Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
CUPRINS
...
11
12
13
13
14
15
15
16
16
17
17
18
19
19
20
21
22
22
24
24
24
25
26
26
29
31
33
33
34
34
CHIMIE ANALITIC
V3*
3*
35
35
35
35
36
36
36
36
37
37
38
40
42
43
45
46
68
68
69
71
71
72
74
76
77
79
80
80
81
83
47
47
51
52
52
52
54
58
59
60
62
66
CUPRINS
...
...
...
...
...
...
...
.
...
...
...
...
...
...
...
. .
. .
. .
. .
34
34
34
35
35
35
35
36
36
36
36
37
37
38
40
42
43
45
46
.
.
.
.
47
47
51
52
.
.
.
.
. . 52
. . 52
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
54
58
59
60
62
66
. .
. .
...
. . .
. . .
...
...
. .
. . .
. .
68
68
69
71
71
72
74
76
77
79
80
80
81
83
5.1.2.1.3. Electrozi
ton-setectfv
5.1.2.2. Analiza conductometric (conductometria)
5.1.2.2.1. AplicaHlecontluctometrlei. .
5.1.2.3. Biosenzori
5.1.3. Metode analitice de separare
5.1.3.1. Cromatografia
5.1.3.1.1. Cromatografia de adsorble
5.1.3.1.2. Cromatografia de partiie
5.1.3.1.3. Cromatografia de schimb Ionic
5.1.3.1.4. Cromatografia de excludere molecular
5.1.3.1.5. Cromatografia de afinitate
5.1.3.1.6. Gaz - cromatografia
5.1.3.2. Electroforeza
5.1.3.2.1. Bazele fizice ale etectroforezel.
5.1.3.2.2. Suporturi eletroforetice
5.1.3.2.3. Analiza i interpretarea eiectroforegramelor.
Bibliografie
85
89
90
90
92
93
93
94
95
95
97
98
101
101
104
105
107
NOIUNI INTRODUCTIVE
DE
CHIMIE ANALITIC
Chimia analitic este ramura Chimiei care se ocup cu studiul metodelor de
separare, identificare i determinare a compoziiei i structurii substanelor. Totali
tatea acestor metode constituie analiza chimic, care poate fi:
- calitativ, care are drept scop determinarea constituenilor (elementelor, ioni
lor, gruprilor) din substana de studiat i
- cantitativ, care are drept scop determinarea compoziiei cantitative a sub
stanelor, adic stabilete raportul cantitativ dintre componenii si.
Importana chimiei analitice. Chimia analitic este cunoscut din cele mai vechi
timpuri, ca opus sintezei chimice; ea a contribuit la transformarea chimiei magice i
a alchimiei n chimie tiinific. Dezvoltarea chimiei pe baze tiinifice a nceput n
momentul folosirii balanei, cnd s-au descompus substanele - prin analiza canti
tativ - i s-a cercetat comportarea lor chimic. Analiza chimic a permis emiterea
legilor proporiilor definite i multiple, precum t emiterea legii lui Dalton.
Ulterior, dezvoltarea vertiginoas a chimiei s-a realizat cu ajutorul chimiei anali
tice i a metodelor sale de analiz.
Chimia analitic i domeniile nrudite
Pn nu demult, chimia a fost mprit n cinci clase: analitic, biochimic,
anorganic, organic i fizic. n prezent, o astfel de delimitare este arbitrar, datorit
ntreptrunderii acestor domenii.
Chimia analitic, la fel ca i alte ramuri ale chimiei a suferit o evoluie rapid. n
prezent, noi discipline, cum ar fi: chimia fizic biofizica, biologia molecular etc, afla
te ntr-o continu dezvoltare, i datoreaz succesele chimiei analitice.
Importana chimiei analitice, privit prin prisma legturilor cu domeniile tiinifice
nrudite, poate fi ilustrat prin contribuia sa nsemnat la dezvoltarea metodelor apli
cate n analizele chimice, n cercetrile farmaceutice, n controlul de calitate, precum
i n analizele privind mediul nconjurtor.
Analizele chimice. n trecut, analizele medicale erau preponderent calitative i,
de aceea, majoritatea diagnosticelor erau bazate pe simptome i/sau pe examinri
radiologice, dei era cunoscut c multe boli erau nsoite de schimbri chimice n
lichidele biologice.
Uneori erau utilizate teste pentru detectarea componenilor normali sau anor
mali n diferite probe recoltate pentru analiz. Aceste teste au fost transformate n
procedee prin intermediul crora a devenit posibil determinarea cantitativ a corn-
CHIMIE ANALITICA
portanilor.
Pe msur ce precizia a crescut i au fost stabilite proporiile normale, a deveni
clar c rezultatele de laborator pot fi folosite n scopul precizrii diagnosticului.
Majoritatea acestor teste se execut pe probe de snge i urin i includ deter
minarea cantitativ a unor componente organice i anorganice (glucoza, proteine
lipide, acid uric, CI , Na*, Ca 2 ', Petc).
Analizele clinice nu se limiteaz numai la aceste determinri generale, deoa
rece cu ajutorul lor se pot evalua i boli metabolice specifice. De exemplu, la unul O
10.000 de nou-nscui este absent enzima fenilalanilhidroxilaza. Acest fapt conduce
la un metabolism secundar care, dac nu este corectat n stadiul timpuriu al vieii,
determin o dezvoltare insuficient a creierului i napoieri mintale severe. Unul d.n
rezultatele metabolismului viciat este fenilpiruvatul prezent n urin. Aadar, detecta
rea fenilpiruvatului n urin constituie un test clinic important, efectuat n mod curen
la nou-nscui, prin tratarea unei probe de urin cu FeCI3.
Analiza produselor de origine animal
Alimentele, indiferent de originea lor (animal sau vegetal), din punct de vede
re biochimic sunt constituite din substane anorganice (apa i srurile minerale) i din
substane organice (glucide, lipide, protide, vitamine etc).
Pentru a prezenta garania unei valori alimentare corespunztoare, este nece
sar ca alimentele s fie supuse unui control sanitar veterinar care urmreasc
aprecierea integritii, salubritii i strii de prospeime.
Aceste caracteristici ale alimentelor se stabilesc prin analize chimice calitative i
cantitative.
n urma acestor analize se determin componente naturale existente n alimen
te (glucoza, cazeina, vitamina C etc), precum i substane toxice naturale (alcaloizi
glicoizi etc.) i substane toxice depoluare (pesticide, detergeni, ioni metalici: Hg2*,
Pb2*, hidrocarburi aromatice policiclice).
Analiza farmaceutic. In industria farmaceutic, calitatea medicamentelor tre
buie s fie controlat atent i cu mult exactitate. Uoare modificri n compoziia sau
n puritatea medicamentului pot afecta valoarea terapeutic. Pentru stabilirea propor
iei de administrare a unui medicament este necesar s se determine produii meta
bolici rezultai i toxicitatea lor.
Analiza mediului nconjurtor. Apa, aerul, solul pot suferi modificri de natur
fizic, chimic sau biologic. Analiza acestora precizeaz msura n care aceste
transformri au fost provocate de oameni, cum i n ce condiii aplicarea tiinei i
tehnologiei poate controla i ameliora calitatea mediului nconjurtor.
Dezvoltarea metodelor analitice de separare, identificare i dozare a furnizat
informaii preioase privind prezena n aer, ap i sol a unor particule poluante ca:
var, praf de ciment, oxizi de fier, fluoruri, negru de fum, solveni, detergeni, alcooli
etc.
io
CHIMIE ANALITIC
12
CHIMIE ANALITIC
2
I4
i
aA + bB =s=S: cC+dD
Viteza reaciei directe (v,) i viteza reaciei inverse (v2) se exprim prin relaiile:
v,=k,[A]v[Bh
v a =k a [C] n [D] n unde, k, i kg reprezint constantele de vitez, n nb, nc, nd, ordinele de reacie
(pentru reacii simple ordinele de reacie sunt egale cu coeficienii stoechiometrici) i
[A], [B], [C], [D] concentraiile molare.
n momentul atingerii strii de echilibru viteza reaciei directe devine egal cu
viteza reaciei inverse (v, = v 2 ) i respectiv:
(1)
Pentru aceast n
k2
(2)
[C]"<
[D]"
[A]"-
[B]^
, .1
- [A]"
[B]0
3.2. D E P L A S A R E A E C H I L I B R U L U I C H I M I C
Starea de echilibru chimic este rezultatul a dou procese care se desfoar cu
viteze egale dar in sensuri opuse, aceast proprietate reflectnd caracterul dinamic
al strii de echilibru.
Deplasarea echilibrului chimic se produce atunci cnd se exercit o aciune
asupra sistemului, aciune care influeneaz n mod inegal viteza reaciei directe i
viteza reaciei inverse. Putem concluziona deci c modificarea egalitii vitezelor de
reacie este responsabil de trecerea sistemului ntr-o nou stare de echilibru, cnd
vitezele celor dou reacii vor fi din nou egale, dar diferite de cele iniiale.
n urma aciunii unor factori externi (concentraie, temperatur, presiune) echili
brul chimic se poate deplasa spre formarea unei cantiti suplimentare de produi de
reacie sau spre formarea reactanilor.
Efectul schimbrilor de concentraie, temperatur i presiune asupra echilibrului
chimic este cuprins n principiul foarte general enunat n 1884 de ctre Le
Chtelier: un sistem chimic aflat fn echilibru sub aciunea unei fore exterioare va
suferi acea deplasare care va tinde s micoreze efectul aciunii exterioare.
16
C+D
La adugarea m
cNmic se va deplasa
aacie (C i D) aste 1
De exemplu, o m
m unei soluii de htcrae
aofcjii care conine oi
Reacia iodutu ai
l + 2 K 0 H ==a
-
Prin adugare*
mediul de reacie ur
eantraiei ionilor MC
Cantiti suplimentar* i
rinnd recolorarea
3.2.2. INFLL:
Sensul n czr~
determinat de lege*
totem aflat n ec ne temperaturi i
De exemplu
2 NO,
rou-brun
Scderea tec
crtMbrului cfwrac r
temporaturii cono^c*
I reaciei eno-ir-
3.2.3. INF
Presiunea
(cel puin) este tel
volum.
tn cazul acestor I
chimic In senaU fcrte
determina deptasa/eai
mare.
2NOt
*-N,04Se,5fcj
RENDCTERMA
rou-brun
incolor
CHIMIE ANALITICA
N2 + 3 H 2
4 volume
2NH3
2 volume
3.3. ECHILIBRE C H I M I C E N S I S T E M E E T E R O G E N E
Echilibrele chimice n sisteme eterogene se ntlnesc la reaciile analitice care
au loc n sisteme formate din cel puin dou faze.
In figura 1 sunt redate sistemele eterogene alctuite din dou faze (bifazice),
ntlnite n cazul reaciilor analitice:
SISTEM ETEROGEN
Mg(OH), w + 2 HNO s
^ S N H a w + HCIj,
CaO ( + CO, w
18
[CaOlfCO,]
[CaCOjJ
Concentraiile componentelor solide fiind constante pentru o temperatur dat,
pot f) nglobate n constanta de ecbWbru obinndu-se:
K-fC02}
Aceast relaie demonstreaz faptul c echilibrul chimic este definit de concen
traia gazului sau de presiunea sa.
3.4. ECHILIBRE L E N T E S A U METASTABILE
Orice fenomen chimic necesit un anumit interval de timp pentru desfurarea
procesului. Totui, timpul necesar pentru desfurarea diferitelor reacii este foarte
variat. Astfel, multe reacii se petrec instantaneu, altele, dei nu sunt instantanee, se
desfoar cu o vitez considerabil fiind considerate reacii rapide. Exist Ins i
reacii chimice care decurg cu viteze foarte mici, pentru desfurarea lor fiind nece
sari ani sau poate chiar secole. n principiu aceste reacii nu pot atinge un echilibru
real i de aceea sunt numite echilibre meiastabile.
Muli reactivi utilizai n chimia analitic sunt metastabiU descompunndu-se sau
participnd la reacii secundare, cu viteze suficient de mari pentru a crea dificulti.
n aceast categorie de reacii sunt incluse procesele:
- decolorarea soluiei de permanganat de potasiu la fierbere sau sub aciunea
luminii;
- decolorarea .unor soluii de indicatori la cald i n medii acide;
- degradarea soluiei de bicromat de potasiu n prezena urmelor de diferii ioni
(Hg*+);
reacia ioduri) de potasiu cu oxigenul din aer, aceasta fiind numai aparent
stabil fa de aer:
Kl
> + ~2 * w i K l O s W
Aceste procese care au loc cu vitez foarte mic conduc n timp la modificarea
concentraiei reactivilor i la apariia unor produi secundari nedorii. Modificrile de
concentraie suferite de reactivi precum i produii secundari rezultai determin apa
riia unor erori sistematice pentru analizele efectuate.
3.5. APLICAII A L E C O N C E P T U L U I DE E C H I L I B R U
Pentru a nelege diferitele tipuri de reacii care prezint interes pentru chimia
analitic este necesar s se ia n considerare teoria echilibrului chimic, aceast teorie
permind determinarea condiiilor favorabile de desfurare a unei reacii chimice.
In cele ce urmeaz sunt prezentate pe scurt constantele de echilibru corespun
ztoare diferitelor tipuri de reacii utilizate in chimia analitic calitativ i cantitativ.
19
CHIMIE ANALITICA
NaCI w
Na*
(aq)
+ Cr
NaOH
- ^ 2 - Na* ( a q ) + H O - , ^
HO,.,
H+m +
a-m
NH,.H,O^NH...HO-
" - p ^ f e
<">
[CH3COOH]
*K>**-K0M
jflT
H 2 0 + H 2 0 = ^ H 3 C * + HO-
K-kagJdhOJ
(5)
la
temperatura de 22C.
n apa pur, concentraia ionilor de hidroniu este egal cu concentraia ionilor
de hidroxil.
^ 3 O 4 ] = ^ O - ] = V l 0 - M = 1 0 ' 7 mol/l
Caracterul acid sau bazic al unei soluii este dat de concentraia n ioni de
hidroniu i se exprim n numere de tipul 10"p. ntruct aceast exprimare este
greoaie, s-a introdus noiunea de pH.
pH-ul unei soluii se exprim prin logaritmul zecimal cu semn schimbat al
concentraiei ionilor de hidrogen: pH = -/ogrV*J.
Neelectroliii n soluii apoase nu disociaz, echilibrul chimic fiind complet
deplasat spre stnga. Deoarece concentraia n componenta disociat tinde ctre
zero, se poate considera c i pentru constanta de echilibru valoarea este zero. n
categoria neelectroliilor putem include solveni organici ca totuen, benzen, cloroform
etc.
3.5.2. ECHILIBRE N SISTEME REDOX
Reaciile chimice care se bazeaz pe modificarea strilor de oxidare pot fi
reprezentate prin constante de echilibru.
Considernd reacia dat de un oxidant (ox,) i un reductor (red2) se poate
scrie ecuaia:
p ox, + m red2 = s = i p red, + m 0X2
Aplicnd acestui sistem legea aciunii maselor, pentru constanta de echilibru se
obine urmtoarea expresie:
Jred.lMoxJ"'
[ox,Nred2r
Reaciile de oxido-reducere prezint, n geneial, valori mari pentru K ^ , dar au
viteze de reacie reduse. Vitezele de reacie pot fi ns mrite n mod semnificativ
prin utilizarea catalizatorilor.
21
CHIMIE ANALITICA
NH3=*[Ag{NH3)r
[Ag'][NH7]
[ A 9( N H 3) ? 1 >
" ~[Ag(NH 3 )][NH 3 ]
._M(NH3j
' [Ag(NH3)]-
: L
Ks
ssss
m A"*^ + n 8 % ^
22
Deoarece concentraia fazei solide, AJB, este constant, aceasta poate fi tre
cut n membrul stng i expresia constantei de echilibru poate fi scris astfel:
23
- grupa a 111-a este grupa cationilor ce formeaz sulfuri sau hidroxizi greu solu
bili n mediu alcalin.
Din aceast grup fac parte cationii de nichel, cobalt, mangan, fier, zinc, crom i
aluminiu i are ca reactiv de grup sulfura de amoniu n mediu de amoniac i ciorur
de amoniu (pH 9).
- grupa a IV-a este constituit din cationi care formeaz sulfuri greu solubile n
mediu acid. Din aceast grup fac parte ionii de cupru (II), cadmiu, mercur (II), staniu
(II i IV), plumb (II), arsen (III i V), stibiu (III i V) i bismut. Reactivul de grup TI
constituie hidrogenul sulfurat fn mediu puternic acid (pH * 5).
- grupa a V-a este grupa cationilor ce formeaz sulfuri i cloruri greu solubile.
Din aceast grup fac parte cationii de cupru (I), argint, mercur (I) i plumb (II), iar
reactivul de grup pentru aceti cationi este acidul clorhidric.
4.1.1.1. GRUPA CATIONILOR FR REACTIV DE GRUP
Cationii: Na*. K*. NH* formeaz cloruri, sulfuri i carbonai solubili. n aceast
grup este inclus i cationul Mg2* care formeaz hidroxid i carbonat de solubilitate
medie.
Reacii de identificare pentru ionul Na*
/. Acatatul de uranil i magneziu conduce la o reacie sensibil i specific
pentru ionul Na*. Din reacie rezult un precipitat galben-verzui de acetat de uranil,
magneziu i sodiu, cu cristale caracteristice (octaedri) care se analizeaz la
microscop:
Na* + Mg [(U02)3(CH3COO)e] + CH3COOH - NaMg [(U0 2 ) 3 (CH 3 COO) 9 ] + H*
2. Hexahidroxoantimoniatul de potasiu formeaz cu ionul Na* un precipitat alb
cristalin:
Na* + K[Sb(OH)a] - Na[Sb(OH)6J + K*
3. Srurile volatile de sodiu coloreaz flacra incolor a unui bec de gaz n
galben-deschis.
Reacii de identificare pentru ionul K*
/. Acidul percloric precipit din soluiile srurilor de potasiu, un precipitat alb,
cristalin de perclorat de potasiu.
K* + HCI0 4 ->KCI0 4 4- + H*
Precipitatul rezultat este insolubil n alcool.
2. Hexanitrocobaltiatul de sodiu este un reactiv foarte sensibil pentru ionul de
potasiu, cu care formeaz, n mediu de acid acetic, un precipitat galben, cristalin:
2K + + Na s [Co(N0 2 ) 6 ]-+r^NafCotNO^gli + 2Na*
3. Srurile de potasiu coloreaz flacra incolor a unui bec de gaz n violet.
Reacii de identificare pentru ionul NH*,
1. Hidroxizi! alcalini adugai peste o substan solid sau lichid ce conine
Ionul NH*, la nclzire, degaj amoniac care nalbstrete hrtia de turnesol.
NH* + NaOH ~* NHg + H 2 0 + Na*
2. Reactivul Nessler (soluia alcalin de iodomercuriat de potasiu) formeaz cu
amoniacul sau cu ionul amoniu, n mediu alcalin, un precipitat brun.
NH 3 + 2 1 ^ [Hgl4] + 3KOH - HHJr\&G\l + 7KI + 2H 2 0
25
CHIMIE ANALITIC
2
26
Cr(OH),).
Cationii din grupa sudurii de amoniu formeaz sulfuri, hidroxizi, carbonai, sulfii
i fosfai greu solubili.
A Reacii comune
t. Sulfura de amoniu n mediu de amoniac i ciorur de amoniu, precipit: NiS
(negru), CoS (negru), FeS (negru), Fe2S3 (negru), MnS (roz). ZnS (alb). Cr(OH)3 (verde-cenuiu) i AI(OH)3 (albijelatinos).
Reaciile generale care au loc sunt:
Me8* + (NHJ2S - MeSi + 2NH 4
Me3* + 3(NH4)eS - Me2S34- + 6NH*
n cazul ionilor Al3* i Cr3*, sulfurile formate hidrollzeaz instantaneu formnd
hldroxizii greu solubili:
Me2S + 6H 2 0 ===== 2Me(OH)3J + 3H2S
2. Amoniacul cu cationii Fe**, Fe3*. Al3*. Mn** formeaz: Fe(OH)2 (alb-murdar ce
trece n verde), Fe(OH)3 (rou-brun). AI(OH)3 (alb-gelatinos). Mn(OH)2 (alb-murdar).
Ionii Mf**, Co2*. Zn2*, Cr3* formeaz precipitatele: Ni(OH)? (verde). Co(OH)2 (albastru).
Zn(OH)2 (alb), Cr(OH)3 (verde-cenuiu) care se dizolv n exces de reactiv formnd
urmtorii compleci solubili: lNi(NH3)s]** (albastru). [CoNHj)/* (galben), care se oxi
deaz la ICotNH^e)3* (roz). 'Zn(NH3)4f* (incolor) i [Cr(NH3)6J3* (violet).
Reaciile generale care au loc sunt:
' Me** + 2NH 3 + 2 1 ^ 0
Me(OH)24 + 2NH 4 *
rou:
CHIMIE ANALITICA
Dac soluia conine ionul Fe ' se adaug NaF pentru complexarea fierului,
care cu suifocianura de potasiu formeaz o coloraie roie.
2
Ionul Fe * cu hexacianoferatul (III) de potasiu formeaz un precipitat albastru,
denumit "albastru de Turnbull".
2
Fe 4 [Fe(CN) s ]3 + 12K*
Zn(OH)2 + 2NH;
C0(NO 3 ) 2
1000C
Ionul Cr* cu apa oxigenat n mediu alcalin formeaz o coloraie galben dator
at ionului CrO2":
2Cr3* + 10NaOH + 3 H 2 0 2 - 2Na 2 Cr0 4 + 6Na* + 8 H 2 0
IonulA3* cu azotatul de cobalt n mediu alcalin, la 1000C formeaz un compus
de culoare albastr numit "albastru Thenard". Reacia se efectueaz analog cu cea
de obinere a verdelui Rinmann.
Al3* + 3NH 3 + 3 H 2 0 -+ AKOH)3 + 3NH*
AKQH)3 +3HNO, -> AKN0 3 ) 3 + 3H a O
AI(NOa)2
Co(N0 3 ) 2
Co(AI0 2 ) 2 (aluminat de cobalt)
1000C
Prezena aluminiului n diet ntr-o concentraie mai mare dect cea normal
poate induce stri de hipocalcemie (favorizeaz excreia calciului), malabsorbia fos28
^ S
+ 2H*0
> NH 2
H2S + NH 3 + CH3COOH
A Reacii comune
1. Hidrogenul sulfurat la pH * 0,5 precipit HgS (negru), PbS (negru), Bi2S3
(brun), CuS (negru), CdS (galben), AsaS3 (galben), A s A (galben), Sr^S;, (rou),
SbaS5 (rou), SnS (brun), SnS2 (galben murdar)
Reaciile generale care au loc sunt:
Me2* + H 2 S->MeS + 2H*
2M63* + 3H2S - Me 2 S 3 + 6H*
Me 4 * + 2H 2 S -> MeS 2 + 4H*
2Me** + 5H2S -+ Me 2 S s + 10H*
Sulfurile de Hg2*, Pb2*, Bi3*, Cu2* i Cd2* sunt insolubile n sulfura de amoniu i
n mediu alcalin; sulfurile de As (Hi, V), Sb (III, V), Sn (II, IV) sunt solubile n sulfura i
polisulfur de amoniu.
B. Reacii caracteristica
Ionul Hg2* cu iodura de potasiu formeaz un precipitat rou-portocaliu de Hgl2
solubil n exces de reactiv cu formarea unui complex incolor.
Hg 2 *+2KI-^Hgl 2 4-+2K*
Hgl2 i+2KI->K 2 [Hgl 4 ]
... Ionul Hg2* este redus de ciorur de Sn (II) n dou trepte. n prima treapt se
formeaz un precipitat alb de ciorur de Hg (I), reducerea continu n exces de
reactiv pan la mercur metalic (precipitat cenuiu):
2Hg** + S n a 2 -*-Hg8CI2 i +Sn4*
29
CHIMIE ANALITICA
CdS.
Ingestia de alimente cu un coninut mai mare n cadmiu dect cel admis poate
conduce la perturbri ale procesului de asimilare a fierului, disfuncii intestinale i
renale.
Compui ai cadmiului se afl n ngr.mintele chimice cu superfosfai, produii
rezultai n urma arderii combustibililor i n gazele de eapament.
Ionul As (III) este redus de clorura stanoas la arsen metalic de culoare neagr:
2As3* + 3Sn 2 ' -> 2As 1 +3Sn4*
Ionul As (III) din arsenii formeaz n prezena azotatului de argint un precipitat
galben de arsenit de argint:
AsO3' +3Ag* -> Ag 3 As0 3 i
Ionul As (V) din arseniai formeaz cu azotatul de argint un precipitat rou-brun
(ciocolat) de arsenit de argint, solubil n acizi i n soluie de amoniac.
AsO3 + 3Ag* -> Ag 3 As0 4
Ionul arsenit (As III) ete de 5-10 ori mai toxic dect ionul arseniat (As V). Aceti
compui se gsesc n insecticide, erbictde, exfoliante, pesticide, precum i n unii
produi de poluare din industria metalurgic.
in intoxicaiile cu compui ai arseniutui apar deshidratri, dermatite, alergii ale
pielii, diaree hemoragic, hematurie, precum i stri de hipotermie sau de febr.
Pentru cine doza letal (oral) de arsenit de sodiu este 50-100 mg iar de
trioxid de arsen de 100-1500 ng.
30
Ionii Sb (III, V) reacioneaz cu metale (Fe, Zn, Al) formnd stibiu metalic care
se prezint n mediu de reacie sub form de fulgi de culoare neagr:
SSb3* + 3Fe -+ 2Sb 4- + 3Fe2*
2Sb 8 *+5Fe-2Sb<t+5Fe 2 *
'
31
CHIMIE ANALITICA
Hg 2 l 2 4 +2KI -* Hg 4- +K 2 [Hgl 4 ]
3. Cromatul de potasiu formeaz cu cei trei cationi precipitate diferit colorate:
AftjCrO* (rou-brun), PbCr0 4 (galben) i Hg2CrO (rou-aprins):
2Ag*+K 2 Cr0 4 -* Ag 2 Cr0 4 4+2K*
Pb** + K 2 Cr0 4 - > P b C r 0 4 4 +2K*
Hg|* +K 2 Cr0 4 --Hg 2 Cr0 4 4+2K*
4. Hidrogenul sulfurat (gazos sau ap de H2S) precipit sulfurile corespunz
toare de culoare neagr:
2Ag*+H2S-+Ag2Si+2H*
Pb2* + H 2 S - t . P b S l + 2 H *
Hg?,* + H 2 S -* Hg2S 4 + 2 H '
B. Reacii caracteristice
Ionul Ag*, transformat in AgCI cu ajutorul unei soluii de acid clorhidric, cu sruri
de Mn2* in mediu de hiciroxid de sodiu, formeaz un precipitat negru de argint metalic
i dioxid de mangan:
AgCI + Mn2* +4HO" -> Ag 4 +Mn0 2 H 2 0 + H 2 0 + Cr
Reacia este cunoscut n chimia analitic sub numele de "reacia Tananaev" i
se execut pe hrtie de filtru (metoda picturii).
Ionul Pb2* n prezena unei soluii de acid sulfuric formeaz un precipitat alb de
PbS0 4 insolubil n alcool:
Pb2* + H 2 S 0 4 ->PbS0 4 4 + 2 H *
Compuii anorganici i organici ai plumbului se pot gsi dispersai n aer (n
zonele poluate) precum i n chituri i vopsele.
n cazul intoxicaiilor cu plumb s-a evideniat acumularea ionului n rinichi, ficat,
esut osos, snge i lapte. Intoxicaiile Cu plumb determin apariia anorexiei, salivaie intermitent, vomismente, stri de letargie i tulburri neuropsihice.
Boala provocat de intoxicaia cronic cu plumb se numete saturnism.
Ionul Hg2* din Hg2CI2 formeaz cu amoniacul un precipitat negru de mercur
metalic i cloroamidur mercuric:
Hg 2 CI 2 + 2NH 3 -* NH2HgCI 4 +Hg 4 +NH4CI
Mercurul constituie unui dintre cele mai toxice elemente pentru animale i om.
Poate ptrunde n organism prin intermediul apei i hranei contaminate cu compui
organici sau anorganici ai mercurului, absorbia intestinal a compuilor anorganici ai
mercurului fiind de cteva procente iar cea a compuilor organici fiind de 100%. Cele
mai frecvente intoxicaii cu mercur sunt datorate consumului de cereale tratate cu
fungicide. Aciunea toxic a mercurului se explic prin afinitatea sa pentru gruprile
-NH 2 , -COOH, -OH din proteine, ca i pentru radicalul - P 0 3 H 2 din membranele
celulare.
Intoxicaiile cu compui anorganici i organici ai mercurului determin anorexie,
32
33
CHIMIE ANALITICA
34
+CI 2 ->2CI + S 4
SO\- + H 2 S 0 4 -* SO - + S 0 2 1 +H z O
4.1.2.8. REACII DE IDENTIFICARE PENTRU IONUL SULFAT
/. Clorura de bariu formeaz cu ionul sulfat un precipitat alb cristalin, greu solu
bil n acizi minerali:
SO2* +BaCI 2 -* BaS0 4 4 +2CI*
2. Acefalul de plumb (sau azotatul de plumb) formeaz cu tonul sulfat un
precipitat alb cristalin, solubil n acid sulfuric concentrat:
SOf
AgCI 4 +NO;
AgCi;+2NH3-*(Ag(NH3)2]CI
35
CHIMIE ANALITICA
-;{;:;:
2. Apa de efor oxideaz ionul Br' la brom elementar care coloreaz soluia
apoas n galben-brun:
2BT+CI,
Br 2 +2CI
l,+2KCI
Dintre anionii prezentai ionii azotit (nitrit) i azotat (nitrat) sunt deosebit de
toxici, aceti ioni putnd fi preluai de ctre animale din ap i din furaje, n special
cele verzi, inclusiv n form nsilozat.
Limita concentraiei azotailor n hran, considerat sigur pentru animale, este
0,5 mg%, concentraii mai mari n azotai avnd un efect toxic. Azotaii au efect can
cerigen, la animalele de experien producnd neoplasm al stomacului, pielii, creie
rului, mduvei spinrii. Azotaii (nitraii) din hran au aciune inhibitoare asupra fun
ciei tiroidiene prin diminuarea prelurii iodului de ctre gland. Dozele zilnice de
aproximativ 150 mg azotat de potasiu au produs avort la taurine. Din acest motiv
numrul de avorturi la taurine este mult mai mare n zonele depresionare dup con
sumul de plante din flora spontan, bogate n azotai.
4.2. ANALIZA C H I M I C C A N T I T A T I V
4.2.1. ANALIZA VOLUMETRIC
- Volumetria sau titrimetria cuprinde o grup de metode care, pentru determina
rea cantitii de component de analizat (ion, element, radical, substan compus)
utilizeaz msurarea exact a volumului de reactiv de concentraie cunoscut, con
sumat n reacie. Cunoscnd astfel cantitatea de reactiv i raportul stoechiometric de
combinare se calculeaz cantitatea de substan de analizat.
Volumul de reactiv se adaug treptat, cu biureta, pn cnd are loc transforma36
37
CHIMIE ANALITICA
Alcalimetria
4.2.1.2.1.
H20
[H-]=10-\
p H = 1,3
fH'J= - H - - 1 0
1
100
= 10
pH =
F
pH = 4
pH = 7
hi = 1 0 - 1 0
pH = 10
] = ^
10-'=10-2;
] = 10-,J
pH = 12
Aceste date se pot nscrie ntr-un grafic, unde pe ordonat se trec valorile pHului, iar pe abscis volumele de reactiv (de baz) utilizate (figura 2).
Curbele de titrare sunt curbe logaritmice ce prezint o variaie lent a pH i <'ui la
nceputul i sfritul titrrii i un salt de pH la echivalen. Punctul de inflexiune
38
BAZ EXCES
VB0H(ml)
14
VB0H(ml)
CHIMIE ANALITICA
5
IU
0
V
BOH< M L )
4.2.1.2.2. Acidimetria
Este o metod de dozare a bazelor tari i slabe i a srurilor cu hidroliz bazic
cu o soluie de acid tare de concentraie cunoscut.
40
V H A(ml)
41
CHIMIE ANALITICA
ECHI
i ... ,
Vmm'riI)
Figura 6 - Curbele de titrare ale unor baze slabe cu constante de bazicitate
Kb, < K 6 , < K b , c u 0 soluie de acid tare
42
OL
'
VMctiv(ml)
. H A - = - = = H * + A2-
K. K l l A ! " l
'
Titrarea unei baze poliacide cu o soluie de acid tare decurge similar cu titrarea
unui acid polibazic cu o soluie de baz tare, principala diferen constnd in schim
barea pH-ului pe direcie invers (de la mediu alcalin la mediu acid) (figura 7). Pentru
constantele de bazicitate, corespunztoare treptelor de disociere ale bazei poliacide,
se pun aceleai condiii ca i n cazul titrrii acizilor polibazici.
n figura 7 este redat curba de titrare a unei baze diacide, B(OH)2 cu o soluie
de acid tare de concentraie cunoscut.
4.2.1.2.4. Metode vizuale de determinare a punctului de echivalen
n cazul titrrilor acid-baz, cele mai utilizate metode de determinare a punctului
final al titrrii se clasific n: metode vizuale i metode Instrumentale.
Metodele vizuale constituie cea mai veche tehnic de determinare a punctului
final i se bazeaz pe utilizarea indicatorilor.
Indicatorii utilizai n volumetria bazat pe reacii de neutralizare sunt, n gene
ral, substane organice (acizi slabi sau baze slabe) a cror form disociat posed o
alt constituie structural i o alt culoare dect forma nedisociat.
De exemplu, pentru metilorange schimbarea de culoare este explicat de urm
toarele procese:
43
Pilii
mm
i,.,
IS...
M1
< 11 "1
UIIIIIIIIIIIIMMIIIIIMHHIiill
"I
"""'I
"!!!'!'
::i
q|j; P i r
Huli
CHIMIE ANALITICA
-0,8 N N N f C H , ) , + H *
iii
'O.S - ^ ^ - N N N * ( C H
H
) ,
forma acid
(rou)
forma bazic
(galben-orange)
i!s In
Denumirea
uzual
Modificarea de
culoare
3,0-4,6
3,1 -4.4
3,8 - 5.4
galben-aibastru
Albastru de bromfenoi
Metilorange
Verde de bromcrezol
Rou de metil
4,2 - 6.3
Albastru de bromtimoi
Rou de fenol
Rou de crezol
6.2-7,6
6,8 - 8,4
7.2 - 8,8
Albastru.de timol
Fenolftalein
Galben de alizarin
8-9.6
8.3 -10
10-12
rou-orange
galben-albastru
rou-galben
galben-albastru
galben-rou
galben-rou
galben-albastru
incolor-purpuriu
incolor-galben
Preparare
0,4% soluie apoas
0 , 1 % soluie apoas
0 , 1 % soluie apoas
0 , 1 % n alcool 60%
0,5% soluie apoas
0,05% soluie apoas
0,05% soluie apoas
0,04% soluie apoas
0,05% n alcool 50%
0 , 1 % alcool
BAZE
Amine.alifatice
Amine aromatice
Alcolai
Poliamine
Alcaloizi
Antihistamine
Xantogenai
Baze Schiff
Hidrazide
Tioamide
Solvenii neapoi, dup proprietile acido-bazice, se clasific n: solveni amfiprotici i solveni aprotici.
Solvenii amfiprotici pot fi protogenici (cu caracter acid puternic), protofilici (cu
caracter bazic) i amfoteri (n funcie de condiiile de reacie pot avea caracter acid
sau bazic).
n tabelul 3 sunt prezentai solvenii neapoi cei mai utilizai n chimia analitic.
Pentru titrrile n soluii neapoase se utilizeaz reactivi de titrare cu caracter
acid sau alcalin. n general, pentru a obine o curb de titrare bine definit se utili
zeaz acizi i baze tari.
Cei mai utilizai reactivi de titrare cu caracter acid utilizai n solveni neapoi
sunt: acidul percloric, acidul 2,4-dinitrobenzensulfonic, acidul 2, 4, 6 trinitrobenzensulfonic, acidul para-toluensulfonic.
45
CHIMIE ANALITICA
Tabelul 3
Solveni neapoi utilizai In volumetria bazata pe reacii de neutralizare
SOLVENTUL AMFIPROTIC
Solveni am1b teri
etilenglicol
metanol
etanol
izopropanol
t-butanol
Solveniprotogenlci
acid acetic
acid formic
SolveniprotofilicJ
amoniac
butilamin
etilendiamin
SOLVENTUL APROTIC
acetonitril
aceton
piridin
dimetilformamid
nitrometan
anhidrid acetic
dioxan
nitrobenzen
benzen
cloroform
tetraclorur de carbon
46
*** H i ] K r
(mediu acid)
MnO, + 2H g O
(mediu neutru)
MnOf"
(mediu alcalin)
MnOJ
+1
e"
5?==
47
CHIMIE ANALITICA
Tabelul 4
-~ Co2*
H2Os + 2H* + 2e _
+1,84
2H.O
+1,77
Mn2* + 4H 2 0
Cl, + 2e"
2cr
2H.0
2
1,51
+1.2
1.36
+1,33
Br + 2e" = i 2Br"
+1.09
I 2e-ag=S2r
+0,536
i +
MnO.
2 e " : = = 2H+
Cd * + 2e"
Cd
Na* + 1 e " = 5 : Na
0.51
0,00
-0,41
-2,71
Tabelul 5
PRODUSUL DE REACIE
C 0 2 + H20
HN0 2
HN0 3
Br
Br2
Sn**
Sn *
H?0 + 0 2
H202
4
[Fe(CN)6] -
[Fe(CN)6]3
Mo3*
MoO2
Fe2*
Fe3'
1"
h
KMnO, n soluie neutr
Mn0 2
Mn *
KMnO n soluie bazic
i o ;
i o
CN"
CNO
s o
HS"
s o '
s o r
49
CHIMIE ANALITICA
I 2 W M C ^ U + 2Na 2 S 2 0 3 -2Nal + Na 2 S 4 O e
Utilizarea soluiei de l2 implic cteva dezavantaje: la pH mai mare de 8, iodul
prezint p disproporie uoar n favoarea I" i IO;; iodul este volatil, astfel c pier
derile datorate evaporrii sunt apreciabile. Soluia de iod nu este o soluie standard
dar se standardizeaz cu uurin cu ajutorul unei soluii de tiosulfat de sodiu stan
dardizat la rndul su cu o soluie standard primar de bicromat de potasiu. n iodometrie se utilizeaz ca indicator amidonul deoarece cu iodul formeaz o coloraie
albastr. Soluia de iod n iodur de potasiu este utilizat pentru dozarea unor ioni (tabe
lul 6) i a unor substane compuse (glucoza, acid uric, acid ascorbic, aldehide).
Tabelul 6
3.
Sn2*
s2s2o2-
Produsul
AsO3"
SbO 3 ;
Sn**
S
so2-
Br2+2P -+2Br + l 2
Iodul rezultat este titrat cu o soluie standardizat de tiosulfat de sodiu.
Bromul este utilizat pentru determinarea gruprilor funcionale organice (amine,
fenoli, compui organici nesaturai).
,
2,6 diclorfenollndofenolulm mediu slab acid (pH 6,9) are un caracter oxidant,
reactivul fiind utilizat pentru dozarea unor compui organici cu caracter reductor
(acidul ascorbic).
Utilizarea soluiei de 2,6 diclorfenolindofenol prezint avantajul c reactivul
funcioneaz i ca indicator; forma oxidat este de culoare albastr iar forma redus
este incolor:
50
OH
CI
CI
OH
Forma oxidat
(albastru)
OH
Forma redus
(incolor)
51
CHIMIE ANALITICA
culoar* II
Proprietatea privind reversibilitatea este cel mai greu de atins deoarece forma
final (redus sau oxidat) sufer procese adiionale Tn mediul de reacie i reacia
de oxido-reducere devine ireversibil. Indicatorii cei mai utilizai Tn volumetria bazat
pe reacii redox sunt prezentai Tn tabelul 7.
Tabelul 7
Indicatori redox
Culoarea
forma redus forma oxidat
Indicator
Albastru de metiten
Difenitbenzidina
Acid dlfenHaminosulfonic
Complex feros-o-fenantrolin
Acid N-fenilantranilic
incolor
incolor
Incolor
rou
incolor
albastru
violet (verde)
violet (verde)
albastru pal
roz
ion central
52
ION COMPLEX
ligand
acidul
ortoamonibenzoic
\
\
J
\
1
H3C C = N OH
H2N C H j C H 2 NH C H 2 CH 2 NH 2
H3CC = N OH
dietilentriamina
i*
dimetllglioxlma
53
CHIMIE ANALITICA
fwT + xHaO s = B (rvKH.OJJn cazul liganzilor monodentai, o reacie de compJexare, Tn soluie apoas, poa
te fi definit ca acea reacie Tn care una sau mai multe molecule de ap, din sfera de
coordinare a ionului metalic, este nlocuit de ctre alte molecule sau ioni.
Ugandul L (molecule neutre sau ioni) va substitui succesiv moleculele de ap
obinndu-se o sene de compleci:
[M(H i! 0)J n * + L1"" = = = f M ^ O ^ L r " + H 2 0
1
fJM(H20).,LRN + L"" = = = :
lM(H,0),4L,r*" + HaO
54
Zn * + NH 3 fZnNHjjf*
[zn *][NH3]
[Zn(NH ) f
'* [Zn(NH 3 )f*[NH 3 ]
rZn(NH )3f + N H
= 1 9 x 1 Q 2
fZnfNrgj* *
K
K
[Zn(NH 3 ) 3 f*
^ . o
i- 2,5x10*
..
"
[Zn(NH 3 ) 3 rt|NH 3 ]
,1x10
K^.K.4=4^510
55
CHIMIE ANALITICA
Cel mai utilizat acid poliaminopolicarboxilic este sarea disodic a acidului etilendiaminatetraacetic notat prescurtat EDTA (complexon III, versen, versenat de sodiu
chelaton, trilon B). EOTA are urmtoarea structur:
pu
M,CH2-CCONa
C H
*-N<CHa-COOH
*H _ M ^ O H 2 C O O H
C H
'
N<
CH2-COONa
56
CH 2
Ca
CH2-N<CH2-COO
CH2-COOH
n dozrile volumetrice care folosesc ca reactiv de titrare soluia de EDTA se
nregistreaz un salt la punctul de echivalen, acesta putnd fi detectat uor prin
metode vizuale i instrumentale precum i o vitez de formare a complexonatulu CaEDTA remarcabil.
Aceste dozri se caracterizeaz i printr-o sensibilitate apreciabil, metoda fiind
utilizat pe domeniu de concentraie semimicro-micro. Titrrile cu EDTA sunt utilizate
tn laboratorul clinic la dozarea calciului i magneziului din urin i ser sanguin.
Sarea disodic a acidului etilendiaminotetraacetic sub form de dihidratat, se
poate utiliza ca standard primar. Se recomand pstrarea soluiilor de EDTA n reci
piente de plastic, deoarece soluia se poate contamina cu ionii metalici din sticl. Nu
se utilizeaz c.cidul etilendiaminotetraacetic liber i sarea sa monosodic deoarece
aceti compui sunt insolubili n ap.
Poliaminele reprezint o clas de ageni chimici de chelatare de tipul aminelor
primare, secundare i teriare. Creterea numrului de puncte de coordinare crete
efectul de chelatare i implicit stabilitatea complexului format l sensibilitatea reac
tivului.
Cele mal utilizate poiiamine n volumetrie sunt etilendiamina, 1,3-diaminopropanul, dietilentriamina, 1,2,3-triaminopropanul, trietilentetraamina (Trien), p,p',p"-triaminotrietilamina i tetraetilenpentaamina (Tetren).
H2N - CH 2 - CH 2 - NH 2
H2N - CH 2 CH 2 CH 2 - NH 2
etilendiamina
1,3-diaminopropan
H2N-CH2-CH2-NH-CH2-CH2-NH2
H2N CH 2 CHNH 2 CH 2 NH 2
dietilentriamina
1,2,3-triaminopropan
H2N - CH 2 - CH 2 - NH - C H 2 - C H 2 - NH - C H 2 - C H 2 - NHj
trietilentetraamina
^C^-CHj-NH,
N CH2-CH2-NH2
^CH2-CH2-NH2
p,p',P"-triaminotrietilamin
57
CHIMIE ANALITICA
H,N - CH - CH a - NH - C H - C H , - NH - C H 8 - C H a - NH - C H 8 - C H - NH 2
tatraetilenpentaamin
Poiiaminele sunt ageni de complexare foarte buni dar, nu sunt reactivi de titrare
universali, deoarece formeaz compleci stabili numai cu acei ioni metalici care coordineaz amoniacul (Ni, Zn, Cu). Cele mai utilizate poliamine Tn volumetrie sunt trienul
i tetrenul.
*
4.2.1.4.3. Metode vizuale de determinare a punctului de echivalen
Cea mai utilizat metod de detectare a punctului de echivalen este metoda
indicatorilor metalcromici. *
Indicatorii metalcromici sunt compui care complexeaz ionul de dozat formnd
complexul rnetal-indicator cu o coloraie intens, diferit de cea a indicatorului ne
complexat, n general, nu se observ erori de titrare, deoarece indicatorul se adaug
tn cantiti ce nu depesc nivelul de urme. Complexul metal-indicator trebuie s
aib o constant de stabilitate optim. Dac aceasta este prea mare, proba va fi
supratitrat, iar dac este prea mic proba va fi subtitrat.
Cel mai cunoscut indicator metalcromic l constituie ionul tiocianat. Acest ion
este utilizat ia dozarea ionului Fe3* cu EDTA la pH 3, deoarece ionul Fe3* cu ionul
tiocianat formeaz un complex rou-snge. n cursul titrrii cu EDTA, ionul Fe3* este
scos din complexul Fe 3 , -SCN" formnd complexonatul Ca-EDTA incolor, cu stabi
litate mai mare:
Fe?*_ + S C N ' g = = F e 3 * - S C N ' + Fe3*
rou - snge
Fe 3 * + F e 3 * - SCN" + EDTA W = = F e 3 * - EDTA + SCN"
incolor
Momentul echivalenei este marcat de modificarea culorii de la rou intens la
incolor.
Eriocrom negru T este utilizat ca indicator la dozarea complexonometric cu
EDTA a unui numr mare de cationi. Acest indicator formeaz compleci colorai cu
diferii cationi: Ca2*, Mg2*, Zn2*, Cd2*, Ag*. Al3*. Fe3*, Co2*. Ni2*. Hg2*, lantanide, n
anumite condiii de pH. Din punct de vedere cido-bazic indicatorul este un acid
organic dlbazic slab. n funcie de pH, eriocrom negru T se prezint sub trei forme
diferit colorate:
H 2 l n d - ^ = f H lnd 2 'ii=r Ind 3 '
pH<7
rou
7<pH<11,5
albastru
pH>11,5
portocaliu
Acest indicator este utilizat la pH mai mare dect 7, cele-mai multe determinri
complexonometrioe, cu acest indicator, se efectueaz la pH 10. Pentru realizarea
58
'
______
H4lnd*
pH<9
9<pH<11,5
pH>11,5
rou-violet
violet
albastru-violet
59
CHIMIE ANALITICA
ntr-o faz greu solubil. n funcie de relaia care exist ntre produsul de solubilitate
i concentraiile-ionilor n soluie, soluiile pot fi:
a) soluH nesaturate: [A** ]m [_B~ ]* < P8
b) soluii saturate: j/T ] M { B 1 - ]" = P 8
c) soluii suprasaturate: [A"*]m JB'""]" >P 8
Precipitatele se formeaz numai n cazul n care soluia este suprasaturat.
ntr-un astfel de sistem, cnd soluia saturat a electrodului greu solubil se afl
n contact cu faza solid, dac se modific concentraia unuia dintre ioni, echilibrul se
va deplasa conform principiului lui Le Chtelier. Astfel, creterea concentraiei
ionului A"* sau a ionului B M " conduce la formarea unei cantiti suplimentare de
precipitat iar scderea concentraiei ionilor conduce la solubiiizarea unei cantiti de
precipitat. Cele dou procese au loc pn la stabilirea unei noi stri de echilibru ntre
ionii din soluia suprasaturat i ionii electrolitului greu solubil.
Analiza volumetric utilizeaz reaciile de precipitare pentru determinarea canti
tativ a diverilor constitueni, de regul ioni.
n analiza volumetric sunt utilizate numai reaciile care conduc la precipitate
practic insolubile, valoarea produsului de solubilitate s aib o valoare ct mai mic,
i care decurg rapid. n cazul reaciilor lente apare fenomenul de supratitrare datorit
absorbiei ionilor din reactivul de titrare la suprafaa precipitatului. Din acest motiv,
multe reacii de precipitare, ca de exemplu titrarea ionilor metalici cu hidroxizi alcalini,
nu sunt utilizate n practic.
Factorul care guverneaz desfurarea complet a unei reacii de precipitare
este solubilitatea precipitatului. Cu ct un precipitat este mai greu solubil, cu att
reacia de precipitare este mai complet la punctul de echivalen iar precizia de
dozare va fi mai mare.
Cu toate c sunt cunoscute foarte multe reacii de precipitare, nu toate sunt
utilizate n volumetrie deoarece nu satisfac condiiile menionate mai sus. Cele mai
utilizate reacii de precipitare n analiza volumetric sunt reaciile de dozare ale halogenilor (CI'.Br
i a pseudonatogenHor (RS",CN",SCN") cu ionul Ag* i doza
rea ionului sulfat cu ionul Ba2*.
4.2.1.5.1. Dozri volumetrice bazate pe reacii de precipitare
La dozarea ionului halogenur (X ) cu o soluie de concentraie cunoscut de
azotat de argint are loc reacia de formare a precipitatului:
X " M + A g r M - s = = AgX w
Pe msur ce se adaug reactivul de titrare, concentraia ionului X' scade n mod
treptat deoarece se formeaz compusul greu solubil AgX. La atingerea punctului de
echivalen, concentraia ionului X' nu poate fi zero, deoarece precipitatul AgX este
n echilibru cu ionii si. Cantitatea de ioni X" din soluie este determinat de
valoarea produsului de solubilitate pentru compusul AgX, punctul de echivalen al
titrrii fiind atins atunci cnd se atinge starea de echilibru pentru ionii din soluia
suprasaturat i precipitat. La atingerea punctului de echivalen se constat o
modificare brusc a concentraiei ionului X" (figura 8). Adugarea unui mic exces de
60
A(H>jlm,>
CHIMIE ANALITICA
49CX-1
Afli
P,-8,3 1 0 "
i
i
g
Afli
AgBr
Ps-5,2 1 0
P-1,8 1 0
AgBr
AgCI
/
VA9N0>(ml>
-JOGLSO]
VnKthi(ml)
62
Ag*+CI"-> AgCI,,,
P s =1,8"IO" 10
La punctul final:
Ps=t1-10_,z
rou
Cromatul de sodiu, care acioneaz ca indicator, este adugat n proba care
conine ionul de clor. Pentru a fi un indicator eficient, ionul cromat trebuie s reac
ioneze cu ionul de argint atunci cnd n soluie se atinge concentraia ionului de
argint corespunztoare punctului de echivalen. n concluzie, n cursul titrrii se
formeaz un precipitat alb de ciorur de argint iar la punctul de echivalen se va
forma un precipitat rou de cromat de argint.
Deoarece ionul cromat imprim soluiei o culoare galben, virajul de la galben
la rou este sesizat cu o eroare destul de mare. Pentru a evita eroarea de titrare care
apare datorit culorilor contrastante (galben-rou) soluia de cromat de potasiu
trebuie s aib o concentraie sczut. Din cauza preciziei sczute de determinare a
punctului de echivalen, metoda Mohr are o aplicabilitate restrns. Ea poate fi
utilizat pentru dozarea ionilor CI" i Br", dar nu i pentru dozarea ionilor I" i
SCN".
Metoda Volhard
Aceast metod este utilizat la dozarea ionului de argint cu o soluie standard
de tiocianat i folosete ca indicator o soluie care conine ionul Fe3*. Indicatorul este
adugat n soluia care conine ionul de argint, pe parcursul titrrii formndu-se tiocianura de argint:
Ag* + SCN" = AgSCN (s)
Adugarea unui mic exces de reactiv de titrare determin apariia brusc a unei
culori roii datorate complexrii ionului Fe3*:
Fe 3 * + SCN" = = = [Fe(SCN)F+
rou
Aceast metod se poate folosi i la dozarea halogenurilor cu o soluie stan
dardizat de azotat de argint, procedeul fiind bazat pe titrarea indirect. Pentru a
realiza o astfel de dozare, n soluia care conine ionul X" se adaug un volum exact
msurat de soluie standard de azotat de argint n exces. Ionii de argint nereacionai
(aflai n exces) sunt titrai cu o soluie standard de SCN", utiliznd ca indicator ionul
Fe3*.
63
CHIMIE ANALITICA
cr or
+cr
64
Ag*
Ionii de dozat
Indicator
AgN03
Br"
Hg 2 (N0 3 ) 2
Rou Congo
Hgf
SCN", CI", Br", 1"
AgNCv,
Diclorfluorescein
AgN03
Difenilcarbazon
AgN03
Albastru de bromtimol
SCN-
AgN03
Eozin
Br", r, SCN"
Albastru de bromfenol
Fluorescein
Hg(N0 3 ) 2
Ag+
4
so2-
Ag+
Ba(OH)2
65
CHIMIE ANALITICA
66
x
m
M
Mc
67
E = hv = mc2
unde, hreprezint constanta lui Planck i are valoarea 6 . 6 3 - 1 0 " erg-s.
ntre lungimea de und a unei radiaii i masa m a particulei asociate exist
relaia:
27
69
CHIMIE ANALITICA
mc
nlocuind produsul mc n relaia lui Planck se obine relaia existent ntre
energia unei particule (E) i lungimea sa de und l:
E-h.
X.
Din expresia obinut se poate observa relaia de invers proporionalitate care
exist ntre energie i lungime de und.
n funcie de lungimea de und, radiaiile electromagnetice au fost mprite n
domenii spectrale. n figura 11 sunt prezentate domeniile spectrale i implicaiile pe
care le prezint la nivel molecular absorbia unei radiaii electromagnetice de ctre
materie.
~ " T
Tranziii ale ;
electronilor .
de pe straturile
interne
j
Tranziii ale
electronilor
de valen
Vibraii
moleculare
Rotaii
moleculare
70
ORBITALI DE ANTILEGTUR
..
ORBITALI DE NELEGTUR
n
O
ORBILTAU DE LEGTUR
CHIMIE ANALITICA
PROBA
A = lgk
nlocuind pe I, tn expresia absorbantei obinem relaia matematic a legii
Lambert-Beer:
to^-e-c-d
...
'
k constant de proporionalitate
0,1 %
Concentrai*
CHIMIE ANALITICA
Absorbant
(DO)
260
280
300
nm.
200
250
300 nm
74
Ama-
1
)/
Surs de
radiaii
Monocromator
Cuv
Detector
nregistrator
CHIMIE ANALITICA
Monocromatorul are rolul de a separa radiaia policromatic n radiaii monocromatice i de a selecta radiaia monocromatic adecvat. Cei mai utilizai monocromatori sunt prismele i reelele de difracie.
Cuvele pentru prob trebuie s fie confecionate din materiale transparente n
domeniul lungimii de und analizate. Oin acest motiv pentru domeniul vizibil se utili
zeaz cuve de sticl iar pentru domeniul ultraviolet cuve de cuar.
Detectoarele cele mai utilizate sunt celule fotoelectrice pentru domeniul vizibil i
fotomultiplicatoare pentru ultraviolet.
.
5.1.1.2. SPECTROSCOPIA DE ABSORBIE ATOMIC
Absorbia unei cuante de energie de ctre atomi determin tranziii electronice.
Comparativ cu tranziiile electronice care au loc la nivel molecular, aceste tranziii
sunt limitate ca numr i sunt asociate cu un numr restrns de linii de absorbie.
Radiaia cea mai puternic absorbit corespunde ia o tranziie electronic de la starea
fundamental la starea excitat i este cunoscut ca linie de rezonan. Benzile de
absorbie sunt corespunztoare excitrii electronilor de valen, energia necesar
tranziiilor fiind diferit de la un element la altul.
Spectroscopia de absorbie atomic este o metod de determinare a concentra
iei unui element, prin msurarea absorbiei unei radiai) caracteristice de ctre atomii
elementului adui n stare gazoas. Absorbia radiaiei respect legea Beer fiind di
rect proporional cu numrul de atomi din unitatea de volum i cu grosimea stratului
de substan:
A=*kNd
unde: '
N = numrul de atomi din unitatea de volum
d grosimea stratului de substan
Deoarece absorbia nu este dependent de temperatur i de energia de exci
tare, procedeul cel mai simplu de a trece b substan n stare atomic const n
nclzirea acesteia la o temperatur ridicat. Din acest motiv, n spectroscopia de
absorbie atomic cuvele cu soluie sunt nlocuite cu flacra n care se atomizeaz
proba. Dac un fascicul de lumin alb trece printr-o astfel de flacr, atomii aflai n
stare fundamental vor absorbi o radiaie de lungime de und caracteristic pentru
fiecare element, absorbiile fiind reflectate n radiaia transmis.
Spectroscopia de absorbie atomic poate fi utilizat n analiza calitativ prin
determinarea lungimii de und a radiaiei absorbite precum i n analiza cantitativ
prin determinarea intensitii radiaiei absorbite.
Schema unui spectrofotometru de absorbie atomic este redat n figura 18.
Sursele de radiaii utilizate n spectroscopia de absorbie atomic sunt, n gene
ral, lmpi cu catod scobit (cavitar). Acestea sunt alctuite dintr-un catod n form de
U construit din elementul ce urmeaz a fi determinat i dintr-un anod de wolfram.
Electrozii sunt plasai ntr-un tub de sticl ncrcat cu un gaz inert.
Sursele de excitare de sensibilitate mare sunt tuburile de excitare cu micro
unde, fr electrozi. Atomizoarele cele mai utilizate sunt arztoarele cu flacr. Spectrofotometrele de nalt rezoluie utilizeaz dispozitive de atomizare fr flacr care
prezint avantajul utilizrii unui spaiu nchis sau semideschis, n scopul atomizrii,
evitnd fenomenul de diluare spaial a atomilor.
Cu ajutorul acestei metode se pot determina aproximativ 60 de elemente.
76
Modulator
Flacra
Monocromator
Detector
Prob
Surs de
radiaii
Combustibil
energie
termic
A*
A + hv
77
CHIMIE ANALITICA
Detector
Proba
Combustibil
Sursa de cldur
COMBUSTIBIL OXIDANT
TEMPERATUR
C
Propan
aer
Butan
aer
Acetilen
aer
2300C
Acetilen
oxid de
azot
3000C
1900C
OBSERVAII
temperatura sczut determin
excitarea unor atomi uor excitabiii ca: Na, Li, K i Ca
temperatur medie corespunz
toare majoritii emisiilor;
se pot excita i atomii de Mg, Mn
iSr
temperatura ridicat determin
excitarea elementelor retractile
ca P
Emisia tn plasm
Plasma este produs prin cuplarea unui gaz ionizabil cu cmpul electric ai unei
surse de microunde; electronii cu vitez mare ionizeaz gazul producnd plasma.
Fa de flacr, temperatura n plasm este mult mai ridicat i excitarea atomilor
mai puternic, ceea ce determin creterea sensibilitii.
5.1.1.4. SPECTROSCOPIA DE FLUORESCENT ATOMIC
Spectroscopia de fluorescent atomic este o combinaie ntre procesele de ab
sorbie i emisie a luminii. Procesul de fluorescent const n absorbia unei radiaii
luminoase de ctre un atom aflat n starea fundamental (A) i trecerea ntr-o stare
excitat (A*). Revenirea atomului la starea fundamental se face prin emisia unei
radiaii de o anumit lungime de und. Schematic procesul de fluorescent poate fi
redat astfel:
A + hX.
- A*
A + h?,
radiai
Proba
79
CHIMIE ANALITICA
80
M
N*
M*
eliberare de
electroni
captare de
electroni
Figura 21 - Schema unei celule electrolitice (A) i a unei celule galvanice (B)
n mod uzual, electrodul indicator este constituit dintr-un metal nobil (Pt, Ag) i
are rolul de a capta electronii care particip la reacie. Ca electrozi indicatori se pot
utiliza i electrozi de crbune sau electrozi membran ion-selectiv, pentru cationi sau
anioni, iar n pH-metrie electrodul de sticl sau de platin pretratat.
Electrozii de referin cei mai utilizai sunt electrodul de calomel i electrodul
Ag-AgCI.
Electrodul de calomel este alctuit dintr-un fir de platin care face contactul
electric cu un electrod care este alctuit dintr-o past de mercur metalic, ciorur mercuric (calomel) i ciorur de potasiu (figura 22). Tubul de sticl n care se afl firul
de platin i pasta de calomel este umplut pe jumtate cu o soluie saturat de
ciorur de potasiu i are rolul de a ntreine contactul electric direct cu dopul poros.
Cele mai cunoscute aplicaii ale poteniometriei sunt determinarea pH-ului i
stabilirea punctului de echivalen n volumetrie.
5.1.2.1.1. Determinarea pH-ului
Cea mai utilizat metod de determinare a pH-ului este metoda cu electrod de
sticl. Acest electrod este constituit dintr-un electrod Ag-AgCI imersat ntr-o soluie
de referin de acid clorhidric (0,1M), coninut ntr-o membran de sticl (figura 23
A). Membrana este confecionat dintr-o sticl special, n mod uzual un aluminosilicat hidratat coninnd ioni de sodiu sau calciu. Aceast membran este permea
bil selectiv pentru ionii de hidrogen. Potenialul dezvoltat la suprafaa membranei
este proporional cu concentraia ionilor de hidrogen din soluia testat i comparat
cu soluia acid de referin din interiorul electrodului. Acest potenial poate fi deter
minat fa de electrodul de referin (electrodul de calomel) cu ajutorul unui voltmetru
de impedan nalt. Pentru nlesnirea operaiei electrodul de sticl este de cele mai
81
CHIMIE ANALITICA
Fir platina
Marcur
Pasa
Soluia saturat da
cloruri da potasiu
Cloruri da pot lu solid
Dop poros
Electrod da Ag-AgCI
Sotute interni da
rafarlni do HCI 0,1*1
Mombrani de sticli
multe ori combinat cu electrodul de referin Tn acelai tub de sticl (figura 23 B).
Electrodul de sticl trebuie pstrat fn ap ntre utilizri pentru a menine membrana
permanent hidratat.
82
3)
Figura 23 - B. Electrodul
combinat
Electrod de calomel
Dop poros
KClaoild
Electrod de Ag-AgCI
Soluie de referina
de HCI 0,1M
Membrana de aticii
83
CHIMIE ANALITICA
RwtotMitfvartaMIi
AAAAAAAAAAAAAA
Gatvanomotru
Electrozi
P"14
12
10
8
7
6
t
|
.1
C
O
84
IONUL TESTAT
Electrozi ion-selectiv
MEMBRANA
cr
Br"
AgCI/Ag2S
AgBr / Ag2S
IONI DE INTERFEREN
I , Br", CP
2
s , r
s2,r
2
s-
r
2
s-
Agl/Ag^S
Agl/Ag 2 S
Cu2*
Ag2S / CuS
Hg2 ,Ag*
Pb2*
Ag 2 S/PbS
Hg 2 \Ag*
Cd2*
Ag 2 S/CdS
AgaS
Ag*
Electrozi cu membran lichid
K*
2
Ca *
valinomicin n difenileter
dialchilfosfat de calciu n
dioctilfenilfosfonat
CHIMIE ANALITICA
Electrodul Intern
de referina
Membrana lon-selectlvi
tudine structural cu ionii mobili din reea pot avea acces din afara membranei Tn
interior i vor conferi membranei o specificitate ridicat. La imersarea electrodului Tn
soluia de analizat se stabilete un echilibru Tntre ionii mobili din cristal i ionii similari
din soluie determinnd crearea unui potenial la suprafaa membranei care poate fi
determinat printr-o metod uzual.
Cele mai simple membrane solide sunt cele destinate determinrii ionilor
comuni cu ionii mobili din cristali i sunt confecionate dintr-un cristal alctuit dintr-o
singur substan. n figura 27 este prezentat schema unui electrod ion-selectiv
specific pentru ionul de Ag* a crui membran este confecionat din sulfura de
argint. Ionul mobil din reea, ionul de argint, trece In soluie iar ionii de argint din solu
ie trec prin membran, la stabilirea echilibrului la suprafaa membranei generndu-se o diferen de potenial.
n cazul in care membrana solid este constituit din mai multe substane, ionul
de analizat poate s reacioneze cu unul dintre ionii din membran determinnd
alterarea activitii ionului mobil din membrane. Astfel, electrodul ion-selectiv cu
membran de AgCI/Ag2S la imersarea Intr-o soluie care conine ionul C determin
o reacie a ionului Ag* cu ionul CI'. Aceast reacie genereaz scderea activitii
ionului de argint i implicit modificarea diferenei de potenial de la suprafaa
membranei (figura 28).
Electrozii cu membran lichid sunt confecionai dintr-un material ion-selectiv
dizolvat ntr-un solvent nemiscibH cu apa. Lichidul este inserat ntr-o membran po
roas, inert, care se afl n contact cu soluia intern de referin a electrodului pe o
fa l cu soluia care se testeaz pe partea opus. Ionii din lichidul de referin se
vor repartiza ntre cete dou lichide nemiscibile (faza apoas i faza organic) con
ferind electrodului un potenial propriu. Prezena ionului de testat n prob afecteaz
activitatea ionilor din membran determinnd schimbarea diferenei de potenial la
suprafaa membranei.
86
Afl*
Ag*
Ag*
Electrod
cr
Figura 28 - Schema electrodului ion-selectiv cu membran de AgCI / Ag2S
87 .'
O M M E AIIMJT4CaA
Soluie de referina
Ionului de analizat
; MEMBRAN :.
SOLVENT MEMBRAN
ION-SELECTIV ',
ION OE TESTAT
+ 2H,0*-
ureaz
*- C 0 8 + 2NH + + H il O
88
\
K
89
CHIMIE ANALITICA
sau
l =AV
~*AD + C'B
90
V reactiv (cm*)
Acid 1 Acid |
tare ! slab
Exces
V reactiv (CITI1)
Vreactiv (cm )
Componenii biosenzorilor
COMPONENT
Biocatalizatori
Bioreceptori
EXEMPLE
Enzime
Celule animale, vegetale, microbiene
Organite subcelulare
Anticorpi
Lectine
Receptori membranari
Acizi nucleici
Molecule sintetice
91
CHIMIE ANALITICA
Biocatalizatorii determin producerea unei reacii chimice cu eliberarea produilor de reacie. Enzimele constituie cei mai folosii biocatatizatori cu toate c enzimele purificate nu sunt satisfctoare fn toate cazurile. n aceste cazuri preparatele
celulare care conin enzimele necesare Tn mediul lor natural, conduc la rezultate
superioare. Aceste preparate reduc specificitatea dar pot fi utilizate cu succes pentru
efectuarea analizelor referitoare la substane de poluare.
Bioreceptorii au proprietatea de a lega ireversibil anumite substane cu care
prezint complementaritate structural. O categorie foarte dezvoltat de biosenzori o
constituie biosenzorii cu bioreceptori formai din anticorpi monoclonali. Bioreceptorii
sunt utilizai la confecionarea biosenzorilor capabili s detecteze: medicamente, hor
moni, virui i bacterii patogene.
Transductori)'transform detecia componentului biologic ntr-un semnal electric
dependent de concentraie. n funcie de mecanismul de efectuare a transduciei ei
sunt clasificai n transductori electrochimici, optici, termici i piezoelectrici.
Tipuri de biosenzori
-!
Biosenzorii electrochimici cei mai utilizai sunt cei cu enzime deoarece multe
reacii enzimatice decurg cu formare sau consum de specii electroactive care pot fi
monitorizate ampermetric, poteniometric sau conductometric.
Biosenzorii ampermetricidetermin curentul rezultat la aplicarea unei diferene
de potenial ntre transductor i electrodul de referin. Curentul este produs n urma
oxidrii la anod sau a reducerii la catod a speciilor analizate. Cantitatea de curent
este dependen de concentraia speciilor de la suprafaa electrodului. Acest tip de
transducere este aplicat pentru dozarea substanelor care au caracter reductor sau
oxidant.
De exemplu, biosenzorul utilizat la dozarea glucozei din snge are ca funda
ment reacia de oxidare a glucozei n prezena glucozoxidazei:
glucoza + Q2 -> acid gluconic + H 2 0 2
Cu ajutorul unui electrod (electrodul Clark) se determin scderea curentului
datorat consumului de oxigen.
Biosenzorii poteniometrici determin diferena de potenial dintre electrodul
transductor i electrodul de referin. Aceti biosenzori utilizeaz electrozi ion-selectiv
i electrozi sensibili la gaze.
5.1.3. METODE ANALITICE DE SEPARARE
Metodele analitice de separare au ca scop separarea unui amestec omogen
sau eterogen n unitile sale componente. Exist o multitudine de procedee de
separare, unele.cunoscute de foarte mult timp (distilarea, extracia cu solveni, preci
pitarea), Tn timp ce altele au fost elaborate recent (cromatografia de gaze, electroforeza n geluri).
n cadrul acestui capitol vor fi discutate metodele de separare care prezint
interes pentru laboratorul sanitar-veterinar i anume, cromatografia i electroforeza.
92
5.1.3.1. CROMATOGRAFIA
Cromatografia este o metod fizico-chimic de analiz care se bazeaz pe
separarea n zone spaiale distincte a componenilor unui amestec, la trecerea ames
tecului printr-un mediu n care componenii se deplaseaz cu viteze diferite.
Termenul de cromatografie provine de la cuvntul grecesc chtoma care n
seamn culoare. Pionierii cromatografiei au fost Oavid Day i Mihail vet. David
Day a reuit s fracioneze ieiul brut pe pmntul Fuller iar vet a separat pig
meni! dintr-un extract eteric de plante pe o coloan umplut cu carbonat de calciu.
n cromatografie exist dou faze: faza staionar (taxa. fix) i faza mobil
(eluentul).
Faza staionar este reprezentat de materialul prin care circul proba i care
asigur separarea.
Faza mobil este amestecul lichid (gazul) care transport proba la suprafaa
fazei staionare.
Clasificarea metodelor cromatografice
1. Dup mecanismul de separare metodele cromatografice pot fi clasificate
astfel:
a) cromatografie de adsorbie
b) cromatografie de partiie
c) cromatografie de schimb ionic
d) cromatografie de excludere molecular
e) cromatografie de afinitate
2. Dup starea de agregare a celor dou faze, metodele cromatografice sunt
clasificate n metode cromatografice de tip solid-lichid, solid-gaz, lichid-lichid
i lichid - gaz.
5.1.3.1.1. Cromatografia de adsorbie
Cromatografia de adsorbie se bazeaz pe adsorbia difereniat a componen
ilor unui amestec pe un suport adsorbant (faza staionar).
ntre suportul adsorbant i substanele care se deplaseaz peste faza staio
nar se stabilesc interacii intermoleculare de tipul: dipol-dipol, van der Waals, leg
turi de hidrogen. Aceste interacii conduc ia o adsorbie fizic reversibil. n cazul n
care s-ar forma legturi chimice, procesul s-ar numi chemosorbie. Deoarece chemosorbia este un proces ireversibil, nu prezint interes pentru cromatografie.
Deoarece adsorbia substanelor de faza staionar este reversibil, sub aciu
nea fazei mobile, acestea se vor deplasa la suprafaa fazei staionare n urma unor
procese de adsorbie-desorbie repetate. Vitezele de deplasare ale componenilor vor
fi dependente de tria forelor de adsorbie i deci de viteza procesului de adsorbiedesorbie. De exemplu, dac se dorete separarea componenilor A i B dintr-un
amestec, componentul A, adsorbit mai puternic, va prezenta o vitez de deplasare
mult mai mic dect componentul B care este adsorbit slab (figura 32).
n cromatografia de adsorbie se folosesc ca adsorbani (faza staionar) sub
stane cu suprafa util mare (poroase) i cu grupri funcionale polare ca: celuloza,
alumina, silicagelul, crbunele.
93 .
CHIMIE ANALITIC
ELUENT
NA
A
-"^1
FAZA SI
ELUENT
O)
FAZA
ELUENT
&3=
94
95
CHIMIE ANALITICA
Tabelul 12
Tipuri ale gelului utilizate n cromatografia de excludere molecular
NUMELE GELULUI
SEPHADEX
G -10 -> G -200
BIO - GEL
~* F300
SEPHAROSE
6B-+2B
NATURA CHIMIC
dextran nreelat
700-+200.000
poiiacrilamid
nreelat
200 -* 400.000
aga roz
4. 1 0 r - + 4 - 1 0 *
Sephadexuf este o substan bldrofil, insolubil care deriv de (a dextran (poliglucid al glucozei cu formula brut (CeH,0O6) i care este constituit din maoromolecule filiforme legate ncruciat).
Golurile pe baz de poiiacrilamid (Bio-gel) sunt preparate prin copolimerizarea
acriiamidei cu N.N'-metilen-biacrilamid. Gelul obinut se prezint sub forma unei
reele tridimensionale, gradul de nreelare fiind determinat de raportul molar al celor
doi monomeri.
Sepharoza, substan care deriv de la poliglucldul agaroza, permite fraciona
rea amestecurilor formate din biomolecule cu mase moleculare foarte mari, la limita
96
Polimer
insolubil
CHIMIE ANALITICA
Rezervor
jjgntru
gaz p'.rtto-
nclzitor
nclzitor
nclzitor
98
nregistrator
Principiul de separare este urmtorul: faza mobil (gazul purttor) curge prin
sistem transportnd proba, care a fost introdus n blocul de injecie. n coloan,
separarea componenilor are loc datorit adsorbiei sau repartiiei difereniate a lor n
faza staionar lichid sau solid. Dup separare, fiecare component este detectat
pe msur ce prsete coloana.
Gazulpurttor(faza mobil) este, n mod obinuit, heliu sau azot (gaze inerte).
Blocul de injecie este amplasat astfel nct proba s fie introdus direct n
gazul de transport. In blocul de injecie are loc evaporarea instantanee a probei,
astfel nct trecerea n coloan s se fac rapid.
Coloanele folosite n gaz-cromatografie sunt confecionate n mod obinuit din
evi de oel inoxidabil sau cupru, cu un diametru de 1,5-8 mm i lungimea de 1-4 m.
Coloanele sunt umplute cu un material solid (cromatografie solid-gaz) sau cu un solid
inert acoperit cu un strat lichid (cromatografie gaz-lichid).
Coloana este plasat ntr-un cuptor, astfel ca temperatura s fie reglat i con
trolat (25-400C). Pentru probe biologice sau pentru probe care reacioneaz cu
oelul inoxidabil sau cupru se folosesc, n mod frecvent tuburi de sticl.
Coloanele pot fi umplute cu diferite substane care au rolul de a funciona ca
faze staionare: adiponitril, asfalt, cear de albine, carbowax, cauciuc siliconic, alege
rea acesteia fiind fcut n funcie de natura amestecului care trebuie separat.
Cauciucul siliconic este utilizat ca faz staionar n gaz-cromatografie pentru
analiza alcoolilor, compuilor aromatici, compuilor biliari, medicamentelor, alcaloizilor, acizilor grai, pesticidelor, vitaminelor.
Detectorii au rolul de a analiza gazul care prsete coloana cromatografic i
de a transmite la nregistrator informaia primit. Detectoarele pot fi: cu conductibilitate termic, cu ionizare n flacr i cu captur de electroni.
Detectorul cu conductibilitate termic are ca fundament principiul: un obiect n
clzit pierde cldura cu o vitez determinat de compoziia gazului nconjurtor. Aa
dar, viteza cu care se pierde cldura reprezint o msurare a compoziiei gazului.
Dac peste filamentul detectorului trece gazul purttor, n condiii constante, atunci
pierderea de cldur este constant. Schimbarea compoziiei gazului din jurul fila
mentului determin modificarea temperaturii i implicit modificarea rezistenei fila
mentului. Aceast modificare de rezisten este evaluat i pus n eviden de nre
gistrator. '
Detectorul cu ionizare n flacr const dintr-o flacr H2-aer amplasat ntr-un
cmp electrostatic. La trecerea gazului purttor, n regim constant, peste flacr cu
rentul electric rmne constant. Cnd o substan organic prsete coloana, va fi
transportat de gazul purttor n flacr unde are loc combustia sa. n urma com
bustiei se produc ioni i electroni care vor modifica curentul electric. Modificarea
curentului electric, determinat cu un set de electrozi, este proporional cu concen
traia probei.
Detectorul cu captur de electroni funcioneaz pe baza absorbiei de electroni
de ctre compuii care au afinitate pentru electroni (de exemplu, halogenii). Acest
detector este constituit dintr-o surs radioactiv care emite electroni, un catod care
respinge electronii i un anod care colecteaz electronii. "
Absorbia electronilor de ctre anod are loc n mod constant la trecerea gazului
purttor. Pe msur ce un compus intr n detector, electronii vor fi absorbii avnd
loc o scdere a numrului de electroni care ajung la anod i deci o scdere a curen
tului electric. n acest mod detectorul va prezenta un rspuns dependent de compo
ziia gazului care prsete coloana cromatografic. Detectorii cu captur de elec-
99
CHIMIE ANALITIC
troni sunt utilizai la analiza pesticidelor, deoarece clorul, care intr tn constituia lor,
prezint afinitate pentru electroni.
nregistratorul, n conformitate cu informaia primit de ia detector, va nregistra
rspunsul detectorului n funcie de timp. Aceast nregistrare se numete cromatogram i se prezint sub forma unei linii curbe cu maxime i minime numite picuri.
, Analiza calitativ
Pentru efectuarea unei analize calitative se compar timpii de retenie ai com
ponenilor de analizat cu timpii de retenie ai unor etaloane. n figura 37 este ilustrat
o cromatogram pentru un amestec de alcooli necunoscui i o cromatogram pentru
o serie de alcooli cunoscui (etaloane). Prin comparare se pot identifica alcoolii
necunoscui din probe.
Alcooli
necunoscui
S
Injectare
_L!
0 n6 .12 '18
>i
Etaloane
24
30
36
A
B
C
D
E
min
Alcool metilic
Alcool etilic
Alcool n-propilic
Alcool n-butllic
Alcool n-amilic
Injectare
l_
12
18
24
30
36 min
.2*.
A,
100
IOO
T i m p de retenii
A _ p-in3
*3 " 2
5.1.3.2. ELECTROFOREZA
Electroforeza reprezint o metod fizico-chimic de analiz bazat pe feno
menul migrrii particulelor ncrcate electric, ntr-un mediu solid sau lichid, sub aciu
nea unui cmp electric extern.
Denumirea acestei metode de separare provine de la cuvntul grecesc elektron
(electric) i de la cuvntul latin phore (purttor).
n 1937 Arene Tiselius a pus la punct tehnica separrii electroforetice ntr-un
mediu lichid numit electroforeza n front mobil de lichid. Pentru realizarea electroforezei Tiselius a utilizat un tub de forma literei U n care a introdus proba de anali
zat format dintr-un amestec de proteine, tubul fiind apoi umplut cu o soluie tampon.
La aplicarea unei diferene de potenial la capetele tubului s-a reuit separarea
proteinelor din amestec datorit vitezelor diferite cu care au migrat. Cercetrile ulteri
oare au condus la diversificarea tehnicilor electroforetice, la creterea capacitii lor
de separare, n special prin introducerea unor medii poroase stabilizante.
5.1.3.2.1. Bazele fizice ale electroforezei
Prin suspendarea unei particule coloidale ncrcate electric ntr-un mediu lichid,
particula va fi nconjurat de ioni de semn contrar din mediul cu care se afl n con
tact (figura 39). n acest mod n jurul particulei se va crea un strat ionic imobil format
din ionii adsorbii la suprafa i un strat mobil care devine din ce n ce mai mobil o
dat cu creterea distanei fa de suprafaa coloidului. Sarcina particulei coloidale,
dependent de compoziia sa chimic i de pH-ul mediului lichid, este numit
potenial electrochimie.
Potenialul electrochimie al coloidului scade la creterea concentraiei srii din
soluia tampon datorit efectului de neutralizare produs de ionii adsorbii. Sarcina
101
CHIMIE ANALITICA
Stratul mobil
POTENIAL
ELECTROCHIMIC
POTENIAL
2ETA
102
_ v __d_
~E~tE
cm2
volts
Ionii de sarcin contrar care intr n constituia stratului fix i mobil tind s
antreneze particula n direcie opus sensului ei de migrare, determinnd o micorare
a mobilitii electroforetice.
Potenialul eiectrocinetic este potenialul de sarcin contrar care se creaz n
jurul particulei coloidale i care tinde s-i frneze micarea. Acest proces de frnare
va fi direct proporional cu concentraia ionilor din tampon i implicit cu molaritatea
tamponului. Tria ionic a tamponului (u) este jumtate din suma produsului dintre
molaritatea tamponului (e) i sarcina ionilor din soluie la ptrat (C):
Termenul ^ este necesar deoarece numai jumtate din ionii soluiei tampon sunt de
sarcin opus coloidului i sunt capabili s modifice sarcina particulei.
De asemenea, unele medii utilizate ca suport de migrare (hrtia de filtru) se
ncarc negativ la pH-ul la care se face electroforeza. Din aceast cauz, lichidul
care mbib S u p o r t u l de migrare se ncarc pozitiv i va migra spre electrodul nega
tiv. Acest fenomen de deplasare a lichidului n sens invers se numete electroendoosmoz i tinde s micoreze mobilitatea electroforetic a particulelor.
Un alt factor care afecteaz deplasarea n cmp electric a particulei coloidale
este cldura dezvoltat ca urmare a trecerii curentului electric. Acest factor determin
creterea conductivitii electrolitului din soluie i de asemenea creterea curentului.
Aceast cretere a temperaturii produce evaporarea apei din soluia tampon determi
nnd creterea concentraiei acesteia, modificarea potenialului zeta i conductivitii
tamponului. Din acest motiv se impune controlul temperaturii i meninerea constant
fie a voltajului, fie a curentului.
Schema celui mai simplu tank (cuv) de electroforeza este prezentat n figura
40.
Electrod
Soluie tampon
Suport
103
CHIMIE ANALITIC
jCHJ
CH, C
CH
H
I
C =
C H ! C H ,
c*=oi
I
NH,
N H
I
I
CH,
I
|
I
I
CH5
CH
I
C
c=o
I
NH,
I
.
u!
N H
C H
C H
C H . CH
"
I
N H
c = o
I
NH.
CHIMIE ANALITIC
Metoda eluiei presupune decuparea spoturilor i eluia compuilor ntr-un volum exact msurat de solvent. Pentru fiecare soluie se determin absorbanta.
Suma tuturor extinciilor (absorbantelor) corespunztoare pentru spoturile obi
nute este considerat 100% iar distribuia procentual a componenilor separai se
calculeaz dup relaia:
%C,
E,-100
a2
ai
Albumln
te
Procentul corespunztor arioi flecarul pic
19
11
BIBLIOGRAFIE
SELECTIV