La Fotometra es la ciencia que se encarga de la medida de la luz, como el brillo
percibido por el ojo humano. Es decir, estudia la capacidad que tiene la radiacin electromagntica de estimular el sistema visual. La mayora de las mediciones que se realizan actualmente, en los laboratorios clnicos son fotomtricas, de ah que la calidad analtica dependa entre otras cosas, del tipo y estado en que se encuentre el instrumento utilizado. En cuanto al error instrumental o error fotomtrico T se define como la precisin que tiene un instrumento a la hora de realizar mediciones analticas. Experimentalmente se obtiene midiendo la transmitancia de unas 10-20 porciones de una solucin y calculando la desviacin media de esas mediciones. Cada medida debe incluir las operaciones de vaciado, llenado y colocacin de la celda en el portaceldas, as como el ajuste del 0.0% T (con el obturador) y del 100%T con el disolvente puro. El error fotomtrico o instrumental indica la repetitividad de las lecturas en un espectrofotmetro.
La exactitud y la precisin de un anlisis espectroscpico frecuente, est limitado
por la incertidumbre o ruido asociado al instrumento. Las mediciones en la espectroscopia implican un ajuste a un 100% T y finalmente la medicin de la transmitancia o absorbancia de la solucin. El ruido que se genera en cada uno de los procesos espectroscpicos da finalmente un valor total de incertidumbre en la medicin, a este total se le conoce como error fotomtrico. Como consecuencia de este tipo de error que se ha generado se le conoce como error fotomtrico, la precisin en las lecturas de absorbancia, estar limitada por altos y bajos valores de esta misma. Otra forma de interpretar el hecho de que a bajos y altos valores de absorbancia o transmitancia, el grado de incertidumbre sea grande, es considerado que a baja absorbancia la intensidad del haz incidente y transmitido es prcticamente igual y el detector pasa a percibir un error grande al haber detectado la intensidad de dos haces muy semejantes. A altos valores de absorbancia la energa transmitida es muy pequea que hace que no sea posible que se pueda medir con la precisin que es necesaria. Las determinaciones fotomtricas dependen de que la magnitud de la absorbancia sea directamente proporcional a la concentracin del compuesto de la muestra a medir, siendo necesario que se elabore una curva de calibracin. Desafortunadamente, lo que ha sido la comercializacin de juegos de reactivos ya preparados ha propiciado una prctica mala de laboratorio, que es el uso del factor de calibracin qumica, que proviene de un slo patrn de concentracin conocida en sustitucin de las curvas de calibracin, olvidando que esto slo es vlido cuando la relacin entre absorbancia y concentracin es una lnea recta que parte de cero. Lo que se mide fsicamente en todo fotmetro es la intensidad de la luz transmitida, que esta se expresa en funcin de la luz incidente, en la relacin que es lo que llegamos a conocer como transmitancia. La luz incidente puede considerarse como 1 100, por lo que la T se multiplica por 100 para obtener el porciento de transmitancia (%T). Evidentemente que la luz transmitida resulta de la resta de otros componentes como la luz refractada y la reflejada, mismos que pueden ser ms importantes en celdas y equipos en mal estado y afectar las mediciones fotomtricas La mayor precisin que se puede obtener va en un rango del 15% de transmitancia a un 65% de esta misma, por lo que si se desea obtener un resultado de alta precisin, es conveniente que se diluya o se concentre la muestra a valorar, hasta que la absorbancia o transmitancia de esta muestra se encuentre en el rango de mayor precisin, que es el del 15%.
El clculo de un error fotomtrico se puede valorar mediante la medicin de su
estndar, este se tiene que medir 10 veces y es preferible que se utilice el que se encuentra justo en la mitad de la curva de calibracin en la misma celda. Es importante tener en cuenta, que la exactitud de las mediciones fotomtricas depende tambin de otros factores como: la exactitud de la escala de longitud de onda, la linealidad de la respuesta del detector, la exactitud al hacer la lectura de absorbancia, la magnitud de la radiacin dispersa y el ancho de banda efectivo. Por otra parte, la precisin depende de la respuesta aleatoria del detector utilizado por el tipo de ruido instrumental que lo caracterice.
CONCLUSIN
Los errores instrumentales o errores fotomtricos se pueden dar a muchos tipos
de casos, no siempre se dan por el analista o en las condiciones de la muestra, en la mayora de estos casos se debe a la mala calibracin de los equipos, como lo es en la medicin de la curva de tolerancia. Tambin en las medidas de la absorbancia y la transmitancia que en estos casos son muy importantes ya que son el valor principal de la mayora de estos casos. El buen uso de los reactivos y los materiales toman un papel importante en los errores fotomtricos que se pueden llegar a dar. El equipo que se utiliza en estos tipos de espectroscopia tambin pueden llegar a ser un factor importante en el error, es por ello que se debe tener y llevar una condicin optima de cada de uno de los factores limitantes que estn incluidos y pueden llegar a afectar.