vii. Organismul uman conine ntre 58 i
66% ap. O influen remarcabil asupra coninutului de ap al organismului o are vrsta.
Coninutul de ap variaz i n funcie de sex, astfel femeile au un coninut de ap mai redus n
comparaie cu brbaii.
4

Apa din organism este repartizat n vasele sanguine i limfatice, spaiile intercelulare i
celule nsi. Apa din organism se gsete repartizat n dou compartimente i anume:
compartimentul extracelular, care reprezint aproximativ 50% din greutatea corpului i
compartimentul intracelular, care reprezint aproximativ 20% din greutatea corporal.
Figura nr.1

Apa reprezint mediul ideal al reaciilor biochimice, vehiculul care asigur transportul i
schimburile metabolice. Apa ocup cea mai mare parte din organism reprezentnd 2/3 (55%-75%)
din greutatea corporal.
Cantitatea total de ap din organism este n funcie de vrst, sex, adipozitate precum i de esutul
exploatat : esutul nervos conine aproximativ 82-85%, plmnul, cordul, rinichiul 75-80%, osul
30%, iar dintele 10%.
Apa total liber este repartizat n dou sectoare principale celular i extracelular.
Apa celular: se gasete n citoplasm, nucleu, mitocondrii, lizozomi. Ea reprezint aproximativ
40% din greutatea corporal.
Apa extracelular: este separat de cea celular prin membrane celulare, cantitatea ei se determin
cu ajutorul unor substane care difuzeaz rapid prin membranele capilare, dar nu prin cele celulare
5

(manitol, inulin, tiocianat de sodiu). La adult, apa extracelular reprezint 20% din greutatea
corporal. Ea este depozitat n mai multe compartimente: intravascular, interstiial, transcelular, i
cel din esutul conjunctiv dens cartilaje i vase.
a) Compartimentul intra vascular: conine plasma sanguin i limfa. Acesta reprezint 5% din
greutatea corporal cantitatea lor poate fi determinat fie cu ajutorul unor substane colorante
(albastru Evans, rosu de Congo) fie cu ajutorul albuminei marcate.
b) Compartimentul interstiial: reprezint adevratul mediul intern al organismului. Este vorba
de un ultrafiltrat plasmatic, care scald celulele, separat de compartimentul intravascular prin
membranele capilare. Acestea permit o circulaie hidroelectrolitic liber, dar se opun ieirii
proteinelor din vase. Cantitatea de ap din compartimentul interstiial este dedus prin scderea
volumului plasmatic din cel extracelular. Se admite ca ea reprezint 15% din greutatea corporal.
c) Compartimentul transcelular: se refer la lichidul cefalorahidian, la mediile lichidiene oculare
i articulare i la lichidele din seroase i toate nsumeaz aproximativ 200 ml sau 1,5 % din
greutatea corporal.
n acelai compartiment sunt nglobate i secreiile glandelor digestive. Acestea, aproximate la un
total zilnic de 6-8 l, se resorb aproape complet la nivelul diverselor segmente ale tubului digestiv.
d) Compartimentul hidric din esutul conjunctiv dens : (cartilaje i oase) reprezint aproximativ
10% din greutatea corporal. Apa acestui compartiment se deplaseaz lent i are schimburi foarte
reduse cu restul lichidelor organismului.
Aportul de ap
n organism poate avea o provenien :
Exogen: din digestia apei ca atare sau sub forma apei coninute n alimente (aprox 2000ml / 24
ore).
Endogen: din oxidarea principiilor mediate n cadrul metabolismului intermediar. Astfel din
metabolismul
- a 100 g proteine rezult 46 ml ap
- a 100 g lipide rezult 107 ml ap
- a 100 g glucide rezult 55 ml ap.
Exist o interdependen ntre cantitatea de ap format i cea eliminat.
Eliminarea apei se face pe cale : renal, cutanat, digestiv i pulmonar.
a) prin perspiraie insensibil: ( saturarea cu vapori de ap a aerului expirat ) se pierd zilnic
aproximativ 400 ml ap. Aceast cantitate este mult depasit n stri patologice nsoite de febr.
b) prin perspiraie sensibil: (evaporare transcutanat ) se pierd zilnic ntre 200-500 ml ap.
Intensitatea pierderilor prin perspiraie insensibil i sensibil nu poate fi reglat.
c) prin eliminri hidrice digestive: Sunt minime la omul normal. Prin fecale se elimin
aproximativ 150ml / 24 ore.
d) prin eliminri hidrice renale: sunt egale n medie cu 1500 ml / 24 ore ( cu variaii ntre 7001700ml / 24 ore. Ele reprezint elementul reglabil i cel mai nobil al pierderilor lichidiene. Aceast
eliminare de ap este reglat pe cale hormonal de ctre hormonul antidiuretic (ADH) i prin
aldosteron.

Electroliii sunt reprezentai de cationi i anioni. Ei ndeplinesc n organism rol fizico- chimic,
structural i catalitic. Distribuia cationilor n compartimentele intra i extracelulare este diferit.
Tabelul 3. Distribuia cationilor intra- i extracelular n mEg/l.
Cationi
Na+
K+
Ca+2
Mg+2

intracelular
10
150
2
15

extracelular
145
5
2
2

O clas diferit de biocompui sunt vitaminele care sunt indispensabile pentru funciile lor
biologice, dar pe care organismul nu le poate sintetiza.Ele reprezint componenii nutritivi eseniali.
Hormonii sunt o alt clas de biomolecule cu rol major n procesele endocrine, care au loc
n organism.

II. Nucleotide i structura covalent a acizilor nucleici

Acidul dezoxiribonucleic (ADN) i ribonucleic (ARN) sunt macromolecule tip lan, care au
funcia de a depozita i transmite informaia genetic. Acetia sunt componente majore n toate
celulele, reprezentnd 5-15% din masa uscat a acestora. Acizii nucleici se gsesc i n virusuri,
care sunt complexe infecioase protein-acid nucleic, capabile s se autoreplice n celula gazd.
Dei denumirea acizilor nucleici vine de la faptul c ADN a fost izolat prima dat din nucleii
celulari, ei se gsesc totui i n alte compartimente ale celulei.
La fel cum aminoacizii sunt elementele constitutive ale proteinelor, aa nucleotidele sunt
componenii de baz a acizilor nucleici.
Structura general a nucleotidelor
Unitile monomere ale ADN se numesc dezoxiribonucleotide, iar cele ale ARN se numesc
ribonucleotide.
Nucleotidele sunt formate din 3 componente caracteristice i anume: o baz azotat, o
pentoz i molecul de acid fosforic.
Bazele azotate care intr n structura nucleotidelor sunt de dou tipuri: baze purinice i
baze pirimidinice. Bazele purinice prezint un nucleu de baz numit purina, de la care deriv cele
dou baze purinice: adenina i guanina.
N

Baz purinic
O

NH2
H

H2N

H
adenina

N
H

guanina

Bazele pirimidinice prezint un nucleu de baz numit pirimidina, de la care deriv 3 baze
pirimidinice, care int n structura acizilo nucleici, i anume: citozina, uracilul i timina.
N
N
Baz pirimidinic
O

NH2
H
N
O

H
citozina
8

O
H

N
N
H
uracilul

CH3

N
N
H
timina

Bazele azotate sunt compui slabi bazici, care pot exista n 2 sau mai multe forme tautomere
n funcie de pH. Uracilul, de exemplu, exist n form de lactam i lactim.
O
H

OH

HO

H
lactam

lactim

Aceste forme, n special cea lactam, este responsabil de formarea legturilor cu celelalte
componente din structura nucleotidei.
Pe lng bazele obinuite, descrise mai sus, n acizii nucleici se mai gsesc n cantiti mici i alte
baze, numite baze rare sau minore.
NH

NH2

CH3
N

CH3

N
O

N6 metiladenina

5 metilcitozina
O

H
HC
3

NH2
N

HN

CH2

N
O

OH

N
H

N3 metilguanina

5 hidroximetilcitozina

A doua component care intr n structura nucleotidei este reprezentat de pentoz. Aceasta
poate s fie D - riboza sau 2 dezoxi D riboza.

HO

H2C
H

O
HH

OH OH
D riboza
9

HO

OH

H2C
H

O
H H

H
OH

OH H
2 dezoxi D riboza

Prin ataarea unei pentoze la baza azotat rezult o nucleozid, care n funcie de natura
pentozei poate s fie ribonucleozid sau dezoxiribonucleozid.

NH2

NH2

N
HO

N
H2C
H

N
H2C

HO

O
H H

H
OH H

N
O
H H
H

OH OH

2 dezoxiadenozina

adenozina

Prin ataarea unei molecule de acid fosforic la structura unei nucleozide se formeaz un
nucleotid.
NH2
N

N
OH
HO

P
O

OH

OH
O

P
O

N
H2C
H

N
O
H H
H

OH H
AMP
ADP
AT P
Deci, prin ataarea unei molecule de acid fosforic la o nucleozid se formeaz nucleozid
monofosfatul (NMP), prin ataarea a 2 molecule de acid fosforic se formeaz nucleozid difosfatul
(NDP), i prin ataarea a 3 molecule de acid fosforic se formeaz nucleozid trifosfatul (NTP).
Componentele majore ale ADN sunt 4 dezoxiribonucleotide, care se deosebesc ntre ele prin
baza azotat, care le d i numele. Cele 4 baze specifice dezoxiribonucleotidelor din ADN sunt:
adenina i guanina (baze purinice) i citozina i timina (baze pirimidinice). Similar, pentru
ribonucleotide, care sunt componente fundamentale pentru acizii ribonucletidici (ARN), bazele
azotate care intr n compoziia lor sunt: adenina i guanina (baze purinice), citozina i uracilul
(baze pirimidinice). Deci, timina se gsete numai n ADN, nu i n ARN, iar uracilul se gsete
numai n ARN i nu i n ADN. O alt diferen ntre compoziiile celor dou tipuri de acizi nucleici
este dat de pentoza din structura nucleotidului:
10

dezoxiribonucleotidele conin: 2 dezoxi D riboza

ribonucleotidele conin: D riboza.

OH
HO

H2C
H

baza azotat
O
HH
H

OH H
dezoxiribonucleotid

OH
HO

P
O

H2C
H

baza azotat
O
HH
H

OH OH
ribonucleotid
Nucleozidtrifosfaii prezint o serie de funcii importante.
ATP este un transportor de grupri fosfat i pirofosfat n cteva recii enzimatice implicate n
transferal energiei chimice. ADP ul rezultat prin defosforilarea ATP ului este refosforilat la ATP
n procesul respiraiei. Sistemul ATP ADP este sistemul principal pentru transferul gruprilor
fosfat n celul, dar i ceilali nucleozidtrifosfai, i anume: GTP, UTP i CTP au rolul de a canaliza
energia chimic pe anumite biosinteze specifice.
A doua funcie major a NTP i NDP este cea de transportori de energie, energie pe care o
nmagazineaz sub form de legturi macroergice. NTP i d NTP sunt precursori bogai n
energie n procesul de biosintez enzimatic a ADN i ARN. n acest proces NTP i d- NTP i
pierd gruprile pirofosfat terminale, transformndu se n resturi de nucleozid monofosfai, care
sunt elemente constitutive ale acizilor nucleici.
O alt funcie major a NTP i NDP este cea de transportori energizani de tip coenzim ai
anumitor elemente constitutive. De exemplu: UDP este un transportor pentru glucide n procesul de
biosintez a polizaharidelor.
n toate cele 3 funcii ale NTP i d NTP, energia chimic a legturilor fosfat i este
folosit pentru formarea unor legturi covalente noi.
Pe lng nucleozid 5 fosfaii descrii, n natur mai exist i nucleotide cu gruprile fosfat
n alte poziii.
Dou nucleotide foarte importante au un rol cheie n aciunea biochimic a unor hormoni: 3 ,
5 ciclic adenozin fosfatul (AMP ciclic) i guanozin 3,5 ciclic fosfatul (GMP ciclic).

11

NH2
N

N
O

H2C

O
H H

H
O

O OH

OH
AMPc
AMPc se formeaz n celulele eucariote, din ATP prin aciunea unei enzime din membrane
celular, adenilat ciclaza, stimulat de anumii hormoni adui pe cale sanguin. AMPc mai este
denumit i al doilea mesager, ntruct el transmite i amplific n celul semnalele chimice
transmise pe calea sngelui de ctre hormoni, care sunt primii mesageri.
ADN ul este format din lanuri de dezoxiribonucleotide legate covalent, iar ARN ul este
compus din lanuri de ribonucleotide. Acizii dezoxiribonucleici i acizii ribonucleici prezint o
serie de propriti fizice i chimice commune, ntruct n ambele molecule, nucleotidele succesive
sunt legate covalent prin puni fosfodiesterice ntre gruparea 5 hidroxil a unei nucleotide i
gruparea 3 hidroxil a urmtoarei nucleotide.

12

baz azotat
H2C 5'
O
H H

H
3'
O

O H
P

OH

O
5' CH2
baz azotat
O
H H
3'

HO

H
O H
P

O
ADN

13

baz azotat
H2C 5'
O
H H

H
3'
O

O OH
P

OH

O
5' CH2
baz azotat
O
H H
3'

HO

H
O OH
P

ARN
Astfel catena principal a ADN i ARN const n grupri fosforice alternnd cu radicali de
pentoz, legtura fosfodiesteric asigurnd continuitatea covalent. Bazele purinice i pirimidinice
din unitile nucleotidice nu fac parte din catena principal, ele formeaz catene distincte n acelai
mod n care radicalii R ai aminoacizilor sunt catenele laterale distinctive ale polipeptidelor.
Acidul dezoxiribonucleic (ADN) a fost izolat pentru prima dat din celulele i sperma de
somon de ctre Friedrich Miesscher (1869). El a denumit produsul izolat nuclein, dat fiind
prezena lui n nucleii celulari. De atunci au trecut peste 70 de ani de cercetri pn la definirea
complet a elementelor constitutive i a structurii catenei principale a acizilor nucleici.
Figura nr.2

14

Moleculele de ADN din diferite celule i virusuri se deosebesc prin raportul dintre cele 4
tipuri de monomeri nucleotidici, prin secvena nucleotidelor i prin masa molecular. Pe lng cele
4 tipuri de baze majore, n anumite tipuri de ADN, n deosebi de origine viral se gsesc cantiti
mici de derivai metilai ai acestor baze. Acizii dezoxiribonucleici izolai din diferite organisme i
virusuri au dou lanuri dispuse ntr-un aranjament complementar dublu elicoidal. n majoritatea
celulelor moleculele de ADN sunt att de mari, nct este greu s le izolm sub form intact. n
celulele procariote, care conin un singur cromozom, ntreaga cantitate de ADN este prezent ca
unic macromolecul, o singur elice dubl, cu masa molecular de peste 2 x 10 9. n celulele
eucariote, ce conin mai muli cromozomi, exist mai multe molecule de ADN. n bacterii,
molecula de ADN care reprezint 1% din greutatea celulei se afl zona nuclear; de obicei ea este
ataat printr-un singur punct de un pliu al membranei celulare, numit mezozom. Uneori, n
citoplasma celulelor bacteriene se gsesc molecule mici de ADN extramitocondrial; aceste
molecule de ADN, care poart doar cteva gene, se numesc plasmide sau epizomi, n funcie de
relaia lor genetic cu ADN -ul cromozomial.
n celulele eucariote diploide, aproape ntreaga cantitate de ADN se gsete n nucleu,
combinat prin legturi ionice cu proteine bazice, numite histone. Pe lng
ADN ul din nucleu n celulele eucariote diploide mai gsim cantiti foarte mici de ADN n
mitocondrii, care difer de ADN ul nuclear prin bazele coninute i prin masa molecular.
Acizii ribonucleici
Cele 3 tipuri majore de acizi ribonucleici din celule sunt: ARNm, ARNr i ARNt. Toate cele
3 tipuri de ARN sunt lanuri monocatenare poliribonucleotidice, dar se deosebesc ntre ele prin
domenii caracteristice de mase moleculare i de coeficieni de sedimentare. Fiecare dintre cele 3
tipuri majore de ARN exist n forme moleculare multiple. ARNr exist n cel puin 3 forme
majore, ARNt exist n 60 de forme, iar ARNm exist n sute i poate mii de forme distincte.
Majoritatea celulelor conin de 2- 8 ori mai mult ARN dect ADN.
n celulele bacteriene, cea mai mare parte a ARN se afl n citoplasm, dar o anumit
cantitate este ataat necovalent de ADN, pe msur ce se formeaz n procesul de transcripie. n
celulele eucariote diferitele forme de ARN au o distribuie intracelular distinct.

Figura nr.3

15

ARNm conine doar cele 4 baze majore. El se sintetizeaz n nucleu n procesul de

transcripie, prin care secvena bazelor dintr-un lan de ADN cromozomial este copiat enzimatic n
lanul de ARNm. O anumit cantitate de ARNm se sintetizeaz i n mitocondrii. Secvena bazelor
din lanul de ARNm este complementar celei din lanul de ADN ce se transcrie. Dup transcripie,
ARNm trece n citoplasm i apoi la ribozomi, unde servete ca matri pentru ordonarea
secvenial a aminoacizilor n procesul de biosintez a proteinelor. ARN ul mitocondrial
reprezint doar o mic parte din ARN ul total din celul, dar el se afl n foarte multe forme
distincte, care se deosebesc prin masa molecular i secvena bazelor azotate. Fiecare din miile de
proteine diferite sintetizate n celula este codificat de ctre un ARNm.
ARNm din celulele eucariote se caracterizeaz prin prezena la captul 3 terminal a unei
secvene lungi de cca 200 de radicali adenilici, care pare s aib un rol n prelucrarea sau
transportul ARNm de la nucleu la ribozomi.
ARNt sunt molecule relativ mici, care funcioneaz ca transportori specifici ai cte unei
molecule de aminoacizi n procesul de biosintez a proteinelor pe ribozomi. Ei au o mas
molecular de 23000 28000 i un coeficient de sedimentare de 4S. Ei conin 75 90 de
nucleotide. Fiecare dintre cei 20 de aminoacizi din proteine are cel puin un ARNt coerspunztor,
iar unii au chiar mai muli ARNt.
De exemplu: n celulele de Escherichia coli exist 5 ARNt diferii pentru transferul leucinei.
Mai mult, n celulele eucariote unui anumit aminoacid i corespund ARNt mitocondriali
diferii de ARNt citoplasmatici. Moleculele de ARNt prezint cteva trsturi comune. Toate
tipurile de ARNt au la un capt al lanului polinucleotidic un acid guanilic terminal, iar la cellalt
capt secvena terminal citidil citidil adenil (CCA). Gruparea 5 hidroxil a acidului adenilic
terminal este legat de gruparea 3 hidroxil a acidului citidilic precedent print-o punte
fosfodiesteric. Gruparea hidroxil liber din acidul adenilic terminal este acilat enzimatic cu aminoacidul specific, formnd aminoacil ARNt. Acest aminoacid este transferat enzimatic la
captul lanului polipeptidic n curs de formare pe suprafaa ribozomilor, n procesul de biosintez
proteic.
ARNr reprezint 65% din masa ribozomilor. El se poate obine din ribozomii de E.coli ca
molecule lineare, monocatenare, prezente n 3 forme caracteristice, cu coeficienii de sedimentare
de 23S, 16S i respectiv 5S. Aceste 3 forme se deosebesc prin secvena i raportul bazelor. n
celulele eucariote, care au ribozomi mai mari dect celulele procariote, exist 4 tipuri de ARNr: 5S,
7S, 18S i 28S. Dei ARNr reprezint o mare parte din ARN celular total, funcia lui n ribozomi nu
este nc, bine elucidat.
Sinteza proteinelor
Procesul de sintez proteic const n polimerizarea aminoacizilor, n celule sau n vitro.
ntr-o celul pot exista circa 10000 proteine care au rol esenial n funcionarea i reproducerea
celulei i organismului. Biosinteza proteinelor se desfoar n urmtoarele momente. n primul
moment are loc transcriptia, care const n sinteza mARN de ctre una dintre catenele de ADN
dintr-o gen. Acest mARN are o structur complementar catenei de ADN matrice, reprezentnd o
imagine n oglind a acestuia, o transcriere mecanic a codonilor catenei de ADN, respectiv a
mesajului genetic, cu simboluri complementare. n al doilea moment are loc translaia care const
n migrarea mARN n citoplasma i asocierea mARN cu ribozomii activi n sinteza proteic.
Catena de mARN se fixeaz simultan prin absorbie pe mai muli ribozomi la distana ntre ei de
300-350A, formnd poliribozomi. n al treilea moment are loc activarea aminoacizilor, care
const n reacia unui aminoacid cu adenozin-trifosfat (ATP) catalizat de aminoacil-ARN sinteza,
i formarea de aminoacil-adenilat (aminoacil AMP), care se ataeaz de o molecul de tARN,
determinnd apariia unui complex aminoacil-tARN. Acest complex este transportat n locul lui
propriu n lanul proteic, determinat de mARN din polizomi. Pe catena mARN din polizom, se vor
amplasa, la nivelul fiecrui ribozom, numai acele complexe aminoacil-tARN care, pe bucla
central, reprezentnd anticodonul, posed o secven de trei ribonucleotizi complementar
16

codonilor mARN din complexul polizomului. n acest fel aminoacizii sunt legai enzimatic ntr-o
ordine impus de ADN care a matriat mARN i care joac un rol direct n biosinteza proteinelor.
n al patrulea moment are loc translata, polimerizarea sau asamblarea aminoacizilor. Legtura se
realizeaz ntre gruparea COOH a primului aminoacil care reprezint punctul activ al biosintezei
progresive, cu gruparea NH2, a celui de al doilea aminoacil, n prezena enzimei peptidpolimeraza, care catalizeaza formarea legaturilor peptidice ntre aminoacizi; ncorporarea
aminoacizilor este ireversibil; iau astfel natere lanuri polipeptidice care se elibereaz de
polizom, prin translocarea ultimului complex aminoacil-tARN de ultimul ribozom din polizom,
cnd acesta a ajuns n urma rotirii la extremitatea matricei mARN de care se detaseaz. Un lant
polipeptidic se sintetizeaz ntr-un minut.

Figura nr.4

17

Complexe supramoleculare acizi nucleici - proteine

Unii acizi nucleici se afl n celule asociai necovalent cu proteine specifice, formnd
complexe supramoleculare. Dintre aceste sisteme acid nucleic proteine, cu structuri i funcii
biologice foarte complexe; ribozomii i virusurile sunt cele mai cunoscute. Cele mai complexe
sisteme acid nucleic protein sunt probabil cromozomii din celulele eucariote.
Ribozomii sunt particule ribonucleoproteice care se gsesc n toate tipurile de celule. Ei sunt
eseniali n biosinteza proteinelor.
Virusurile sunt structuri subcelulare la limit ntre lumea biotic i abiotic. Virusurile au
capacitatea de a se antagoniza atunci cnd intr ntr-o celul gazd specific.
Implicaiile medicaleale nucleotidelor
Unele nucleotide naturale, precum i derivaii lor obinui prin sintez pot fi utilizate n
terapie, fiind utilizate n: chimioterapia bolii maligne, tratamentul hiperuricemiei i gutei, n
afeciuni virale, n hipertiroidism sau ca ageni imunosupresori, hipogliceminai, antifungici i
antiparazitari.
Mecanismul lor de aciune este variat:
- nhib enzimele implicate n biosinteza acizilor nucleici, blocnd procesul
- nhib enzimele care catalizeaz conversia xantinei n acid uric.

18

III. Proteine
Proteinele sunt compui macromoleculari, respectiv biopolimeri rezultai din
policondensarea aminoacizilor legai ntre ei prin legturi peptidice. Diferena ntre proteine i
polipeptide se face pe baza dimensiunii moleculare, limita de delimitare fiind stabilit arbitrar la o
greutate molecular de 8 x 10 Kd. Lanurile de peptide alctuite din sub 10 resturi de aminoacizi se
numesc oligopeptide, iar cele de pn la 50 60 de resturi de aminoacizi se numesc polipeptide.
Proteinele sunt formate din sute de resturi de aminoacizi, iar masa lor molecular poate urca la sute
de mii de daltoni.
Aminoacizii
Aminoacizii sunt unitile structurale de baz din molecula proteinelor. Aminoacizii conin
dou grupri funcionale comune tuturor aminoacizilor: o grupare aminic i o grupare carboxilic.
Capacitatea unui aminoacid de a se condensa cu ali aminoacizi pentru a forma peptide este
dependent de propritile chimice ale acestor dou grupri funcionale. Cea mai important
proprietate a aminoacizilor este aceea de a servi ca subuniti monomerice pentru proteine, dar ei
prezint i alte roluri importante pentru celul. De exemplu, glutationul este o tripeptid cu funcii
importante, alte peptide mici au funcii de hormoni, sau n unele organisme au rol de antibiotice.
Acidul glutamic are rol de neuro transmitor. Aminoacizii sunt precursorii unei variti de
biomolecule (de exemplu: hitidina pentru histamin). Unii aminacizi sunt metabolizai i utilizai
pentru producerea de glucoz (gluconeogenez). Deoarece nu exist rezerve de aminoacizi, cu
excepia celor implicai n structura proteinelor, atunci cnd gluconeogeneza are nevoie de
aminoacizi, acetia sunt eliberai prin decompunerea proteinelor.
Structura aminoacizilor
n proteinele tuturor speciilor procariote i eucariote a fost identificat un set de cca 20 de
aminoacizi, marea majoritate aprinnd seriei sterice L. Toi aminoacizii, cu excepia prolinei,
prezint aceeai strucutur general n sensul c atomul de carbon - este legat de o grupare
COOH, de una NH2 i de un rest R rspunztor de proprietile diferite ale diferiilor aminoacizi.
Formula general a unui aminoacid:
R

CH COO-

NH3+
n toi - aminoacizii, cu excepia glicinei, carbonul este optic activ. Izomerii posibili aparin
seriei D sau L. S-a constatat c toi izomerii existeni n mod natural n constituia proteinelor
aparin seriei sterice L. Sarcinile aprute n formulele aminoacizilor sunt cele care apar la pH 6-7.
Ca urmare, la pH 6-7, un aminoacid poate s aib caracter acid sau bazic.
Clasificare aminoacizilor
Din punct de vedere structural aminoacizii se pot clasifica astfel:
- aminoacizi alifatici
HC
2

H3C

COOH

NH2
glicina ( glicocol, Gly)
H3C

CH

CH

CH3 NH2
valina (val)
19

COOH

CH

COOH

NH2
alanina (Ala)
H3C

CH

CH2

CH3
leucina (leu)

CH
NH2

COOH

H3C

CH2

CH

CH
NH2

CH3
Izoleucina (ile)
-

COOH

aminoacizi hidroxilai

HO

CH2

CH

H3C

COOH

NH2

CH

CH

OH

NH2

serina (ser)

COOH

treonina (thr)

- aminoacizi cu sulf
HS CH2 CH COOH

H3C S

CH2

CH2

NH2

NH2
cisteina (cys)
-

metionina (met)

aminoacizii dicarboxilici i amidele lor

HOOC

CH2

CH

COOH

NH2
H2N CO CH2

acidaspartic(asp)
CH COOH
NH2

asparagina ( asn)
HOOC

CH2

CH

CH2

COOH

NH2
acid glutamic (glu)
HN
2

CO

CH2

CH2

CH

COOH

NH2
glutamina (gln)
-

20

CH

aminoacizi cu dou grupri bazice

COOH

H2N CH2

CH2

CH2

CH2

CH

COOH

NH2
lisina (lys)
H2N C

NH CH2

CH2

CH2

NH

CH COOH
NH2

arginina (arg)
CH2
N

CH

NH

COOH

NH2

histidina (his)
-

aminoacizi aromatici

CH2

CH

COOH

NH2
fenilalanina (phe)
HO

CH2

CH

COOH

NH2
tirozina (tyr)
CH2
N
H
triptofan (trp)

CH

COOH

NH2

COOH
N
H
prolina (pro)
21

n funcie de polaritatea radicalului, aminoacizii se clasific, astfel:

aminoacizi neutri: Gly,Ala, Ser, Cys, Thr, Asn, Gln care au radicalul polar, dar lipsit de
sarcin electric la pH=7.
aminoacizi hidrofili, cu caracter acid: Asp, Glu, Tyr care sunt aminoacizi ncrcai negative la
pH fiziologic.
aminoacizi hidrofili cu caracter bazic: Arg, Lys, His aminoacizi care la pH fiziologic sunt

ncrcai cu sarcin pozitiv.

- aminoacizi hidrofobi: Val, Leu, Ile, Met, Pro, Phe, Trp.
Exist proteine care pe lng aceti 20 de aminoacizi eseniali sau de baz, conin i ali
aminoacizi. Acetia pot s ia natere prin modificri ulterioare sintezei lanului polipeptidic,
determinnd astfel caracteristici noi ale activitii biologice.
Exemplu:
- acetilarea captului N-terminal, crete rezistena la degradare
- prin hidroxilarea resturilor de prolin i lizin se formreaz: hidroxiprolina i hidroxilizina, cu
rol n stabilizarea fibrei de colagen
- carboxiglutamatul are legtur cu aciunea vitaminei K
- fosforilarea resturilor de: Ser, Thr, Tzr, se folosete ca mecanism de reglare a multor procese
celulare.
o Ali aminoacizi modificai se ntlnesc n structura unor peptide biologic active. Pe
lng aminoacizii prezeni n proteine, exist aminoacizi, care liberi sau n combinaii
ndeplinesc funcii importante n metabolism.
De exemplu:
- alanina, din stuctura coenzimei A i a unor peptide
- homoserina i homocisteina sunt intermediari metabolici
- citrulina i ornitina apar n biosinteza ureei
- acidul - aminobutiric (GABA) este un mediator chimic nervos
- 3,4 dioxifenilalanina (DOPA) este precursor al adrenalinei
- acidul p- aminobenzoic intr n structura acidului folic.
Proprietile aminoacizilor
Aminoacizii sunt substane solide, cristaline i au puncte de topire sau de descompunere
peste 2000C. Ei sunt mult mai solubili n ap dect n solveni nepolari. n reeaua cristalin,
moleculele de aminoacizi sunt atrase prin fore electrostatice. Dac aminoacizii ar cristaliza ntr-o
form neionic, datorit atraciei Van der Waals, atunci ar avea puncte de topire mult mai sczute.
Toate acestea duc la concluzia c aminoacizii se gsesc n soluii apoase i n reeaua cristalin sub
form de ioni dipolari sau amfioni.
+

HN
3

H2N R COOH

COO-

Datorit caracterului lor amfoter, aminoacizii formeaz sruri att cu acizii ct i cu bazele.
+

HN

HN
3

COO- +H+

COO-

+ H2O

HN
3

HN
2

COOH
R

COO- + H2O

Deci, n mediu acid, aminoacizii se comport ca baze, iar n mediu bazic se comport ca
acizi.
Datorit faptului c aminoacizii posed grupri carboxilice i grupri bazice, ei prezint
proprieti datorate gruprilor carboxil i proprieti datorate gruprii aminice precum i proprieti
determinate de ambele grupri.

22

PEPTIDE
Cea mai important proprietate a aminoacizilor, este aceea de condensare, care duce la
formarea de peptide. Peptidele se formeaz prin eliminarea unei molecule de ap ntre gruparea
carboxil a unui aminoacid i gruparea aminic a unui alt aminoacid.
H2N CH

COOH + H2N CH

R1

R2

COOH

H2N CH

CO

NH

CH COOH +H2O
R2

R1

Prin convenie, un lan polipeptidic se scrie ncepnd cu extremitatea ce are gruparea

aminic liber, numit capt N- terminal i se ncheie cu captul C terminal, reprezentat de
gruparea carboxilic a ultimului aminoacid.
H2N

CH

CO

NH

CH

CO

....... NH

CH COOH

R2

R1

Rn

n unele cazuri aceste capete sunt derivatizate. Oligopeptidele se clasific n di-, tri-, tetrapn la decapeptide, n funcie de numrul de resturi de aminoacizi prezeni n structura peptidei.
Ca exemple de peptide cu rol biologic cunoscut amintim:
- Dipeptidele: carnozina i anserina, cu rol n metabolismul muscular.
CH2
N

N R

CH

COOH

NH

CO

CH2

CH2

NH2

R = H carnozina
= CH3 anserina
- Tripeptide.
Glutationul este o tripeptid format acid glutamic, cistein i glicin, motiv pentru care se numete
i - glutamil-cisteinil-glicin.

HOOC CH
NH2

CH2

CH2

CO

NH

CH

CO

NH

CH2

COOH

CH2
SH

Glutationul se ntlnete n celulele animale, unde se gsete n concentraie ridicat. El

funcioneaz ca un sistem redox i servete n transportul intercelular de aminoacizi.

23

Glu

Cys

Gly

SH

- 2H

Glu

+2H

Cys

Gly

S
S

Glu

Cys

Gly

(GSSH)
glutation oxidat

(GSH)
glutation redus

Interconversiunea formelor reduse i oxidate are loc sub aciunea unor enzime i servete n
biosinteza eicosanoizilor, a dezoxiribonucleotidelor, n biotransformarea insulinei circulante,
precum i n alte procese.
Deoarece glutationul redus protejeaz gruprile tiol ale proteinelor, el este esenial pentru
integritatea eritrocitului i deasemeni pentru meninerea Fe din hemoglobin n stare bivalent.
Mecanismul implicat privete neutralizarea potenialului agresiv al peroxizilor rezultai n
metabolismul aerob.

2 GSH + R- O- OH

glutation
peroxidaza

GSSH + R- OH +H2O

Formarea unor astfel de peroxizi este favorizat de un numr de medicamente, la care pot s
apar ca efecte adverse anemia hemolitic i methemoglobinemia.
O alt tripeptid este hormonul de eliberare a tirotropine (TRH) de origine hipotalamic,
care are ambele capete derivatizate. TRH se mai numete: piroglutamil- histidil- prolinamida.
Glutamatul N-terminal apare ciclizat sub forma acidului piroglutamic, iar captul C terminal este
reprezentat de prolinamid.
Exist dou grupe de oligopeptide formate din 7- 10 resturi de aminoacizi cu aciune asupra
musculaturii netede, care rezult din hidroliza enzimatic a unor proteine plasmatice.
Angiotensinele provin din angiotensigen, o protein format din cca. 400 de aminoacizi.
Angiotensinogen renina Angiotensina I
(decapeptid)
(proteina plasmatic)
captopril
enzima de conversie
Angiotensina II
(octapeptid)
aminopeptidaza
Angiotensina III
(heptapetid)
Angiotensinele acioneaz asupra vaselor, mai intens pe artere stimulnd secreia de
aldosteron i eliberarea de prostaglandine. Angiotensina II este socotit cel mai puternic agent
presor present n circulaia general. Aceasta pare a fi implicat n patogeneza hipertensiunii
arteriale eseniale, dei sunt cazuri cu activitate reninic normal sau chiar sczut. Inhibitorii
24

sistemului renin- angiotensin, n care rolul central l are enzima de conversie, se utilizeaz n
tratamentul hipertensiunii arteriale: de exemplu captoprilul.
Un alt grup de polipetide este reprezentat de kininele plasmatice, formate din kininogeni sub
aciunea enzimelor numite kalikreine.
Plasmakininele, considerate i hormoni locali, produc vasodilataie arterial (efect
hipotensor), dar determin contracia vaselor, musculaturii uterine, a intestinului i
bronhoconstricie.
Alte oligopeptide cu activitate biologic sunt encefalinele i hormonii neurohipofizari.
Un alt exemplu de polipeptide naturale este reprezentat de vasopresin i oxitocin, care sunt
peptide ciclice alctuite numai din aminoacizi. Aceste dou polipeptide au o structur foarte
apropiat, fiind alctuite din 9 resturi de aminoacizi, dar prezint funcii fiziologice diferite.
Vasopresina are efect antidiuretic, iar oxitocina acioneaz asupra musculaturii netede a uterului,
producnd contracia uterului. Oxitocina stimuleaz i contracia musculaturii din jurul alveolelor
mamare, determinnd astfel eliminarea laptelui din canalele glandei mamare, avnd aciune
lactagog.

25

PROTEINE
Proteinele i funciile lor biologice.
Proteinele sunt cele mai rspndite molecule organice din celul. Masa molecular a
proteinelor este foarte mare, dar prin hidroliz acid toate se transform n compui organici simpli,
i anume L-aminoacizi.
Proteinele se mpart, n funcie de compoziia lor n dou clase principale:
- proteine simple
- proteine conjugate
Proteinele simple sunt acelea care prin hidroliz formeaz numai aminoacizi i nici un alt
compus organic sau anorganic.
Proteinele conjugate sunt acelea care prin hidroliz pun n libertate pe lng aminoacizi i
ali compui organici sau anorganici.
Partea conjugat a proteinei, care nu este aminoacid se numete grupare prostetic. n funcie de
natura gruprii prostetice, proteinele conjugate se mpart n:
Tipul proteinei
- nucleoproteine
- lipoproteine
- glicoproteine

Gruparea prostetic
acizi nucleici: - ADN
- ARN
fosfolipide

- hemoproteine

glucide: - hexozamine
- galactoz
- manoza
- acid sialic
fosfai esterificai cu
radicali ai sernei
hem

- flavoproteine
- metaloproteine

metale

- fosfoproteine

FAD

Locul n care se gsesc

ribozomi
virusul mozaicului tutunului
lipoproteinele plasmatice
lipide membranare
globuline

cazeina
hemoglobina
citocromul C
succinat dehidrogenaza
feritina

Masa molecular a proteinelor se poate determina prin metode fizice i poate fi cuprins
ntre 5000 i cteva milioane.
Exemplu:
- insulina: greutatea molecular de 5700 daltoni
- virusul mozaicului tutunului: greutatea molecular de 40000000 de daltoni.
Diversitatea funcional a proteinelor
Proteinele ndeplinesc n organism multiple funcii, dintre care amintim urmtoarele:
1. Enzimele sunt proteine ce catalizeaz diverse reacii biochimice.
Exemplu: hexokinaza, lactat dehidrogenaza
2. Proteinele de rezerv
Exemplu:
- ovalbumina proteina din albuul de ou
- cazeina proteina din lapte
- feritina proteina de depozitare a Fe n splin
- zeina proteina din semine de porumb
- gliadina proteina din gru
3. Proteine de transport
Exemplu:
26

- hemoglobina proteina ce transport oxigenul n sngele vertebratelor

- hemocianina proteina ce transport oxigenul din sngele nevertebratelor
- mioglobina proteina ce transport oxigenul n celulele musculare
- albumina seric proteina ce transport acizii grai n snge
- 1-lipoproteina proteina ce transport lipidele n snge
- ceruloplasmina proteina ce transport cuprul n snge
Aceste proteine sunt capabile s lege i s transporte pe calea sngelui anumite tipuri de molecule.
4. Proteinele contractile sunt proteine cu rol esenial n fenomenul de contracie i n micare.
Exemplu:
- actina filamentele subiri din miofibrile
- miozina filamentele groase din miofibrile
- dineina proteinele din cili i flageli.
n muchi, actina i miozina sunt aezate n iruri paralele, alunecnd unele pe lng altele n
timpul contraciei.
5. Proteinele cu rol de protecie n sngele vertebratelor
Exemplu:
- anticorpii formeaz compleci cu proteinele strine
- sistemul complement formeaz complexe cu anumite sisteme antigen-anticorp.
- Fibrinogenul precursor al fibrinei n coagularea sngelui
- Trombina particip la procesul de coagulare.
Unele proteine au rol de aprare sau de protecie.
Proteinele sanguine (trombina i fibrinogenul) particip la coagularea sngelui oprind astfel
pierderile de snge n sistemul vascular al vertebratelor.
Cele mai importante proteine cu rol de aprare a organismului sunt anticorpii sau globulinele
imune, care se combin cu proteinele strine sau cu alte substane strine intrate ntmpltor n
organism, neutralizndu-le.
6. Toxinele
Exemplu:
- toxina din Clostridium botulinum
- toxina difteriei
- veninul de arpe
- ricinul
- gossipina
Toxinele sunt substane foarte toxice pentru organismul animalelor superioare, chiar i n cantiti
foarte mici.
7. Hormoni
Exist proteine care funcionez ca i hormoni.
Exemplu:
- insulina este secretat de anumite celule specializate din pancreas i regleaz metabolismul
glucozei.
- Hormonul adrenocorticotrop: hormonul de cetere sau somatotropina este un hormon al
glandei hipofizare anterioare, care regleaz sinteza corticosteroizilor.
8. Proteinele structurale
Exist o clas de proteine care servesc ca i elemente structurale.
Exemplu:
- proteinele din nveliul viral
- glicoproteinele
- - keratina
- sclerotina
- fibroina
27

colagenul
elastina
mucoproteinele.

Anticorpii i rspunsul imun. Specificitatea de specie a proteinelor.

Anticorpii sau imunoglobulinele au o importan foarte mare n demonstrarea faptului c
proteinele sunt specifice pentru fiecare specie. Moleculele de anticorpi apar n serul sanguin sau n
anumite celule de vertebrate ca rspuns la introducerea unei proteine sau a unei alte macromolecule
strine acelei specii. O astfel de macromolecul strin speciei respective se numete antigen.
Moleculele specifice de anticorpi produse n acest mod se pot combina cu antigenul care a
determinat formarea lor pentru a forma complexul antige-anticorp. Aceast reacie, numit rspuns
imun, este baza ntregului domeniu al imunologiei. Imunitatea fa de o anumit boal infecioas
poate fi adesea realizat prin injectarea unei cantiti foarte mici de componeni macromoleculari
din microorganisme sau virusuri care provoac boala respectiv. Ca rspuns la antigenul strin se
formeaz anticorpul specific, sau o imunoglobulin, care rmne n snge un timp ndelungat. Dac
microorganismul va ptrunde mai trziu n snge sau n limf, aceti anticorpi specifici l vor putea
inactiva sau chiar omor prin combinare cu componenii lor antigenici. Rspunsul imun este dat
numai de vertebrate.
Anticorpii sunt foarte specifici pentru moleculele strine care le produc. Un anticorp format
de un iepure injectat cu ou de gin, de exemplu, se va combina cu acesta, dar nu i cu alte
proteine, cum ar fi hemoglobina uman. Mai mult ei sunt specifici pentru structura tridimensional
a albuminei native din oul de gin, astfel nct dac aceasta este denaturat prin nclzire sau prin
alt mijloc, cu deplierea lanurilor polipeptidice componente sau este modificat chimic, anticorpii
nu se vor mai combina cu ea. De aici putem trage urmtoarele concluzii:
1. Proteine cu funcii diferite aparinnd unei singure specii determin formarea unor anticorpi
diferii. Astfel cnd se imunizeaz un iepure cu hemoglobin de cal, anticorpii vor precipita
hemoglobina de cal i nu celelalte proteine de cal.
2. Proteine omoloage de la specii diferite nu sunt identice imunologic.
3. Specificitatea anticorpilor reflect relaia filogenetic.
Exemplu:
Proteinele omoloage a speciilor foarte nrudite sunt mult mai asemntoare ntre ele dect ale
speciilor foarte ndeprtate. Astfel, anticorpii produi de iepure fa de hemoglobina de cal
reacioneaz cel mai bine cu hemoglobina de cal. Ei reacioneaz, de asemenea puternic cu
hemoglobina altor specii nrudite cu calul (zebra, vaca, porcul sau alte copitate) dar sunt mult mai
puin reactivi cu hemoglobina roztoarelor, psrilor sau amfibienilor.
Astfel cu ct dou specii sunt mai apropiate cu att mai asemntoare sunt i secvenele de
aminoacizi ale proteinelor lor omoloage. Deci, secvena de aminoacizi ale proteinelor omoloage
poate da informaii preioase despre evoluia diferitelor organisme i pentru legtura lor
filogenetic.

28

Structura proteinelor
Lanurile polipeptidice ale proteinelor se pliaz n diferite moduri, att n cadrul propriului
lan, dar i ntre lanurile vecine, adic intracatenar i intercatenar. Acest mod de pliere este esenial
pentru activitatea biologic a proteinelor i aceast organizare complicat este cea care trebuie
conservat pe parcursul procedurilor implicate n purificarea proteinelor. Dei mult timp s-a
considerat c modurile de pliere ale lanurilor polipeptidice sunt determinate numai de secvena
aminoacizilor din lan, astzi s-a stabilit c proteinele avnd aceeai secven a aminoacizilor pot
exista n forme diferite de mpachetare i c astfel de plieri pot fi influenate de prezena altor
proteine.
Structura proteinelor a fost imaginat ca avnd 4 nivele de organizare, i anume: structura primar,
secundar, teriar i cuaternar.

Fig. 4. Principalele tipuri de structuri ale proteinelor

29

Figura nr.6
Structurile proteice sunt stabilizate de dou tipuri de legturi puternice:
legtura peptidic i puntea disulfidic, precum i de trei tipuri de legturi slabe.
Legtura disulfidic se stabilete ntre dou resturi de cistein, aparinnd sau nu aceluiai lan
polipeptidic i este la fel de rezistent ca i legtura peptidic la aciunea agenilor denaturani
uzuali ai proteinelor. Aceast legtur poate fi distrus prin oxidare cu acid performic sau prin
reducere cu betamercatoetanol. Legturile disulfidice sunt prezente de obicei n proteinele
extracelulare i aproape c lipsesc din cele intracelulare. Legturile slabe sunt reprezentate n
general de legturile necovalente, i anume: legturi de hidrogen, ionice i hidrofobe.
Legturile de hidrogen se stabilesc ntre grupri CO i NH aparinnd unitilor peptidice
diferite, aflate n poziie adecvat.
R
C

CH

N
H
legtur de hidrogen
O

H
N

CH

R
Forele electrostatice se formeaz prin atracia gruprilor cu sarcin opus ce aparin
30

aminoacizilor ionizai.
Exemplu:
- ntre un aminoacid dicarboxilic i gruparea aminic a lizinei.
Un rol semnificativ n meninerea structuri l au deasemeni interaciunile hidrofobe prin care
radicalii nepolari ai aminoacizilor hidrofobi tind s se asocieze.
Proteinele n stare natural au o structur tridimensional unic, ce se exprim prin
conformaia, care i determin de astfel i funcia.
Structura primar
n structura oricrei proteine sau peptide se distinge un element comun, reprezentat de axul
covalent, care se formeaz prin repetarea gruprii peptidice i o parte a variabilei reprezentat de
radicalii aminoacizilor constituieni.
H2N

CH
R1

CO

NH

CH
R2

CO

....... NH

CH COOH
Rn

Structura primar este definit ca secvena resturilor de aminoacizi ce deriv din

policondensarea lor prin legturi - peptidice. Exist mai multe argumente n favoarea acestei structuri,
dintre care amintim:
- proteinele au puine grupri amino- i carboxil titrabile, iar numrul lor crete dup hidroliz
- dau uor reacia biuretului
- sinteza de proteine este posibil excusiv prin interaciuni peptidice
- proteinele sunt substrate pentru peptidaze
- identificarea aminoacizilor componeni prin difracie cu raze X i spectroscopie n infrarou (IR).
Cunoaterea structurii primare a proteinei const n stabilirea naturii radicalilor, n ordinea
nlnuirii i localizarea eventualelor puni disulfidice i stabilirea tuturor conexiunilor dintr-un lan
polipeptidic.
Pentru determinarea compoziiei, proteina este supus hidrolizei n cataliz acid, bazic sau
enzimatic, urmat de separarea i identificarea aminoacizilor rezultai. Hidrolizatul obinut n urma
reaciei de hidroliz este analizat prin cromatografie sau alte tehnici automatizate. Dup separarea
aminoacizilor, cuatentificarea lor se face prin reacia de culoare cu ninhidrina sau fluoresceina, care sunt
reacii de mare sensibilitate.
Pentru determinarea succesiunii aminoacizilor dintr-un lan se folosesc tehnici manuale i automate
bazate pe procese chimice i enzimatice. Dac catena polipeptidic este relativ scurt, se identific mai
nti capetele N i C terminale i apoi secvena cuprins ntre ele. Pentru lanuri mai lungi, dup
identicarea capetelor N i C terminale, fragmentul rmas ntre ele se scindeaz n fragmente de pn la
50 de resturi, care se separ prin cromatografie sau electroforez. Se determin structura primar a
fiecrui fragment i apoi se potrivesc n ordinea lor iniial, fcndu-se reconstituirea lanului. Numrul
de grupri terminale gsite ofer informaii asupra numrului de lanuri ce compun proteina. Captul N
terminal se poate identifica prin marcarea sa cu un compus care formeaz o legtur covalent, stabil n
condiiile n care legturile peptidice sunt hidrolizate. n acest scop s-au utilizat 2,4
dinitrofluorbenzenul, clorura de Dansyl i clorura de Dabsyl. O alt metod enzimatic folosete
aminopeptidaza, care hidrolizeaz legtura peptidic n care este cointeresat aminoacidul N terminal.
Astfel, enzima va detaa pe rnd cte un aminoacid ce ajunge n poziie terminal. Dezavantajul acestei
metode este c aciunea enzimei este foarte lent n cazul unor aminoacizi.
Captul C terminal poate fi stabilit prin aciunea carboxipeptidazei, enzim ce scindeaz lanul
peptidic cu un rest, ncepnd dinspre aminoacidul cu gruparea carboxilic liber. Dup un timp de
reacie se separ i se identific aminoacizii eliberai.
Odat ce fragmentele rezultate din lanul iniial au structura primar descifrat, urmez rezolvarea
succesiunii lor n lan, pentru care se folosete tehnica peptidelor suprapuse. Lanul peptidic original se
31

scindeaz prin dou sau mai multe metode diferite de hidroliz specific i din compararea seturilor de
peptide obinute se deduce integral secvena iniial. Pentru proteinele mari, cu peste 1000 de resturi de
aminoacizi, secvenarea lanului devine o operaie dificil i care cere mult timp. A aprut ns,
tehnologia ADN-ului recombinat, care a permis o nou modalitate de abordare experimental n chimia
proteinelor.
Semnificaia structurii primare
Prima protein a crei structur primar a fost identificat este insulina. S-a dovedit c structura
primar a proteinelor este determinat genetic i c proteinele din toate organismele sunt sintetizate
printr-un mecanism comun.S-a constatat c secvena de aminoacizi este veriga ntre mesajul genetic
cuprins n ADN i structura tridimensional responsabil de funcia biologic a proteinei. Cunoaterea
secvenei de aminoacizi aduce informaii eseniale pentru descifrarea conformaiei i mecanismului de
aciune, cu privire la nrudirea proteinelor, n legtur cu evoluia filogenetic a speciilor precum i cu
domeniul patologiei moleculare. Activitatea biologic a unei proteine poate depinde direct i indirect de
structura ei primar. Modificri minore, ca nlocuirea, pierderea sau inseria unui aminoacid se traduc
biochimic prin polimorfismul proteinelor n cadrul speciei conferind individualitate organismelor prin
specificitatea de specie i prin boli genetice consecutive alterrii sau pierderii funciei.
Structura secundar a proteinelor
Structura secundar a proteinelor se refer la dispunerea spaial a resturilor de aminoacizi
nvecinai n secvena liniar, ce poate fi ordonat sau dimpotriv cu puine neregulariti. Prin difracie
cu raze X a fost confirmat existena conformaiilor ordonate i au fost observate structuri ce se repet
periodic. Tot prin tehnica cristalografic cu raze X a fost stabilit caracterul planar, rigid al legturii
peptidice, datorat conjugrii.

Figura 7. Coplanaritatea celor 4 atomi

Consecinele formrii acestui
sistem
puternic
conjugat
sunt
coplanaritatea celor 4 atomi, ceea ce
presupune imposibiliatea rotirii i
existenei formelor cis i trans. S-a
observat c izomerul trans este
favorizat, deoarece este mai srac n
energie. Scheletul lanului polipeptidic
apare, deci ca o succesiune de planuri
rigide unite prin atomii de C ai
aminoacizilor constitutivi. Dou treimi dintre atomii lanului poilpeptidic se afl n poziii fixe unul
fa de altul, dar de o parte i de alta a fiacrei legturi peptidice exist o libertate de micare.
Astfel 2 planuri succesive se pot roti n jurul aceluiai C.
Prezena unor radicali mai mult sau puin voluminoi va impune amplitudinea rotaiilor,
astfel c unghiurile nu pot avea valori ntmpltoare, ci sunt caracteristice diferitelor tipuri de
structuri secundare. Structura secundar prezint 2 modele, i anume: modelul -helix i foaie
pliat.
Modelul -helix
Modelul -helix reprezint un tip de structur secundar ce presupune ca lanul s se
nfoare strns pe o direcie spiralat, formnd un cilindru cu interiorul aproape plin, din care
radicalii aminoacizilor apar nt-o dispunere helicoidal.

32

Figura 8 . Modelul de -helix

Ca sens de rsucire n
proteine a fost identificat helix pe dreapta. Stabilitatea helixului este meninut prin
legturi de H ce se formeaz
ntre gruprile carbonil i
aminice din lanul spiralat aflate
fa n fa la o distan
adecvat. La -helix fiecare
aminoacid avanseaz spirala cu
1,5A0 la o rotire de 1000, pe
fiecare spiral existnd 3,6
resturi, deci pasul spiralei este
de 5,4A0. Aceste dimensiuni
arat formarea legturii de H
ntre gruprile CO i NH din
cadrul lanului polipeptidic.
Exist unii aminoacizi care sunt nefavorabili structurii de -helix. Acetia sunt aminoacizi ce
stabilizeaz structura de -helix.
Exemplu: - prolina poate s rup spirala. Aminoacizii cu resturi laterale voluminoase (arg, ile, lys,
asp, glu) destabilizeaz helixul prin interferne fizice sau electrostatice.
Coninutul de -helix n proteine cu structur spaial este variabil. Lungimea i repartizarea
segmentelor de -helix depinde de distribuia resturilor favorabile sau destabilizatoare n lungul
lanurilor. n mioglobin i hemoglobin apare ca motiv structural major, iar n altele lipsete
chimotripsina. La majoritatea proteinelor se gsete ca helix singular pe distane scurte (40 A0), rar
pe zone extinse de 1000A0. Dou sau cteva -helixuri se pot mpleti ca uviele unui nur, aa cum
apar n proteinele fibroase: -keratina din pr, miozina, fibroina, care ndeplinesc un rol mecanic de
formare a mnunchiurilor rezistente de fibre.

Figura nr.9

33

Figura nr.10
Moelul sau foia pliat
Structura de foaie pliat a fost studiat tot de Pauling i Corey, curnd dup -helix, de aceea
au numit-o structura . Cele 2 modele difer n primul rnd prin faptul c lanul polipeptidic n
conformaia este mai relaxat, fiind aproape complet extins. Distana axial ntre dou resturi
succesive este de 3,5A0 fa de 1,5A0 n -helix, cu o periodicitate decorespunznd la cca 7A 0.
Lanurile polipeptidice sunt aezate n foi pliate, care sunt legate ntre ele prin legturi de hidrogen.
Radicalii aminoacizilor se situeaz deasupra i dedesubtul planului foii. Dac sensul de desfurare
a lanului n poriunile adiacente coincide, foaia este numit paralel. Aranjamentul alternativ n
foaia antiparalel este favorabil, succesiunea gruprilor CO i NH fiind complementare.

Figura nr.11. Strucura de foaie pliat.

Aminoacizi mici: gly, ala, avantajeaz foaia pliat, iar cei cu radical mare sau cu sarcin
stnjenesc aranjamentul.
Ca i modelul de -helix, structura se ntlnete n multe proteine globulare sau fibroase.
Asocieri de lanuri paralele apar n fibroina (mtase) i antiparalele apar n -keratina.
Un exemplu de protein fibrilar prezent la animlaele superioare este colagenul din esutul
34

conjunctiv, fiind cea mai rspndit protein dintre proteinele vertebratelor superioare. Cu ct un
animal este mai mare i mai greu, cu att proporia de colagen este mai mare. Fibrele de colagen
sunt aranjate n moduri diferite, depinznd de sarcina biologic pe care o are de ndeplinit proteina.
Structura teriar a proteinelor
Structura teriar a proteinelor reprezint aranjamentul spaial general al moleculei, rezultat
prin asocierea dintre diferite regiuni ale aceluiai lan, a cror structur secundar poate sau nu
varia. Aranjamentul spaial al proteinelor s-a studiat cu raze X.
Printre proteinele globulare ale cror structur teriar este binecunoscut sunt: mioglobina,
hemoglobina, lizozomii, ribonucleaza, citocromul c, lactat dehidrogenaza. Reprezentantul clasic al
structurii teriare este mioglobina.
Mioglobina este o protein globular relativ mic, care conine un singur lan polipeptidic
format din 153 resturi de aminoacizi, a cror secven nc nu se cunoate. Mioglobina conine o
feroprotein, sau hem, grupare identic cu cea a hemoglobinei, fiind i ea capabil s se oxigeneze
i s se deoxigeneze.
Mioglobina se gsete n celulele muchilor scheletici i este deosebit de abundent la
mamiferele acvatice, cum ar fi: balena, foca sau morsa, a cror muchi sunt att de bogai n
mioglobin nct sunt colorai n brun nchis.
Scheletul moleculei de mioglobin este format din opt segmente aproximativ drepte, unite
prin poriuni curbate. Fiecare segment drept este un -helix, cel mai lung fiind constituit din 23 de
aminoacizi, iar cel mai scurt este format din numai 7 aminoacizi i toi au sensul de rsucire spre
dreapta. Aceste regiuni - helicoidale reprezint 70% din aminoacizii din molecul. Dei structura
mioglobinei pare neregulat i asimetric, ea nu este deloc ntmpltoare. Toate moleculele de
mioglobin au aceeai configuraie.

Figura nr.12 . Structura mioglobinei

Alte aspecte structurale legate de structura mioglobinei sunt urmtoarele:
1. Molecula este foarte compact, n interiorul ei rmne spaiu pentru patru molecule de ap.
2. Toate gruprile R polare ale resturilor de aminoacizi sunt localizate pe suprafaa extern a
moleculei i sunt hidratate.
3. Aproape toate gruprile R nepolare sau hidrofobe se afl n interiorul moleculei, ferite de
expunerea la ap.
4. Resturile de prolin se gsesc numai n zonele de curbur, care conin, deasemenea aminoacizi
care nu formeaz cu uurin -helix, de exemplu: izoleucina i serina.
5. Conformaia de ansamblu a lanului polipeptidic este aparent aceeai la mioglobina tuturor
speciilor speciilor studiate, dei ele difer oarecum n compoziia de aminoacizi. Astfel,
35

resturile constante de secven pot fi implicate n determinarea poziiei curburilor i a direciei

segmentelor drepte.
Ribonucleaza, este o enzim pancreatic ce depolimerizeaz molecula de ARN i exemplific
un model diferit de mpachetare tridimensional a lanului. Catena ei este format din 124 de
aminoacizi i este organizat n proporie de 40% ca foaie pliat antiparalel, 15% n -helix, restul
lanului gsindu-se sub form de bucle. n structura teriar forma general a moleculei amintete de
cochilia unui melc, la a crei stabilitate contribuie i 4 puni disulfidice.
Structura cuaternar
Structura cuaternar apare la proteinele alctuite din dou sau mai multe lanuri
polipeptidice care se asociaz formnd o unitate de sine stttoare, cu form spaial bine definit
i posednd o anumit activitate biologic.
Structura cuaternar se refer la felul, numrul i aranjamentul lanurilor polipeptidice
ncluznd i natura contactelor dintre ele.
Cele mai multe proteine oligomer sunt formate dintr-un numr mic i par de lanuri, care se
numesc subuniti sau protomeri. Subunitile identice sau diferite au fiecare structura sa spaial;
ele se pot aeza succesiv pe direcie liniar, circular sau mai compact suprapuse n forme
geometrice diferite. Aceste posibiliti de aranjare se refer la protomeri identici sau foarte puin
diferii. Ansamblul prezint simetrie, suprafeele de contact sunt complementare, sugernd gradul
nalt de specificitate al structurii cuaternare.
Monomerii realizeaz interaciuni slabe: (legturi saline, legturi de hidrogen, fore Wan der
Waals, legturi hidrofobe), proteina putnd astfel disocia reversibil.
Lanurile izolate sunt lipsite de activitate, funcia fiind rezultatul ansamblului cu structur
cuaternar.
Exemple de proteine cu structur cuaternar:
- creatin kinaza, lactat dehidrogenaza, glutamat dehidrogenaza, enzime, proteine neenzimatice:
hemoglobina , imunoglobulina G.
Alte exemple de proteine cu structur cuaternar sunt enzimele allosterice.
Noiunea de structur cuaternar se poate extinde i la unele heteroproteine.
Printre cele mai simple proteine oligomere este hemoglobina, care este format din 4 lanuri
polipetidice.
Hemoglobina conine 2 lanuri formate din 141 de resturi de aminoacizi i 2 lanuri
formate din 146 de resturi de aminoacizi; fiecare dintre acestea avnd ataat printr-o legtur
necovalent cte un radical hem. Molecula a fost studiat n forma sa oxigenat, care are o structur
sferic, compact, cu dimensiuni de: 6,4/5,5/5,0mm.
n hemoglobin, ntre cele 2 lanuri , ca i ntre cele dou lanuri exist foarte puine
contacte, n schimb, numeroase grupri R fac legtura ntre perechile de lanuri care nu sunt
asemenea.

36

Figura nr.13. Structura hemoglobinei

Un inters deosebit l prezint aezarea pe fiecare subunitate a cte uneia dintre cele 4 grupri
hem, care leag cele 4 molecule de oxigen. Aceste grupri hem, molecule plane, n care atomii de
fier formeaz compleci de coordinare plan-ptrai, sunt destul de ndeprtate ntre ele i sunt
situate la anumite ungliuri unele de altele. n molecula hemoglobinei rmne o cavitate cental,
mrginit de grupri cu radical R polare.

Figura nr.14. Formarea hemoglobinei

n sngele uman adult s-au identificat trei hemoglobine a cror prezen este constant,i
anume hemoglobinele A1, A2 i F. Rolul fiziologic al hemoglobinei A2 nu este bine definit nc, iar
n ceea ce privete hemoglobina F fetal aceasta reprezint un tip de hemoglobin adaptat pentru
condiiile de oxigenare din uter. Dup natere hemoglobina F este nlocuit cu hemoglobina A1.
Hemoglobina are proprietatea de a accepta oxigenul , proprietate dublat de posibilitatea de
37

a l transporta organism. Acest lucru sete posibil datorit structurii tetramerice ce permite att
acceptarea unei cantiti mari de oxigen n plmn, ct i posibilitatea de eliberare a acestuia n mod
treptat, n funcie de presiunea de oxigen din esutul respectiv. Legarea oxigenului de hemoglobin
se face la nivelul celor 4 atomi de fier coninui n cele 4 molecule de hem ale lanurilor i .
Fierul din hemoglobin nu i schimb valena n urma fixrii oxigenului el rmne deci sub form
de ion feros. Ia natere astfel oxihemoglobina, compus labil care la presiune sczut de oxigen la
nivelul esuturilor pune n libertate oxigenul cu reformarea hemoglobinei. Legarea oxigenului de
hemoglobin i eliberarea sa constituie un model de adaptare biologic fa de o anumit necesitate
a organismelor superior organizate. Combinarea gradat i controlat a hemoglobinei cu oxigenul,
precum i existena unor forme parial saturate cu oxigen, permite oxigenarea tuturor celulelor,
indiferent de presiunea de oxigen existent la nivelul lor.
n afar de oxigen hemoglobinele se pot uni reversibili cu alte gaze, iar valena fierului n
compuii care rezult este cai n oxihemoglobin i anume +2. Gazul pentru care hemoglobina are
o afinitate mare este oxidul de carbon, formndu se carboxihemoglobina mai stabil ca i
oxihemoglobina. Acest lucru este motivul pentru care ntr un mediu saturat oxid de carbon pot s
apar intoxicaii grave.
Ambele forme oxi i carboxihemoglobina se pot transforma prin desfacerea oxigenului
respectiv a oxidului de carbon simultan cu o oxidare a ionului feros la feric, ntr un compus numit
methemoglobin. Acest lucru are loc n mod continuu n eritrocit unde se gsete ntr o concentraie
de 0,4% dintotalul hemoglobinei, constituid o etap preliminar catabolizrii sale. O cantitate
limitat de methemoglobin se poate transforma n hemoglobin sub aciunea unei enzime numit
methemoglobinreductaz. Concentraia methemoglobinei nu crete mai mult de 0,4% din totalul
hemoglobinei eritrocitare numai prin introducerea n organism de oxidani ca fericianura i azotii
sau chiar a unor medicamente cum ar fi antipirina. Combinaia hemoglobinei cu gazele au spectre
de absorbie caracteristice care permit identificarea fiecareia dintre ele.
Denaturarea proteinelor
Denaturarea proteinelor reprezint perturbarea structurii lor native, nalt organizate, trecerea
la o form ntmpltoare cu creterea entalpiei sistemului, astfel c activitatea biologic este
compromis. Denaturarea proteinelor are loc sub aciunea unor ageni denaturani.
Agenii denaturani sunt: temperatura, acizii, bazele, oxidanii, unele metale, ureea,
guanidina, solvenii organici.
Agenii denaturani acioneaz distrugnd legturile ce dau stabilitate structurii tridimensionale.
Fenomenul de denaturare privete nivelele de structur secundar, teriar i cuaternar,
meninute prin legturi slabe, fr afectarea structurii primare.
Procesul de denaturare poate s fie pn la un punct reversibil. ns, dac agentul denaturant
acioneaz mai energic, proteina se denatureaz ireversibil. n cazul unui proces reversibil, dup
ndeprtarea agentului cauzant, proteina se renatureaz, redobndind structura nativ. Aceasta se
explic prin dependena structurii spaiale de cea primar.

38

Figura nr.15. Procesul de denaturare i renaturare a proteinelor

Proteinele denaturate i schimb proprietile fizice, cum ar fi: activitatea optic i
vscozitatea. Deasemenea solubilitatea n ap scade producnd precipitarea lor. Acest fenomen de
precipitare este exploatat n biochimia analitic la cercetarea proteinelor din lichidele biologice n
scopul deproteinizrii.
Alte aplicaii ale fenomenului de denaturare sunt: procedeele de purificare a proteinelor i
operaia de sterilizare.

39

IV. Enzime
Enzimele sunt proteine ce posed o funcie nalt specializat i anume aceea de biocataliz i
se deosebesc de catalizatorii din lumea nevie prin cteva proprieti care le definesc. Enzimele se
caracterizeaz prin urmtoarele proprieti:
- capacitatea catalitic mare, eficiena catalitic crete cu un factor de 10 6 1012 fa de reacia
necatalizat.
- Specificitatea superioar de reacie elimin formarea de produi secundari
- Activitile catalitice enzimatice sunt reglate prin mecanisme diferite, care privesc fie aciunea
lor, fie cantitatea de enzim sintetizat. Controlul enzimatic are semnificaie major pentru
reglarea metabolismului celular.
- Enzimele acioneaz n condiii foarte blnde i anume la temperatura celulelor vii, la pH
aproape neutru i la presiune atmosferic.
Nomenclatur i clasificare
Mult vreme enzimele au fost denumite prin adugarea sufixului aza la numele substratului.
Ex. Amilaza, ureeza, alcool dehidrogenaza.
Unele denumiri ns nu includeau nici substratul, nici reacia catalizat.
Ex. Tripsina, pepsina, catalaza.
Datorit faptului c numrul de enzime este n continu cretere, nomenclatura veche crea
confuzii, astfel c s-a impus introducerea unei terminologii unitare i a unei clasificri adecvate.
n 1961, Comisia de Enzime a Uniunii Internaionale de Biochimie, adopt o claisficare i o
nomenclatur sistematic, bazat pe natura reaciei chimice catalizate.
Astfel, enzimele au fost clasificate n 6 clase, fiecare cuprinznd un numr de subclase i, respectiv
subsubclase.
1. Oxidoreductaze enzime ce catalizeaz reaciile de oxidoreducere.
2. Transferaze enzime ce catalizeaz reaciile de transfer de grupri funcionale.
3. Hidrolaze enzime ce catalizeaz reaciile de hidroliz.
4. Liaze enzime ce catalizeaz reaciile de descompunere a substratului prin alte mecanisme
dect cele de oxidare i hidroliz.
5. Izomeraze enzime ce catalizeaz reacii de interconversiune a izomerilor.
6. Ligaze enzime ce catalizeaz reacii de formare a legturii C-O, C-C, C-S, C-N, cuplat cu
scindarea unui compus macroergic (ATP).
Pentru a defini o enzim, fiecruia i se atribuie un numr sistematic format din numele
substratelor, urmat de cuvntul ce indic tipul de reacie catalizat, la care adaug sufixul aza.
Deasemenea, fiecrei enzime i se atribuie un cod determinat de poziia pe care enzima o ocup n
sistemul zecimal.
Exemplu: Acest numr de clasificare este alctuit din iniialele EC (Comisia de enzime) i 4 cifre.
Prima cifr indic clasa din care face parte enzima, a doua indic subclasa, determinat de felul
gruprii implicate n reacie, a treia cifr reprezint subsubclasa , adic natura particular a
substratelor din grupul respectiv, iar a patra cifr reprezint poziia ocupat de enzim n
subsubclas.
- alcool dehidrogenaza: E.C. 1.1.1.1.
- glucozooxidaza: E.C. 1.1.3.4.
Structura enzimelor
n cea mai mare parte, enzimele sunt proteine globulare. Excepie face ribonucleaza P.
O mic proporie de enzime sunt proteine simple (pepsina, chimotripsina, lizozim), iar
celelalte sunt heteroproteine (metaloenzime, dehidrogenaze piridinice). Unele enzime sunt alctuite
40

sunt alctuite dintr-un singur lan polipeptidic (ribonucleaza), altele din mai multe lanuri identice
sau diferite.
Masa molecular a enzimelor este extrem de variabil datorit lungimii lanurilor
polipeptidicre componente, ct i datorit asocierii unui numr diferit de subuniti, ca n cazul
enzimelor oligomer.
Pe lng aceste aspecte legate de structur, la enzime mai apar anumite caracteristici
specifice lor:
- identificarea centrului catalitic, i, la enzimele allosterice i a centrilor allosterici.
- Cunoaterea cofactorilor enzimatici ct i locul lor n ansamblul structural enzimatic.
Cofactorii enzimatici sunt componente micromoleculare indispensabile activitii unui
numr mare de enzime.
Cofactorul poate s fie un ion metalic sau o molecul organic specific, uneori sunt cerui ambii i
foarte rar cofactorul este un anion anorganic.
1. Metalele n cataliza enzimatic
Un numr mare de enzime cer pentru a-i manifesta activitatea ioni metalici.Zn +2 , Mn+2 ,
Mo+2 , Co+3 , Fe+3 , Cu+2 , Mg+2 , K+ , Na+ , Ca+2 . Unele enzime care conin o cantitate definit de
ion metalic funcional, fiind strns legat n structura lor se numesc metalo-enzime, iar altele care
leag slab metalu se numesc enzime metalo-activate.
Exemple:
- anhidraza carbonic: Zn+2
- enzimele heminice: Fe+3
- piruvat kinaza : Mg+2 , K+
2.Cofactorii de natur organic sunt sisteme conjugate n care mobilitatea electronic este foarte
mare, ceea ce explic puterea lor catalitic. Cofactorii slab legai de enzim sau ataai temporar se
numesc coenzime.
Exemplu: acid lipoic, coenzima Q, biopterinele, NAD+, NADP+, FAD, CoA.
Centrul activ al enzimei ( centrul catalitic)
Centrul activ al enzimei este o zon restrns din structura enzimei responsabil direct de
funcia ei catalitic, aceea de legare i transformare a substratului. Aceast regiune reprezint la
majoritatea enzimelor cca 5% din total.
Ca entitate tridimensional centrul activ poate cuprinde o poriune sau mai multe din acelai lan,
ori din lanuri diferite, apropiate spaial.
Exemplu:
Din centrul activ al ribonucleazei fac parte: His 12, His119, Lys41. Aceti aminoacizi dei sunt
situai la distan n structura liniar, sunt apropiai n structura teriar, datorit plierii lanului.
Centrii activi conin resturi de aminoacizi i eventual cofactori cu rol de a recunoate i lega
substratul sau care particip n transformarea lor chimic, uneori aceti aminoacizi
ndeplinind ambele funcii. Ali aminoacizi aflai la distane variabile de centrul activ contribuie la
stabilitatea structurii proteice, sunt resturi structurale, considerate alturi de resturile catalitice i
de legare ca eseniale pentru activitatea enzimei.
De fapt, n procesul catalitic particip indirect ntreaga molecul. Activitatea este
condiionat de existena conformaiei native a structurii enzimatice.
Aminoacizii care nu particip n nici un fel la actul catalitic sunt numii resturi neeseniale, ele
conferind moleculei anumite proprieti fizico- chimice.
Mecanismul de aciune al enzimelor
Procesul catalitic const n formarea complexului cu substratul sau substratele, ceea ce
determin o scdere a energiei strii de tranziie, transformarea chimic i eliberarea produilor. Se
41

cunosc urmtoarele mecanisme de aciune ale enzimelor:

Cataliza prin distorsie implic interaciuni care deformeaz legturile i unghiurile acestora n
molecula substratului. n unele cazuri, contorsia, poate fi consecina atarii covalente a
substratului de enzim.
Cataliza acido-bazic se datoreaz radicalilor aminoacizilor din centrul activ care pot funciona
ca acizi sau baze Bronsted sau ca acizi sau baze Lewis.
Cataliza prin orientarea reactanilor. Enzima are rolul de a dispune substratele ntr-o poziie
favorabil reaciei.
Specificitatea catalizei enzimatice
Specificitatea unei enzime reprezint capacitatea unei enzime de a selecta dintr-un numr de
compui substratul particular i a-l transforma printr-o reacie de un anume tip. Se distinge :
specificitatea de aciune ( de reacie), i specificitatea de substrat.
Specificitatea de recie.
Spre deosebire de catalizatorii neproteici, care accelereaz o varietate de reacii, o enzim
catalizeaz, de regul, un singur tip de reacie.
Exemplu:
- o reacie de hidroliz
- o reacie redox
- formarea unei legturi.
Exist, ns unele proteine, puine la numr, cu activiti polienzimatice. n acest caz proteina
posed centri catalitici independeni, responsabili de reacii diferite ce decurg prin mecanism
deosebit.
Specificitatea de substrat reprezint calitatea enzimei de a forma complexul enzimsubstrat ca prima etap obligatorie n transformarea acestuia.
Dac enzima acioneaz asupra unei varieti de compui avem de-a face cu o specificitate relativ
(de grup), n care caz enzima are capacitatea de a transforma un numr de substrate nrudite chimic.
Exemplu:
- hidrolaze: - esteraze
- peptidaze
- glicozidaze
- proteaze: - exopeptidaze
- endopeptidaze.
Specificitatea relativ are importan n biochimia analitic, deoarece permite introducerea
de substrate artificiale la determinri enzimatice.
Se cunosc i enzime cu specificitate absolut. Acestea sunt inactive fa de analogii
structurali ai substratului, ceea ce presupune recunoaterea integral a unei molecule, precum i o
rigiditate a centrului activ, n conformitate cu modelul cheie- broasc.
Exemplu:
- ureaza
- arginaza
- anhidraza carbonic
- fructozo-1,6-difosfataza.
Stereospecificitatea enzimelor.
Stereospecificitatea enzimelor este un caz de specificitate absolut. Exist un numr mare de
substrate care se caracterizeaz prin asimetrie structural, iar n procesele metabolice adeseori se
ntlnete unul din izomerii posibili.
Exemplu:
- L i D aminoacid oxidazele sunt specifice pentru stereoizomerii respectivi.
- Alte enzime recunosc numai izomerii geometrici: succinat dehidrogenaza, fumaraza.
42

Factorii care influeneaz activitatea enzimatic

n reaciile enzimatice viteza de reacie se msoar fie prin cantitatea de substrat
transformat, fie prin cantitatea de produs format, exprimat n molaritate, iar timpul se exprim n
minute.
Viteza unei reacii enzimatice poate fi influenat de un numr de factori, dintre care amintim:
concentraia de enzim, concentraia de substrat, temperatura, pH, inhibitori.
1. Influena concentraiei de enzim
Viteza unei reacii enzimatice arat o dependen liniar de concentraia enzimei, n condiiile
n care concentraia de substrat este fix.

[ E]
Figura nr.16
Dependena vitezei de reacie de concentraia de enzim
Abaterile de la liniaritate se datoreaz erorilor tehnice sau existenei unui inhibitor ce
acioneaz numai la o anumit concentraie.

2. Influena concentraiei de substrat.teoria Michaelis-Menten

De exemplu s presupunem urmtoarea reacie catalizat de enzim:
E+S

k1
k2

ES

k3

E+P

Pentru enzimele michaeliene, dependena vitezei de reacie de concentraia de substrat este

descris ca o hiperbol, la o concentraie de enzim constant.
Astfel viteza de reacie crete la nceput rapid i liniar, dup care dependena nu mai este
43

liniar, iar la o anumit concentraie de substrat curba tinde spre o valoare maxim.
V
Vmax

Vm/2

Km

[ S]

Figura nr.17
V0 = Vmax = [S] / [S] + Km
V - viteza iniial de reacie
Vmax capacitatea catalitic maxim a enzimei viteza maxim realizat
[ S ] concentraia de substrat
Km Constanta lui Michaelis Menten, reprezint concentraia de de substrat pentru care
viteza de reacie atinge jumtatea valorii maxime.
Dozrile de activitate enzimatic se efectueaz la concentraii mari, saturante de substrat pentru
a asigura o cinetic de ordinul zero.
Ecuaia Michaelis-Menten este fundamental n studiile de cinetic enzimatic, permind
analiza cantitativ a majoritii reaciilor enzimatice. Pe lng utilitatea la interpretarea
mecanismului reaciilor enzimatice i a aciunii inhibitorilor, cei doi parametri cinetici ( Vmax,
Km ) au importan la determinarea de enzime, inclusiv n laboratorul clinic.
3. Inhibitorii enzimelor
Inhibiia reprezint scderea parial sau pierderea activitii enzimatice ca urmare a legrii de
enzim a unui compus numit inhibitor. Inhibiia poate s fie un proces reversibil sau ireversibil.
a. Inhibiia reversibil
n cazul inhibiiei reversibile inhibitorul se combin cu enzima sau cu complexul ES, iar
prin ndeprtarea inhibitorului activitatea enzimei se restabilete.
E+I

k1
k2

ES + I

Ki

EI
Ki =

[ E] [ I]
[ EI]

ESI

Eficiena unui inhibitor se msoar prin Ki. Cu ct valoarea Ki este mai mic cu att
inhibitorul este mai efficient.
Inhibiia reversibil este de dou tipuri competitiv i necompetitiv.
44

Inhibiia competitiv
n cazul inhibiiei competitive inhibitorul intr n competiie cu substratul pentru acelai loc de
legare la situsul activ al enzimei.

E+S

ES

E+P

E+I

EI

E+P

Ki =

[E][I]
[ EI]

n cazul inhibiiei competitive inhibitorul este un analog structural al substratului.

Exemplu:

CH2

COOH

CH2

COOH

HC

+ FAD
-

FADH2

HOOC

COOH

CH

Enzima succinat dehidrogenaza, care catalizeaz aceast reacie, este inhibat competitiv de
analogi structurali, ca de exemplu: acid malonic, acid oxalilacetic, acid oxalic.
Aceti acizi dicarboxilici se pot lega de centrul activ al enzimei la fel ca i succinatul.
Inhibiia necompetitiv are loc prin legarea inhibitorului la un loc diferit de centrul activ al
enzimei, rezultnd un complex ternar ESI. Inhibitorul poate interaciona fie cu enzima liber, fie cu
complexul ES.
E+P
ES
E+S

+
I

+
I
Ki

Ki
EI + S

V 'max =

V max
1 + [I]/Ki

ESI

Pe de alt parte substratul se poate lega i de complexul EI. Spre deosebire de inhibiia competitiv
efectul inhibitorului necompetitiv nu este influenat de creterea concentraiei de substrat.

45

1/v
Inhibiie competitiv
inhibiie necompetitiv
Reacie fr
inhibitor

1/Vm

1/Vm

-1/Km

-1/Km

1/S

Figura nr.18
Un alt tip de inhibiie reversibil este inhibiia necompetitiv (incompetitiv ), care are loc
atunci cnd se formeaz complexul ternar ESI, ca urmare a interaciunii I cu complexul ES, cnd
are loc scderea valorii Km i Vmax.
b. Inhibiia ireversibil
Inhibiia ireversibil este consecina legrii covalente a inhibitorului de enzim sau de
complexul ES, el neputnd fi ndeprtat.
E+P
ES
E+S
+
I

+
I

EI

ESI
inactivi

Capacitatea inhibitorului ireversibil este msurat printr-o constant de vitez care exprim
fraciunea de enzim inhibat ntr-o perioad definit de timp la o anumit concentraie de inhibitor.
Inhibitorii ireversibili sunt toxici, fiind numii i otrvuri enzimatice.
Exemplu: metalele grele, agenii oxidani, organofosforicele, compui ai arseniului.
Semnificaia i importana practic a inhibiiei enzimatice
1. Inhibiia enzimatic este o modalitate important de control metabolic.
2. Unele toxice i exercit aciunea datorit calitii lor de inhibitori enzimatici ireversibili.
Exemplu: insecticidele
3. Inhibitorii enzimatici au aplicabilitate n toxicologia clinic, servind ca antidoturi.
Exemplu: etanolul este folosit ca antidot n intoxicaiile cu metanol i etilenglicol.
4. Utilizarea inhibitorilor n enzimologie pentru identificarea mecanismului de aciune i a
46

centrilor activi.
5. Inhibiia enzimatic este un instrument terapeutic polivalent.
Exemplu: agenii chimioterapici, antiinflamatoarele nesteroidiene.
4. Influena temperaturii asupra activitii enzimatice
Viteza reaciei enzimatice crete odat cu temperatura, n intervalul n care enzima respectiv
este stabil, datorit creterii energiei cinetice a reactanilor. n multe procese biologice o cretere a
temperaturii cu 100 C duce la dublarea sau triplarea vitezei de reacie.
Temperatura optim pentru majoritatea enzimelor este temperatura celulelor n care acestea se
gsesc. Peste temperatura de 50 600 C majoritatea enzimelor sunt inactive. Excepie fac unele
microorganisme termofile ale cror enzime sunt active i la 800C.
5. Efectul pH-ului asupra activitii enzimatice.
Enzimele sunt stabile ntr-un domeniu relativ ngust de pH, domeniu n care se gsete o
valoare, numit pH optim, pentru care activitatea unei enzime este maxim.
Majoritatea enzimelor au pH-ul optim n jurul pH-ului fiziologic de 7,4.
Excepii fac enzimele digestive pentru care pH-ul optim este cel acid, monoaminooxidazele din
membrana mitocondrial extern care au pH optim aproximativ 10. Exist unele enzime a cror
activitate este independent de pH ( pepsina ).
Reglarea activitii enzimatice
Reglarea activitii enzimatice este o component esenial a procesului de control i de
coordonare a metabolismului, n direct legtur cu meninerea homeostaziei.
Fluxul reaciei enzimatice poate fi influenat prin 3 mecanisme generale:
- variaii n cantitatea absolut de enzim
- modificarea fondului metabolic celular de substrate i cofactori, condiionate i de transportul
prin membrane
- schimbri n eficiena catalitic a enzimelor.
Enzimele allosterice
Enzimele allosterice sunt alctuite din subuniti care interacioneaz n cursul procesului
catalitic, fenomen ce se numete cooperativitate.
Activitatea acestor enzime este controlat prin legarea necovalent a unor metabolii specifici
n locuri distincte de centrul activ, locuri ce se numesc centri alosterici.
Deci, proteinele (enzimele) allosterice sunt oligomeri alctuii din monomeri identici sau nu,
aflai n numr par. Fiecare monomer posed un centru activ i locuri separate i diferite de situsul
activ numite centri alosterici.
O enzim allosteric catalizeaz de obicei o etap iniial din secvena multienzimatic a unei
ci metabolice. Reaciile enzimelor allosterice sunt ireversibile sau cu grad redus de reversibilitate,
reprezennd astfel puncte de control pentru ntregul lan de reacii. Astfel, cnd produsul final al
cii metabolice se acumuleaz peste concentaia necesar, el funcioneaz ca modulator negativ al
enzimei. Acest efect se numete inhibiie prin produs final, inhibiie feedback sau
retroinhibiie.
Exemplu:

47

E1

S1

E2

S2

P inhiba enzima
-

aspartat transcarbamilaza, enzim ce catalizeaz prima reacie din procesul de sintez a

ribonucleotidelor pirimidinice.

Importana biomedical i farmaceutic

Enzimologia aduce un aport important att n problemele de diagnostic ct i n ceea ce
privete terapia cu enzime.
I.
Diagnosticul enzimatic
Diagnosticul enzimatic se bazeaz pe informaiile furnizate de dozarea enzimelor din ser.
Determinrile enzimatice din hematii i leucocite, precum i din material bioptic sunt mai
puin abordate. Se mai urmresc unele enzime i n urin, suc gastric i suc duodenal.
n funcie de locul de producere i modul n care ajung n snge, enzimele serice se clasific
astfel:
9. Enzime secretate activ; se produc n ficat i se elibereaz n plasm, unde ndeplinesc
un anumit rol fiziologic.
Exemplu: lipoproteinlipaza, pseudocolinesteraza, lecitin colesterol- acil- transferaza.
10. Enzime ale secreiilor exocrine. Acestea se produc n diferite organe i difuzeaz pasiv
n plasm.
Exemplu: amilaza salivar i pancreatic, lipaza pancreatic, fosfataza acid prostatic,
fosfataza alcalin.
11. Enzime celulare. Aceste enzime se gsesc n plasm n cantiti de sute de ori mai mici
dect n esuturi.
Exemplu: lactat dehidrogenaza, creatin kinaza, transaminazele.
12. Enzimele inductibile, sintetizate n exces ca rspuns la un agent imductor, i ca atare
mbogesc plasma.
Exemplu: - glutamil transpeptidaza, enzimele de hidroxilare, glicuronozil-transferaza.
Izoenzimele
Izoenzimele sunt enzime ce ndeplinesc acelai rol catalitic, dar difer prin proprietile
structurale, fizice, chimice, cinetice i imunologice.
Din punct de vedere structural sunt oligomeri alctuii din subuniti identice sau diferite.
Exemplu:
1. lactat dehidrogenaza prezint 5 izoenzime LDH, care se deosebesc prin proporia n care
sunt distribuite. Cele 5 izoenzime rezult prin combinarea difert a 2 tipuri de lanuri, notate
cu H (subunitate de origine miocardic) i M (subunitate ce provine din muchi).
LDH1 : H4
LDH2 : H 3M
LDH3: H 2M2
LDH4 : HM3
LDH5 : M4
Aceste enzime se dozeaz n studiul leziunii de organ i anume n boli cu citoliz.
2. Creatin kinaza prezint 3 izoenzime, i anume:
48

CK1 : BB
CK2. BM
CK3 : MM
Aceste izoenzime sunt dozate n infarctul miocardic
Terapia cu enzime.
Pentru multe medicamente att aciunea principal ct i efectele secundare sunt n legtur
direct cu diferite activiti enzimatice.
Enzimele sunt ageni terapeutici unici ce produc efecte importante i specifice.
Enzimele sunt introduse n terapie din aproximativ 1930.
Medicamentul enzimatic apare n diferite forme solide, soluii buvabile, soluii injectabile
precum i preparate destinate uzului local.
Terapia cu enzime este indicat n afeciuni digestive i boli genetice, boli cardio-vasculare,
neoplazii sau ca medicamente antiinflamatoare n dermatologie, oftalmologie, ORL, reumatologie,
afeciuni bronice.
Metode i surse de obinere a enzimelor terapeutice:
- Extragerea din diferite esuturi sau lichide biologice umane (placenta, snge, urin) sau animal
i purificarea corespunztoare.
- Culturi de celule mamifere sau bacterii din sol.
- Surse vegetale
- n ultimul timp tehnologia ADN-ului recombinat.
Exemplu: - streptokinaza, urokinaza, enzime ce se obin prin biotehnologie. Aceste enzime reduc
mortalitatea prin infarctul de miocard.

49

V. VITAMINE
Vitaminele sunt biomolecule indispensabile vieuitoarelor pentru creterea, ntreinerea
troficitii i funciei esuturilor.
Organismul uman nu le poate sintetiza sau produce n cantiti insuficiente. Vitaminele sunt
necesare organismului n cantiti mici de ordinul miligramelor sau mai puin, cu excepia
vitaminei C care este necesar n cantiti de aproximativ 75 mg pe zi.
Deci, vitaminele pot fi considerate factori eseniali. Carena unei vitamine genereaz stri
patologice, cu manifestri specifice.
Deficienele vitaminice reflect dezechilibru dintre aport i necesiti. Ele sunt cauzate:
Primar :
- prin lipsa de aport alimentar
- de afeciuni digestive ce se repercut asupra absorbiei
- datorit disbiozei pentru vitaminele ce sunt produse de flora intestinal, aceasta este afectat
prin administrarea oral de antibiotice sau sulfamide.
Secundar :
- datorit cerinelor crescute ce apar n anumite stri.
Necesarul pentru o vitamin sau alta depinde de:
- vrst
- de starea fiziologic, de exemplu: sarcina
- de starea de sntate
- efortul fizic
- temperatura ambiant
- administrarea unor medicamente.
Strile careniale sunt numite avitaminoze (apar astzi la populaia malnutrit din rile
subdezvoltate) i hipovitaminoze, cu manifestri policareniale.
Unele vitamine au provitamine, care sunt compui nrudii structural, inactivi sau slab activi,
pe care organismul i transfer n forma activ n forma activ de vitamin.
Au mai fost identificai i ali compui numii antivitamine, care sunt capabili s-i diminuie
sau s-i suprime activitatea unei anumite vitamine. Unele antivitamine au utilizri terapeutice, dar
prezin dezavantajul de a induce simptome careniale.
Clasificarea vitaminelor
Exist o clasificare care are la baz criteriul solubilitii n ap sau solveni nepolari. Astfel
vitaminele se mpart n:
- vitamine hidrosolubile: B1, B2, B6, B12, PP, acid folic, C, biotina, acidul pantotenic.
- vitamine liposolubile: A,D,E,K.
Unii autori admit i o categorie de pseudovitamine care cuprind compui care au parial
trsturi de vitamine (vitaminoide). De exemplu:
- flavonoizii numii i vitamina P
- acizii grai eseniali sau vitamina F
- mezoinozitolul
- colina

Mecanismul de aciune al vitaminelor

Multe vitamine acioneaz dup o prealabil biotransformare, iar altele rmn nemodificate
i funcioneaz ca i coenzime, participnd la o multitudine de procese biochimice.
Alte vitamine ca de exemplu vitaminele A sau D folosesc ci de aciune ce amintesc de
mecanismele hormonale.
Vitaminele E sau tocoferolii funcioneaz ca sisteme antioxidante fa de agresiunea
peroxidic.
50

Exist, deasemenea i modaliti particulare de aciune, cum ar fi de exemplu: retinalul i

acidul retinoic.
n general vitaminele prezint i un important rol catalitic.
Implicaii terapeutice
n terapie, vitaminele sunt utile ca medicaie specific pentru combaterea sau profilaxia
strilor careniale. Preparatele pot s conin o singur vitamin sau asocieri de vitamine. n doze
terapeutice vitaminele sunt n general bine tolerate. Supradozarea poate provoca tulburri grave,
numite hipervitaminoze, mai ales la vitaminele liposolubile, care sunt mai greu eliminabile.
Exemplu: - n literatur se semnaleaz c vitamina A ar prezenta risc teratogen, fiind astfel
contraindicat n primele luni de sarcin.
n terapie se folosesc unii derivai vitaminici ca sruri, esteri, reprezentnd forme optimizate sub
raportul eficacitii sau al posibilitii de adminidtrare.
Vitaminele liposolubile
Vitaminele liposolubile sunt molecule apolare derivate din izopren. Ele sunt relativ stabile la
temperatura operaiilor culinare, dar uor inactivate de radiaiile UV i substanele oxidante.
Digestia i absorbia lor decurge n condiii proprii lipidelor, cu participarea enzimelor specifice i a
bilei.
Ficatul poate depozita vitaminele A,D,K, iar vitamina E se acumuleaz mai ales n esutul adipos.
n circulaia sanguin vitaminele liposolubile sunt vehiculate de ctre proteinele plasmatice.
Vitaminele liposolubile se elimin n bil, urmeaz un circuit enterohepatic i se excret n fecale.
Unii metabolii pot s treac n urin.
Vitaminele A
Vitaminele A mai sunt cunoscute i sub denumirea de retinoide.
Surse de Vitamina A
Vitamina A se gsete n alimenia carnal ca atare sau n produsele vegetale sub form de
provitamine.
Organismul uman nu poate sintetiza vitamina A, dar are capacitatea de a transforma provitaminele
n forme active. Provitaminele A sunt pigmeni de culoare galben-portocalie sau roie.
Structur
Pigmenii vegetali au o structur polizoprenic format din 40 de atomi de carbon i au nite inele
ciclohexenil (cicluri iononice).
n grupa provitaminelor A intr hidrocarburi (caroteni) i derivaii lor oxigenai (xantofile,
carotenoide).
Condiia structural obligatorie este prezena a cel puin a unui nucleu -iononic.
Exemplu:

- caroten

51

 caroten
n mucoasa intestinal, - carotenul sufer o scindare oxidativ a legturii duble din poziia
15 (proces enzymatic) n urma creia se formeaz vitamina A1 (retinalul).
O2
dioxigenaza

CH
2

vitamina A1 (retinalul)
-

Tot n mucoasa intestinal mai au loc dou transformri i anume:

reducerea gruprii carbonilice la grupare alcoolic n prezena enzimei alcool dehidrogenazei
sau retinol dehidrogenazei.

CH

alcool
dehidrogenaza
CH2OH

retinol

52

oxidarea gruprii aldehidice la acid carboxilic, n prezena aldehid dehidrogenazei, cu formare

de acid retinoic.

CH

aldehid
dehidrogenaza
COOH

acid retinoic

Forma alcolic i cea de aldehid reprezint formele de absorbie intestinal. Dup absorbie
vitamina A se esterific cu acizii grai (acid palmitic) i se depoziteaz n ficat. De acolo se
mobilizeaz dup necesiti. Vitamina A este transportat de o protein plasmatic specific la
esuturile int. Majoritatea esuturilor au capacitatea de a realiza conversia:
ol

al

oic

Se mai cunosc i alte vitamine A, i anume. A2, A3.

CH
O

vitamina A2 (3-dehidroretinal)
Vitamina A2 se gsete sub 3 forme, i anume: 3- dehidroretinal , -ol i oic i se gsete n ficatul
petilor.
CH2
CH

Vitamina A3
n cazul vitaminei A3 are loc deplasarea legturii duble din poziia 13-14 n poziia
13-20.
Toate cele trei forme ale vitaminei A1 (retinol, retinal i acid retinoic) sunt active biologic, dar sunt
inechivalente ca aciune.
Acidul retinoic
53

Acidul retinoic este capabil s ntrein dezvoltarea i diferenierea diferitelor esuturi.

Acidul retinoic particip n biosinteza glicoproteinelor, datorit capacitii sale de a proteja pielea i
mucoasele (aciune epitelotrop) i mrete rezistena organismului la infecii.
Retinolul
n celula int retinolul este captat de o protein specific citoplasmei, diferit de cea seric
i l transloc n nucleul celulei, unde este preluat de o protein nuclear. Se presupune c vitamina
A sub forma alcoolic acioneaz asemntor hormonilor. Retinolul influeneaz funcia de
reproducere, acionnd asupra hormonilor.
Retinalul
Retinalul particip direct n procesul vederii, fiind elementul cromofor al tuturor pigmenilor
vizuali coninui n celulele fotoreceptoare din retin. Celulele fotoreceptoare din retin conin dou
tipuri de celule ca form: bastonae i conuri.
Pigmenii vizuali sunt instrumente moleculare ale vederii. Ca structur sunt cromoproteine,
proteine complexe formate din proteina propriu-zis plus o grupare micromolecular colorat.
Celula bastona este implicat n procesul vederii i este format din dou segmente, i anume unul
extern i unul intern. Segmentul extern este format din aproximativ 1000 de discuri ce conin
pigmeni vizuali de tipul rodopsinei. Rodopsina este o cromoprotein format din dou
componente: o parte proteic, numit opsina i cromoforul, care este izomer al vitaminei A: 11cis retinalul. Cele dou componente sunt legate printr-o legtur de tip baz Schiff ce se realizeaz
ntre funcia carbonil a cromoforului i funcia - aminic a unui rest de lizin din structura opsinei.
R

CH

N+

( CH2 )4

NH

CH

opsina

CO

H
cromofor ( 11- cis retinal )

Rodopsina are capacitate mare de a absorbi lumina, ceea ce face ca celula bastona s fie un
receptor foarte sensibil, fiind necesar energia unui singur foton pentru a fi fotoexcitat.
Rodopsina face parte dintr-un sistem senzor. Fenomenul primar al procesului de excitare vizual
este izomerizarea 11-cis retinalului din structura rodopsinei, consecutiv absorbiei luminii.

izomerizare
lumina

HC
+

11 cis
-

retinal

NH

opsina

CH

NH

opsina

all trans retinal

Prin izomerizare se schimb geometria structurii polienice a rodopsinei, are loc o deplasare a
legturii aldiminice cu 5A0 n raport cu inelul - iononic. Aceast deplasare va antrena structura
54

proteinei i apar astfel modificri constante ale opsinei, modificri ce duc la desprinderea
cromoforului de opsin. Procesul de fotoliz a pigmentului are loc n etape care se succed cu vitez
foarte mare. Rodopsina activat va declana o serie de interaciuni n cascad care explic
fenomenul de excitaie vizual.
R
lumina

intuneric

R* (rodopsina fotoexcitata)

all trans retinal

izomeraza
dehidrogenaza
all trans retinol

11 cis

opsina

retinal

Figura nr.19. Procesul de excitare vizual.

Carena de viatmina A mbrac diverse forme.
La nivelul ochilor:
- se instaleaz tulburri funcionale, scderea acomodrii n lumin crepuscular, apar dificulti
n vedere.
- Pot s apar leziuni ale conjunctivei (xeroftalmie)
- Obstrucia canalelor vasculare, cheratomalacie, suprainfectare cu Bacillus xerosus
La nivelul pielii:
- apar leziuni trofice ale epidermei i mucoasei
Tot n caren de vitamina A pot s apar tulburri ale creterii i sterilitate.
Supradozarea cu vitamina A duce la hipervitaminoz, care se manifest prin creterea tensiunii
intracraniene, cefalee, prurit, hepato-splenomegalie, descuamare cutanat, anorexie, iritabilitate.
n condiii obinuite necesarul zilnic de vitamina A este de 1,7mg pentru adult i 1 mg pentru copii.
El poate s creasc n sarcin, lactie, pneumonie, nefrit.
Indicaii
Vitamina A este indicat n special n: oftalmologie, dermatologie, dar i n boli infecioase febrile,
boli renale, ciroze hepatice, hipertiroidism, diabet i n pediatrie. n scop terapeutic se folosesc
esterii de retinol i anume: acetatul i palmitatul.
Vitaminele D ( calciferolii)
Prin origine, structur i mod de aciune vitaminele D se apropie mult de hormonii steroizi.
Necesarul n raia alimentar este evaluat n jur de 150 UI la adult, ntre 300- 500UI la copil, cu
condiia unui aport adecvat da Ca i P. Necesitile de aport exogen crescut sunt reclamate n
sarcin, alptare, la sugari i la persoanele private constant de lumina solar.
Surse de vitamina D:
- din alimente sub form de provitamine
- endogen prin biosintez
- suplimentar sub form de medicamente n caz de sarcin, la sugari, persoanele ce triesc i
lucreaz mult n ntuneric
Provitaminele D sunt compui sterolici cu 19 atomi da carbon n structura tetraciclic de
baz. Conversia provitaminelor D n vitamine D este un proces fotochimic ce are loc sub influana
55

radiaiilor UV. Procesul are loc n etape cu deschiderea inelului B. Se cunosc 6 vitamine D, care se
noteaz de la D2 la D7. D1 este considerat preparat impur de D2.

lumina

HO

HO

7- dehidrocolesterol

colecalciferol (D3)

lumina

HO

HO

ergosterol

ergocalciferol (D2)

Provitamina D2 se ntlnete n sclerotul de secar, S.cereviceae, esuturi animale.

56

Sursa endogen de vitamina D

sinteza endogena

alimente

colesterol
mucoasa intestinala
7

dehidrocolestrol
lumina

HO
colecalciferol
Prin aciunea radiaiilor UV 7-dehidrocolesterolul format n mucoasa intestinal i depozitat
n piele sufer un process de fotoliz neenzimatic, trecnd n precolecalciferol, care se
izomerizeaz spontan n colecalciferol. Transformarea este direct proporional cu intensitatea
expunerii i invers proprional cu gradul de pigmentare a epidermei. Procesul de conversie se
diminu cu vrsta. Calciferolii se absorb din intestinul subire proximal.
Metabolismul vitaminei D
Vitamina D sufer un proces de hidroxilare la fel ca i hormonii. Au fost pui n eviden cca
20 de derivai hidroxilai. Astfel, n microzomii hepatici o hidroxilaz specific introduce gruparea
hidroxil n poziia 25. 25- hidroxicalciferolul sub aciunea unui complex de trei enzime duce la
hidroxilarea n poziia 1, cu formare de 1, 25 calciferol sau calcitriolul, care este metabolitul cel
mai activ, fiind considerat i hormonul D.
Perturbarea procesului de obinere a calcitriolilor duce la cauzele de producere a carenei de
vitamina D. Astfel, medicaia antiepileptic (fenobarbital, fenitoina) administrat timp ndelungat
induce enzime capabile s produc produi hidroxilai preponderent inactivi.

57

calciferol
OH

hidroxilaza
OH
25 hidroxicalciferol

1,25 calciferol

(calcitriol)

24,25 calciferol

HO
calcitriol

1,24,25 calciferol

58

Rolul biochimic al vitaminei D

Vitamina D alturi de hormonul paratiroidian intervine n metabolismul Ca i al fosfailor.
Astfel, reacia de hidroxilare a calcifediolului este stimulat direct de scderea fosfatului i indirect
de scderea calciului.
hipofosfatemie

hipocalcemie
+

PTH
+

calcifediol

calcitriol

Figura nr.20
Calcitriolul i stopeaz propria sintez prin mechanism feed-back. Calcifediolul s-a putut
localiza n intestine, n esutul renal, osos; acestea find deci principalele esuturi int a hormonului
D.
Aciunea biologic principal a hormonului D este de a facilita absorbia intestinal de Ca i
fosfat. La nivelul tubilor renali produce retenie de fosfai i crete sinergic cu PTH reabsorbia Ca.
n corelaie cu PTH asigur concentraiile sanguine optime de Ca i fosfai, n vederea mineralizrii
normale a osului. Dup unele preri, calcitriolul ar stimula sinteza de osteocalcin, o protein
transportoare de Ca, a crei formare depinde i de vitamina K. Aciunea parathormonului i a
hormonului D este de a ridica nivelul de Ca n fluidul extracelular i de a menine sau scdea
concentraia de fosfat. Cnd exist un deficit de Ca n os, creterea calcemiei sub influena
vitaminei D va produce inhibiie feed-back a secreiei PTH, permind mineralizarea. Dozele mari
de vitamina D stimuleaz osteoclatii i mobilizeaz Ca din oase. Aceste micri ale Ca pot fi puse
n legtur cu proteinele transportoare din celulele respective.
n concluzie, hormonul D este produs printr-o serie complex de reacii enzimatice i
neenzimatice, ce implic transportul moleculelor precursor la esuturi. n organele int hormonul
D acioneaz dup modelul hormonilor steroizi, interceptnd n final un numr de procese
biologice. Hormonul D are o contribuie esenial la homeostazia calciului. Acest bioelement este
important nu numai n metabolismul osos, ci i n excitabilitatea neuromuscular, stimuleaz
producerea unor hormoni i neurotransmitori, intervine i n procesul de coagulare.
Carena de vitamina D
Carena de vitamina D se manifest n primul rnd prin tulburri n metabolismul osos. La
adult, demineralizarea osului provoac osteoporoza, care evolueaz spre osteomalacie. La copii,
carena de vitamina D duce la apariia rahitismului.
Semnele biuochimice sunt creterea fosfatazei alcaline serice, hipocalcemia i
hipofosfatemia. Tabloul clinic al rahitismului include: deformri ale scheletului, modificri osoase
vizibile radiologic, hipotonie muscular i ligamentar, uneori spasmofilie. Deformrile osului se
instaleaz n primii ani de via.
Exemplu:
59

fontanela defectuos suturat, craniu ovalar, dentiie ntrziat, toracele cu sternul proiectat
nainte, bazin strmtat. La maturitate apare bazin distocic, membrele inferioare se curbeaz, iar
abdomenul devine voluminos.
Indicaii
n terapie se utilizeaz vitaminele D2 i D3, calcifediolul i calcitriolul asociate cu preparate
de Ca i fosfat. La sugari se face profilaxie cu vitamina D. Exist forme de rahitism, numite
rahitism pseudocarenial, rezistente la vitamina D. Aceste boli sunt congenitale, datorate
incapacitii transformrii vitaminei D n calcitriol i a absenei receptorului pentru hormonul D.
Toate preparatele cu vitamina D sunt toxice prin supradozare, provocnd mobilizarea Ca din os,
osteoporoza, hipercalcemia, depuneri n esutul renal ducnd la calculoza renal. La administrarea
prelungit a vitaminei D se recomand controlul nivelului de Ca i fosfat din snge.
A fost obinut un analog sintetic al vitaminei D , compusul dihidrotachisterolul ( AT10,
tachystin), prin hidrogenarea parial a tachisterolului, unul din produii secundari din procesul de
fotoliz a provitaminei D. Acest compus este folosit la combaterea de urgen a tetaniei
paratireoprive, datorit efectului rapid de corectare a hipocalcemiei.
Vitamina E (tocoferolii)
Vitamina E este cunoscut sub denumirea de vitamina antisterlitii, deoarece este necesar
pentru fertilitate la unele mamifere i psri. Denumirea de tocoferol vine din limba greac *tokos
= a nate, pherein = a purta*. Vitamina E se gsete exclusiv exogen n plantele verzi, uleiuri
vegetale, alimente de origine animal, mai ales viscere.
Structura vitaminei E
Tocoferolii sunt derivai metilai ai nucleului, numit tocol. Se cunosc 4 tocoferoli naturali
notai: -, -, -, - tocoferol. Compusul posed activitatea vitaminic cea mai marcat i este cel
mai larg rspndit.

HO
CH3

CH3

CH3

CH3
CH3

tocol
tocoferol: 5,7,8 trimetiltocol
tocoferol: 5,8 dimetiltocol
tocoferol: 7,8 dimetiltocol
tocoferol: 8 metiltocol
Metaboliii acestei vitamine nu se cunosc, neidentificndu-se nici un metabolit activ.
Rolul biologic al vitaminei E
Vitamina E prezint dou funcii biochimice:
- una legat de calitatea sa puternic antioxidant
- cealalt privind metabolismul Se.
Vitamina E este un puternic antioxidant n vivo sau n vitro. Vitamina E este activ la
presiuni mari de oxygen i protejeaz astfel acizii grai nesaturai, vitamina A, carotenii i gruprile
tiolice ale enzimelor. Vitamina E este bine distribuit n membranele eritrocitelor i ale celulelor
din teritoriul arborelui respirator.
n vivo joac un rol important n protecia fosfolipidelor membranare, contribuind astfel la
conservarea structurii celulare, fa de agresiunea peroxidic a diverilor ageni.
Relaia vitamina E Se este una de reciprocitate. Rolul legat de Se este specific i
insuficient precizat. n ce privete Se, se arat c el este necesar pentru funcionarea normal a
60

pancreasului (digestia lipidelor i deci a vitaminei E). Se contribuie la reinerea vitaminei E n

lipoproteinele plasmatice. Se are o aciune sinergic antioxidant ca i component al unei enzime
numite glutation peroxidaz.
2G

H2O2

SH

glutation peroxidaza
G S

2 H2O

Necesarul de viatamina E este de 10 mg /zi, iar n sarcin i alptare ajunge la

15 mg/zi.
Carena de vitamina E
Stri de caren E se pot instala n cadrul sindromului de malabsobie lipidic, cauzate de
disfuncia pancreatic, colecistopatii, boli inflamatorii intestinale, cnd se produce steatoree
(pierderea de lipde n scaun). Pn n prezent lipsesc dovezi sigure c vitamina E ar fi necesar
funciei reproductive la om.
Carena se manifest prin tulburri neurovegetative, apariia de edeme, fragilitate eritrocitar,
anemia hemolitic, care apare n special la nou-nscuii prematur.
Vitamina E se indic n sarcin i alptare, la prematuri, la vrstnicii cu tulburri de circulaie
periferic. n avort, sterilitate i distrofii musculare eficiena este ndoielnic.
Vitamina K
Vitaminele K naturale se gsesc n diferite alimente, ca: lapte, ou, uleiuri vegetale. Sursa
major de vitamina K este flora saprofit intestinal (B.coli), astfel c n mod obinuit nu este
necesar aportul exogen.
Vitaminele K sunt derivai de 2- metal- 1,4-naftochinona. Compusul printe este considerat
vitamina K3, numit i menadiona.
O
CH3

O
vitamina K3 , menadiona
Se cunosc 7 vitamine K, dintre care: K 1K3 sunt liposolubile (vitamine naturale), iar
K4..K7 sunt hidrosolubile (vitamine de sintez).

O
CH3
CH2
O
61

CH3
CH

C CH2 CH2

CH3
CH2 CH

CH2

H
3

fitomenadiona , vitamina K1
O
CH3
CH2

CH3
CH

C CH2

H
n

vitamina K2 ( n= 6,7,8)
OH
CH3

OH

vitamina K4
NH2HCl
CH3

OH
vitamina K5
NH2HCl
CH3

NH2HCl
vitaminaK6
OH
CH3

NH2HCl
vitamina K7

62

Biotransformarea vitaminei K are loc n microzomii hepatici. Metabolitul cel mai activ al
vitaminei K este derivatul hidrochinonic. Acesta sufer un proces de glicuronoconjugare, iar
produii rezultai se elimin pe cale biliar i renal.

Acid glutamic

acid carboxiglutamic
CO2

monooxigenaza

O2
OH

O
CH3

CH3

O
R

OH

O
O
CH3

epoxid reductaza

R
O
Figura nr. 21
Acidul -carboxi- glutamic fixeaz calciul cu afinitate mare pentru glutamat, care este un
chelator slab, permind interaciunea specific protein Ca+2 fosfolipide, esenial pentru
procesul de coagulare.
Rolul biologic al vitaminei K
Vitamina K are rol n procesul de coagulare a sngelui. Vitamina K este esenial pentru
asigurarea nivelului optim pentru 4 din factorii coagulrii sngelui: II, VII, IX, X. Aceti factori
sunt proteine care se sintetizeaz i se elibereaz n circulaie sub form de precursori inactivi:
zimogeni (precursori enzimatici). Conversia zimogenilor la forme active este un proces vitamino
K dependent.
Rolul biochimic al vitaminei K a fost pus n eviden prin experiene cu antivitamine K.
Astfel, s-a demonstrat c dicumarolul introdus n alimentaia animalelor produce hemoragii letale,
deoarece sngele acestor animale conine o protrombin anormal, incapabil s lege calciu,
ntruct ea nu conine resturi de acid -carboxiglutamic. Compuii de tip cumarinic sunt folosii n
terapia anticoagulant, pentru tratamentul i profilaxia afeciunilor tromboembolice, acionnd
asupra epoxid reductazei pe care o nhib.
Carena de vitamina K
Deficitul de vitamina K se poate instala n sindromul malabsorbiei lipidice, n boli hepatice,
prin disbioza intestinal indus de antibiotice sau sulfamide, abuz de laxative, tratament cu
63

anticoagulante cumarinice, supradozare cu vitamina A. Carena de vitamina K duce la hemoragii,

epistaxis, hemoragii subcutane, digestive, hematurie. Deasemenea carena de vitamina K poate s
mai apar n boala hemoragic a sugarului, la care intestinul este relativ steril, sistemul de sintez
hepatic a factorilor de coagulare este imatur, iar bariera placentar este greu accesibil la vitamina
K.
Terapia cu vitamina K
Vitamina K face parte dintre hemostaticele folosite sistemic n hemoragii de diverse
etiologii.
Preparatele farmaceutice de vitamina K sunt: fitomenadiona, menadiona solubil i derivaii si
hidrosolubili, menadion sodiu sulfat i menadiol sodiu fosfat.
Fitomenadiona este lipsit de toxicitate, celelate fiind contraindicate la nou-nscui i sugari putnd
provoca anemie hemolitic i hiperbilirubinemie.
Dozele terapeutice sunt mai mari dect cerina fiziologic, care este apreciat la 2 mg/zi.

64

Vitaminele hidrosolubile
Vitaminele hidrosolubile sunt molecule polare cu structur chimic foarte variat. Ele se
ntlnesc asociate n produse naturale ca: drojdia de bere, cortexul gramineelor, ficat. Din aceast
cauz lipsa de aport prin alimentaie provoac stri de policaren i nu o hipovitaminoz anume.
De exemplu: alcoolismul cronic produce policarena vitaminic B, cu preponderen a carenei de
vitamina B1.
Vitaminele hidrosolubile se absorb n circulaia portal, se stocheaz n cantiti mici, eliminndu-se
cu uurin pe cale renal.
Vitamina B1
Vitamina B1 se mai numete tiamina sau aneurina i apare larg rspndit n esuturile
vegetale i animale, n drojdia de bere. Necesarul zilnic pentru un adult sntos este de cca 2 mg/zi.
Necesiti crescute pot s apar n sarcin i alptare, n cretere i n stri patologice ca boli
nervoase, alcoolism, boli infecioase.
Structura
n structura moleculei de tiamin intr 2 nuclee heterociclice: unul pirimidinic i unul
tiazolic. Cele dou nuclee sunt unite print-o punte metilenic.
CH2

N
H3C

N+

CH3
CH2

CH2 OH

Vitamina B1 este uor absorbit din intestine, n esuturi unde este fosforilat i transformat
n tiaminpirofosfat (TPP), care apoi poate fi hidrolizat cu eliminarea gruprii pirofosforice.

ATP

AMP

TPP
Tiamina
pirofosfattransferaza
pirofosfataza
P

CH2

N
H3C

N+
S

H2O

CH3
CH2

OH
CH2 O P O
O

65

OH
P OH
O

TPP

TPP (cocarboxilaza) este forma metabolic activ, care servete drept coenzim n reacii ce
transfer uniti de aldehid activat. Asemenea transferuri au loc n reacia de decarboxilare
oxidativ a - cetoacizilor i n reacia de transcetolare. Ambele tipuri de reacii sunt ntlnite n
cadrul metabolismului glucidic. n aceste reacii de transfer, rolul propriu-zis al coenzimei TPP este
de a servi la eliberarea din anumite molecule a unitilor aldehidice care urmeaz a fi transferate pe
alte molecule.
Carena
Carena de tiamin apare atunci cnd cresc necesitile. Sindromul tipic pentru carena de
tiamin este cunoscut sub numele de boala beri-beri. Sindromul beri-beri prezint 3 forme:
- Beri-beri uscat (paralitic), se manifest prin atonie muscular, caecsie, polinevrit periferic
degenerativ.
- Beri-beri edematos (umed), care se manifest prin tahicardie, cardiomegalie, dispnee, edem
generalizat
- Beri-beri difuz , ce se manifest cu dureri musculare de tip reumatismal, astenie.
Sindromul beri-beri rmne cauza esenial a mortalitii neonatale n Asia de S-E. O alt form de
hipovitaminoz este sindromul Wernicke, care se manifest cu fenomene de encefalopatie
(afeciune a sistemului nervos).
La alcoolici carena apare frecvent evolund cu polinevrita, crampe dureroase ale membrelor
inferioare, tulburri senzitive, apoi motorii.
Indicaii
Vitamina B1 este indicat n tratamentul strilor careniale, n neurologie, reumatologie,
alcoolism, boli infecioase, diabet zaharat.
Vitamina B2
Vitamina B2 sau riboflavina este sintetizat de plante i microorganisme. Ea se gsete n
cantiti mari n: lapte, ou, ficat, legume verzi. Este relativ termostabil, dar se descompune n
prezena luminii.
Structura
Riboflavina este reprezentat de nucleul izoaloxazinic substituit cu doi radicali metil n
poziiile 6 i 7, i cu un rest ribitil n poziia 9.
CH2

CHOH 3 CH2 OH

H3C

H3C

O
NH

O
Riboflavina la nivelul mucoasei intestinale este fosforilat cu ajutorul mATP rezultnd o
structur ce amintete e un nucleotid, i anume: FMN.
FMN reprezint forma de absorbie intestinal. n diferite esuturi, FMN este nglobat ntr-o
structur mai complex, prin legare de un rest de AMP, transferat de pe o molecul de ATP cu
formare de FAD.

66

H3C

CH2

CHOH 3 CH2 OH

flavokinaza

+ ATP

NH

H3C

Mg+2

O
CH2

CHOH 3 CH2

H3C

H3C

PO3H2

O
NH

O
FMN
CH2 CHOH 3 CH2 OPO3H2
H3C

H3C

O
+ ATP

NH

flavokinaza
Mg+2
NH2

OH

OH

CH2 CHOH 3 CH2 O

P O

H3C

P O CH2
N
O
O

H3C

N
N

NH
O

HO OH

FAD
Dintre aceste dou forme FAD reprezint 80%, FMN 20%, iar riboflavina liber rmne
ntr-o proporie neglijabil.
Rol biochimic
Ambele flavin-nucleotide (FMN, FAD) sunt coenzime care fac parte din sisteme enzimatice
implicate n diverse procese de oxido-reducere din organism. Datorit structurii coenzimelor
respective, aceste enzime se mai numesc flavoenzime sau flavoproteine. n structura lor se remarc
o legtur strns (necovalent) ntre coenzim i partea proteic. Deasemenea, majoritatea
flavoproteinelor conin metale cu rol de cofactori adiionali, de aceea enzimele respective sunt
cunoscute i sub numele de metaloflavoproteine.
n reaciile de oxido-reducere catalizate de flavoproteinele active, participantele directe la
procesele redox sunt tocmai coenzimele constituente, FMN sau FAD. Astfel, ciclul izoaloxazinic
67

poate suferi reduceri reversibile prin fixarea temporar la atomii de azot din poziiile 1 i 10 a doi
atomi de hidrogen preluai de la substratele cu care intr n reacie i care se oxideaz.
R
H3C

NH

H3C

O
+ SH
2

O
R
H3C

H3C

N
N
H

H
N

O
NH

+ Sox

n acest fel, FMN sau FAD trec din formele lor oxidate n formele reduse FMNH 2 sau
FADH2 . Formele oxidate sunt pigmeni galbeni, fluoresceni, iar cele reduse apar ca leucoderivai.
Aceste flavoproteine pot fi utilizate n oxidarea unor substrate ca: aminoacizi, amine, glucoza, etc.
Necesarul de vitamina B2 este de aproximativ 1,5 mg n 24 de ore i este acoperit din
alimente i prin aportul florei intestinale, astfel c o caren de B2 este destul de rar ntlnit.

68

Carena
Cnd aportul de riboflavin este insuficient apar simptomele avitaminozei i anume: ragade
la colurile gurii, leziuni ale buzelor, colorarea n rou intens a limbii, oboseal ocular, dilatarea
pupilei, sensibilitatea ochiului la lumin, modificri ale vascularizaiei la nivelul corneei,
tremurturi, tulburri digestive, dificulti la urinare. Toate aceste simptome dispar prin includerea
sistematic n alimentaie a unor alimente bogate n vitamina B 2 sau prin administrarea de produse
farmaceutice ce conin riboflavin.
Indicaii
Vitamina B2 este indicat n dermatologie, oftalmologie i neurologie. Ea se administreaz
n asociaie cu alte vitamine din grupul B.
Vitamina PP
Vitamina PP (niacina, nicotinamida, vitamina B3 ) este vitamina antipelagroas. Vitamina PP
se sintetizeaz n plantele verzi i la animale pornind de la triptofan. Ea se gsete n cantiti mari
n: carne, legume i cereale. Necesarul zilnic de vitamina PP este de cca 15 mg /zi.
Din punct de vedere structural vitamina PP este acidul nicotinic.
COOH

CONH2

acid nicotinic

nicotinamida

Vitamina PP este constituientul a 2 nuleotide ce reprezint formele sale biologic active:

NAD+ i NADP+.
NH2
CONH2
O
+N

CH2

OH
OH OH

P O P
OH

N
O

CH2

OH O R

R: H
= NAD
PO3H2 = NADP
n celulele animale NAD+ este prezent n cantiti mult mai mari dect NADP. Coninutul de
NADP+ al esuturilor este proporional cu activitatea lor biosintetic. NAD+ i NADP+ au rol de
coenzime i servesc unor enzime de oxido-reducere, numite dehidrogenaze. Astfel NAD + este
considerat principalul colector de hidrogen al substratelor.

69

AH2
A

H+

CONH2

CONH2

+N

( NAD+)

( NADH )

H+

BH2
Aceste reacii implic transferal reversibil de perechi de atomi de H.
Rolul dehidrogenazelor piridinice:
- transfer de H i electroni ntre substrate fie n reacii cuplate aparinnd aceleai ci metabolice,
fie ntre ci metabolice diferite.
- NADH ofer hidrogen n etapa final a oxidrii celulare reprezentat de lanul respirator
mitochondrial
- NAD+ este principalul colector de H a substratelor. El funcioneaz mai cu seam n cile
metabolice oxidative.
Enzimele NAD dependente se mai numesc reductaze i servesc n procese de hidroxilare ce
privesc substane endogene i xenobiotice.
Carena de vitamina PP provoac pelagra.
Timp ndelungat pelagra a fost considerat ca o form tipic de caren PP. Ulterior s-a
constatat c pelagra este o stare policarenial cauzat prin absena aportului de viatamina PP i B 6,
precum i de triptofan. Ea apare la populaii malnutrite, mai ales consumatoare de porumb, din care
lipsete triptofanul i proteinele cu valoare biologic ridicat. Pelagra mai poate s apar i secundar
n cazul sindromului de malabsorbie, al sindromului carcinoid, cnd o cantitate mare de triptofan
este sustras biosintezei de acid nicotinic, la alcoolici, n aminoacidurii (ca boala Hartnup) i sub
tratament cu izoniazid.
Pelagra se manifest printr-o erupie caracteristic pe pielea expus soarelui, care devine
atrofic, aspr i fisurat, prin inflamaia mucoaselor digestive (stomatite, glosite, enterite).
Simptomelor dermice li se asociaz i tulburrile de tranzit, diaree apoas, uneori sanguinolent,
tulburri ale SNC, insomnie, confuzie, delir, com, tulburri hematologice i de circulaie periferic.
Utilizarea n terapeutic
Preparatele cu vitamina PP corecteaz eficient o bun parte din simptome, ncepnd cu cele
digestive i mai trziu cu dermatita. Pentru administrare se prefer nicotinamida. Acidul nicotinic
poate s produc fenomene adverse chiar i n doze terapeutice.
Administrarea cantitilor mai mari de niacin (pn la 100mg /zi) nu determin fenomene
de toxicitate. Cantitile excesive provoac ns prurit, roirea pielii i, n general, modificri
circulatorii deoarece vitamina PP determin dilatarea lumenului vaselor sanguine.

70

Vitamina B6
Vitamina B6 , numit i piridoxina sau adermina, apare sub trei forme biologic active
interconvertibile. Vitamina B6 se gsete n principal n grne, ficat, drojdie, legume verzi i n
cantiti mici n lapte i ou.
Din punct de vedere structural are la baz nucleul piridinic, substituit.
CH2OH
HO

CHO

CH2OH HO

H3C

H3C

piridoxina

CH2OH
N

piridoxal
CH2

HO

NH2
CH2OH

H3C

piridoxamina
Piridoxina i analogii si se absorb din intestine. n citoplasma celulelor derivaii vitaminei B 6 sunt
fosforilai la gruparea alcoolic din poziia 5, rezultnd piridoxal-fosfatul (PALPO).
CHO
HO
H3C

CHO
CH2OH

piridoxal kinaza

HO

O
CH2 P

OH

OH

ATP
ADP

H3C

PALPO

CH2NH2
HO

CH2 P

OH

OH
H3C

PMP

PALPO i PMP (piridoxaminfosfat) sunt formele active ale vitaminei B 6. Ele funcioneaz ca i
coenzime n metabolismul aminoacizilor. PALPO intervine n procesul de transaminare a
aminoacizilor.

71

E CHO

H2O

R1 CH COOH

E CH

N CH R1

NH2

COOH
baza Schiff I

+H O
2

R1 C COOH

R1 C N

CH2 E

COOH
baza Schiff II

CH2 NH2

R2 C COOH + E

CH2NH2

H2O

R2 C COOH
N CH2 E

baza Schiff III

+H O
2

R2

CH COOH
N

CH E

baza Schiff IV

R2 CH COOH + E CHO
NH2

Deci, ntr- un proces de transaminare are loc transferul funciei aminice de pe un aminoacid
pe un alfa- cetoacid acceptor, astfel c aminoacidul donor devine alfa- cetoacid, iar alfa-cetoacidul
acceptor devine aminoacid.. n cursul procesului catalitic are loc transformarea reversibil a PLP n
PMP.
Vitamina B6 este foarte bine rspndit n rndul produilor alimentari, astfel c o
alimentaie normal i aportul florei intestinale acoper necesitile de vitamina B 6 n condiii
obinuite. Astfel strile careniale de vitamina B 6 de origine nutriional apar foarte rar la om.
Principalele manifestri ale carenei de vitamina B6 sunt dermatita seboreic, polinevrita, apariia de
convulsii (n special la sugari), anemia. Anemia apare ca urmare a perturbrii etapelor iniiale din
biosinteza hemului.
Alte posibiliti de instalare a deficienei de vitamina B 6 sunt: alcoolismul cronic, sarcina,
insuficiena renal i unele boli genetice. Deasemenea, unele medicamente, ca: izoniazida (HIN),
cicloserina, penicilamina, contraceptivele orale, administrate timp ndelungat pot s induc carena
de vitamina B6.
Necesarul de vitamina B6 este n jur de 2 mg/zi la adult. Aportul excesiv poate determina
efecte toxice pe sistemul nervos.
Acidul pantotenic (vitamina B5 )
Acidul pantotenic poart acest nume pentru c este foarte mult rspndit n esuturile
vegetale i animale. El este vitamin pentru om, dar i factor de cretere pentru microorganisme.
Cele mai bogate surse de acid pantotenic sunt: drojdia de bere, boabele cerealelor,
glbenuul de ou, carnea. n organism acidul pantotenic provine i prin sintetizarea sa de ctre flora
bacterian intestinal.
n structura acidului pantotenic intr acidul pantoic i -alanina legate printr-o legtur
amidic.

72

CH3
HO

CH2

CH

CO

NH

CH2

CH2

COOH

CH3 OH
acid pantoic

beta- alanina

Acid pantoic este absorbit uor n intestine, i apoi fosforilat n poziia a acidului pantoic,
urmnd astfel o cale metabolic prin care este transformat n 2 cofactori enzimatici : fosfopantoteina
i coenzima A.
O

CH3

HO P

O CH2 C CH CO

OH

NH CH2 CH2 CO NH CH2 CH2 SH

CH3 OH

fosfopanteina
O
HO

CH3

O CH2 C

CH CO

NH CH2 CH2 CO NH CH2 CH2 SH

CH3 OH

NH2
O

O CH2

OH

N
N

N
N

O OH
O

OH

OH

Coenzima A
Dup cum se observ coenzima A are o structur nucleotidic ce include fosfopantoteina de
care este legat un rest adenilic fosforilat n poziia 3 a ribozei. Fosfopantoteina servete ca grupare
prostetic transportoare de radicali acil, numit Acyl carrier Protein (ACP). ACP face parte
dintr-un system multienzimativ implicat n procesul de biosintez a acizilor grai.
Coenzima A este deasemenea implicat n diverse reacii enzimatice din diferite ci
degradative sau biosintetice cum ar fi: oxidarea acizilor grai, decarboxilarea oxidativ a alfacetoacizilor, degradarea aminoacizilor, n procesul de iniiere a ciclului Krebs, n biosinteza
diferitelor lipide, precum i n procesele de acetilare a unor compui endogeni sau xenobiotici ( de
ex. acetilarea HIN).
Coenzima A se leag de resturile acil prin intermediul funciei tiolice, formnd astfel
73

tioesteri macroergici de tipul : R- CO- SCoA.

Formarea legturilor macroergice presupune consum de energie, care poate s fie cedat de ATP.
Alimentele pot s ofere cantiti mari de acid pantotenic, astfel nct nu a fost semnalat
carena spontan. Deficiena specific s-a putut induce experimental prin administrare de
antagoniti. Simptomele sunt variate: digestive, predispoziie la infecii, crampe musculare,
modificri cutanate, hipoglicemie, depresii nervoase.
Deficitul de pantotenat alturi de cel al vitaminei B 6, acizilor grai eseniali i de proteine contribuie
la instalarea steatozei hepatice. Acidul pantotenic este indicat n stri de policaren B.
Biotina (Vitamina H)
Biotina este un derivat imidazolic cu structur biciclic care conine ca lan lateral un rest de
acid valerianic la -biotina sau izovalerianic la -biotina.
O
HN

NH

CH2 4 COOH

n natur, biotina se gsete liber sau combinat fie cu lisina (biocitina), fie cu proteine. n
intestin biotina este eliberat de biotinaz pancreatic i absorbit printr-un proces activ Nadependent.
Biotina funcioneaz ca grupare prostetic pentru enzimele ce catalizeaz reaciile de
carboxilare, servind astfel drept cru pentru CO2 activat.
Biotin- enzima + HCO
3 + AT P

CO2

biotin- enzima + ADP + aP

substrat

substrat carboxilat

Astfel, biotin-enzima ncarc gruparea carboxil pe biotin rezultnd carboxi-biotin-enzima,

care transport gruparea carboxil pe un substrat acceptor.
Exemle de enzime biotin-dependente:
- piruvat carboxilaza, care catalizeaz carboxilarea piruvatului la oxalil-acetat.
- acetil- CoA carboxilaza, care catalizeaz formarea malonil- CoA.
La om necesarul de biotin este de 150- 300 g pe zi i este n mare msur asigurat de flora
intestinal. Cantiti suficiente se gsesc alimentaia carnat, glbenu, cereale i legume.
Carena provocat experimental se manifest prin dermatit seboreic, anorexie, oboseal,
74

insomnii, parestezii. Stri careniale se cunosc la sugarii cu deficit genetic privind enzima
responsabil de ataarea biotinei la componenta carboxilazic. Semnele clinice sunt:cetoza
metabolic, cu creterea lactocidemiei i o eliminare anormal de acid propionic n urin.
n terapie, biotina este de obicei inclus n preparatele polivitaminice.
Acidul folic (folacina)
La fel ca i alte vitamine din complexul B, acidul folic este factor de cretere pentru
microorganisme. Denumirea de acid folic se datoreaz faptului c prima substan descoperit din
acest grup de vitamine a fost izolat din frunze de spanac i s-a dovedit c are caracter acid.
Din punct de vedere structural acidul folic conine n structura sa acid pteroic i un lan glutamil peptidic.
COOH

OH
N

N
H2N

CH2 NH

CO NH CH
CH2
CH2
CO

COOH
NH CH
CH2
CH2
COOH

Acizii folici pot s fie:

- acizi pteroil monoglutamic
- acizi pteroil poliglutamici
La plantele exist sub form de complex heptaglutamic, iar n ficat predomin conjugatul
pentaglutamic. Spre deosebire de plante i microorganisme, organismul animal este incapabil s
sintetizeze acid pteroilmonoglutamic.
n intestine acizii pteroil poliglutamici sunt hidrolizai cu enzime specifice rezultnd derivatul
monoglutamic, care se absorbe n circulaia mezenteric. n celulele intestinale acidul folic este n
mare parte redus la THF (FH 4). Aproximativ 2/3 din folatul absorbit se leag de proteinele
plasmatice.
Hidrogenarea acidului folic sub aciunea folat-reductazei NADPH-dependente are loc n 2 etape,
intermediar formndu-se DHF.

75

OH

OH
N

N
H2N

NH R

CH2

folat reductaza

NADPH + H+

NADP +

N
H2N

CH2 NH R

folat reductaza

NADPH + H+ NADP +

H
OH
N
H2N

H
N

DHF
CH2 NH R
H

H
THF

THF reprezint metabolitul activ i servete drept coenzim n reaciile de transfer sau
interconversiunea gruprilor cu un C, numite i fragmente C 1 active. Donorii de grupri C1 active
sunt: serina, histidina, acidul formic.
Acidul folic particip la biosinteza nucleotidelor i a acizilor nucleici, care au un rol
important n biosinteza proteinelor. Deasemenea acizii folici controleaz procesul de cretere i
hematopoeza.
Organismul uman este dependent de aportul de folat furnizat de legumele cu frunze i carne.
Acidul folic nu rezist la temperatura de preparare culinar. Necesarul zilnic este de 400 g, care crete
n sarcin i alptare, n sindroame de malabsorbie intestinal la alcoolici, la bolnavii cu anemie
hemolitic sau cancer cu evoluie rapid.
Carena poate fi indus medicamentos prin administrare de antifolice sau la tratament
ndelungat cu: fenobarbital, fenitoina, primidona, care cresc nevoia de folat.
Deficiena folic acut cuprinde manifestri digestive i dermice. Carena cronic se caracterizeaz
prin tulburri de cretere, dereglri de hematopeoz ce conduc la anemia megaloblastic,
leucopenie, trombocitopenie.
Acidul folic se administreaz ca biostimulator general, ca factor antianemic n diferite forme
de anemie, mai ales macrocitar, n leucopenia secundar, chimio- sau radioterapia bolii maligne.
Acidul folic este contraindicat persoanelor peste 60 de ani deoarece poate stimula un process
neoplazic latent. Uneori acidul folic se asociaz cu vitamina B12 sau cu preparate pe baz de fier.
Antifolice ( Antagoniti folici)
Antifolicele sunt substane care se aseamn structural cu acidul folc i sunt inhibitori ai
unor enzime implicate n biosintez.
Multe antifolice i-au gsit aplicabilitate terapeutic.
Exemple:
- Sulfamidele i sulfonele sunt utilizate ca antibacteriene i interfereaz inserarea PAB n
structura acidului folic, acionnd asupra dihidropteroat sintetazei, care catalizeaz etapa
intermediar n sinteza de folat.
- Trimetoprimul este inhibitor al folat reductazei
- Metotrexatul este folosit n leucemie i psoroazis.
n tratamentul ndelungat cu antifolice apare o caren folic. Carena poate fi compensat prin
administrare de acid folinic, care se administreaz oral sau parenteral sub form de folinat de Ca.
Vitamina B12
Vitamina B12 sau ciancobalamina ndeplinete rol de vitamin pentru om i este factor de
76

cretere pentru microorganisme. Poart indicele 12 deoarece este al 12-lea compus izolat din
complexul B.
Din punct de vedere structural vitamina B 12 are o structur foarte complex. Asfel, ea conine o
parte intern,reprezentat de un schelet tetrapirolic numit corrina. Nucleul corinic din partea
central difer de cel al hemului prin urmtoarele elemente:
- n centru se afl ionul Co+
- sistemul tetrapirolic este mai saturat
- dou nuclee pirolice sunt unite direct ntre ele
- are un numr mai mare de substituieni, majoritatea lor cu grupri amidice.
Deasemenea vitamina B12 mai conine i o parte extern reprezentat de un nucleotid cu riboz. El
este unit prin dou legturi cu regiunea central: una direct ntre unul din atomii de N ai
benzimidazolului i ionul monovalent de cobalt, iar a doua legtur se realizeaz prin intermediul
restului de acid fosforic al nucleotidului cu riboz i o caten ataat la unul din cele patru nuclee
pirolice.
R
R: CN- , OH, CH3
N
N

Co+

N
N

nucleotid
Vitamina B12 este sintetizat exclusiv de ctre bacterii anaerobe, dar se gsete i n esuturile
animale, mai ales n ficat. Absorbia ei este mediat de receptori specifici din ileum, dup
prealabila cuplare cu un factor intrinsec (CASTLE). Acesta este o glicoprotein cu specificitate
absolut pentru vitamina B12, secretat de celulele parietale din mucoasa gastric. Dup desprindere
de factorul intrinsic cobalamina trece n circulaia portal, unde se leag de o protein plasmatic
transportoare, numit trancobalamina II.
n esuturi se elibereaz ca hidroxicobalamina, fiind apoi transformat n metilcobalamin.
Ficatul stocheaz cantiti de ordinul mg, pentru lungi perioade, graie legrii de o alt protein,
numit transcobalamina I.
Funciile biochimice ale vitaminei B12
Enzimele cobalaminice funcioneaz n metabolimul gruprilor cu un C, fiind ntlnite n 3
tipuri de reacii:
2. reacii de rearanjament intramolecular
3. reacii de metilare
4. reacii de reducere a ribonucleotidelor la dezoxiribonucleotide.
n esutul mamiferelor se cunosc dou procese dependente de cobalamine:
- izomerizarea metal-malonil CoA la succinil CoA

77

COOH
CH2

CH

CO

mutaza
SCoA

CH2

CH2

COOH

CO SCoA

transformarea homocisteinei n metionin

CH2

N5metil THF

HO

Cbl

CH2
CH

NH2

CH3
metionina

COOH
THF

Me

Cbl

CH2

SH

CH2
CH

homocisteina
NH2

COOH
Deficitul de cobalamin se repercut negativ asupra sintezei de metionin, cu consecine privind
biosinteza proteic i regenerarea de THF.
Vitamina B12 este esenial alturi de folat, pentru creterea i maturarea celulelor, mai cu seam a
celor cu ritm intens de proliferare. Deasemenea cobalamina este necesar pentru funcia mduvei
hematogene, a aparatului digestiv i a sistemului nervos.
Prin participarea la sistemul metioninei este un factor lipotrop, protejnd ficatul de ncrcarea cu
grsimi.
Carena cobalaminic apare rar, deoarece alimentaia carnal ofer necesarul (cca 10 mg/zi),
existnd avantajul termostabilitii. Cauza principal este absena factorului intrinsec datorit
incapacitii mucoasei gastrice de a-l produce n afeciuni gastrice, rezecii sau constituional prin
defect genetic de sintez, ori prin mecanism autoimun.
Carena este rar provocat prin lips de aport, n regim exclusiv vegetarian prelungit, n sindrom de
malabsorbie intestinal, dup tratament cu neomicin, metformin, antiepileptice, n disbioz
intestinal.
Maladia produs n carena de vitamina B 12 este anemia pernicioas (anemia Biermer). Clinic
aceasta se manifest prin: paloare, astenie (sindrom anemic), inapeten, grea, emez, balonri,
tulburri de transit (sindrom de transit), neuropatie.
Anemia biermerian face parte dintre anemiile megaloblastice, majoritatea cauzate prin deficiena
vitaminei B12 i/sau a acidului folic, ce determin perturbri n sinteza acizilor nucleici, implicnd
suferina tuturor sistemelor celulare. Apare astfel hematopoeza ineficient cu deviaie
megaloblastic, consecina fiind producerea insuficient a elementelor liniilor celulare ale sngelui
i n special a seriei roii. Astfel n sngele periferic se evideniaz: pancitopenia, megalocitoza,
magaloblastoza, celule cu alte modificri morfologice, fragile. Diagnosticul diferenial n anemia
megaloblastic se face prin dozarea cobalaminei n plasm, prin testarea absorbiei intestinale,
administrarea de vitamina B12 marcat i msurarea radioactivitii n urin.
n anemia pernicioas tratamentul ncepe cu doze de atac de vitamina B 12, parenteral, care pe
msura ameliorrii simptomelor se reduce la doze de ntreinere administrate cu intermiten toat
viaa. Alte indicaii ale viatminei B12 sunt n : neuropatii, ciroz, hepatite, stri de malnutriie.
78

n terapie se folosesc ciancobalamina i hidroxicobalamina.

Vitamina C
Vitamina C poart i numele de acid ascorbic deoarece este o substan cu caracter acid, iar
carena sa n organism provoac scorbut. Din punct de vedere structural vitamina C este numit i
lactona acidului 2,3-dienol- L- gulonic. Structura sa este extrem de labil prin expunere la aer, iar n
soluii alcaline trece n acid dehidroascorbic. Ambele forme sunt active i apar n esuturi.
O
O
C
C
HO

HO

HO

HO

CH2OH

CH2OH

acid L ascorbic

acid L dehidroascorbic

Transformarea acidului L-ascorbic n acid L-dehidroascorbic poate fi efectuat de L-ascorbat

oxidaza, enzim ce conine Cu.
Vitamina C este una din cele mai rspndite vitamine, fiind sintetizat de majoritatea speciilor
vegetale i animale din glucoz. Excepie sunt primatele, cobaiul i alte cteva specii, posesori ai
unor enzimopatii genetice, fiind incapabili s efectueze etapa final din lanul metabolic de
biosintez, adic conversia L-gulono-lactonei n acid ascorbic.
Acizii ascorbic i dehidroascorbic se absorb aproape n totalitate n intestin i se distribuie
extra- i intracelular. La un aport adecvat rezervele satisfac necesitile cteva luni consecutive
lipsei de alimentaie. Dozele foarte mari de vitamina C satureaz depozitele i depete pragul
renal de eliminare. Deci dozele mari de vitamina C sunt excretate urinar, astfel c administrarea
excesiv este inutil.
n esuturi vitamina C este transformat n mic msur prin oxidare.
O
C
HO
HO
H

HO C

H
H

CH2OH
acid L ascorbic

HO

C OH

OH

HO

C
C
C

H
CH2OH

CH2OH
acid L dehidroascorbic acid 2,3 diceto gulonic

COOH

Ca+2

COOH
O

oxalat de Ca

OH

OH

HO

CH2OH
acid L treonic

Vitamina C se elimin urinar, n proporie mare netransformat, cantitatea de acid ascorbic

excretat normal fiind pn la 1%. Oxalatul de calciu poate ns precipita n cile renale cauznd
litiaza oxalic.
Rolul vitaminei C
79

Acidul ascorbic are un potenial reductor destul de mare, fiind astfel capabil s reduc
oxigenul molecular, nitraii, citocromii a i c, methemoglobina.
Cuplul ascorbat-dehidroascorbat funcioneaz ca sistem redox activ ntr-o serie de procese
biochimice.
Exemplu:
- n reaciile de hidroxilare din: - metabolismul aminoacizilor aromatici
o metabolismul prolinei, lisinei
o biosinteza noradrenalnei
o biotransformarea medicamentelor
Dozele mari de vitamina C stimuleaz absorbia Fe, reducndu-l la ion feros, forma
favorabil absorbiei, iar concentraiile fiziologice cresc ncorporarea Fe n feritina. Se consider c
acidul ascorbic este necesar procesului de cretere, pentru integritatea tegumentelor, n buna
funcionare a aparatului cardiovascular. De asemenea i se atribuie un rol n procesul de aprare
imunitar, n mrirea rezistenei la efort, n hematopeoz.
Necesarul de vitamina C este de 1mg/kgcorp/zi la adultul sntos i este asigurat n primul
rnd de vegetalele proaspete, crude.
Cerinele sunt crescute n sarcin, alptare, frig, condiii de munc grea, boli infecioase,
cancer i dependent de vrst.
Carena este reprezentat de scorbut. Pot s apar stri de subcaren, n special la sfritul
iernii. Se manifest prin: tendina la hemoragii, n special gingivale, echimoze, hiperkeratoza
folicular, dureri articulare (osteoporoza), anorexie, tulburri de tranzit intestinal, anemie, astenie.
Acidul ascorbic este necesar formelor active ale unor enzime (dioxigenaze cu enzime),
acionnd probabil prin meninerea metalului la valena sa inferioar.
Indicaiile vitaminei C sunt profilactice i de corectare a simptomelor careniale, n boli
infecioase, n pediatrie, n methemoglobinemie, astenie, asociat preparatelor cu Fe.
Nu se cunosc efecte toxice, dar n caz de supradozare poate fi duntoare la subiecii cu
predispoziie la oxaloz sau deranjeaz absorbia unor vitamine ca: B 12 sau a altor medicamente
simultan ingerate.

80

81

VI. METABOLISM
Metabolismul reprezint totalitatea transformrilor de substan, energie i informaie, care
au loc ntr-un organism viu. Metabolismul general prezint dou aspecte eseniale: catabolismul i
anabolismul.
Catabolismul reprezint totalitatea reaciilor de degradare din organism, iar aceste reacii
sunt frecvent procese de oxido-reducere, care au loc cu eliberare de energie. Energia eliberat este
conservat sub forma legturilor macroergice din ATP.
Energia nmagazinat n ATP este utilizat n procese de biosintez a biomoleculelor, care
sunt substane cu molecul mare. Cu mare specificitate i cu nivel nalt de organizare. Totalitatea
proceselor de biosintez din organism constituie anabolismul. Spre deosebire de procesele
catabolice, procesele anabolice decurg cu consum de energie, fiind endergonice. Energia necesar
proceselor de biosintez este asigurat de hidroliza legturii macroergice din ATP.
Pe lng procesul cu caracter catabolic sau anabolic, n celule mai au loc transformri ale
constituenilor si, care au concomitent att caracter catabolic ct i anabolic. Acestea se numesc
procese amfibolice. n cadrul acestor procese pot rezulta compui care pot fi catabolizai sau care
pot fi utilizai n procese de biosintez.
Totalitatea transformrilor pe care le sufer anumii compui de la ingestia sau biosinteza lor
pn eliminarea lor din organism se numete metabolism intermediar. Degradarea constituenilor
organici fundamentali ai celulei vii (proteine, glucide i lipide) se desfoar n mai multe stadii:
I.

Moleculele mari a acestor compui sunt degradate cu eliberarea unitilor lor structurale
fundamentale;
II.
Produii rezultai n primul stadiu sunt transformai pe ci specifice ntr-un numr mic de
molecule simple, printre care predomin acetil-CoA;
III.
Compuii rezultai n al doilea stadiu sunt transformai n dioxid de carbon i ap pe o
cale numit ciclul citratului;
IV.
Echivalenii de hidrogen preluai de la metaboliii din stadiile anterioare sunt oxidai cu
formare de ap prin intermediul lanului respirator.
Stadiile I i II sunt specifice pentru fiecare categorie de compui, iar stadiile III i IV sunt
caracteristice transformrii glucidelor, lipidelor i proteinelor.
Cea mai important cale de formare de dioxid de carbon n celul este ciclul citric sau ciclul
acizilor tricarboxilici sau ciclul lui Krebs.

82

proteine

polizaharide

aminoaacizi

monozaharide

lipide

acizi grasi
glicerina

II
acetil-CoA

CAT

III

CO2
2H

2H
2H

2H
IV
O2

oxidare biologica

CO2

lantul respirator
H2O

Figura nr.22

CICLUL ACIZILOR TRICARBOXILICI

Respiraia este procesul prin care celula aerob obine energie n urma oxidrii moleculelor de
combustibil de ctre oxigenul molecular. Ciclul acizilor tricarboxilici este calea metabolic central cea
mai obinuit pentru degradarea resturilor de acetil-CoA rezultate prin catabolizarea glucidelor, acizilor
grai i aminoacizilor. Ciclul acizilor tricarboxilici este o secven ciclic, care are loc n toate celulele
aerobe. Se mai numete i ciclul acidului citric sau ciclul lui Krebs. Aceast secven de reacii este
catalizat de un sistem multienzimatic care primete gruparea acetil de la acetil-CoA drept combustibil
i o descompune n dioxid de carbon i echivaleni reductori. Acetia sunt apoi condui printr-un lan
de proteine transportoare de electroni la oxigen, care este redus pentru a forma ap.
Din schema prezentat mai sus se constat c acetil-CoA rezultat n urma procesului de
catabolizare a principalelor biomolecule, intr n ciclul acizilor tricarboxilici. n unele cazuri, ns, n
urma procesului de catabolizare a acestor biomolecule nu rezult acetil-CoA, ci piruvat. Piruvatul ca s
poat intra n ciclul acizilor tricarboxilici trebuie s se transforme, n prealabil, n acetil-CoA.
83

Oxidarea piruvatului la acetil-CoA.

Oxidarea piruvatului la acetil-CoA este un proces complex catalizat de complexul
multienzimatic piruvatdehidrogenaz.
+

CH3 - C - COOH + NAD + CoA

piruvatdehidrogenaza

CH3 - CO - CoA + NADH + H + CO2

Aceast reacie, care este ireversibil n esuturile animale, nu reprezint o parte din ciclul
acizilor tricarboxilici, dar este obligatorie pentru participarea tuturor hidrailor de carbon la ciclul
acizilor tricarboxilici.
Decarboxilarea oxidativ a piruvatului la acetil-CoA i dioxid de carbon necesit trei enzime
diferite i cinci coenzime organizate ntr-un complex multienzimatic. Etapele de reacii realizate sub
influena acestor enzime sunt artate mai jos.
CH3 - C - COOH + E1 - TPP
O

piruvat
dehidrogenaza

CO2

E1 - TPP - CH - CH3
OH

Aceast etap este catalizat de ctre piruvat dehidrogenaz, enzim a crei grupare
prostetic este coenzima tiaminpirofosfat. Piruvatul sufer o decarboxilare pentru a elimina dioxidul
de carbon i derivatul -hidroxietil.

84

aminoacizi

glucoza

acizi grasi

piruvat
CO2
2H
acetil-CoA
citrat

oxalilacetat

[cis-aconitat]

malat

izocitrat

fumarat

CO2
-cetoglutarat

succinat
succinil-CoA
2H

2H

2H

NAD

CO2
2H

flavoproteine

ADP + P
ATP

coenzima Q

citocrom b
ADP + P

transportul de e- si
fosforilarea oxidativa
din lantul respirator

ATP
citocrom c
ADP + P
citocrom a3

2H+ + 1/2O2

ATP

H2O

Figura nr.23
n etapa a doua, gruparea hidroxietil este dehidrogenat de piruvat dehidrogenaz iar
gruparea acetil care rezult este transferat la acidul lipoic, care reprezint gruparea prostetic
legat covalent la cea de a doua enzim, dihidrolipoil transacilaz.
E1 - TPP - CH - CH3 + E2
OH

E1 - TPP + E2
S

SH

O = C - CH3

85

Transferul unei perechi de atomi de hidrogen de la gruparea hidroxil a TPP la legtura

disulfuric a acidului lipoic face ca aceasta din urm s treac n forma redus a acidului
dihidrolipoic.
n etapa a treia, gruparea acetil este transferat pe cale enzimatic, de la gruparea lipoil a
acidului dihidrolipoic la gruparea tiolic a CoA.
E2
S

SH

+ CoA-SH

E2
SH

SH

+ CH3 - CO - SCoA

O = C - CH3

Acetil-CoA astfel format prsete complexul enzimatic sub forma sa liber.

n etapa a patra, forma ditiolic a gruprii lipoil a dehidrolipoil transacetilazei este reoxidat
la forma disulfuric prin transferul atomilor de hidrogen de la cea de a treia enzim a complexului,
cunoscut sub numele de dihidrolipoil dehidrogenaz, la a crei grupare prostetic este strns legat
FAD.

E2
SH

SH

E2

+ E3 - FAD

+ E3 - FADH2

FADH2, care rezult, rmne legat de enzim i este reoxidat n faza a cincea de ctre NAD+.
E3 - FAD + NADH + H+

E3 - FADH2 + NAD+

Complexul piruvat dehidrogenaz este inhibat specific de compuii arsenului trivalent

(As ). Activitatea complexului piruvat dehidrogenaz este reglat la nivelul ATP-ului i a ionilor de
calciu. Acetil-CoA rezultat intr n ciclul acizilor tricarboxilici unde este transformat n dioxid de
carbon i ap.
+3

Reaciile ciclului tricarboxilic.

La nceput ciclul acizilor tricarboxilici reprezenta o simpl schem. Aceast schem a fost
completat cu detalii privind enzimele care catalizeaz reaciile, ct i stereochimia reaciilor din
ciclu.
1. Acidul citric este primul intermediar al ciclului acizilor tricarboxilici se formeaz prin
condensarea acetil-CoA cu oxalilacetat.
CO - CoA

COOH
CH2
HO - C - COOH

CH2

CH2

CH2

COOH

COOH

oxalilacetat

86

H2O

HO - C - COOH

CoAS - OC - CH3 + O = C - COOH

acetil-CoA

citrat sintetaza

CH2

citroil-CoA

CoA-SH

COOH
acid citric

Aceast reacie este catalizat de citrat sintetaz, enzim ce determin formarea

intermediar a citroil-CoA, care ulterior trece n acid citric. Citrat sintetaza are rol de enzim
reglatoare, deoarece este inhibat de ATP i (NADH + H+), produsul final al fosforilrii oxidative.
2. A doua reacie a ciclului acizilor tricarboxilici este reprezentat de trecerea citratului n
izocitrat, printr-un intermediar denumit acid cis-aconitic.
COOH

COOH

COOH
H2O

CH2

H2O

CH2

CH2
CH - COOH

C - COOH

HO - C - COOH

CH

CH2

HO - CH
COOH

COOH

COOH

acid izocitric

acid cis-aconitic

acid citric

Enzima care catalizeaz aceast reacie se numete aconitaz, care este activat i stabilizat
de Fe i de cistein. Aceast reacie este stereospecific, adiia apei la cis-aconitat este o trans
adiie.
+2

3. Oxidarea izocitratului la -cetoglutarat este o reacie care are loc n prezen de izocitrat
dehidrogenaz care necesit prezen de NAD+ sau NADP+.
COOH

COOH

CH2

izocitrat
dehidrogenaza

CH - COOH

CO2

CH2
CH2

HO - CH

C=O
NAD+

COOH
acid izocitric

NADH + H+

COOH

acid -cetoglutaric

Izocitrat dehidrogenaza NAD dependent din mitocondrie necesit prezena ionilor de

magneziu, este o enzim alosteric reglat de ADP, ca i activator specific i Mg+2.
4. A patra etap o constituie oxidarea -cetoglutaratului la succinil-CoA n prezena cetoglutarat dehidrogenazei.
COOH
CH2
CH2
C=O
COOH

+ NAD + CoA

acid -cetoglutaric

-cetoglutarat
dehidrogenaza

COOH
CH2
CH2

+ CO2 + NADH + H

CO - CoA
succinil-CoA

Reacia este analoag oxidrii piruvatului la acetil-CoA i dioxid de carbon i are loc prin
acelai mecanism, cu participarea tiamin-pirofosfatului, a acidului lipoic, a coenzimei A, FAD-ului
87

i NAD-ului drept coenzime.

5. n etapa a cincea succinil-CoA sufer o pierdere a gruprii CoA, nu printr-o simpl reacie
de hidroliz ci printr-o reacie conservatoare de energie. Reacia are loc n prezena succinil-CoA
sintetazei, ca enzim, care provoac formarea legturii macroergice a GTP-ului, gin GDP i fosfat
anorganic, pe seama legturii macroergice din succinil-CoA.
COOH
CH2

+ Pa + GDP

CH2

COOH

succinil-CoA
sintetaza

CH2

+ GTP + CoASH

CH2

CO - CoA

COOH

succinil-CoA

Acid succinic

GDP + Pa

GTP
E-succ-fosfat + CoA

succinil-CoA + Pa + E
E-succ.-fosfat
E

fosfat + GDP

fosfat + succinat
E + GTP

6. n etapa urmtoare succinatul este oxidat la fumarat de flavoproteina succinat

dehidrogenaza, care conine FAD legat covalent.
COOH
CH2
CH2

+ FAD

COOH
Acid succinic

succinat
dehidrogenaza

COOH
CH
HC

+ FADH2

COOH
Acid fumaric

Enzima este activat de succinat, fosfat, ATP i coenzima Q redus i inhibat de

concentraii mici de oxalilacetat.
Reacia este stereospecific, dehidrogenaza ndeprteaz atomii de hidrogen din poziia trans
de la atomii de carbon metilenici ai succinatului.
7. Succinatul rezultat este apoi hidratat la L-malat n prezena enzimei fumarat
dehidrogenaz sau fumaraz.

88

COOH
CH

COOH
+ H2O

HC

fumaraza

HO - C - H
CH2

COOH

COOH

Acid fumaric

Acid malic

Fumaraza acioneaz stereospecific, deoarece ea formeaz numai stereoizomerul L al

malatului.
8. n ultima reacie a ciclului L-malatul este oxidat la oxalilacetat n prezen de L-malat
dehidrogenaz NAD dependent.
COOH

COOH
HO - C - H
CH2

+ NAD+

O=C
CH2

+ NADH + H+

COOH

COOH

Acid oxalilacetic

Acid malic

Reacie este strict stereospecific pentru stereoizomerul L al acidului malic. Oxalilacetatul rezultat
poate reintra ntr-un nou ciclu condensndu-se cu acetil-CoA.
Dac facem un bilan al ciclului se constat c pentru fiecare grupare acetil intrat n ciclu
doi atomi de carbon formeaz dou molecule de dioxid de carbon, iar prin reacia de dehidrogenare
enzimatic, care au loc, rezult patru perechi de atomi de hidrogen: trei dintre ele au fost utilizate la
reducerea NAD+ i una la reducerea FAD. Aceste patru perechi de atomi de hidrogen vor ceda
electronii, n cursul lanului respirator, oxigenului.
Ecuaia global se poate scrie astfel:
Ac-CoA + 3 NAD+ + FAD + 2 H2O + GDP + Pa
2 CO2 + CoA-SH + 3 NADH + 3 H+ + FADH2 + GTP

Localizarea intracelular a enzimelor ciclului

Cercetrile efectuate de Kennedy i Lehninger au demonstrat c mitocondriile izolate prin
ultracentrifugare omogenatelor de esut hepatic, asigur transformarea tuturor intermediarilor
ciclului citric, deci conin toate enzimele necesare acestui ciclu.
Pe de alt parte nucleele, fraciunea microzomal i fraciunea solubil a citoplasmei erau
inactive. Deci, mitocondriile hepatice conin toate enzimele necesare ciclului citric i enzimele
necesare transportului de electroni. Deci, se constat c la toate animalele i plantele studiate pn
n prezent, sediul desfurrii ciclului Krebs ce reprezint mitocondriile.
Natura amfibolic a ciclului
Ciclul acizilor tricarboxilici este de fapt o cale amfibolic, care funcioneaz nu numai n
catabolism, ci i n anabolism, fiind precursor important ntr-o serie de biosinteze. Anumii
intermediari i cu preponderen -cetoacizi i oxalilacetatul servesc n biosinteza unor aminoacizi
89

ce pot fi uor transformai n prezena unor transaminaze.

HOOC - C - CH2 - CH2 - COOH + H3C - CH - COOH

O

GPT

NH2

acid -cetoglutaric

alanina

HOOC - CH - CH2 - CH2 - COOH + H3C - C - COOH

NH2

acid glutamic

acid piruvic

HOOC - C - CH2 - CH2 - COOH + HOOC - CH - CH2 - COOH

O

GOT

NH2

acid -cetoglutaric

acid aspartic

HOOC - CH - CH2 - CH2 - COOH + HOOC - C - CH2 - COOH

NH2

acid glutamic

acid oxalilacetic

Citratul format imediat dup intrarea acetil-CoA n ciclu poate s serveasc ca precursor n
biosinteza hemului. La fel i succinil-CoA va servi pentru biosinteza hemului.
Prin ndeprtarea citratului din ciclul acizilor tricarboxilici, acesta servete pentru biosinteza
acizilor grai
Aceti intermediar pot fi, la rndul lor, pui la loc prin reacii enzimatice specifice, numite
i reacii anaplerotice. De exemplu carboxilarea piruvatului duce la formarea acidului oxalilacetic.

CH3 - CO - COOH + CO2 + ATP + H2O

piruvatcarboxilaza
Mn+2

HOOC - CO - CH2 - COOH + ADP + Pa

Lanul respirator constituie o secven de procese biochimice a crui rezultat este

transportul electronilor la oxigenul molecular. Sistemul este format dintr-un complex
multienzimatic avnd componentele niruite ntr-o secven dictat de valoarea crescnd a
potenialului redox.
Sistemul de enzime care deservete lanul respirator este localizat n membran
mitocondrial intern.
substrat

NADH + H

FMNH2

ADP + Pa

90

CoQ

ATP ADP + Pa

cit. b

ATP

cit c1

cit c

cit a3 + H+ + O2

cit a

ADP + Pa

H2O

ATP

Energia eliberat n urma proceselor de oxidare din lanul respirator este ncorporat n
moleculele de ATP.
ADP + Pa + Q

ATP + H2O

Aceste procese ce cupleaz sinteza endergonic de ATP n urma unor procese de

oxidoreducere din lanul respirator reprezint punctele de fosforilare oxidativ.
Astfel, oxidarea unei molecule de NADH + H+ din lanul respirator produce trei molecule de
ATP, iar oxidarea unei molecule de FADH2 produce 2 ATP.
Semnificaia energetic a ciclului acizilor tricarboxilici. Procesele din ciclul Krebs i din
lanul respirator au loc n mitocondrie i constituie etapa final a oxidrii celulare care furnizeaz o
cantitate mare de energie stocat sub form de ATP.
Bilanul energetic al ciclului este urmtorul:
GTP

1 ATP

3(NADH + H+)

3 ATP

FADH2

2 ATP
12 ATP/AcCoA

Reglarea ciclului acizilor tricarboxilici.

91

piruvat
CO2
Ac-CoA

oxalilacetat

citrat

malat

izocitrat

fumarat

CO2
-cetoglutarat

succinat

92

succinil-CoA

CO2

ENZIME TRANSPORTOARE DE ELECTRONI

n transportul de electroni de la substrate organice la oxigenul reductor particip patru
tipuri de enzime:
- dehidrogenaze legate de un nucleu piridinic (piridindependente), care necesit NAD sau NADP
ca i coenzime;
- dehidrogenaze legate de nucleu flavinic (flavindependente), care conin FAD sau FMN ca i
grupare prostetic;
- proteine cu fier-sulf;
- citocromii, care conin inelul porfirinic cu fier ca i grupare prostetic.
n plus, fa de aceste proteine, pentru transportul de electroni mai particip i ubiquinona sau
coenzima Q.
Dehidrogenaze legate de piridin.
Deoarece aceste enzime necesita NAD sau NADP drept coenzime, aceste enzime se numesc
dehidrogenaze piridin dependente. Se cunosc mai bine de dousute de astfel de enzime care
funcioneaz n diferite procese metabolice. Forma general a reaciilor catalizate de acest tip de
enzime este:
SH2 + NAD+

S + NADH + H+

SH2 + NADP+

S + NADPH + H+

Aceste reacii implic transferul reversibil a echivalenilor reductori de la substrat, sub

forma unui ion de hidrur (H-), la poziia 4 a inelului nicotinamidic (n forma oxidat) a nucleului
piridinic; cellalt hidrogen este eliminat de pe substrat ca ion liber (H+)
Piridinnucleotidele sunt legate necovalent i slab de dehidrogenaza proteic. Deci, NAD i
NADP trebuiesc privite nu ca i grupri prostetice fixe, ci ca un al doilea substrat, deoarece ele se
leag reversibil de situsul activ catalitic de pe enzim. Astfel, nucleotidele piridinice servesc ca i
transportori disociabili de electroni.
Unele dehidrogenaze piridin dependente (ex. -hidroxibutirat dehidrogenaza) sunt localizate
n mitocondrie, altele (de ex. lactat dehidrogenaza) sunt localizate n citoplasm, iar altele (ex. malat
dehidrogenaza) se gsesc n ambele compartimente. n celulele animale, NAD se gsete intr-o
cantitate mult mai mare dect NADP. n ficat cca 6o% din NAD-ul total se afl n mitocondrie, iar
restul n citoplasm. Dehidrogenazele NAD - dependente au un rol important n respiraie unde
asigur transferul de electroni de pe diferite substrate spre oxigen, pe cnd dehidrogenazele
NADP-dependente servesc n principal la transferul de electroni de la intermediari catabolici la
intermediari anabolici.
Multe dehidrogenaze piridin dependente conin strns legai ioni metalici divaleni, de
exemplu, alcool dehidrogenaza conine ioni de zinc (Zn +2). Dehidrogenazele piridin dependente
reacioneaz stereospecific, de exemplu, lactat dehidrogenaza este specific numai pentru L-lactat.
n secvena glicolitic aldehida 3-fosfogliceric este oxidat la piruvat n urmtoarele reacii,
cu intermediarul comun NAD.
CH = O
H - C - OH + Pa + NAD+
CH2 - O- P
93

COOP
H - C - OH + NADH + H+
CH2 - O- P

CH3

CH3

NADH+ + H - C - OH

NADH + H+ + C = O

COOH

COOH
nsumnd cele dou ecuaii:
CH = O

CH3

H - C - OH + Pa + C = O

H - C - OH + H - C -H

COOH

CH2 - OP

CH3

CHOOP

CH2 - OP

COOH

deci sistemul NADH/NAD+ poate transfera electroni de la un substrat la altul n virtutea

faptului c NADH are capacitatea de a aciona ca un intermediar comun pentru dou reacii piridin
dependente, fiecare catalizat de o dehidrogenaz specific.
Dehidrogenaze legate de flavin. Aceste enzime conin, strns legate grupri prostetice, fie
FMN, fie FAD. n reaciile catalizate de aceste enzime are loc transferul unei perechi de atomi de
hidrogen de la substrat pentru a genera formele reduse FMNH2 i FADH2.
SH2 + E-FMN

S + E-FMNH2

SH2 + E-FAD

S + E-FADH2
O

H3C

H
N

H3C

N
H

O
H3C

H3C

N
R

N
N

H
O

2H

H
O

Cele mai importante dehidrogenaze flavin dependente ntlnite n transportul de electroni

n procesul de respiraie mitocondrial sunt:
1. NADH dehidrogenaza, care conine FMN i catalizeaz transferul de electroni de la
NADH la urmtorul membru al lanului respirator;
2. Succinat dehidrogenaza, este activ n ciclul acizilor tricarboxilici;
3. Dihidrolipoil dehidrogenaza, un component al sistemului piruvat i -cetoglutarat
dehidrogenaz;
- Acil-CoA- dehidrogenaza, catalizeaz prima etap de dehidrogenare din oxidarea acizilor grai.
Dehidrogenazele flavin dependente difer semnificativ de cele piridin dependente, deoarece
flavin nucleotida este strns legat de molecula enzimei, funcionnd astfel ca o grupare
prostetic i nu ca i o coenzim. Flavin nucleotida nu prsete enzima n timpul sau dup
efectuarea ciclului catalitic.
Enzimele de oxidoreducere flavin dependente pot fi plasate n dou clase: dehidrogenaze i
oxidaze, n funcie de capacitatea lor de a reaciona ca acceptori de electroni. La flavin
dehidrogenaze de tipul NADH dehidrogenaz i succinat dehidrogenaz exist o tendin foarte
slab a reoxidrii formei reduse a flavin nucleotidei de ctre oxigenul molecular. Spre deosebire
de acestea, flavin oxidazele sunt reoxidate de oxigenul molecular cu formare de peroxid de
hidrogen, de exemplu, D-aminoacid oxidaza i xantin oxidaza.
94

n celule, acceptorul direct de electroni dintre hidrogenazele flavin dependente, pare s fie
ubiquinona din lanul transportor de electroni. Unele flavoproteine conin, pe lng flavin
nucleotid i metale (de ex. Fe i Mn), acetia fiind eseniali n pentru exprimarea activitii
catalitice. Flavoproteinele cu fier (de ex. succinat dehidrogenaza i NADH dehidrogenaza)
conin atomi de sulf reactivi. Atomii de fier n flavoproteinele cu fier i sulf sufer tranziia:
FeII

FeIII

i par s participe la transferul de electroni ctre i de la gruparea prostetic flavinic. Alte

enzime flavin dependente (de ex. xantin oxidaza i aldehid oxidaza) conin Fier i molibden.
Proteine cu fier i sulf.
Proteinele cu fier sulf conin fier i sulf liberabil cu acizi, n cantiti echimoleculare.
Prima protein fier sulf descoperit, feredoxina, a fost identificat ntr-o bacterie anaerob,
Clostridium pasteurianum, capabil s fixeze azotul atmosferic. Proteine asemntoare au fost apoi
descoperite n plantele superioare, unde ele se gsesc n cloroplaste i particip la transportul de
electroni al procesului de fotosintez. Proteine cu fier sulf au fost gsite i n microorganisme i n
esuturi animale, n mod special n mitocondrii. Grupri Fe S se gsesc n unele flavoproteine i se
numesc centri fier sulf. Aceste proteine par s funcioneze ca transportori de electroni suferind
tranziii reversibile Fe(II) Fe(III). n lanul mitocondrial de la NADH la oxigen, par s existe cel
puin apte centre de fier sulf diferite. Patru sunt localizate n complexul NADH-dehidrogenaza,
dou centre sunt asociate citocromului b i unul citocromului c1.
Citocromii
Citocromii sunt proteine transportoare de electroni care conin n molecula lor ca i grupri
prostetice fier porfirinic. Aceste structuri sunt prezente doar n celulele aerobe. Unii citocromi sunt
localizai n membrana mitocondrial intern, unde acioneaz secvenial pentru transportul de
electroni provenii de la diferite sisteme de oxido-reducere pn la oxigen molecular. Ali citocromi
joac un rol important n procesele specializate de hidroxilare. Toi citocromii sufer tranziii
reversibile de stare de oxidare Fe(II) Fe(III) n timpul secvenelor de transport de electroni.
Formele reduse de citocromi nu pot fi oxidate direct de ctre oxigenul molecular, cu excepia
citocromului terminal al respiraiei mitocondriale, i anume citocromul a3 sau citocrom c oxidaza,
care conine cupru ca i cofactor. n membrana mitocondriile animalelor superioare, au fost
identificai cel puin cinci citocromi diferii (cit. b, c1, c, a i a3.
Citocromii conin ca i grupare prostetic porfirinic protoporfirina. Dac protoporfirina
complexeaz ionul de F+2 rezult hemul iar dac complexeaz ionul Fe+3 rezult hemina.
CH=CH2
H3C

H3C

H
H

CH=CH2

H3C

CH3
CH=CH2

N
+2

Fe
N

CH3

H3C

CH3

CH2

CH2

CH2

CH2

CH2

CH2

CH2

CH2

COOH

COOH

COOH
COOH
protoporfirina IX

95

CH=CH2

CH3

hem

Se tie c ionul de fier are ase coordinaii. Datorit structurii plane a sistemului aromatic
porfirinic cei patru atomi de azot formeaz un ptrat iar ionul de fier se afl n centru, consumnd n
felul aceste patru coordinaii. Coordinaiile 5 i 6 se afl de o parte i de alta a planului ptratului pe
o perpendicular.
5
1

Fe
4N

N3
6

n mioglobin i hemoglobin, coordinaia a cincea este legat de gruparea imidazolic a

unui rest de histidin, iar poziia a asea este fie neocupat, fie ocupat cu O2. n aproape toi
citocromii (cu excepia citocromului a3, att poziia a cincea ct i poziia a asea de coordinare sunt
ocupate de gruprile R ale unor resturi specifice de aminoacizi. Deci citocromii pot lega liganzi ca
O2, CO sau CN-.
n funcionarea normal a hemoglobinei i a mioglobinei atomul de fier nu sufer schimbri ale
strii de oxidare, n timp ce oxigenul este desprins sau prins. La citocromi, ns, Atomul de fier
sufer trecerii reversibile ntre starea de oxidare Fe(II) i Fe(III). Deci, se constat c citocromii
servesc ca transportori de electroni, pe cnd hemoglobina i mioglobina acioneaz ca transportori
de liganzi.
Ubiquinona (Coenzima Q)
Ubiquinona este o coenzim liposolubil, care particip la transferul de electroni de la
substratele organice la oxigen, n lanul respirator din mitocondrie.
OH

O
CH3

H3CO

CH3

(CH2 - CH = C - CH2)n

H3CO
O

+ 2e-, + 2 H+
- 2 e-, - 2 H+

H3CO

CH3

H3CO

(CH2 - CH = C - CH2)n

CH3

OH

Aceast coenzim este o chinon reductibil, n mod reversibil i are o caten lateral
izoprenoid. Se cunosc mai multe ubiquinone, care difer numai prin lungimea catenei izoprenoide,
care are ase uniti de izopren n unele microorganisme i zece n mitocondriile esuturilor
animale. n esuturile vegetale, corespondentele ubiqinonei sunt plastochinonele, care ndeplinesc
funcii similare n transportul de electroni ai fotosintezei.
Calea transportului de electroni (lanul respirator)
Secvenele de reacii pe care le pargurg electronii de la NADH la oxigen molecular poart
numele de lan respirator. NADH este forma sub care electronii sunt colectai de la diferite
substrate, cu ajutorul dehidrogenazelor NAD-dependente.
96

Secvena de reacii, care are loc este:

NADH + H+ + FMN
FMNH2 2 Fe.S(III)

NAD+ + FMNH2
FMN + 2 Fe.S(II) + 2 H+
2 Fe.S(III) + QH2

2 Fe.S(II) + 2 H+ + Q
QH2 + 2 cit.b(III)
2 cit.b(II) + 2 cit.c(III)
2 cit.c(II) + 2 cit.a(III)
2 cit.a(II) + 2 cit.a3 (III)

Q + 2 H+ + 2 cit.b(II)
2 cit.b(III) + 2 cit..c(II)
2 cit.c(III) + 2 cit.a(II)
2 cit.a(III) + 2 cit.a3(II)
2 cit.a3(III) + H2O

2 cit.a3(II) + 1/2 O2 + 2 H+

Se constat c transportorii de electroni intermediari din lan, dinspre substrat ctre oxigenul
molecular, se gsesc n stare de echilibru aerob ntr-o succesiune de forme din ce n ce mai oxidate,
artnd c electronii se scurg de-a lungul unui gradient de la NADH la O2.
De asemenea, s-a constatat c exist inhibitori care blocheaz n mod specific transportorii
din lanul transportor de electroni. Exemple de astfel de inhibitori amintim: rotenona (substan
foarte toxic extras din plante), amitalul (medicament din clasa barbituricelor), antimicina (izolat
din Streptomiccs griseus), monoxidul de carbon, hidrogenul sulfurat i acidul cianhidric.
Schimburi de protoni n timpul transportului de electroni.
O alt proprietate a lanului transportului de electroni este aceea c ionii de hidrogen sunt
formai sau utilizai ntru-nele din reaciile secveniale ale transportului de electroni.
Unii dintre transportorii de electroni (NADH i ubiquinona) transport electroni ca atare i
nu preiau s-au cedeaz protoni. Aceste reacii unde se formeaz sau se absorb protoni au un rol
important n conservarea energiei transportului de electroni.
Energetica transportului de electroni.
n cursul trecerii unei perechi de electroni de-a lungul lanului respirator de la NADN la
oxigen se formeaz 3 ATP, n urma unui proces numit fosforilare oxidativ.
Pa + ADP

ATP + H2O

Cele trei puncte de formare a ATP n procesul de transport de electroni de la NADH la

oxigen sunt:
FP - Fe.S
cit.b
cit.a3

Q
cit.c
O2

1 ATP
1 ATP
1 ATP

Deci, se constat c eliberarea energiei are loc n trepte i sunt absorbii i eliberai numai la
unele dintre aceste etape, sugernd c schimburile de protoni sunt implicate n conservarea energiei.
Transhidrogenaze piridin-nucleotide
esuturile animale i microorganismele conin enzime ce catalizeaz reacia:
NADPH + N AD+
97

NADP+ + NADH

Aceast reacie permite utilizarea echivalenilor reductori ai NADH de ctre lanul respirator, care,
n mod normal, accept electroni de la NADH ca donor apropiat. Enzimele ce catalizeaz reacia
invers, ce permite reducerea NADP+ se numesc transhidrogenaze. Sensul reaciei de
trasnhidrogenare n mitocondria intact depinde de energia produs de transportul de electroni i
prezena ATP. Viteza reaciei de la NADPH la NAD+ este, de obicei, mai mare dect viteza reaciei
n sens invers. Tendina electronilor de a trece de la NADH la NADP+ cu formare NADPH apare
atunci cnd exist exces de ATP, iar NADPH-ul rezultat joac un rol nsemnat n procesele de
biosintez.
Utilizarea oxigenului de ctre oxigenaze.
Dei, cea mai mare parte an oxigenului molecular consumat de celulele aerobe este redus cu
formare de ap. Cantiti mici de oxigen sunt folosite n reacii enzimatice, n care unul sau ambii
atomi de oxigen din molecul sunt introdui direct pe substrate organice cu formare de grupri
hidroxil. Enzimele care catalizeaz astfel de reacii se numesc oxigenaze. i se mpart n dou
clase.:
-

dioxigenaze

monoxogenaze

Dioxigenazele catalizeaz introducerea ambilor atomi de oxigen ai moleculei O2 pe diferite

substrate organice, n timp ce monoxigenazele introduc numai unul.
Dioxigenazele numite i oxigen-transferaze, catalizeaz reacii de tipul:
AH2 + O2

A(OH)2

unde AH2 este molecula de substrat A(OH)2 forma hidroxilat.

Cele dou grupri hidroxil sunt introduse de obicei n poziii adiacente sau vicinale.
Produsul A(OH)2 este deseori instabil i are loc ruperea legturii C C ntre gruprile hidroxilice
vicinale. Un exemplu important este cazul triptofan-2,3-dihidroxilazei, enzim ce catalizeaz o
etap de degradare oxidativ a triptofanului. n aceast reacii doi atomi de oxigen sunt introdui n
ciclul de cinci atomi al triptofanului rezultnd un produs hidroxilat, care este apoi transformat n Lformilkinunerin.
NH2

CH2 - CH - COOH
N
H

NH2

CH2 - CH - COOH
OH

O2
dioxigenaza
triptofan oxigenaza

NH2

C - CH2 - CH - COOH
NH - CH = O
N-formil-L-kinuinerina

98

N
H

OH

Monooxigenazele sau hidroxilazele catalizeaz introducerea unui singur atom de oxigen din
molecula de oxigen pe un substrat organic, cellalt atom de oxigen fiind redus la ap.
Monoxigenazele necesit un al doilea substrat care s cedeze electroni pentru reducerea
pentru reducerea celui de-al doilea atom la ap. Din aceast cauz monooxigenazele mai sunt
numite i oxigenaze cu funciune mixt. Ecuaia general este:
AOH + H2O + X

AH + XH2 + O2

unde: AH - substratul ce va fi hidroxilat, XH2 - donorul de electroni, AOH substratul hidroxilat i

X donorul de electroni oxidat. Substratul care furnizeaz electroni pentru a reduce un atom de
oxigen la ap este NADH sau NADPH.
Cele mai multe monooxigenaze (din bacterii) sunt flavoproteine care conin FAD i
catalizeaz secvena de reacii:
NAD(P)+ + E-FADH2
E-FADH2 + AOH + H2O

NAD(P)H + E-FAD
E-FADH2 + AH + O2

unde E + enzima i AH + substratul.

De exemplu: fenilalanin hidroxilaza (enzim hepatic) sau fenilalanin-4-monooxigenaza
catalizeaz reacia de hidroxilare a fenilalaninei cu formare de tirozin. Ultimul donor de electroni
este NADPH, dar echivalenii reductori sunt transferai prin intermediul tetrahidrobiopterinei.
O2
HO

CH2 - CH - COOH
NH2

NADPH + H

CH2 - CH - COOH + H2O

NH2

Superoxid dismutaza i catalaza

n timpul transportului de electroni spre oxigenul molecular sau n diferite reacii de
hidroxilare i oxigenare, se pot forma produi toxici rezultai prin reducerea parial a oxigenului.
Cei mai importani produi toxici sunt O -2 (superoxid) i H2O2, care sunt extrem de reactivi i
capabili de a distruge activitatea biologic a unor macromolecule.
n celulele aerobe a fost pus n eviden o superoxid dismutaz, ce catalizeaz reacia:
2 O2- + 2 H+

H2O2 + O2

Peroxidul de hidrogen format este distrus de o hemoglobulin numit catalaz.

99

H2O2

H2O + 1/2 O2

Superoxid dismutaza se gsete sub dou forme una n citoplasma extramitocondial i alta
n mitocondrie. Aciunea superoxid dismutazei i catalazei este completat de acidul sorbic,
glutationul redus i vitamina E, care accept uor electroni, fiind eficieni pentru ndeprtarea
radicalului.

100

VI. METABOLISMUL GLUCIDIC

Generaliti.
Glucidele sau zaharurile sunt compui polihidroxicarbonilici (aldoze i cetoze). n funcie de
capacitatea de a hidroliza glucidele se pot clasifica n monozaharide (zaharuri simple
nehidrolizabile), oligozaharide (formate din 2 10 resturi de monozaharide, legate prin intermediul
legturilor glicozidice i care prin hidroliz elibereaz monozaharidele constituente) i polizaharide
(formate din lanuri lungi, liniare sau ramificate de monozaharide, ce pot fi eliberate prin hidroliz.
O categorie aparte o constituie glucidele conjugate glicoproteinele, glicolipidele (care prin
hidroliz pun n libertate pe lng componenta glucidic i o component neglucidic numit
aglicon).
Rolul glucidelor n organism.
Glucidele ndeplinesc n organism funcii variate.
a. Glucidele sunt surse nemijlocite de energie. Astfel n toate organismele vii, sursa imediat
de energie o constituie oxidarea glucozei. De exemplu, celulele nervoase sunt dependente de
glucoz ca i surs de energie.
b. Glucidele au rol de substane de rezerv. n organismele animale superioare i ale omului,
glucoza poate constitui depozite de energie sub form de glicogen hepatic i muscular. La plante,
substana major de rezerv glucidic este amidonul.
c. Glucidele ndeplinesc roluri de substane structurale i de susinere. La animale,
polizaharidele intr n structura esuturilor conective ale matricei osoase.
d. Glucidele sunt substane cu funcii specifice. Mucopolizaharidele intr n structura
substanelor de grup sangvin, particip la procesele imunitare, intr n structura heparinei, substan
cu aciune anticoagulant.
Digestia i absorbia glucidelor.
n organismul animal, glucidele pot fi de origine exogen, introduse n organism sub form
de alimente sau de origine endogen, rezultate n urma unor procese de biogenez. Cea mai mare
parte din glucidele din organismul animalelor superioare i al omului este de origine exogen.
Glucidele alimentare pot fi, la rndul lor, de natur vegetal sau animal. principala glucid de
origine animal este glicogenul, ns cea mai mare parte a glucidelor alimentare const din amidon,
glucid de origine vegetal, mai ales sub form de pine.
n cantiti mai mici alimentele mai conin dizaharide ca zaharoza, lactoza, maltoza sau
monozaharide ca glucoza sau fructoza.
Pentru a putea fi utilizate de ctre organism, glucidele alimentare sunt n prealabil unui
proces de digestie, urmat de un proces de absorbie. Digestia polizaharidelor ncepe n cavitatea
bucal sub aciunea amilazei salivare, care este o enzim hidrolitic secretat de glandele salivare.
Sub aciunea acestei enzime, amidonul alimentar este hidrolizat sub form cu formare de dextrine,
eventual maltoz. Aciunea acestei enzime este limitat timpul de contact pentru c alimentele
rmn n gur un timp relativ scurt.
n continuare, la nivelul stomacului sub aciunea sucului gastric asupra bolului alimentar, amilaza
salivar este inactivat de aciditatea sucului gastric.
La nivelul intestinului, glucidele alimentare sunt hidrolizate sub aciunea enzimelor
pancreatice i a celor intestinale. Astfel, amilaza pancreatic acioneaz asupra amidonului i a
glicogenului alimentar, pe care le hidrolizeaz cu formare intermediar de dextrine, pn la stadiul
de maltoz. Asupra maltozei, precum i asupra altor dizaharide, acioneaz enzime coninute n
sucul gastric.
O serie de polizaharide, cum ar fi celuloza, nu sunt transformate n tubul digestiv al omului, care nu
conine enzimele necesare acestor procese. Aceti compui trec, ca atare, n intestinul gros, unde
101

sunt degradai n mic msur sub aciunea florei intestinale i sunt apoi eliminai prin fecale.
Aadar, aceste polizaharide nu au rol n nutriie, cu sunt utile pentru digestie, deoarece regleaz
peristaltismul intestinal.
Ca rezultat al digestiei zaharurilor, n intestinul subire rezult o serie de monozaharide,
printre care predomin glucoza, galactoza, fructoza, manoza precum i unele pentoze.
Absorbia glucidelor are loc la nivelul intestinului subire sub form de monozaharide.
Viteza de absorbie depinde de mai mui factori, printre care regiunea i starea de funcionare a
intestinului, prezena unor anumite coenzime (tiamin, acid pantotenic) i hormoni (tiroxin).
Absorbia monozaharidelor se pate face prin mecanisme fizice sau prin mecanisme
biochimice. Monozaharidele provenite din absorbia intestinal ajung prin vena port la ficat, unde
pot fi temporar depozitate sub form de glicogen, apoi trec n circulaia general ajungnd pe calea
sangvin n toate celulele diferitelor organe i esuturi.
n celule, glucidele pot suferi diferite transformri, care pot fi anabolice (n cadrul crora au
loc sinteze de glucide din ali compui glucidici i neglucidici) i catabolice (n cadrul crora
moleculele glucidice sunt degradate cu eliberare de energie).
Catabolismul glucidic
Glucidele care servesc cel mai frecvent substrate al transformrilor catabolice la animale,
plante i microorganisme este glucoza
Figura nr.24
Schema metabolizrii glucozei
4

1
2

CO2 2a
acetil-CoA

G-6-P

oze (3-7c) + NADPH + H+

piruvat

G-1-P
2c

lactat + energie

2CO2

glicogen

acid glucuronic

reactii de conjugare vitamina C

CAT
2b

lant respirator

H2O + energie

1 - fosforilarea glucozei, 2 glicoliza, 2a decarboxilarea oxidativ a piruvatului, 2b ciclul

Krebs i lanul respirator, 2c, 3, 4 gluconeogeneza, 5 calea pentozofosfatului, 6 calea de
interconversie n cei doi esteri ai glucozei, 7 gliconeogeneza, 9 glicogenoliza.
Ficatul utilizeaz glucoza astfel:
- o parte o utilizeaz pentru necesiti proprii;
- o parte o depoziteaz sub form de glicogen;
102

- cea mai mare parte este repus n circulaie pentru a servi altor esuturi.
Glucoza i fructoza sunt transformate n ficat n glucoz, care reprezint forma principal de
utilizare de ctre organismul animal.
n ficat:
25% din glucoz se transform pe calea 2;
2% din glucoz se transform pe calea 5;
18% din glucoz se transform pe calea 8;
55% din glucoz este repus n circulaie graie cii nr. 4, catalizat de ctre glucozo-6fosfataz. Aceast cale este prezent n rinichi, intestin, lipsete din muchi, creier, esut adipos.
Eritrocitele folosesc
90% din glucoz pe calea 2;
10% din glucoz pe calea 5.
Creierul
Nu face depozit de glicogen;
Cnd nu primete glucoz pe cale sangvin rmne fr substrat glucidic, astfel c n caz de
hipoglicemie, se ajunge uor la lipotimie.
Calea nr. 1
-

G + ATP

cale obligatorie pentru intrarea glucozei n transformri metabolice.

Mg+2
glucokinaza
hexokinaza

G-6-P + ADP

procesul de fosforilare este endergo-dependent ireversibil;

procesul are loc cu scderea entalpiei libere;

enzime: glucokinaza (enzim specific)

hexokinaza (enzim nespecific).

Ambele enzime au rol cheie n metabolismul glucozei.

103

Glicoliza
Calea nr. 2 ciclul Embden Meyerhof Parnas (glicoliza)
-

procesul de degradare a glucozei pn la piruvat sau lactat;

procesul are loc cu producere de energie;

se desfoar n faza solubil a celulei (citoplasm), deoarece acolo se gsete ntregul

set de enzime necesare desfurrii procesului.

Etapele glicolizei
I degradarea glucozei pn la trioze (proces consumator de energie);
II descompunerea glicerinaldehid-3-fosfatului pn la piruvat (proces n care se produce energie)
I.
CH2OH
O
OH

OH

OH

HO

CH2OP
O

glucokinaza

OH

CH2OP

CH2OH

O
HO

OH

HO

ADP

ATP

glucozo-6-fosfat
izomeraza

OH

OH

OH
CH2-O-P
C=O

fosfofructo
kinaza

CH2OP

CH2OH

CH2OP

O
HO

fosfotriozo
izomeraza

OH

CH=O

OH

HC-OH
CH2OP

II.
O
CH=O
H-C-OH
CH2OP

NADH + H

CH2OH

fosfogliceroil
kinaza
ADP

CH2OP

COOH
H-C-OH
CH2OP

ATP

COOH

COOH

COOH
H-C-OP

H-C-OH
+

NAD

fosfoglicerat
mutaza

104

C-O

glicerinaldehid-3-fosfat
dehidrogenaza

enolaza
H2O

C-O P
CH2

piruvat kinaza

ADP

ATP

C-OH
CH2

COOH

COOH
lactat dehidrogenaza

C=O
CH3

H - C - OH
CH3

NADH + H+

NAD+

Importana glicolizei
- glicoliza este o etap obligatorie n procesul de degradare a glucozei, ca substrat energetic pn la
dioxid de carbon i ap;
- este cea mai important cale sub aspect cantitativ de degradare a glucozei;
Bilanul energetic al glicolizei
I

- consum

2 ATP

(reaciile 1 i 3)

II

- ctig

4 ATP

(reaciile 7 i 10)

2 ATP
Glicoliza este:
-

un proces metabolic cu bilan exergonic;

o important surs de energie att pentru esuturile ce lucreaz anaerob, ct i pentru cele
ce lucreaz aerob.

Fermentaia alcoolic
Unele microorganisme (drojdia de bere) au capacitatea de a transforma glucoza n etanol cu
eliberare de dioxid de carbon. Procesul se numete fermentaie alcoolic, i are un mers asemntor
cu glicoliza pn la formare de acid piruvic. De aici, fermentaia alcoolic i are mersul su
caracteristic.
Astfel, ntr-o prim etap, acidul piruvic este decarboxilat, sub aciunea piruvat
decarboxilazei.

H3C - CO - COOH

piruvat
decarboxilaza
(TPP, Mg +2)

H3C - CH=O + CO2

Acetaldehida rezultat este redus la alcool etilic, sub aciunea alcool dehidogenazei, care necesit
prezena coenzimei NADH.

H3C - CH=O + NADH + H

alcool
dehidrogenaza

H3C - CH2 - OH + NAD+

Ecuaia global este:

glucoza + 2 Pa + 2 ADP
105

2 CH3-CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP + 2 H2O

Procesul prezint importan industrial deosebit, deoarece st la baza fabricrii buturilor

alcoolice de fermentaie.
n fermentaia acetic, acetaldehida sub aciunea alcool dehidrogenazei, care are ca i
coenzim NAD+, se transform n acid acetic.
H3C - CH=O + H2O
NAD+

106

H3C - COOH
NADH + H+

Calea pentozofosfatic

O alt cale de degradare a glucozei n celulele organismului uman este reprezentat de calea
pentozofosfat sau untul pentozofosfat. Aceast cale se realizeaz n poriunea solubil a
citoplasmei extramitocondriale din celulele animale. n procesul de degradare a glucozei pe aceast
cale se pot distinge dou etape:
d) oxidativ (obinerea de pentoze din hexoze);
di) calea ce permite interconversia dintre diferite glucide.
1. Etapa oxidativ
CH2OP
O
HO

OH

CH2OP
O
OH

OH

HO
NADH+H+

NAD

OH
OH

n aceast reacie glucozo-6-fosfatul se oxideaz sub aciunea glucozo-6-fosfat

dehidrogenazei (GDPH) formnd 6-fosfogluconolacton. GPDH are drept coenzim NADP+ care
funcioneaz ca i acceptor de electroni i hidrogen. n continuare 6-fosfogluconolactona,
hidrolizeaz spontan sau sub influena unei lactonaze formeaz acid 6-fosfogluconic.
COOH
CH2OP
O
HO

H-C-OH

H2O

HO-C-H

OH

H-C-OH
H-C-OH

OH

CH2-O-PO3H2
n etapa urmtoare, catalizat de 6-fosfogluconat dehidrogenaz (PGDH) are loc
concomitent o oxidare i o decarboxilare. Enzimele utilizeaz NADP ca i coenzim.

COOH

COOH

H-C-OH

H-C-OH

HO-C-H

CH2-O-PO3H2

107

C=O

O=C

H-C-OH
H-C-OH

CH2-OH

H-C-OH
+

NADP

NADPH+H

H-C-OH
CH2-O-PO3H2

- CO2

H-C-OH
H-C-OH
CH2-O-PO3H2

Sub aciunea unei izomeraze, ribulozo-5-fosfatul se izomeraz la nitrozo-5-fosfat.

CH2-OH
C=O
H-C-OH

CH=O
H-C-OH

ribulozo-5-fosfat
izomeraza

H-C-OH

H-C-OH

H-C-OH

CH2-O-PO3H2

CH2-O-PO3H2

n unele cazuri procesul se poate opri aici, din oxidarea glucozo-6-fosfatului rezult dioxid
de carbon, NADH+H+ ce intr n reaciile de biosintez, care au loc n citoplasma
extramitocondrial i D-ribozo-5-fosfat, care este un precursor n sinteza nucleotidelor.
Ecuaia global este:
Ribozo-5-fosfat + CO 2 + 2 NADPH + H+

G-6-P + 2 NADP+

n alte cazuri, ins, pentozele rezultate pot fi din nou convertite n hexoze, n cadrul unei
secvene de reacii de sine stttoare.
n etapa anterioar din glucozo-6-fosfat a rezultat ribulozo-5-fosfat, care sub aciunea unei
izomeraze se transform n ribozo-5-fosfat, iar sub aciunea unei epimeraze se transform n
xilulozo-5-fosfat.
CH=O
H-C-OH
t
sfa

CH2-OH

-fo
o-5 za
z
o
ul era
rib izom

H-C-OH
H-C-OH
CH2-O-PO3H2
ribozo-5-fosfat

C=O
H-C-OH
H-C-OH
CH2-O-PO3H2
ribulozo-5-fosfat

rib
ulo
epi zo-5
me -fo
raz sfa
t
a

CH2-OH
C=O

HO-C-H
H-C-OH
CH2-O-PO3H2
xilulozo-5-fosfat
108

Aceste transformri sunt reversibile, iar echilibrul se stabilete n urmtoarele rapoarte

cantitative. 35% ribulozo-5-fosfat, 25% ribozo-5-fosfat i 40% xilulozo-5-fosfat.
n etapa urmtoare, sub aciunea transcetolazei are loc transferul unei grupri
glicolaldehidice de la xilulozo-5-fosfat la ribozo-5-fosfat. Reacia necesit prezena TPP ca i
coenzim i ioni de magneziu, iar produsul care rezult este o heptoz, seduheptulozo-7-fosfat i o
trioz.
CH2-OH
CH=O

CH2-OH

H-C-OH

C=O

H-C-OH
H-C-OH

H-C-OH

C=O
transcetolaza

H-C-OH

CH2-O-PO3H2
ribozo-5-fosfat

CH=O

HO-C-H
H-C-OH

H-C-OH
CH2-O-PO3H2
glicerinaldehid-3-fosfat

H-C-OH

CH2-O-PO3H2
ribulozo-5-fosfat

H-C-OH

CH2-O-PO3H2
seduheptulozo-5-fosfat

n continuare n prezena unei transaldolaze, are loc transferul unei grupri de

dihidroxiaceton la seduheptulozo-7-fosfat la glicerinaldehid-3-fosfat. Din reacie rezult o prim
molecul de hexoz i anume fructozo-6-fosfatul, precum i o molecul de eritrozo-4-fosfat.
Fructozo-6-fosfatul este un produs ce face legtura cu secvena glicolitic.
CH2-OH

CH2-OH

C=O

C=O

HO-C-H
H-C-OH
H-C-OH
H-C-OH

CH=O

H-C-OH
CH2-O-PO3H2
glicerinaldehid-3-fosfat

CH2-O-PO3H2
seduheptulozo-7-fosfat

transaldolaza

HO-C-H

CH=O
H-C-OH

H-C-OH
H-C-OH

H-C-OH
CH2-O-PO3H2
eritrozo-4-fosfat

CH2-O-PO3H2
fructozo-6-fosfat

Produii rezultai sunt tot intermediari ai secvenei glicolitice. Enzimele cheie ale acestei ci
sunt glucozo-6-fosfat dehidrogenaza i 6-fosfogluconat dehidrogenaze.
Importana metabolic a ciclului pentozofosfat
Metabolizarea glucozei pe calea pentozofosfat nu constituie propriu-zis o form de
degradare sau de oxidare a glucozei. Calea pentozofosfat nu este cuplat cu lanul respirator, ci n
cadrul ei, nu se formeaz ATP, ci se consum pentru activarea glucozei la glucozo-6-fosfat.
Importana sa metabolic o constituie faptul c diveri produi ai secvenei metabolice sau
intermediarii cii pentozofosfat sunt implicai n procese de biosintez a unor compui de
importan biologic major. NADPH + H+ este un furnizor de hidrogen i de electroni n procesele
de sintez a acizilor grai, a compuilor steroidici. Diferitele tetroze, pentoze, hexoze i heptoze
rezultate sunt implicate n biosinteza monozaharidelor i a acizilor nucleici.
109

Transformarea glucozei pe calea pentozofosfat constituie un mecanism tipic amfibolic de

metabolizare. Diferitele etape ale acestei secvene metabolice au loc n faza solubil a citoplasmei i
toate enzimele care particip la aceste reacii au fost izolate n stare pur. Ciclul pentozofosfat este
avantajos pentru economia celular i prin faptul c necesit echipament enzimatic relativ redus, de
unde i denumirea de unt pentozofosfat.
Patologia cii pentozofosfat
Glucozo-6-fosfat dehidrogenaza este o enzim ce prezint proprietatea de polimorfism
genetic. Aceasta nseamn c exist numeroase variante genetice ale acestei enzime, ca urmare a
unor mutaii genetice.
Aceast enzim este un exemplu tipic de enzimopatie farmacogenetic, deoarece se
manifest condiionat de administrarea unor medicamente i numai la indivizi cu variaii genetice
ale enzimei.
Exemple de medicamente ce pot provoca apariia de enzimopatii sunt antimalaricele
(chimina), sulfamidele, nitrofurantoina, vitamina K, aspirina. Posesorii de o astfel de enzimopatie
nu prezint suferine pn cnd nu inger un astfel de medicament, cnd se produce hemoliz,
anemie hemolitic i methemoglobinurie.
Aceste medicamente cresc potenialul oxidativ al celulei i enzima nu mai face fa.

110

Degradarea glucozei pe calea acizilor uronici

Pe lng celelalte ci de degradare a glucozei n organismele animale i la plantele
superioare s-a observat i o alt cale, care implic oxidarea glucozei la acid glucuronic.
Aceast cale este important din punct de vedere metabolic deoarece:
1. Furnizeaz acid glucuronic, care este utilizat n procesele de detoxificare hepatic prin
conjugarea sa cu fenoli, bilirubin, cu diveri hormoni, cu unele medicamente sau produii lor de
oxidare. Aceast conjugare are ca i consecin scderea toxicitii acestor compui i mrirea
solubilitii lor, ceea ce faciliteaz excreia renal.
2. acidul glucuronic prezint i o importan structural, deoarece intr n structura
mucopolizaharidelor.
3. Att n plantele superioare ct i n organismele animale (cu excepia omului, a primatelor
i a cobailor), acidul glucuronic constituie o etap intermediar n biosinteza acidului ascorbic din
glucoz.
Formarea acidului glucuronic n organismele umane parcurge mai multe etape.
1. Glucozo-1-fosfatul rezultat din glicogen prin foforoliz sau din izomerizarea glucozo-6fosfatului i se activeaz prin cuplare cu UTP, cu formare de UDP-glucoz.
O
H
O

CH2OH
O
HO

+ P P P - O - H2C

OH
OPO3H2
OH

N
UDP-glucozo-pirofosforilaza
pp

OH OH

O
H
CH2OH
O
HO

OH

OH

OH

OH

O - P - O - P - O - P - O - H2C
OH O
O
O

OH

OH

UDP-glucoza

n etapa urmtoare UDP-glucoza se oxideaz n prezen de UDP-glucozo dehidrogenaz cu

formare de acid UDP-glucuronic.
111

O
H
CH2OH
O
HO

OH

OH

OH

OH

N
UDP-glucozopirofosfataza

O - P - O - P - O - P - O - H2C
OH O

PP
OH OH

O
H
COOH
O
HO

OH

OH

OH

OH

O - P - O - P - O - P - O - H2C
OH O
O
O

OH

OH

acid UDP-glucuronic

Acidul UDP-glucuronic poate elibera i UTP prin hidroliz sau poate intra direct n reacii
de conjugare.

O
H
CH2OH
O
HO

OH

OH

OH

OH

O - P - O - P - O - P - O - H2C
OH O
O
O

UDP-glucozodehidrogenaza

2 NAD+

OH OH

O
H
COOH
O
HO

OH

OH

OH

OH

O - P - O - P - O - P - O - H2C
OH O
O
O

OH

112

OH

2NADH + 2H+

acid UDP-glucuronic

Acidul UDP-glucuronic poate elibera acidul glucuronic i UTP prin hidroliz sau poate intra
direct n reacii de glucuronoconjugare.
reactii de
conjugare
acid UDP glucuronic

vitamina C
alicozaminoglicani
(gliciproteine)

Transformarea acidului UDP-glucuronic pe calea 7a, reprezint o cale de detoxifiere a

organismului. Aceast cale se desfoar n esutul hepatic i renal, viznd, n primul rnd, compuii
toxici de origine exogen sau produi rezultai n urma metabolismului normal. n urma acestui
proces se formeaz glicuronide, compui solubili i uor de eliminat, prin care se neutralizeaz
efectul toxic al unor metabolii ( de exemplu, compui fenolici, carboxilici, aminici etc.)
UDP-glucuronic

R-OH

glucuronat transferaza

R-O-glucunoril

UDP

La om, la maimue i la cobai, acidul glucuronic rezultat prin hidroliza acidului UDPglicuronic se oxideaz la acid gulonic, cu formare final de xiluloz i dioxid de carbon (7c).
H H OH H
acid UDP-glucuronic

H2

HOOC - C - C - C - C - CH=O
UDP

HO OH H OH
acid glucuronic

H H OH H

CO2

HOH2C - C - C - C - CH2OH

HOOC - C - C - C - C - CH2OH
HO OH H OH
acid gulonic

113

OH H

H2

O H OH
L-xiluloza

L-xiluloza trece n D-xiluloz, care intr intr n calea pentozofosfat. Prezena xilulozei n
cantitate mic n urina omului sntos i n cantiti mari la bolnavii suferinzi de pentozurie
carenial, dovedete posibilitatea acestei ci de degradare a acidului glucuronic.
La plantele superioare i la majoritatea animalelor, acidul glucuronic trece n acid ascorbic
(7b).

CH=O
H - C - OH
HO - C - H

C - CH=O

H - C - OH

OH

H - C - OH

H2O

H2

glucuronolactona

COOH

OH OH

H
O

C - CH2OH

gulonolactona

C - CH2OH
OH

OH
OH OH

H2

OH OH
acid ascorbic

Deficiena genetic, care nu permite sinteza acidului ascorbic la om, primate i cobai, const
n absena enzimei L-gulonolacton oxidaz, care catalizeaz etapa final abiosintezei de acid
ascorbic.

114

Gluconeogeneza
Procesele de catabolizare a glucidelor n celule se desfar concomitent cu cele de
biosintez. Astfel, dei majoritatea proceselor metabolice sunt procese reversibile, calea de
biosintez a unei molecule nu reprezint o simpl inversare a cii de degradare. n cadrul fiecrui
proces metabolic trebuie s existe cel puin o verig prin care anabolismul s se diferenieze de
catabolism. Aceste verigi constituie, n general, tocmai punctele de control al cii metabolice
respective.
Cile anabolice prezint o anumit independen n raport cu cele catabolice, ele
desfurndu-se adesea n compartimente celulare diferite.
Cuplarea proceselor catabolice cu cele anabolice este realizat frecvent prin intermediul
ATP-ului, transportor al energiei eliberate n cursul catabolismului i totodat furnizor al energiei
necesare n procesele de biosintez.
n cadrul anabolismului glucidic, formarea glucozo-6-fosfatului constituie etapa nodal.
Glucozo-6-fosfatul se poate forma pe mai multe ci:
1. prin fotosintez (procesul se ntlnete n organismele autotrofe);
2. prin conversia acidului lactic, respectiv a acidului piruvic n glucoz;
3. prin gluconeogenez din intermediari ai ciclului acizilor tricarboxilici;
4. prin gluconeogenez din aminoacizi;
5. prin interconversia altor hexoze n glucozo-6-fosfat.
Gluconeogeneza este procesul de resintez a glucozei din material neglucidic. Este procesul
ce contribuie la satisfacerea necesarului de glucoz a esuturilor ntre mese sau atunci cnd aportul
alimentar de glucoz este insuficient. Procesul poate avea loc plecnd de la lactat sau piruvat prin
inversarea etapelor glicolizei cu intercalarea anumitor etape unidirecionale, care sunt soluionate
prin alte secvene de reacii, cu participarea altor enzime. Acestea se numesc ci de ocolire i sunt:
-

formarea fosfoenol piruvatului din piruvat;

transformarea fructozo-1,6-difosfatului n fructozo-6-fosfat;

transformarea glucozo-6-fosfatului n glucoz

Formarea fosfoenolpiruvatului. Trecerea fosfoenol piruvatului n piruvat sub aciunea

piruvatkinazei este un proces care decurge cu o scdere apreciabil a energiei libere, ceea ce face ca
reversibilitatea acestei reacii s fie extrem de redus. Din aceast cauz, fosforilarea piruvatului la
fosfoenol piruvat, care pe cale direct ar fi puternic endergonic, decurge pe o cale deviat, care
implic participarea att a unor enzime din citoplasm ct i din mitocondrii. Astfel ntr-o prim
etap piruvatul este carboxilat n mitocondrii cu formare de oxalilacetat. Reacia necesit
participarea ATP-ului, ca donor de energie i prezena acetil CoA, ca modulator de reacie.
COOH

CH3
C = O + CO2 + ATP
COOH

CH2
C=O

+ ADP + Pa

COOH
Acidul oxalilacetic rezultat este apoi redus la malat, tot n mitocondrii, sub aciunea NADH.

115

COOH

COOH
CH2
C=O

CH2

+ NADH + H+

CHOH

+ NAD+

COOH

COOH

Acidul malic difuzeaz din mitocondrie n citoplasm unde este reoxidat la acid oxalil
acetic, sub aciunea malat dehidrogenazei.
COOH

COOH
CH2
CHOH

CH2

+ NAD+

+ NADH + H+

C=O
COOH

COOH

Acidul oxalilacetic sub aciunea fosfoenolpiruvat dehidrogenazei li cu participarea GTP ca

donor de energie se decarboxileaz i se fosforileaz concomitent formnd fosfoenol piruvat.
COOH
CH2
C=O

CH2
+ GTP

Mg

+2

C-O

PO3H2 + GDP + CO2

COOH

COOH

Ecuaia global a procesului este:

CH3

CH2

C = O + ATP + GTP

C - O PO3H2 + GDP + ADP + Pa

COOH

COOH

Deci, pentru fosforilarea enolpiruvatului la fosfoenolpiruvat a fost necesar energia unei

molecule de ATP i una de GTP. n continuare fosfoenolpiruvatul format, se transform prin
inversarea reaciilor glicolitice pn la stadiul de fructizo-1,6-difosfat.
Hidroliza fructozo-1,6-difosafatului este a doua reacie din cursul biosintezei glucozei care
are un mecanism propriu i nu const dintr-o inversare a reaciei din cadrul glicolizei.

Fructozo-1,6-difosfat + H2O

fructozofosfataza

Fructozo-6-fosfat + Pa

n etapa urmtoare fructozo-6-fosfatul sub aciunea izomerazei este transformat n glucozo6-fosfat.

116

Fructozo-6-fosfat

Glucozo-6-fosfat

Glucozo-6-fosfatul este un compus cheie n cadrul metabolismului glucidic, deoarece el

constituie compusul iniial pentru multiple transformri anabolice i catabolice ale glucozei. n
vederea biosintezei glucozei libere, glucozo-6-fosfatul hidrolizeaz n baza unui mecanism propriu
i nu prin inversarea procesului de formare.
Hidroliza glucozo-6-fosfatului. n secvena glicolitic, glucozo-6-fosfatul se formeaz prin
fosforilarea direct a glucozei de ctre ATP i n prezena hexokinazei. Reacia invers este
endergonic i puin probabil.
Formarea glucozei libere se realizeaz prin hidroliza glucozo-6-fosfatului sub aciunea
glucozo-6-fosfatazei

Glucozo-6-fosfat + H2O

glucozo-6-fosfataza

Glucoza + Pa

Aceast enzim este repartizat selectiv n RE din ficat i rinichi. Este o enzim cu funcii
multiple poate cataliza i hidroliza pirofosfatului sau biosinteza glucozo-6-fosfatului din glucoz i
pirofosfat.
n acest caz glucozo-6-fosfatul nu se gsete n muchi i creier, care nu au capacitatea de a
forma glucoza liber.
Organismul poate s produc glucide i din ali precursori (intermediari ai ciclului acizilor
tricarboxilici, amino acizi etc).
n procesul de gluconeogenez exist patru enzime ce constituie puncte de control a acestei
ci: piruvat carboxilaza, fosfoenolpiruvat carboxilaza, fructozodifosfataza i glucozo-6 fosfataza, de
fapt sunt enzimele care catalizeaz etapele de ocolire din procesul de gluconeogenez.
Gluconeogeneza este un proces endergonic ce se desfoar n ficat, rinichi i mai puin n
alte esuturi. Dac n proces se pleac de la lactat i piruvat se consum ase molecule de ATP
pentru o molecul de glucoz.

117

Metabolismul glicogenului
Glicogenul reprezint forma major de stocare (uor disponibil) a excesului de glucoz n
organismul animal. La acest form se face apel n faza catabolic a metabolismului.
Glicogenul este un polimer ramificat alctuit din -D-glucoz, legate majoritar prin prin
legturi 1-4 glicozidice i cu o frecven de cca 10 uniti legturi 1-6 glicozidice, care for crea
punste de ramificare.

CH2OH
O
OH

CH2OH
O
O

OH

OH

CH2OH
O
O

OH

OH

O
OH
HO

CH2

OH

O
OH

Glicogenul este localizat n ficat (cca 60%) i n muchi ( 1%). Cantitatea de glicogen
depozitat n ficat este mai mic dect cea din muchi, deoarece masa muscular este mai mare
dect masa ficatului. Glicogenul va fi folosit n scopuri diferite n funcie de locul de depozitare.
Gliconeogeneza i glicogenoliza, ca i alte ci metabolice decurg decur distinct i se
conformeaz principiului general al dualitii reglrii, ceea ce asigur funcionarea lor nesincron.
Glicogenoliza reprezint procesul de degradare a glicogenului, care presupune desfacerea
legturilor 1-4 i 1-6-glicozidice din structura acestuia. Procesul se desfoar sub aciunea
conjugat a dou enzime specifice.
Prima etap (limitant de vitez) este o fosforoliz adic transferul unui rest glucozil, de la
captul nereductor al polizaharidei pe o molecul de acid fosforic (fosforoliz). n urma
transferului rezult glucozo-1-fosfat i glicogen cu o unitate de glucoz mai puin.

glicogen (n+1) + P

fosforilaza

glucozo-1-fosfat + glicogen (n)

Fosforilaza sau 1-4 glucozil-fosfo-glicozil transferaza este o enzim specific care

acioneaz asupra legturii glicozidice 1-4.
Aciunea acestei enzime nceteaz la o distan de patru uniti de glucoz fa de punctul de
ramificare. Aici intr n aciune enzima de deramificare, care ndeplinete dou roluri: desprinde un
rest de trei uniti de glucoz (rest trizaharidic) pe care-l va transfera pe lanul nvecinat.

118

enzima de
deramificare

enzima de
deramificare

Enzima de deramificare funcioneaz ca o transferaz. n apropierea punctului de ramificare mai

existp o singur unitate de glucoz. Aceeai enzim de deramificare, dar cu activitate 1-6
glicozidic va desface i acest ultim rest de glucoz.
Glucozo-1-fosfatul rezultat n urma procesului de fosaforoliz se va transforma n glucozo6-fosfat, care n ficat, sub aciunea glucozo-6-fosfatazei trece n glucoz, care trece n snge i va
servi ca surs de energie prin trecere prin secvena glicolitic.
n muchi nu exist glucozo-6-fosfataz, astfel c glucozo-6-fosfatul va trece direct n
glicogenoliz (glicogenul muscular nu poate funciona direct ca surs de glucoz sanguin).Totui,
metabolismul esutului muscular poate contribui la glucoz sanguin indirect, prin aceea c lactatul
produs n muchi poate fi convertit la glucoz n ficat. Aceat secven de reacii prin care poart
numele de ciclul lui Cori.
Deci, degradarea glicogenului la glucoz implic 4 reacii catalizate de 4 enzime:
-

fosforilaza, care hidrolizeaz legturile -1,4

enzima de deramificare, care ndeprteaz ramificaiile cu legturi -1,6

fosfoglucomutaza, care convertete G 1P n G 6P

glucozo-6 fosfataza, care convertete G 6P n glucoz.

Gliconeogeneza reprezint etapa de formare a glicogenului din resturi de glucoz i

glicogen cu uniti mai puine de glucoz (primer).
n procesul de formare a glicogenului din glucoz, mai nti glucoza este transformat n glucozo-6
fosfat, din care apoi se formeaz glucozo-1 fosfat. Glucozo-1 fosfatul reacioneaz cu UTP pentru a
forma UDP-glucoza. UDP-glucoza reacioneaz cu o molecul iniial de glicogen preexistent din
metabolismul glicogenului, denumit iniiator (primer) pe care vor fi transferate una cte una uniti
de glucoz de pe forma activat a aceasteia.
La nceput se formeaz legturile 1-4--glicozidice sub aciunea glicogen sintetazei (rol reglator).
Se pornete de la o molecul iniial de glicogen preexistent din metabolismul glicogenului,
denumit iniiator (primer), pe care vor fi transferate una cte una uniti de glucoz de pe forma
activ a acestuia.
UDP

glicogen (n) + UDP-glucoza

(primer)
GS

glicogen (n+1)

Reacia decurge n acest fel pn se leag cel puin 11 resturi de glucoz. Dup aceast faz
intervine enzima de ramificare, care creiaz legturi 1-6 glicozidice. Aceast enzim desprinde un
119

rest de ase uniti de glucoz i l transfer pe un lan nvecinat cu apariia unui punct de
ramificare. Aciunea combinat a moleculei primer de glicogen, a glicogensintetazei i a enzimei de
ramificare duce la formarea moleculei de glicogen.

enzima de
ramificare

Deci, secvena de reacii din biosinteza glicogenului cuprinde urmtoarele etape:

-

legarea a aproximativ 8 resturi de glucoz la molecula primer de glicogen

creterea catenei -1,4 sub aciunea glicogen-sintetazei

formarea legturilor -1,6 de ctre enzima de ramificare

creterea ulterioar a catenelor -1,4 de ctreglicogen-sintetaza

repetarea etapelor 3 i 4.

Reglarea i controlul metabolismului glicogenului

Reglarea glicogenolizei
-

afecteaz n mod special fosforilaza, aceast enzim este supus unui control metabolic
variat i complex realizat att prin modificri de covalen ct i allosterice.

Sistemul fosforilaz este alctuit din mai multe enzime:

- fosforilaza b (form inactiv)
- fosforilaza a (forma activ)
- alte dou fosforilaze
- bosforilaz-b-kinaza (transform forma inactiv b n forma activ a)
- fosforilaz-b-fosfataza (catalizeaz reacia invers)

120

epinefrina
adenilat
ciclaza

insulina

glicogensintetaza
fosforilata

AMP

adenilat-ciclaza
E
PD

glicogensintetaza
defosforilata

AMPc

ATP

proteinkinaza
AMPcinactiva

ATP

proteinkinaza
AMPca

ADP

glucozo-1-fosfat
glicogen (n) + glicogen (n-1)

ADP

fosforilaza a

fosforilazkinaza a fosforilazfosfataza

fosforilazkinaza b
defosforilata

ATP

fosforilaza b

fosforilazfosfataz
kinaza

La apariia unui stimul intr n aciune epinefrina care acioneaz pe R i determin

activitatea adenilat ciclazei, care transform AT n AMPc. Este vorba de o activare n cascad a
glicogenului care duce la o amplificare a semnalului iniial.
adrenalina

DAG (diacilgliceride)

I3P3(inozitol-3-fosfat)
OH

CH2OOC-R1
CHOOC - R2

OH

PO
HO

CH2OH

OP

OH
Cele dou ci metabolice, glicogenoliza i giconeogeneza sunt distincte, dar n reglare
intervin aceleai mecanisme: creterea c-AMP afecteaz i procesul glicogenezei, acionnd asupra
glicogensintetazei, favoriznd fosforilarea acesteia de ctre proteinkinaz.
Reglarea acestor procese se realizaz nu numai ca AMPc, ci i n urma interaciunii
hormonului (andrenalin) cu R1-adrenergici i prin intermediul altor mesageri secunzi (I 3P)
Inozitol-3-fosfatul acioneaz prin scoaterea calciului din RE, creterea tranzitorie a
concentraiei intracelulare a ionului de calciu, care poate aciona fie independent, sau cuplat cu
sisteme de formare a acestuia sub aciunea altor mesageri. Aciunea poate s fie o aciune rapid, de
scurt durat (10-7s) mai ales cnd se produce un influx de ioni de calciu din exterior, sau poate fi
o aciune de mai lung durat, n cazul n care aciunea sa este cuplat cu a altor mesageri secunzi
121

(ex. inozitol-3-fosfat).
Ionul de calciu acioneaz cuplat cu calmodulina, protein cu mare flexibilitate
conformaional, cu patru domenii similare de legare a ionului de calciu. Att ionul de calciu ct i
calmodulina, separat, sunt inactivi. Prin legare de ion de calciu, calmodulina trece ntr-o
conformaie compact activ, capabil s scioneze asupra altor proteine, determinnd la acestea o
tranziie cu implicaii n activitatea acestora. Uneori calmodulina constituie o parte integrant a unei
enzime fosforilazkinaz.
Prin creterea concentraiei ionilor de calciu intracelular, calmodulina fixeaz calciu i duce
la transformri conformaionale favoriznd activitatea fosforilazkinazei.
Inhibarea glicogenolizei
AMPc

5'AMP

Insulina este un hormon ce activeaz PDE, favoriznd trecerea AMPc la 5-AMP, deci
inactiveaz glicogenoliza.
Tulburri metabolice. Datorit unei deficiene ereditare a sistemului enzimatic implicat n
cele dou ci ale glicogenului duc la depuneri masive de glicogen n ficat sau muchi sau depunere
anormal de glicogen cu o evoluie blnd sau dramatic (mortale uneori). Maladia se numete
glicogenoz.
Exist cteva defecte genetice ce duc la stri n care se acumuleaz glicogenul. Acestea au
consecine severe asupra sntii esuturilor, n special a ficatului. Ele sunt cunscute sub denumirea
de boli de stocare a glicogenului.Una din cele mai comune boli se datorete deficienei glucozo-6fosfatazei i este cunoscut ca tipul 1 de boal de stocare a glicogenului sau boala Von Gierke. n
acest caz se observ nivel sczut al glicemiei n timpul repausului alimentar i ficat mrit cu un
nivel ridicat al glicogenului.

122

123

Glicoproteine i proteoglicani.
Conjugaii glucidelor
Sunt compleci formai prin asociere de glucide cu proteine i/sau lipide, de exemplu,
glicoproteinele, proteoglicanii, lipoproteinele etc.
Glicoproteinele i proteoglicanii sunt compui care se formeaz prin ataarea covalent de
lanuri oligo sau polizaharidice la schelete polipeptidice. Distincia se face n raport cu componenta
glucidic.
Glicoproteinele sunt formate din lanuri de oligozaharide, de obicei ramificate, unite n
proporie variabil cu lanuri proteice.
Structura unitii glucidice
Unitile glucidice pot fi reprezentate de:
-

uniti glucidice: galactoz, glucoz, manoz

oze N-acetilate (doi aminoacizi): N-acetilactozamina, N-acetilglucozamina

acid sialic (NANA ac. N-acetilneuraminic)

fucoza

CH2OH
O
HO
OH

CH2OH
O
OH

OH
NH-CO-CH3
N-acetilgalactozamina

HO

OH
NH-CO-CH3
N-acetilglucozamina
COOH

HO

OH
NH2

COOH

H2N-C-H O
HO-C-H

HOOC
HO O

C-OH
CH2
O

H-C-OH
H2N-C-H

H-C-OH

H-C-OH

C-H

H-C-OH

H-C-OH

H-C-OH

CH2OH

CH2OH

H-C-OH
CH2OH

acid sialic (NANA) = acilarea ac. Neuraminic

124

CHO

CHO

HO-C-H

HO-C-H

H-C-OH

H-C-OH

H-C-OH

H-C-OH

HO-C-H

HO-C-H

CH2OH
L-galactoza

CH3
fucoza

Lanurile zaharidice se leag de lanurile proteice prin legtur O- sau N-glicozidic. De

exemplu, n colagen (glicoprotein) se leag de hidroxilul lizinei.
CH2OH
O
HO
OH

O
O

CH2-NH2
CH
(CH2)2
CH-CO-

OH

NH

Biosinteza
Componentele se sintetizeaz separat, dup care se cupleaz formnd glicoproteina.
Sinteza oligozaharidei
n sinteza oligozaharidei l are un compus lipofil cu structur poliizoprenic, poliizoprenol =
dolichol.

H3C - C = CH - CH2 - [CH2 - C = CH - CH2 -]n- CH2 - CH - CH2 - CH2OH

CH3

CH3

CH3

dolidol
Etapele sintezei
1. Asamblarea lanului oligozaharidic i transferul su pe scheletul peptidic.
2. Prelucrarea glicoproteinei formate n prima etap.
1.
125

Dol

kinaza
ATP

Dol-P

UDP-glu

ADP

Dol-P-P-Glu

UMP

UDP-N-acetil-gal

UDP

Dol-P-P-glu-N-Ac-gal
GDP-manoza

GDP

Dol-P-P-glu-N-Ac-gal-man

Dol-P-P-oligozaharida

lant polipeptidic
oligozaharid transferaza

Dol-P-P
glicoproteina primara
Dol-P

2. n etapa a doua are loc prelucrarea enzimatic a glicoproteinelor primare prin eliminarea
i adugarea de uniti glucidice sub aciunea unor glicozidaze i a unei glicozil transferaz, ce
adaug alte subuniti cu formare de glicoproteine de anumite tipuri.
Rolul glicoproteinelor este divers i multiplu.
-

rol structural: - colagen

- peretele celular;

126

rol de transport glicoproteinele ce transport ioni metalici, lipide, vitamine etc.

rol lubrifiant i protecie mucina

rol enzimatic factori de coagulare

unii hormoni sunt glicoproteine

rol n imunitate

rol n reacii de recunoatere (rol receptor) ex. recunoaterea unei bacterii sau a unui

virus.
Proteoglicani.
Proteoglicanii sunt compui formai dintr-un lan polizaharidic legat de un lan polipeptidic.
n structura lor ponderea mare o are componenta glucidic (95%) polizaharide i 5% proteic.
Proteoglicanii sunt specifici celulelor animale i formeaz matricea esutului conjunctiv. Partea
glucidic este reprezentat de glicozaminoglicani (mucopolizaharide) polimeri liniari de natur
heteropolizaharidic.
n structura lor intr:
- hexoze aminate
- acizi uronici
1. Acid hialuronic
Acidul hialuronic este un polimer linear cu mas molecular foarte mare, fiind format din
acid glucuronic i N-acetilglucozamin, legate alternativ prin legturi -1,3-glucuronidice i -1,4glucozamidinice. SE ntlnete n esutul conjunctiv, piele, corpul vitros, cartilagii, lichid sinovial.
Legturile glicozidice ale acidului hialuronic pot fi hidrolizate de ctre hialuronidaza bacterian,
ceea ce duce laalterarea capacitii de filtru selectiv al substanei fundamentale i la expunerea
esuturilor la invazia bacterian.
COOH
O
O

OH

O
OH CH3CONH

OH
CH2OH

2. Condroitin-sulfaii sunt glicozaminoglicanii majori din proteoglicanii cartilagiilor,

arterelor, corneei, fiind alctuii din acid glucuronic i N-acetilgalactozamin legate -1,3glucuronidic i -1,4-galactomidinic. Numrul mare de sarcini negative din molecula
condroitinsulfailor i consacr un rol de rini schimbtoare de cationi, avnd un rol important n
reglarea homeostaziei matriceicartilajului i n mineralizarea matricei osoase.
3. Dermatansulfatul este un constituient fundamental al esutului conjunctiv dermic. Se
ntlnete n tendoane, valvele cardiace, peretele vascular.
4. Heparina
Heparina este un glicozaminoglican ce are o serie de particulariti funcionale. Heparina
este sintetizat n mastocite i n toate esuturile ce le conin. Aciunea anticoagulant a heparinei sar explica prin abilitatea acesteia de a accentua aciunea de inhibare a trombinei, manifestat prin
antitrombina III. Legarea de heparinei la antitrombina III induce n molecula acesteia o tranziie
allosteric ce favorizeaz legarea sa la trombin. Heparina joac un rol important i n procesul de
clarificare a plasmei prin aciunea de eliberare n circulaie a lipoproteinlipazei din pereii
127

capilarelor.

O
COOH
OH

COOH
O

CH2OSO3H
O
O

OSO3H

OH

O
NHSO3H

OH

CH2OSO3H
O
O

OSO3H

OH

O
NHOCCH3

Patologia metabolismului glucidic

Desfurarea normal a metabolismului glucidic este controlat att la nivel molecular prin
intermediul enzimelor reglatoare, ct i la nivel superior, de factorii de reglare cum sunt: hormonii,
sistemul nervos.
Starea de echilibru a metabolismului glucidic este indicat de glicemie, care reprezint
concentraia glucozei din snge. n condiii fiziologie, la 12 ore de la ultima ingestie alimentar
glicemia este cuprins ntre 80 i 120 mg%. Tulburprile metabolismului glucidic, mecanism
deosebit de complex, se poate manifesta prin hiperglicemii, iar n form mai avansat prin
glicozurie (apariia glucozei n urin) este diabetul zaharat, care const ntr-o alterare complex a
ntregului metabolism intermediar, ndeosebi a celui glucidic n corelare cu cel lipidic. Diabetul
zaharat implic i tulburri endocrine grave, mai ales a secreiei insulinei din pancreas.
O alt categorie de tulburri ale metabolismului normal al glucidelor o constituie
sindroamele hipoglicemice, care au la baz modificri patologice ale activitii principalilor factori
de reglare i control care intervin n metabolismul glucidic, respectiv hormonii pancreatici, insulina
i glucagonul.
n patologia metabolismului glucidic sunt ntlnite i boli de depozitare ale glicogenului,
numite glicogenoze. Acestea sunt boli congenitale i familiale rare i sunt caracterizate prin
depunerea n diverse esuturi i organe a unor cantiti neobinuite de glicogen.

128

Metabolismul altor hexoze

Metabolismul galactozei
Galactoza este o component a catenei oligoglucidice care intr n constituia unor
glicolipide, glicoproteine i proteoglicani.Deasemenea intr n compiziia lactozei, care este
diglucida din lapte. Galactoza este un important substrat energetic.
Schema metabolizrii galactozei
NAD+

NADH + H+

dulcitol

hexokinaza

galactoza

aldoreductaza

ATP

galactozo-6-fosfat

ADP

ATP
galactokinaza (1)
ADP

galactozo-1-fosfat

UDP-glucoza

UDP-galactoza

glicogen

glucozo-1-fosfat

glucozo-6-fosfat
glicoliza

glucoza

Prima etap n metabolismul galactozei o constituie formarea galactozo-1 fosfatului, sub

aciunea unei kinaze, numit galactokinaza.
CH2
HO

CH2
ATP

O
OH
OH
OH

galactoza
129

ADP

galactokinaza

HO

O
OH
O

OH
galactozo_

1 fosfat

n continuare Gal-1 fosfatul reacioneaz cu UDP-glu i formeaz UDP-gal i glucozo-1

fosfat.

HO

CH2OH

CH2OH

O
OH

O
OH

HO

uridil _

transferaza
O UDP

OH

Gal1P

UDP_glu

O
OH

O P

O UDP HO

OH

OH

OH

OH

CH2OH

CH2OH
HO O

UDP_gal

G1P

epimeraza
UDP_gal

UDP_ glu

Aceste reacii au loc n ficat, motiv pentru care viteza de metaboliare a galactozei reflect
capacitatea de funcionare a ficatului. Acest lucru se folosete n practic prin testul de ncrcare cu
galactoz.
La nivelul glandei mamare UDP-galactoza reacioneaz cu glucoza sub aciunea enzimei
lactozo-sintetaza i formeaz lactoza.
CH2OH

CH2OH
HO O
OH

O
OH

O UDP
OH

HO

OH
OH

CH2OH

CH2OH
HO O
lactozo_sintetaza
OH

O
OH
O

OH

UDP

OH
OH

Dismetaboliile galactozei
Acestea apar ca urmare a deficienei enzimelor care intervin n metabolismul galactoze. Prin
deficiena galactokinazei, prima enzima de transformare a galactozei apare galactozemia. Aceasta
duce la acumularea galactozei n snge. Acumularea galactozei n cristalin duce la transformarea
acesteia n prezena aldo-reductazei n galactil, care este responsabil de apariia cataractei.
Prin absena celei de-a doua enzime (uridil-trabsferaza), se acumuleaz
Gal-1P, care este un produs toxic pentru organism. La copii lipsa acestei enzime este destul de
sever, deoarece UDP-gal nu se mai formeaz. Sugarul prezint tulburri de cretere, iar n lipsa
unui tratament pot aprea afeciuni hepatice, boli mintale, cataracta i leziuni ale tubilor renali.
Galactozemia se trataeaz prin excluderea galactozei din alimentaie.

130

Metabolismul fructozei
Fructoza, n urma metabolizrii ei ofer intermediari metabolici cu importan metabolic
major, n special ai glicolizei.
Pentru a putea fi metabolizat fructoza trebuie s fie n prealabil fosforilat. Fosforilarea poate avea
loc cu ajutorul unei hexokinaze (F6P- calea minor) sau a unei fructokinaze F1P- calea major).
Fructokinaza este o enzim cu afinitae mare pentru fructoz, nu este dependent de insulin i este
influenat de natura dietei, astfel c fructoza este un zahr care poate fi folosit de ctre diabetici.
Fructozo-1 fosfatul poate fi scindat de o aldolaz (fructoaldolaza) la DOAP i gliceraldehid
(nefosforilat). Gliceraldehida poate s fie la rndul ei fosforilat la gliceraldehid-3 fosfat n
prezen de gliceraldehidkinaz sau s fie redus la glicerol, n prezena unei reductaze ce necesit
NADH + H +.
Glicerolul rezultat poate s fie fosforilat la glicerol-fosfat de o glicerol-kinaz. Glicerol-fosfatul la
rndul su poate s fie oxidat printr-o reacie de dehidrogenare cu ajutorul unei gliceroldehidrogenaze cu formare de DOAP. Deci, fructoza se poate integra n glicoliz pe mai multe ci:
calea minor, prin DOAP, prin glicerol-kinaz i calea ocolit.
NADH+H+NAD+
G
Sorbitol
AR
NAD+
G6P
Sor_DH
NADH +H+
ADP
ATP
F 6P
F
HK
ATP
FK
ADP
F 1,6DP

F1P
FA
GA NADH +H+

DOAP
Ga3P

ADH NAD+
TK

piruvat

ATP
ADP

glicerol
ATP

GK

glicerol_ 3 fosfat
NAD+
ADP
NADH+H+
DOAP

AR- aldozo-reductaza
HK- hexokinaza
FK fructokinaza
FA fructoaldolaza
131

TK tiokinaza
GK glicerolkinaza

Fructoza se administreaz diabeticilor sub form de perfuzii.

Fructoza se transform n mare parte n glucoz, astfel c n circulaia posthepatic ajunge o
cantitate destul de mic de fructoz, deoarece se metabolizeaz n glucoz. Apariia glicerofosfatului ca metabolit al fructozei, leag metabolismul glucidic de metabolismul lipidic.
Calea de formare a fructozei din glucoz prin intermediul sorbitolului se numete calea poliol.

Glu

AR

Sor

NADH+H+ NAD+

Sor_DH_aza
F
+
NAD
NADH+H+

Aspecte de patologie
Deficiena fructokinazei duce la apariia enzimopatiei numit fructozurie esenial (nu se
fosforileaz fructoza, aceasta se acumuleaz n snge, apoi trece n urin).
Deficiena de fructozoaldolaz duce la acumularea de Fructozo-1P, ceea ce provoac
intoleran ereditar la fructoz 8boal Grav). Sugarul prezint tzlbiurri digestive cu formare de
emez, hepatomegalie, icter, uneori moarte. Tratamentul const n excluderea fructozei din
alimentaie pentru toat viaa.
Administrarea de fructoz n perfuzii, n cantiti mari, precum i a excesului alimentar de
zaharoz, duce la ncrcarea sngelui cu fructoz, care stimuleaz sinteza de grsimi i implicit rete
lipemia.
Patologia metabolismului glucidic
Desfurarea normal a metabolismului glucidic este controlat att la nivel molecular prin
intermediul enzimelor reglatoare, ct i la nivel superior de factorii de reglare cum sunt: hormonii,
sistemul nervos.
Starea de echilibru a metabolismului glucidic este indicat de glicemie, care reprezint
concentraia de glucoz din snge. n condiii fiziologice, la 12 ore de la ultima ingestie alimentar,
glicemia este cuprins ntre 80-120mg%. Tulburrile metabolismului glucidic se pot manifesta prin
hiperglicemii sau hipoglicemii. Cea mai grav maladie care se manifest prin hiperglicemie, iar n
forma cea mai avansat prin glucozurie este diabetul zaharat, care const ntr-o alterare complex a
ntregului metabolism intermediar, ndeosebi a celui glucidic n corelare cu cel lipidic. Diabetul
zaharat implic ns i tzlburri endocrine grave, mai ales ale secreiei hormonului insulin din
132

pancreas.
O alt categorie de tulburri ale metabolismului normal al glucidelor o constituie
sindroamele hipoglicemice, care au la baz tot modificri patologice ale activitii principalilor
factori de reglare i control care intervin n metabolismul glucidic, respectiv hormonii pancreatici:
insulina i glucagonul.
n patologia metabolismului glucidic sunt ntlnite i boli de depozitare a glicogenului,
numite glicogenoze. Acestea sunt boli congenitale i familiale rare i sunt caracterizate prin
depunerea n diverse esuturi i organe a unor cantiti neobinuite de glicogen, cu structur normal
i anormal.

133