Sunteți pe pagina 1din 136

www.cartiaz.

ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

Microbiologie
Omul triete ntr-un mediu populat de o imensitate de microorganisme, fiind el
nui purttorul unora dintre ele. Dimensiunile lor reduse au fcut ca ele s scape mult
timp observaiei, dar rezultateleactivitii lor au fost sesizatedin totdeauna. Astfel, omul a
selectat empiric microorganisme pe care le-a folosit n scopuri practice ca, de pild,
dospirea pinii, fermentaia vinului, a berii etc., practicnd n acelai timp incontient
tehnici de sterilizare,care i-au permis conservareapentru un timp ndelungat a alimentelor.
Rolul microorganismelor n etiologia bolilor infecioase a fost descoperit doar n a
doua jumtate a secolului trecut, cu toate c de-a lungul timpului muli cercettori au
sugerataceastposibilitate.
Subiect paramedical la nceputurile ei, microbiologia devine o tiin de sine
stttoare la sfritul secolului al XIX-lea n urma descoperirilor lui Pasteur, precedate de
multe secole de observaii i cercetri.Ea se ocup cu studiul organismelor microscopice.
Astzi microbiologia este o tiin foarte vast, cu multe ramuri cum sunt:
microbiologia medical (uman i veterinar), microbiologia plantelor, microbiologia
industrial, microbiologia solului etc. Noi ne vom opri asupra microbiologiei medicale care
studiazmicroorganismeleimplicaten etiologia infeciilor la om.
1. CONCE P T U L

DE CONTAG I U N E

Noiunea de contagiune este foarte veche, referiri la contagiozitatea leprei fiind


prezente n Vechiul Testament, iar bolile contagioase, care au decimat populaia, precum
i cauzelelor au constituit o permanent preocupare a medicilor i a filozofilor din cele mai
vechi timpuri.
n cutrilelor seremarcunelepreviziuni asupraexisteneimicrobilor.Astfel, Thucidide (465395 .e.n.) explic apariia unei epidemii datorit unui contagiu viu - contagiumanimatum,
iar filozoful roman Marcus Terentius Varo (116-27 .e.n.) credea n existena unor
animale minuscule n zonele palustre - animalia minuta - care n nici un caz nu pot fi
vzute,dar care produc malaria.
Hippocrate (460-377 .e.n.) a ncercat s afle elementul comun prezent la toi
bolnavii n cursul unei epidemii, consemnnd vrsta, sexul, obiceiurile i constituia
bolnavului. El ajunge la concluzia c singurul element comun este aerul pe care l respir
bolnavii, afirmaie care a stat la baza teoriei miasmelor sau a aerului
otrvit. Aceast teorie s-a meninut n tiin pn n secolul trecut alturi de teoria
contagiunii care i are originea n opera lui Girolamo Fracastoro (1478-1553),
De contagioneetcontagiosismorbisetcuratione.
Fracastoro intuiete corect posibilitatea transmiterii bolii de la individul bolnav la cel
sntos prin contact direct - contactu-, prin intermediul unor obiecteca, de pild, haine sau

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


obiecte de lenjerie (pe care autorul le numete fomite) - per fomitem- i la distan - ad
distans.El sugereaz,de asemenea, c rspndirea bolilor infecioase este condiionat de
trecerea de la un individ la cellalt a unor particule foarte mici, animate, pe care el le
denumeteseminariamorbi,fiind astfel foarte aproape de adevr.
Ambele teorii au avut consecine practice, deoarece ele au stat la baza instituirii unor
msuri elementare de igien i epidemiologie ca, de pild, instaurarea carantinelor cu efect
benefic n profilaxia diferitelor boli epidemice. Dictonul a fugi repede, a ajunge ct mai
departe i a te ntoarce ct mai trziu ntr-o colectivitate cuprins de o epidemie se
suprapune cu unele practici ale epidemiologiei moderne.
2. D ESCO P E R I R E A

MICRO B I LO R

Microbii au fost vzui prima oar de Antoni van Leeuwenhoeck (1632-1723),


un postvar olandez din Delft. Cu lentile lefuite de el nui i un sistem de iluminare pe
fond ntunecat,al crui secret l-a pstrat,observ n anul 1675 creaturi minuscule,n
apa de ploaie, apa din vazele de flori, urin, fecale etc., pe care le descrie minuios ntr-o
serie de scrisori trimise Societii Regale din Londra. El descrie formele de baz ale
microbilor: forme rotunde (coci), alungite de bastona (bacili), de virgul (vibironi) i
spiralate(spirili i spirochete).
n anul 1695 Leeuwenhoeck i public ntreaga oper ntr-o carte intitulat Arcanae
naturaemicroscopiorumdetecta (Tainele naturii descoperitecu microscopul).
3. TEO R I A GEN E R A I E I SPONT A N E
Nici Leeuwenhoeck i nici contemporanii si nu au realizat importana extraordinar
a descoperirii sale, atenia savanilor ndreptndu-se, nu spre rolul acestor vieuitoare,ci
spre originea lor. Astfel s-a adoptat teoriageneraieispontanesau generatioaequivoca, care
susinea c microorganismele apar din nimic, acolo unde se afl material organic n
putrefacie. Aceast teorie a aprut nc din antichitate, printre adepii ei aflndu-se
Aristotel, care considera c animalele apar spontan din sol, plante sau alte animale, i
Virgiliu, care ddea sfaturi privind nmulirea artificial a albinelor.
Teoria s-a meninut pn n secolul al XIX-lea, n ciuda ncercrilor repetateale unor
savani de a demonstra contrariul.
Astfel, Francesco Redi , care scrie o carte despre originea insectelor, arat nc din
1665 c viermii care apar n carne sunt larvele ce se dezvolt din oule depuse de mute.
Dac se previne contactul crnii cu acestea,ei nu mai apar.
Abatele Spallanzani (1729-1799) arat c fierberea infuziilor i izolarea
recipientului mpiedic apariia generaiei spontane. n polemica sa cu Needham, care nu
obine aceleai rezultate susinnd n continuare teoria generaiei spontane, Spalanzani
arat erorile de sterilizare, erori ce au permis dezvoltarea microorganismelor n infuziile
respective.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Schroeder i von Dusch au introdus folosirea dopurilor de bumbac pentru a
preveni recontaminarea infuziilor sterilizate cu microorganismele din aer. Aceast tehnic
se folosetei astzi n toatelaboratoarelede microbiologie.
4. TA XO N O M I A

MICROO RGAN IS M E L O R

Pe msur ce se descopereau noi microorganisme, s-a ivit necesitatea clasificrii lor.


Aceasta s-a dovedit dificil datorit cunotinelor limitate privind biologia vietilor
microscopice. Descrierea sistematic a microbilor a nceput doar n secolul al XVIII-lea, o
dat cu perfecionarea microscopului. n opera sa Systema naturae, aprut n anul 1767,
botanistul Charles Linn ncadreazmicroorganismele n clasa Chaos influsoria.
Naturalistul danez Mueller clasific microorganismele n 379 specii i introduce
genurile Monas i Vibrio. Cu o jumtatede secol mai trziu, Ehrenberg creeazn opera
sa Infusoria, genurile Bacterium, Spirochaetai Spirillumi le ncadreaz n regnul animal. n
anul 1854 Cohn observ unele deosebiri dintre microorganisme i celulele animale i le
introduce n regnul vegetal.
Termenul de microb a fost utilizat pentru prima oar de Sdillot n anul 1878, dar
adevrata natur a microbilor a fost descoperit doar n prima jumtatea secolului nostru.
Semnificaia termenului de microb nu a fost foarte clar, el fiind folosit iniial numai
pentru desemnareabacteriilor. Acum estesinonim cu cel de agent infecios microscopic.
n prezent, bacteriile se clasific dup criterii stabilite de Comitetul Internaional de
Sistematic a Uniunii Internaionale a Societilor de Microbiologie. Acest comitet
editeaz, la intervale regulate, de exemplu, un manual n care se prezint ultimele
modificri ale taxonomiei bacteriene i care se numete Bergeys Manual of
Determinative Bacteriology.
5. ELA B O R A R E A
IN F E C I O A S E

TEO R I E I

MICRO B I E N E

A BOL I L O R

ncepnd din secolul al XVII s-au ridicat tot mai frecvent voci care au pledat pentru
rolul microorganismelor n etiologia infeciilor, dar ele nu au fost luate n seam.Robert
Boyle sugereaz n 1663 c unele boli ca febrele i altele ... trebuie s rezulte n urma
unor fermentaii. Agostino Bassi descrie fungul (denumit mai trziu Botrytis bassiana)
care produce muscardina, la viermii de mtase i art c boala se transmite prin hrana
infectat. Acesta a fost primul raport tiinific cu privire la etiologia printr-un
microorganism al unei boli, urmat curnd de comunicarea lui Schnlein , care descrie o
ciuperc,Achorionschoenleini, ce produce la om boala numit favus.
n anul 1850 Rayer i Davaine raporteaz prezena unui bacil, cu capetele tiate
drept, n sngele animalelor ce au murit de antrax i posibilitatea transmiterii acestei
infecii la alte animale,prin inoculareasngelui n care exist aceti bacili.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


nmulirea scrierilor cu privire la rolul microbilor n etiologia bolilor infecioase,fr
dovezi certe ns, l determin pe Henle s-i premearg lui Koch n enunarea celebrelor
sale postulatei s spun, c orice microb care este socotit a fi cauza unei boli, trebuie s fie
prezent n fiecareorganism infectat.
Elaborarea teoriei microbiene a bolilor infecioase este meritul lui Louis Pasteur
(1822 - 1895), fondatorul microbiologiei ca tiin.
Pasteur a studiat chimia la Paris, ocupndu-se la nceputul carierei sale de studii
cristalografice.El observ c sarea de amoniu a acidului paratartric,iniial optic inactiv,se
descompune cu formarea de acid tartric levogir, iar lichidul care l conine se tulbur.
Examinnd lichidul la microscop, el descoper prezena unei ciuperci, Penicilliumglaucum,
care metabolizeazsubstratul racemic i consum numai izomerul dextrogir (1848). Aceast
observaie i trezeteinteresul pentru biologie.
Profesor de chimie la facultatea din Lille, Pasteur ncepe s studieze procesul de
fermentaie la solicitarea productorilor de vin. El descoper c fermentaia vinului, a
berii, a oetului, precum i fermenaia lactic este rezultatul activittii unor anumii
microbi, introducnd astfel noiunea de specificitate.
Din 1861 Pasteur devine director tiinific la coala Normal din Paris. n acelai an
combate teoria generaiei spontane printr-o serie de experiene simple, artnd c
autogeneza nu este posibil i c microbii provin din mediul nconjurtor. nclzind la
fierbere baloane cu bulion, el constat c acesta rmne limpede timp ndelungat, dac
ptrunderea microbilor este oprit cu dopuri de vat. Partizanii generaiei spontane i-au
reproat lui Pasteur c prin nclizire distruge fora vital i c, n acelai timp, mpiedic
prin inchiderea baloanelor ptrunderea acesteia. Pasteur a repetat experimentul, utiliznd
ns de aceast dat baloane cu gtul foarte lung i ncovoiat n gt de lebd, fr s le
mai inchid cu dopuri de vat.Lichidul a rmas steril, rezultatul experienei aducndu-i lui
Pasteur o victorie incontestabil.
n acelai an, Pasteur descoper anaerobioza,viaa microbilor n absena oxigenului.
Discreditnd definitiv teoria generaiei spontane, Pasteur a nceput s se preocupe de
cauzele care determin apariia bolilor infecioase. La nceput el studiaz dou boli ale
viermilor de mtase, pebrina i flacheria, artnd c molipsirea viermilor se produce fie
prin contactul cu viermii bolnavi, fie prin consumul frunzelor de dud contaminate. El i
nva pe cresctori s se serveasc de microscop, s izoleze viermii sntoi de cei bolnavi
i s ndeprtezefrunzelecontaminate(1865).
Cutnd s mpiedice fermentaia, care producea mari pagube productorilor de
vinuri, el nclzete vinul la 60-70C distrugnd microorganismele responsabile. Astfel
introduce metoda de sterilizare care-i poart numele - pasteurizarea, utilizat i astzi pe
scar larg n industria alimentar (1866).
n continuare Pasteur i-a ndreptat atenia spre studiul infeciilor animale i umane.
El descoper foarte muli microbi, n diverse produse patologice, ceea ce i permite
mpreun cu elevii si Joubert i Chamberland s prezinte n 29 aprilie 1878 celebra
comunicare La thorie des germeset ses applications a la mdicine et a la chirurgie. Aceast

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


teorie expune pentru prima oar ideile fundamentaleale teoriei microbiene.
Dup ce descoper agentul etiologic al holerei ginilor, prepar prin nvechirea
culturii un vaccin capabil s previn apariia bolii. La solicitarea cresctorilor de vite,
Pasteur cerceteazboala numit dalac sau crbune, care decima cirezile de vite i oi ce
pteau pe punile contaminate cu spori de bacili crbunoi. Combinnd aciunea
cldurii i nvechirii, Pasteur a sczut virulena bacilului crbunos preparnd dou
vaccinuri: vaccinul Pasteur I mai puin atenuat i vaccinul Pasteur II mai atenuat. Dup
obinerea celor dou vaccinuri, efectueazn anul 1891 celebra experien de la Pouilly Le
Fort inoculnd 24 de oi, 6 vaci i o capr, nti cu vaccin Pasteur II i dup 7 zile cu vaccin
Pasteur I. Dup alte 7 zile inoculeaz att lotul vaccinat ct i un lot martor de animale
nevaccinate cu bacil crbunos virulent. Dup 24 de ore toate animalele martor,
nevaccinate,au murit de infecie crbunoas,pe cnd cele vaccinatenu au fcut boala.
Tot lui Pasteur i se datoreaz vaccinul antirabic, pe care l-a preparat fr s cunoasc
natura viral a agentului etiologic. Nereuind s izolezemicrobul rabiei pe mediile uzuale
de cultur, Pasteur intuiete c acest agent etiologic are unele particulariti n ceea ce
privete dimensiunea i nmulirea sa. Pentru a-l izola, Pasteur reproduce boala la iepuri,
inoculndu-le intracerberal material nervos provenit de la animalele bolnave de rabie; el
creeaz astfel, n mod empiric, primul model experimental de cultivare a virusurilor. Prin
treceri repetate pe iepuri, virusul de strad cu perioad de incubaie variabil ntre o
lun i un an s-a transformat ntr-un virus fix cu o perioad de incubaie de 7 zile. Dup
obinerea acestui virus cu perioad fix de incubaie, Pasteur l atenueaz prin desicaia
lent, n prezena acidului sulfuric, a mduvei animalelor inoculate cu acest virus. Dup
experimentarea eficient pe animale, s-a efectuat n 6 iulie 1885 prima vaccinare
ncununat de succes la un copil mucat de un cine turbat, Joseph Meister. n urma
acestei remarcabile realizri s-au strns, prin eforturi internaionale, fonduri pentru
construirea unui Institut de Cercetri la Paris care poart numele lui Pasteur.
n aceeai perioad, avnd preocupri asemntoare, Tyndall descoper cele dou
forme de existena a unor bacterii, vegetativ, sensibil la cldur, i sporulat, rezistent
chiar i la fierbere ndelungat. El introduce o metod de sterilizare fracionat, prin
inclzireadiscontinu a produselor, cunoscut sub numele de tyndalizare.
Contemporan cu Pasteur, Robert Koch (1843-1910) i ncepe cariera ca medic de
ar la Wollstein. Prima sa descoperire a fost sporul bacilului crbunos, n timp se examina
cultura acestui germene pe un preparat nativ ntre lam i lamel.
El introduce n practica bacteriologic examinarea morfologic a microbilor pe frotiuri
fixate i colorate.n cultivarea microbilor folosete gelatina pentru solidificarea mediilor de
cultur i obine primele colonii izolate. (Agar-agarul a fost introdus n practica de
laborator de un bacteriolog amator, Hesse. Ideia i-a venit de la soia sa, care folosea agarul
la solidificareasupelor chinezeti.)
Efectund studii n tuberculoz, Koch descoper agentul etiologic al acestei boli,
bacilul tuberculos. Anunnd descoperirea sa n anul 1882 la edina Societii de
Ftiziologie din Berlin 1882, el formuleaz celebrele sale postulate, care, cu unele excepii,

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


stau la baza implicrii agenilor infecioi n etiologia maladiilor infecioase. Pentru a
considera c un microb esteagentul patogen al unei boli infecioaseel trebuie:
s se gseasc constant n organismul bolnavilor ce prezint aceleai semne de
boal,
s poat fi cultivat i s dea culturi cu aceleai caractere,
cu aceste culturi s se poat reproduce boala experimental la animal, de la care s
se izolezeacelai microb.
n anul 1883 Koch i ncepe n Egipt studiile asupra holerei i le continu apoi n
India. Aici descoper vibrionul holeric i demonstreazcalea de transmiterehidric a bolii.
Dezvoltarea microbiologiei a avut un impact deosebit asupra igienei, epidemiologiei
bolilor transmisibile i chirurgiei prin generalizarea antisepsiei i asepsiei. Astfel,
Semmelweis (1818-1865), eful clinicii vieneze de obstetric, reduce mortalitatea
lehuzelor de la 18% la 1,27%, oblignd personalul sanitar i studenii care lucrau la
disecia cadavrelor s se spele pe mini cu clorur de var. n acelai timp, Joseph
Lister , chirurg din Edinburgh introduce n clinica sa asepsia prin pulverizarea acidului
carbolic n slile de operaie.
6. APA R I I A

I DE Z V O L T A R E A

IMUNOLOGI E I

Una din consecinele dezvoltrii cunotinelor despre microbi i al rolului pe care l


joac n etiologia bolilor infecioase a dus la apariia unei noi ramuri a microbiologiei,
imunologia, care a devenit cu timpul o tiin de sine stttoare. Ca n multe domenii,
practica a devansat n imunologie cunotinele teoretice.
La sfritul secolului al XVIII-lea, medicul englez Edward Jenner public
rezultatele obinute prin imunizarea artificial a oamenilor mpotriva variolei. Bazndu-se
pe observaiile populare, n legtur cu faptul c ngrijitorii de vaci care se mbolnveau de
vaccina vacilor nu mai fceau variol, el inoculeaz lichid din pustulele vaccinale de pe
ugerul vacilor la om, instituind astfel vaccinareaantivariolic.
Primele vaccinuri antibacteriene, introduse n profilaxia unor boli infectioase de ctre
Pasteur, au fost vaccinuri vii, atenuate. Salmon i Smith descoper n 1886 c pesta
porcin poate fi prevenit i prin administrarea de bacterii omorte. Aceast descoperire a
fost punctul de pornire pentru preparareade ctre Haffkine a unor vaccinuri din tulpini
bacteriene omorte,ca cele mpotriva holerei (1895) i ciumei (1897).
Roux i Yersin arat, n 1888, c patogenitatea bacilului difteric se datoreaz unei
exotoxine. Behring i Kitasato , la rndul lor, descoper c injectarea unor cantiti
nenocive de toxin difteric determin apariia n organism a unor substane, anticorpii
capabili s fixeze i s neutralizeze toxina. Aplicaia practic a acestei descoperiri a fost
seroterapia,care s-a practicatprima oar cu succes la un bolnav de difterie n anul 1893. Ea
const, n principiu, n administrarea unui ser de animal ce conine anticorpi, ca urmare a
unei admnistrri anterioare de toxin.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Pentru a obine cantiti mari de seruri antitoxice, Behring a cutat s scad
toxicitatea toxinei injectate la animal. El observ c toxina i pierde toxicitatea prin
nvechire, dar nu i capacitatea de a induce formarea de anticorpi la animalul inoculat.
Ramon detoxific mai eficient toxina difteric prin tratarea ei cu formol, o denumete
anatoxin i o folosete n vaccinarea antidifteric. Acelai principiu a stat i la baza
vaccinrii antitetanice.
Unul dintre cei mai strlucii elevi a lui Pasteur, savantul rus Ilia Mecinikov
(1845-1916) este fondatorul teoriei celulare a imunitii. El descoper rolul fagocitozei,
arat c omul i animalele dispun de mijloacenaturale de aprare,reprezentatede leucocite
i celulele SRH, care au proprietatea de a ngloba i digera unii microbi ptruni n
organism.
Cercetrile lui Mecinikov au fost precedate de observaiile lui Lister cu privire la
puterea bactericid a sngelui. Buchner descoper n serul proaspt un factor termolabil,
alexina, care s-a dovedit, ulterior, a fi identic cu sistemul de proteine plasmatice, foarte
important n aprarea antiinfecioas a organismului, descoperit i denumit de Ehrlich ,
complement. Pfeiffer evideniaz in vivo bacterioliza vibrionului holeric sub aciunea
anticorpilor specifici n combinaie cu complementul, iar Bordet o reproduce in vitro.
n continuare, serologia face mari progrese. Astfel, Grabar i Durham descoper
aglutinarea bacteriilor n prezena anticorpilor specifici, Kraus - precipitareaiar Bordet
i Gengou reacia de fixare a complementului, toate trei cu mare valoare n diagnosticul
serologic al bolilor infecioase.
n a doua jumtate a secolului nostru, cercetrile n domeniul imunologiei se
intensific enorm, imunitateafiind implicat practic n toate specialitile medicale.Astfel,
s-a artat foarte curnd c reaciile imunologice nu au ntotdeauna un efect benefic asupra
organismului, cauza multor afeciuni, cu etiologie pn nu demult necunoscut, fiind
reaciile imunopatologice.
8. APA R I I A

I DE Z V O L T A R E A VI R U S O L O G I E I

n anul 1892 se nate o nou tiin - virusologia - o dat cu descoperirea de ctre


botanistul rus Ivanovski a virusului mozaicului tutunului. El a artat c mozaicul
tutunului este produs de un agent care trece prin filtrele bacteriologice i care poate fi
transmis de la o plant la cealalt. n anul 1898 Beijerinck confirm descoperirea lui
Ivanovski i intuiete deosebirile dintre virusuri i bacterii.
n continuare se dezvolt metodele de cultivare i izolare a virusurilor. Astfel, Ross
Granville Harrison din SUA (1907), francezul Alexis Carrel (1909) i
Montrouse Burows , tot din SUA (1909-1910), pun bazele cultivrii virusurilor pe
culturi celulare.P. Rous (1911), E. Goodpasture i Alice Woodriff (1931), M.F.
Burnet (1933) izoleaz virusurile pe ou embrionate, tehnic ce a fost utilizat pe scar
larg nainte de generalizareacultivrii virusurilor pe culturi celulare.
La cunoaterea morfologiei i biologiei virusurilor au adus contribuii importante

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


E.Roux , J.Carrol , Fr. Loeffler , F.W. Twort , F. dHrelle, P. Leidlaw , A.
Sabin , A. Isaaks , M. Burnett, A.Lwoff etc.
9. D E Z V O L T A R E A

CH I M I O T E R A P I E I

ANT I I N F E C I O A S E

n eforturile de a gsi mijloace terapeutice eficiente n tratamentul bolilor infecioase


se nscriu cercetrile lui Paul Ehrlich , creatorul teoriei moderne a dezinfeciei i
chimioterapiei selective.
Cutnd glontele magic care s omoare microbii dar s nu lezeze organismul,
sintetizeazpeste 600 de produi arsenicali. Al 606-lea preparat - salvarsanul - se dovedete
activ asupra spirochetelor i este introdus n anul 1911 n tratamentul sifilisului i al unor
boli produse de protozare.
Studiind fagocitoza n infecia streptococic la oareci, Domagk descoper n 1932
sulfamidele.
n anul 1928 Alexander Fleming observ c culturile de stafilococi sunt inhibate
de o substan,secretatde un mucegai, Penicilliumnotatumpe care a denumit-o penicilin.
Pencilina este introdus n practica medical doar n anul 1941 dup purificarea i
stabilizarea ei de cte doi chimiti de la Oxford, Florey i Chain . Descoperirea
antibioticelor a deschis o er nou n medicin, producnd o adevratrevoluie n terapia
bolilor infecioase,modificnd profilaxia i evoluia acestora.Ca urmare,ns, s-a remarcat
fenomenul de apariie a tulpinilor bacteriene rezistentela antibiotice.
10. M I C R O B I O L O G I A

MO D E R N

I CONTE M P O R A N

Progresele eseniale n microbiologie s-au obinut prin dezvoltarea microscopiei


electronice care a permis obinerea unor date de importan fundamental privind
morfologia i structura agenilor infecioi. De asemenea, se intensific cercetrile privind
patogenitatea microorganismelor, respectiv a mecanismelor prin care acestea sunt capabile
s produc infeciile.
Dezvoltarea tuturor tiinelor biologice dup anul 1950 este tributar microbiologiei
care a furnizat un model experimental unic, reprezentat de Escherichia coli, ca prototip al
organizrii structurale i funcionale a celor mai simple sisteme biologice. Astfel, s-a
descoperit codul genetic, biosinteza proteinelor, mecanismele reglrii genetice,
mecanismele variabilittii la bacterii etc. Prin tehnici de inginerie genetic s-a realizat
clonarea DNA, procedeu care permite studiul structurii i funcionalitii genelor.
Prin aceleai tehnici s-au implantat unor bacterii ca, de exemplu, bacilului coli gene
care codific sinteza de interferoni, a unor hormoni (insulina, somatotropin) sau a altor
substane care sunt greu sau imposibil de obinut prin metode chimice.
n prezent dezvoltarea microbiologiei este tributar matematicii, informaticii, fizicii i
chimiei, iar microbiologia la rndul ei a ptruns n diverse domenii ca: industria chimic,

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


alimentar,petrolier,farmaceuticetc.,fiind o tiina indispensabil secolului XX.
11. M I C R O B I O L O G I A RO M N E A S C
Microbiologia romneasc se prezint cu descoperiri importante i cu o pleiad de
savani care au adus contribuii valoroase att n patologia infecioas ct i n
imunologie.
Victor Babe (1854- 1926) este ntemeietorul microbiologiei romneti. El i-a
fcut studiile la Budapesta i Viena, lucrnd apoi la Berlin, Paris alturi de Virchov, Koch
i Pasteur. Vine ca profesor de bacteriologie i anatomie patologic la Bucureti
preocupndu-se de cele mai variate probleme de bacteriologie, anatomie patologic, igien,
parazitologie. Cercetrile sale sunt cuprinse n 1005 lucrri. n anul 1885 public la Paris,
mpreun cu Victor Cornil, primul tratatde bacteriologie din lume intitulat Les bactrieset
leur rle dans ltiologie,lanatomieet lhistologiepathologiquedes maladies infectieuses. Dintre
descoperirile sale menionm: granulele metacromatice la bacilul difteric (corpusculii
Babe-Ernst), peste 40 de specii microbiene i dou specii de protozoare din genul
Babesiella. El a fost preocupat de studiul turbrii, leprei, tuberculozei, pelagrei etc. i a
introdus la noi n ar vaccinarea antirabic, seroterpia antirabic i antidifteric. De
asemenea organizeazprimul institut de cercetri medicale din Romnia, Institutul Victor
Babe i primele laboratoarede igien i bacteriologie din ar.
Ion Cantacuzino (1863-1934) a studiat la Paris filozofia, tiinele naturale i
medicina. n anul 1901 devine profesor la catedra de medicin experimental din
Bucureti. Opera sa tiinific cuprinde studii n domeniul holerei, artnd rolul
imunitii celulare i umorale. n anul 1913 aplic n armata romna, aflat n plin
epidemie de holer, vaccinarea antiholeric cu vaccin omort. n anul 1906 introduce n
ar, imediat dup Frana, vaccinarea antituberculoas cu BCG. Fiind ministrul sntii,
nfiineazprin legea sanitar din 1910 primele sanatorii de tuberculoz,primele spitale de
boli infecioase iar n 1921 la Bucureti Institutul de Seruri i Vaccinuri I. Cantacuzino,
care a devenit cea mai important coal de microbiologie romneasc.
Constantin Levaditi (1874 - 1953) , elev a lui Victor Babe, a fost profesor la
Institutul Pasteur din Paris. Personalitate deosebit, are studii de valoare n imunologie,
virusologie, bacteriologie, parazitologie i chimioterapie. mpreun cu elevul su t.S.
Nicolau pune bazele nvtmntului virusologic n ara noastr. Activitatea Institutului
de Virusologie t.S.Nicolau a fost continuat de Prof.Dr. Nicolae Cajal .
Ca personaliti marcanteale microbiologiei romneti i amintim pe C. Ionescu
Mihieti, M. Ciuc, D. Combiescu, G. Zotta, M.Nasta, A. Ciuc, P.
Condrea, Cornelia Combiescu, G. i Alice Magheru, M. Marbe, Aristia
Dmboviceanu, Lidia i I. Mesrobeanu, Eugenia Soru, Olga Bonciu, N.
Nestorescu, Gh.Istrati, M. Georgescu, Eugenia i M.Duca, i muli alii.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

**generated by an Adobe
application**LOCUL AGENILOR
INFECIOI N SISTE M A T I C A
MICROO RGAN IS M E L O R
nainte i mult timp dup descoperirea microorganismelor, organismele vii au fost mprite n dou
regnuri, animal i vegetal, nebnuindu-se posibilitatea existenei unor alte forme de via.
n secolul trecut s-a observat, ns, c microorganismele prezint nu numai asemnri dar i diferene
fa de celulele de tip animal i vegetal. Sesiznd aceste diferene, Haeckel propune n 1866 reunirea
microorganismelor cunoscute ntr-un regn aparte, PROTISTA, care s cuprind algele, protozoarele, fungii
i bacteriile.
n secolul nostru, prin dezvoltarea mijloacelor de cercetare, s-a demonstrat c microorganismele,
ncadrate iniial n acest regn, difer n mod fundamental unele de celelalte. Astfel, celulele bacteriene au o
structur mult mai simpl, fiind desemnate ca celule de tip procariot, iar algele, protozoarele i fungii au o
structur complex de tip eucariot. Ca urmare, termenul de Protista s-a restrns asupra organismelor
unicelulare de tip eucariot, bacteriile fiind trecute ntr-un regn aparte - PROCARIOTE.

1. PROTISTE
Algele sunt microorganisme eucariote, acvatice, fotosintetizante, care formeaz un grup heterogen, de
la dimensiuni microscopice pna la forme gigante, pluricelulare, filamentoase. Se cunosc 16.000 de specii,
divizate n 6 grupe filogenetice. Ele nu prezint interes medical propriu-zis, cu excepia agar-agarului din
care se obine agarul, un polizaharid important n bacteriologie, deoarece servete la prepararea mediilor de
cultur solide.
Mycetele sau ciupercile microscopice sunt celule eucariote grupate n 4 clase. Exist n jur de 12.000
de specii, din care doar 100 sunt de interes medical.
Protozoarele sunt microorganisme unicelulare eucariote foarte evoluate structural i n general
mobile, asemnnndu-se cu celulele animale. Cele de interes medical se ncadreaz n 4 clase: flagelata,
rhizopoda, sporozoa i ciliata.

2. PROCARIOTE
Archaebacteriile sunt lipsite de interes pentru medicin. Ele sunt bacterii termofile, productoare de
metan.
Eubacteriile cuprind un numr foarte mare de bacterii, dintre care cele de interes medical sunt:
bacteriile clasice - cu forme variate i cu perete celular,
chlamydiile - bacterii cu parazitism intracelular obligatoriu i care prezint un mecanism de
multiplicare unic n lumea bacteriilor,
rickettsiile - bacterii cu habitat intracelular (cu o excepie), dar cu diviziune direct, ntlnit la
majoritatea bacteriilor,
micoplasmele - bacterii crora le lipsete n mod natural peretele celular.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


n prezent sunt incluse n Eubacterii i Cyanobacteriile sau algele albastre, care sunt microorganisme
acvatice. Ele prezint interes medical numai pentru c pot ajunge ntmpltor n soluiile perfuzabile,
producnd accidente grave prin substanele pirogene pe care le conin.

3. VIRUSURI, VIROIZI I PRIONI


Virusurile sunt considerate microorganisme, cu toate c se deosebesc fundamental de formele
celulare de via. Ele sunt formate dintr-un singur acid nucleic (ADN sau ARN), nvelit de o capsid
proteic i sunt parazite obligatoriu intracelulare. Virusurile sunt particule inerte n stare extracelular dar,
dup ce ptrund ntr-o celul vie, deviaz metabolismul acesteia n scopul propriei replicri.
Viroizii au o structur i mai simpl, fiind alctuii doar dintr-un acid nucleic cu GM mic. Unii
dintre ei produc boli transmisibile la plante. Virusurile i viroizii alctuiesc mpreun regnul VIRA.
Prionii. n ultimul deceniu se discut tot mai des despre existena unor entiti infecioase de
dimensiuni foarte mici (5nm) i de natur proteic, prionii. Pn n prezent exist relativ puine date
referitoare la aceti ageni, dar se presupune c ei ar constitui cauza unor boli degenerative ale SNC, cum
sunt bolile Jacob-Creutzfeld, Kuru, scrapia oilor etc.
La agenii infecioi microscopici se adaug paraziii multicelulari cum sunt helminii i artropodele,
cu structur complex i cu studiul crora se ocup parazitologia.
Microbiologia medical studiaz urmtoarele aspecte legate de agenii infecioi:
biologia agenilor infecioi,
relaia dintre agenii infecioi i organismul uman,
patogenia agenilor infecioi,
aprarea antiinfecioas natural i dobndit,
bazele profilaxiei bolilor infecioase,
bazele terapiei antiinfecioase,
diagnosticul etiologic al infeciilor.

**generated

by

an

Adobe

application**

MORFOLOGIA I

STRUCTURA BACTERIILOR
1. MORFOLOGIA BACTERIILOR

1.1. Dimensiuni
Lumea bacterian este populat de entiti microscopice ce nu pot fi vzute cu ochiul liber.
Dimensiunile sunt att de reduse, nct un volum de 1cm3 poate cuprinde 1012 bacterii cu o greutate de
aproximativ 1g, iar ntr-un mediu lichid limpede sunt necesare cel puin 1-10 milioane de bacterii pentru a
produce o turbiditate sesizabil macroscopic. n intestinul nostru sunt prezente n jur de 10-100 de trilioane
de bacterii, numrul lor depind cu mult cel al propriilor noastre celule.
Dimensiunea bacteriilor se exprim n micrometri (1=10 -3 mm), variaiile fiind n funcie de specie,
form, mediu i vrsta culturii. n general, este cuprins ntre 1-10. Cele mai mici bacterii sunt cele din

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


genul Mycoplasma, cu diametrul de 0,3-0,8, pe cnd cele mai mari ca, de pild, spirochetele ajung pn la
o lungime de 15-20. Formele filamentoase, cum sunt actinomicetele, pot atinge o lungime pn la 500.
Aprecierea dimensiunii, a formei i aezrii bacteriilor sunt posibile la microscopul optic, iar a detaliilor
morfologice i structurale numai prin microscopie electronic.

1.2. Form
n raport cu forma lor deosebim 4 categorii de bacterii: rotunde (cocii), alungite (bacili), ncurbate
(spirili, spirochete, vibrioni) i filamentoase (actinomycetele).
cocii sunt bacterii rotunde (genul Staphylococcus), ovalare (genul Streptococcus), lanceolate (specia
Streptococcus pneumoniae), reniforme (genul Neisseria) cu de 0,8 - 1;
bacilii sunt bacterii cu form alungit de bastona cu dimensiuni ntre 1,5 - 10. La bacili este
important examinarea extremitilor, aspectul acestora avnd rol n identificarea lor. Astfel, bacilii
pot prezenta capetele rotunjite (familia Enterobacteriaceae), tiate drept (Bacillus anthracis bacilul crbunos), mciucate (Corynebacterium diphteriae - bacilul difteric), n form de suveic
(Fusobacterium);
cocobacilii sunt bacterii uor alungite, fiind forme intermediare ntre coci i bacili (Yersinia pestis,
Bordetella pertussis, Haemophilus influenzae);
vibrionii sunt bacterii ncurbate n form de virgul (Vibrio cholerae);
spirilii sunt bacterii spiralate avnd 1-2 spire rigide (Spirillum volutans);
spirochetele sunt bacterii spiralate cu corpul flexibil avnd 12-20 de spire (Treponema pallidum),
foarte multe spire strnse (Leptospira) sau 2-3 spire (Borrelia):
actinomicetele sunt bacterii foarte asemntoare fungilor i formeaz filamente sau hife lungi i
ramificate care se rup, rezultnd forme bacilare (Actinomyces).

1.3. Aezare
Bacteriile sunt organisme unicelulare care se multiplic prin diviziune binar. La unele specii, dup
diviziune urmeaz separarea complet a celulelor fiice, rezultnd bacterii izolate. La alte specii, dup
diviziune, celulele fiice rmn legate ntre ele, grupndu-se n mod caracteristic datorit unei substane
vscoase dispus fie pericelular, fie localizat n anumite regiuni determinnd diferite tipuri de aezare a
celulelor.
Aezarea bacteriilor permite uneori recunoaterea genului, sau chiar a speciei, prin examinarea la
microscopul optic a preparatelor colorate efectuate din culturi, sau direct din produsul recoltat de la pacient.
Cocii se aaz:
n grmezi sau asemntor unei ciorchini de struguri ca, de exemplu, germenii din genul
Staphylococcus;
n tetrade la genul Micrococcus;
n baloturi de cte 8 coci orientai n cele 3 direcii ale spaiului la genul Sarcina;
n lanuri la genul Streptococcus;
n diplo, ca dou flcri de lumnare care se unesc prin bazele lor, la specia Streptococcus
pneumoniae;
n diplo, ca dou boabe de cafea care se privesc fa n fa prin concavitile lor ca, de pild, la
Neisseria gonorrhoeae (gonococ) i Neisseria meningitidis (meningococ);
izolai, care nu sunt de interes medical.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Bacilii se aaz:
cel mai ades izolai i n poziii ntmpltoare unul fa de cellalt ca, de exemplu, majoritatea
bacililor gram-negativi;
grupai cte doi (diplobacili) sau n lanuri scurte ca, de exemplu, genul Klebsiella;
dispui n lanuri ca bacilii din genul Bacillus (bacilul crbunos);
dispui n mod caracteristic sub forma unor majuscule sau litere chinezeti cum sunt bacilii
difterici (Corynebacterium diphteriae);
n palisad, ca scndurile unui gard (bacilii difterimorfi).

2. STRUCTURA CELULEI BACTERIENE


Unitatea morfofuncional a bacteriilor este celula, un complex autoorganizat de molecule organice
care schimb energie cu mediul nconjurtor i este capabil s-i regleze n mod autonom funciile vitale.
Bacteriile au o structur foarte complex, fiind alctuite din componente obligatorii, prezente la toate
speciile bacteriene (nucleu, citoplasm, membran citoplasmatic, mezozomi, perete celular) i
componente facultative ce se gsesc doar la unele specii (capsul, flageli, fimbrii, spor).

2.1. Componentele obligatorii


2.1.1. Nucleul bacterian
Este un nucleoid sau echivalent nuclear, cu o structur primitiv n comparaie cu nucleul celulelor
eucariote i reprezint 2% din greutatea uscat a bacteriei. Nucleoidul este format dintr-o molecul
circular de ADN, organizat sub forma unui cromozom haploid care este n contact direct cu citoplasma
datorit lipsei membrane nucleare. Molecula de ADN dublu spiralat este la rndul ei suprahelicat n jurul
unui miez de ARN, dispoziie necesar funcionalitii materialului nuclear.
n mod obinuit, nucleoidul este situat n centrul celulei bacteriene i poate fi legat de membrana
citoplasmatic prin intermediul mezozomilor.
Funcia nucleului bacterian const n depozitarea informaiei genetice necesar autoreplicrii,
organizrii structurale i funcionale a celulei bacteriene, deci a caracterelor ce definesc specia.
n afar de ADN cromozomial, la unele bacterii sunt prezente molecule circulare mici,
extracromozomiale de ADN care se numesc plasmide i care se replic independent de cromozomul
bacterian. Vom reveni asupra lor n capitolul de genetic bacterian.
2.1.2. Citoplasma
Situat ntre materialul nuclear i faa intern a membranei citoplasmatice, citoplasma este un sistem
coloidal alctuit din 80% ap, n care se gsete o cantitate mare de molecule organice, ioni anorganici,
enzime, ARN (de transport, mesager i ribozomial), vacuole i incluzii. Este lipsit de organitele celulare
prezente la celulele eucariote cum sunt reticulul endoplasmatic, aparatul Golgi, mitocondriile, centrul
celular, ergastoplasma.
La microscopul optic citoplasma apare omogen, amorf, iar la cel electronic fin granulat datorit
unui numr mare de ribozomi. Se apreciaz c o celul bacterian are 20.000 de ribozomi ce conin 80-90%
din ARN-ul citoplasmatic.
Ribozomii sunt structuri sferice cu diametru de aproximativ 180nm i constanta de sedimentare de
70S. n absena ionilor de Mg2+ se desfac n dou subuniti cu constanta de sedimentare de 50S i 30 S.
Din punct de vedere chimic sunt alctuii din 65-70% ARN i 30-35% proteine. O parte din ribozomi se

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


asociaz formnd polizomi (mai ales n timpul sintezelor proteice), alii sunt liberi, iar o a treia categorie se
ataeaz mezozomilor sau membranei citoplasmatice. Ribozomii reprezint sediul sintezelor proteice din
celul.
Incluziile citoplasmatice, descrise la unele specii bacteriene, sunt formaiuni structurale inerte,
temporare, de diferite dimensiuni, variind n funcie de specia bacterian i condiiile de mediu. Compoziia
lor chimic este diferit, ele putnd fi de glicogen sau amidon (la unii bacilii aerobi sporulai), lipide (la
genul Bacillus), polimetafosfai (sau incluziile de volutin descrise mai nti la Spirillum volutans i apoi de
Babe i Ernst la bacilii difterici) etc. Incluziile sunt structuri legate de activitatea metabolic a celulei
bacteriene i reprezint un material de rezerv care poate fi folosit ca surs de energie.
2.1.3. Membrana citoplasmatic
Este o membran fin (6,5-7nm), elastic, lipsit de rezisten mecanic ce mrginete la exterior
citoplasma bacteriilor i o separ de peretele celular. Pe seciune apare trilaminat, fiind alctuit din dou
straturi fosfolipidice dispuse cu prile hidrofobe fa n fa. Printre moleculele fosfolipidice se gsesc
molecule proteice, situate fie la nivelul unuia dintre cele dou straturi fosfolipidice, fie le traverseaz fiind
expuse la ambele fee ale membranei. Aceast structur dinamic, fluid, temporar i reversibil n funcie
de factorii de mediu este o structur n mozaic, modelul ei fiind descris n 1972 de Singer i Nicholson.
Funciile membranei citoplasmatice:
este o membran cu permeabilitate selectiv, ndeplinind funcia de barier osmotic ce regleaz
schimburile celulei bacteriene, n ambele sensuri cu mediul nconjurtor. Permeabilitatea
selectiv a membranei citoplasmatice permite realizarea n interiorul celulei, pentru unele
substane, concentraii de 105 ori mai mari dect n afara celulei,
secret numeroase enzime hidrolitice ce se elibereaz n mediul nconjurtor unde scindeaz
substratul nutritiv n uniti absorbabile,
unele proteine legate de membrana citoplasmatic joac rolul de chemoreceptori,
ndeplinete rolul mitocondriilor de la celulele eucariote, fiind sediul enzimelor lanului
respirator i al fosforilrii oxidative, deci centrul energogenezei celulare,
este sediul sintezei acizilor grai, a fosfolipidelor,
este implicat n sinteza peretelui celular, al polizaharidelor capsulare, participnd activ la
creterea i diviziunea celulei bacteriene, la formarea sporului bacterian,
constituie o posibil int pentru aciunea unor chimioterapice ca, de pild, polimixinele.
2.1.4. Mezozomii
Sunt structuri membranare care se formeaz prin invaginarea membranei citoplasmatice sub form de
buzunar sau n deget de mnu, prezente la bacteriile gram - pozitive i ocazional la cele gram - negative.
Ei nu formeaz n citoplasm caviti inerte, ci deschise spre spaiul periplasmic (spaiul dintre membrana
citoplasmatic i peretele celular) i sunt n contact direct cu materialul nuclear.
Dup morfologia lor, mezozomii sunt lamelari, veziculari i tubulari, iar dispoziia lor n celula
bacterian poate fi septal, periferic i nuclear.
Funciile mezozomilor:
particip la replicarea cromozomului bacterian i diviziunea celular,
particip la reaciile de fosforilare oxidativ i oxidoreducere, dar n msur mai mic dect
membrana celular,
sediul unor enzime hidrolitice care ndeplinesc rolul enzimelor lizozomale de la celulele
eucariote,
sinteza i secreia unor exoenzime, ca de exemplu penicilinaza sau cefalosporinaza,

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

sinteza peretelui celular i formarea sporului bacterian.

2.1.5. Peretele celular


Component celular obligatorie care nconjoar membrana citoplasmatic, peretele celular este o
structur rigid, specific bacteriilor. El este format dintr-un strat bazal, asemntor la toate bacteriile i un
strat al structurilor superficiale, foarte difereniat, n funcie de care bacteriile manifest caractere tinctoriale
diferite: bacterii gram - pozitive, gram- negative i acido-alcoolorezistente.
Structura stratului bazal. Peptidoglicanul sau mureina este structura chimic responsabil de
rigiditatea peretelui celular i care asigur forma i rezistena mecanic a bacteriei. Prezent la toate
bacteriile, el const dintr-un schelet, format din molecule lungi paralele polizaharidice de N-acetilglucozamin i acid N-acetil-muramic. Moleculele de acid N-acetil-muramic din lanurile vecine sunt
legate ntre ele prin puni polipeptidice, transversale, a cror structur difer la bacteriile gram- pozitive de
cele gram-negative i chiar de la specie la specie. Astfel, de fiecare molecul de acid N-acetil-muramic se
leag un tetrapeptid ce conine D i L aminoacizi. De exemplu, tetrapeptidul la Staphylococcus aureus este
format din L-alanin - D-glutamin - L-lizin - D-alanin, iar la bacteriile gram negative conine acid
diaminopimelic.
La bacteriile gram - pozitive dou tetrapeptide de pe 2 lanuri paralele nvecinate sunt legate printr-un
pentapeptid. La bacteriile gram - negative, tetrapeptidele se leag ntre ele printr-o simpl legtur
peptidic. Menionm c acidul diaminopimelic i acidul N-acetil-muramic sunt componente care nu au
fost gsite n natur dect la bacterii.
Structura stratului structurilor speciale. Deosebim 3 tipuri de structuri speciale: gram-pozitiv, gramnegativ i acido-alcoolorezistent.
La bacteriile gram - pozitive, peptidoglicanul reprezint 50-90% din greutatea uscat a peretelui
celular, are o grosime de 15-30 nm i conine pn la 200 de lanuri paralele de murein.
Stratul structurilor speciale este redus i alctuit din polimeri hidrosolubili care sunt acizii theicoici:
acidul ribitoltheicoic i gliceroltheicoic. Acetia pot ptrunde pn la membrana citoplasmatic legndu-se
covalent de aceast - acizii theicoici de membran sau numai pn la perete - acizi theicoici de perete. Ei
reprezint antigenele de supafa ale bacteriilor gram-pozitive.
Peretele celular al bacteriilor gram-pozitive este sensibil la aciunea lizozimului care rupe legturile
dintre acidul N-acetil muramic i N-acetilglucozamin i a penicilinei care nhib sinteza peptidoglicanului.
La bacteriile gram-negative, peptidoglicanul are o grosime de 4-5nm, reprezentnd numai 10% din
greutatea uscat a bacteriei. Stratul superficial este ns mult mai complex dect la bacteriile gram pozitive fiind alctuit dintr-o membran extern, lipoproteine i lipopolizaharidul de perete.
Membrana extern este format dintr-un strat dublu fosfolipoproteic ce cuprinde o cantitate foarte
mare de molecule proteice. Aceste proteine, bine definite la majoritatea speciilor bacteriene, sunt denumite
Omp (outer membrane proteins) sau Momp ( major outer membrane proteins). Membrana extern se leag
de protoplast prin intermediul unei lipoproteine i a proteinei OmpA din membrana extern.
Proteinele nespecifice ale membranei externe cu funcie de porine, cum sunt trimerii OmpF i OmpC,
delimiteaz nite canale umplute cu ap prin intermediul crora pot difuza n spaiul periplasmic substane
hidrosolubile.
Proteinele specifice au funcii de transport pentru anumite substane, unele dintre ele fiind i receptori
pentru bacteriofagi. De exemplu, proteina LamB este responsabil pentru transportul maltozei i receptor
pentru fagul lambda al bacilului coli.
Proteinele de suprafa pot avea la unele bacterii rol n patogenitate, ca de exemplu cele 7 proteine de
suprafa al shigellelor care le asigur invazivitatea.
Deasupra membranei externe a bacililor gram-negativi se afl lipopolizaharidul de perete (LPZ) sau
endotoxina bacililor gram-negativi. Aceasta este alctuit din:
lipidul A care are o structur particular, fiind format din uniti dizaharidice de glucozamin,

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

legate de beta-hidroxiacizi grai cu 10-16 atomi de carbon fixai direct de membrana extern,
miezul sau core, numit i antigen R, comun tuturor bacteriilor gram - negative i care include 2
zaharuri caracteristice: acidul keto-deoxyoctanoic i o heptoz.
uniti monozaharidice repetitive (15-40) care sunt specifice de specie i tip i constituie
antigenul O al bacteriilor gram-negative.

LPZ este o toxin termolabil, care se elibereaz n mediul nconjurtor de ctre bacteriile gramnegative numai dup liza lor i foarte reactiv n organismul gazd. Astfel, lipidul A produce febr,
activeaz mecanismele aprrii antiinfecioase i n exces produce ocul endotoxic cu evoluie grav, chiar
fatal.
Spaiul periplasmic. Sistemul structural dublu al peretelui celular la bacteriile gram-negative creeaz
un compartiment ce se ntinde de la membrana celular pn la membrana extern, numit spaiu
periplasmic. El conine peptidoglicanul i un gel care favorizeaz nutriia bacteriei prin coninutul n
enzime degradative ca, de pild, fosfataze, nucleaze, proteaze etc. Tot aici sunt prezente enzimele de
inactivare ale unor antibiotice cum sunt beta-lactamazele i cefalosporinazele.
Bacteriile acido-alcoolorezistente de interes medical sunt bacilul tuberculos i bacilul leprei a cror
perete celular se aseamn cu cel al bacteriilor gram-pozitive. Structurile speciale conin acid micolic i o
cear ce confer acestor bacterii caractere tinctoriale deosebite i rezisten crescut la factorii de mediu.
Astfel dac, dup o nclzire de scurt durat ce topete cerurile, un colorant ptrunde n celula bacterian,
decolorarea acesteia sub aciunea acizilor sau alcoolilor nu se mai produce ca la alte bacterii. Acest caracter
se numete acido-alcoolo-rezisten. Bacteriile acido-acoolo-rezistente se coloreaz foarte slab cu coloraia
gram, evidenierea lor fcndu-se la cald prin tehnica Ziehl-Neelsen.
Bacterii cu perete alterat sau formele L. Sunt bacterii cu stratul bazal viciat sub aciunea unor
factori din mediu ca, de exemplu, lizozimul i penicilina, care lizeaz, respectiv mpiedic sinteza
peptidoglicanului.
Bacteriile lipsite total de perete celular se numesc protoplati i provin din rndul bacteriilor gram pozitive, iar cele cu perete parial lezat, sferoplati din bacteriile gram-negative, care i pierd mai greu
peretele.
Formele L sunt foarte sensibile la variaiile osmotice, putnd supravieui numai n condiii speciale de
osmolaritate, dar sunt foarte rezistente la antibioticele beta-lactamice. Dac factorii nocivi dispar din
mediu, formele L se pot transforma n bacterii normale prin resinteza peretelui celular. Unele teorii mai
vechi susin c formele L pot ntreine i croniciza o infecie, dar dovezile n acest sens lipsesc.
Funciile peretelui celular:
asigur forma, rezistena mecanic i osmotic a bacteriei;
asigur protecia membranei citoplasmatice fa de presiunea intern a celulei bacteriene, care
este foarte mare: 5-6 atm la E. coli, 20-30 atm. la S. aureus;
regleaz traficul molecular de perete n ambele sensuri, deci schimbul de substane dintre
bacterie i mediul nconjurtor, fiind permeabil pentru molecule cu o GM mai mic de 10.000
daltoni i cu un diametru mai mic de 1nm;
stocheaz unele enzime n spaiul periplasmic la bacteriile gram-negative ce vor fi eliberate dup
necesiti, spre deosebire de bacteriile gram-pozitive care i elimin enzimele direct n mediul
extern;
prezint receptori pentru bacteriofagi1;
este sediul antigenelor de suprafa, fiind deci implicat n rspunsul imun al macroorganismului;
este sediul unor factori de patogenitate;
are rol n diviziunea bacterian i n procesul de sporulare.

2.2. Componente bacteriene neobligatorii

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


2.2.1. Capsula
Majoritatea bacteriilor patogene i comensale sunt capabile s produc in vivo un material de nveli
extracelular.
Capsula este un nveli compact, intim legat de celula bacterian, cu o lime de cel puin 0,2m.
Este vizibil pe preparatele uzuale sau n coloraiile negative sub forma unui halou clar ce nconjoar
bacteria.
Din punct de vedere chimic, capsula tuturor bacteriilor de interes medical este de natur
polizaharidic (Streptococcus pneuomoniae, Klebsiella etc.) cu excepia capsulei bacilului crbunos care
este polipeptidic.
Capsula are rol n rezistena bacteriilor fa de fagocitoz, fiind astfel un factor de virulen.
Variantele necapsulate ale acelorai specii sunt nepatogene. De exemplu, Streptococcus pneumonie, de tip
S, capsulat, produce la oarecele alb de laborator o septicemie mortal, pe cnd varinata necapsulat nu
este patogen.
Capsula este o structur cu proprieti antigenice specifice (antigenele K) care permit diferenierea
unor serotipuri n cadrul speciei.
Bacteriile nu sintetizeaz material capsular in vitro pe mediile uzuale, coloniile rezultate fiind
rugoase, de tip R =rough. Pe medii speciale, ns, bacteriile pot crete capsulate, coloniile fiind mucoase,
de tip S =smooth.
Structura descris mai sus este capsula clasic a bacteriilor, la care ne referim atunci cnd vorbim
de bacterii capsulate. La unele bacterii s-au mai evideniat i alte structuri de nveli, cum sunt:
Microcapsula este o structur discret cu o grosime sub 0,2m care nu se evideniaz la microscopul
optic, ci numai prin metode imunologice sau electronomicroscopice (Neisseria gonorrhoeae). Ea constituie
un factor de virulen.
Stratul mucos, glicocalixul este un strat amorf i vscos ce nvelete bacteria. El este format din
lanuri lungi de polizaharide, cum sunt levanii i dextranii, cu rol major n adezivitatea bacteriilor de
suprafee. Astfel, de pild, Streptococcus mutans produce cantiti mari de dextran i levan prin intermediul
crora se ataeaz de suprafaa diniilor contribuind la formarea cariilor i a plcii dentare. Un alt exemplu
este Pseudomonas aeruginosa, care secret un strat mucos dens care i crete rezistena la antibiotice.
Funciile capsulei:
este un factor de aderen i colonizare a bacteriile pe suprafee;
protejeaz bacteriile de diferii ageni antibacterieni din mediu cum sunt: bacteriofagii,
colicinele, complementul, lizozimul sau alte enzime bacteriolitice;
protejeaz bacteriile de aciunea fagocitelor, fiind deci un factor de virulen;
reprezint sediul antigenelor capsulare, importante n identificarea acestor bacterii.
2.2.2. Cilii sau flagelii bacterieni
Sunt apendici filamentoi ai speciilor bacteriene mobile, cu originea n citoplasma bacterian, i
servesc ca organe de locomoie. Ei sunt prezeni mai ales la bacili (Enterobacteriaceae) dar i la unii coci
(enterococ). Cilii sunt structuri helicoidale, cu dimensiunea n general mai mare dect cea a celulei
bacteriene creia i aparin (2-15/2-20 nm) i se evideniaz microscopic prin coloraii speciale.
Dispoziia i numrul cililor sunt caracteristice speciei. S-au descris bacterii atriche (fr cili),
monotriche - cu un cil polar (Vibro cholerae), lofotriche - cu un smoc de cili situat la unul din polii
bacteriei - (Pseudomonas fluorescens), amfitriche - cu cilii situai la ambii poli ai bacteriei (la genul
Spirillum) i peritriche - cu cilii dispui pe ntreaga suprafa a bacteriei (Salmonella, E. Coli, Proteus etc.).
Structura cililor este tubular, ei fiind formai dintr-o protein contractil, flagelina, sub form
polimerizat. Cilul se ataeaz de bacterie printr-un corpuscul bazal i un crlig de articulaie aflate n

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


citoplasma bacteriei. Corpusculul bazal se inser prin crligul de articulaie de membrana citoplasmatic i
peretele celular.
Mobilitatea i direcia micrii cililor pot fi influenate de concentraia unor substane din mediu
(chimiotactism pozitiv sau negativ) i de temperatur. Ei sunt sediul antigenelor flagelare (H), importante
n identificarea bacteriilor.
Cilii bacterieni nu se observ dect pe preparate colorate special. n practica de rutin nu se
evideniaz flagelii, ci mobilitatea bacteriilor, fie prin examinarea lor pe un preparat nativ ntre lam i
lamel n care se urmresc micrile bacteriilor, fie prin nsmnarea tulpinii pe un mediu semisolid prin
neparea n profunzime a mediului. Dac bacteria crete nu numai pe traseul nsmnrii i difuzeaz n
mediu, ea este mobil.
2.2.3. Pilii bacterieni
Numeroase specii bacteriene gram-negative au pe suprafaa lor lor nite apendici filamentoi, rigizi,
mai scuri dect flagelii, n numr mare (100-500/celul) i cu dispoziie n general peritrich. Ei se
evideniaz numai prin microscopie electronic.
Din punct de vedere chimic sunt polimeri proteici de pilin, dispui helicoidal ntr-o structur
tubular. Natura proteic a pililor le confer proprieti antigenice. Din punct de vedere funcional, pilii se
mpart n:
sex pili - codificai de formaiunile genetice extracromozomiale (plasmide) i care prezint o
importan deosebit n transferul de material genetic ntre bacterii. Sunt prezeni mai ales la bacteriile
gram-negative (Enterobacteriaceae, Pseudomonas),
pili comuni sau pili de aderen (fimbrii), n numr mare, codificai cromozomial, i care servesc
bacteriilor la fixarea ferm de mediul de cultur sau de celulele pe care se afl. Ei constituie, deci, un
factor important de virulen (de exemplu la gonococ). n afar de aderen, pilii comuni mai au i
proprieti antifagocitare.
Ambele categorii de pili prezint antigene specifice piliare i pot fi receptori pentru bacteriofagi.
2.2.4. Sporii
Unele bacterii se transform n spori, care sunt forme primitive de difereniere celular, cu rezisten
crescut la factorii de mediu i care apar endocelular n condiii nefavorabile de via. Sporogeneza se
ntlnete numai la 3 genuri de bacterii gram-pozitive, Clostridium i Bacillus care sunt bacili i
Sporosarcina care sunt coci.
Sporii nu sunt forme de nmulire ale bacteriilor. Dintr-o bacterie vegetativ se formeaz un singur
spor, care n condiii favorabile de via va da natere unei singure celule bacteriene.
Forma sporului poate fi rotund sau oval. Diametrul sporilor este mai mic la bacilii sporulai aerobi,
nedepind diametrul bacteriei (genul Bacillus), pe cnd la genul anaerob Clostridium, sporul are un
diamentrul mai mare dect bacteria, producnd deformarea acesteia. Acest caracter al sporului se numete
caracter clostridial i este important n identificarea bacililor gram-pozitiv anaerobi.
Poziia sporului bacterian constituie un caracter taxonomic. Poate fi central, ca la bacilul crbunos
(Bacillus anthracis), subterminal, ca la B.cereus, sau terminal, ca bacilul tetanic (Cl.tetani).
n coloraiile obinuite sporul apare ca o zon incolor n corpul bacterian. El se evideniaz ns prin
coloraii speciale, la cald, care permeabilizeaz nveliurile sporale pentru colorani (coloraia Mller). Pe
preparatele native ntre lam i lamel efectuate din culturi, sporii apar ca nite formaiuni rotunde,
refringente.
Ultrastructura i compoziia chimic a sporilor asigur acestora o mare rezisten la agenii fizici i
chimici, ceea ce face ca ei s fie considerai forme de rezistena ale bacteriilor. De importan deosebit
pentru medicin este rezistena sporilor la cldur, de care trebuie s se in cont la sterilizare.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Sporularea. Este un proces ce se declaneaz n condiii nefavorabie de via, cnd bacteriile sunt
lipsite de surse nutritive. Ea presupune formarea unor structuri noi i dispariia altor structuri caracteristice
formei vegetative ale bacteriei.
Din punct de vedere morfologic, sporularea ncepe prin condensarea la un capt al celulei a
materialului nuclear. Acesta va fi separat de un sept ce provine din invaginarea membranei citoplasmatice.
Septul crete, se desprinde de membrana citoplasmatic i formeaz n jurul materialului nuclear o
membran dubl a crei fee care se privesc sunt cele ce sintetizeaz peretele bacterian. Acesta este stadiul
de prespor.Cele dou lamele ale membranei presporale vor sintetiza nveliurile sporale: peretele sporal i
cortexul situate ntre cele dou lamele ale membranei presporale i o tunic proteic i exosporiumul n
afara membranei presporale.
Structura sporului variaz de la specie la specie, dar organizarea general se aseamn. De la
interior spre exterior, sporul este format din:
core sau protoplastul sporal, format din materialul nuclear inconjurat de membrana citoplasmatic. Aici
este depozitat DNA i o substan care are rol n rezistena sporului la cldur - dipicolinatul de Ca, care
nu s-a mai evideniat nicieri n natur,
cortexul intern sau peretele sporal format din peptidoglican i care este peretele celular primordial,
membrana extern sau cortexul sporal, care este stratul cel mai gros al sporului i care conine i el un
peptidoglican, cu o structur particular, foarte sensibil la lizozim. Autoliza acestui strat este momentul
cheie n transformarea sporului n forma vegetativ,
tunica proteic este format din proteine chitinoase cu numeroase legturi disulfitice. Ea este
impermeabil, fiind responsabil de rezistena sporilor la unele dezinfectante,
exosporiumul este prezent numai la unii spori i conine lipoproteine i zaharide.
Germinarea sporului. n condiii de mediu favorabile, sporul germineaz i va da natere unei
bacterii vegetative identice cu aceea n care s-a format. Germinarea are loc n 3 etape:
Activarea sporului. Se produce cnd acesta ntlnete condiii favorabile de via, dar i un factor care
s lezeze nveliul sporal (mecanic sau chimic ca, de exemplu, lizozimul, compui cu grupri sulfhidrilice
libere etc.).
Iniierea este declanat de un mediu nutritiv bogat. Pentru unii spori triggerul este L-alanina, iar
pentru altele adenozina. Acesta duce la activarea unei enzime autolitice care degradeaz cortexul sporal.
Are loc absorbia de ap, eliberarea dipicolinatului de calciu i degradarea unor compui sporali.
Dezvoltarea sporului. Protoplastul sporal se transform n bacterie vegetativ, care trece printr-o
perioad metabolic activ de refacere a constituenilor celulari normali i a echipamentului enzimatic
complet.

3. STUDIUL MORFOLOGIC AL BACTERIILOR


Examinarea microscopic este frecvent primul pas n identificarea unor bacterii. Caracterele
morfologice i tinctoriale ncadreaz bacteriile ntr-unul din grupurile majore stabilind conduita
diagnosticului bacteriologic. Elementele morfologice importante n identificarea unei bacterii sunt:
dimensiunea, forma, aezarea, prezena unor structuri speciale ca, de pild, endospori, flageli, capsul sau
incluzii intracelulare.
Microscopul cu cmp luminos. Acesta are 2 sisteme de lentile care mresc imaginea obiectului
studiat: lentilele obiectivului i lentilele ocularelor. n mod obinuit se folosesc 3 obiective: un obiectiv care
mrete de 10x i care se folosete pentru obinerea unei imagini de ansamblu a preparatului examinat, un
obiectiv ce mrete de 40x, cu care se examineaz microorganisme mai mari ca, de pild fungi, parazii i
n fine obiectivul cu imersie care amplific imaginea de 90 sau 100x i cu care se examineaz bacteriile.
Imaginea mai este amplificat nc de 7 sau 10 ori de lentilele ocularelor. Puterea de rezoluie (distana cea
mai mic ntre 2 puncte ce poate fi perceput) a unui microscop fotonic este de 0,2. La microscopul cu

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


cmp luminos se examineaz preparatele colorate, dar uneori i preparate native.
Microscopul cu fond ntunecat. Are un condensator special, cardioid, care permite ptrunderea
luminii numai de la periferia obiectivului. La acest tip de microscop se examineaz preparatele native, ntre
lam i lamel, efectuate direct dintr-un produs, n care se caut bacterii a cror lime nu depete 0,10,2 (ca, de exemplu, evidenierea treponemelor din ancrul sifilitic), sau dintr-un mediu de cultur lichid,
n care se urmrete dezvoltarea unei culturi (Leptospira etc.).
Microscopul cu contrast de faz se folosete tot la examinarea preparatelor native. El are un
sistem de filtre care permit sesizarea diferenelor de faz a luminii cnd aceasta trece prin obiecte de
densitate diferit. Microorganismele examinate la acest microscop au aspect tridimensional.
Microscopul cu raze UV. Unii compui ca, de exemplu, fluorocromii sunt capabili s absoarb
lumina ultraviolet i s emint o energie cu lungime de und superioar. Preparatele de examinat sunt
colorate n prealabil cu un compus fluorescent ca, cum este, izotiocianatul de fluorescein iar apoi sunt
examinate. Particulele colorate vor apare luminoase, fluorescente pe cmpul ntunecat al microscopului.
Microscopul electronic. Lumina este nlocuit cu un fascicul de electroni. n microscopia
electronic cu transmisie, electronii trec direct prin preparat, iar n microscopia prin baleiaj ei trec dintr-un
anumit unghi prin preparat, astfel nct imaginea ce apare pe ecran este tridimensional.
Examinarea morfologiei bacteriene se efectueaz pe diverse preparate microscopice.
Efectuarea frotiurilor fixate i colorate este o metod de rutin n laboratorul de bacteriologie.
Frotiurile se pot colora simplu cu un singur colorant, elementele preparatului avnd toate aceeai culoare,
eventual de intensitate diferit, sau difereniat cu mai muli colorani, bacteriile colorndu-se diferit n
funcie de afinitatea lor tinctorial.
Dup efectuarea frotiurilor, acestea se usuc la temperatura camerei i se fixeaz cel mai des prin
cldur, trecnd frotiul de 2-3 ori prin flacr. n timpul fixrii, formele vegetative ale bacteriilor sunt
omorte i devin permeabile pentru colorani. Fixarea chimic (cu alcool metilic, aceton, May-Grnwald,
acid osmic etc.) se utilizeaz mai ales cnd preparatele sunt seciuni de esuturi sau frotiuri de snge,
deoarece protejeaz celulele din produs de degradare.
Coloraiile simple folosesc soluii apoase a unui colorant bazic ca, de exemplu, albastru de metilen,
violet de metil, fuxin bazic etc. Cationii coloranilor bazici se combin cu anionii protoplastului bacterian
i cu fosfaii acizilor nucleici. Dup colorare, frotiurile se spal pentru ndeprtarea excesului de colorant.
Coloranii acizi nu coloreaz bacterii dect la un pH foarte acid, dar pot fi folosii pentru coloraii negative.
Precizm c peretele celular nu se coloreaz n mod obinuit, structura colorat observabil la microscop
fiind protoplastul bacterian. Spaiul dintre bacteriile dispuse n lanuri corespunde tocmai pereilor celulari
nvecinai necolorai. Unii microbi se coloreaz bipolar datorit dispoziiei citoplasmei la ambele capete ale
bacteriei.
Coloraia negativ este o metod rapid i simpl de studiu a morfologiei bacteriene. Bacteriile se
amestec cu colorantul (tu de China) i se ntind ca un film pe lam. Bacteriile apar incolore pe fondul
colorat al preparatului.
Impregnarea argentic se utilizeaz pentru colorarea spirochetelor, mai ales cnd se urmrete
evidenierea lor n esuturi. n aceast coloraie, spirochetele se coloreaz n brun-negru pe fondul galben al
preparatului.
Coloraiile difereniale sunt cele mai importante n laboratorul de bacteriologie. Cel mai des folosit
este coloraia gram, introdus de studentul danez Christian Gram la sfritul secolului trecut. Dup cum
apar bacteriile n aceast coloraie ele se mpart n gram-pozitive i gram-negative.
Coloraiei gram const n colorarea iniial a bacteriilor cu cristal-violet sau violet de geniana.
Mordansarea se face cu lugol. Urmeaz decolorarea n urma creia unii microbi, cei gram-pozitivi,
pstreaz colorantul violet, iar alii, cei gram-negativi, vor fi decolorai cu un amestec de alcool-aceton.
Acetia din urm se vor recolora cu fuxin bazic. Bacteriile gram-pozitive vor aprea deci de culoare
violet iar cele gram-negative roii. Este important de menionat faptul c bacteriile i pot schimba
caracterele tinctoriale n condiii neprielnice de via, cele gram-pozitive mai ales putndu-se decolora.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Proprietatea bacteriilor de a se colora diferit prin aceast coloraie exprim diferene de structur a
peretelui celular. Mecanismul care st la baza acestei coloraii nu este nc elucidat.

1. COM P O Z I I A CH I M I C

A BACT E R I I L O R

Compoziia chimic a bacteriilor este asemntoare tuturor organismelor vii. Ea cuprinde n jur de 20
de elementeale sistemului periodic, care se pot mpri n trei grupe:
elementele de baz , H, C, N, O, P i Sulf, care intr n compoziia substanelor cu rol
primordial structural i energetic a oricrei celule vii (proteine,lipide i zaharide),
elemente n concentraie sub 1% i mai ales sub forma ionizat cum sunt K +, Na+, Mg 2+, Cl -,
Ca etc. cu rol funcional n procesele de activare a unor enzime (Mg), n permeabilitatea sistemului
membranar al celulei bacteriene (Ca), n vscozitateacitoplasmei etc.
2+

oligoelementele, cum sunt Mn 2+, Fe2+, Fe3+, Co 2+, Cu 2+, MoO 42+, SeO32-, WO 42- etc., ce se
g sesc n celula bacterian n cantit i foarte reduse, sub 0,001%, i care intr n structura unor
coenzime absolut necesaredesfurrii metabolismului,
coninutul n ap al bacteriilor se situeaz n medie la 85% din masa celular. Apa este faza n
care se solubilizeaz, sunt transportai electroliii i substanele neelectrolitice i mediul n care se petrec
toate reaciile metabolice. Ea particip la multe din aceste reacii (hidroliz , reacii anabolice etc.) i
formeaz mpreun cu substanele anorganice i macormoleculele organice coninute o unitate fizicochimic i biologic.

2. NUT R I I A

BACT E R I A N

Nutriia bacterian reprezint totalitatea proceselor prin care bacteriile i procur din mediul
nconjur tor substanele necesare supravieuirii, cre terii i nmulirii , iar respiraia bacterian
modalitateade a-i produce energia necesar activitii metabolice.
Sursa de energie . n funcie de sursa de energie pe care o folosesc,bacteriile se mpart n:
fotosintetizante, care utilizeaz energia luminoas pentru sintezacompuilor proprii i
chimiosintetizante, care si procur energia prin reacii de oxido-reducere a unor
substane. Bacteriile care oxideaz substanele anorganice se numesc lithotrofe, iar cele care
oxideaz substane organice chemoorganotrofe .
Sursa de carbon. Dup sursa de carbon, bacteriile se clasific n:
autotrofe, care sintetizeaz compu i organici pornind de la substane anorganice, sursa de
carbon fiind CO 2,
mixotrofe, care folosesc ca surs de carbon att substane organice ct i CO 2,
heterotrofe, care utilizeaz ca surs de carbon numai substane organice.
Sursa de azot a bacteriilor de interes medical o constituie n general aminoacizii, dar unele bacterii
utilizeaz i srurile de amoniu (Escherichiacoli,Salmonellaetc.).
Necesarul de oxigen pentru dezvoltareabacteriilor este variabil i va fi discutat n cadrul reaciilor de
energogenez.

2.1. Necesitile nutritive ale bacteriilor de interes medical


Bacteriile de interes medical sunt, cu foarte puine excepii, chimiosintetizante heterotrofe.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Ele au nevoie pentru multiplicare de substane organice, diveri ioni, oligoelemente i factori de cretere (vitaminele
B1, B2, acid pantotenic, biotin, lactoflavin acid folic etc.).
Necesarul de substane organice este foarte diferit de la o specie bacterian la alta. Astfel, de pild, Escherichia
coli cultiv foarte bine pe medii care au n compoziie o singur surs organic de carbon (glucoz , acetat sau
succinat),o surs de azot [(NH 4)2SO 4)], ioni eseniali dezvoltrii (K+, Mg 2+ etc.)i oligoelemente(Cl-, Co, Cu, Mo, Ni,
Se, Zn etc.). Alte bacterii au nevoie de substane organice ca aminoacizi, purine, pirimidine, vitamine, factori de
cretere etc. pe care nu le pot sintetiza,deoarecesunt adaptatela habitatul lor natural (organismul uman sau animal),
care le asigur acestesubstane.
Cu ct necesitile nutritive bacteriilor sunt mai mari cu att dependena lor fa de o gazd natural crete.
Astfel, o categorie aparte n cadrul bacteriilor heterotrofe sunt bacteriile paratrofe. Ele sunt lipsite de unele enzime
(genul Rickettsia) sau nu sunt capabile de energogenez (genul Chlamydia) i nu se pot nmuli dect n celule vii, avnd
deci un habitat natural obligator intracelular .
Necesit ile nutritive difer chiar i n cadrul aceleia i specii. Astfel, prin mutaii sau alte
mecansime ale variabilit ii genetice, unele tulpini pierd proprietatea de a sintetiza un compus necesar dezvolt rii,
nmulirea depinznd de prezena acestuia n mediu. Astfel de tulpini se numesc auxotrofe, iar tulpinile originale
din care au provenit se numesc prototrofe. De exemplu, tulpinile prototrofe de E. coli, principalul agent etiologic al
infeciilor urinare, sunt capabile s sintetizeze timidina necesar replicrii ADN. S-a observat, ns, la bolnavii cu
infecii urinare care au fost tratai timp ndelungat cu biseptol, apariia unor tulpini auxotrofe care pierd proprietatea
de a sintetiza timidina. Deci, urocultura, pe mediile uzuale, lipsite de timidin , va fi constant fals steril , tulpina
auxotrof prezent n urin neputndu-se dezvolta n lipsa acestui nucleotid.

3. M E T A B O L I S M U L

BACT E R I A N

Metabolismul bacterian cuprinde totalitateareaciilor biochimice care au loc n celula bacterian, precum i cele
care sunt determinate de microorganism n mediul nconjur tor. Ele au ca scop final cre terea i multiplicarea
bacteriei i se mpart n:
reacii catabolice , prin care se fragmenteaz substratul nutritiv n uniti componente cu eliberarede
energie,
reacii metabolice intermediare , prin care energia rezultat
nmagazinat n compui macroergici i

din primele reacii este

reaciile anabolice , prin care celula bacterian i sintetizez substanele propri, cu consum
energetic.
Toate acestereacii sunt catalizatede enzime a cror activitateeste controlat genetic astfel nct intensitatealor
s fie ct mai eficient adaptat condiiilor n care bacteria crete i se nmulete.

3.1. Reaciile catabolice


Bacteriile heterotrofe catabolizeaz substane organice din mediul nconjur tor printr-o succesiune de reacii
enzimatice,care parcurg n principiu 4 faze:
descompunerea extracelular a substanelor organice n unit i mai mici sub aciunea unor
exoenzime. La bacteriile care au ca habitat omul, macromoleculele din mediul ambiant sunt reprezentatede proteine,
acizi nucleici, colagen, mucopolizaharide, lipide etc. Pentru scindarea acestor substane bacteriile invazive secret
exoenzime hidrolitice,care pot fi n acelai timp i factori de patogenitate.
absorbia substanelor din mediul extern se faceprin 3 mecanisme:
- pasiv n funcie de diferena de concentraie a unei substane n interiorul i exteriorul celulei ca, de
exemplu, n cazul glicerolului;

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


- activ prin fosforilarea,cu consum energetic,a substanei ce urmeaz a fi absorbit ca, de pild, glucoza care
se absoarbe numai sub form de glucozo-6-fosfat;
- activ cu consum energetic prin legarea substanelor de proteinele de transport numite permeaze.Printr-un
astfel de mecanism se absorb substanele pe care celula bacterian le depoziteaz n concentraii foarte mari
fa de concentraia din mediu. Astfel dac celula bacterian este lipsit de permeazapentru lactoz, aceasta
nu poate fi absorbit nici dac bacteria, complet lipsit de lactoz, se afl ntr-o soluie cu coninut foarte
mare de lactoz.
O meniune special o merit transportul transmembranar de fier, necesar bacteriilor n multiplicare. n
esuturile organismului fierul nu se gsete n stare liber ci legat de proteine, cum sunt transferina i siderofilina.
Bacteriile au dezvoltatmecanisme ingenioase de absorbie a fierului prin secreia sideroforilor, substane chelatoarede
fier care scot fierul din combinaiile sale fcndu-l absorbabil.
pregtirea substanelor pentru oxidare prin reacii de decarboxilare,dezaminare,fosforilare etc.i
oxidarea substanelor cu eliberare de energie sau respiraia bacterian . Oxidarea se
definete ca o pierdere de electroni sau de ioni de hidrogen. Substana care se va oxida este donorul, iar cea care se
reduce, acceptorul de hidrogen. Deci, n urma oxid rii va rezulta o substan oxidat , o substan redus i o
anumit cantitatede energie liber. Substana energogenetic de baz este la multe bacterii glucoza, monozaharid ce
poate fi metabolizatpe mai multe ci n funcie de performanele oxidative ale bacteriilor.
La bacterii deosebim n funcie de acceptorul final de hidrogen, 3 tipuri de oxidaie: respiraia , n care
acceptorul final de hidrogen este oxigenul atmosferic, fermentaia , n care acceptorul final de hidrogen este o substan
organic, i respiraia anaerob , n care acceptorulfinal dehidrogenesteoxigenulprezentntr-o sareanorganic (nitrat
sau sulfat) care se va reduce.Subliniem c termenul de respiraie anaerob pe care l folosim, noi bacteriologii, pentru
a desemna bacteriile strict anaerobe se refer de fapt la fermentaie n absena oxigenului.
Respiraia este legat de sistemul membranar al bacteriilor (membrana citoplasmatic, mezozomi). Cantitatea
de energie eliberat prin respiraie este mai mare dect cea eliberat prin fermentaie, deoareceoxidrii de substrat i
urmeaz oxidaia de transfer, n care electronii sunt transportai pe lanul respirator (citocromi, flavoproteine,
ubichinone) pn la acceptorul final de hidrogen (oxigenul atmosferic) i fosforilarea oxidativ. Astfel, la degradarea
complet a unei molecule de glucoz bacteriile obin 38 de molecule de ATP. Exist i posibilitatea degrad rii
incompletedatorit lipsei unor enzime oxidative,cantitateade energie fiind mai mic.
Fermentaia folosete compui organici ca donori i acceptori de electroni i se produce pe urmtoarele ci
metabolice:
glicoliza pe calea Emden Meyer hof care transform o molecul de glucoz n 2 molecule de
acid piruvic, energia rezultat fiind nmagazinat n 2 molecule de ATP,
fermentaia secundar a piruvatului care poate fi lactic , alcoolic , propionic , butiric , mixt
(lactic, formic) n funcie de produii de metabolism rezultai,
c i alternative de metabolizare a glucozei cum sunt untul fosfailor i calea EntnerDoudoroff, aceastadin urm specific genului Pseudomonas.
Din punct de vedere practic, bacteriile se mpart,dup necesarul de oxigen, n:
bacterii strict aerobe, care se dezvolt numai n prezena oxigenului atmosferic, folosind
exclusiv respiraia aerob i deci oxigenul ca acceptor final de hidrogen. Astfel de bacterii sunt, de exemplu,
Pseudomonasaeruginosa, Corynebacteriumdiphteriae, Mycobacteriumtuberculosisetc.
bacterii strict anaerobe, care nu se dezvolt dect n absena oxigenului , prezena lui fiind
foarte toxic culturii chiar la o presiune de numai 10-5 atm. Aceste bacterii folosesc ca reacie energogenetic exclusiv
fermentaia, n condiii anaerobe, deci oxidaia de substrat. Dac fermentaia se produce n prezena
oxigenului, se formeaz radicali de superoxid (O2-) foarte toxici. Bacteriile strict anaerobe, spre deosebire de cele
aerobe, sunt lipsite de superoxiddismutaz care transform radicalul superoxid n ap oxigenat

i catalaz care

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


descompune apa oxigenat. Exemple de bacterii strict anaerobe sunt cele din genul Clostridium, Bacteroides, Prevotella,
Fusobacteriumetc.
bacterii facultativ anaerobe, care se pot dezvolta att n prezena ct i n absena oxigenului
atmosferic. Ele utilizeaz ca reacii energogenetice respiraia aerob , fermentaia iar unele chiar i respiraia
anaerob. Majoritateaspeciilor de interes medical sunt facultativ anaerobe (de pild, enterobacteriile).
bacterii anaerobe aerotolerante folosesc numai fermentaia n prezena aerului
atmosferic, f r participarea oxigenului la reaciile energogenetice. Ele tolereaz oxigenul n mediu fie
pentru c au n echipamentul enzimatic superoxiddismutaz i catalaz, fie c enzimele exist n mediul de cultur.
Astfel, bacteriile din genul Streptococcussunt lipsite de catalaz, dar pot fi cultivaten condiii de aerobioz pe medii cu
snge,care suplinete catalaza.
bacterii microaerofile folosesc respiraia i fermentaia, dar necesit o concentraie mai mare de bioxid
de carbon dect cea din atmosfer pentru reacii de carboxilare. Astfel, unele specii, ca cele din genurile Neisseria,
Brucella, Campylobacter,necesit concentraii de bioxid de carbon de 6-10%.
Reaciile energogeneticeale bacteriilor sunt n principiu aceleai ca i la celulele eucariote,i anume: glicoliza pe
calea Embden-Mayerhoff (n condiii de aerobioz sau anaerobioz ), calea pentozofosfailor, (n care se produce
NADPH 2 important donor de ioni de H pentru reaciile anabolice), beta-oxidaia acizilor gra i, ciclul acizilor
tricarboxilici, dezaminareaoxidativ i transaminareaaminoacizilor, oxidarea de substrat,fosforilareaoxidativ.
Liniile metabolice folosite de diferitele specii bacteriene variaz foarte mult, n funcie de substratul care este
prezent n mediul n care bacteria se nmulete i de dotarea genetic a bacteriei. Astfel, specia Bacteroidesfastidiosus
poate cataboliza doar un singur substrat - acidul uric, sau produ ii de degradare ai acestuia pe cnd Pseudomonas
multivoranspoate folosi peste100 de substraturi drept surs de carbon.
Cunoaterea preteniilor nutritive ale bacteriilor este esenial pentru prepararea unor medii corespunztoare
cultivrii lor, iar cunoatereaperformanelor metabolice ale microorganismelor este important prin faptul c, alturi
de morfologie,constituie criteriile de baz n identificarealor.

3.2. Reacii intermediare


Energia rezultat n urma oxid rii va fi transformat n energie chimic , fie sub forma unor tioesteri, ca de
exemplu Acetyl~SCoA , fie sub form de ATP . Energia astfel stocat va fi eliberat la nevoie pentru amorsarea
unor reacii catabolice sau pentru sinteza unor molecule cu rol structural sau funcional. Unii din produ ii
intermediari rezultai pe parcursul reaciilor de oxidare pot fi utilizai de bacteriela sintezaunor substane proprii.

3.3 Reacii anabolice


Sunt reacii prin care celula bacterian i sintetizeaz din compu i simpli, rezultai n timpul reaciilor
catabolicesau intermediare i cu consum energeticsubstane cu rol structural (macromolecule) i funcional (enzime).
La acestease adaug sintezaunor substane cu rol de rezerv energetic (incluzii de polizaharide i lipide).
Din punct de vedere al biosintezelor, bacteriile au posibliti practic nelimitate. Este suficient s ne gndim la
complexitatea structurilor membranare ale bacteriilor i la structura peretelui celular, componente pe care celula
bacterian i le sintetizeaz, uneori, numai dintr-un singur compus organic prezent n mediu.
Posibilitateareaciilor de biosintez difer de la specie la specie.Astfel, unele bacterii sunt capabile s sintetizeze
toi aminoacizii, nucleotidele, monozaharidele i coenzimele din substane simple, rezultate n cursul reaciilor
catabolice i intermediare ale metabolismului. Alte bacterii ns sunt lipsite de unele linii anabolice,fiind dependente
de aportul din exterior al substanelor ce se sintetizeazape acesteci. Bacteriile de interes medical se situeaz ntre cele
dou extreme.
Performanele biosintetice ale microorganismelor sunt exploatate n diferitele ramuri ale industriei, n care
obinerea pe calea sintezei chimice a unor produi ar fi imposibil sau nerentabil. Astfel, industria farmaceutic
obine antibioticele, unii aminoacizi i vitamine prin activitatea dirijat a microorganismelor, industria alimentar

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


brnzeturile i b uturile alcoolice etc. Unele bacterii sunt capabile s metabolizeze hidrocarburi alifatice, ele fiind
sperana decontaminrii apelor poluatecu iei.
Reglarea metabolismului are ca scop adaptarea economic a reaciilor i a intensitii lor la substratul nutritiv
existent n mediul n care triete bacteria, astfel nct ele s asigure creterea i nmulirea acesteia. Reglarea se
efectueaz prin modularea activitii enzimelor bacteriene, a cror structur alosteric favorizeaz inactivarea lor de
ctre produsul final a crui formare au catalizat-o.

4. CR E TE R E A

I N M U L I R E A

BACT E R I I L O R

Cretereai nmulirea bacteriilor esterezultatul nutriiei i al metabolismului bacterian.


Viteza de multiplicare a bacteriilor estefoarte mare. S-a fcut un calcul ipotetic din care rezult c, dac la fiecare
20' are loc o diviziune, dintr-o celul bacterian cultivat ntr-un mediu nelimitat ar lua natere ntr-o zi 1x1021 celule,
ceea ce ar corespunde unei mase de 4.000 de tone. n realitate, o asemenea rat de nmulire a bacteriilor nu este
posibil , fiind mpiedicat de epuizarea substanelor nutritive i a factorilor de cre tere, pe de o parte, i de
acumulareametaboliilor toxici, pe de alt parte.
Bacteriile se divid n marea lor majoritateprin diviziune binar , cu excepia chlamydiilor, care au un
ciclu de dezvoltare unic n lumea bacterian . Diviziunea este precedat de creterea n volum a celulei bacteriene,
dedublarea materialului nuclear i a componentelor citoplasmatice,ceeace duce la un dezacord ntre masa i volumul
celulei bacteriene. Cnd acest dezacord atinge un punct critic se produce diviziunea celulei parentale n dou celule
fiice,identice cu celula din care au provenit.
La bacili diviziunea se face ntotdeauna dup un plan perpendicular pe lungimea bacteriilor, n timp ce la coci
planurile de diviziune sunt variate. Celulele fiice se pot separa imediat dup diviziune sau pot rmne legate una de
cealalt , rezultnd o a ezare caracteristic , util n recunoa terea bacteriilor ca, de exemplu, a celor din genul
Staphylococcus, Streptococcus, Neisseriaetc.
Diviziunea bacteriilor gram pozitive are loc prin formarea unui sept ntre cele dou celule fiice,pe cnd bacteriile
gram negativese divid prin strangulare direct.

4.1. Curba de cretere i nmulire a bacteriilor ntr-un mediu


limitat
Dac se introduce un inocul (un num r redus) de celule bacteriene dintr-o cultur pur ntr-un mediu de
cultur proaspt i se incubeaz ntr-o atmosfer prielnic speciei respective,bacteriile vor crete i se vor nmuli, iar
timpul care trecede la o diviziune celular la urmtoarea se numete timpde generaie. Dac se apreciaz numrul de
celule bacteriene la intervalediferite de timp de la momentul inoculrii i reprezentm grafic raportul care se stabilete
ntre acest numr i timpul care s-a scurs, vom obine dou curbe caracteristicen funcie de celulele bacteriene luate
n calcul.
o numrtoare total a germenilor ce cuprinde toatecelulele bacteriene care au luat natere,att cele vii ct i
cele moarte,sau
o numrtoare a germenilor viabili, cu o deosebit importan practic i care apreciaz numrul de microbi
capabili s se nmuleasc n continuare.

4.2. Curba de multiplicare a bacteriilor n mediu limitat


cuprinde urm toarele faze:
Faza de lag . n aceast perioad nu se remarc o cretere a numrului de celule, cu toate c ele cresc n
volum i dovedesc o activitate metabolic intens . Durata acestei faze variaz n funcie de specie, condiiile de
mediu, de numrul de celule din inocul i este intervalul de timp n care celulele se adapteaz noilor condiii de

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


mediu. Astfel, dac mediul n care sunt inoculate celulele bacteriene difer de mediul din care au provenit, ele vor
trebui s - i readapteze echipamentul enzimatic noilor condiii, renunnd la secreia unor enzime pe care le vor
nlocui cu altele.n aceast faz se pot induce mutaii sau se produce selecia unor mutante capabile s creasc sau s
se nmuleasc pe noul mediu. Sensibilitateabacteriilor fa de chimioterapiceeste crescut. La majoritateabacteriilor
de interes medical, durata ei esten jur de 1/2 de or, iar la formele sporulate3-4 ore.
Faza exponenial sau logaritmic este precedat de o faz de accelerare n care celulele bacteriene
ncep s se nmuleasc din ce n ce mai repede. Celulele se divid constant prin fisiune binar , deci n progresie
logaritmic, raportul dintre numrul bacteriilor i timp fiind liniar. Aceast rat intens de multiplicare este posibil
doar in vitro, in vivo ea fiind mult frnat de mecanismele ap r rii antiinfecioase. Durata acestei perioade este
dependent de aceleai condiii de mediu ca i faza precedent dar i de specie.Astfel E.coli are un timp de generaie
de aproximativ 10 minute iar Mycobacteriumtuberculosispeste 25 ore. Sensibilitatea la antibiotice a microbilor rmne
crescut. Compoziia mediului de cultur se modific pn la sfritul acestei faze pe de o parte datorit consumului
principiilor nutritivi iar pe de alt parte, acumulrii de metabolii. Faza de nmulire logaritmic este urmat de o
perioad de ncetinire dup care se instaleaz.
Faza staionar . Multiplicarea bacteriilor n progresie logaritmic nu mai este posibil, rata de nmulire
scade treptat pn cnd bacteriile trec n faza staionar. Numrul bacteriilor rmne constant, de unde s-ar putea
deduce c numrul bacteriilor care se nasc esteegal cu cel al bacteriilor care mor. n realitate,ns, numrul bacteriilor
rmne constant deoarece ele nici nu se nmulesc i nici nu mor. n aceast faz, celulele nu mai cresc, ci are loc o
activitate metabolic endogen, prin care celula i sintetizeaz rezerve de energie i produi intermediari necesari
meninerii n viaa n noile condiii. ncetareamultiplicrii n faza staionar se datoreaz n principal epuizrii unui
factor nutritiv esenial din mediu, numit factor limitant i acumulrii unor produi toxici cum sunt, de pild, acizii
organici care, prin sc derea pH-ul mediului, limiteaz multiplicarea bacteriilor. n acest faz scade sensibilitatea
tulpinilor la chimioterapice.
Dat fiind schimbarea condiiilor de via ale bacteriilor, acestea vor prezenta modificri ale morfologiei i
fiziologiei lor, att unele fa de celelalte, ct i comparativ cu faza exponenial. Astfel, bacteriile gram-pozitive nu
mai rein cristalul violet i apar gram-negativepe frotiurile colorate.
n faza staionar celulele conin cantiti mari de polizaharide i lipide, substane pe care nu le gsim n faza
de multiplicare exponenial . La nceputul fazei staionare, unele specii bacteriene produc anumii metabolii
secundari cu distribuie taxonomic foarte riguroas. Acet metabolii includ antibiotice,colicine i exotoxine.
Iniierea sporogenezei la bacteriile sporulate se petrece la sfr itul fazei exponeniale sau la nceputul fazei
staionare.Durata fazei staionare esten general de ctevaore.
Faza de declin care dureaz mai multe zile se caracterizeaz prin sc derea num rului de bacterii,
remarcndu-se o divergen ntre curba care ilustreaz numrul total de bacterii i cea care reprezint bacteriile vii. Ea
se datoreaz sc derii substanelor nutritive i acumulrii de substane toxice pentru bacterii. La ace ti factori se
adaug la unele specii bacteriene proprietatea de autoliz cu eliberarea coninutului citoplasmatic n mediu.
Modificrile morfologice sunt pregnante att n ceea ce privete forma, dimensiunile ct i caracterele tinctoriale. n
timp mor toatebacteriile,cu excepia celor sporulate,i cultura se autosterilizeaz.
Cultivarea bacteriilor n mediu limitat este utilizat n laboratoarele de bacteriologie medical, pentru stabilirea
diagnosticului unei infecii bacteriene,caractereleculturale sunt deosebit de importante n identificareabacteriilor.

4.3. Curba de cretere i nmulire a bacteriilor


n culturi continui
Cnd se urm re te obinerea unei mase mari microbiene sau a unor produ i bacterieni pentru cercetare,
preparare de vaccinuri, diversele industrii (farmaceutic , alimentar etc.), cultivarea bacteriilor se face n sisteme
deschise, n care mediul de cultur este permanent nlocuit cu mediu proaspt, ndeprtndu-se n acelai timp masa
nou format de bacterii. Bacteriile vor fi mereu n faz logaritmic, curba de nmulire avnd un aspectliniar. n acest
fel se obin culturile continui, pentru realizareacrora estenecesar un chimiostat sau un turbidistat.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


4.4. nmulirea bacteriilor n organism
Urm rind curba de multiplicare a bacteriilor ntr-un mediu limitat, putem deduce c dup p trunderea n
organism a unui num r mic de microbi, se poate produce o infecie. Un astfel de exemplu este meningita, n care
meningococul se nmulete foarte rapid punnd viaa pacientului n pericol dac nu se intervine cu un tratament
antiinfecios.
Pe de alt parte, ns, nu toate bacteriile se divid repede.Baciul tuberculos, de pild, a crui timp de generaie
estede 24 de ore, se va nmuli lent i va produce o infecie cu evoluie insidioas, cronic.
n organism, cre terea i multiplicarea bacteriilor este diferit de multiplicarea in vitro, fiind stresat de
necesiti nutritive (prin competiie cu flora normal) i prin mecanismele de aprare antiinfecioas. Condiiile pe
care microorganismele le ntlnesc n organism le selecteaz pe acelea care cresc n anumite limite de temperatur,
osmolaritatei pH.
Agenii infecioi pe care i gsim numai n organismele infectatevor supravieui in vitronumai n condiiile de
temperatur, osmolaritatei pH apropiateorganismului nostru.
Microorganismele care au i alt habitat dectomul cresc n limite mai largi, necesitile nutritive ale unui microb
reflectnd, n general, habitatul lui. Astfel, goncocii, care tr iesc aproape numai n organismul uman, au pretenii
nutritive mai mari necesitnd pentru cultivarea in vitro medii speciale, pe cnd E. coli, Pseudomonas aeruginosa i alte
specii, care supravieuiesc frecvent n mediul nconjurtor, numai medii minimale.
La aspectelemenionate se adaug habitatul n organism al agenilor infecioi. Astfel, bacteriile cu
habitat extracelular sunt expuse aciunii anticorpilor, complementului, fagocitozei, spre deosebire de bacteriile
ce se nmulesc intracelular i care sunt protejate de aciunea acestor factorii i scap uneori supravegherii
imunologice.
Bacteriile dezvolt mecanisme adaptative care s ocoleasc barierele ce se opun nmulirii lor. Precizm c i n
condiiile n care multiplicarea bacteriilor este oprit, simpla lor prezen n organism poate constitui un permanent
stimul imunologic cu urmri beneficesau dimpotriv, duntoare.

5. IN F L U E N A FACTO R I L O R DE M E D I U
N M U L I R I I BACT E R I I L O R

ASU P R A

Unii parametri fizici ai mediului nconjur tor influeneaz n mod hot rtor cre terea i multiplicarea
microorganismelor.

5.1. Temperatura
Temperarura optim de dezvoltare a bacteriilor este cea a habitatului lor natural. n funcie de aceast
temperatur , bacteriile se mpart n psihrofile, care se nmulesc optim la 20C dar i sub aceast temperatur ,
mezofile, cu temperatura optim cuprins ntre 20-40C i termofile, care se nmulesc optim la peste 45C.
Bacteriile mezofile sunt cele patogene deoarecese nmulesc la temperatura organismului, fiind denumite i
bacterii homeoterme.
Limitele de temperatur n care acestebacterii pot s creasc sunt ns mai mari i variaz de la specie la specie.
Astfel, gonococul i meningococul nu suport variaii mai mari de 1-2C fa de temperatura optim, spre deosebire
de enterobacterii, care cresc n limite foartelargi.
Microorganismele sunt sensibile la temperaturile ridicate,aplicaia practic a acestui aspectfiind sterilizarea.
Temperaturile moderat sczute,ca, de pild, cea de +4oC din frigidere,nu distrug bacteriile,dar opresc n general
nmulirea lor prelungindu-le viabilitatea. Din acest motiv, majoritatea produselor biologice sau patologice destinate
examenului bacteriologic se pstreaz n aceste condiii. Totui, exist tulpini microbiene care se nmulesc i la
temperatura frigiderului ca, de exemplu, tulpinile criogene de Pseudomonasaeruginosa, ce se nmulesc la 0oC i tulpini
din familia Enterobacteriaceae(E.coli) care se n nmulesc la +5oC. Acest aspect trebuie luat n calcul de ctre medicul

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


bacteriolog, mai ales acolo unde implicaia etiologic a unui germene ntr-o infecie se bazeaz pe criteriul numeric.
Congelarea. Dac o suspensie bacterian este supus ngheului la temperaturi nu prea mici fa de 0oC,
cristalizareaapei determin formarea unor spaii ce conin soluii concentratede sruri care nu cristalizeaz dect la
temperaturi mult mai joase (-20C pentru NaCl de exemplu), cnd soluiile devin saturate i pot cristaliza. Aceste
concentraii ridicate de s ruri minerale, la care se adaug cristalele de ap , vor leza structurile bacteriene. Prin
ngheare nu vor fi omorte toate celulele unei suspensii, dar ngheul i dezgheul repetat scad foarte mult numrul
de bacterii viabile.
Conservareaprin congelare. Temperatura congelatoarelor casnice (-10C) nu este destul de sczut pentru a permite
conservarea bacteriilor. Temperatura optim este cea realizat de CO 2 (-78C) sau de azotul lichid (-180C).
Conservarea bacteriilor, a virusurilor prin congelare este favorizat de adaosul de glicerol sau dimethilsulfoxid. Aceti
ageni chimici induc o solidificareamorf, vitroas care nlocuiete solicificareaprin cristalizare.

5.2. pH- ul
Bacteriile se pot dezvolta n limite largi de pH, cele patogene pentru om dezvoltndu-se optim la un pH de 7,27,4. Exist i excepii ca, de pild, bacteriile din genul Brucellacare cresc la un pH de 6,0 i vibrionul holeric la pH de
9,0. Lactobacilii, prezeni n flora vaginal normal se dezvolt chiar i la un pH de 3,9.
Unele bacterii modific ele ns i prin procesele metabolice pH-ul mediului. Aceast modificare poate opri
nmulirea lor sau chiar distruge cultura. Din acest motiv, multe medii au n compoziia lor soluii tampon care
menin pH-ul n limite convenabile.
Modificarea de ctre o bacterie a pH-lui unui mediu poate avea valoare deosebit n identificareaunui microb i
poate fi sesizat prin adaugarea n mediu a unui indicator de pH. Foarte multe bacterii se identific biochimic prin
proprietatea lor de a fermenta diferite zaharuri. Aceast capacitate se evideniaz tocmai prin ns mnarea unei
bacterii pe mai multe medii ce conin fiecare alt zahar i un indicator de pH. n cazul ferment rii, acidifierea va
determina schimbareaculorii mediului.

5.3. Umiditatea
Apa liber este absolut necesar creterii i multiplicrii microbilor. Necesarul de ap variaz n funcie de
specie. Astfel, datorit coninutului srac n ap a unor alimente cum sunt gemul de fructe, pinea, unele sorturi de
cacaval, arahidele etc.,multiplicarea bacteriilor este practic imposibil, n timp ce mucegaiurile se pot dezvolta foarte
bine chiar i n acestecondiii.
Pentru a aprecia umiditatea,se compar coninutul n ap a vaporilor deasupra apei curate,care se noteaz cu 1,
cu coninutul n vapori deasupra mediului de cultur. Bacteriile de interes medical au nevoie de o umiditate de 0,98,
pe cnd ciupercile cresc i la o umiditatede 0,8.
Prin liofilizare (desicare brusc la -78oC), care este o metod de conservare a microbilor, se extrage practic
ntreaga ap liber din celulele bacteriene, ceea ce are ca urmare creterea stabilit ii biopolimerilor i ncetarea
metabolismului. Bacteriile liofiliizatese pstreaz ani de zile.

5.4. Concentraia de bioxid de carbon


Cu toate c bacteriile de interes medical nu pot folosi bioxidul de carbon ca surs de carbon, acesta este absolut
necesar reaciilor de carboxilare n biosinteza unor substane propri celulei bacteriene (aminoacizi, purine, pirmidine
etc.). Necesarul de bioxid de carbon al bacteriilor este diferit. Astfel, unele specii (Neisseria meningitidis,N. gonorrhoeae)
sunt dependente de prezena lui n concentraii ridicate pn la 10% n atmosfera n care se dezvolt, pe cnd altele
ca, de exemplu, S.aureus se dezvolt la concentraia obi nuit de CO 2 din atmosfer (0,03%), dar nu i ntr-o
atmosfer complet lipsit de CO 2.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Astzi, incubarea produselor patologice din care se urmrete izolarea bacteriilor se efectueaz n termostatecu
CO2 (6%), deoarecedezvoltarealor estesuperioar celei din termostateleobinuite.

5.5. Ultrasunetele
Ultrasunetele cu o frecven peste 20.000 de cicli/s sunt bactericide. Bacteriile i virusurile sunt distruse de
ultrasunete ntr-un interval de o or . Ultrasonarea microorganismelor se folose te mai puin pentru sterilizare, ct
pentru a obine diferite componente bacteriene sau virale, cum sunt: enzime, perei celulari, acizi nucleici bacterieni
n scopul cercetrii acestora.

5.6. Presiunea hidrostatic


Bacteriile obinuite sunt rezistente la presiunea atmosferic. Formele vegetative sufer alterri la 300 de atm i
sunt omorte la 600 de atmosfere, presiune ntlnit n oceane la o adncime de 6000m. Cultivarea bacteriilor la
presiuni mari induce creterealor filamentoas sczndu-le capacitateade diviziune.

5.7. Presiunea osmotic


Bacteriile se nmulesc optim pe medii izotonice, rezisten lor la variaiile presiunii osmotice fiind
incomparabil mai mare dect cea a celulelor organismelor superioare.Aceast rezisten se datoreaz peretelui celular.
Bacteriile din genul Mollicutes,lipsite de aciunea protectoare a peretelui celular, sunt foarte sensibile la variaii mici
ale presiunii osmotice.
ntr-un mediu puternic hiperton, bacteriile vor pierde apa din citoplasm i vor muri. Acest fenomen se
numete de plasmoliz.
Dac presiunea osmotic a mediului este foarte sczut, apa va ptrunde n celul, care se va umfla devenind
turgescent. Moartea bacteriei se produce prin plasmoptiz.
Cre terea presiunii osmotice a unui mediu prin adaus de NaCl sau zaharuri st la baza conserv rii unor
alimente.
Exist ns bacterii osmofile, dintre care cele halofile sunt capabile s se nmuleasc n soluii hipersaline
(bacteriile din genul Staphylococcusi Enterococcus). Pe baza acestei proprieti se prepar unele medii de mbogire i
selective a a cum este mediul hiperclorurat Chapmann pentru stafilococi. Acesta conine 7,5g NaCl la 100 ml de
mediu, spre deosebire de mediile obinuite care conin doar 5g/l. Dintre bacteriile osmofile menionm i pe cele
zaharofile, care sunt capabile s se nmuleasc pe medii cu coninut mare de glucide (6g%). Acest aspect este
important pentru unele medicamente, ca de pild, siropurile care, n ciuda coninutului ridicat de zaharoz, se pot
altera n urma contaminrii cu acestebacterii.

5.8. Electricitatea
Electricitateasub form de cureni galvanici, cureni de joas sau nalt frecven nu afecteaz bacteriile. Dac
ns curentul electric este trecut printr-un mediu lichid, bacteriile pot fi afectatesub aciunea unor ioni sau produi
chimici rezultai n urma electrolizei.

5.9. Radiaiile
5.9.1. Razeleneionizante
Razeleultraviolete. Puterea bactericid a razelor luminoase devine perceptibil la o lungime de und de 330nm,
crescnd pe msur scderii lungimii de und a luminii UV. Timpul necesar distrugerii microorganismelor depinde de

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


intensitatealuminii, distana de sursa de emisie i mediul n care se gsesc microorganismele. Mecanismul bactericid
al razelor UV const n inducerea formrii n celula bacterian a unor dimeri de timin care interfereaz replicarea
DNA. Alterrile altor elementestructurale bacteriene sunt neglijabile.
Fotoreactivarea. Modificrile induse n celulele bacteriene prin razeleUV sunt reversibile,eficiena sterilizrii prin
aceste raze nefiind prea performant. Astfel, dac se expune o cultur bacterian care a fost iradiat cu raze UV la
lumin vizibil , o parte din dimerii de timin se vor disocia i bacteriile aparent omorte i reiau activitatea
metabolic i nmulirea.Aceastapoate depi de sute de ori activitateainiial a culturii neiradiate.
n scop practic lmpile cu vapori de mercur se folosesc pentru a reduce numrul de bacterii existente n aer n
slile de operaie, n laboratoare,n ncperi n care sunt adpostite animale de exprien etc.
Efectul bactericid al razelorsolarese datoreaz coninutului n raze UV (300-400nm). n condiii naturale efectul
bactericid al luminii solare este mai mare n rile sudice unde coninutul n raze UV este mare. Semple i Greig au
artat n India (1909) c bacilii tifici expui pe lenjerie alb la soare sunt distrui n dou ore, pe cnd la ntuneric i
pstreaz viabiliateapeste6 zile.
S-a observat ns c expunerea la lumina puternic solar poate omor bacteriile chiar cnd radiaiile UV sunt
ecranate,datorit sensibilitii la lumin a unor substane necesaremetabolismului bacterian cum sunt riboflavina i
porfiriniele. Astfel, expunerea la lumina solar a fiolelor n care se afl BCG 1 va avea ca urmare pierderea viabilitii
i deci a eficienei vaccinului.
Sensibilizareafotodinamic. Razele luminoase vizibile au o aciune bactericid slab, care poate ns fi crescut
pn la nivelul aciunii razelor UV dac sunt trecuteprin colorani fluoresceni ca, de pild, eozina, rou bengal etc.
5.9.2. Radiaiileionizante
Mecanismul bactericid al acestor raze const n formarea n celul a unor radicali cu via scurt i protoni.
Ace ti produ i vor altera bazele azotate i leg turile dintre ele. Efectul bactericid al razelor ionizante depinde de
cantitatea de energie absorbit , temperatur , presiuea parial a oxigenului, coninutul n substane organice,
prezena unor substane protectoare ca alcoolii alifatici sau substane bogate n grup ri sulfhidrilice, specia
microorganismului i coninutul n ap. Sporii sunt n general mai rezisteni dect formele vegetative ale bacteriilor,
excepie fiind o bacterie nesporulat, Micrococcusradiodurans, care este cel mai rezistent microorganism la radiaii. El
rezist la doze de 200 de ori mai mari dect restul bacteriilor datorit faptului c este echipat cu mecanisme deosebit
de eficientede repararea alterrilor acizilor nucleici.

6. M E T O D E

DE CULT I V A R E

A BACT E R I I L O R

Cunoaterea necesitilor nutritive ale bacteriilor este foarte important n bacteriologia medical, deoarecest
la baza prepar rii mediilor de cultur destinate izol rii diverselor specii bacteriene din produsele biologice sau
patologice.
La nceputurile dezvoltrii bacteriologiei, prepararea mediilor a fost artizanal, numeroi bacteriologi intrnd n
istoria microbiologiei prin mediile pe care le-au preparat i care le poart i ast zi numele. Astfel, amintim, de
exemplu, mediul Loeffler pentru cultivarea bacilului difteric, mediul Lwenstein-Jensen pentru bacilul lui Koch,
mediul selectiv Wilson-Blair pentru salmonele i multe altele.
Prin cercetarea necesit ilor nutritive ale diferitelor specii s-au realizat medii adecvate pentru aproape toate
bacteriile de interes medical, speciile necultivabile fiind foarte puine, ca, de pild , Mycobacterium leprae i unele
spirocheteprintre care Treponemapallidum.
Cultivareabacteriilor n scop diagnostic pune n esen dou probleme:
alegereaunui mediu de cultur optim, care s permit izolarea tuturor bacteriilor care ar putea fi prezente
n produsul de examinat i
obinerea bacteriilor n culturi pure, pentru a putea fi identificate.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


6.1. Condiii generale pentru cultivarea bacteriilor
Un mediu de cultur uzual trebuie s conin ap, substane organice, minerale, oligoelemente i factori de
cretere. Pentru satisfacea acestor necesiti se ultilizeaz diferite substraturi biologice nutritive complexe care au n
compoziia lor acesteingredinente.Astfel:
- peptonele, care se obin prin hidroliza enzimatic sau acid a proteinelor de origine animal (de exemplu
fin de oase). Ele nu au o compoziie chimic foarte bine definit, iar prin coninutul n peptide i aminoacizi
constituie o surs universal de azot, pentru toate bacteriile cultivabile, fiind folosite practic n prepararea tuturor
mediilor de cultur,
- extractul de carne, ce se obine prin deshidratareadecoctului de carne de vit. Acesta conine cantiti
importante de creatin , xantin , hipoxantin , acid uric, acid adenilic, glicocol, uree, glutamin ca surs de azot
precum i glicogen, hexozofosfai, acid lactic etc.ca surs de carbon,
- extractul de drojdie, care se obine prin cultivarea controlat a drojdiilor i care conine numeroase
vitamine,mai ales cele din grupul B,
n afar de ingredientelemai sus menionate mai amintim:
- clorura de sodiu , care se adaug la mediile uzuale ntr-o concentraie de 0,9%. Pentru cultivarea
bacteriilor halofile concentraie poate crete pn la 10%,
- mono sau polizaharidele , unii alcooli (glicerin , manitol) pot nmbog i mediile, deoarece
constituie surse de carbon uor accesibile multor bacterii,
Cultivarea microbilor pe medii lichide. Mediile lichide se folosesc cel mai adesea pentru nmulirea
unor microbi care se g sesc n num r mic ntr-un anumit produs. Cel mai simplu mediu folosit n laboratorul de
bacteriologie este bulionul care se prepar din decoct de carne de vac, pepton i clorur de sodiu. Cultivarea unui
produs pe medii lichide are dezavantajul c nu permite ns obinerea unei culturi pure.
Caracterele culturale ale microbilor pe medii lichide difer . Astfel, bacteriile aparinnd familiei Enterobacteriaceae
tulbur uniform mediul, altele,ca de pild bacteriilestrict aerobe(Pseudomonas, Nocardia) formeaz pelicule la suprafaa mediului. Altele
formeaz agregatecaresedezvolt sub form de grunji cesedepun pepereteleeprubeteisau la fundul mediului (Streptococcus).Unelebacterii
secret n mediupigmeni difuzibilicadeexemplubacilulpiocianic(Ps.aeruginosa).
Cultivarea bacteriilor pe medii solide. Introducerea mediilor de cultur solide a nsemnat un progres
uria n tehnicile de diagnostic, deoarece permite dezvoltarea distinct a microbilor, sub form de colonii izolate. O
colonie bacterian este o micropopulaie ce rezult din nmulirea unui singur microb pe un mediu, vizibil n
general cu ochiul liber.
Cel mai simplu mediu solid este geloza simpl , ce se obine prin ad ugarea la bulion a unei substan
gelificabile,care de regul este geloza,un polizaharid obinut din alga marin agar-agar. La aceast mediu simplu se pot
ad uga diferite ingrediente (snge de oaie, ser, ascit , extract de drojdie etc.) pentru a putea cultiva bacteriile
pretenioase.
Caractereleculturale sunt foarte importante n identificareamicrobilor. Ele se apreciaz fie cu ochiul liber, fie cu
ajutorul unei lupe. Elementele ce se descriu, n general, sunt dimensiunea, forma, pigmentul, consistena, aderena la
mediu, activitateahemolitic i unele modificari pe care microorganismele le produc n mediul respectiv.
Coloniile cu aspectneted,cu marginile regulatei care se suspend omogen n ser fiziologic se numesc colonii de
tip S (smooth), pe cnd coloniile aceleiai specii, cu suprafaa rugoas, relief i margini neregulate i care aglutineaz
sponatan n ser fiziologic - colonii de tip R (rough). n general, cu unele excepii, coloniile S aparin tupinilor
virulente,pe cnd cele R sunt nevirulente.
Cultivarea microbilor pe medii solide permite, de asemenea, numrtoarea de germeni ntr-un anumit produs.
Acest aspect este deosebit de important deoarece n multe infecii criteriul de implicare etiologic este num rul
bacteriilor n produsul de examinat (infecii urinare).

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Medii speciale. Exist situaii n care izolarea unui microb necesit medii deosebite care s favorizeze
selectarealui din produse intens contaminate.
Mediile de mbog ire sunt medii lichide care permit nmulirea preferenial a unui microb dintr-un
amestec. Astfel sunt mediile cu coninut mare de clorur de sodiu (1-10%) n care se pot dezvolta numai bacterii
halofile ca, de exemplu, stafilococul (mediul Chapmann lichid) i enterococul. Unele medii de mbogire au ca factor
electiv anumite substane, ca, de exemplu, selenitul acid de sodiu, care permite dezvoltarea salmonelelor din materiile
fecale. Alte medii se bazeaz pe propietatea unor germeni de a se dezvolta la un pH mai acid sau mai alcalin dect
majoritatea speciilor bacteriene de interes medical. Astfel, vibrionul holeric se dezvolt la un pH alcalin (9) iar
brucelelela la un pH acid (6).
Medii selective. Dac un mediu de mbogire se solidific, rezult un mediu selectiv care are avantajul
obinerii microbilor sub form de colonii izolate.Datorit acestor medii, izolarea i identificareabacteriilor este astzi
mult simplificat. Mediile selective,care se bazeaz pe particularitile metabolice ale unor specii microbiene sau mai
ales pe rezistena natural a acestora la antibiotice, sunt utilizate n mod curent n laboratoarele de bacteriologie,
deoarecepermit, practic,izolareadintr-un amestecde microbi, a oricrui microb n cultur pur.
Mediile de diagnostic sunt medii de cultur care evideniaz anumite proprieti fiziologice i caractere
biochimice ale tulpinilor bacteriene pe baza c rora acestea pot fi identificate. Astfel, de exemplu, numeroase specii
bacteriene se recunosc pe baza zaharurilor pe care le fermenteaz. Mediile de diagnostic cu zaharuri conin zaharul de
cercetat i un indicator de pH. n cazul n care bacteria nsmnat n acest mediu va fermenta zaharul, culoarea
mediului se va schimba dup ctevaore datorit scderii pH-ului.

Dac n trecut mediile de cultur se preparau n laboratoarelede bacteriologie,astzi producia lor


a devenit o industrie puternic. Exist mii de firme care sunt ntr-o permanent concuren,
rezultatul fiind elaborareaunor medii de cultur din ce n ce mai performante,care uureaz i
mbuntesc asistena medical microbiologic.
**generated by an Adobe application**GENETICA BACTERIAN

Ereditatea este nsuirea general biologic a tuturor vieuitoarelor de a transmite caracterele specifice speciei
la urmai iar variabilitatea apariia unor caractere diferite de cele ale genitorilor.
Dintre cele dou laturi ale geneticii bacteriene, variabilitatea este cea care intereseaz medicina n mod
deosebit. Modificarea zestrei ereditare la bacteriilor d natere unor tulpini bacteriene noi care, prin virulen i
rezistena la chimioterapice, se adapteaz mai bine condiiilor de mediu i nlocuiesc bacteriile mai puin adaptabile.
Un exemplu foarte sugestiv n acest sens l reprezint modificarea, numai ntr-un secol, a etiologiei infeciilor
nosocomiale 1. Astfel, agenii etiologici ai hospitalismului clasic ca, de pild, bacteriile din genurile Clostridium i
Streptococcus, se ntlnesc astzi extrem de rar, ei fiind nlocuii cu agenii etiologici ai hospitalismului modern care
sunt tulpini multirezistente la antibiotice ce aparin speciilor Staphylococus aureus, Pseudomonas aeruginosa,
familiei Enterobacteriaceae etc.
Pentru a nelege mecanismele variabilitii, vom schia, pe scurt, bazele structurii, replicrii i funcionalitii
materialul genetic la bacterii.

1. SUPORTUL MATERIAL AL EREDITII


Totalitatea caracterelor unei bacterii sunt determinate genetic, informaiile fiind codificate de ADN.
Exprimarea manifest a acestor caractere constituie fenotipul unei tulpini iar informaiile care le codific genotipul.
Genetica molecular, n general, a avut ca punct de pornire studiul bacteriilor i bacteriofagilor.
n anul 1892 August Weisman susinea, deja, c esena ereditii const n transmiterea la descendeni a unei
substane nucleare cu structur molecular specific. Cunoaterea precis a substanei care pstreaz i transmite

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


caracterele ereditare a parcurs un drum lung, care a nceput n anul 1928 prin experienele bacteriologului englez
Fred Griffith.
Griffith a pornit de la observaia c pneumococul de tip S, virulent, capsulat, injectat la oarecele alb produce la
acesta septicemie mortal, n timp ce injectarea pneumococului de tip R, nevirulent, necapsulat, sau a pneumococului
de tip S capsulat omort prin cldur rmne fr efect. Injectnd ns un amestec dintr-o tulpin de pneumococ de
tip R necapsulat, nevirulent, viu i o tulpin de pneumococ de tip S, capsulat, omort prin cldur, la oarece, acesta
a dezvoltat o septicemie mortal. Prin hemocultur s-a izolat pneumococ viu, de tip S, capsulat. Griffith a tras
concluzia c pneumococul viu de tip R necapsulat a preluat un principiu transformant de la pneumococul de tip
S omort, principiu ce i permite sinteza factorului de virulen - capsula.
Precizarea naturii acestui principiu transformant este meritul unui colectiv format din Avery, Mc Leod i Mc
Carty, care n anul 1944 au extras diferite substane din pneumococul virulent (polizaharid capsular, lipide, proteine,
acizi nucleici) i au artat c transformarea pneumococului de tip R se face numai n prezena acidului
dezoxiribonucleic provenit de la pneumococul de tip S.
Dovada hotrtoare c ADN este depozitarul informaiei genetice a fost adus dup descoperirea
bacteriofagului de ctre Twort i dHerelle, independent n 1915 i 1917. Atunci s-a demonstrat c bacteriofagul i
injecteaz numai ADN n celula gazd i c acesta singur este capabil s determine n celula gazd sinteza de
bacteriofagi complei, identici cu cei de la care provenea acidul nucleic.

1.1. Structura ADN


ADN este format din 2 catene spiralate complementare i de polaritate invers (modelul Watson i Crick),
fiecare fiind rezultatul polimerizrii ntr-o anumit ordine a untilor structurale de baz a acizilor nucleici, nucleotidele.
Acestea sunt formate la rndul lor dintr-o molecul de dezoxiriboz, o molecul de acid ortofosforic i dintr-una din bazele azotate
purinice - adenina (A) i guanina (G) - sau pirimidinice - citozin (C) i timina (T).
Scheletul spiralei este format din acidul ortofosforic i dezoxiriboz de care se leag bazele azotate.
Complementaritatea celor dou lanuri de nucleotide se realizeaz prin relaiile sterice ce se stabilesc ntre bazele
complementare, iar legturile prin puni de hidrogen.
Proporia de baze complementare este constant n cadrul unei specii, raportul adenin-timin/guanincitozin (AT/GC) servind drept criteriu taxonomic de baz n clasificarea modern a bacteriilor.

1.2. Replicarea ADN


Structura dublu spiralat a ADN permite replicarea lui identic, semiconservativ. Spirala se deschide ca un
fermuar la locul iniial al replicrii sub aciunea unei ADN-giraze. Pe fiecare spiral se va sintetiza o spiral nou,
complementar, cu participarea ADN - polimerazei (I, II, III) din direcia captului 5' terminal spre captul 3'
terminal.

1.3. Transcripia i translaia


S-a stabilit c specificitatea biologic a funcionalitii ADN const n secvena de nucleotide. Cele 4 baze se
succed n lanul de ADN ntr-o ordine specific ce se aseamn cu un text, secvena lor reprezentnd coninutul
textului. Fiecare aminoacid dintr-un polipeptid este codificat de trei nucleotide consecutive (triplet) ce alctuiesc un
codon. Codul genetic este corespondena dintre secvena codonilor i cea a aminoacizilor n cadrul unui polipeptid.
O gen (sau un cistron) reprezint o anumit secven de nucleotide ce codific structura primar a unui
polipeptid care funcioneaz direct sau mpreun cu alte polipeptide ca enzim sau protein structural.
Pe lng genele care codific polipeptide, exist, de asemenea, gene ce codific ARN-ul ribozomal i ARN-ul
de transfer.
Transcripia reprezint transcrierea codului genetic de pe ADN pe ARNm, proces la care particip o ARN -

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


polimeraz ADN dependent. Aceast enzim gsete prin intermediul unui factor promotorul, locul de legare i
recunoatere situat deasupra genei, sau a genelor din ADN care codific ARNm. La bacterii, promotorul este
reprezentat de regul de 40 de baze. ARN-polimeraza determin separarea catenelor de ADN i iniierea transcripiei
ARNm. Punctul de start corespunde primului nucleotid de m - ARN. Terminatorul este reprezentat de o succesiune
de baze care ncheie sinteza de ARNm. Cei mai muli ARN-m bacterieni sunt policistronici, deci conin informaii
codificate de mai multe gene.
Ceea ce deosebete transcripia la celulele procariote de cele eucariote este faptul c translaia ncepe imediat
dup iniierea transcripiei informaiei n ARNm, nainte chiar ca sinteza acestuia s fie ncheiat. Procesul de
cuplare transcripie-translaie este regul la bacterii.
Translaia reprezint transpunerea, respectiv concretizarea, informaiei m-ARN la nivelul ribozomilor n
secvena de aminoacizi din cadrul unui polipeptid.
ARN-m transpune informaia de pe gena corespunztoare la ribozomi nespecifici, crora le confer o
specificitate temporar sintezei unui anumit polipeptid. Ribozomul se nir pe ARNm, acesta fixndu-se de
unitatea 30S a ribozomului.
Aminoacizii sunt adui la ribozomi de ARNt sub forma de aminoacyl - tARN, pentru fiecare dintre aminoacizi
existnd cel puin un ARN de transfer. Acesta poart un anticodon complementar codonului de pe m-ARN. De
exemplu, ARNt pentru metionin are un anticodon UAC, ce se va lega de codonul AUG de pe ARNm.
Iniierea i terminarea translaiei secvenei de nucleotide ale m-ARN ntr-o secven de aminoacizi ntr-un
peptid sunt determinate de codoni speciali, codon start i stop. Regiunea ARN-m dintre cele 2 semnale se numete
regiune de codare, iar intervalul dintre 2 asemenea segmente, regiune intercistronic.
Sintezei oricrui polipeptid ncepe prin fixarea anticodonului de pe ARNt pentru formilmetionin pe codonul
de iniiere (start) de pe ARNm situat n poziia A a ribozomului (locul de fixare a aminoacidului). Menionm c
formilmetionina transportat aici de ARNt nu particip la structura polipeptidului, ci are numai rol de iniiere a
sintezei. n cazul cnd intr n structura polipeptidului, ea trebuie s fie neformilat. (Formil-metionina este o
substan chemoatractant puternic pentru leucocite, influennd deci aprarea antinfecioas.)
Dup fixarea anticodonului de codonul metioninei, ribozomul se deplaseaz de-a lungul ARNm n aa fel nct
pe poziia A a ribozomului trece codonul urmtor al ARNm, iar ARNt legat de ARNm trece n poziia P a
ribozomului(locul de elongare propriu-zis a peptidului). n poziia A vine urmtorul aminoacyl-ARNt. ntre
metionin i al doilea aminoacid se realizeaz legtura peptidic (NH-CO-) i ARNt al celui de al doilea aminoacid
este eliberat. Ribozomul sufer din nou o translocaie. Poziia A este din nou liber pentru al urmtorul ARNt, iar n
poziia P se afl primul ARNt de care este legat un dipeptidul rezultat. La acesta se va aduga un al treilea aminoacid
adus la ribozom i aa mai departe pn se ncheie sinteza polipeptidului care este semnalat de un codon nonsens
(stop) de pe ARNm. n aceast etap lanul peptidic este eliberat din legtura cu ARNt i ARNm i ribozom.

1.4. Reglarea activitii genelor


Jacob i Monod au imaginat un model de funcionare al genelor bacteriene care a fost demonstrat ulterior
experimental. Scopul mecanismelor de control genetic la bacterii este ajustarea metabolismului la condiiile mediului
nconjurtor n aa fel nct creterea i multiplicarea s se produc n condiii optime. Aceste mecanisme ale reglrii
negative, prezente numai la procariote, pot fi prezentate sintetic dup cum urmeaz:
genele structurale codific sinteza unor enzime care aparin unei anumite linii metabolice sunt situate una
dup alta i formeaz o unitate care se numete operon. Acesta este delimitat de secvenele de control care sunt:
- operatorul, care reprezint poriunea de ADN din structura operonului care recepioneaz semnalele
asigurnd funcionarea coordonat a operonului, promotor i terminator;
- promotorul, care este situat lng operator i iniiaz transcrierea genei structurale. La unii operoni
operatorul i promotorul sunt identici. La alii ei sunt nvecinai, sau chiar se ntreptrund;
- terminatorul, care incheie transcriptia;
gen reglatoare conduce activitatea unui operon i codific sinteza unui represor. Acesta, prin configuraia sa

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


steric este capabil s se fixeze pe operator, blocnd activitatea m-ARN polimerazei.
activitatea proteinei represoare este indus sau oprit printr-un efect alosteric determinat de molecule
semnal. Astfel, unele substane, ca de exemplu lactoza, inactiveaz represorul, rezultatul fiind declanarea activitii
genelor care codific enzimele catabolizante ale lactozei. Substanele care inactiveaz represiunea se numesc
inductori. Produii finali de degradare a unui substrat, activeaz represorul. Astfel operonul anabolizant, ce codific
enzimele sintetice va fi inhibat. Produii operonilor anabolici, ce activeaz represorul se numesc corepresori.

2. ORGANIZAREA MATERIALULUI GENETIC LA BACTERII


Genomul bacterian este alctuit din repliconi, care sunt formaiuni genetice ce se pot replica independent.
Astfel, se descriu:
cromozomul bacterian
elemente genetice extracromozomiale
elementele genetice transpozabile

- plasmide
- genomul bacteriofagilor
- fragmentele de inserie (IS)
- transpozonii (Tn).

2.1. Cromozomul bacterian


Majoritatea genelor bacteriene se gsesc ntr-un cromozom haploid, echivalent nuclear care codific
informaiile absolut necesare supravieuirii speciei n condiii normale.
Cromozomul la Escherichia coli este format dintr-o molecul circular dublu spiralat de ADN ce reprezint
80% din greutatea lui, dintr-o component proteic, ARN-polimeraza care reprezint 10% iar restul de 10% din
ARNm i ARNr n curs de sintetizare.
Pe lng dispoziia dublu spiralat spre dreapta a catenelor de ADN (o spir = 10 baze), acestea sufer o
suprahelicare spre stnga (o spir suprahelicat = 15 spire). Acest mod de organizare denumit supercoil sau
supertwist asigur pe de o parte mpachetarea economic a ADN i pe de alt parte o configuraie optim
activitii funcinale a ADN (replicare, transcripie, recombinare). Modelul de mpachetare a nucleului bacterian a
fost descris de Pettijohn i Hecht (1973) pentru E. coli i se pare c are un caracter general la bacterii.

2.2. Formaiunile genetice extracromozomiale


2.2.1. Plasmidele
Plasmidele sunt formaiuni genetice autonome, extracromozomiale, libere n citoplasm, reprezentate de
molecule circulare de ADN care se replic independent de cromozom. Denumirea de plasmide le-a fost dat de
Lederberg n 1952, iar importana lor practic a fost sesizat n 1963 de Watanabe, o dat cu descoperirea
posibilitii transmiterii prin plasmide a rezistenei la antibiotice ntre bacterii .
Bacteriile conin foarte frecvent plasmide, descriindu-se peste 1.000 de tipuri diferite. Lungimea acestor
molecule variaz ntre 1-150 mm i greutatea molecular ntre 2-3 milioane (3x103 pn la 450x103 perechi de baze).
Plasmidele mici se gsesc de obicei ntr-o celul bacterian n 10-40 de copii, pe cnd cele mari n numr mai redus
de 1-3 copii. n aceeai celul nu pot coexista mai multe plasmide nrudite (cu mecanism comun de control al
replicrii), ele fiind incompatibile, spre deosebire de cele nenrudite (cu mecanism distinct de reglare al replicrii),
care sunt compatibile. Compatibilitatea exprim competiia plasmidelor pentru un anumit situs de legare n celula
bacterian.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Plasmidele pot fi:
conjugative, care se pot transfera singure la alte bacterii, ca de exemplu plasmidele de rezisten la antibiotice
R,
neconjugative, care nu pot prsi ele nsi bacteria de origine, ci numai prin intermediul unui alt plasmid
conjugativ sau a unui bacteriofag (de exemplu plasmidul care codific secreia de beta-lactamaz la S.aureus)
episomi, care se pot integra prin recombinare n cromozomul bacterian, pierzndu-i astfel autonomia de
replicare. Un exemplu de episom este factorul de sex F (plasmidul F sau factorul de fertilitate).
Determinanii genetici eseniali ai plasmidelor codific informaiile legate de replicarea lor autonom, iar cei
accesorii caractere fenotipice neeseniale supravieuirii celulei bacteriene n condiii naturale: gene de transfer (tra),
de rezisten la antibiotice (factorul R), de secreie a colicinelor (factorul col), de secreie a unor toxine, de
metabolizarea unor substraturi, de rezisten la unii ioni i compui organometalici etc. Unele plasmide nu au un
efect observabil asupra fenotipului bacteriei i se numesc plasmide criptice.
Pentru medicin important este cunoaterea plasmidelor de virulen i a celor care confer bacteriilor
rezistena la antibiotice.
Plasmidele de virulen poart determinanii genetici ai unor factori de virulen la bacterii, ca de exemplu
secreia de enterotoxina (termolabil i termostabil) i factorul de colonizare la Escherichia coli, hemolizina la
Staphylococcus aureus, Streptococcus faecalis i E.coli, exfoliantina la S. aureus, gena de invazivitate la Shigella
etc.
Plasmidele R -de rezisten la chimioterapice (Factorul R) sunt molecule circulare de ADN care constau n
esen din dou regiuni genetice distincte: genele care codific rezistena la antibiotice R, care pot fi unice sau
multiple i genele care confer plasmidului capacitatea de a se transfera FTR.
Rezistena la peste 90% din tulpinile de spital este de natur plasmidic. Existena acestor plasmide se explic
prin aglomerarea mai multor gene de rezisten R, pe acelai plasmid, prin fenomenul transpoziiei repetate de
material genetic. Plasmide de rezisten au fost evideniate la genurile Escherichia, Salmonella, Shigella, Proteus,
Providencia, Klebsiella, Serratia din familia Enterobacteriaceae, la genurile Pseudomonas, Acinetobacter, Vibrio,
Yersinia, Pasteurella, Campylobacter, Haemophilus, Neisseria, Bacteroides, Staphylococcus, Streptococcus,
Bacillus, Clostridium, i Corynebacterium. Plasmidele prezente la bacilii gram-negativi sunt mai mari dect cele
evideniate la bacteriile gram-pozitive.
Plasmidul F se mai numete i plasmid de sex, sau factor de fertilitate i conine, pe lng ali determinani
genetici, genele de transfer tra. Plasmidul F se poate transmite altor celule bacteriene prin conjugare. El se poate
integra n cromozomul bacterian putnd media transferul de gene cromozomiale de la o celul bacterian donor
la cea receptor. n funcie de prezena factorului F, bacteriile se mpart n:
bacterii F- lipsite de factorul F, denumite celule femele i care sunt receptoare de material genetic,
bacterii F+, masculine, care au factorul F+, autonom, ca plasmid n citoplasm i care sunt celule donoare,
bacterii Hfr care au factorul F+ integrat n cromozom, de asemenea masculine,
bacterii F care au factorul F+ ca plasmid autonom, dup ce acesta a fost integrat n cromozom i l-a prsit
rupnd un fragment ADN din cromozom. i aceste celule dunt donoare, deci masculine.
2.2.2.Bacteriofagii
Sunt virusuri care pazariteaz bacteriile. Se cunosc 6 grupe morfologice de bacteriofagi, cei mai bine studiai
fiind bacteriofagii T ai bacilului coli.
Morfologie. Bacteriofagii sunt formai dintr-un cap hexagonal, un gt i o prelungire numit picior (coad).
Capul este alctuit dintr-un nveli proteic caracteristic virusurilor (capsida) i adpostete ADN. Coada este un
cilindru rigid nvelit ntr-un manon proteic asemntor miozinei i se termin cu o plac hexagonal ce conine o
enzim de tipul lizozimului. De placa bazal se aprind 6 fibre cu rol n fixarea bacteriofagului pe suprafaa bacteriei.
Ataarea bacteriofagului pe suprafaa peretelui bacterian este determinat de existena unor receptori de perete,
specifici. Aceast specificitate este de tip enzimatic i st la baza lizotipiei 2. Dup ataare are loc contracia

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


manonului proteic i bacteriofagul i injecteaz numai ADN n celula bacterian.
Dup ptrunderea genomului fagic n celula bacterian, acesta va determina sinteza de noi bacteriofagi identici
cu cel de la care a provenit ADN. ADN se replic prin replicare semiconservativ iar ribozomii bacterieni vor
sintetiza proteinele capsidale i ale cozii. Dup asamblarea noilor virusuri ele vor prsi celula bacterian care se
lizeaz. Acesta este ciclul litic al bacteriofagilor, iar ei se numesc fagi viruleni.
Dar nu ntotdeauna relaiile bacteriofag-bacterie evolueaz n acest fel. Uneori genomul bacteriofagului se va
integra n cromozomul bacterian ncadrndu-se i funcional n acesta. n aceast situaie el nu se mai replic dect
n acelai timp cu cromozomul bacterian, deci n timpul diviziunii bacteriene i se numete profag. Acest ciclu este
ciclul lizogen iar bacteriofagii se numesc fagi temperai.
Lizogenia are urmtoarele consecine pentru bacteria n cauz:
bacteria lizogenizat este imun la infecia cu acelai bacteriofag, dar nu pentru ali bacteriofagi
profagul codific el nsui unele caractere pe care le dobndete astfel bacteria lizogen. Un exemplu clasic n
acest sens este toxigeneza la bacilul difteric care este codificat de un profag ce se afl n cromozomul bacterian.
Tulpinile de bacili difterici care nu sunt lizogenizate de acest profag, nu sunt capabile s secrete toxina i sunt, deci
nepatogene,
transducia, mecanism de transfer genetic de la o bacterie la alta, mediat de bacteriofagi i asupra creia vom
reveni la variabilitatea bacterian.

2.3. Elemente genetice transpozabile


Elementele genetice transpozabile sunt fragmentele de inserie (IS) i transpozonii (Tn).
IS i Tn sunt fragmente mici de ADN cu limite structurale bine precizate care se pot integra repetat n mai
multe situsuri dintr-un genom. Existena lor a fost presupus nc n anul 1931 i n anul 1952 de Barbara Mc
Clintock care le-a denumit gene sltree (jumping genes). Descoperirea a fost primit cu mult scepticism i
nencredere la vremea respectiv, dar timpul a dovedit importana ei, autoarea fiind onorat cu premiul Nobel n anul
1983.

3. VARIABILITATEA LA BACTERII
Bacteriile sunt supuse acelorai legi ale eredittii, unitare lumii vii, cu unele particulariti dictate de
organizarea materialului genetic. Astfel, n timpul diviziunilor succesive (n lipsa unui accident genetic) toi
descendenii unei bacterii sunt identici ntre ei i identici cu celula din care provin. Aceasta este descendena
vertical cu formare de clone de indivizi identici, stabilitatea fiind posibil datorit cromozomului haploid cu set
unic de gene.
Variabitatea la bacterii, latur a geneticii care are implicaii deosebite n medicina practic, poate fi explicat
prin dou procese fundamentale:
variaia fenotipic, care reprezint schimbarea unor nsuiri ale bacteriilor, ca adaptare la condiiile mediului
nconjurtor, fr s intervin vreo modificare n genomul bacterian i
variaia genotipic, ce rezult prin modificarea genomului.
Apariia modificrilor genetice la bacterii este cunoscut de mult dar nu s-a tiut, ns, dac aceste modificri
urmeaz aceleai legi ca i la organismele cu organizare superioar. n 1943 s-a dovedit faptul c modificrile
proprietilor unei populaii bacteriene este rezultatul unor variaii rare la un numr mic de celule, care se selecteaz
i dau natere unei populaii noi. Variabilitatea la bacterii se produce prin: mutaii, transfer de material genetic i
transpoziie.

3.1. Mutaia

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Modificrile spontane ale genomului se numesc mutaii i constau din modificarea secvenei de nucleotide
dintr-o gen. Ele pot fi punctiforme, inversii, inserii, deleii i mutaii secundare.
Mutaiile punctiforme afecteaz un singur nucleotid n cadrul unei gene i sunt reversibile. Consecinele unei
astfel de mutaii pot fi:
nlocuirea unui codon cu altul, ceea ce se va traduce prin nlocuirea unui aminoacid cu altul din structura unui
polipeptid. Aceast mutaie se numete mutaie cu sens greit,
apariia unui codon nonsens. Mutaia nonsens mpiedic sinteza n continuare a unui polipeptid, iar dac ea se
produce la nceputul genei ce codific un polpeptid - mutaie polar, acesta nu se va mai putea sintetiza deloc.
Inseria i deleia nseamn adugarea, respectiv pierderea a dou pn la sute sau chiar mii de nucleotide,
procesul fiind ireversibil. Acest tip de mutaie duce la modificarea important a secvenei de aminoacizi, fiind
denumit mutaie cu schimbare de proiect.
Mutaiile secundare sunt mutaiile reverse, care restabilesc o secven nucleotidic ce s-a modificat, iar
mutaiile supresoare permit exprimarea funciei anterioare a unei gene care a suferit o mutaie, fr restaurarea
codonilor iniiali. Acest fenomen se explic prin sinteza unui ARNt care tie s citeasc un codon nonsens.
Frecvena pe unitatea de timp cu care se produc mutaiile este diferit i se numete rat de mutaie. Mutaia
spontan variaz de la gen la gen ntre 10 -6 i 10 -10.
Mutaiile duc la apariia unor indivizi cu caractere noi, cum sunt rezistena la chimioterapice, structur
antigenic modificat, pierderea unor receptori specifici pentru bacteriofagi, pierderea capacitii de sintez a unui
metabolit etc.
Din punct de vedere medical intereseaz n mod deosebit mutaia spre chemorezisten care se poate produce
dintr-o dat, adic one-step, sau n mai multe etape, multistep.
Prin mutaie one-step bacteria devine rezistent brusc peste noapte la un antibiotic, pe cnd prin mecanism
multistep se produc mutaii multiple, succesive, pn ia natere o mutant rezistent la concentraii ridicate de
antibiotic. Astfel prima mutant va fi puin mai rezistent dect tulpinile slbatice din care provine, mutanta a doua
mai rezistent dect mutanta 1 .a.m.d.
Dat fiind c mutaiile naturale sunt rare, este necesar un mijloc care s selecteze mutanta pentru ca aceasta s se
transforme ntr-o populaie bacterian cu proprieti noi.
Rata mutaiei poate fi crescut n mod considerabil prin ageni mutageni, ca, de pild, raze X, UV, derivai
acridinici, ageni alchilani etc.
Mutaiile spontane sau induse pot duce la pierderea integral a unui plasmid printr-o modificare ce produce
deficiene ale mecanismului de replicare, astfel nct plasmidele nu vor mai fi motenite de celulele fiice.

3.2.Transferul de material genetic


Organismele superioare se reproduc sexuat. Materialul genetic a 2 indivizi de sex opus se transmite combinat
urmailor. Bacteriile se nmulesc vegetativ prin diviziune direct, deci materialul genetic provine de la o singur
celul. Cu toate acestea exist i la bacterii mecanisme care permit schimbul de material genetic de la o bacterie la
alta. Dat fiind c aceste mecanisme nu urmeaz legile sexuale ale transmiterii caracterelor ereditare, ele se numesc
mecanisme parasexuale. Transmiterea materialului genetic de la celula donor la celula receptor este unidirecional i
se realizeaz prin transformare, transducie i conjugare.
3.2.1.Transformarea
Reprezint transferul de material genetic de la o celul donor la una receptor sub forma de ADN pur, eliberat
fie prin liza celulei donor, fie prin extracie chimic. Acest proces a fost observat pentru prima oar la pneumococi de
Griffith n 1928. ADN-ul pneumococilor viruleni, capabili s sintetizeze capsula, s-a transferat la mutante R,
nevirulente, acestea din urm dobndind capacitatea de a sintetiza capsula. Transformarea s-a pus n eviden ulterior

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


la numeroase genuri cum sunt, de pild, Streptococcus, Haemophilus, Bacillus, Neisseria, Salmonella etc. i se
petrece nu numai ntre tulpiile aceleiai specii, ci i ntre specii diferite.
Transformarea genetic este posibil numai dac bacteria receptoare se afl n stare de competen, stare care-i
permite nglobarea de ADN strin. Competena este o stare fiziologic temporar a bacteriei, care variaz n funcie
de specie i de faza de multiplicare n care se afl bacteria. Dup unii autori, celulele competente au pe suprafaa lor
un antigen special numit factor de competen. n timpul strii de competen se modific structura peretelui celular,
care devine mai poros, ncrcat electropozitiv, favoriznd legarea ADN-lui strin.
Transformarea depinde n egal msur i de unele proprieti ale ADN transformant, cum sunt structura dublu
catenar i o dimensiune minim a moleculei de 1 x 106 daltoni.
Cu toate c transformarea s-a descoperit experimental i se practic astzi pe scar foarte larg n tehnicile de
inginerie genetic, ea se petrece n mod natural n mediile n care triesc mpreun multe specii bacteriene i unde
procesul de liz a celulelor bacteriene este frecvent, ca de exemplu n colon . Aici se pun n libertate cantiti mari de
ADN care, dac ntlnete celule bacteriene n stare de competen, va ptrunde i se va recombina cu genomul
acestora, conferindu-le caractere noi.
Majoritatea bacteriilor nu sunt n mod natural capabile de transformare dar experimental s-au dezvoltat metode
de inducere artificial a strii de competen foarte utile ingineriei genetice.
3.2.2.Transducia
Transducia reprezint un transfer de gene cromozomiale de la o celul bacterian la alta, mediat de
bacteriofagi. Unii bacteriofagi sunt capabili s transfere orice gen bacterian (transducie generalizat) iar alii
numai anumite gene (transducia specializat).
Transducia generalizat este mediat de fagii viruleni, litici, care dup ptrunderea n celula bacterian se
multiplic i determin liza celulei gazd. n timpul lizei celulei bacteriene cromozomul acesteia se fragmenteaz. Se
poate ntmpla, ocazional, ca un fragment cu o dimensiune apropiat de cea a genomului fagic s se integreze n
capisda bacteriofagului, n locul genomului fagic. Astfel de fagi sunt defectivi i nu se vor mai putea replica, dar pot
ptrunde n alte celule bacteriene injectndu-le ADN-ul, ce provine de fapt din genomul celulei donoare. ADN-ul se
va integra n cromozomul celulei receptoare prin recombinare, conferindu-i acesteia caractere noi, ca, de exemplu,
rezistena la chimioterapice, proprieti ce in de patogenitatea bacteriei etc.
Transducia specializat este mediat de fagii temperai. Dup ptrunderea n celula bacterian a ADN-lui
bacteriofagului temperat, acesta sufer iniial un proces de circularizare dup care se inser n cromozom prin
recombinare sub forma de profag. Inseria n cromozom se face pe baza homologiei dintre 10 perechi de baz ale
ADN fagic i bacterian. Profagul devine parte integrant a cromozomului bacterian, se va replica o dat cu acesta i
nu independent, deoarece este supus unui proces de represie din partea genomului gazd.
Bacteriile care au integrate n cromozomul lor un profag sunt n stare de lizogenie. n anumite condiii, ns, are
loc un proces de derepresie i genomul bacteriofagic prsete cromozomul bacterian devenind din nou autonom.
Cnd prsete cromozomul bacterian poate detaa din acesta un fragment de ADN care va rmne legat de genomul
bacteriofagic. Acest bacteriofag nu se va putea nmuli, fiind defectiv, dar va putea intra n alt celul integrndu-se
n cromozomul acesteia tot sub forma de profag. Fragmentul provenit de la prima celul bacterian poate s codifice
diferite caractere (rezistena la antibiotice, secreia unor enzime, toxine etc.), ce se vor manifesta fenotipic la noua
bacterie gazd.
Cel mai bine studiat exemplu de transducie specializat este cea mediat de fagul lambda i gena bacterian ce
codific degradarea galactozei (lambda-gal).
Transducia specializat nu trebuie s se confunde cu conversia lizogen. In acest caz caracterul nou al celulei
bacteriene este codificat chiar de genomul bacteriofagului temperat. Fenomenul a fost descris pentru prima oar, aa
cum am mai artat, la Corynebacterium diphteriae, toxigeneza fiind tributar prezenei unui fag temperat n
cromozomul bacterian.
3.2.3.Conjugarea
Conjugarea este transferul de material genetic de la o bacterie donoare la una receptoare printr-un proces de

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


mperechere, ce se realizeaz prin contactul direct dintre cele dou celule. Prin conjugare se pot transmite plasmide,
precum i gene cromozomiale (prin intermediul factorului F+).
Conjugarea la bacilii gram negativi.
Factorul F+ poate fi situat, aa cum s-a mai artat, ntr-un plasmid, favoriznd transferul acestuia sau n
cromozomul bacterian, fcnd posibil transferul unor gene cromozomiale de la o bacterie la alta. Celulele bacteriene
care au factorul F+ integrat n cromozom se numesc Hfr (high freqency of recombination ), deoarece ele pot transfera
material genetic cromozomial cu o frecven mare, ceea ce duce la recombinarea unor gene din cromozomul
bacteriei donoare cu material genetic al cromozomului celulei receptoare.
Prin intermediul factorului F+ inserat n cromozom se poate transfera o copie ntreag a cromozomului celulei
donoare la cea receptoare.
Transferul integral dureaz n jur de 100 minute. Procesul de mperechere este un mijloc ideal de localizare a
genelor pe cromozomul celulei donoare. Ca celul donoare se alege o tulpin Hfr. Aceasta va fi cultivat cu celule
F-. Prin agitare puternic a mediului se intrerupe procesul de mperechere la anumite intervale de timp, i se caut
recombinani printre celulele receptoare. Cu ct ntreruperea recombinrii se produce mai repede cu att gena studiat
se afl mai aproape de vrful moleculei de ADN transferat.
Transferul prin conjugare a plasmidelor este condiionat de prezena n plasmid a genelor de transfer tra,
care sunt responsabile de sinteza sex-pilului i de transferul plasmidului.
Conjugarea ncepe prin sinteza sex-pilului care va adera de receptori specifici prezeni pe peretele celular al
bacteriei receptoare. Dup formarea legturii dintre celula donor i cea receptor are loc replicarea de transfer a
plasmidului. O caten parental de ADN va rmne n celula donor, iar a doua va trece n celula receptoare, pe
tiparul lor sintetizndu-se catene complementare.
Din punct de vedere medical importante sunt plasmidele conjugative de rezisten - plasmidele R.
Dintre proprietile plasmidelor de rezisten ale bacililor-gram negativi, 3 sunt de interes medical deosebit :
frecvena transferrii: frecvena transferului multor plasmide slbatice pe receptori adecvai este relativ
sczut 10-4/ cel., i se datoreaz faptului c plasmidele tulpinilor slbatice sunt reprimate, adic produc un represor
care inhib activitatea propriei gene de transfer. Dac se incubeaz donorii i receptorii mpreun mai multe ore,
numrul de celule recombinante cresc;
spectrul de gazde: plasmidele transferabile R circul ntre specii diferite. Acest transfer are loc i n laborator
i n macroorganism. S-a descris astfel transferul de plasmide de la bacilul coli nepatogen la salmonele sau shigelle.
Nu s-a observat ns transferul plasmidelor de la bacterii gram-negative la cele gram-pozitive;
determinanii de rezisten R: caracteristici pentru plasmidele conjugative sunt determinanii de rezisten
multipli. S-au evideniat astfel la tulpinile izolate din spital plasmide ce au factori de rezisten fa de toate
chimioterapicele uzuale (ampicilina, cefalosporine, streptomicina, tetraciclina, cloramfenicol, kanamycina,
gentamicina, sulfonamide).
Conjugarea la bacterii gram-pozitive
S-au descris procese de mperechere i la bacteriile gram-pozitive ca, de pild, la genurile Streptococcus,
Streptomyces, Clostridium, procesul bazndu-se pe performana celulei receptoare.
Celula receptoare produce un peptid cu mol. mic (GM=1000 daltoni) care determin sinteza unor substane
proteice de agregare de ctre celula donoare cu afinitate pentru unele substane adezive de pe suprafaa receptorului.
Se produce astfel o legtur strns ntre receptor i donor cu formarea unei puni intercelulare care permite transferul
de material genetic. Prin analogie cu substanele atrgtoare la insecte peptidul ce induce substana de agregare a fost
desemnat ca sexpheromon.
3.2.4.Transpoziia
Transpoziia presupune integrarea ntr-un genom al unui elemente genetic transpozabil din aceeai molecul de
ADN sau din alta prezent n aceeai celul. Elementele genetice transpozabile se mpart, dup structur i mecanism

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


de translocare, n 3 clase:
CLASA I cuprinde sevenele de inserie (IS) i transpozonii compui.
Secvenele de IS au n jur de 1000 de baze i fac parte n mod normal din cromozom sau plasmide. Ele sunt
prezente n mai multe copii i sunt flancate la cele 2 capete a aceleai baze, 10-40 pb-IR (inverted repeats), dar n
ordine inversat. Acestea nrmeaz secvena ce codific proteine necesare procesului de transpoziie. IS nu confer
ele nsi un caracter nou celulei, dar pot produce dup inseria lor modificri n expresia genelor adiacente inserrii.
Transpozonii compui constau din 2 IS care nu au nevoie de secvena de ADN pentru codificarea transpoziiei
i delimiteaz determinani de rezisten sau a unor caractere ce pot apare n fenotipul bacteriei.Un exemplu de
transpozon de clasa I este Tn 9 i Tn10, care codific rezistena la cloramfenicol i, respectiv, la tetraciclin.
Transpoziia elementelor din clasa I se face pe baza translocrii conservative, secvena transpozabil mutnduse de pe repliconul donor pe cel receptor fr reduplicarea tranposozonului.
CLASA II - cuprinde familia de transpozoni TnA care se transloc dup modelul transpoziiei replicative,
adic prin reduplicarea Tn nainte de translocare. Tn original rmne pe loc, iar copia se inser n noul situs. La
proces particip 2 enzime: transpozaza i rezolvaza. n timpul translocrii replicative se formeaz un produs
intermediar ntre repliconul donor i receptor care se numete cointegrat i care va fi desfcut de rezolvaz. Pe lng
genele care codific enzimele necesare transpoziiei, Tn de clasa II mai conine o gen ce confer celulei un caracter.
Tn3, de pild, codific rezistena la Ampicilin.

CLASA III cuprinde bacteriofagii transpozabili ca, de pild, fagul Mu i D 108, care folosesc transpoziia ca
mod de replicare. Fagul Mu este un fag temperat care se inser n cromozomul celulei bacteriene dup ptrundere.
Inseria acestui fag intrerupe activitatea genei n care s-a inserat i a unor gene neadiacente din acelai operon. Fagul
se replic, originalul ramne pe loc, iar copia se inser n orice alt loc de pe cromozom.
Inseria oricrei gene ntre dou elemente transpozabile face posibil transferul ei prin recombinare
neomolog, n aceeai celul pe o molecul de ADN nenrudit structural.
Astfel, prin transpoziie se pot produce deleii, inversii, transpuneri de determinani genetici de pe un plasmid
pe altul sau chiar fuzionarea stabil a unor repliconi complei, de pild a dou plasmide.
Evoluia rezistenei la antibiotice a bacteriilor nu poate fi conceput astzi fr fenomenul de transpoziie.
Studii moleculare au relevat posibilitatea ca genele de rezisten la antibiotice s fi aprut cu mult timp nainte,
la microorganismele productoare de antibiotice. Aceti determinani genetici au fost mobilizai i au ptruns prin
mecanismele transferului genetic la bacteriile importante din punct de vedere clinic.
Mecanismele transpoziiei sunt responsabile de formarea plasmidelor cu multirezisten, prin inserarea
succesiv pe un plasmid a determinanilor genetici de rezisten situai ntre dou elemente transpozabile de pe alte
plasmide.

4. RECOMBINAREA SECVENELOR DE ADN

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Indiferent care este mecanismul prin care are loc transferul sau transpoziia de material genetic, inserarea ADN
la noul sediu are loc prin recombinare.
Prin recombinare se nelege formarea de noi combinaii genetice ntr-un genom. Ea se poate petrece prin
schimb de segmente homologe sau prin integrare suplimentar de ADN.
Recombinarea legitim sau homolog are loc atunci cnd un fragment de ADN provenit de la celula donoare,
sau chiar din alt molecul de ADN se inser ntr-o regiune a ADN receptor ce se aseamn din punct de vedere
chimic cu cea a ADN-ului donor, deci prezint o homologie de baze. Este ntlnit n transformare, dar i n unele
forme de transducie i conjugare.
n ADN receptor se produc rupturi cu schimbul unor secvene homologe. n acest proces sunt implicate mai
multe enzime dintre care recA-proteina i recBC nucleaza. De aceea recombinarea legitim se mai numete recAdependent.
Recombinarea nelegitim sau heterolog const n integrarea de ADN suplimentar ntr-un replicon i este
recA-independent. Exemple de recombinare heterolog sunt integrarea a plasmidului F sau a unor profagi n
cromozom sau transpoziia elementelor genetice mobile.
Clonarea genelor este o form deosebit de recombinare nelegitim genetic in vitro. Astfel, plasmidele uor
transmisibile de la o bacterie la alta sunt folosite frecvent ca vectori pentru transferul i clonarea de material genetic
de la o bacterie la alta sau ntre organisme foarte ndeprtate din punct de vedere filogenetic. Prin aceast tehnic se
introduc n genomul bacterian gene care codific sinteza unor substane ca, de exemplu, interferoni, insulin, STH
etc., a cror obinere pe cale chimic ar fi fie imposibil, fie foarte costisitoare.
Bacteria preferat a ingineriei genetice este Escherichia coli, care n mod natural nu este capabil de
transformare, dar creia n vitro i s-au introdus n genom cei mai diveri determinani genetici provenind de la
organisme ndeprtate filogenetic, cum sunt omul i animalele.

1. GENERALIT I
Microorganismele triesc n mediul nconjurtor n prezena anumitor factori fizici, chimici i biotici
care influeneaz n mod favorabil sau defavorabil dezvoltarea i nmulirea lor. De-a lungul timpului,
omul a nv at s selecteze acei factori care s- i permite distrugerea speciilor patogene sau selectarea
speciilor folositoare.
n cele mai vechi civilizaii s-au cunoscut practici care au prevenit alterarea alimentelor, putrefacia
cadavrelor, fr a se cunoate rolul microorganismelor n aceste procese. Astfel, alimentele perisabile
au fost conservate prin adaus de sare, uleiuri aromatice, afumare sau fermentaie acid. Conservele au
aprut cu 50 de ani naintea cercetrilor lui Pasteur, fr a fi fost lmurit principiul care st la baza lor.
La nceputul secolului al XVIII-lea s-a folosit pentru prima oar clorura de var i fenolul pentru
dezodorizarea gunoaielor i n final pentru curirea plgilor, fr a se cunoate aciunea bactericid
a acestor substane.
Tehnicile de sterilizare s-au dezvoltat iniial n laboratoare pentru a permite izolarea miocrobilor n
culturi pure, ele fiind apoi rapid preluate de toate specialitile medicale pentru a preveni rspndirea
infeciilor.
Se folosesc doi termeni pentru a desemna distrugerea sau nlturarea microorganismelor,
sterilizarea i dezinfecia, diferena dintre ele fiind important.
Prin termenul de sterilizare, care este un termen absolut, se neleg procedeele fizice i chimice
care elimin toi germenii viabili (bacterii, spori, fungi, virusuri, parazii) de pe un obiect. Se
desemneaz ca steril un obiect care a fost supus unui procedeu de sterilizare i protejat n mod
corespunztor pentru a preveni contaminarea sa.
Se folosesc, n principiu, 4 metode de sterilizare:
sterilizarea prin cldur;

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


filtrarea prin filtre bacteriologice care rein bacteriile din lichidele ce nu pot fi supuse temperaturilor
ridicate;
iradierea cu raze UV sau raze ionizante;
sterilizarea chimic, metod evitat n general deoarece doar civa dezinfectani, foarte toxici
i iritani (ca de exemplu, formaldehida, oxidul de etilen etc.) folosii n condiii riguros
controlate, sunt capabili s omoare toate formele de via inclusiv sporii, fr a deteriora
obiectele de sterilizat.
Trebuie specificat, ns, c sterilizarea nu este identic cu distrugerea fizic a bacteriei, cu toate c
cele dou noiuni se folosesc des una n locul celeilalte. Acest aspect este foarte important, deoarece
soluiile perfuzabile, care sunt sterile dar conin bacterii omorte, a cror produi de degradare au
efecte pirogene, dau reacii toxice a cror gravitate merge pn la ocul endotoxinic. Deci, apa i
lichidele care vor servi la prepararea soluiilor injectabile sau perfuzabile trebuie s fie nu numai sterile,
dar s aib un grad pronunat de puritate.
Dezinfecia se refer n general la distrugerea intit a potenialului infecios n scopul de a
mpiedica rspndirea microbilor dintr-un anumit focar de infecie, rezultatul nefiind ntotdeauna
omorrea tuturor formelor microbiene, mai ales a endosporilor. Dezinfectantele sunt substane puternic
bactericide, cel mai des toxice pentru organismul uman. Dezinfecia se aplic acolo unde sterilizarea nu
se poate efectua: mobilier, aternuturi de pat, bazine de not, ncperi etc.
Metodele de dezinfecie sunt:
dezinfecia prin cldur umed i const n splarea obiectelor la 70-80C,
dezinfecia chimic.
Antisepsia const n aplicarea unor substane bactericide sau bacteriostatice n scopul de a omor
sau inhiba dezvoltarea florei patogene n plgi.
Asepsia cuprinde toate msurile care mpiedica contaminarea cu ageni infecioi a unei plgi.
Cinetica reaciei bactericide prin ageni fizici i chimici decurge ca o reacie de ordinul nti, ceea
ce nseamn c bacteriile supuse oricirei aciuni bactericide nu vor muri toate n acelai timp.
Criteriul fundamental de apreciere a aciunii bactericide a unei noxe este pierderea capacitii
microorganismului de a se nmuli atunci cnd este nsmnat ntr-un mediu favorabil. Testele de
viabilitate sunt foarte importante n prepararea vaccinurilor, de pild, a cror sterilizare se face prin
metode blnde pentru a nu modifica imunogenitatea microbilor. Astfel, exist posibitatea supravieuirii
unui numr mic de bacterii care dup ncetarea noxei se vor nmuli din nou.
Conservarea reprezint prevenirea alterrii prin ageni microbieni ai unor produse degradabile
cum sunt alimentele sau medicamentele.

2. STERILIZAREA PRIN CLDUR


Microorganismele sunt distruse la temperaturi ridicate ntr-un timp care depinde de mai muli factori:
temperatura, care este invers proproional cu timpul necesar expunerii bacteriilor,
numrul microorganismelor i al sporilor, elemente ce afecteaz rapiditatea sterilizrii,
specia i proprietatea de a sporula a microorganismelor. Sensiblitatea i supravieuirea la
cldur variaz la diferitele tulpini din cadrul aceleiai specii,
materialul n care este cuprins microorgansimul. Un coninut ridicat de substane proteice,
zaharuri, lipide, amidon, acizii nucleici sau uleiuri protejeaz sporii i formele vegetative de
aciunea cldurii. Prezena dezinfectanilor are efect sinergic cu cel al temperaturii ridicate,

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


pH-ul. Rezistena maxim a sporilor la cldur se situeaz la un pH de 7 i scade o dat cu
creterea aciditii sau alcalinitii,
condiiile n care are loc sporularea. Se pare c sporii formai n habitatul natural al microbilor
sunt mai rezisteni la cldur dect cei obinui pe mediile de cultur.
Sensibilitatea microorganismelor la cldur se poate exprima prin:
punctul termic letal, care se definete ca cea mai joas temperatur care distruge bacteriile dintr-o
cultur cu densitate dat n 10 minute. Pentru E.coli valoarea se situeaz la 55C, pentru bacilul
tuberculos la 60C, iar pentru majoritatea sporilor la 120C;
timpul termic letal, care se definete ca timpul minim n care are loc distrugerea bacteriilor la o
temperatur dat.
Dat fiind sensibilitatea diferit a tulpinilor din cadrul unei specii se prefer ca index pentru timpul n
care sunt distruse bacteriile timpul zecimal de reducere, sau valoarea D10, care este timpul minim
exprimat n minute care reduce viabilitatea culturii bacteriene cu 90% la o temperatur dat n condiii
standard.

2.1. Sterilizarea prin cldur uscat


Cldura uscat omoar microorganismele prin oxidarea distructiv a componentelor celulare. Cei
mai rezisteni spori sunt distrui de cldura uscat la 160 o, timp de 60 de minute. Cldura uscat de
100 o C distruge n 60 de minute bacteriile care sunt omorte prin cldur umed la 60 oC n 30 de
minute. Sporii fungilor sunt distrui n 60 de minute la 115 oC, iar cei bacterieni la temperaturi cuprinse
ntre 120-160 oC. n laboratorul de microbiologie se utilizeaz urmtoarele tehnici de sterilizare:
nclzirea la rou n flacr a obiectelor se aplic anselor bacteriologice n laboratorul de
microbiologie;
flambarea (trecerea prin flacr pentru cteva secunde) se aplic gtului baloanelor, eprubetelor
dup deschiderea i nainte de nchiderea lor, pipetelor nainte de utilizare pentru a preveni
contaminarea cu germenii din aer. Se mai sterilizeaz prin flambare instrumente de mic
chirurgie, dup ce se stropesc cu alcool, dar temperatura produs nu este suficient de nalt
pentru a asigura o sterilizare optim;
sterilizarea la pupinel. Pupinelul sau cuptorul cu aer cald este o cutie metalic cu perei dubli ntre
care se gse te un strat de azbest care mpiedic pierderile de cldur, o surs de cldur
care este energia electric i un termoregulator. n interior pupinelul este prevzut cu rafturi
pentru obiectele de sterlizat. Temperatura de sterilizarea la pupinel este de 160 oC timp de o or
sau 180 oC timp de 1/2 de or. La pupinel se sterilizeaz ntreaga sticlrie de laborator,
instrumentarul de stomatologie, seringi fr armtur metalic, pudre, uleiuri etc. Pupinelul nu
trebuie s fie suprancrcat, pentru ca aerul s poat circula nestingherit printre obiectele de
sterilizat.
sterilizarea cu raze infraroii este folosit pentru sterilizarea seringilor fr armtur metalic la
o temperatur de 180 oC. Sterilizarea se poate efectua i la 200 oC n vid, aplicndu-se
instrumentelor chirurgicale.

2.2. Sterilizarea prin cldur umed


Cldura umed este mai eficient dect cldura uscat, distrugnd bacteriile la o temperatur
mai sczut i timp mai scurt. Formele vegetative a majoritii bacteriilor, fungilor i virusurilor animale
sunt omorte de cldura umed n 10 minute la temperaturi cuprinse ntre 50 oC (Neisseria gonorrhoeae)
i 65 oC (Staphylococcus aureus). O susceptibilitate deosebit fa de cldur o prezint Treponema

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


pallidum, care este distrus n 10 minute la 43 oC. Rezistena maxim la cldur umed o are, ns,
Bacillus stearothermophylus, a crui form vegetativ se poate multiplica la 80 oC. O parte din virusurile
animale au o rezisten crescut fa de cldura umed, ca, de pild, virusul poliomielitic care este
inactivat la 60 oC dup 30 de minute, i virusul hepatitei B care dac se afl n ser rezist 10 ore la 60 o.
Muli bacteriofagi au o rezisten mai mare la cldur umed dect bacteria gazd, aceasta fiind
distrus la 60 oC n 15-30 minute iar bacteriofagul la temperaturi cuprinse ntre 65-80 oC.
Formele sporulate ale actinomicetelor, ciupercilor i a fungilor sunt mai rezistente dect formele
vegetative, dar nu att de rezistente ca i sporii bacterieni.
Rezistena sporilor bacterieni variaz la diferitele specii, dar chiar i ntre tulpinile aceleiai specii.
Astfel, majoritatea sporilor de Cl.tetani sunt distrui prin fierbere la 100 oC n 10 minute, dar s-au semnalat
tulpini a cror spori rezist la fierbere 1-3 ore, fiind cei mai rezisteni patogeni ce pot infecta o plag.
Rezistena lor determin standardele minime pentru sterilizarea chirurgical: 10 minute la 121 oC sau 30
de minute la 115 oC fr a socoti timpul de nclzire. Unii spori de Cl.botulinum rezist la fierbere la un
pH=7 pn la 8 ore iar la autoclavare 10-40 de minute la 115 oC.
Omorrea microorganismelor prin cldur umed se produce prin coagularea proteinelor
structurale i inactivarea enzimelor, cu participarea apei. Cei mai rezisteni spori sunt distrui prin
expunere la cldur umed la 121 o timp de 30 de minute.
fierberea este de fapt o metod de dezinfecie deoarece ea nu distruge toate formele sporulate.
Se efectueaz la 100 oC timp de 1/2 de or i se aplic siringilor i instrumentelor de mic
chirurgie atunci cnd nu este posibil alt metod. Fierberea se mai folosete n epidemii la
sterilizarea apei.
pasteurizarea a fost introdus de Pasteur pentru conservarea vinului, fiind utilizat i acum pentru
sterilizarea unor alimente lichide care nu suport temperaturi prea ridicate (lapte, bere, sucuri de
fructe). Metoda const n nclzirea lichidului la 62C pentru 30 de minute (pasterurizare joas),
71 oC 15 minute (pasteurizare medie), 80-85 o 3-5 minute (pasteurizare nalt) sau introducerea
unor vapori filani la o temperatur de 130 -150 oC sub presiune pentru cteva secunde
(ultrapasteurizare). Pasteurizarea este o metod eficient deoarece bacteriile patogene care se
pot dezvolta n lapte (Mycobacterium tuberculosis, Salmonella, Streptococcus i Brucella) nu sunt
bacterii sporulate, numrul lor reducndu-se dup pasteurizare cu 97-99%. Coxiella burnetii nu
este distrus prin pasteurizare joas.
tyndalizarea const n nclzirea produsului de sterilizat 3 zile la rnd, n baie de ap la 56-100 oC
cte o or. Temperatura se alege n funcie de produsul de sterilizat. Metoda se aplic lichidelor
care nu suport temperaturile ridicate, ca de exemplu: vaccinuri, medii de cultur ce conin
zaharuri n concentraie mare, proteine, gelatin etc. Formele vegetative sunt distruse n prima zi,
iar sporii se transform n forme vegetative ce vor fi distruse zilele urmtoare. Reamintim, ns,
c sporii bacteriilor termofile nu se distrug prin aceast metod.
autoclavarea este metoda folosit pentru instrumentarul de chirurgie iar n laboratoarele de
microbiologie pentru sterilizarea mediilor de cultur i a materialului infecios. Sterilizarea are loc
ntr-o atmosfer saturat de vapori de ap la 120 oC, la o presiune de 1 atm, timp de 20 de
minute, n aparate speciale numite autoclave.

3. ST E R I LI Z A R E A P RIN R A D I A I I
3.1. Razele neionizante
Razele ultraviolete. Puterea bactericid a razelor luminoase devine perceptibil la o lungime de
und de 330nm, crescnd pe msur scderii lungimii de und a luminii UV. Timpul necesar distrugerii
microorganismelor depinde de intensitatea luminii, distana de sursa de emisie i mediul n care se
gsesc microorganismele. Mecanismul bactericid al razelor UV const n inducerea formrii n celula

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


bacterian a unor dimeri de timin care interfereaz replicarea DNA, alterrile altor elemente structurale
bacteriene fiind neglijabile.
Fotoreactivarea. Modificrile induse n celulele bacteriene prin razele UV sunt reversibile, eficiena
sterilizrii nefiind deosebit de performant. Astfel, dac se expune o cultur bacterian care a fost
iradiat cu raze UV la lumina vizibil, o parte din dimerii de timin se vor disocia, bacteriile aparent
omorte relundu-i activitatea metabolic i nmulirea, care vor dep i de multe ori activitatea
iniial a culturii neiradiate.
n scop practic, lmpile cu vapori de mercur se folosesc pentru a reduce numrul de bacterii
existente n aer n slile de operaie, n laboratoare, n ncperi n care sunt adpostite animale de
experien etc.
Sensibilizarea fotodinamic . Razele luminoase vizibile au o aciune bactericid slab, care poate
ns fi crescut pn la nivelul aciunuii razelor UV dac sunt trecute prin colorani fluoresceni, ca,
de pild, eozina, rou bengal etc.

3.2. Radiaiile ionizante


Dintre radiaiile ionizante se folosesc n practic razele electromagnetice i cele particulare .
Razele , , neutronii i protonii au o penetrare redus sau induc o radioactivitate ridicat o obiectelor de
sterilizat. Radiaiile ionizante sunt folosite pe scar larg pentru sterilizarea materialelor medicale de
unic folosin.

4. ANTI S E P T I C E I D E ZINF E C T A N T E
Dezinfectantele sunt substane puternic bactericide la concentraii relativ sczute, folosite la
decontaminarea obiectelor i ncperilor. Spre deosebire de radiaiile letale care acioneaz asupra
DNA i a agenilor chimioterapici care interacioneaz ireversibil cu multiple sisteme metabolice, inta
de atac a majorittii dezinfectantelor este peretele celular, membrana celular cu enzimele asociate i
citoplasma. Ele acioneaz prin dizolvarea lipidelor din nveliurile celulare (detergeni, solveni lipidici)
sau prin denaturarea proteinelor structurale i enzimatice (oxidani, ageni alkilani, reactivi sulfhidrilici
etc.).
Antisepticele sunt substane cu aciune bacteriostatic, uneori bactericid, putnd fi aplicate pe
tegumente sau ca splturi ale unor mucoase (vaginal, uretral, otic etc.). Aceeai substan poate
fi antiseptic sau dezinfectant n funcie de concentraie.

4.1 Determinarea potenialului dezinfectant


Indicele fenolic (testul Rideal-Walker). Dup folosirea de ctre Lister a fenolului pentru dezinfecia
slilor de operaii, s-a convenit ca acest compus s fie socotit dezinfectantul standard, cu toate c
acioneaz n concentraii mai mari dect majoritatea dezinfectantelor folosite astzi. Indicele fenolic a
unui dezinfectant reprezint raportul dintre concentraia minim bactericid a fenolului i cea
dezinfectantului. Concentraia folosit n dezinfecie este n general de 5 ori mai mare dect CMB.
Microorganismele recomandate pentru a testa puterea bactericid a dezinfectantelor sunt n general
S.aureus, Ps.aeruginosa, S.typhi, dar i altele. Indicele fenolic se recomand pentru aprecierea
activitii bactericide a derivailor de fenol, deoarece ali dezinfectani nenrudii cu fenolul au o alt
evoluie a curbei de concentraie i susceptibilitatea diferit fa de agenii neutralizani ai mediului.
Unii ageni dezinfectani (srurile de mercur, detergeni) ader de bacterii i exercit o aciune
bacteriostatic, care mimeaz un efect bactericid. De aceea, cnd se nsmn eaz bacteriile ntr-un
nou mediu pentru a aprecia dac celulele bacteriene sunt viabile, este important includerea n mediu a

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


unui compus neutralizant care s desprind dezinfectantul de pe suprafaa mediului permind astfel
bacteriei s se nmuleasc
Eficiena unui dezinfectant depinde de mai muli factori, cum sunt concentraia dezinfectantului,
densitatea celulelor bacteriene, speciile crora le aparin, prezena formelor sporulate i timpul de
aciune al dezinfectantului. La aceti factori se mai adaug o serie de variabile, cum sunt:
curenia materialului care este supus decontaminrii. Coninutul mare n substane organice
a produsului de dezinfectat modific chimic dezinfec-tantul i-i reduce aciunea bactericid. Ideal
este, deci, s se testeze aciunea antibacterian a unui dezinfectant n condiiile n care este
aplicat,
accesibilitatea dezinfectantului. Astfel, de pild, nici dezinfectanii gazoi i nici cei lichizi nu pot
aciona asupra bacteriilor, dac acestea sunt prinse n cristale care s-au format n urma desicrii
produsului n care sunt coninute,
temperatura la care acioneaz dezinfectantul. Creterea temperaturii intensific activitatea
antibacterian a dezinfectantelor n condiiile termostabilitii lor,
pH-ul la care acioneaz dezinfectantele.
Dezinfectantele se folosesc n urmtoarele scopuri:
decontaminarea obiectelor nainte de utilizare sau reutilizare. Astfel, materiile fecale, urina, sputa
sau alte produse biologice ce constituie un focar de infecie trebuiesc dezinfectate nainte de curirea
recipientelor n care sunt coninute. De asemenea, se dezinfecteaz unele instrumentele medicale, ca,
de exemplu termometrele, instrumente ce nu se pot supune sterilizrii. Lamele i pipetele se introduc
ntr-un vas cu dezinfectant n care stau cel puin 24 de ore nainte de a fi splate,
reducerea contaminrii microbiene a mediului nconjurtor. n spitale specii ca, de pild,
stafilococi, streptococi, enterobacterii, bacili piocianici pot fi prezeni pe perei, pardosele, mobilier, n
buctrii, bi i WC- uri favoriznd apariia infeciilor nosocomiale. n general este suficient
curirea podelelor, a pereilor i a mobilierului cu ap cald i detergent, dezinfectantele fiind
necesare numai ariilor care se contamineaz cu produse infectate. Se dezinfecteaz, de asemenea,
ncperile n care au fost spitalizai pacieni cu boli contagioase (variol, TBC etc.),
dezinfecia (antiseptizarea) pielii minilor chirurgului nainte de efectuarea unei intervenii
chirurgicale i a pielii pacientului n regiunea In care va fi operat. Microorganismele florei flotante sunt
uor ndeprtate de pe piele prin splare cu ap i spun urmat de aplicarea unui antiseptic. Unii
microbi, ns, ca, de pild, Staphylococcus aureus i Staphylococcus epidermidis, care se gsesc
profund n foliculii piloi, sunt greu de ndeprtat i pot produce infecii postoperatorii,
antiseptizarea plgilor i a mucoaselor (colire, inhalaii, instilaii nazale, otice, splturi vaginale,
uretrale etc.).

4.2. Acizii i bazele


Efectul bactericid al acizilor i bazelor se datoreaz denaturrii brutale a proteinelor bacteriene.
Aciunea dezinfectant a unui acid crete, n general, paralel cu gradul de disociere electrolitic.
Cei mai bactericizi acizi n ordine descresctoare a activitii lor sunt: acidul azotic, dicromic, clorhidric,
persulfuric i permanganic. Acizii organici au o aciune bactericid mai slab. Acizii minerali se folosesc
mai rar n dezinfecie. Astfel, n laboratoare se utilizeaz amestecul sulfocromic pentru dezinfecia i
degresarea pipetelor.
Ca antiseptice se folosesc mai frecvent:
acidul boric: 2-3% n soluii apoase, 10% n unguente i 0,005 - 1,6% pentru colire. Nu se aplic
sugarilor, pentru c este toxic i nu se aplic pe plgi ntinse,

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


acidul acetil glacial: diluat 28 -32% se utilizeaz n dermatologie i stomatologie ca antiseptic,
astringent, cauterizant i antifungic.
Bazele, ca i acizii, sunt active n funcie de gradul de disociere. Acizii cu proprieti puternic
bactericide sunt: KOH, NaOH, LiOH, NH 4OH. Se pare c aciunea bazelor se datoreaz nu numai
radicalilor rezultai prin disociere, ci i bazelor nedisociate cu efect bactericid care ptrund n celula
bacterian. Dintre baze, Ca(OH) 3 este folosit la vruirea ncperilor iar soluia cald de NaOH 5% ca
dezinfectant.
Sensibilitatea la acizi i baze este diferit de la specie la specie. Astfel, Mycobacteriile sunt relativ
rezistente la acizi i baze, NaOH i H 2SO 4 1N fiind folosite pentru lichefierea sputei n scopul izolrii
bacilului tuberculos.

4.3 Srurile
Dintre sruri, cele ale metalelor grele au efectul bactericid cel mai puternic. Astfel, ionii de Hg i Ag
sunt activi ntr-o proporie de 1/un milion. Aciunea lor bactericid se datoreaz combinrii lor cu
grupri active al enzimelor pe care le inactiveaz. Eficiena lor depinde, ns, mai degrab de
densitatea culturii bacteriene dect de concentraia lor, deoarece ei sunt absorbii repede i
preferenial de bacterii, atingnd n bacterii concentraii mari n defavoarea concentraiei din mediu.
clorura de mercur (sublimatul) 1%o se folosete n laboratoare ca dezinfectant pentru pipete i
lame;
merthiolatul, care este un compus organic al mercurului, este folosit drept conservant pentru seruri
i vaccinuri n concentraie de 1/10.000 i ca dezinfectant n concentraie de 1/1000;
nitratul de argint n concentraie de 1% se folosea n profilaxia oftalmiei gonococice la nou-nscut
nainte de introducerea penicilinei n terapie;
colargolul, protargolul i argirolul sunt compui de argint care se folosesc sub forma de colire i
unguente n concentraie de 1-1,5%;
compuii organici ai arsenului, bismutului, antimoniului au fost utilizai n trecut n tratamentul
sifilisului i a unor infecii produse de unele protozoare.
sulfatul de cupru este folosit cu succes ca fungicid, dar nu n medicin, ci n agricultur;
oxidul de zinc se folosete ca antiseptic, astringent i caustic n dermatologie.

4.4. Halogenii
Halogenii cei mai utilizai ca antiseptice i dezinfectante sunt clorul i iodul, ambele cu aciune
puternic bactericid i sporicid. Mecanismul de aciune al halogenilor se bazeaz pe proprietile lor
oxidante.
Clorul a fost introdus ca dezinfectant de O.W.Holmes la Boston n anul 1835 i de Semmelweis la
Viena n 1847 pentru a preveni transmiterea febrei puerperale prin minile medicilor.
clorul gazos n concentraie de 2-3mg%o este folosit pentru potabilizarea apei, dar concentraia
trebuie s fie mai mare dac apele au coninut crescut de substane organice, deoarece
acestea fixeaz i inactiveaz clorul;
hipocloritul de sodiu se folosete tot pentru dezinfecia apei, a veselei i a WC- urilor, la
curirea suprafeelor n industria alimentar, n uniti de alimentaie public etc;
cloramina este folosit ca dezinfectant pentru vesel, lenjerie, n concentraie de 2-3% i ca
antiseptic n concentraie de 1%;
Iodul este un oxidant puternic i se combin ireversibil cu proteinele bacteriene. Se folosete sub
form de:

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


soluie alcoolic 1-2% ca antiseptic cutanat
tinctur de iod care conine 4-5% iod i 2-5% iodur de potasiu se utilizeaz tot ca antispetic
cutanat pentru antiseptizarea pielii nainte de intervenii chirurgicale. Att soluia alcoolic
ct i tinctura nu pot fi aplicate direct pe plgi deoarece au efect distructiv asupra esuturilor;
iodoforii conin iod complexat cu un detergent anionic au o serie de avantaje. Au o penetrabilitate
foarte bun a pielii, nu sunt iritani deoarece iodul este eliberat treptat din combinaie i nu
ptez lenjeria. Un exemplu este betadina, un complex hidrosolubil al iodului cu polivinilpirolidona.
Preparatul poate fi folosit pentru antiseptizarea plgilor superficiale.

Dezavantajul antisepticelor cu iod este alergizarea pe care o produc la unele


persoane.
4.5. Formaldehida i glutaraldehida
Formaldehida nlocuiete atomii labili de H din gruprile NH 2 sau -OH, frecvente n nucleoproteine
i din gruprile -COOH i -SH ale proteinelor. Este la fel de activ fa de spori ca i fa de formele
vegetative, probabil pentru c poate ptrunde uor n celula bacterian datorit dimensiunilor reduse
ale moleculei i pentru c reacioneaz n lipsa apei.
Formaldehida este un gaz, forma obinuit de prezentare fiind o soluie de 37% numit formalin.
n concentraie de 0,1% a fost utilizat mult timp n prepararea vaccinurilor prin detoxifierea
toxinelor.
se poate utiliza sub form gazoas sau lichid pentru sterilizarea diferitelor suprafee.
Formaldehida gazoas este pus n libertate dintr-un polimer, paraformaldehida i este folosit la
dezinfecia ncperilor, a mobilierului i n general a obiectelor care nu pot fi sterilizate prin cldur. Ea
nu deterioreaz obiectele supuse dezinfeciei (mbrcminte, obiecte de metal, lemn, piele etc.), dar are
o aciunea iritant asupra conjunctivei i cilor respiratorii.
Glutaraldehida 2% n soluie apoas este mai activ dect formolul i mai puin iritant. Este
mai activ n mediu alcalin fiind bactericid, sporicid i virulicid. Este indicat n sterilizarea unor
instrumente medicale ce nu pot fi supuse sterilizrii prin cldur, ca, de pild, cistoscoape, echipament
de anestezie, materiale plastice i termometre.

4.6. Dezinfectanii gazoi


Succesul obinut n prevenirea toxiinfeciilor alimentare nu a putut fi nici pe departe reeditat n
infeciile ce se transmit pe care aerian. Pulverizarea fenolului n slile de operaie introdus de Lister
a fost rapid abandonat. Pulverizarea propilenglicolului sau a dietilenglicolului n concentraii mici,
netoxice pentru om, reduc mult numrul de bacterii din aer, dar aceti produi sunt foarte sensibili la
umiditate pe de o parte, iar pe de alt parte nu distrug bacteriile de pe mobilier, suprafee ce constituie
de fapt una din sursele bacteriilor din aer.
oxidul de etilen este un gaz foarte solubil n ap, fiind cel mai potrivit dezinfectant gazos pentru
suprafee uscate. Este ns destul de costisitor i are o toxicitate rezidual. Se utilizeaz la sterilizarea
materialelor care nu suport temperaturi ridicate: obiecte din plastic, echipament chirugical, cri,
obiecte din piele care au fost contaminate de pacieni contagioi. Fiind exploziv, se utilizeaz n
amestec de 90% cu CO 2.

4.7. Agenii tensioactivi


Spunurile au o aciune moderat bactericid datorit acizilor grai nesaturai pe care i conin

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


(acizii oleic, linoleic i linolenic) mai ales asupra florei gram pozitive. Flora gram-negativ, mai ales cea
din grupul coliformilor, este mai sensibil la spunuri ce conin acizi grai saturai. Nu se cunoate
exact mecanismul bactericid al spunurilor, ele fiind folosite mai ales pentru ndeprtarea mecanic a
microbilor de pe piele prin splare. n spunuri se pot ncorpora diferite antiseptice care intensific
aciunea antibacterian a acestora.
Detergenii sunt substane tensioactive sintetice. Din punct de vedere chimic, ei se mpart n
detergeni anionici ce includ alcooli sulfatai, alkilaril sulfonai etc., detergeni cationici care sunt
compuii cuaternari de amoniu n care cei 4 atomii de hidrogen sunt nlocuii prin radicali organici,
detergeni neionici care sunt poliesteri i eteri formai din condensarea unor acizi grai, alcooli i fenoli
i, n sfrit, detergenii amfoteri care conin att grupri anionice ct si cationice. Dintre detergeni
importani ca antiseptice i dezinfectante sunt:
detergenii anionici (Perlan, Dero, Alba etc.) se folosesc ca ageni de splare a lenjeriei, veselei,
instalaiilor industriale etc., aciunea lor antibacterian fiind moderat faa de bacteriile gram
pozitive i neglijabil fa de cele gram-negative,
detergenii cationici sunt frecvent utilizai n dezinfecie datorit combinrii proprietilor
tensioactive cu cele antimicrobiene, fiind lipisii n acelai timp de toxicitate. Ei au aciune
antibacterian, antifungic, antiviral, sunt ineficieni fa de spori i sunt inactivai de spunuri
i substane organice. La noi se folosete bromocetul (bromura de cetrimoniu) ca antiseptic pentru
tegumente n concentraie de 1-2%o i ca dezinfecant n concentraie de 1%. Pseudomonas
aeruginosa este foarte rezistent fa de bromocet, fiind des izolat chiar de pe dopurile sticlelor n
care este pstrat acesta. Un alt compus cuaternar de amoniu este zefirolul (clorura de benzalconiu)
care se folosete ca antiseptic n concentraie de 1/10.000-1/40.000 i drept conservant pentru
colire n proprorie de 0,01%. n concentraie de 12 poate fi pulverizat pentru dezinfecia
pereilor sau a altor suprafee, nefiind toxic pentru conjunctiv i cile respiratorii,
detergentii cationici sau compuii de tip Tego sunt derivai de dodecil-(diamino)-etilglicin. La o
concentraie de 1% sunt activi fa de o gam larg de bacterii gram-pozitive, gram-negative i
unele virusuri. Activitatea lor este ns diminuat de prezena substanelor organice sau chiar de
apa cu coninut mare de calciu. Se poate utiliza ca antiseptic cutanat i sub form de sprayuri, dar
este nlocuit n general prin dezinfectani mai activi i mai ieftini.
Fenolii. Fenolul (C 6H 5OH) sau acidul carbolic este un bun denaturant al proteinelor precum i un
detergent. Aciunea sa bactericid presupune liza celulelor bacteriene. El se poate folosi ca dezinfectant
n concentraie de 2,5% la decontaminarea bilor, a podelelor de spital, a plotilor etc., fiind ns iritant.
Este activ faa de majoritatea bacteriilor, inclusiv fa de bacilul tuberculozei i spori. n cocentraie de
1%o se folosete pentru conservarea vaccinurilor.
Activitatea antibacterian a fenolului crete prin halogenarea sau alkilarea inelului, ceea ce
intensific polaritatea gruprii fenolice (-OH), restul moleculei devenind mai hidrofob. Compusul
halogenat este mai tensioactiv i puterea bactericid crete de 100 de ori. Spre deosebire de
detergenii cationici, aciunea fenolilor este intensificat de spunuri care le faciliteaz ptrunderea.
Lungimea catenei fenolului crete pn la un punct activitatea antibacterian, pentru a o scdea la o
lungime ce dep e te o anumit limit.
mixtura de tricresol (ortho, meta, para-metilfenol) i spun este larg utlizat pentru dezinfecia
materialelor rezultate din laboratorul de bacteriologie, aciunea nefiind diminuat de prezena materiilor
organice. Are un miros neplcut i ptrunztor.
lizolul este un amestec de tricrezol i un spun de K. Se utilizeaz ca dezinfectant n medicina
veterinar, fiind activ asupra bacilului lui Koch n concentraie de 3.
difenolii halogenai, ca, de pild, hexaclorofenul este bacteriostatic n diluii foarte mari
(1/2.500.000) i este mai puin inactivat de spunuri dect detergenii anionici. Hexoclorofenul nu are

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


mirosul ptrunztor al celorlali fenoli i nu este prea volatil. Este larg utilizat pentru dezinfecia pielii n
combinaie cu un detergent, sau n spunurile deodorante care mpiedic descompunerea sudorii sub
aciunea bacteriilor. n cazurile n care este posibil absorbia lui pe cale cutanat din pudre (de
exemplu prin pielea sugarilor imaturi), pot apare semne toxice sistemice.
esterii alkil ai acidului p-hidroxibenzoic sunt folosii n conservarea alimentelor i a
medicamentelor. Ei acioneaz pe bacterii ca i fenolii alkilai, dar sunt netoxici cnd ptrund pe cale
oral deoarece sunt rapid hidrolizai n p-hidroxibenzoat, netoxic.
uleiurile eseniale care au fost utilizate nc din antichitate ca antiseptice i conservante conin o
mare varietate de compui fenolici cum sunt tymolul (5-metil-2-isopropilfenol) i eugenolul (4-alil-2methoxifenol). Ultimul este folosit n stomatologie.

4.8. Solvenii volatili


Alcooli. Aciunea dezinfectant a alcoolilor alifatici crete o dat cu lungimea catenei de carbon
pn la C8-C10, dup care solubilitatea n ap descrete. Aciunea dezinfectant a alcoolilor, precum
i activitatea lor de denaturare a proteinelor presupune prezena apei.
Metanolul este activ n soluii de 50-70% i este foarte des utilizat n antiseptizarea pielii nainte de
injecii i puncii venoase. Pielea pe care se aplic alcoolul etilic trebuie s fie uscat, diluarea
alcoolului etilic scznd puterea sa bactericid. Aplicarea alcoolului pe piele ndeprteaz stratul lipidic
fcnd pielea nereceptiv fa de ali dezinfectani liposolubili. Adausul de clorhexidin (0.5%) sau de
iod (1-2%) crete foarte mult activitatea bactericid i sporicid.
alcoolul de 95% are o actiunea dezinfectant foarte slab, datorit lipsei de ap, sporii de bacil
crbunos rezistnd n alcool pur peste 51 de zile
cu toate c este mai puin folosit, alcoolul isopropilic are o serie de avantaje: nu este att de
volatil, deci persist timp mai ndelungat pe suprafee, este puin mai activ i nu constituie o restricie
legal folosirea lui n recoltarea sngelui pentru stabilirea alcoolemiei.
Ali solveni organici ca de exemplu eterul i acetona sunt slab bactericizi i nu pot fi folosii ca
antiseptice sau dezinfectante.
Adausul a ctorva picturi de toluen sau cloroform n ap va avea un caracter pronunat antifungic
i antibacterian.
Glicerolul este bacteriostatic ntr-o concentraie de peste 50% i este folosit la conservarea
vaccinurilor sau altor produse biologice, nefiind iritant pentru organism.

4.9. Ali dezinfectani


Peroxidul de hidrogen ntr-o concentraie de 3% este folosit ca antiseptic, dar nu este recomandabil,
susceptibilitatea bacteriilor fiind diferit.
Permanganatul de potasiu (KMnO 4) este un antiseptic uretral sau vaginal n concentraie de 1/1000.
Acidul peracetic (CH 3-CO- O-OH), agent puternic oxidant, este folosit sub forma de vapori pentru
sterilizarea camerelor unde se cresc animale germ-free, pentru care este ns toxic.

4.10. Coloranii
Coloranii trifenilmetanici, cum sunt cristal-violetul, metil-violetul i verdele briliant, sunt substane
puternic bacteriostatice, slab bactericide active mai ales pe bacteriile gram-pozitive. Violetul de geniana
se poate folosi ca antiseptic n concentraie de 0,2%.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Coloranii tiaznici, cum este albastrul de metilen, se folosesc ca antiseptici externi n concentrnaii
de 0,2%- 0,5%. Albastrul de metilen poate fi administrat ca antiseptic intern in infeciile urinare
(urodezinfectante).

Dintre coloranii acridinici, cel mai utilizat este rivanolul (lactat de metacridin) n
concentraii de 1-2%, la antiseptizarea plgilor chirurgicale i traumatice.

P rintele chimioterapiei antiinfecioase este Paul Ehrlich, care dup numeroase sinteze i
cercet ri asupra compu ilor arsenicali obine n anul 1909 salvarsanul (compusul 606) activ
asupra Treponemei pallidum i altor spirochete.
n anul 1929 Fleming descoper penicilina, secretat de mucegaiul Penicillium notatum, dar
introducerea ei n terapie s-a produs de abia dup un deceniu, fiind meritul a doi chimiti de la
Oxford, Florey i Chain.
Studiind aciunea bactericid a unor colorani, Domagk (1934) descoper c prontozilul
rou administrat la oareci i protejeaz de efectul letal al infeciei experimentale cu streptococi
beta-hemolitici, n ciuda faptului c in vitro este lipsit de activitate bactericid . Trfoul i Niti
(1935) arat c n organismul oarecilor prontozilul se descompune ntr-un compus cu aciune
bacteriostatic - sulfamida.
n trecut, sub denumirea de chimioterapice erau desemnate substanele antimicrobiene
obinute prin sintez chimic (sulfamide, sulfone, nitrofurani etc.) iar sub cea de antibiotice
substane de origine biologic, secretate de unele bacterii i mucegaiuri. Cu timpul, ns , unele
antibiotice s-au obinut mai u or pe cale sintetic dect pe cale biologic (de exemplu
cloramfenicolul), motiv pentru care termenul de chimioterapic antiinfecios este utilizat ast zi
pentru orice substan folosit n tratamentul infeciilor, indiferent de origine.
Introducerea chimioterapiei antiinfectioase a dus la o cre tere spectaculoas a ratei de
supravieuire dup infecii. Din p cate, ns , rezultatele nceputului nu mai pot fi reeditate
deoarece utilizarea antibioticelor n infeciile bacteriene a determinat, n decurs de 50 de ani,
apariia sub presiune selectiv a fenomenului de rezisten . Ca urmare, producerea de
chimioterapice antiinfecioase a devenit o industrie care, fiind n permanent concuren cu
apariia tulpinilor rezistente, caut produi noi fa de care microorganismele s fie sensibile.
Introducerea unui nou chimioterapic n practica medical este evaluat la 200 milioame de
dolari i parcurge mai multe etape care dureaz aproximativ 10 ani.

1. CLASIFICARE
sunt:

Chimioterapicele se clasific dup mai multe criterii, dintre care de importan medical

1.1 Aciunea bactericid sau bacteriostatic asupra


microorganismelor
Un chimioterapic bacteriostatic, care opre te doar nmulirea bacteriilor, nu le va putea
elimina din esuturi fr intervenia factorilor rezistenei naturale i dobndite.

n lipsa mecanismelor acestora nici chimioterapicele bactericide nu sunt


eficient deoarece ntr-o populaie bacterian exist ntotdeauna cteva tulpini cu
rezisten fenotipic , a a-numitele tulpini persistente (persister) care apar n
culturile in vitro cu o frecven de 1/106 -1/108 . Dup ntreruperea chimioterapiei,
aceste tulpini se vor nmuli i vor produce recidive.
mprirea chimioterapicelor n bacteriostatice i bactericide este artificial,
deoarece aciunea static sau/ i cid este condiionat i de concentraia
chimioterapicului, timpul de aciune i specia bacterian asupra c reia
acioneaz.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


1.2 Mecanismul de aciune
1.3 Spectrul de aciune
Spectrul de aciune al unui chimioterapic antiinfecios este reprezentat de toate speciile bacteriene
sensibile la acel chimioterapic.
Spectrul natural cuprinde toate speciile bacteriene sensibile la un chimioterapic n momentul
introducerii sale n terapie.
Este foarte important ca medicului practician s cunoasc spectrul natural al antibioticelor,
deoarece atunci cnd nu exist posibilitatea efectu rii antibiogramei el va trebui s aleag un
antibiotic la care microbul este n mod natural sensibil.
Prospectul care nsoete antibioticele indic medicului spectrul natural.
Spectrul actual al unui chimioterapic cuprinde tulpinile microbiene sensibile la un anumit antibiotic,
la un moment dat, ntr-o zon limitat i depinde n mare m sur de antibioticele utilizate n zona
respectiv. Spectrul actual este mai restrns dect cel natural, deoarece n timpul scurs de la introducerea
chimioterapicului n practic are loc apariia tulpinilor rezistente.

2. FARMACOCINETIC
O chimioterapie antiinfecioas poate fi eficient numai dac n focarul infecios se realizeaz
concentraii de antibiotic biologic active asupra germenilor patogeni.
Concentraia minim inhibitorie (CMI) a unui antibiotic pentru o anumit tulpin bacterian este cea
mai mic concentraie care inhib complet multiplicarea tulpinii respective.
Concentraia minim bactericid (CMB) a unui antibiotic pentru o tulpin este concentraia minim
care omoar tulpina. Cu ct CMI sau CMB sunt mai mici fa de nivelul seric maxim pe care l poate
atinge un antibiotic, cu att acesta este mai activ.
Majoritatea antibioticelor se administrez la intervale de timp fixe n funcie de perioada de
njumtire a antibioticului. n unele cazuri, timpul de njumtire este att de scurt nct este necesar
administrarea continu a antibioticului prin perfuzie.
La administrarea intermitent a unui antibiotic, concentraia plasmatic depinde de doz , de
intervalul administr rii, de absoria i eliminarea antibioticului. Cu ct perioada de resorbie este mai
lung cu att concentraia va fi mai mic. Prin eliminare se neleg procesele prin care se inactiveaz
principiul activ al unui antibiotic sau se elimin din organism. De obicei eliminarea are loc prin filtrare
glomerular sau prin secreie tubular . Mai rar, unele antibiotice se pot elimina prin intestin, dup ce
urmeaz un ciclu enterohepatic de retrorezorbie sau sunt metabolizate n ficat prin reacii de oxidare,
reducere, hidroliz sau conjugare.
Raportul dintre concentraia sanguin a chimioterapicului i cea din focarul infecios depinde de pe
de o parte de diferitele propriet i fizico-chimice ale chimioterapicului iar pe de alt parte de
macroorganism. Constanta de disociere (pK), solubilitatea, dimensiunea molecular a antibioticului i ali
factori cum sunt perfuzarea diferitelor organe i esuturi, pH-ul plasmei i n focarul infecios etc.
influeneaz repartizarea regional i astfel raportul dintre concentraia plasmatic i cea din focar.

3. TOXICITATE

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Cu toate c antibioticele au o aciune selectiv asupra microbilor, ele pot avea efecte secundare
nefavorabile asupra macroorganismului uneori chiar i n doze terapeutice. Acestea sunt:
efecte toxice propriu-zise. Acestea se datoreaz supradozrii relative sau absolute a antibioticului
i apar mai ales la pacieni cu tulburri ale funciei renale sau hepatice, la gravide, la sugari, copii etc.
Pentru a preveni apariia acestor efecte i a evita instalarea efectelor cumulative (de exemplu
ototoxicitatea streptomicinei), este obligatorie stabilirea unei concentraii serice optime i urmrirea dozei
totale de antibotic administrat,
reaciile alergice reprezint o problem serios a chimioterapiei. Utilizarea frecvent a
antibioticelor sub cele mai diverse forme (unguente, sprayuri etc.) cre te posibilitatea de sensibilizare.
Cea mai grav form de sensibilizare este cea la penicilin, deoarece poate produce oc anafilactic cu
evoluie letal n lipsa unei intervenii terapeutice prompte i competente,
efectele biologice se refer la modificarea florei normale a organismului, factor de baz n
rezistena natural antiinfecioas. Distrugerea florei normale duce la nmulirea compensatorie masiv a
unor germeni rezisteni care vor produce infecii postantibiocoterapice greu de tratat. De pild , dup
tratamente intempestive cu antibiotice care distrug flora tubului digestiv se produc o infecii grave cu
germeni din genul Candida.

4. REZISTENA BACTERIILOR LA ANTIBIOTICE


Se deosebesc dou tipuri de rezisten a bacteriilor la antibiotice:
- rezistena natural, care este un caracter de specie, determinat genetic, deci absolut, i
- rezistena dobndit, care apare la tulpinile unor specii natural sensibile la un anumit antibiotic. Ea
este relativ , deoarece desemneaz rezistena unei tulpini la concentraiile de antibiotic utilizate n
terapie.
Num rul tulpinilor cu rezisten dobndit este n continu cre tere, n apariia acestui fenomen
eseniale fiind:

4.1. Mecanismele rezistenei dobndite


Rezistena la antibiotice se instaleaz prin mecanisme negenetice i genetice.
Mecanismele negenetice, de importan mai redus, constau n esen n:
inactivitatea metabolic a celulei bacteriene. O serie de antibiotice acioneaz numai n faza de
multiplicare a bacteriilor. Astfel, de pild, micobacteriile supravieuiesc n esuturi ani de zile inactive din
punct de vedere metabolic, fr a se nmuli, rezistnd astfel la aciunea antibioticelor bacteriostatice;
lipsa intei de atac pentru antibiotic. Formele L ale bacteriilor (cele care au pierdut peretele
celular) sunt foarte rezistente la antibioticele care acioneaz asupra acestei structuri celulare (betalactamine).
Mecanismele genetice prin care o celul bacterian dobnde te rezistena sunt cele ale
variabilitii bacteriene: mutaia i adausul de material genetic (transformare, transducie, conjugare i
transpoziie).
O celul bacterian poate deveni rezistent la un antibiotic printr-o singur mutaie (one-step
mutation). Astfel rezistena la streptomicin poate fi dobndit prin alterarea unei proteine ribozomiale, iar
schimbarea unui singur aminoacid din dehidropteroat-sintetaz, enzim necesar sintezei de acid folic,
scade afinitatea bacteriei pentru sulfamide. Rezistena se poate instala i prin mutaii succesive
(multistep), ca, de exemplu, rezistena la penicilin a gonococului.
Mecanismul cel mai frecvent prin care se instaleaz rezistena la antibiotice este transferul

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


plasmidelor de rezisten (sau plasmide R) dela o bacterie la alta. Acest tip de rezisten infecioas
sau epidemic transmisibil printre bacterii a fost descris pentru prima oar de cercettori japonezi, la
tulpinile de Shigella. Plasmidele R pot conine determinani genetici care codific rezistena la unul sau
mai multe antibiotice ce aparin unor familii diferite, deci cu structur diferit.
Plasmidele pot trece barierele de specie, astfel c acelea i gene de rezisten R se reg sesc la
bacterii ce aparin unor specii diferite. De exemplu, plasmidul TEM- 1, cel mai frecvent plasmid ce codific
sinteza beta-lactamazei la enterobacterii, este reg sit la Neisseria gonorrhoeae (gonococ) i H.
influenzae.
Num rul factorilor R de pe un plasmid de rezisten se pot nmuli prin intermediul transpozonilor
(gene s lt ree) deoarece ace tia se pot integra att n cromozom precum i n plasmide. Unii
supergermeni izolai n spitale pot avea pn la 15 factori de rezisten R. Stabilitatea lor este mai mare
dac se integreaz n cromozom, diseminarea lor depinznd deci de rapiditatea multiplicrii bacteriene.
Translocarea transpozonilor este posibil din cromozom n plasmide i chiar de la plasmidele
netransmisibile le cele transmisibile, ceea ce permite o diseminare foarte rapid a genelor de rezisten
printre bacterii.

4.2. Suportul biochimic al rezistenei


Caracterele noi pe care le dobnde te celula bacterian rezistent , mecanismele biochimice prin
care eludeaz aciunea antibioticului sunt n prinicipiu urmtoarele:
inactivarea chimioterapicului prin producerea unor enzime inhibitoare. Astfel de enzime sunt, de
pild , betalactamazele care hidrolizeaz inelul betalactamic al penicilinelor i cefalosporinelor,
aminoglicozidazele cu aciune antibioticelor aminoglicozidice (streptomicin , gentamicin etc.),
acetiltransferaza care inactiveaz cloramfenicolul etc. Secreia lor este cidificat n general de plasmide
R,

transformarea intelor moleculare sensibile n inte rezistente. Acest mecanism


presupune o modificare la nivelul structurii de care se ataeaz antibioticul astfel nct
accesul antibioticului s nu mai aib loc. Spre exemplu, rezistena la quinolone se
bazeaz pe modificarea unei subunit i A DNA-girazei, care constituie chiar locul de
aciune al quinolonelor,
sc derea concentraiei antibioticului n celula bacterian se realizeaz prin sc derea
permeablit ii peretelui celular i a membranei citoplasmatice, sinteza de c tre bacterie a unui num r
crescut de situsuri de combinare cu antibioticul, sinteza unor metabolii antagoni ti, folosirea unei c i
metabolice care ocolete substana inhibat de antibiotic i un eflux activ de antibiotic,
realizarea unui eflux activ prin proteine transportoare, situate n membrana citoplasmatic , ce
realizeaz un eflux superior influxului de antibiotic.

4.3. Transformarea unei tulpini ntr-o populaie rezistent


ntr-o populaie de bacterii sensibile exist ntotdeauna un num r redus de tulpini rezistente.
nlocuirea populaiei sensibile cu una rezistent se realizeaz prin selecie. De pild, dac intestinul gros
este populat de E.coli sensibil la tetraciclin i n populaia respectiv exist o singur tulpin rezistent la
tetraciclin, administrarea acestui antibiotic va elimina ntreaga populaie, cu excepia tulpinii respective.
Acesta, nemaifiind supus competiiei, se va muli n mod compensator i va nlocui populaia disprut.
Tulpinile rezistente se pot transmite de la purt torul tulpinii la un alt organism prin contact direct.
Purt torii cei mai frecveni de tulpini cu multirezisten fac parte din personalul medical din spitale.
Datorit utilizrii antibioticelor se formeaz cantiti mari de aerosoli ncrcai cu aceste substane, pe

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


care personalul medical le inhaleaz zilnic. n acest fel tulpinile sensibile de Staphylococcus aureus, de
exemplu, din faringele i vestibulul nazal al unei persoane vor disprea, dar vor persista cele cteva tulpini
rezistente ce vor repopula faringele.
Tulpinile periculoase de spital sunt acelea care au patogenitatea maxim caracteristic speciei, fiind
totodat multirezistente la antibiotice. Ele aparin n general speciilor purt toare de fR, Pseudomonas ,
Proteus, Klebsiella, Escherichia, Staphylococcus aureus etc. Este firesc ca aceste tulpini s apar n
spital, deoarece aici se aplic frecvent antibioticoterapia i tulpinile au posibilitatea de a se dezvolta n
organisme cu ap rarea antiinfecioas deficitar . Ele pot duce la apariia epidemic a unor infecii
nosocomiale cu evoluie grav.
Tulpinile multirezistente pot proveni i din mediu nconjurtor, mai ales din alimente. Unii cresc tori
de animale administreaz acestora necontrolat antibiotice care selecteaz din flora normal a animalelor
tulpinile rezistente.

6. TESTAREA ACTIVITII ANTIBACTERIENE A


CHIMOTERAPICELOR
Exist , n principiu, dou posibilit i de testare a activit ii antibacteriene a chimioterapicelor:
antibiograma n diluii i antibiograma difuzimetric.
Prin antibiograma n mediu lichid, n diluii crescnde de antibiotic se poate stabili precis
concentraia minim inhibitorie (CMI) i concentraia minim bactericid (CMB) a antibioticului fa de o
anumit specie bacterian. Se folose te n cercetare, deoarece este pretenioas din punct de vedere
tehnic, presupune un consum mare de materiale i depete n general necesitile clinice. Principiul
antibiogramei n diluii este ilustrat n urmtoarea figur:
n examenele bacteriologice de rutin se utilizeaz antibiograma difuzimetric, n mediu solid, dup
tehnica Kirby-Bauer. Ea const n ns mnarea tulpinii de cercetat pe suprafaa unui mediu solid i
aplicarea unor microcomprimate de antibiotice pe suprafaa mediului. Dup o termostatare de 16 ore se
apreciaz sensibilitatea germenelui n funcie de diametrul zonei de inhibiie care apare n jurul
microcomprimatului de antibiotic. Fiecare firm productoare de microcomprimate livreaz, mpreun cu
acestea, o list din care rezult coresponden diametrului zonei de inhibiie m surat n mm i
sensibilitatea la fiecare microcomprimat.
Recent s-a introdus o alt variant de antibiogram pe mediu solid, testul E, care permite stabilirea
precis a CMI. n loc de microcomprimate se aplic pe mediul de cultur nsmnat fii de hrtie de filtru
impregnate cu antibiotic n concentraie crescnd . Astfel, la un capt al fiei concentraia este minim
iar la cellalt capt maxim. Dup diametrul zonei de inhibiie corespunztoare fiecrei concentraii se va
putea calcula CMI.
Cunoscnd CMI pentru antibioticele la care un germene este sensibil, nivelul seric maxim care se
poate realiza i capacitatea de difuziune a antibioticului n focarul infecios se va putea alege varianta
optim de tratament.

7. PRINCIPALELE CLASE DE AGENI TERAPEUTICI


ANTIBACTERIENI
7.1. Inhibitori ai sintezei peretelui celular
7.1.1. Beta-lactaminele
Structur . Beta-lactaminele sunt un grup mare de antibiotice, care cuprinde penicilinele i
cefalosporinele. Structura chimic de baz este inelul beta-lactamic.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Mecanism de aciune. Beta-lactaminele inhib sinteza peretelui celular prin legarea lor de enzimele
care intervin n faza final a acestui proces (PBPs - penicillin binding proteins).
Inhibiia acestor enzime mpiedic legarea transversal a lanurilor de polizaharide cu acumularea
consecutiv a subunitilor de murein. Acestea, la rndul lor, activeaz un sistem enzimatic autolitic care
va duce la liza celulei bacterian.
n mod fiziologic, acest sistem autolitic este responsabil de scindarea peretelui celular dup
diviziunea celulei bacteriene i este supus unui puternic control negativ prin inhibitori. Ace ti inhibitori se
elibereaz sub aciunea betalactaminelor i enzimele autolitice se vor sintetiza n cantiti nepotrivite,
distrugnd arhitectura peretelui celular. Ca urmare se va produce liza celulei bacteriene sub aciunea
presiunii mari din interior.
Toxicitatea. Beta-lactaminele sunt netoxice, dar produc frecvent alergii. Astfel, administrarea
penicilinei la pacieni sensibilizai duce la declanarea fenomenelor alergice de tip I, a cror intensitate
poate merge pn la oc anafilactic cu edem glotic, bradicardie i moarte. Este cu des vr ire
contraindicat administrarea penicilinei n condiii ambulatorii la persoane la care nu s-a testat
sensibilitatea la penicilin sau interpretarea testului nu este sigur deoarece, n cazul declarii ocului
anafilactic, este necesar o intervenie prompt , calificat care, n general, nu este posibil dect n
condiii oferite de spital.
Rezistena bacteriilor la beta-lactamine. Principalul mecanism prin care se instaleaz rezistena
la beta-lactamine este secreia de beta-lactamaze care vor inactiva antibioticul nainte de legarea sa de
peretele bacterian. n principiu, ele se mpart n penicilinaze i cefalosporinaze i prezint activitate
ncruciat, fiind active una n locul celeilalte. Genele care codific sinteza acestor enzime pot fi prezente
att n cromozom ct i n plasmide.
La bacteriile gram-pozitive, cantitatea de beta-lactamaz secretat crete proporional cu cantitatea
de antibiotic prezent n mediu, astfel nct activitatea enzimelor nu poate fi depit prin creterea dozei
administrate. Rezistena prin beta-lactamaze este foarte rspndit la aceste bacterii, astfel c stafilococii
aurii trebuie considerai rezisteni la penicilin , cu excepia situaiei n care antibiograma indic
sensibilitate.
Rezistena la beta-lactamine a bacteriilor gram-negative s-a instalat mai lent. n anul 1974, 100 %
din tulpinile de Haemophilus influenzae (agent etiologic important al meningitelor i al infeciilor
pulmonare la copii) erau sensibile la ampicilin, iar n 1975, 15-20% au devenit rezistente prin secreia
unei beta-lactamaze. Genele care codific producerea acestei enzime sunt situate pe un plasmid
transferabil. Acela i lucru s-a ntmplat i la gonococ. Acesta era extrem de sensibil la penicilin la
introducerea acesteia n practica medical. Cu anii, ns , dozele de penicilin necesare tratamentului au
crescut, iar astzi se menioneaz tot mai frecvent tulpini rezistente la penicilin. Genele responsabile de
sinteza beta-lactamazei la gonococ se afl situate pe un transpozon care se transmite nu numai printre
tulpinile de gonococi, ci i la alte bacterii gram-negative.
Alte mecanisme prin care bacteriile devin rezistente la betalactamine sunt sc derea permeabilitii
nveliurilor bacteriene i modificarea intei antibioticului n aa fel nct acesta s nu se mai poat lega de
structurile bacteriene respective. Mecanismul este foarte important, deoarece modificarea proteinelor de
care se leag beta-lactaminele de peretele celular confer tulpinii respective rezisten la toate betalactaminele. Acest tip de rezisten se ntlne te la tulpinile de stafilococi din spital, deci cu mare
potenial nosocomial. Depistarea acestor stafilococi se face prin testarea sensibilit ii la meticilin ,
deoarece rezisten la meticilin (MRSA 1) semnific rezisten la toate beta-lactaminele.
Peniciline sunt produse de mucegaiul Penicillium notatum i Penicillium chrysogenum avnd n
structura lor un nucleu comun, acidul 5-aminopenicilanic. Prin nlocuirea sau adausul unor radicali se
obin penicilinele semisintetice cu spectru mai larg i stabile faa de penicilinaze.
Cefalosporine i cefamycine. Cefalosporinele sunt antibiotice beta-lactamice, ce au ca parte activ
acidul 7-amino-cefalosporanic i care se extrag din mucegaiul Acremonium. Cefalomycinele sunt nrudite
cu cefalosporinele, diferena constnd n nlocuirea sulfului din inelul dihidrothizinic cu oxigen. Ele au
acelai mecanism de aciune ca i penicilinele, avnd ns un spectru mai larg, o rezistena mai bun

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


fa de aciunea betalactamazelor i proprieti farmacokinetice superioare.

Subliniem c cefalosporinele de-a doua i a treia generaie sunt mai puin active
asupra cocilor gram-pozitivi dect cele de prim generaie. Ele nu sunt active asupra
tulpinilor de Streptococcus pneumoniae rezistente la penicilin , a celor de stafilococi
rezisteni la meticilin, pe enterococi sau listerii. Este deci o gre eal administrarea n
infecii produse de coci gram-pozitivi a cefalosporinelor de generaie recent n ideea
c ele sunt superioare penicilinelor. Este, de asemenea, important faptul c tulpinile de
Enterobacter, Serratia i Pseudomonas dezvolt foarte repede rezisten fa de aceste
antibiotice.
7.1.2. Glicopeptidele
Sunt polipeptide cu molecul mare, fiind reprezentate de vancomicin i teicoplanin. Se obin din
Streptomyces orientalis. Au un spectru de aciune ngust fiind active numai asupra bacteriilor grampozitive.
Vancomocina i teicoplanina interfereaz elongaia peptidoglicanului, fiind bactericide n faza de
multiplicare a bacteriilor.
Administrarea lor este indicat n infeciile produse de bacterii gram-pozitive rezistente la
betalactamine i la pacieni alergici la peniciline. Bacteriile gram-negative sunt natural rezistente la
glicopeptide, deoarece acestea au molecula prea mare pentru a putea ptrunde prin membrana extern a
peretelui celular.
Glicopeptidele sunt alergene, nefro i ototoxice, evitndu-se utilizarea lor la pacienii cu afeciuni
renale.
Rezistena bacteriilor la glicopeptide se transmite prin intermediul plasmidelor conjugative i este
destul de rar. S- au semnalat totui tulpini rezistente de enterococi, stafilococi, listerii, leuconostoc etc.
7.1.3. Bacitracina
Bacitracina este un antibiotic cu structura polipeptidic care din cauza toxicitii ridicate se utilizeaz
doar n aplicaii locale n infeciile cutanate. Este activ numai pe bacteriile gram-pozitive prin mecanisme
multiple: mpiedic sinteza peretelui celular prin inhibiia unei enzime ce transport precursorii
peptidoglicanului, altereaz membrana celular i perturb transcripia ARN.
7.1.4. Isoniazida, cicloserina i etionamida
Aceste chimioterapice se utilizeaz n tratamentul tuberculozei. Cicloserina inhib dou enzime care
catalizeaz sinteza peretelui celular, iar etionamida i izoniazida interfereaz multiplicarea micobacteriilor
la mai multe nivele. Rezistena se instaleaz prin sc derea permeabilitii peretelui celular i modificarea
moleculelor int.

7.2. Ageni tensioactivi ce lezeaz membrane citoplasmatic


Polimixinele. Polimixina B i colistinul (polimixina E) sunt antibiotice cu o structur ciclic polipeptidic cu aciune
bactericid i asupra bacteriilorn faz de laten.
Grup rile amino libere acioneaz asupra membranei celulare asem n tor detergenilor cationici,
distrugnd structurile fosfolipidice ale acesteia. Sunt active numai pe bacili gram-negativi (inclsiv pe
Pseudomonas ) cu excepia speciilor de Proteus i se administreaz local n otite externe, infecii oculare
i infecii cutanate. Ele nu se absorb pe cale oral, iar administrarea sistemic s-a abandonat din cauza

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


nefrotoxicitii ridicate.

7.3. Inhibitori ai sintezei proteice


7.3.1.Aminoglicozidele
Structur. Aminoglicozidele se extrag din speciile Micromonospora i Streptomyces. Ele conin n
molecula lor streptidin sau 2-dezoxistreptidin. Prin ad ugarea unor radicali diferii se obin preparate
noi, semisintetice.
Mecanism de aciune. Aminoglicozidele sunt bactericide prin blocarea legrii formylmethionyl-tRNA
de ribozomi, mpiedicnd practic iniierea sintezei lanurilor polipeptidice i determin, de asemenea, o
decodificare incorect a informaiei de pe m-RNA prin legarea lor ireversibil de ribozomi.
Spectrul de aciune cuprinde mai ales bacili gram-negativi, dar i unele bacterii gram-pozitive.
Streptococii i flora bacterian anaerob sunt n mod natural rezistente la aminoglicozide. Toate
aminoglicozidele sunt active fa de bacilii tuberculoi, dar din cauza toxicitii unui tratament ndelungat
se utilizeaz doar streptomicina.
Toxicitatea aminoglicozidelor. Antibioticele acestei familii sunt nefro i ototoxice, dozele
terapeutice fiind practic egale cu cele toxice. La pacienii care sunt supui tratamentului cu aminoglicozide
se urmrete n mod obligatoriu funcia renal.
Rezistena la aminoglicozide. Cel mai frecvent mecanism prin care bacteriile devin rezistente este
secreia unor enzime (acetilaze, fosforilaze, nucleotidiltransferaze) care altereaz
structura
aminoglicozidelor. Sinteza lor este codificat de plasmide transferabile de la o specie la alta. La acest
mecanism se mai adaug sc derea permeabilitii peretelui celular, alterarea mecanismului de transport
prin membrana citoplasmatic i modificarea unor molecule int de pe ribozomi astfel nct legarea
antibioticului este mpiedicat.

7.3.2. Tetraciclinele
Structur . Tetraciclinele au o structura ciclic cu posibilit i multiple de ata are a unor radicali
diferii.

Mecanism de aciune. Sunt antibiotice bacteriostatice, care inhib sinteza proteic


prin blocarea ata rii moleculelor de aminoacyl-tRNA de ribozomi. Acest efect nu se

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


exercit numai asupra celulei bacteriene, ci i asupra celulei de tip eucariot.
Tetraciclinele se absorb optim pe cale digestiv i se elimin pe cale renal . Sunt
antibiotice cu penetrare intracelular.
Spectru de aciune i utilizare. Principalii reprezentani ai acestei familii sunt tetraciclina,
oxitetraciclina, clortetraciclin , dimetilclortetraciclina, doxicilclina, minociclina, vibramicina etc. Ele au un
spectru foarte larg, care cuprinde practic toate bacteriile inclusiv micoplasmele i bacteriile cu habitat
intracelular (chlamydii i rickettsii). Utilizarea lor se restrnge ns din cauza rezistenei din ce n ce mai
pronunate a bacteriilor fa de aceste antibiotice.
Toxicitatea. Administrarea tetraciclinelor duce la o perturbare a florei normale a intestinului
favoriznd dezvoltarea n exces a unor bacterii (S.aureus) sau fungi (Candida) cu producerea consecutiv
a unui sindrom diareic greu de tratat.
Tetraciclinele perturb metabolismul osos, motiv pentru care nu se administreaz la gravide i copii.
La copii se depune n dini determinnd o colorare maronie a acestora. Administrarea sistemic a
tetraciclinelor se evint din cauza hepatotoxicitii.
Rezistena la tetracicline este foarte r spndit i se transmite prin transpozoni. Mecanismul
const n modificarea structurii unor proteine ale membranei citoplasmatice i printr-un eflux activ de
antibiotic din celul.
7.3.3.Cloramfenicolul
Structura. Cloramfenicolul conine un nucleu nitrobenzenic de care se leag un radical n poziia
para.

Mecanismul de aciune const n blocarea producerii leg turilor peptidice ntre aminoacizi. Are
acelai efect i asupra celulei eucariote, fiind deci toxic i pentru aceasta.
Absoria este optim n tubul digestiv, administrarea obinuit fiind cea oral. n anumite situaii se
poate administra i pe cale sistemic . Cloramfenicolul traverseaz bariera hematoencefalic i are
penetraie intracelular bun. Este inactivat prin conjugare n ficat i eliminat pe cale renal.
Spectru de aciune i utilizare. Spectrul de aciune este foarte larg cuprinznd bacterii grampozitive, gram-negative, aerobe i anaerobe, inclusiv bacteriile cu habitat intracelular, cum sunt
chlamydiile i rickettsiile.
Toxicitatea. Cloramfenicolul este un antibiotic imunodepresor, foarte toxic, a c rui administrare
trebuie evitat . Este contraindicat la gravide, sugari i copii. El acioneaz asupra m duvei osoase
datorit structurii sale nitrobenzenice, putnd produce aplazie medular. Toxicitatea se manifest sub 2
forme:
- toxicitatea dependent de doz, dup administrare ndelungat de cloramfenicol, i
- toxicitatea prin mecanism alergic, care duce la anemie aplastic ireversibil (1/24.000).
Rezistena la cloramfenicol. Este codificat de plasmide i const n sinteza unei acetiltransferaze
intracelulare care mpiedic legarea cloramfenicolului de moleculele int de pe ribozomi.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


7.3.4. Macrolidele
Structur. Macrolidele sunt antibiotice cu structur ciclic i se obin din Streptomyces eritreus. Cel
mai frecvent utilizat macrolid este eritromicina.
Mecanism de aciune. Macrolidele se leag de ribozomi blocnd translocarea lanului peptidic n
timpul sintezei sale. Sunt antibiotice bacteriostatice i bactericide n funcie de doza. Absorbia are loc pe
cale digestiv. Distribuia lor este foarte bun deoarece ele penetreaz i intracelular. Eliminarea are loc
pe cale biliar i doar o mic parte prin urin. Sunt antibiotice relativ netoxice.
Eritomicina este activ pe cocii gram-pozitivi aerobi i anaerobi, spirochete i nlocuiete penicilina la
pacienii alergici. Se administreaz i n infeciile produse de Legionella pneumophyla i Campylobacter
jejuni. La pacienii la care este contraindicat tetraciclina (copii, gravide) se utilizeaz n tratamentul
infeciilor chlamydiene.
Alte macrolide, introduse relativ recent n practca medical , sunt roxitromicina, claritromicina i
azitromicina. Ele au o activitate antibacterian superioar eritromicinei, azitromicina fiind folosit n doz
unic n tratamentul infeciilor chlamydiene.
Rezistena bacteriilor la macrolide, n special la eritromicin, este n cretere i se transmite prin
plasmide. Mecanimsul biochimic const n metilarea adeninei din ARN. Tulpinile ce au dobndit
rezisten la macrolide sunt implicit rezistente la lincosamide.
7.3.5. Lincosamidele
Sunt reprezentate de lincomicin i clindamicin . Ele se leag de ribozomii celulelor procariote,
mpiedicnd formarea legturii peptidice. Aciunea lor este bacteriostatic.
Clindamicina se poate administra oral i pe cale sistemic. Nu traverseaz bariera hematoencefalic
ns difuzeaz foarte bine n esutul osos, fiind indicat n tratamentul osteomielitelor stafilococice. Este
metabolizat n ficat i se elimin pe cale digestiv.
Spectrul de aciune este asem ntor eritromicinei, dar este mai activ pe bacteriile anaerobe grampozitive (clostridii) i gram-negative (genul Bacteroides).
Clindamicina nu este toxic, dar administrarea dozelor mari distruge flora intestinal cu producerea
unei colite pseudomembranoase cu Clostridium difficile, bacterie natural rezistent la clindamicin.
7.3.6. Acidul fusidic
Este un chimioterapic cu structur sterolic care blocheaz sinteza proteic prin legarea sa de
factorul de elongaie al lanului polipeptidic, de guanozin-fosfat i de ribozomi.
Se poate administra pe cale oral i intravenos avnd o penetrare bun n esuturi, inclusiv n
esutul osos. Se metabolizeaz n ficat i este eliminat prin bil.
Spectrul de aciune cuprinde mai ales cocii gram-pozitivi, fiind indicat n infeciile cu stafilococi
rezisteni la beta-lactamine. Se recomand asocierea cu alte antibiotice pentru a preveni instalarea
rezistenei.
Toxicitatea este moderat, acidul fusidic producnd rar icter i tulburri gastro-intestinale.

7.4. Inhibitori ai sintezei acizilor nucleici


7.4.1.Rifamicinele
Rifamicinele sunt derivai semisintetici al rifamicinei B care se obine din Streptomyces mediterranei.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Ele se leag de RNA- polimeraza DNA- dependent blocnd sinteza de RNA, avnd aciune
bacteriostatic i bactericid.
Este foarte activ fa de cocii gram-pozitivi, administrndu-se i n infeciile stafilococi meticilinorezisteni. Acioneaz , de asemenea, asupra bacilului tuberculos. Rezistena la acest chimioterapic se
instaleaz relativ repede.
7.4.2.Quinolonele
Sunt chimioterapice de sintez ce blocheaz DNA- giraza care rspunde de suprahelicarea ADN.
Prima quinolon, negramul, s-a folosit mult n tratamentul infeciilor urinare, datorit activitii sale
asupra bacililor gram-negativi. n prezent se utilizeaz mai rar datorit toxicit ii sale pe de o parte i
apariiei tulpinilor rezistente pe de alt parte.
Fluoquinolonele mai recente, cum sunt ciprofloxacinul, norfloxacinul, ofloxacinul etc., au o activitatea
superioar negramului prin spectrul lor foarte larg ce cuprinde i bacilului piocianic.
n afar de norfloxacin, care se administreaz mai ales n infecii urinare, ele se utilizeaz i n
infecii sistemice cu bacterii gram-negative. Spectrul lor cuprinde i rickettsiile, chlamydiile. De asemenea,
sunt indicate n tratamentul febrei tifoide, deoarece sunt capabile s previn starea de purttor s ntos.
Sunt active i asupra stafilococilor, dar au o activitate slab pe streptococi, enterococii fiind chiar
rezisteni.
7.4.3.Sulfamidele
Sulfamidele se aseman structural cu acidul paraaminobenzoic, grupul para-amino fiind esenial
pentru activitatea sulfamidelor.

Figura 7.12. Structura sulfamidelor n comparaie cu acidul paraaminobenzoic.

Mecanismul de aciune al sulfamidelor este competitiv. Atunci cnd ele se g sesc n mediu n
cantiti superioare acidului paraaminobenzoic, necesar sintezei de acid folic, l vor nlocui pe acesta n
metabolismul bacterian blocnd astfel sinteza de acid folic i implicit pe cea de DNA. Sulfamidele sunt
chimioterapice bacteriostatice. Bacteriile care nu sintetizeaz acid folic ci I iau din mediul nconjur tor
sunt n mod natural rezistente la sulfamide.
Sulfamidele se administreaz pe cale oral, se metabolizeaz n ficat i se elimin prin urin. Ele se
utilizeaz mai ales n infeciile urinare, spectrul lor de aciune cuprinznd bacilii gram-negativi (cu
excepia bacilului piocianic). Cele mai cunoscute sulfamide sunt Sulfanilamida, Sulfamethoxazol,
Sulfurazol, Ftalilsulfatiazol etc.
Rezistena la sulfamide este foarte r spndit , antibiograma fiind obligatorie nainte de
recomandarea lor.
Sulfamidele sunt lipsite n general de efecte toxice, dar pot da alergii cutanate i ocazional depresii

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


medulare.
Un chimioterapic deosebit de valoros este biseptolul (cotrimoxazol, septrin), care rezult din
combinarea sulfametoxazolului cu trimetoprimului. Aciunea lor este sinergic i depete cu mult suma
aciunii ambelor substane. Are spectru larg pe cocii gram-pozitiv i negativ, bacili gram-pozitivi i
negativi, fiind folosit n afar de infeciile urinare n infecii respiratorii i sistemice. Ca efecte secundare
poate produce neutropenie.
Sulfonele sunt substane nrudite sulfamidelor. Dintre ele amintim Dapsona folosit n tratamentul
leprei.

8. UTILIZAREA CHIMIOTERAPICELOR ANTIINFECIOASE


Chimioterapicul antiinfecios ideal ar trebui s aib urmtoarele caliti:
- toxicitate selectiv pentru celula bacterian,
- spectru larg de aciune,
- activitate bactericid,
- s fie lipsit de toxicitate pentru macroorganism,
- timp lung de njumtire,
- penetraie optim n esuturi.
Tratamentul corect trebuie s in cont de:
particularitile agentului infecios
a) etiologia infeciei. n lipsa posibilit ii efectu rii antibiogramei, medicul practician trebuie s
cunoasc sensibilitatea natural a microbului respectiv i s fie informat asupra procentajului de tulpini
care au dobndit rezisten la antibiotice. Spre exemplu, Escherichia coli este n mod natural sensibil la
Ampicilin, dar statisticile efectuate pe antibiogramele din diferite laboratoare arat c 80% din tulpinile
izolate au devenit rezistente.n consecin, se evit administrarea acestui antibiotic n infecii urinare;
b) semnificaia germenilor izolai din produsele patologice. Izolarea din zone normal sterile a oricrui
microb are o semnificaie patologic . Implicaia etiologic a unui germene condiionat patogen izolat
dintr-un produs natural contaminat este discutabil i trebuie interpretat cu pruden . Astfel, dup un
tratament prelungit cu antibiotice pe cale oral se modific flora faringelui predominnd specii selectate
cum ar fi, de exemplu Pseudomonas sau Enterobacter. n acest caz nu se va interveni n nici un caz cu
antibiotice, ci dimpotriv se vor evita pentru a crea condiii reinstalrii florei normale.
proprietile chimioterapicului
mecanismul de aciune,
absorbia, distribuia, metabolizarea i calea de eliminare,
spectrul de aciune,
calea de administrare, dozarea chimioterapicului i infeciile n care se utilizeaz,
toxicitatea,
costul tratamentului.
Ori ce cte ori este posibil se indic efectuarea antibiogramei. n anumite cazuri, se poate efectua
antibiograma direct , din produs, pentru a oferi clinicianului ct mai repede indicaii terapeutice. n
continuare se va izola agentul etiologic n cultur pur i se va efectua antibiograma pe specii izolate.
starea pacientului
Dat fiind c o mare parte din agenii antiinfecio i au i efecte toxice, trebuiesc cunoscute
eventualele suferine hepatice i renale, precum i statusul imunologic al pacientului.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Terapia combinat . Prin utilizarea concomitent a dou sau mai multor antibiotice se obine o
lrgire a spectrului de aciune, necesar n infecii cu germeni cu rezisten diferit. De asemenea, se
ntrzie instalarea rezistenei la antibiotice a tulpinilor (ca de exemplu n tuberculoz).
Trebuie inut ns cont de faptul c dou antibiotice administrate concomitent pot aciona n mod
diferit:
indiferent, atunci cnd aciunea lor nu se influeneaz reciproc;
aditiv, cnd activitatea lor este mai puternic antibacterian dect suma activitii lor individuale
(trimetoprim +sulfametoxazol + biseptol);
antagonic, cnd efectul antibacterian este mai mic. n general, antagonice sunt antibioticele
bacteriostatice cu cele bactericide n faza de replicare a bacteriilor.
Administrarea necontrolat i inutil de antibiotice va duce la perturbarea ecologic a florei
bacteriene normale, factor esenial n ap rarea natural antiinfecioas pe de o parte i nlocuirea
acesteia, prin selecie, cu tulpini cu rezisten multipl.
Dac apariia rezistenei la antibiotice este un fenomen genetic natural care nu poate fi
mpiedicat, selecia tulpinilor multirezistente, transformarea lor n populaii rezistente i
rspndirea lor poate fi ntrziat de medic. n acest scop, n rile dezvoltate rezistena tulpinilor
bacteriene izolate este monitorizat pe plan local i naional iar informaiile prelucrate sunt puse
permanent la dispoziia personalului medical, astfel nct cei care prescriu antibioticele s fie
informai asupra rezistenei dobndite a germenilor din zona lor geografic i s aibe posibilitatea
alegerii corecte a agenilor antiinfecioi terapeutici.
Chimioterapia antifungic i antiviral vor fi tratate n capitolele de micologie i virusologie.

1. CLASIFICAREA MICROORGANISMELOR
DUP PATOGENITATE
ntre organismul uman i microorganisme (bacterii, virusuri, fungi, protozoare) se stabilesc
relaii care pot fi de comensalism, mutualism i parazitism.
Comensalismul este o asociaie n care un microorganism folose te ca mediu de via un
alt organism fr s -l prejudicieze. Omul este gazda unei flore comensale foarte bogate, prezent
pe piele, mucoase, tract digestiv etc. i care alctuiete flora normal.
Mutualismul este o relaie care se stabilete n beneficiul ambilor parteneri ai asociaiei.
De exemplu, ntre bacilii lactici i gazda uman exist un beneficiu reciproc: vaginul ofer condiii
de via bacililor lactici iar ace tia la rndul lor acidific, mediul mpiedicnd dezvoltarea altor
microorganisme.
Parazitismul este o relaie care se stabilete n mod cert n beneficiul microorganismului i
n detrimentul gazdei umane. Din aceast categorie fac parte microorganismele patogene.
Subliniem, ns , c acestor tipuri de relaii nu le corespund grupe taxonomice fixe de
microorganisme, deoarece relaiile ce se stabilesc depind n egal m sur de gazda uman .
Astfel, n anumite condiii, relaia de comensalism sau mutualism poate s se transforme ntr-o
relaie de parazitism cu efecte nefavorabile asupra gazdei. A adar, microorganismele nu se pot
clasifica rigid din punct de vedere al patogenit ii, deoarece n anumite condiii acela i
microorganism stabilete relaii diferite cu gazda uman.
La un capt al clasificrii n funcie de patogenitate se afl microorganismele nepatogene
care triesc n mediul nconjurtor i nu gsesc condiii prielnice de dezvoltare n gazda uman, iar la
cellaltcaptse afl microorganismele patogene care produc ntotdeauna mbolnviri cu penetraie
mare n populaie (Salmonella typhi, Yersinia pestis etc.) sau mboln viri cu consecine grave
(Streptococcus pyogenes , Treponema pallidum).
ntre aceste dou extreme se afl flora condiionat patogen care, de regul, provine din
flora normal a organismului i care produce infecii doar n anumite condiii, ca, de exemplu, n
sc derea rezistenei antiinfecioase a organismului (n stress, dup viroze, dup tratament
imunodepresor, n SIDA etc.) i n cazul n care colonizeaz zone anatomice sterile (septicemii,
meningite).
Flora accidental patogen provine din flora comensal a organismului dar necesit condiii
deosebite de nmulire chiar dac ptrunde n zone anatomice sterile. Astfel, streptococii viridans
se gsesc n mod normal n faringe i ajung n circulaie dup extracii dentare sau chiar i dup
periaje energice ale dinilor. La omul s ntos, mecanismele rezistenei naturale antiinfecioase
nltur streptococii n cteva ore de la ptrunderea lor n snge, pe cnd la cei cu vicii valvulare,
la care exist depozite de fibrin pe endocard, streptococii se vor nmuli producnd endocardita
lent malign . Sunt cunoscute, de asemenea, e ecurile din chirurgia ortopedic i cardiac
datorita p trunderii, n timpul operaiei, a tulpinilor de Staphylococcus epidermidis, principalul
comensal al pielii. Flora condiionat patogen i cea accidental patogen alc tuiesc flora
oportunist, care profit n orice mprejurare de vulnerabilitatea gazdei umane.
Este remarcabil modificarea de-a lungul timpului a ponderii germenilor n etiologia
infeciilor. Pn la descoperirea rolului microbilor n producerea acestora, patologia infecioas a
fost dominat clar de bacteriile nalt patogene care au generat de-a lungul secolelor epidemii
pustiitoare. Descoperirile lui Pasteur au avut ca urmare ntroducerea metodelor de antisepsie i
asepsie care au avut ca rezultat sc derea considerabil a morbiditatii prin aceste bacterii. Pe
de alt parte introducerea profilaxiei specifice, prin vaccinare i seroterapie a bolilor infecioase a

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


sczut i mai mult incidena infeciilor.
Dup descoperirea antibioticelor problema infeciilor p rea rezolvat , ns la scurt timp dup
introducerea lor n tratamentul infeciilor s-a remarcat apariia tulpinilor bacteriene rezistente. n
consecin , etiologia infeciilor a nceput s fie i mai este i ast zi dominat de flora condiionat
patogen.
n fine, n ultimul deceniu, microbiologia clinic are o nou problem legat de diagnosticul
microbiologic al infeciilor care apar la bolnavii cu SIDA. Infeciile, la ace ti bolnavi cu imunitatea
compromis, sunt produse de microorganisme condiionat patogene, accidental patogene i uneori chiar
i de microorganisme care pn n prezent nu au fost deloc s-au foarte rar izolate n infecii.

2. FLORA NORMAL A ORGANISMULUI


n timpul vieii intrauterine, organismul este steril, fiind ferit de contaminarea ascendent prin
membranele fetale, iar placenta este impermeabil pentru majoritatea microorganismelor, cu excepia
unor virusuri (virusul rubeolic, citomegalic etc.), bacterii (Treponema pallidum) i parazii (Toxoplasma
gondi). Prima ntlnire a organismului uman cu microorganismele mediului nconjur tor se produce n
momentul naterii, cnd ftul vine n contact cu flora vaginal i cutanat a mamei.
Dup na tere, organismul este supus unei contamin ri continue. Unele din speciile cu care
organismul vine n contact dispar foarte repede, iar altele colonizeaz pielea i suprafeele organismului
ce vin n contact cu exteriorul, constituind flora normal a organismului.
Organismul uman este populat de foarte multe de specii bacteriene i de un num r mai mic de
virusuri, fungi i protozoare.
Flora normal a organismului depinde de o serie de factori, cum sunt: vrsta, regimul alimentar,
statusul hormonal, starea de s n tate, condiiile de igien colectiv i personal . Este foarte dificil
definirea exact a speciilor care alctuiesc flora normal, deoarece o serie de specii patogene pot fi i ele
prezente temporar pe tegumente i mucoase, fr s produc nbolnviri. De exemplu, pneumococul i
meningococul sunt bacterii patogene, fiind cauza unor infecii foarte grave. Totui ele se g sesc la 10%
din populaia sntoas.
Zonele organismului populate n mod normal cu microorganisme sunt: pielea, tractul respirator
superior (vestibul nazal, faringe), tubul digestiv (cavitatea bucal i intestinul gros), tractul urinar (partea
anterioar a uretrei) i vaginul.
n zonele intens colonizate, ca, de pild, n intestinul gros, numrul de bacterii este de 1 x 10 12 /ml pe
cnd n zonele cu flor mai redus, cum sunt pielea, vaginul, numrul lor nu depete n mod normal 1 x
10 6/ml.
n afar de aceste zone, microorganisme mai pot aprea n numr mic i n mod pasager n restul
tractului respirator, digestiv i n uter, fiind rapid ndeprtate de mijloacele de ap rare ale organismului.
Sngele, lichidul cefalorahidian, lichidele sinoviale, din seroase, esuturile profunde sunt sterile. Prezena
microbilor n aceste zone are ntotdeauna o semnificaie patologic.

2.1. Flora normal a pielii


Pielea este populat de multe specii bacteriene, densitatea acestora fiind mai mare n zonele umede,
cum sunt axila, zona perineal, zonele interdigitale i scalpul. Specia cel mai des ntlnit, care reprezint
90% din flora cutanat aerob este Staphylococcus epidermidis. Se apreciaz densitatea S.epidermidis la
103-104/cm2. n regiunile umede se poate ntlni i S. aureus. n afar de speciile menionate, pe piele se
mai g sesc bacili difterimorfi anaerobi, ca, de pild , Propionibacterium acnes . Ace tia din urm sunt
prezeni n foliculii piloi, transpiraie, glandele sebacee, se nmulesc mai ales n pubertate i contribuie

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


la producerea acneei juvenile. La 20% din populaie se izoleaz de pe piele Clostridium perfringens. n
mod pasager se evideniaz n patul periunghial i pe scalp specii de Candida.

2.2. Flora normal a cavitii bucale i a vestibului nazal


Speciile ce colonizeaz aceste zone anatomice sunt, n general, streptococi, stafilococi, bacili
difterimorfi, coci gram-negativi i mai rar ciuperci. Unele din aceste specii, ca, de exemplu, S.aureus,
Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Candida, sunt condiionat patogene.
Densitatea florei microbiene este foarte mare n cavitatea bucal , fiind apreciat la 10 11 celule
bacteriene la un g de esut. Suprafeele dinilor i anurile gingivale sunt sediul unei bogate flore
anaerobe.
Placa dentar este un film format din celule bacteriene ancorate ntr-o matrice polizahardic
secretat de acestea. Dac igiena cavitii bucale este deficitar, placa se ngroa i sub aciunea unor
specii ca Streptococcus mutans se produc cariile dentare. S- a constatat c numrul de Str.mutans crete
n timpul producerii cariilor i scade dup tratarea acestora.
n cavitatea bucal pot coexista i protozoare, ca, de exemplu, Trichomonas tenax.
Flora faringian este reprezentat de streptococi viridans i ocazional de streptococi beta-hemolitici
(specie patogen), la care se adaug difterimorfi, neisserii hemolitice, stafilococi etc.
Tractul respirator inferior este steril, dar s-a izolat din plmnul persoanelor s ntoase Pneumocistis
carinii. Acest parazit nu are semnificaie patologic la aceste persoane, dar poate da pneumonii grave la
persoanele imunocompromise, cum sunt bolnavii de SIDA.

2.3. Flora normal a tubului digestiv


Stomacul conine doar ocazional flor bacterian acidotolerant (unii lactobacili i streptococi) dat
fiind aciditatea gastric pronunat. Frecvent se izoleaz de pe mucoasa gastric Helicobacter pylori, care
ar putea constitui cauza unor gastrite i a ulcerului duodenal. La personane la care se admnistreaz o
medicaie ce schimb pH-ul coninutului gastric, flora normal sufer modificri.
Partea incipient a intestinului subire conine un num r redus de microbi, care cre te vertiginos
spre ileon unde se vor gsi streptococi, lactobacili, enterobacterii, specii de Bacteroides etc.
Intestinul gros este cea mai populat zon cu microbi a organismului. Aici, peste 90% din flor este
anaerob, reprezentat mai ales de bacili aparinnd genului Bacteroides, nsoit de enterobacterii care
sunt facultativ anaerobe, la care se adaug protozoare nepatogene, ca, de pild Entamoeba coli.
Tratamentul cu antibiotice altereaz rapid echilibrul care se stabile te ntre aceste specii cu nmulirea
consecutiv a unor specii mai rezistente la antibiotice cum sunt Clostridium difficile, specii din genul
Enterococcus i Pseudomonas care pot produce diaree cu posibilit i de evoluie spre colit
pseudomembranoas.

2.4. Flora normal a tractului urogenital


Uretra anterioar este populat la ambele sexe cu flor asem n toare celei de pe piele: S.
epidermidis, Enterococcus faecalis, difterimorfi etc.
Flora vaginal variaz n funcie de vrst. Astfel, pn la pubertate flora vaginal conine specii prezente pe piele, iar
dup pubertate pn la menopauz vaginul este populat cu o varietate foare mare de bacterii,predominante fiind speciile de
Lactobacillus (bacili Dderlein). Dintre speciile prezente menion m: stafilococi coagulazo-negativi, streptococi (mai ales din
grupul B), enterococi, Gardnerella vaginalis, micoplasme, Mobiluncus etc.Ocazional pot fiprezente i specii de Candida.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


2.5. Rolul florei normale
Flora normal joac un rol important att n meninerea strii de s ntate ct i n producerea unor
infecii. Astfel:
este un factor important n aprarea antiinfecioas natural
Prin prezena lor, microorganismele induc sinteza de anticorpi care, datorit faptului c reacioneaz
ncruciat i cu alte specii microbiene, particip la aprarea antiinfecioas a organismului. De asemenea,
deprim nmulirea florei patogene prin mecanisme competitive pentru un substrat nutritiv, pentru aceiai
receptori celulari i producerea de bacteriocine.
contribuie la nutriia i metabolismul organismului
Flora normal (specii de Bacteroides i E. coli) sintetizeaz i secret n intestin unele vitamine, cum
sunt vitamina K i vitamine din grupul B.
De asemenea, intervine n circuitul hepato-entero-hepatic al unor substane cum sunt hormonii
steroizi i s rurile biliare. Aceste substane sunt excretate n intestin prin bil sub forma conjugat de
glucuronide sau sulfai. Ele nu pot fi reabsorbite dect dup deconjugare care se petrece sub aciunea
glucuronidazelor i sulfatazelor secretate de flora bacterian.
constituie sursa majoritii infeciilor oportuniste
Medicul practician ntlnete mai frecvent infecii produse de microorganisme ce fac parte din flora
normal dect infecii produse de flora patogen provenit din mediul extern al organismului. Astfel,
speciile de Bacteroides, de pild, rezidente ale intesinului gros produc abcese dac ptrund n zone sterile
ale organismului. Staphylococcus epidermidis, cea mai important specie a florei normale a pielii, are
proprietatea de a se ataa n mod nespecific de catetere de plastic, producnd septicemii. De asemenea,
E. coli, prezent n flora intestinal este cel mai frecvent agent etiologic al infeciilor urinare. Aceste infecii
cu germeni comensali i condiionat patogeni sunt favorizate de admnistrarea necontrolat a
antibioticelor.

3. RELAII ECOLOGICE NTRE MICROORGANISME


Am vzut c ntre organismul uman si microorgansime se stabilesc relaii foarte variate, dintre care
unele i sunt duntoare iar altele benefice.
ntre microorganisme, la rndul lor, se dezvolt relaii care pot influena gazda uman. Relaiile ce
se stabilesc ntre microorganisme sunt:
relaii de indiferen, n care speciile se tolereaz reciproc. Aceast indiferen este relativ,
deoarece la un moment dat speciile ntr n competiie pentru substratul nutritiv. Acest tip de relaie
infueneaz mai puin gazda uman.
relaii de comensalism , n care un microorganism are nevoie de un altul, fr ca fenomenul s
fie valabil i invers. De pild, Haemophilus influenzae are nevoie pentru cretere i multiplicare de factor V
pe care l secret Staphylococcus aureus. Aplicaia practic a acestui raport dintre cele dou specii se
folosea n trecut pentru izolarea Haemophilus influenzae dintr-un produs patologic n care se b nuia
prezena lui prin ns mnarea n striu transversal a unei tulpini de Staphylococcus aureus. Coloniile de
Haemophilus se dezvolt doar n jurul culturii de stafilococ. Acest fenomen se numete satelitism.
simbioza const n asocierea a dou specii care se favorizeaz reciproc. Astfel, aciditatea
produs de bacilii lactici favorizeaz dezvoltarea levurilor, care consum la rndul lor acidul lactic.
scderea aciditii permite dezvoltarea bacililor lactici.
sinergismul este o relaie ntre microorgansime, frecvent duntoare organismului. Astfel, unele
bacterii fuziforme (Fusobacterium) i spiralate (Treponema vincenti) nu sunt patogene separat, dar atunci
cnd se reg sesc mpreun n faringe, sunt cauza unei faringite ulceronecrotice denumit i angina

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


fuzospiralar a lui Plaut-Vincent. Alt exemplu este prezena concomitent, ntr-o plag, a florei aerobe i
anaerobe. Flora aerob consum oxigenul crend astfel condiii optime dezvoltrii florei anaerobe.
parazitismul const n folosirea unei specii de ctre o alt specie ca habitat. Exist multe forme
de parazitism ntre microorganisme, dar din punct de vedere medical importante sunt virusurile care
paraziteaz bacterii (bacteriofagii). Prin relaiile care se stabilesc ntre bacteriofagi i celulele parazitate
se pot r spndi diverse caractere, dintre care de interes medical sunt cele legate de patogenitatea i
rezistena la antibiotice ale bacteriilor. Acest aspect a fost discutat n capitolul de genetic bacterian.
antagonismul se define te prin efectul inhibitor pe care un microorgansim l are asupra
dezvoltrii i multiplicrii altui microorganism. Se deosebesc trei tipuri de antagonism:
a) antagonism prin diferen de vitalitate care se datoreaz vitezei de multiplicare mai mare a
unei specii dect a speciei concurate, diferene de echipament enzimatic etc.
b) antagonism nespecific care este determinat de eliberarea n mediu a unor substane toxice,
neselective ca, de pild acizi, alcooli etc.
c) antagonism specific ce se datoreaz elabor rii unor substane mai puin toxice asupra
organismului, dar nocive pentru alte specii microbiene. Aceste substane sunt antibioticele, care
constituie baza terapiei antiinfecioase i bacteriocinele. Despre antibiotice vom vorbi pe larg n capitolul
ce se refer la baza chmioterapiei antiinfecioase.
Bacteriocinele sunt substane specifice, de natur proteic, cu activitate antibacterian cu spectru
ngust secretate de unele bacterii. De obicei bacteriocinele acioneaz asupra indivizilor aceleiai specii
sau a speciilor nudite. Primele bacteriocine descoperite au fost cele produse de bacilul coli (Gratia, 1935).
Denumirea bacteriocinelor se face ad ugnd la denumirea bacteriei sufixul -cin, ca, de pild colicin ,
piocin (baciul piocianic) etc. Ele sunt secretate att de flora gram-negativ ct i de cea gram-pozitiv.

Cunoasterea bacteriocinogenezei este important din punct de vedere practic, deoarece


permite tipizarea tulpinilor bacteriene. Astfel, specia Shigella sonnei este mprit n 17
bacteriocinotipuri, iar Pseudomonas aeruginosa n 37 de piocinotipuri.

1. REZISTEN A ANTIINFEC IOAS


Mediul nconjurtor conine o infinitate de ageni infecioi, omul fiind supus unei contaminri
permanente. Cu toate acestea, la individul sntos, infeciile se produc rar, sunt de obicei de durat
limitat i dispar fr sechele, datorit mecanismelor rezistenei antiinfecioase.
Rezistena antiinfecioas este suma tuturor mecanismelor care protejeaz organismul de
infecii i cuprinde:
rezistena nnscut, care asigur rezistena natural, nespecific, fa de agenii
infecioi, comun tuturor indivizilor unei specii, necondiionat de un contact anterior cu un agent
infecios, i
rezistena dobndit sau imunitatea antiinfectioas , care se dezvolt pe parcursul vieii, ca
urmare a contaminrii continue cu diveri ageni infecioi i care depinde, deci, de experiena
individual a fiecruia.
Rezistena natural antiinfecioas reprezint totalitatea mecanismelor constituionale
nnscute care se opun penetrrii i dezvoltrii microbilor patogeni n organism.
n esen, organismul este aprat fa de unele infecii prin zestrea sa ereditar, care nu
permite dezvoltarea anumitor germeni. Germenilor la care este sensibil, organsimul se opune ptrunderii

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


lor prin bariere externe anatomice i chimice la care se adaug flora normal a organismului. Dac
totui germenii au reuit s strbat aceste bariere i ajung n zonele interne sterile ale organismului,
intervin o serie de factori umorali (complement etc.) care declaneaz reacia inflamatorie i care la
rndul ei va mobiliza un alfux mare de celule fagocitare (PMN, macrofage) n focarul infecios. Rezultatul
este distrugerea germenilor prin fagocitoz.
Bineneles c exist germeni care au dezvoltat strategii ce ocolesc mecanismele rezistenei
naturale i care dau infecii la indivizii neimunizai.
Cu toate c mecanismele rezistenei naturale sunt distincte de cele ale rezistenei dobndite, ele
nu pot fi separate deoarece se intric i acioneaz sinergic.

1.1. Factorii genetici


Rezistena antiinfecioas de specie. Fiecare specie este genetic rezistent la anumii ageni
etiologici infecioi. Astfel, de pild, omul este rezistent fa de virusul Carr, agentul etiologic al
jigodiei la cine, la virusul hepatitei cinilor sau la pesta aviar. Pe de alt parte, omul este singura
specie care face n mod natural infecia sifilitic, Treponema pallidum nefiind patogen pentru alte specii
animale.
Rezistena genetic antiinfecioas de specie este absolut. Ea se explic prin condiiile
impropri pe care un organism le ofer microorganismului fa de care este rezistent i prin lipsa
receptorilor celulari specifici pentru agentul infecios respectiv.
Rezistena individual. n cadrul aceleiai specii, rezistena antiinfecioas prezint variaii de
ras i individuale. Este cunoscut faptul c n timpul unor epidemii, ca, de pild, n cele de poliomielit,
unii indivizi fac forme grave de boal infecioas, alii forme fruste iar unii chiar infecii clinic
inaparente. De asemenea, n timp ce exist purttori sntoi de streptococ beta-hemolitic de grup A,
infeciile streptococice pot produce n funcie de rezistena individual, infecii faringiene banale sau
complicaii alergice severe.
Relaia dintre factorii genetici i sensibilitatea la diveri ageni infecioi este deosebit de
important, infeciile constituind de-a lungul timpului factorul cel mai puternic al seleciei naturale.
Astfel, efectele distrugtoare ale tuberculozei, rujeolei i variolei asupra populaiei americane
btinae, dup descoperirea Americii, au fost echivalente unui genocid. De asemenea, este
binecunoscut rezistena natural fa de infecia cu Plasmodium falciparum a indivizilor care au
anemie drepanocitar1 .
Antigenele de histocompatibilitate au fost i ele legate de sensibilitatea la unele infecii, cum ar fi
lepra2 , glomerulonefrita acut3 , forma paralitic a poliomielitei4 , sindromul Reiter5 etc.

1.2. Barierele anatomice


Integritatea anatomic a organismului este unul din factorii eseniali n aprarea antiinfecioas
natural.
1.2.1. Pielea i mucoasele
Tegumentele i mucoasele constituie bariere mecanice eficiente n prevenirea ptrunderii microbilor
n organism.
Pielea intact este impermeabil prin structura ei pentru majoritatea microorgansimelor, cu unele
excepii, ca, de exemplu, leptospirele, virusurile papiloma i dermatofiii. Orice leziune a pielii poate
constitui punctul de plecare a unei infecii. Astfel, bacilul piocianic, rezident al florei cutanate normale,
infecteaz aproape ntotdeauna plgile arse.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Acizii grai liberi produi de glandele sebacee i de unele specii microbiene de pe suprafaa pielii,
acidul lactic, rezultat al metabolismului local, pH-ul sczut (5-6) i uscciunea relativ a pielii creeaz
condiii nefavorabile dezvoltrii majoritii microorganismelor, cu excepia germenilor din genurile
Staphylococcus , Corynebacterium, Proprionibacterium etc. i confer pielii proprieti autosterilizane.
Proprietatea autosterilizant a pielii curate este superioar celei murdare. Descuamarea continu a
stratului cornos este, de asemenea, o modalitate de ndeprtare a florei bacteriene de pe piele.
Mucoasele, structuri ce delimiteaz suprafeele interne ale organismului, gzduiesc un mare
numr de microbi i se opun ptrunderii acestora n organism nu att prin rezistena mecanic ct prin
secreiile cu proprieti antibacteriene. Astfel, mucusul cervical, lichidul prostatic, lacrimile sau alte
secreii au proprieti bactericide ce se datoreaz unor substane, dintre care aminitim lizozimul, activ
mai ales pe flora gram-pozitiv i lactoferina, protein chelatoare ce spoliaz mediul de fierul necesar
multiplicrii bacteriene.
Pe suprafaa mucoaselor mai este prezent IgA-secretor care mpiedic ataarea bacteriilor de
celule prin fixarea i blocarea unor receptori pentru bacterii, inhib mobilitatea bacterian, aglutineaz
unele microorganisme sau neutralizeaz toxinele lor.
1.2.2. Tractul respirator
Tractul respirator este prevzut cu mecanisme de clearence microbian foarte eficiente. Mucoasa
respiratorie este lubrefiat cu un strat de mucus. Acesta are proprieti tensioactive i surfactante
inhibnd fixarea bacteriilor de celulele epiteliale6.
Microorganismele inhalate n particule de praf sau picturi mai mari dect 5 m ader de mucoasa
tractului respirator superior i sunt readuse prin micrile cililor vibratili n faringele posterior, de unde
sunt fie expectorate, fie nghiite. La micrile cililor se mai adaug tusea i strnutul, ambele foarte
eficiente n eliminarea diverselor impuriti din cile respiratorii. Particulele mai mici de 5 m ajung pn
n tractul respirator inferior, unde sunt fagocitate de macrofagele alveolare.
Fumul de igar sau ali poluani, precum i unele bacterii i virusuri (B. pertussis, v. gripal)
blocheaz acest clearence, prin paralizia cililor, favoriznd producerea unei pneumonii secundare.
Intubaia sau tracheostomia scad eficiena rezistenei naturale n cile respiratorii.
1.2.3. Tubul digestiv
Microorganismele sunt supuse deja n cavitatea bucal aciunii salivei care, prin coninutul de
lizozim, lezeaz peretele celular i membrana citoplasmatic a unor bacterii gram-pozitive. La aceasta
se adaug aciunea unor anticorpi care se pot gsi n saliv.
n stomac, flora bacterian sufer o reducere drastic sub aciunea acidului clorhidric din sucul
gastric (pH=1,5). n perioadele de var crete numrul de toxiinfecii alimentare deoarece consumul de
lichide este mare i sucul gastric se dilueaz. Creterea consecutiv a pH-ului permite trecerea
microbilor de bariera gastric i nmulirea lor eficient n intestin.
Tripsina i celelalte enzime din sucul pancreatic au aciune bactericid prin hidroliza proteinelor din
peretele celular i membrana celular, iar bila interfereaz funciile vitale ale membranei celulare avnd
i o aciune neutralizant asupra unor toxine bacteriene.
1.2.4. Tractul genito - urinar
Urina este n mod normal steril. pH-ul acid i curgerea urinii asigur o splare permanent a
cilor urinare.
Infeciile urinare sunt mai rare la brbai, deoarece uretra este lung (20cm) limitnd accesul
microbilor n vezica urinar, spre deosebire de uretra feminin (5cm) care permite mai uor colonizarea
vezicii.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Staza urinar cauzat prin reflux, hipertrofie de prostat sau calculoz renal favorizeaz
nmulirea microbilor i deci infecia.
Vaginul este protejat parial de pH-ul acid rezultat n urma metabolizrii glicogenului de ctre bacilii
lactici.
Lichidul seminal conine spermina, o poliamin dependent de pH i care inhib creterea florei
gram pozitive.

1.3. Flora normal


Flora normal are o serie de funcii fiziologice, printre care prevenirea colonizrii organismului cu
flor patogen. Mecanismele prin care flora normal se opune multipicrii florei patogene sunt:
competiia pentru acelai receptor celular,
competiia pentru un substrat nutritiv,
secreia unor produi secundari toxici,
stimularea sistemului imun, care va produce anticorpi naturali, ce vor reaciona ncruciat cu
antigenele florei patogene.
Administrarea abuziv de antibiotice va distruge echilibrul dintre speciile florei normale i unele
specii condiionat patogene sau patogene, lipsind organismul de un mecanism antiinfecios important.
Astfel, tratamentul oral ndelungat cu antibiotice va avea ca urmare apariia diareei prin dezvoltarea
necontrolat a unei singure specii ca, de pild, S.aureus, Candida albicans, Clostridium difficile etc. care
fac parte din flora normal i care se menin la individul sntos n anumite limite tocmai datorit
antagonismului bacterian.7

1.4. Mecanismele umorale


Dac un microorganism trece de stratul protector al barierelor anatomice, el ntlnete mecanismele
de aprare nespecifice nnscute, umorale i celulare, prezente n lipsa unui contact anterior cu agentul
infecios respectiv.
Mecanismele umorale. Serul proaspt este capabil s lizeze unele microorganisme (bacterii,
virusuri) datorit n primul rnd coninutului n complement i lizozim, la care se mai adaug i ali
factori umorali.
1.4.1. Sistemul complement
Complementul este un sistem seric de 25 de proteine enzime care, ca i sistemul coagulrii i
fibrinolizei, se activeaz n cascad sub aciunea unui trigger8 .
Desemnarea componentelor sistemului complement este ngreunat de numerotarea nelogic
n ordinea descoperirii lor i nu n ordinea n care se activeaz.
Componentele majore sunt notate cu C1-C9. Cnd o component se activeaz, ea se descompune
n 2 subuniti notate cu literele a i b.
De exemplu, factorul C3 se transform prin activare ntr-un peptid cu GM mic, notat C3a i unul
mai mare, notat C3b. Cnd produii de clivaj se asociaz pentru a forma mpreun o enzim activ, ca,
de pild, C4b2a, se adaug o bar deasupra componentelor sale. n cazul n care un produs intermediar
activat se inactiveaz, va fi precedat de litera i, de pild iC3b.
Activarea complementului se poate petrece pe dou ci cu punct de plecare diferit, dar, care
converg spre aceiai produi finali:
- calea alternativ, mai veche din punct de vedere filogenetic care se activeaz n absena
anticorpilor specifici i face parte, deci, din rezistena antiinfecioas natural, i

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


- calea clasic, a crei activare presupune n general prezena anticorpilor specifici, deci, un
contact prealabil cu agentul etiologic respectiv.
Momentul esenial n activarea complementului este activarea C3, care se descompune n
C3a i C3b sub aciunea C3-convertazei.
Calea alternativ. n plasma normal C3 este supus permanent unei activri spontane discrete prin
clivarea n C3a i C3b. C3b se combin cu factorul B rezultnd C3bB. Acesta la rndul s u este supus
aciunii factorului D care va transforma C3bB n C3bBb i Ba.
C3bBb este C3-convertaza cii alternative. Aceast convertaz, rezultat, deci, n mod fiziologic
ar putea cliva cantiti mari de C3 printr-un feedback pozitiv, asemntor unui cerc vicios, dac nu ar
exista mecanisme foarte riguroase de reglare ce mpiedic activarea spontan a unor cantiti mari de
C3.
n prezena unor polizaharide de pe suprafaa bacteriilor, a endotoxinei i a acizilor theicoici,
C3bBb rezultat n urma clivrii fiziologice se leag de suprafaa bacteriilor fiind protejat astfel de
inactivare. La stabilizarea C3bBb particip i o protein plasmatic, properdina.
Deci, activarea complementului pe calea alternativ este rezultatul stabilizrii C3bBb (a C3convertazei) ce poate fi determinat, printre altele, de prezena bacteriilor.
Activarea complementului pe calea clasic se produce de regul n prezena complexelor
antigen-anticorp, deci n urma unui rspuns imunitar. Astfel, bacteriile cu care organismul a mai venit n
contact, ptrund n organism i ntlnesc anticorpii corespunztori cu care vor forma complexe antigen
anticorp.

Figura 9.2. Schema activrii complementului pe cale clasic.

Cte o molecul de C1q, C1s i dou molecule de C1r formeaz unitatea de recunoatere care se
va lega de complexul antigen-anticorp. Unitatea de recunotere va cliva C2 i C4 n C2a, C2b i C4a,
C4b. C4b2a va forma C3 convertaza cii clasice, care va cliva C3 n C3a i C3b, piesa esenial n
reaciile urmtoare.
Formarea complexului de atac al membranei. Indiferent pe ce cale s-a activat complementul,
reaciile urmtoare sunt comune ambelor ci. Ambele C3 convertaze se combin cu C3b formnd
C5 convertaza (C3b2BbP pentru calea alternativ i C3b4b2a pentru calea clasic). C5 se va
descompune n C5a i C5b. C5b se fixeaz pe suprafaa celulei pe suprafaa creia se afl antigenul
- deci n cazul nostru pe suprafaa bacteriei. De C5b se vor lega n continuare C6,7,8 care mpreun cu
mai multe molecule de C9, care polmerizeaz, formeaz un complex de atac al membranei ce
perforeaz membrana celular cu liza consecutiv a celulei bacteriene.
Rolul biologic al complementului
Activarea complementului genereaz o serie de efecte biologice de o importan deosebit n

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


rezistena antiinfecioas:
declanarea inflamaiei. Activarea complementului aduce dup sine declanarea reaciei
inflamatorii prin produii intermediari rezultai pe parcursul activrii. Astfel, C5a este un puternic factor
chemotactic i chemokinetic pentru PMN pe care le va aduce n focarul infecios. C3a i C5a sunt
anafilatoxine care vor duce la o degranulare fiziologic a mastocitelor cu eliberarea unor mediatori
chimici vasoactivi;
citoliza. Celulele pe care s-a fixat complementul i care n mod fiziologic sunt celulele strine
organismului (bacteriile, n cazul de fa) sunt lizate sub aciunea complexului de atac al membranei. n
cazuri patologice, complementul se poate fixa de celulele proprii organismului producnd distrugerea
acestora;
opsonizarea. Fagocitele au pe suprafaa lor receptori pentru C3b. Astfel, microbii de care s-a
fixat C3b vor adera de celulele fagocitare fiind fagocitai mai eficient.
Deficienele ereditare ale unor componente ale complementului scad capacitatea de aprare
antiinfecioas a organismului. Astfel, un deficit de C1q, C1r, C1s, C4, C2 se asociaz cu o
susceptibilitate crescut pentru infecii cu germeni piogeni. O deficien de C3 duce la perturbarea
activrii complementului pe ambele ci. La indivizi cu deficien de C3 opsonizarea este slab,
eficien fagocitozei redus, evoluia infeciilor putnd fi fatal. Deficiena de properdin favorizeaz
infeciile cu germeni piogeni, remarcndu-se n special apariia infeciilor meningococice cu evoluie
fulminant. Deficiene ale factorilor C5, C6, C7, C8 i C9 cresc susceptibilitatea pentru infeciile
diseminate cu cu neisserii.
1.4.2. Lizozimul
Lizozimul e ste o mucopeptidaz prezent aproape n toate umorile organismului (ser,
lacrimi, s aliv, se creie nazal), fiind ab sent n L C R, urim i umoarea apoas ). n plasma
sanguin, concentraia de lizozim este de 4mg/ml i e ste singura enzim a vertebratelor
capabil s rup legturile din interiorul peptidoglicanului prezent n peretele bacterian
precum i chitina fungilor. Lizozimul e ste activ pe peretele celular al bacteriilor grampozitive. B acteriile gram-negative nu su nt se n sibile la ac iunea lizozimului, deoarece
peptidoglicanul e ste acoperit de membrana extern. D a c bacteriile sunt supu se iniial
aciunii complementului, ace sta va leza membrana extern dezvelind peptidoglicanul,
sen sibil acum la ac iunea lizozimului.
Multe specii bacteriene au dezvoltat strategii de eludare a aciunii complementului i lizozimului,
ceea ce ns nu scade importana lor n aprarea antiinfecioas.
1.4.3. Citokinele
Citokinele sunt peptide, asemntoare hormonilor, cu proprieti imunomodulatoare, produse de
celulele care rspund invaziei microbiene. Cele care acioneaz chiar asupra celulelor care le produc
sunt denumite autocrine, cele cu efect pe celulele nvecinate paracrine, iar cele cu efect pe celule la
distan endocrine. Exist multe celule productoare de citokine, dar cele mai importante sunt
macrofagele i limfocitele.
Tabelul 9.5. Exemple de citokine

n cazul invaziei organismului de ctre ageni strini (bacterii, toxine), se declaneaz secreia de
citokine care contribuie n ansamblu la creterea rezistenei la infecii.
Astfel, citokinele au rol important n declanarea inflamaiei. IL-1este implicat n producerea
febrei, creterea permeabilitii vasculare, induce explozia respiratorie n macrofage i PMN, moment

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


esenial n fagocitoz. IL-6 declaneaz n ficat sinteza proteinelor de faz acut. IL-8 secretat de
macrofage la stimularea acestora de Il-1 i TNFa este un puternic factor chemotactic pentru PMN,
contribuind astfel la formarea puroiului n focarul infecios. TNFa favorizeaz agregarea i activarea
leucocitelor neutrofile i eliberarea enzimelor proteolitice din celulele mezemchimale, deci sunt
productoare de leziuni tisulare.
Unele simptome generale ale infeciei, ca, de exemplu, febra, somnolena, starea de disconfort,
durerea muscular etc., se datoreaz activitii acestor substane.
1.4.4. R spunsul de faz acut
Este o reacie generalizat, nespecific a organismului, stimulat de infecie, inflamaie, leziuni
tisulare i inconstant de procese proliferative fiind mediat de citokine dintre care mai importante sunt IL1, IL-6, TNFa, PGE1 (prostaglandina E1) i interferoni.
Febra este cel mai evident semn al rspunsului de faz acut i este rezultatul aciunii IL-1, TNF
i alfa interferonului care acioneaz mpreun asupra centrului termoreglrii al hipotalamusului. La
aceasta se adaug creterea PMN n sngele periferic. Se remarc scderea fierului i zincului n ser,
necesare multiplicrii bacteriilor.
Proteinele serice a cror concentraie crete n timpul rspunsului de faz acut sunt:
componente ale complementului, proteinele coagulrii, proteinele de transport, inhibitori ai proteazelor ce
favorizeaz fagocitoza i stimuleaz migraia leucocitar.
O protein de faz acut este proteina C-reactiv (CRP), produs de celula hepatic stimulat
de IL-1. n 24-48 ore de la debutul inflamaiei acute concentraia seric a CRP crete de mii de ori.
CRP se poate lega de polizahardele unui numr mare de bacterii i fungi. Prin activarea consecutiv a a
complementului, pe cale alternativ, se faciliteaz ndeprtarea acestor microorgansime prin bacterioliz
i fagocitoz.
1.4.5. Opsoninele i opsonizarea
Opsoninele sunt substane care ader de suprafaa unui microorganism fcndu-l accesibil
fagocitozei. Exist opsonine nespecifice i specifice. C3b, de pild, opsonin nespecific ce se produce
n timpul activrii complementului se leag covalent de microbi. Acest complex, microb-C3b, se leag de
glicoprotein-receptorul pentru C3b prezent pe membrana fagocitelor (CR1). Fiind legat de fagocit,
microbul va fi fagocitat eficient.
Alt exemplu de opsonin nespecific este fibronectina, o glicoprotein cu funcii de opsonin fa
de bacteriile gram-pozitive. Ea se gsete la suprafaa mucoaselor, mpiedicnd, prin proprietatea de a
se lega de flora gram-pozitiv, colonizarea mucoaselor cu flor gram-negativ (de exemplu mucoasa
faringian).
Opsoninele specifice sunt unii anticorpi care, ns, sunt implicai n aprarea antiinfecioas
dobndit.
1.4.6. Interferonii (IFN)
Interferonii sunt glicoproteine (GM 20 kD) cu rol important n rezistena fa de virusuri. Se
deosebesc 3 tipuri de interferoni:
IFN-, secretat de macrofage i PMN ca urmare a infeciei celulelor respective cu un virus sau
dup stimulare cu polinucleotide, diverse componente bacteriene cum ar fi endotoxina bacteriilor gram
negative etc.;
IFN-, secretat de fibroblati n aceleai condiii;
Interferonii alfa i beta sunt produi de celule dup ptrunderea unui virus sau a inductorilor de

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


interferoni (polinucleotide, endotoxina bacteriilor gam-negative, ARN dublu catenar etc.). Ei mpiedic
ptrunderea altui virus n celula respectiv pe de o parte, iar pe de alt parte, secretat n exterior se
fixeaz pe receptorii pentru virusuri ale celulelor invecinate protejndu-le i pe acestea fa de
ptrunderea virusului.
IFN- sau interferonul imun, secretat de limfocitele T dup stimularea acestora cu un antigen
fa de care limfocitele au fost sensibilizate anterior.
Dintre efectele biolologice ale interferonilor amintim aici activitatea antiviral
antimitotic i imunomodulatoare. V om reveni a supra lor n capitolul de virusologie.
1.4.7. R spunsul inflamator
n esen, ptrunderea microbilor n esuturi duce la activarea complementului, ceea ce are
ca urmare liza celulelor microbiene, pe de o parte, i declanarea rspunsului inflamator
infecios, pe de alt parte. Cascada de activare a complementului va antrena eliberarea unor
mediatori chimici (citokine, proteinele de faz acut, mediatori rezultai din degranularea mastocitelor
etc.) care particip direct n procesul inflamator i vor atrage n focarul infecios fagocitele.
Acestea vor nltura microorganismele invadatoare prin fagocitoz.
Inflamaia acut este rezultatul schimbrilor ce se petrec ntr-un esut ca rspuns la o agresiune
mecanic, chimic sau infecioas. Ea este un mecanism de aprare antiifecios rapid, care tinde s
localizeze infecia i s previn diseminarea ei. Manifestrile locale ale inflamaiei sunt eritemul
(rubor), cldura (calor), durerea (dolor) i edemul (tumor).
Inflamaia poate evolua spre vindecare cu restitutio ad integrum a esuturilor sau cu sechele.
Deznodmntul unei reacii inflamatorii depinde de extinderea procesului inflamator, de
microorganismele implicate, precum i de reactivitatea gazdei.
Cele 3 evenimente majore ale inflamaiei sunt:

vasodilataia capilar local,

modificrile structurale microvasculare, i

acumularea leucocitelor la locul injuriei.


Vasodilataia capilar. Mediatorii plasmatici ai inflamaiei, ca, de pild, complementul, exist sub
forma unor precursori care, aa cum am vzut, devin biologic activi numai dup activare. Activarea C3 a
complementului este o etap critic a inflamaiei.
C3a i C5a rezultate n cursul activrii complemenetului sunt anafilatoxine puternice ce determin
degranularea mastocitelor cu eliberarea unor mediatori chimici.
O parte dintre acetia sunt preformai, aa cum este histamina. Ea are aciune vasodilatatoare
asupra capilarelor, crescnd totodat i permeabilitatea acestora. n consecin, se produce o exudare
din capilare spre zona infectat a plasmei cu mediatorii pe care aceasta i conine.
Modificrile structurale microvasculare i acumularea de leucocite. Sub aciunea unor
mediatori chimici rezultai n timpul activrii complementului i secretai de macrofagele stimulate de
toxine bacteriene se modific endoteliul capilar, care permite adeziunea PMN de acesta.
PMN sunt atrase de factorii chemotactici de natur bacterian, de cei produi n urma activrii
complementului i de cei rezultai din degranularea mastocitelor. Ele vor prsi capilarul prin diapedez
i se vor ndrepta ctre focarul inflamator unde vor distruge microbii prin fagocitoz.

1.5. Mecanisme celulare nespecifice


Fagocitoza este un mecanism important de ndeprtare a microorganismelor i a celulelor lezate.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Celulele fagocitare sunt: macrofagele i PMN neutrofile i eozinofile. n anumite condiii i alte celule fagocite facultative - pot dobndi proprieti fagocitare, ca, de pild, fibroblatii.
Polimorfonuclearele neutrofile opereaz ca un front n aprarea fa de agenii patogeni.
Numrul lor crete n timpul unei infecii bacteriene, dar scade n infeciile virale.
PMN, precum i macrofagele fagociteaz o gam larg de antigene, mai ales bacterii opsonizate.
Dup nglobare, antigenele strine sunt distruse de enzimele lizozomale. PMN au n citoplasma lor
granulaii primare azurofile ce conin mieloperoxidaz i alte enzime cum sunt beta-glucuronidaz,
elastaza i catepsina G. Granulaiile specifice, neutrofile conin lizozim i lactoferin. Aceste enzime
hidrolitice i digestive sunt eliberate n fagozom favoriznd digestia materialului fagocitat. Frecvent,
leucocitele sunt distruse n urma fagocitozei, ca n cazul infeciilor cu germeni piogeni (stafilococi,
streptococi, neisserii). Ele reprezint celulele kamikaze a aprrii antiinfectioase, deoarece sosesc
primele la locul injuriei.
Polimorfonuclearele eozinofile reprezint 1-3% din totalul leucocitelor sanguine. Numrul lor
crete n timpul reaciilor alergice, n cazul infeciilor parazitare. Ele iau parte la aprarea antiparazitar
i conin enzime ce metabolizeaz histamina i leucotrienele fiind astfel capabile s joace un rol
important n limitarea reaciilor alergice. Pe de alt parte, ele conin proteine toxice, ca, de pild,
proteina major bazic ce duce la distrugerea celulelor epiteliale n tractul respirator, fiind responsabile
de inflamaia cronica n astmul bronic.
Eozinofilele fagociteaz complexe antige-anticorp precum i unele resturi antigenice ce rezult din
rspunsul imun i care n alte condiii ar duce la boli autoimune.
Polimorfonuclearele bazofile reprezint aproximativ 0.5% din leucocite i sunt echivalentul
mastocitelor tisulare. Bazofilele au granulaii mari ce conin numeroi mediatori chimici i precursorii
acestora, ca, de exemplu, histamina, leucotriene, prostaglandine, factori activatori al trombocitelor, etc.
Aceti mediatori sunt eliberai, n mod normal, la nevoie, n cantitti reduse. Eliberarea lor masiv poate
fi duntoare i poate duce la reacii alergice de tip I anafilatic, ca: astm bronic, urticarie, febr de fn
sau chiar oc.
Fagocite mononucleare includ monocitele din snge i macrofagele tisulare. Ele sunt capabile s
fagociteze microorgansime opsonizate, s distrug unele dintre ele dar nu pe toate. Unele
microorgansime (micobacterii, listerii, brucelle, crypococci, toxoplasme) supravieuiesc i se nmulesc
n macrofage. n acest caz celula servete ca factor de diseminare al infeciei, protejnd
microorganismele respective. n cadrul proceselor imunitare mediate celular, monocitele activate pot
omor germenii patogeni intracelulari.
1.5.1. Fagocitoza
Fagocitoza este proprietatea unor celule de a ngloba i digera particule strine organismului.
Aceste celule sunt PMN i monocitele (care dup ce migreaza n esuturi se numesc macrofage) i au
un rol important n aprarea gazdei fa de infecii.
PMN apar primele ca rspuns ntr-o inflamaie acut, urmate mai trziu de macrofage. Factorii
chemotactici sunt eliberai de numeroi microbi. Aceti factori sunt atractani puternici pentru celulele
fagocitare care au receptori specifici.
Fagocitoza are urmtoarele etape: chemotaxia, opsonizarea, ataarea, internalizarea i digestia
Chemotaxia. Fagocitele sunt atrase n focarul infecios de factori de origine bacterian
(formilmetionil-leucil-fenilalanina) i factori chimiotactici ce apar n cursul inflamaiei, cum sunt: C5a,
kallicreina produs de esuturile lezate, produi rezultai din metabolismul acidului arahidonic
(prostaglandine, tromboxan, leucotriene). Aceste substane favorizeaz exprimarea receptorilor pentru
C3b al fagocitelor. Fagocitele prsesc capilarele prin diapedez.
Opsonizarea. Reprezint faza n care microorganismele sunt pregtite pentru fagocitoz i ader

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


de fagocite. Aceast aderare comport 4 modaliti ce definesc eficiena fagocitozei.
Menionm c ultimele dou posibiliti aparin rezistenei antiinfecioase dobndite, deoarece
presupun participarea anticorpilor rezultai n urma unui rspuns imunitar.
nglobarea. Dup ataare, particulele sunt nglobate ntr-o vacuol format din membrana
citoplasmatic. Acest vacuol, sau fagozom, va fuziona cu lizozomii primari pentru a forma
fagolizozomii n care enzimele lizozomale vor declana digestia. Totodat are loc explozia respiratorie
care este de fapt o activare puternic a metabolismul oxidativ al PMN.
Digestia. Distrugerea microbilor sub aciune enzimelor lizozoale se petrece prin dou mecanisme:
oxigen dependente i oxigen independente.
mecanismele dependente de oxigen sunt consecina exploziei respiratorii (intensificare brusc
a metabolismului) ce nsoete fagocitoza i pe parcursul creia se formeaz ioni de superoxid (O 3-),
oxigen atomic (O -), radicali hidroxili, peroxid de hidrogen (H 2O 2) i hipoclorit. Toi aceti produi sunt
puternic bactericizi.
mecanismele bactericide independente de oxigen se datoreaz unor enzime ca:
- enzime hidrolitice: catepsina, glicozidaza, arilsulfataza ce diger peretele celular al microbilor;
- defensine: proteine cationice care se leag de peretele celular i determin formarea unor
canale ce strpung peretele;
- lizozimul care atac peptidoglicanul;
- lactoferina care spoliaz mediul de fierul necesar bacteriilor.
Fagocitoza prin PMN poate fi considerat principalul mecanism de aprare fa de bacteriile
piogene.
Fagocitoza prin macrofage. Rolul fagocitozei prin PMN este distrugerea bacteriilor. Macrofagele
intervin mai trziu n focarul infecios, unde vor fagocita microbi i detritusurile celulare rezultate n urma
leucocitelor distruse la locul injuriei. Fazele fagocitozei prin macrofage sunt asem ntoare cu cele
descrise mai sus, dar, spre deosebire de PMN, macrofagele se pot activa dac sunt stimulate
corespunztor. Ele se activeaz sub aciunea unor substane ce apar n urma prezenei
microorganismelor, ca, de pild, C3b i g-interferon, unele componente bacteriene, cum ar fi
endotoxinele, i de limfocitele Tdh n cadrul rspunsului imun celular. Cu toate acestea, unele bacterii,
protozare sau fungi sunt capabile s supravieuiasc i s se multiplice n macrofagul neactivat
(micobacterii, brucelle, criptococi, listerii etc.). Dup activare unele ele pot fi distruse. Deci, fagocitoza
efectuat de macrofage este eficient asupra microorganismelor cu habitat intracelular. Uneori, ns,
microorganismele nu sunt distruse i supravieuiesc pe durat lung n macrofag, rezultatul fiind
inflamaia cronic.
Fagocitoza prin macrofage are, pe lng rolul de a ndeprta bacteriile, mai ales cele cu habitat
intracelular, i cel de a iniia rspunsul imun. Macrofagele sunt celule prezentatoare de antigen care
dup prelucrarea acestuia l prezint limfocitelor Th.
1.5.2. Limfocitele NK
Celulele NK sunt limfocite citotoxice naturale care exist deja la natere. Ele nu sunt fagocite, dar
pot ataca i distruge n mod nespecific celule infectate cu virusuri sau chiar celule tumorale.
n contact cu celulele infectate, celulele NK secret o perforin nrudit cu C9 a complementului.
Aceasta polimerizeaz pe membrana celulei int i formeaz aici canale ce distrug integritatea
acesteia.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

Apariia unor substane strine organismului este recepionat de sistemul imun


care:
- discrimineaz selful de non-self;
- rspunde prin efectori umorali i celulari care vor elimina ceea ce este strin
organismului, meninnd astfel individualitatea i integritatea acestuia;
- memoreaz acest rspuns.
Funcionalitatea sistemului imun se pe bazeaz pe complementaritatea
steric dintre doi parteneri.
Primul partener, perceput de sistemul imun ca non-self, se numete antigen
i are capacitatea de a induce modificri biologice ale sistemului imun, care
constau, n esen, n apariia efectorilor imuni umorali (anticorpi) i celulari
(limfocite sensibilizate).
Partenerul reaciei imune care provine din partea organismului se numete
anticorp n ser i secreii i receptor pentru antigen cnd se constituie ca parte
component a membranei celulare a limfocitelor (BCR pentru limfocitul B i TCR
pentru limfocitul T).
Reaciile imunologice care au loc ntre antigen i efectorii imuni a cror
formare a indus-o pot avea consecine diferite asupra organismului. La o extrem a
acestor reacii stau cele fiziologice, care asigur imunitatea organismului i pe care
omul ncearc s le provoace artificial prin imunizare pasiv (seroterapie) sau
activ (vaccinare). La cellalt capt stau reaciile imunopatologice, care sunt
defavorabile organismului, fie c sunt ndreptate spre un agent infecios, fie spre
propriile antigene pe care organismul nu le mai recunoate ca propri (reacii
autoimune). n aceste cazuri omul caut s intevin prin depresia reaciilor
imunologice.
1. ANTIGENELE
1.1.Definiie. Antigene complete. Haptene
Antigenele sunt substane capabile de a interaciona specific cu receptorii
pentru antigen (anticorp, BCR1, TCR2). Datorit configuraiei de suprafa,
antigenele sunt recunoscute de organism ca strine, ca non-self. n unele situaii
patologice chiar i unele substane proprii ale organismului pot deveni antigenice,
nemaifiind recunoscute de organism ca self.
Un agent infecios, indiferent de natura lui, este un mozaic de antigene capabile

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

s produc un rspuns imunitar.


Antigenele complete au dou proprieti de baz:
imunogenitatea, care este capacitatea unui antigen de a induce un rspuns
imunitar (umoral sau/i celular), i
antigenicitatea, care este proprietatea antigenelor de a reaciona n mod
specific cu efectorii imuni (anticorpi sau limfocite sensibilizate) a cror
producere au indus-o.
Haptenele sunt antigene incomplete lipsite de imunogenitate, deci de
proprietatea de a induce ele nile un rspuns imunitar, dar sunt capabile s
reacioneze cu anticorpi specifici. Contradicia din definiia de mai sus se explic
prin faptul c o hapten devine imunogen legat covalent de o molecul mai mare,
numit carrier. Anticorpii care se vor forma vor reaciona la un contact ulterior i
cu haptena liber fr ca aceasta s fie asociat cu carrierul.
Epitopii. Gruprile unui antigen care sunt recunoscute de organism ca nonself se numesc epitopi. Partea complementar a efectorilor imuni (anticorpi sau
receptori de pe suprafaa limfocitelor) se numete paratop. Un antigen poart n
general mai muli epitopi diferii fa de care organismul va produce tot atia
anticorpi cu paratopi diferii. S-au descris i antigene cu epitopi identici repetitivi.
Poziia epitopilor ntr-un antigen este diferit i n funcie de aceast poziie
pot fi recunoscui de limfocitele - T sau B.
Epitopii care vor fi recunoscui de anticorpi sau limfocitele B sunt proeminene
ale unor molecule ghemuite la suprafaa antigenului i se numesc epitopi
structurali sau epitopi B. Aceti epitopi nu sunt antigenici dect n stare nativ,
denaturarea proteinei modificnd aspectul acestor epitopi.
Limfocitele T recunosc doar epitopi situai n interiorul moleculei de antigen i
care sunt peptide scurte (8-10 aminoacizi). Aceti epitopi liniari se numesc epitopi
secveniali sau epitopi T. Ei sunt recunoscui de limfocitelele T doar dup
prelucrarea antigenului de ctre macrofag i dup ce ajung la suprafaa acestuia.
Deci, limfocitul B recunoate epitopul ca o parte a moleculei intacte de antigen,
pe cnd limfocitul T i vede epitopul corespunztor doar dup descompunerea
moleculei. Cu alte cuvinte, limfocitul T recunoate o poriune ascuns din
carrier iar limfocitul B haptena.
Antigenele pot fi timodependente stimulnd sistemul imun prin intermediul
limfocitelor T dup prelucrare macrofagic i timoindependente care stimuleaz
direct limfocitele B, n stare nativ, fr intervenia limfocitelor T. Antigenele

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

timodependente sunt proteine, iar cele timoindependente sunt n general


polizaharidele i antigenele cu epitopi repetitivi.
1.2.Factori care influeneaz imunogenitatea
Antigenele trebuie s aib o anumit configuraie de suprafa i o structur
chimic ce le confer caracterul de non-self, deci de strin de organism.
Natura chimic a antigenelor este foarte variat. Cele mai bune antigene sunt
proteinele urmate de polizaharide, care sunt antigene i haptene foarte bune, apoi
de lipide i acizi nucleici, care sunt cel mai ades haptene. Se adminte c greutatea
molecular a unui antigen este n general peste 10.000 D, dar exist i excepii.
Glucagonul, spre exemplu, este imunogenic cu toate c are GM de 3.600 D.
Intensitatea rspunsului imun fa de un antigen este n funcie de natura
chimic, persistena n organism, doza, ritmul, calea, intervalul i calea de
administrare. Cunoaterea rspunsului n funcie de aceti factori st la baza
elaborrii calendarului de vaccinri.
Administrarea antigenelor cuplate cu adjuvani induce un rspuns imunitar mai
intens, deoarece crete perioada de remanen a antigenului n organism. Exemple
de adjuvani sunt adjunvatul Freund incomplet ce conine ap, ulei mineral i
lanolin i adjuvantul Freund complet care conine n plus BCG1.
Studiul rspunsului imun fa de antigenele cuplate i necuplate cu adjuvani
este foarte important, deoarece antigenele de pe suprafaa bacteriilor nu induc
niciodat rspunsuri imune n stare pur, ci cuplate cu corpul bacterian, a crui
componente au rol adjuvant, influeneaz rspunsul imun.
Din punct de vedere al organismului care produce anticorpii fa de antigene,
acestea sunt:
- antigene alogenice, care provin de la indivizii aceleiai specii i mpart specia
n grupe. Un exemplu de astfel de antigene sunt antigenele eritrocitare care
determin grupele sanguine,
- antigene singenice, care provin de la acelai organism,
- autoantigene, care sunt substane proprii organismului ce au suferit o
modificare, nemaifiind recunocute ca self de sistemul imunitar,
- antigene xenogenice sunt antigene care provin de la o alt specie. Astfel de
antigene, foarte importante n patologia uman, sunt antigenele bacteriene.
1.3. Antigenele de histocompatibilitate (MHC)

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

Cu toate c descrierea acestor antigene nu i are locul aici, le vom defini pe


scurt, subliniind totodat importana lor n imunogenez.
Antigenele de histocompatibilitate sunt glicoproteine care au fost descoperite
ca fiind cauza rejetului de gref. Responsabil de respingerea grefei n transplantele
alogenice este un grup de gene de histocompatibilitate, numit i complexul MHC,
care codific glicoproteine membranare mpotriva crora se ndreapt reacia
imun. Exist att de multe gene alele MHC, nct este puin probabil s existe
dou persoane care s aib antigenele identice. Ele au fost denumite iniial HLA
ntruct au fost descoperite pe suprafaa leucocitelor umane (human leukocyte
antigens).
Cu timpul ns, s-a descoperit c rolul lor biologic este extrem de important
deoarece prin participarea nemijlocit la recunoaterea de ctre limfocitele T a
antigenelor iniiaz rspunsul imun care st la baza rezistenei antiinfectioase
dobndite. Ele interacioneaz direct cu antigenul. Antigenele MHC pun n
continuare probleme imunologilor, dimensiunea importanei reale ale acestor
antigene fiind nc necunoscut.
Se deosebesc trei clase de antigene majore de histocompatibilitate: MHC-I,
MHC-II i MHC-III.
MHC-I se gsete, practic, pe membrana celular a tuturor celulelor
nucleate (deci lipsesc pe hematii) organismului. n structura MHC-I se remarc un
lan greu, format din 3 domenii, legat de o beta-2-microglobulin.
MHC-II se gsete numai pe suprafaa celulelor prezentoare de antigen i
a limfocitelor B, fiind format din 2 lanuri, alfa i beta.
Limfocitele T recunosc antigenele strine numai dac acestea sunt n
asociaie cu antigenele MHC.
Limfocitele T - helper (CD4) recunosc antigenele doar n asociaie cu
MHC-II. Antigenele pot fi prezentate, deci, limfocitelor Th doar de macrofage
(monocite i macrofage tisulare) i limfocitele B. Aceasta constituie baza
restriciei imunologice.
Limfocitele T - citotoxice (CD8) vneaz celulele organismului care devin
non-self prin modificarea structurii antigenice de suprafa n urma ptrunderii
unui virus, unui microorganism facultativ intracelular sau a transformrii tumorale.
Ele recunosc antigenele de pe suprafaa acestor celulele numai n asociaie cu
antigenele MHC-I. n condiii fiziologice vor fi reperate toate celulele devenite
non-self.
1.4. Antigene microbiene

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

Microorganismele sunt mozaicuri de antigene. Acestea sunt fie corpusculare


legate de structura microorganismului (bacterii, virusuri fungi etc.), sau eliberate n
mediu dup distrugerea microorganismului (endotoxinele), fie solubile, secretate de
microorganism n mediul nconjurtor (enzime, exotoxine).
Dintre antigenele corpusulare, cele mai importante sunt antigenele de
suprafa (polizaharidele capsulare, componente ale peretelui celular, antigene
flagelare).
Componentele de suprafa a florei microbiene normale a organismului
favorizeaz colonizarea acesteia n niele naturale, cum ar fi cavitatea bucal,
faringele, intestinul gros etc. Antigenele acestei flore au o importana deosebit,
deoarece datorit lor organismul se imunizeaz ocult, rezultatul fiind apariia
anticorpilor naturali, cu rol n aprarea antiinfecioas.
Se presupune c apariia anticorpilor fa de antigenele eritrocitare de grup s-ar
datora stimulrii antigenice oculte a sistemului imun de ctre unele antigene ale
florei normale organismului ce prezint imunitate ncruciat cu antigenele
eritrocitare de grup.
Antigenele care sunt implicate n patogenitatea agenilor infecioi se numesc
antigene de patogenitate. Dintre acestea amintim:
antigenele capsulare (Streptococcus pneumoniae, Klebsiella, Bacillus
anthracis, antigenul de nveli Vi al bacilului tific, antigenul K al bacilului
coli enteropatogen etc.),
antigenele de perete (antigenul O din peretele bacteriilor gram-negative,
proteina M a streptococului de grup A),
exoenzimele (coagulaza, hemolizinele secretate de Staphylococcus aureus,
fibrinolizinele streptococului beta-hemolitic de grup A etc.),
exotoxinele (difteric, tetanic, diferitele enterotoxine etc.)
Imunogenitatea antigenelor bacteriene depinde de mai muli factori, cum
sunt: predispoziia genetic a gazdei, cantitatea, forma de prezentare a
antigenului, care practic nu este niciodat pur, fiind combinat cu diveri adjuvani
sau carrieri ce aparin peretelui bacterian, cililor, capsulei etc. La aceti factori se
mai adaug variabilitatea antigenic a unor microorganisme i modificrile pe
care le pot suferi antigenele bacteriene n organism.
Componentele bacteriene intracelulare pot fi i ele antigenice, dar numai n
cazul n care se elibereaz n mediu dup liza bacteriei.
Rspunsul imunitar difer, de asemenea, n funcie de habitatul bacteriilor n
organismul infectat, Astfel, agenii infecioi care se nmulesc n mediul

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

extracelular induc un rspuns predominant umoral, pe cnd cei cu habitat facultativ


sau obligatoriu intracelular un rspuns predominant celular.
Structura antigenic a agenilor infecioi este important deoarece pe baza
ei putem recunoate diferiii ageni prin intermediul serurilor imune care conin
anticorpi specifici cunoscui. Antigenele pe baza crora agenii infecioi se
ncadreaz n diferite uniti taxonomice (familii, genuri, specii) se numesc
antigene de specificitate. De pild, salmonelele se mpart n grupe pe baza
antigenului O prezent n peretele celular i n tipuri pe baza antigenelor flagelare H.
Acelai antigen poate fi antigen de patogenitate precum i de specificitate. Astfel,
polizaharidul capsular al pneumococului este n acelai timp factor de patogenitate
precum i criteriu de clasificare a speciei n tipuri.
Superantigenele sunt antigene care stimuleaz n mod necontrolat i
dramatic proliferarea limfocitelor T care au n structura receptorului lor pentru
antigen anumite specificiti V (vezi receptorii pentru antigen ai limfocitelor),
fr s se supun restriciei MHC. Ca urmare, limfocitele vor secreta cantiti
deosebit de mari de citokine, care determin manifestri clinice foarte grave, cum
este ocul.
Foarte multe exotoxine bacteriene funcioneaz ca superantigene. Astfel,
de pild, exotoxinele secretate de S.aureus sunt superantigene responsabile de
manifestrile clinice ale ocului toxic stafilococic. Eritrotoxinele streptococice sunt,
de asemenea, superantigene.
Superantigenele sunt antigene T-dependente care nu necesit prelucrare
macrofagic. n loc s se lege de receptorul limfocitelor T (TCR) acolo unde se
leag de regul antigenele (vezi Figura 10.6.), superantigenele se leag de
poriunea lateral a TCR i a moleculelor MHC a celulelor prezentatoare de
antigen. n figur sunt reprezentate dou modaliti de stimulare a limfocitelor T
prin enterotoxina stafilococic. Astfel, n prima situaie (a), dup ce s-a stabilit
recunoaterea, printr-un antigen convenional, ntre celula prezentatoare de antigen
i limfocitul Th, enterotoxina se ataeaz de prile laterale ale MHC al celulei
prezentatoare de antigen i de lanul V al limfocitului. Din situaia a doua (b)
rezult capacitatea enterotoxinei stafilococice de a se lega i de limfocitele T
citotoxice care au n structura receptorului lor lanul V.

2. SISTEMUL CELULAR IMUNOCOMPETENT

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

Organele sistemului imun sau organele limfoide sunt rspndite n tot


organismul i implicate n creterea, diferenierea i activitatea limfocitelor.
Precursorul tuturor celulelor implicate n rspunsul imun este celula su,
omnipotent, care apare n insulele lui Wolf din sacul vitelin, n primul trimestru al
vieii intrauterine. De aici vor migra spre ficat i splin n trimestrul II. n trimestrul
III ajung n mduva roie, de unde vor migra mai departe n organele limfoide
primare.
2.1. Organele limfoide primare
Sunt mduva osoas roie i timusul. n aceste organe limfocitele devin celule
imunocompetente, dobndind repertoriul de recunoatere a antigenelor i
proprietatea de a deosebi selful de non-self. Acest proces de colarizare se
desfoar n absena antigenelor din mediul extern.
n timus prolifereaz limfocitele T, din care 10% dobndesc caracterul
imunocompetent iar restul de 90% sunt distruse.
La psri, limfocitele B migreaz i se difereniaz ntr-un organ numit bursa
lui Fabricius. La mamifere, deci i la om, ele rmn n mduva roie i se
difereniaz aici, mduva roie fiind i un organ limfoid secundar.
2.2. Organele limfoide secundare
Dup diferenierea lor n organele limfoide primare, limfocitele B i T
migreaz pe calea vaselor sanguine i limfatice n organele limfoide secundare,
care sunt ganglioni limfatici, splina, amigdalele i esutul limfoid ataat mucoaselor
(MALT).
Limfocitele imunocompetente care populeaz organele limfoide secundare sunt
celule antigen-reactive. Deci spre deosebire de organele limfoide primare, unde
instruirea se face n absena antigenului, n organele limfoide secundare prezena
acestuia este obligatorie.
Ganglionii limfatici au rolul unui filtru pentru antigenele venite pe cale
limfatic i care vor fi preluate de celulele prezentatoare de antigen (CPA):
macrofage, celulel foliculare dentritice).
Sub capsula conjunctiv a ganglionilor se afl sinusul subcapsular, marginat de
macrofage. Limfocitele i antigenele ajung din alte regiuni aici prin vasele limfatice
aferente.
Zona cortical a ganglionului conine limfocitele B organizate n foliculi

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

limfoizi, care prezint centrii germnativi dac au fost stimulai antigenic.


Zona paracortical conine limfocite T care sunt n contact strns cu celulele
dendritice (prezentatoare de antigen).
Zona medular conine limfocitele T i B, plasmocite, dispuse n cordoane i
macrofage aezate de-a lungul traveelor conjunctive. n trecerea limfei de la vasul
limfatic aferent spre cel eferent, antigenele sunt fagocitate de macrofagele din zona
medular.
Fiecare ganglion limfatic are o vascularizaie arterial i venoas proprie.
Limfocitele circulante intr n ganglion la nivelul endoteliului specializat al
venulelor postcapilare a zonei paracorticale. Limfocitele nu pot prsi ganglionul
dect prin vasul limfatic eferent. Pentru a ajunge din nou n circulaia sanguin
trebuie s strbat toat circulaia limfatic pna la vena subclavicular.
Splina este format din pulpa roie implicat n distrugerea eritrocitelor
mbtrnite i pulpa alb care reprezint esutul limfoid al splinei. Acest esut este
organizat n jurul arteriolelor centrale, constuituind arii limfoide periarteriolare. Ele
cuprind o zon adiacent arteriolei care conine limfocite T, n jurul acestei zone
dispunndu-se limfocitele B, organizate fie n foliculi primari nestimulai, fie n
foliculi secundari stimulai ce conin centri germinativi. n zona marginal a
centrilor germinativi se gsesc macrofage i celule dendritice. Limfocitele intr i
prsesc splina prin capilarele aretriolei centrale situate n zona marginal,
deoarece splina ne dispune de un drenaj limfatic asemntor ganglionilor limfatici.
Sistemul imun al mucoaselor (MALT)1este format din esut limfoid ataat
mucoasei gastrointestinale, respiratorii i a tractului uro-genital i este deosebit de
important n aprarea antiinfecioas dobndit deoarece este principala barier
antiinfecioas fa de microorganismele care ptund n organism pe cale
digestiv, respiratorie i urogenital.
Mai bine cunoscut este esutul limfoid asociat bronhiilor (BALT2) cu rolul de a
capta antigenele venite pe calea aerului i esutul limfoid asociat intestinului
(GALT3) care preia antigenele venite pe cale digestiv.
BALT este format din foliculi i alte agregate limfocitare dispuse n ntreg
sistemul bronic, mai ales la bifurcaia broniilor, bronhiilor i bronhiolelor.
Dispune de o reea foarte organizat de capilare, arteriole, venule i vase limfatice
eferente ceea ce arat c joac un rol de filtru pentru toate antigenele care ajung
aici, fie pe cale respiratorie, fie circulatorie. Antigenele venite pe cale respiratorie
sunt preluate de celulele M sau Owen).

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

GALT este alctuit din plcile lui Peyer (aglomerri submucoase de limfocite
B i T de-a lungul intestinului care sunt stimulate de antigenele ce ptrund pe cale
digestiv) i limfocitele intraepiteliale.
Situate deasupra plcilor lui Peyer nspre lumenul intestinal se afl celulele
M sau celulele lui Owen. Ele au form de potcoav cu concavitatea spre plcile
Peyer i sunt specializate n preluarea antigenelor din intestin. Limfocite tinere
strbat membrana bazal a epiteliului intestinal i ptrund n celulele M. Acestea
vor prelua antigenul prin pinocitoz, dar nu l prelucreaz ci l trec n plcile lui
Peyer unde interacioneaz cu limfocitele T i B ducnd la diferenierea acestora.
Celule M pot prelua n anumite situatii proteine solubile precum i antigene
particulate cum sunt unele virusuri, bacterii i protozoare. n general ptrunderea
acestora din urm ar trebuie s fie mpiedicat de IgA secretor ce se afl pe
mucoasa digestiv, dar unele microorganisme au dezvoltat mecanisme de eludare a
acestei bariere de aprare.
Limfocitele B sensibilizate de antigen i care vor produce IgA prsesc plcile
lui Peyer i ajung mai nti n ganglionii limfatici regionali (mezenterici). De aici,
urmnd calea vaselor eferente, ajung n canalul toracic i n circulaia general.
Majoritatea acestor limfocite B reintr n lamina proprie a mucoasei intestinale,
fenomen denumit homing limfocitar. O mic parte din limfocitele B care au
prsit iniial intestinul, prsesc torentul sanguin i se ndreapt spre alte esuturi
limfoide mucoase (tract respirator, urogenital, bronii etc) sau n glande cu secreia
exocrin (salivare, mamare) unde se vor transforma tot n plasmocite secretoare de
IgA. n acest fel informaia antigenic este rspndit n ntreg organismul.
Dup aezarea lor, ele se matureaz spre plasmocite secretoare de IgA dimer.
Cele dou molecule de IgA sunt legate ntre ele pintr-un lan J, apoi trec prin
celulele epiteliale dobndind piesa secretorie. De la contactul celulelor M cu un
antigen trec 30 - 50 de zile pn la apariia anticorpilor pe suprafaa mucoasei
respiratorii.
Deci, ptrunderea antigenelor pe cale respiratorie i digestiv poate duce la
apariia unor anticorpi protectori la suprafaa mucoasei nazale, bronice sau
intestinale. Cunoaterea acestui proces este foarte important deoarece st la baza
vaccinrilor pe cale oral pe de o parte sau declaneaz fenomene de
hipersensibilizare pe de alt parte (astm bronic, alergii alimentare).
Soarta unui agent infecios care strbate barierele externe ale aprrii
antiinfecioase naturale depinde de calea de ptrundere. Astfel, dac agentul
infecios ptrunde direct n circulaie va ajunge n splin unde va iniia un
rspuns imunitar. Dac ptrunde prin piele, datorit unui traumatism, de

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

pild, va fi transportat de la locul inflamaiei prin limf la ganglionii limfatici


regionali, care vor servi ca sediu al rspunsului imun. n fine, dac strabate
mucoasa digestiv sau respiratorie va ajunge n esutul limfoid ataat
mucoaselor (MALT), unde se va produce i rspunsul imun. Aici se vor
produce anticorpi (IgA) care vor ajunge la suprafaa mucoaselor respective,
dar o parte din limfocite vor migra la alte organe limfoide, astfel ca informaia
antigenic s ajung n ntreg organismul.

2.3. Celulele implicate n rspunsul imun


Pentru a avea spaiu suficient pentru celulele care potenial pot recunoate
milioane de antigene invadante, sistemul imun menine foarte puine celule pentru
fiecare specificitate. Cnd apare un antigen, aceste cteva celule specifice sunt
stimulate i prolifereaz formnd o adevrat armat. Ulterior sunt implicate
mecanisme supresoare care stpnesc aceast proliferare.
Pentru a produce un rspuns imunitar, un antigen trebuie s interacioneze cu o
serie de celule prezente n snge i diferite esuturi. Acestea sunt celulele
prezentatoare de antigen (CPA) i limfocitele T i B.
n interaciunea dintre antigen i aceste celule de o importan major sunt
antigenele de histocompatibilitate (MHC) de pe suprafaa acestor celule.
2.3.1.Celulele prezentatoare de antigen (CPA)
CPA sunt celulele care au proprietatea de a prezenta antigenele limfocitelor.
Ele cuprind macrofagele (fagocite profesioniste), celulele Langerhans din piele,
celulele dendritice din ganglionii limfatici i splin, i limfocitele B.
Macrofagele. Sistemul mononclear macrofagic este alctuit din celule cu
origine mieloid, precursorul lor comun fiind monoblastul. Ele prsesc mduva
roie, intr n snge unde se numesc monocite i reprezint 10% din leucocitele
sanguine. Dup cteva zile prsesc circulaia, ptrund n diverse esuturi, devenind
macrofage mature. Denumirea lor depinde de zona anatomic n care au migrat.
Astfel, ele se numesc macrofage alveolare n plmn, microglii n esutul nervos,
celule Kupffer n ficat, osteoclaste n schelet, celulele mezangiale renale etc.
Macrofagele au pe suprafaa lor receptori pentru C3b a complementului i pentru
Fc a imunoglobulinelor.
Ele intervin n aprarea antiinfecioas prin fagocitoz, dar rolul lor

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

esenial const n relaiile pe care le stabilesc cu limfocitele Th, crora le


prezint antigenul. Macrofagele secret IL-1 cu activitate de stimulare asupra
limfocitului Th, care la rndul lui secret IFN- care activeaz macrofagele.
Celulele dendritice au aceast denumire deoarece au prelungiri foarte lungi i
ramificate. Sunt de dou tipuri: foliculare n ganglionii limfatici i splin i celule
Langerhans n piele. Ele nu fagociteaz, ci doar endociteaz antigene T dependente.
Antigenele particulate le menin la suprafaa lor. Celulele dendritice asigur o
remanen ndelungat a antigenului n esutul limfoid, prelungind astfel
stimularea antigenic a limfocitelor.
Indiferent de tipul de CPA, ele au la suprafaa lor antigene de
histocompatibilitate (MHC) de clasa II. Dup nglobarea antigenului, CPA
prelucreaz antigenul degradndu-l pn la nivel de peptid format din 8-10
aminoacizi. Acest peptid ajunge printr-un mecansim necunoscut la suprafaa CPA
asociat antigenului MHC de clasa II i este prezentat limfocitului Th, care nu
recunoate antigenul dect n aceast asociere. Cnd CPA prezint antigenul
limfocitului T, ele secret o monokin - IL-1 care are aciune stimulatoare asupta
limfocitului Th.
n concluzie, celulele prezentatoare de antigen sunt responsabile de;
legarea antigenului, prelucarea i prezentarea acestuia limfocitelor Th n
asociaie cu MHC-II i secreia de IL-1.
2.3.2. Celule cu origine limfoid - limfocitele
Limfocitele alctuiesc 10 -15% din elementele seriei albe sanguine. Cele
aproximativ un trilion de celule limfocitare (1kg) poart responsabilitatea major a
sistemului imun. Ele nu pot fagocita, dar demonstreaz alte proprieti speciale:
poart pe suprafaa lor receptori specifici care permit fiecrei celule s
reacioneze cu un anumit antigen. Aceasta constituie baza specificittii
imunologice;
se divid dup stimularea antigenic i formeaz clone celulare cu
specificitate identic. Unele limfocite au durat de via lung reinnd
informaia antigenic timp ndelungat, chiar toat viaa. Aceasta este baza
memoriei munologice;
limfocitele sunt vehiculate de snge i limf, memoria specific dobndit
n urma unui rspuns imunologic repartizndu-se ntregului organism.
Limfocitele cu funcionalitate diferit au aspect asemntor la microscopul

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

optic, dar au markeri de suprafa ce pot fi identificai cu anticorpi monoclonali.


Astfel se identific limfocitele B i limfocitele T cu subpopulaiile corespunztoare
i celule nule.
Limfocitele B reprezint 2-12% din limfocitele circulante. Ele au pe suprafaa
lor markerul CD19 i antigene MHC de clasa II.
Cnd limfocitul B este stimulat corespunztor prin limfocitul T-helper sau mai
rar de antigene timoindependente, el ncepe s se divid transformndu-se n
limfoblati care dau natere la plasmoblati, apoi la plasmocite. Toate celulele
provenite dintr-un singur limfocit B aparin unei singure clone celulare,
productoare a milioane de anticorpi identici care vor fi eliberai n mediul intern.
Pe suprafaa limfocitelor B se gsete BCR care permite celulelor B s
recunoasc antigenele specifice.
Cele mai multe limfocite B sunt sub control direct al limfocitelor T-helper care
stimuleaz activitatea lor i T-supresoare care o deprim. Exist ns i limfocite
timoindependente, care nu necesit cooperarea cu limfocitele T reglatoare fiind
stimulate direct de antigen.
Dup stimulare antigenic, limfocitele se difereniaz, n afar de plasmocite
secretoare de anticorpi, i n limfocite B cu memorie, care sunt celule cu via
lung, fiind responsabile de un rspuns umoral rapid la o stimulare ulterioar cu
acelai antigen.
Limfocitele T reprezint 69-80% din limfocitele circulante.
Ca i limfocitele B, ele recunosc n mod specific un numr imens de antigene
ceea ce nseamn c i ele trebuie s dispun de un mecanism care s le garanteze
variabilitatea receptorilor. Principiul mecanismului de sintez a receptorilor este
asemntor celui prin care se sintetizeaz anticorpii. Se deosebesc i aici
fragmentele de genele V,D,J, posibilitatea de variablitate fiind foarte mare.
Markerii de surafa a limfocitelor T. La suprafaa limfocitelor T se gsesc
markerii care individualizeaz subpopulaiile de limfocite T.
La toate categoriile funcionale de limfocite T este prezent molecula CD3,
format din 5 lanuri glicoproteice () care se asociaz cu receptorul pentru
antigen al limfocitului T.
Limfocitele T helper (Th) alctuiesc o subpopulaie de limfocite care dup
interaciunea cu antigenul stimuleaz limfocitele B n elaborarea unui rspuns
imun umoral n anticorpi, limfocitele Tc pentru obinerea unui rspuns celular i activeaz
macrofagele. Markerul de suprafa a limfocitului Th este molecula CD4+.
Limfocitele T supresoare (Ts) limiteaz expansiunea clonal a limfocitelor B i

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

T stimulate antigenic participnd la reglarea intensitii rspunsului imun.


Limfocitele T citotoxice (Tc) sunt stimulate prin antigene care sunt exprimate
la suprafaa celulei gazd ca, de pild, celule virus infectate, celule infectate cu
microbi cu habitat intracelular sau celule tumorale pe care sistemul imun nu le mai
recunote ca self. Markerul de suprafaa este tot CD8+.
Limfocitele TDH1 sunt limfocite care au pe suprafaa lor marker CD4+ fiind
responsabile de producerea hipersensibilitii de tip ntrziat (vezi capitolul de
hipersensibilitate). Ele secret dup stimulare antigenic limfokine care activeaz
macrofagele ce adpostesc bacterii cu habitat facultativ sau obligator intracelular.
Limfocitele T cu memorie se formeaz n timpul rspunsului primar, ele avnd
o viaa de aproximativ 40 de ani. Memoria lor imunologic ns se intinde pe o
perioad de 10-15 ani.
Celulele nule reprezint 10% din totalul limfocitelor i sunt reprezentate de
limfocitele K i NK.
Celulele NK (natural killer) recunosc nespecific celula int pe care o distrug
printr-un mecanism de lezare a membranei celulare, asemntor complementului
(vezi rezistena natural).
Celulele K sunt responsabile de imunitatea celular anticorpodependent. Ele
funcioneaz ca celule citotoxice dependente de anticorpi IgG. Aceti anticorpi se
fizeaz prin fragmentul Fab de celula int (tumoral sau virus infectat) iar prin Fc
de receptorul pentru Fc al celulei killer.
n concluzie:
limfocitele B vor duce la sinteza de anticorpi i sunt responsabile de
imunitatea umoral,
limfocitele T citotoxice vor distruge celule gazd care i-au pierdut caracterul
de self, cum sunt celulele virus infectate sau tumorale. Ele rspund de
imunitatea celular,
limfocitele T helper au rol reglator. Stimularea limfocitelor T citotoxice i a
limfocitelor B timodependente nu poate avea loc n absena limfocitelor Th,
limfocitele TDH au rol reglator prin secreia de limfokine. Ele activeaz
macrofagele, care vor distruge la rndul lor bacteriile cu habitat intracelular,
limfocitele T supresoare au rol reglator, limitnd intensitatea rspunsului

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

imun.
2.4. Receptorii pentru antigene
Recunoaterea antigenului este punctul nodal al rspunsului imunitar i se
bazeaz pe complementaritatea steric dintre antigen i moleculele implicate n
recunoaterea sa, respectiv receptorii pentru antigene ai limfocitelor i anticorpii.
2.4.1. Receptorii pentru antigen a limfocitelor
a) Receptorii pentru antigen a limfocitelor B (BCR)
Majoritatea limfocitelor B exprim la suprafaa lor 2 clase de
imunoglobuline:IgM i IgD. Numrul limfocitelor circulante care prezint pe
suprafaa lor IgG, IgA sau IgE este redus, spre deosebire de limfocitele din esutul
limfoid asociat mucoaselor care au pe suprafaa lor mai ales IgA. Pe lng
imunoglobulinele cu rol de receptori, limfocitele B mai posed pe suprafaa lor
MHC de clasa II, cu rol importnt n cooperarea intercelular.
Receptorii pentru antigen ai limfocitelor B, respectiv imunglobulinele de
suprafat, recunosc antigenele n stare nativ, respectiv epitopii structurali sau
epitopii B ai anigenelor. Reamintim c antigenele timodependente sunt
recunoscute de limfocitele B numai n prezena limfocitelor T-helper, pe cnd cele
timoindependente fra intervenia acestora.
b) Receptorii pentru antigen a limfocitelor T
TCR este receptorul pentru antigen al limfocitului T. Este format din dou
lanuri polipeptidice sau .
Majoritatea limfocitelor prezint la suprafa TCR 2 care este format din 2
lanuri de tip i . Ambele lanuri au cte dou domenii extracelulare, o poriune
transmembranar de ancorare i o prelungire intracelular scurt. Fragmentele
extracelulare sunt foarte asemntoare structurii de baz a anticorpilor, domeniul
apropiat de membrana celular fiind constant iar cel deprtat, variabil, responsabil
de legarea specific a antigenului.
O minoritate a limfocitelor T au pe suprafaa lor receptorul pentru antigen TCR
format tot din dou lanuri cu dispoziie asemntoare i Rolul limfocitelor T
purttoare ale acestor receptori nu este nc pe deplin lmurit.
TCR nu recunosc antigenele native, ci doar dup prelucrare macrofagic i n
asociaie cu antigenele de histocompatibilitate de clasa II. Limfocitele T citotoxice
recunosc numai antigenele virale sau tumorale care se afl la suprafaa acestor

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

celule n asociatie cu antigenele CMH de clasa I.

2.4.2. Anticorpii
Anticorpii sunt proteine serice care migreaz n cmpul electric cu
gamaglobulinele, dar prezeni i n alte umori sau secreii, cu o structur capabil
s le asigure legarea ferm i specific de antigen. Ei au fost pui n eviden
pentru prima oar de Tiselius care a reuit separarea electroforetic a proteinelor
plasmatice.
a) Structura general a anticorpilor
Anticorpii sunt structuri moleculare bifuncionale: o parte a moleculei se leag
prin complementaritate de antigen, iar cealalt parte este responsabil de o serie de
efecte biologice secundare.
Unitatea de baz a anticorpilor este format din 2 lanuri identice grele, H
(heavy) cu GM de 50.000 - 70.000 Da i 2 lanuri identice uoare L (light), cu GM
n jur de 25.000 Da, care se asambleaz n form de T sau Y. Lanurile sunt legate
ntre ele de fore necovalente hidrofobe i prin puni disulfurice: o punte ntre
lanurile L i H i cel puin dou ntre lanurile H n funcie de clasa i subclasa de
anticorp. Aceast unitate monomeric are o GM n jur de 150.000 Da.
Lanurile grele prezint o diversitate structural accentuat fiind notate cu
literele greceti gama (), miu (), alfa (), delta () i epsilon (). Lanurile
uoare sunt numai de dou tipuri: kappa () i lambda ().
Imunoglobulinele se clasific n funcie de lanurile pe care le conin n 5
clase: IgG, IgM, IgA, IgD, IgE. De exemplu imunoglobulina G conine 2 lanuri
grele i dou lanuri uoare sau . Aceeai imunoglobulin conine sau lanuri
sau . Imunogobulinele care conin lanuri apar de dou ori mai frecvent
dect cele ce conin lanuri .
Elucidarea relaiei ce exist ntre structura i funciile anticorpilor a nceput
prin digestia proteolitic a acestora. Sub aciunea pepsinei imunoglobulinele se
cliveaz, la nivelul aminoacidului 234 al lanurilor grele, ntr-un fragment F(ab)2
(fragment antigen-binding) i un fragment Fc (fragment cristalizabil), iar sub
aciunea papainei, la nivelul aminoacidului, 224 n dou fragmente Fab i un
fragment Fc.
Fragmentele Fab reprezint capetele NH2 terminale ale moleculei, fiind

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

purttoare, fiecare, a unui situs de combinare cu antigenul.


Paratopul, structura esenial a anticorpului, este situsul de interaciune cu
epitopul, format din regiuni hipervariabile i variabile ale lanurilor H i L. Fiecare
imunoglobulin conine doi paratopi identici ce se afl n regiunea hipervariabil a
lanurilor H i L. Deci, un anticorp este bivalent.
Dac se cerceteaz secvena de aminoacizi a lanurilor grele i a lanurilor
uoare n cadrul unei clase de imunoglobuline, se observ o enorm diversitate a
acesteia la captul NH2- terminal al lanurilor, pe cnd restul domeniilor (unul Cterminal la lanul uor i 2 domenii mijlocii i unul terminal la lanurile grele)
demonstreaz o structur constant. Regiunile NH2 terminale a lanurilor grele H i
a lanurilor uoare se noteaz cu VH, respectiv VL.
Partea constant a lanului uor se numete CL. Partea constant la lanului
greu cuprinde 3 regiuni diferite CH1, CH2, CH3. Aceste regiuni sunt stabilizate
prin puni disulfurice intracatenare i se numesc domenii. De domeniile CH2 se
leag lanuri oligozaharidice.
Cele 2 situsuri de legare cu antigenul sunt situate n domeniile variabile.
Regiunea balama este un segment al lanurilor grele localizat ntre CH1 i CH2 i
ea schimb unghiul dintre Fab i Fc dup legarea anticorpului cu antigenul. Astfel,
Fab este perpendicular pe Fc, imaginea tridimensional a imunoglobulinelor
amintind de litera T.
n momentul combinrii anticorpului cu antigenul, acest unghi se schimb,
molecula lund forma unui Y. Prin aceast modificare se dezvelete situsul de
combinare al Fc cu factorul C1q al complementului i se declaneaz activarea
acestuia pe cale clasic.
Aspectul paratopului depinde de plierea domeniilor variabile, care la rndul ei
este n funcie de secvena de aminoacizi din aceast regiune.
Fragmentul Fc, situat la extremitatea -COOH terminal a moleculei, poart
situsuri citofile (prin care unele imunoglobuline se pot fixa de anumite celule ca,
de pild, neutrofile, macrofage, bazofile), situsuri de fixare a complementului i
markerii izotipici i alotipici al lanurilor H.
Specificitatea anticorpilor. Anticorpii, fiind proteine, sunt la rndul lor
antigenici. Specificitatea imunoglobulinelor este :
izotipic i corespunde structurii diferitelor clase i subclase de lanuri grele i
uoare, prezente la toi indivizii unei specii. La om, de pild, izotipurile sunt
determinate de prezena n molecul a lanurilor uoare lamda sau kappa i a
lanurilor grele alfa 1, alfa 2, gama 1,2,3,4, miu 1,2, delta sau epsilon,

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

alotipic ce rezult din structura constant a imunoglobulinelor a unui grup de


indivizi n cadrul unei specii,
idiotipic ce este proprie fiecrui anticorp n parte i este definit de structura
zonei hipervariabile.
b) Caracterele biologice principale ale imunoglobinelor
Lanurile grele definesc clasa de imunoglobulin i confer acesteia proprieti
caracteristice.
Imunoglobulina G
IgG reprezint 70% - 80% din imunoglobulinele serice, concentraia ei fiind
de 8-16mg/ml. Concentraia normal este atins la vrsta de 5-8 ani. Dimensunea
mic a moleculei (GM 15 KD) face posibil ptrunderea ei i n esuturi. IgG se
mparte n 4 subclase IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4, care difer ntre ele structural
prin secvena aminoacizilor n Fc al lanurilor H i prin numrul i sediul legturilor
disulfurice dintre lanurile H i L i dintre lanurile H. Diferenelor structurale le
corespund proprieti diferite care sunt ilustrate n tabelul xx.
Proprietatea IgG1 i IgG3 de a se lega prin Fab de antigenul bacterian
(opsonizare) i prin Fc de receptorii de pe suprafaa PMN i a macrofagelor
favorizeaz nglobarea bacteriilor de ctre aceste celule, potennd fagocitoza.
n afar de IgG4, toate celelalte subclase de IgG sunt capabile s activeze
complementul pe cale clasic dup unirea cu antigenul specific (de exemplu o
celul bacterian), ceea ce are ca urmare citoliza dac antigenul este situat la
suprafaa unei celule (bacteriene de exemplu). Clasa IgG cuprinde, n afar de
anticorpi opsonizani, i anticorpi neutralizani (antitoxine), precipitani
(precipitine) i aglutinani (aglutinine). IgG trec prin placent de la mam la ft,
asigurnd rezistena antiinfectioas a sugarului n primele luni dup natere.
Timpul de njumtire a IgG seric este de 21 de zile, cu excepia IgG3 care
este metabolizat dup 7 zile.
Imunoglobulina A
IgA reprezint 17% din totalul imunoglobulinelor. Ea apare n ser ca
monomer, cu GM de 160.000 Da i o constant de sedimentare de 7S, ntr-o
concentraie de 200 mg/100ml i este format de plasmocitele din ganglionii
limfatici i splin. Nu este capabil s fixeze complementul, dar reacioneaz cu
antigenele din torentul circulator. Se presupune, de pild, c antigenele din intestin
ce au ptruns prin bariera intestinal i au ajuns n snge sunt fixate de IgA i vor fi
eliminate prin ficat.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

Cea mai mare parte a IgA este prezent extravascular sub form de dimer
- IgA secretor (S-IgA) - n secreiile epiteliilor (lacrimi. saliv, mucus bronic
etc.) i la suprafaa mucoaselor. Cea mai mare parte a S-IgA este produs de
plasmocitele esutului limfatic asociat mucoasei intestinale dar i ale celui asociat
celorlalte mucoase (respiratorii, nazale etc.).
S - IgA este alctuit din 2 molecule de IgA, legate printr-un lan J (join)
glicolipidic i o component secretorie polipeptidic (CS). Componenta secretorie
se adaug dimerului n celula epitelial i faciliteaz transportul IgA prin epitelii i
secreia sa n saliv, lacrimi, lapte i protejeaz S - IgA de aciunea enzimelor
digestive. Ca i IgA seric, S - IgA nu poate fixa (activa) complementul pe cale
clasic ci numai alternativ, deci nu poate participa la opsonizare. Fixeaz ns
bacterii i virusuri prin Fab formnd complexe imune i mpiedic astfel fixarea
acestor ageni infecioi de celulele epiteliale ale mucoaseor. Aceast
neutralizare este cea mai important funcie antiinfecioas a S-IgA pe mucoase.
IgA are dou subclase IgA1 i IgA2. IgA 1 se gsete predominent sub form
monomeric deci n ser, iar IgA2 mai ales sub forma de S-IgA.
Concentraia normal de S-IgA este atins la vrsta de 10-11 ani, ceea ce
explic frecvena infeciilor respiratorii la copii.
La una din 700 de persoane se constat un deficit de S-IgA, Dac acest deficit
nu este compensat de o activitate crescut de IgM sau dac se adaug i un deficit
de IgG, persoanele afectate sunt susceptibile de a face frecvent infecii respiratorii
i intestinale.
Imunoglobulina M
IgM se prezint sub forma unei structuri mari (IgM-macroglobulin)
pentamerice cu o greutate molecular de 900.000 Da i constant de sedimentare
de 19S. Cei 5 monomeri de IgM sunt legai ntre ei printr-un lan J. Datorit
greutii moleculare mari, IgM nu trece prin placent. Reprezint 6-7% din totalul
imunoglobulinelor serice, concentraia fiind de 0,5-2mg/ml. Aceast concentraie
este atins la vrsta de 1 an. Timpul de njumtire a IgM este de 6 zile. Se cunosc
2 subclase de IgM - IgM1 i IgM2, fr a se evidenia ns diferene n activitatea
lor biologic.
n contextul rspunsului imun, IgM este clasa de anticorpi care apare n
rspunsul primar. Prezena anticorpilor IgM fa de un anumit agent infecios
indic o infecie acut, recent.Mare parte din anticorpi naturali, ca de exemplu
isoaglutininele de grup (anti-A, anti B), sunt IgM.
Datorit structurii pentamerice, IgM are 10 situsuri de combinare cu o

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

configuraie care permite legarea preferenial de antigenele corpusculare. Aadar,


este deosebit de eficace n legarea microorganismelor, producnd aglutinarea
acestora. Prin fixarea complementului se realizeaz concomitent opsonizarea
bacteriilor. IgM activeaz complementul pe cale clasic favoriznd deci i
bacterioliza.
Imunoglobulina E
Este o Ig monomer, cu GM 190.000 i costant de sedimentare 9S. Timpul de
njumatire este de 2-4 zile. Nu fixeaz complementul. Se gsete n cantiti
extrem de mici n serul persoanelor sntoase, dar n concentraii crescute la
persoane alergice. IgE sunt anticorpi citofili, care se leag prin Fc de receptorii
specifici de pe suprafaa leucocitelor bazofile i a mastocitelor. n contact cu
alergenul specific, care le-a indus producerea, are loc degranularea acestor
celule cu eliberarea unor mediatori chimici (histamin, serotonin, leucotriene,
prostaglandine), responsabili de manifestrile alergice de tip I anafilactic.
Imunoglobulina D
IgD a fost evideniat ca un anticorp legat de suprafaa membranei celulare a
90% din limfocitele B. n ser se gsesc doar urme. Nu se cunoate exact rolul
acestei Ig, dar se presupune c ar constitui un receptor pentru antigene la suprafaa
limfocitelor B.
c) Formarea domeniilor variabile a imunoglobulinelor
Contactul organismului cu diferite antigene duce la o proliferare i maturare a
unor celule, care au pe suprafaa lor paratopul corespunztor epitopului prezent la
suprafaa antigenului. Se precizeaz c sistemul imun are 1012 limfocite care
cntresc n jur de 1 kg i 1020 de molecule de anticorpi. Dac considerm c
exist 107 paratopi diferii, fiecare paratop va fi reprezentat n medie de 105 de
limfocite i 1013 molecule de anticorpi. n urma imunizrii se vor multiplica numai
acei paratopi care se potrivesc cu epitopul imunizant. Capacitatea de proliferare n
cadrul sistemului imun este att de mare nct, la adult, n fiecare secund se
formeaz 100.000 de noi celule i dispare acelai numr. Natura rezolv n mod
economic varietatea nelimitat de secvene de aminoacizi din domeniile variabile
ale imunoglobuinelor, respectiv ale paratopului, prin repartizarea informaiei
genetice pentru sinteza unui lan pe mai multe segmente de gene ndeprtate i care
exist n mai multe variante.
n limfocitele B mature va exista o gen care rezult din combinarea

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

segmentelor genelor respective prin eliminare celorlalte segmente genice ce nu se


vor mai regsi n gena matur. Exemplificm acest principiu pentru un lan greu
(H). Segmentele de gene pentru partea variabil a lanului H se numesc V
(variable), D (diversity) i J (joining). Segmentul V exist n cteva sute de
variante, segmentul D n jur de 15 iar J n cteva variante. S presupunem c
segmentele de gen V254, D11 i J3 se unesc i formeaz un lan V254-D11-J3
care va codifica partea variabil a IgM.. Reiese clar c n acest fel se pot construi
foarte multe variante de secvene de gene, numrul lor putnd crete dat fiind c
locul de unire a segmentelor VJD poate fi decalat cu cteva baze. Mai exist i alte
posibiliti de variabilitate a catenei finale ca, de pild, mutaia somatic, ce este
mult mai frecvent n domeniul variabil dect n cel constant.
Lanul uor (kappa sau lamda) se sintetizeaz de o manier asemntoare. Dat
fiind c paratopul este format din ambele lanuri, greu i uor, variabilitatea lui este
i mai mare.
d) Formarea diferitelor clase de imunoglobuline
Molecula de imunoglobulin este format i dintr-o parte constant. Genele
pentru prile constante a lanului G sunt ordonate pe cromozom n urmtoarea
ordine: miu, delta, gama, epsilon i alfa. n funcie de segmentul de gen de care se
leag segmentele VDJ se formeaz lanul greu ce caracterizeaz IgM, IgD, IgG,
IgE sau IgA. Prile constante nu modific nimic din specificitatea paratopului, dar
ele stabilesc proprietile funcionale ale anticorpilor corespunztori. Partea
variabil se poate lega n decursul rspunsului imun de gene diferite pentru partea
constant.
n prile constante ale imunoglobulinelor se pot produce variaii genetice
constante, alotipuri, care se motenesc dup legile mendeliene, i care nu modific
specificitatea de legare i nici funciile imunoglobulinei. Variaiile paratopului
definesc idiotipul.
e) Anticorpi monoclonali
Urmaii unui limfocit B vor forma o clon, i atta timp ct nu apare o mutaie
somatic n clona respectiv, toi descendenii clonei vor da natere unui singur tip
de anticorp.
n decursul rspunsului imun normal se activeaz mai multe clone de limfocite
B, care produc anticorpi cu afinitate mai mare sau mai redus pentru antigenul
respectiv, astfel c n ser vom gsi un amestec de de anticorpi n a cror molecul
secvena de aminoacizi va fi diferit. Acest aspect se explic prin faptul c cele mai

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

multe antigene au mai muli epitopi. Astfel, dac dou antigene pot avea pe lng
epitopii specifici i epitopi comuni, vor induce formarea de anticorpi policlonali
care vor reaciona cu ambele antigene prin epitopii comuni (reacie ncruciat).
n mod natural anticorpi monoclonali apar prin malignizarea plasmocitelor (n
mielomul multiplu) care secret un anticorp monoclonal n cantiti mari. Proteina
secretat de plasmocitele bolnavilor cu mielom multiplu (proteina Bence-Jones),
care se elimin prin urin, reprezint de fapt lanuri uoare L monoclonale. Ele au
avut un rol important n descoperirea structurii imunoglobulinelor.
Dificultatea de a obine anticorpi monoclonali in vitro a constat n
imposibilitatea de cultivare a limfocitelor B.
Anticorpii monoclonali s-au obinut n laborator de prin izolarea n cadrul unui
rspuns imun policlonal a unui singur limfocit B i hibridizarea lui cu o celul
tumoral care s-i confere imortalitate. Produsul de fuziune, hibridomul, unete
imortalitatea celulei tumorale cu specificitatea celulei B. Anticorpii monoclonali
sunt reactivi foarte valoroi ntruct recunosc un singur epitop. Ei nu reacioneaz
ncruciat dect n cazuri de excepie cnd structurile sunt extrem de asemantoare.
Anticorpii monoclonali au o larg utilizare att n cercetare, terapie ct i n
practica de rutin a oricrui laborator. Cu ajutorul anticorpilor monoclonali marcai
cu o substan fluorescent (de obicei izotiocianatul de fluorescein) se evideniaz
prin microscopie n UV antigene bacteriene sau virale n produsele patologice sau
biologice recoltate de la bolnavi, fiind astfel posibil un diagnostic rapid i precis n
infecii n care agentul etiologic este greu de cultivat (infecii chlamydiene,
herpetice, sifilis etc.).

3. RSPUNSUL IMUN
3.1. Rspunsul imun umoral
Soarta antigenelor, deci i a microorganismelor care ptrund n organism,
depinde de calea de ptrundere i de penetrarea barierelor externe ale aprrii
antiinfecioase. Dac microorganismul ptrunde direct n snge, va ajunge n splin
unde va avea loc i rspunsul imun. Microorganismele care ptrund n tegument
ajung pe cale limfatic la primul ganglion limfatic, iar cele care au reuit s
traverseze mucoasele (digestiv, respiratorie) vor ajunge n sistemul limfatic ataat
mucoaselor (MALT).

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

Indiferent de calea de ptrundere a antigenelor (cu excepia celor


timoindependente), ele vor fi preluate prin fagocitoz de macrofage. n macrofage,
antigenele vor fi digerate de enzimele lizozomale pn la eliberarea epitopilor
secveniali, care sunt ntotdeauna peptide scurte.
Epitopii secveniali ajung printr-un mecanism nc necunoscut la suprafaa
macrofagului, care l prezint limfocitului Th n asociaie cu complexul major de
histocopatibilitate MHC de clasa II.
n contact cu un limfocit Th a crui receptor este complementar antigenului
prezentat n asociaie cu MHC de clasa II i poart la suprafa antigenul CD4, se
produce un semnal care va stimula secreia de Interleukin-1 (IL-1) de ctre
macrofag. Aceasta va aciona asupra limfocitului T-helper care va secreta IL-2,
care are induce creterea celuelor ce au receptori pentru aceast interleukin,
printre care chiar limfocitul Th (activare autocrin).
Stimularea limfocitului Th este esenial n rspunsul imun, deoarece Th va
stimula n continuare limfocitele B, care vor produce efectorii umorali ai imunitii
(anticorpii) i celulele Tc, efectorii imunitii celulare.
Cum sunt stimulate limfocitele B? n timp ce limfocitul Th este stimulat de
epitopul secvenial, prelucrat i prezentat de macrofage, al unui antigen, un limfocit
B este stimulat la rndul su de epitopul structural, neprelucrat, nativ.
Stimularea de ctre epitopul structural este un prim semnal pentru limfocitul B, dar
insuficient pentru a produce un rspuns n anticorpi. Aici intervine limfocitul Th
care a fost stimulat de epitopul secvenial al aceluiai antigen.
Limfocitul Th va secreta dup activare un factor de cretere i un factor de
difereniere pentru limfocitele B, care se vor transforma n limfoblati, plasmoblati
i n final plasmocii secretori de anticorpi.
Deci, ca un antigen microbian s induc un rspuns n anticorpi, el va trebui s
fie fagocitat pe de o parte de macrofag care i va evidenia epitopul secvenial
(numit carrier n trecut), iar pe de alt parte va fi recunoscut prin epitopul structural
de pe suprafaa lui (hapten) direct de limfocitul B care, sub influena citokinelor
secretate de limfocitului Th, va deveni celul secretoare de anticorpi.
n decursul rspunsului imun o parte din limfocitele Th i B se vor
diferenia n limfocite T, respectiv B de memorie care vor iniia la o stimulare
ulterioar cu acelai antigen un rspuns secundar mai rapid i eficient.
n afar de antigenele timodependente mai exist i antigene timoindependente.
Acestea sunt n general antigene cu epitopi repetitivi (care se repet n mod
regulat de-a lungul moleculei ca, de exemplu, polizaharidul pneumococic), ele
avnd proprietatea de a stimula direct limfocitele B, fr participarea limfocitelor

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

T. Aceste antigene induc un rspuns n anticorpi discret i fr memorie


imunologic.
3.1.1. Rolul anticorpilor n aprarea antiinfecioas
Anticorpii au un rol esenial n aprarea antiinfecioas fa de bacteriile cu
habitat extracelular.
Efectul blocant i neutralizant al anticorpilor. Uneori este suficient doar
prezena anticorpilor pentru a preveni apariia infeciei. De pild, IgA de pe
suprafaa mucoaselor se unete cu unele antigene de suprafa a bacteriilor,
blocnd astfel ataarea de receptorii specifici de pe mucoase.
Fa de bacteriile toxigene, cum sunt baciul difteric, botulinic sau tetanic,
organismul produce anticorpi antitoxici care se leag de toxinele microbiene
mpiedicnd ataarea i, respectiv, ptrunderea lor n celulele int.
Anticorpii pot produce imobilizarea i aglutinarea microorgansimelor. Cei
mai buni anticorpi imobilizani sunt IgM care au 10 situsuri de combinare la care se
adaug favorizarea fagocitozei i activarea complementul.
Opsonizarea. Bacteriile sunt pregtite pentru fagocitoz prin opsonizare cu
opsonine nespecifice (C3b a complementului, proteina C-reactiv, fibronectina) i
anticorpi care sunt opsonine specifice. Bacteriile capsulate, ca de pild
pneumococii, nu sunt accesibili fagocitozei. Dac ns ele sunt opsonizate de
anticorpi IgG anticapsulari, acetia se vor fixa cu fragmentul Fc de fagocit i cu Fab
de bacterie. n acest fel, fagocitoza va fi posibil i eficient.
Liza bacteriilor. Prin unirea IgG sau IgM cu antigenele de suprafa a
bacteriilor are loc activarea complementului pe cale clasic, ceea ce ve determina
fenomenul de bacterioliz.
n orice caz, bacteriile cu habitat extracelular sunt eliminate n final prin
fagocitoz.
n Figura 10.23 prezentm niveluri la care intervin anticorpii ntr-o infecie cu
bacterii cu habitat extracelular.
Anticorpii sunt implicai i n rezistena fa de microorganisme cu habitat
intracelular, i anume n citotoxicitatea mediat celular anticorpodependent.
Astfel, IgG se vor fixa prin fragmentul lor Fab de antigenele virale sau provenite de
la ali ageni cu habitat intracelular (fungi, bacterii) i exprimate la suprafaa
celulelor infectate, iar cu fragmentul Fc de receptorii pentru Fc de pe suprafaa
limfocitelor K (killer). Acestea vor distruge celula infectat prin perforarea
membranei celulare, printr-un mecanism asemntor complementului.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

3.2. Rspunsul imun celular i rolul su n aprarea antiinfecioas


O serie de microorganisme au habitat obligatoriu sau facultativ intracelular.
Astfel, virusurile, unele bacterii (chlamydii i rickettsii), precum i unele
protozoare au un parazitism intracelular obligatoriu, replicarea lor fiind dependent
n totalitate de celula gazd. Alte bacterii, ca de pild bacilul tuberculos, bacilul
leprei, au un habitat facultativ intracelular.
Aceste microorganisme sunt protejate de aciunea anticorpilor i organismul
este nevoit s-i dezvolte alte mecansime de aprare care se bazeaz mai ales pe
imunitatea mediat celular.
Imunitatea mediat celular cuprinde n esen dou procese:
distrugerea de ctre limfocitele T citotoxice CD8+ (ajutate de limfocitele
Th) a celulelor care conin un microorganism n faz replicativ (de
obicei un virus) i
activarea prin IFN i alte citokine a macrofagelor pentru a le face
capabile s distrug microorganismul care se dezvolt chiar n
interiorul lor (bacilul tuberculos, bacilul leprei, toxoplasma, legionella
etc.)
a) n prima situaie rspunsul celular este declanat de limfocitul Th activat de
macrofag. Astfel, un virus este fagocitat de macrofag, care prezint limfocitului Th
epitopul secvenial n asociaie cu MHC de clasa II. Pe de alt parte, virusul
ptrunde i n alte celule dect macrofage.
Antigenele virale modific imunogenicitatea acestor celule, care devin astfel
non-self. Celulele nucleate ale organismului (n afar de celulele prezentatoare de
antigen) au la suprafaa lor MHC de clasa I n asociaie cu care antigenul de
suprafa aprut datorit infeciei virale va fi vzut de limfocitele Tc. Acestea se
vor nmuli sub actiunea IL-2 secretate de ctre limfocitul Th stimulat de
macrofage. Rezultatul va fi c limfocitele Tc activate vor secreta citotoxine letale
pentru celula virus infectat.
Ca i n cazul limfocitelor Th i B, o parte din Tc se vor diferenia n limfocite
Tc de memorie, capabile s iniieze un rspuns celular mai prompt la un al doilea
contact cu acelai antigen.
b) n infeciile cu germeni cu habitat facultativ sau obligatoriu intracelulari
(TBC, lepr etc.), un rol important l au macrofagele i limfocitele Th. Acestea
secret limfokine care activeaz macrofagele i recruteaz i alte celule
participante. mpreun vor inia un rspuns inflamator, denumit de tip ntrziat

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

Acest rspuns inflamator poart denumirea de ntrziat deoarece, spre deosebire


de rspunsul inflamator iniiat de anticorpi, care apare n timpul cel mai scurt
(minute sau ore), el apare dup cel puin 24-48 de ore, sau chiar mai trziu.
O parte din micoorganismele care i desfoar ciclul de via i supravieuiesc
n macrofage mor, iar produsele lor de degradare prelucrate vor ajunge la suprafaa
acestor celule. Macrofagul va prezenta limfocitului Th aceste antigene n asociaie
cu antigenul MHC de clasa II. Limfocitul Th va declana secreia de IFN care va
transforma macrofagul ntr-un macrofag activat sau furios.
Factorii de activare al macrogelor (mai ales IFN) vor activa mecanisme
microbicide puternice care vor reui de regul distrugerea microorganismului aflat
n celul, dar nu ntotdeauna.
Aglomerarea i proliferarea macrofagelor i a limfocitelor vor determina
formarea unui focar inflamator.
Activarea macrofagelor are dou faete: este benefic dac se petrece n limite
fiziologice, dar este nociv atunci cnd depete n intensitate anumite limite
deoarece procesul inflamator produce leziuni ale esuturilor n care se petrece. Ea
st la originea unor inflamaii cronice (tuberculoz, lepr - vezi hipersensibilitatea
de tip IV mediat celular).
3.3. Rspunsul primar i secundar
Procesele imunogenetice descrise mai sus se petrec atunci cnd organismul
vine n contact pentru prima oar cu un antigen timodependent i ele sunt
desemnate ca rspuns imunologic primar. Aa cum s-a vzut, pe lng celulele i
moleculele efectoare iau natere limfocitele cu memorie care sunt limfocite cu via
lung. La o nou ntlnire cu antigenul, receptorii pentru antigen se gsesc n
concentraie mai mare dect la prima ntlnire. Ca urmare probabilitatea ntlnirii
partenerilor de reacie potrivii crete, reacia imunogenetic decurgnd mai rapid.
Rspunsul primar. n urma stimulrii antigenice, rspunsul n anticorpi
parcurge 4 faze:
o perioad de laten, a crei durat depinde de natura antigenului i care
dureaz n general 2 sptmni,
o faz de cretere, n cursul creia apar anticorpii, titrul lor crescnd n
progresie geometric,
o faza n platou, n care anticorpii se menin la un nivel costant pentru
cteva sptmni i,

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

o faz de descretere, n care anticorpii sunt metabolizai i dispar.


Rspunsul secundar se deosebete de cel primar prin:
1. cinetica rspunsului. Faza de laten n rspunsul secundar este mai scurt
(3-5 zile), faza de platou prelungit (luni) i descreterea mai lent (luni,
ani, uneori pe toat viaa).
2. nivelul de anticorpi. Titrul maxim de anticorpi este n general de 10 ori
mai mari dect n rspunsul primar.
3. clasa de anticorpi. Anticorpii din rspunsul primar sunt IgM, iar cei din
rspunsul secundar IgG.
4. afinitatea anticorpilor. n rspunsul secundar, afinitatea anticorpilor fa
de antigen este mai mare dect n rspunsul primar.
Amplitudinea crescut i rapiditatea rspunsului secundar sau a unor rapeluri
ulterioare sunt posibile datorit memoriei imunologice. Limfocitele B de memorie
au pe suprafaa lor receptori pentru antigene cu afinitate mai mare pentru antigen, i
dup contactul cu acesta prolifereaz foarte repede transformndu-se n plasmocite
productoare de IgG specifice. Nu se tie precis dac i receptorii pentru antigen ai
limfocitelor T au afinitate mai mare pentru antigen dect n rspunsul primar, dar sa constatat c rspunsul secundar se produce la o stimulare cu cantitti mai mici de
antigen.
Cunoaterea dinamicii de apariie ai anticorpilor n rspunsul primar i
secundar este important pentru calendarul de vaccinri.
Rspunsul imun la antigene timoindependente difer prin faptul c stimularea
limfocitelor B, cu proliferarea i transformarea lor n plasmocite secretoare de IgM,
are loc n rspunsul primar ntr-un timp mai scurt dect n cel indus de antigene
timodependente fr participarea limfocitelor T. Producia anticorpi este inferioar
celei timodependente.
Rspunsul secundar la antigenele timoindependente este similar celui primar,
cantitatea de anticorpi fiind mic i reprezentat tot de IgM, dovedind lipsa unei
memorii imunologice
3.4. Reglarea rspunsului imun
Rspunsul imun faa de stimularea antigenic este supus unor mecanisme
riguroase de reglare care mpiedic multiplicarea la nesfrit a efectorilor imuni. Se
cunosc 5 mecansime ce stau la baza meninerii homeostaziei imunitare:
1. Durata de via relativ scurt a celulelor efectoare. Plamocitele, de pild, au

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

o durat de viaa de cteva zile.


2. Scderea progresiv a cantitii de antigen pn la dispariia sa. Scopul
nsi al aprrii antiinfecioase este eliminarea agenilor infectioi din
organism. ndeprtarea lor nseamn implicit dispariia stimulrii antigenice
.
3. Legarea anticorpilor de antigene previne recunoaterea n continuare a
acestora de ctre limfocitele B. n consecin, proliferarea lor i
diferenierea spre plasmicute va fi oprit.
4. Limfocitele Ts, care au un rol limitativ asupra rspunsului imunitar,
prolifereaz pe msur ce se nmulesc limfocitele Th. Acest mecanism de
feedback permite autoreglarea activitii a celor dou subpopulaii de
limfocite
5. Un mecanism deosebit de interesant de reglare este cel prin reeaua
idiotipic propus de Niels Jerne. Aceast teorie se bazeaz pe dou
proprietti ale moleculei de anticorpi, i anume de a reaciona cu antigenul
i a fi la rndul ei antigenic.
Fiecare regiune hipervariabl - idiotip - a unui anticorp este el nsui o structur
antigenic. Ca orice antigen, acest idiotip va declana formarea de anticorpi
antiidiotip. Paratopul lui (situsul de legare cu antigenul) va fi identic cu antigenul
care a determinat formarea anticorpului original fiind o imagine intern a
antigenului i se comoport la rndul su ca un antigen, genernd anticorpi antiantiidiotip care sunt identici cu primul anticorp. Acest proces se autorepet. Anticorpii
antiidiotip mpiedic la rndul lor unirea anticorpilor cu antigenul substituindu-se
acestuia.
3.5.Concluzii
Cu toate c am descris separat factorii rezistenei antiinfecioase naturale i
dobndite, ei nu acioneaz nici odat separat, ci se intric n vederea eliminrii
agentului infecios.
Dac urmrim evoluia unui agent infecios n organism el va fi obligat s
treac prin toate mecanismele rezistenei antiinfecioase care se vor desfura n 3
etape.
n prima etap, asupra miroorganismului vor aciona factorii aprrii
nespecifice prin barierele externe ce se opun atarii i ptrunderii. Odat ajuns n

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

esuturile sterile, microorganismul va fi supus aciunii factorilor interni ai


rezistenei naturale, care sunt: complementul, interferonii, citokinele, substane
bacteriolitice, fagocitoza prin PMN i macrofage, celulele NK etc. n anumite
situaii, microorganismul va fi distrus prin activitatea bacteriolitic a
complementului i prin fagocitoz. Dac distrugerea i eliminarea
microorganismului este incomplet, se vor distruge PMN i vor interveni
macrofagele care au rolul de a face curenie pe cmpul de btaie i de a prelucra
antigenul pentru a-l prezenta limfocitelor. Cu aceasta se iniiaz a doua etap a
rspunsului antiinfecios.
Etapa urmtoare const n stimularea sistemului celular imunocompetent care
va produce efectorii imuni (anticorpi i limfocitele sensibilizate) fa de
microorganismul respectiv. Majoritatea antigenelor microbiene elicit rspunsul
imun numai n prezena limfocitelor Th. O mic parte din antigenele microbiene
(polizaharizi capsulari, epitopi repetitivi) sunt timoidenpendente stimulnd direct
limfocitele B fr intervenia limfocitelor Th.
A treia etap const n aciunea concertat, sinergic a celor dou componente
ale aprrii antiinfecioase: nscut i dobndit. Astfel, anticorpii vor activa, n
combinaie cu antigenul, complementul pe cale clasic, mult mai eficient dect pe
cale alternativ i vor neutraliza toxinele bacteriene i unele enzime citolitice
(leucocidine, hemolizine). La aceasta se adaug citotoxicitatea mediat prin
anticorpi a celulelor K i NK.
Pe de alt parte, limfokinele secretate de limfocitele TDTH activeaz
macrofagele prin amplificarea randamentului distrugerii prin fagocitoz a
paraziiilor cu habitat intracelular.
Rezultatul aciunii efectorilor imuni asupra antigenelor nu are ns ntotdeauna
un efect benefic asupra organismului. Uneori, rspunsul imun este neadecvat.
Astfel, n unele situaii sistemul imun nu mai are capacitatea de a discrimina
selful de non-self, ceea ce constituie baza bolilor autoimune. Alteori, n
imunodeficiene, rspunsul este deficitar, lipsa unor efectori imuni producnd
infecii repetate i greu de controlat. n fine, rspunsul imun poate depi n
intensitate rspunsul normal determinnd fenomenele de hipersensibilitate.

4. FENOMENE DE HIPERSENSIBILITATE

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

n evoluia unor infecii, efectorii imunitari pot contribui, alturi de agentul


etiologic, la patogenia bolii prin sensibilizarea la unele antigene microbiene.
Rspunsurile imune care apar ntr-o manier improprie sau exagerat corespund
termenului de hipersensibilitate. Aceste reacii sunt denumite reacii alergice, iar
antigenele implicate, alergeni.
Reaciile de hipersensibilizare apar la indivizi sensibilizai n prealabil printr-un
contact anterior cu antigenul, deci sunt reacii secundare. P.G. Coombs i R.A. Gell
clasific n 1963 reaciile de hipersensibilitate n 4 tipuri, n funcie de viteza de
reacie i natura efectorilor imuni implicai:
tipul I - reacii mediate de anticorpi IgE (reagine),
tipul II - reacii citolotic-citotoxice, mediate de anticorpi formai fa de
antigenele de pe suprafaa celulelor, cu participarea complementului, celulelor
K i macrofagelor,
tipul III - reacii mediate de complexe imune cu participarea complementului,
tipul IV - reacii mediate de limfocitele T sensibilizate.
Dei tratate separat, reaciile de hipersensibilitate apar n realitate rar complet
izolate una de cealalt, deoarece mecanismele lor se intric.
4.1. Reacia de tipul I (de tip imediat sau anafilactic)
Principalele elemente care particip la aceast reacie sunt: anticorpii
citofili IgE, mastocitele, precum i o serie de mediatori foarte activi din punct
de vedere biologic. Toate acestea sunt responsabile de simptomele clinice ale
alergiei, care pot apare n doar cteva minute (reacie imediat).
Alergenele care induc acest tip de hipersensibilitate sunt foate variate ca, de
pild, polenul, sporii de mucegai (Aspergillus), praful de cas, prul animalelor,
unele alimente (ou, lapte, cpuni, ciocolat etc.), seruri terapeutice, medicamente
(penicilina), veninul unor insecte (viespi) etc.
Primul pas n desfurarea reaciei de tip I este reprezentat de contactul
alergenului cu organismul, cea mai frecvent cale de ptrundere a acestor
antigene fiind cea respiratorie. Alergenele se pot afla n forme mai mult sau mai
puin pure (polenul), sau cuplate cu particulele de praf inhalate i depozitate pe
mucoasa respiratorie. Dup depozitarea n epiteliu, sau penetrarea filmului de
mucoas, alergenele sunt preluate de celulele prezentatoare de antigen (CPA).
Acestea prezint alergenul limfocitelor Th. Limfocitele Th activate vor secreta
interleukinele IL4, IL13 i IL5. IL4 i IL13 vor aciona asupra limfocitului B care
sub aciunea acestor interleukine se va transforma n plasmocit care va produce n

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

loc de IgG, IgE. Interleukina 5 va induce eozinofilie. Limfocitele Th activate induc


apoi transformarea limfocitelor B n plasmocite productoare de IgE.
La pacienii atopici, cu mecanismul de control al produciei de IgE
perturbat, este deseori depit producia de anticorpi chiar dup un contact
scurt, cu o doz sczut de alergen. Producia de IgE la locul de ptrundere al
alergenului sensibilizeaz mai nti celula mastocitar. Excesul de IgE ptrunde
apoi n secreiile mucoase i n circulaie i se leag prin fragmnetul Fc de
bazofilele circulante i mastocitele din esuturi.
A doua etap a reaciei de tip I este activarea celulelor mastocitare i este
declanat de o nou ntlnire cu alergenul.
Alergenul se va uni cu IgE fixate pe mastocite i va determina o reacie
ncruciat ntre dou molecule de IgE cu interconexiuni ale receptorilor Fc la
nivelul membranei iritate a celulei mastocitare. Degranularea apare ca o consecin
a influxului de Ca++. Granulele, coninnd mediatori deja sintetizai, migreaz spre
suprafaa celulelor mastocitare, fuzioneaz cu membrana extern i i elibereaz
constituienii (histamina, serotonina, leucotriene i prostaglandine, factori
chemotactici). n urma interaciunii IgE fixate pe mastocit cu alergenul se
elibereaz din mastocit acid arahidonic sub aciunea enzimatic a fosfolipazei A2.
Acidul arahidonic este metabolizat de lipooxigenaz, sau ciclooxigenaz,
producnd noi substane mediatoare. Pe calea lipooxigenazei se produc
leukotriene,iar pe cea a ciclooxigenazei, prostaglandine i tromboxan.
n a treia faz a reciei de tip I, mediatorii produc variate efecte care dau natere
simptomatologiei clinice
La nivelul tractului respirator, histamina eliberat determin contracia
musculaturii netede a bronhiilor (bronhoconstricia) n decurs de cteva minute. n
acelai timp, mediatorii chemotactici eliberai favorizeaz invadarea mucoasei de
ctre granulocitele eozinofile i neutrofile, limfocite i trombocite, n decurs de
cteva ore. Aceste celule inflamatorii elibereaz ele nsele mediatori, unii dintre ei
toxici, de exemplu, aa-numita protein bazic major a eozinofilelor. Aceti
mediatori cauzeaz o reacie ntrziat, la 6-10 ore de la contactul cu alergenul,
tradus prin: bronhoconstricie, secreie de mucus i edem al mucoasei. Reacia
indus de celulele inflamatorii determin o cretere a hiperreactivitii bronice i
formeaz baza alergiei sau inflamaia astmatic a mucoasei respiratorii.
Cnd antigenul sensibilizant (alergenul) este inoculat parenteral n doz
suficient de mare (penicilin, procain, seruri heteroloage etc.) apare o reacie
sistemic manifestat prin urticarie, fenomene asfixice, oc i colaps circulator cu
deznodmnt adesea fatal.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

Cnd alergenul este inoculat n doz foarte mic (nepturi de albin) sau
depus pe o mucoas (polenuri, praf de cas, mucegaiuri, alimente ca: ou, pete,
fragi), expresia clinic a fenomenului este mai mult sau mai puin circumscris la
tegument (urticaria), la mucoasa nazal i conjunctiv (febra de fn), la cile
respiratorii inferioare (astmul bronic). Sensibilizrile spontane fa de antigene
care ptrund n organism pe cale digestiv sau respiratorie se numesc i reacii
atopice.
Evoluia unor infecii se poate nsoi de fenomene anafilactice: viroze ale
copilului (de exemplu, cu virusul sinciial respirator), astmul intrinsec (sensibilizare
la antigene ale bacteriilor care infecteaz tractul respirator inferior), lambliaza,
helmintiaze (ascaridioz, echinococoz etc.).
Depistarea sensibilizrilor anafilactice este obligatorie, mai ales atunci cnd
se administreaz un produs cunoscut pentru reaciile anafilactice pe care le
produce.
Testul intradermic este indicat nainte de administrarea penicilinelor, a
procainei, a serurilor imune heteroloage. La cteva minute de la inocularea
intradermic a unei mici doze de alergen, la persoanele sensibilizate, apare o papul
urticarian nconjurat de o aureol congestiv i nsoit de prurit. Fenomenele
dispar dup aproximativ o or. Riscul ocului anafilactic impune medicului care
face testarea s lucreze cu diluii mari de antigen i s aib la dispoziie o medicaie
corespunztoare i antioc.
4.2. Reaciile de tip II citotoxic-citolitic
Reaciile de tip II se datoreaz anticorpilor Ig G, mai rar IgM, care se
formeaz n organism fa de antigene situate la suprafaa unor celule sau
esuturi. Antigenele pot aparine unor celule strine sau propri dac acestea nu mai
sunt recunoscute ca self sau i-au modificat anigenitatea. Leziunile se produc
prin 2 mecanisme:
legarea anticorpilor de celula int cu activarea pe cale clasic a
complementului i citoliz consecutiv,
citotoxicitatea mediat de anticorpi IgG i limfocitele K.
n reaciile posttransfuzionale, anticorpi de tip IgM reacioneaz cu antigene de
grup ABO ale eritrocitelor, fiind responsabile de aglutinare, activarea
complementului seric i hemoliza intravascular.
Anemia hemolitic a nou-nscutului, datorit incompatibilitii Rh, este
produs de anticorpi materni de tip IgG care recunosc antigene specifice Rh

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

(factorul D) de pe suprafaa eritrocitelor nou-nscutului.


Sindromul Goodpasture poate fi considerat un exemplu tipic de reacie de tip II.
Este produs de anticorpi de tip IgG specifici fa de antigene ale membranei
alveolare pe care organismul nu le recunoate ca self. Aceste antigene determin
creterea titrului anticorpilor din ser, care vor reaciona ncruciat i cu antigene ale
membranei bazale a glomerulului renal, precum i cu cele alveolare activnd
complementului seric. Membranele sunt apoi lezate i ca urmare a activitii
granulocitelor, rezultnd hemoragia i necroza glomerular.
Reacia de tip II poate fi indus i de medicamente, rezultatul fiind o anemie
hemolitic. Medicamentul sau produii de metabolism ai acestuia se fixeaz pe
membrana eritrocitar devenind din hapten, antigen complet. Eritrocitul nu mai
este recunoscut ca self i se vor forma anticorpi antieritrocitari. Acetia se vor uni
cu medicamentul de pe suprafaa eritrocitelor, vor activa complementul rezultatul
fiind liza acestor eritrocite.
Reacia de tip II apare i n unele infecii, ca, de pild, n infeciile streptococice
(cardita reumatismal), n care se sintetizeaz anticorpi fa de unele antigene
streptococice ce au asemnre cu un antigen al fibrei miocardice.
Hipersensibilitatea citotoxic-citolitic se mai ntlnete n infecii cu mycoplasme,
virusuri (hepatit B), protozoare (malarie) etc.
4.3. Reaciile de tip III prin compexe imune
Leziunile produse de reaciile de tip III sunt iniiate de complexe imune
antigen-anticorp care, formate n cantitate mare, sau persistente n circulaie,
activeaz complementul i determin leziuni la locul depunerii lor. La
persoanele sntoase, complexele antigen-anticorp sunt rapid fagocitate de
macrofage dar, n anumite circumstane (de obicei cnd exist un exces de antigen),
ele persist i stau la baza a numeroase afeciuni.
Antigenele care induc aceast reacie sunt foart variate. Dintre speciile
microbiene care pot determina acest tip de hipersensibilitate menionm :
Streptococcus pyogenes, Mycobacterium leprae, Treponema pallidum,
Plasmodium, virusul hepatitei B, virusul Epstein Barr etc.
Anticorpii implicai sunt IgG i IgM, deci activatori de complement.
Complexele antigen-anticorp ptrund prin epiteliul vascular, se depun pe
membrana bazal a vaselor i activeaz complementul. C3a i C5a, care sunt
anafilatoxine, vor crete permeabilitate vascular, iar C5a (factor chemotactic) va
determina afluxul de PMN. Activarea complementului, eliberarea enzimelor

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

lizomale ale PMN vor produce alterarea membranei bazale. Simptomatologia


clinic depinde de sediul reaciei.
Reacia de tip Arthus este o reacie local. Arthus a inoculat n mod repetat
iepuri cu ser de cal. Dup cca 20 de zile, la locul reinoculrii subcutanate a serului
de cal a observat apariia, la interval de 3-8 ore, a unor modificri inflamatorii
(congestie, edem, peteii, infiltrat celular), uneori i necroz, persistente 2-3 zile.
Este vorba de fapt despre o reacie a complexelor imune, declanat dup
inocularea de antigene la nivel tegumentar.
Antigenul inoculat reacioneaz cu anticorpi de tip IgG la nivelul pereilor
vasculari, cu formare de complexe imune. Acestea determin activarea fraciunii
C3a i C5a ale complementului seric, precum i agregarea trombocitar i
eliberarea de enzime vasoactive. Aceste enzime determin creterea permeabilitii
vasculare i edem local. Granulocitele prsesc vasele, fagociteaz complexele
imune i secret enzime lizozomale. Se poate produce, de asemenea, i o
degranulare mastocitar cu apariia reaciilor inflamatorii locale.
O reacie local de tip Arthus este plmnul de fermier datorat inhalrii
prafului provenit dela fn mucegit. Personalul care paricip la fabricarea brnzei
fermentate de mucegaiuri (Penicillium casei) este susceptibili s fac prin acelai
mecansim alveolit alergic extrinsec. Cronicizarea implic i reaciile de tip IV.
Reacii locale de tip III se produc i prin eliberarea persistent local de antigen
de ctre un agent infecios. Astfel, infecia cu o filarie (Wucheriria bancrofti) este
relativ benign, dar parazitul mort care se afl n vasele limfatice iniiaz o reacie
inflamatoare responsabil de obstrucia vaselor limfatice cu edeme limfatice
gigante : elefantiaza.
Chimioterapia antiinfecioas poate determina o eliberare masiv de antigene
microbiene prin omorrea microbilor, ceea ce va determina reacii mediate de
complexe imune grave, ca, de pild, eritemul nodos lepros ce apare la pacienii
bolnavi de lepr tratai cu dapson.
Boala serului este o reacie de tip III generalizat i apare la pacieni crora li
s-au administrat, n scop terapeutic, doze mari de ser imun heterolog (ser
antidifteric sau antitetanic preparat pe cai).
Dup 7-10 zile de la admnistrarea serului apar n circulaie anticorpi fa de
proteinele de cal. Dac proteinele nu au fost nlturate din circulaie pn la apariia
anticorpilor, acetia se vor uni cu ele i complexele imune formate se vor depune pe
pereii vaselor. Prin activarea complementului se vor leza pereii vaselor la care se
adaug leziunile datorate enzimelor lizozomale pe care PMN, frustrate de a nu
putea fagocita complexele depuse pe pereii vaselor, le elibereaz aici.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

n scurt timp pacienii devin febrili, prezint rash urticarian, adenit


generalizat, splenomegalie, tumefieri i dureri articulare, leucocitoz cu neutrofilie
i eozinofilie, scderea complementului seric. Frecvent apare albuminurie, care
traduce leziuni de glomerulonefrit.
Infecii cronice cauzate de streptococi hemolitici, stafilococi, virusuri hepatitice
(stimulare antigenic persistent) pot duce la continua formare de complexe imune
i afectarea consecutiv a organelor vizate. Un exemplu este glomerulonefrita care
apare la la 2-3 sptmni de la debutul unei infeciei cu anumite serotipuri de
Streptococcus pyogenes sau S. zooepidemicus. Mecanismul patogenic este similar
bolii serului.
4.4. Reaciile de tip IV mediate celular
n 1963 Gell i Coombs grupeaz toate formele de hipersensibilitate mediat
celular care apar la 12 ore sau peste 12 ore, n tipul IV de reacii.
Reaciile de hipersensibilitate de tip IV sunt antigen-specifice, dependente
de limfocitele T, fiind rezultatul unei interaciuni exagerate dintre un antigen
i mecanismele imunitii celulare. Mecanismele reaciei de tip IV sunt:
hipersensibilitatea ntrziat i citotoxicitatea mediat celular.
Hipersensibilitatea de tip ntrziat. Limfocitele TDH (CD4+) sunt
responsabile de hipersensibilitatea de tip ntrziat. Dup stimulare antigenic, (prin
microorgansime cu habitat intracelular limfocitele TDH secret limfokine care vor
activa macrofagele i vor atrage i alte celule n focarul inflamator.
Macrofagele activate vor secreta la rndul lor o serie de mediatori biologic
activi, cum sunt unele citokine, radicali liberi ai oxigenului, enzime lizozomale cu
puternic actvitate microbicid.
Toate reaciile descrise anterior se ncadreaz, de fapt, n aprarea
antiinfecioas fa de infecii cronice cu bacterii intracelulare (tuberculoza, lepra,
bruceloza etc.), infecii micotice (histoplasmoza, blastomicoza etc.), infecii virale
(oreillonul, infecia herpetic etc.) i infecii parazitare (leishmanioza etc.).
Cnd aceste mecanisme nu reuesc eliminarea microorganismului, antigenele
persistente ale acestuia vor provoca o reacie de hipersensibilitate cronic local.
Limfocitele T sensiblizate vor eliberarea continuu limfokine care provoac
acumularea n focar i activarea unui mare numr de macrofage neinfectate dintre
care o parte se vor transforma n celule epiteloide iar alt parte vor fuziona formnd
celule gigante. Leziunile tisulare se produc datorit citotoxicitii nediscriminatorie
a macrofagelor activate. Dac stimuarea anigenic continu, evoluia se face spre

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

reacia granulomatoas. Granulomul imun tipic (din tuberculoz) are un centru


format din celule epiteloide, macrofage i celule gigante. Centrul granulomului
poate fi parial necrotic. Miezul central este nconjurat de un inel de limfocite i
fibroblati, iar ca rezultat al sintezei crescute de colagen, granulomul devine fibros.
Manifestrile clinice ale hipersensibiblitii de tip ntrziat sunt reacia la
tuberculin, reacia granulomatoas, dermatita de contact i hipersensibilitatea
Jones-Mote.
Reacia de tip tuberculinic. Robert Koch a descris pentru prima dat acest tip
de reacie la pacieni bolnavi de tuberculoz pulmonar. Dup administrarea
subcutanat de tuberculin (lipoprotein a bacilului Koch), pacienii prezentau o
stare general alterat, febriliti. La locul inoculrii aprea o reacie inflamatorie
nsoit de tumefacie tegumentar. Focarul inflamator este format din limfocite,
monocite i fibre deteriorate de colagen. Vasele sanguine din vecintatea focarului
vor fi nconjurate de limfocite i macrofage. Are loc eliberarea de limfokine de
ctre limfocitele Tdh, care determin atragerea macrofagelor, activarea i reinerea
lor la nivelul focarului inflamator. Edemul i eritemul consecutiv ating maximum
de intensitate la 2-3 zile. n caz de reinfecie, sau atunci cnd macrofagele sunt
incapabile s distrug antigenul, poate apare o transformare gradual a reaciei
tuberculinice ntr-o reacie granulomatoas.
Reacia de hipersensibilitate granulomatoas. Este forma cu cea mai
important semnificaie clinic, dat fiind faptul c exist un numr mare de
afeciuni caracterizate prin perturbri ale imunitii mediate de ctre limfocitele T,
ceea ce se traduce prin formarea de granuloame. Microorganismele persistente (n
tuberculoz, lepr), care nu pot fi digerate sau eliminate de ctre macrofage duc la
formarea granuloamelor.
Alergia de contact (eczema de contact). Fenomenul a fost descris att la om
ct i la animale, apariia eczemei fiind determinat de contactul direct al
antigenului cu tegumentele, dnd o reacie care prezint un maximum de intensitate
la 2-3 zile. Cele mai comune antigene cauzatoare ale eczemelor de contact sunt
haptene de tipul nichelului, cauciucului etc. Moleculele haptenice mici sunt
capabile s penetreze tegumentele, fixndu-se la nivelul proteinelor normale ale
organismului. Complexele formate sunt antigenice i vor fi preluate de celulele
Langerhans (care funcioneaz ca fagocite) i prezentate limfocitelor T.
Celulele Langerhans reprezint de fapt doar o mic parte a celulelor
epidermice, fiind dispuse sub forma unor reele tegumentare continue. Ele poart
MHC de clasa II i transport antigenele de la nivel tegumentar, pe cale circulatorie
la ganglionii limfatici regionali. Complexul format de hapten i MHC clasa II este

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

recunoscut de limfocitele Tdh. Limfokinele eliberate determin apariia infiltratului


celular mononuclear dup maximum 15 ore. Infiltraia este nsoit de edem
epidermic cu formare de mici vezicule. Uneori se pot observa i efecte la distan,
dar extinderea inflamaiei eczematoase este de regul limitat la aria tegumentar
expus contactului cu haptena.
Reacia de hipersensibilitate Jones -Mote. Este o reacie clinic rar,
caracterizat prin infiltraii epidermice cu granulocite bazofile. Reacia este indus
de antigene solubile, care determin la locul de inoculare o inflamaie a
tegumentelor, care poate persista o durat variabil de timp, uneori chiar peste o
sptmn.
Testarea reactivitii mediat celular. Numrul n cretere al persoanelor cu
deficiene ale imunitii mediat celular, unele congenitale, altele dobndite, sau
induse iatrogen (prin medicaie antitumoral, imunosupresiv), explic interesul
pentru testarea acestui tip de reactivitate.
Intradermoreacia este cea mai simpl posiblitate de a depista
hipersensibilitatea ntrziat. Majoritatea persoanelor normale rspund cu reacii de
tip ntrziat la inocularea intradermic a antigenelor de candida, tuberculin etc.
Rspunsul negativ la inocularea acestor antigene indic o deficien a reactivitii
mediat celular. O reacie exagerat semnific o hipersensibilizare la antigenul
utilizat.Cea mai utilizat reacie este reacia Mantoux de testare a reactivitii la
tuberculin. Se efectueaz n coli pentru a depista copiii care nu sunt sensibilizai
la bacilul tuberculos pentru a fi vaccinai, pe cei imunizai i pe cei
hipersensibilizai pentru a fi investigai dac nu cumva au dezvoltat o infecie
tuberculoas.
Hipersensibilitatea ntrziat mediat de limfocitele Tc- citotoxice.
Limfocitele Tc (CD8) sunt ele nsi citotoxice dup stimulare antigenic i
interaciunea cu Th (CD4)
Aceste celule au efect citotoxic direct asupra celulelor int prin limfokinele pe
care le secret. Limfocitele Tc sunt stimulate de antigene prezente pe suprafaa
celulelor pe care organismul nu le recunoate ca self, cum sunt celulele virus
infectate, celule tumorale sau esuturile transplantate.
Dintre limfokinele secretate de T citotoxice, cea mai important este perforina
care se aseamn cu fraciunea C9 a complementului. Ca i aceasta, se inser pe
membrana celulei int, polimerizeaz i i formeaz canale transmembranare ce
permit influxul de sodiu i deci liza celulei. Limfocitele Tc sunt protejate de
activitatea perforinei printr-o substan numi protectin. Limfocitele Tc joac rol
esenial n respingerea grefelor de esuturi i organe.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

Omul a fost expus ntotdeauna contaminrii cu microorgansime i ca urmare a dezvoltat de-a lungul
evoluiei sale mecansime de aprare antiinfecioas care s limiteze numrul microbilor i s
favorizeze eliminarea lor din organism. La rndul lor, unele microorganisme au elaborat diverse strategii
prin care dep esc mecanismele de aprare ale gazdei, fiind capabile s produc infecii.
Patogenitatea este un proces complex i multifactorial, care cuprinde totalitatea mecanismelor
biochimice prin care microorganismele produc infecii. Ea este dependent att de microorganism ct i
de gazda n care acesta ptrunde. n timp ce unele microorganisme (patogene) produc n mod obinuit
infecii la indivizii neimunizai dar cu rezistena natural intact, altele (oportuniste) produc infecii
doar la indivizi cu barierele aprrii naturale compromise.
Virulena este gradul de patogenitate a unei tulpini n cadrul speciei. Spre deosebire de
patogenitate, care este un caracter de specie, virulena este un caracter de tulpin. De exemplu, n
cadrul speciei Corynebacterium diphteriae exist specii toxigene virulente i netoxigene, deci
nepatogene. Chiar i ntre tulpinile toxigene exist o diferen n ceea ce privete cantitatea de toxin
secretat.
S- a observat c tulpinile de bacil Koch izolate de la pacieni din India sunt mai virulente pentru
cobai dect cele izolate de la pacienii din Anglia. De asemenea, patogenitatea tulpinilor de pneumococ
pentru oricelul alb variaz n funcie de cantitatea materialului capsular. Exemplele sunt nenumrate.
Virulena unei tulpini microbiene se apreciaz prin comparaie cu o tulpin standard a crei
virulen este cunoscut i se exprim prin DLM (doza letal minim) sau DL50 (doz letal medie).
Doza letal minim este numrul total de germeni necesari sau cantitatea de toxin necesar pentru a
omor toate animalele dintr-un lot experimental, iar DL50 numrul de germeni sau cantitatea de toxin
necesar pentru a omor 50% dintr-un lot de animale experimentale.
Pentru a produce o infecie, microorgansimele trebuie s parcurg, n general, dar nu n mod
obligatoriu, urmtoarele etape:
ataarea i ptrunderea n organismul gazd;
invadarea local sau general a organismului;
multiplicarea n organismul gazd i secreia unor factori de patogenitate.
Pentru unele microorgansime, ca, de pild, Vibrio cholerae, Bordetella pertussis (agentul etiologic al
tusei convulsive), ataarea de mucoasa digestiv, respectiv, respiratorie reprezint destinaia final. De
aici ele vor aciona asupra celulelor epiteliale sau vor secreta toxine cu aciune nociv asupra celulelor
nvecinate sau situate la distan.
Dac am mpri bacteriile dup capacitatea de invazie a organismului, la un capt s-ar afla
bacteriile toxigene, care se multiplic discret la poarta de intrare, iar toxina, secretat i apoi vehiculat
de snge n organsim, este responsabil de apariia bolii. Este cazul bacilului difteric i bacilului tetanic
care produc infecia prin multiplicarea lor la poarta de intrare fr a invada organismul. Mai mult, bacilul
botulinic, care i secret toxina numai n condiii de anaerobioz, la 30C (n conservele alimentare),
nici nu ptrunde n organism, boala fiind o intoxicaie ce se produce prin consumul alimentelor
conservate.
La cellalt capt se afl bacteriile invazive pentru care ataarea constituie un prim pas n
penetrarea mai adnc a esuturilor sterile. Ajunse aici, se vor multiplica, vor secreta diveri factori de
patogenitate, rezultatul fiind infecia. Astfel de bacterii sunt, de pild, bacilul crbunos care produce
ntotdeauna o infecie generalizat, cocobacilul ciumei, pneumococul etc.
La aceste dou categorii se adaug bacteriile sensibilizante, care prin infecie sensibilizeaz
organismul. Acesta va rspunde prin reacii imunopatologice ce i sunt nocive i genereaz leziuni. Cel
mai bun exemplu n acest sens este bacilul tuberculos.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


O bacterie poate fi n acelai timp invaziv, toxigen i sensibilizant, ca, de exemplu,
Streptococcus pyogenes , dotat cu enzime invazive, cu capacitatea de a secreta eritrotoxina (responsabil
de apariia scarlatinei) i de a produce prin mecanism alergic cardita reumatismal, reumatismul
poliarticular acut, glomerulonefrita acut etc.

1. FACTORI DE PTRUNDERE I ADEREN


Organismul uman are multiple posibiliti prin care se opune ptrunderii agenilor infectioi.
Totui, o serie de microorganisme reuesc s evite aceste bariere sau profit de situaii deosebite care
le permit ptrunderea n organism.
Astfel, o leziune traumatic care ntrerupe integritatea pielii, principala barier extern
antiinfecioas, creeaz condiii de ptrundere pentru germeni care se gsesc n mod normal pe
tegumente (S. aureus, Pseudomonas aeruginosa).
Unele microorganisme ptrund prin nepturile unor insecte (Plasmodium vivax, Borrelia
burgerdorfi, Yersinia pestis) sau prin muc tura unui animal (virusul rabic), iar altele sunt introduse n
organism n timpul unor acte medicale, cum sunt injeciile, transfuziile (virusurile hepatitice, virusul SIDA
etc.), operaii pe cordul deschis (S.epidermidis) etc.
Leptospirele, care sunt bacterii spiralate, pot ptrunde chiar i prin pielea intact datorit unor
micri de nurubare.
Alte ci de ptrundere pentru agenii infectioi sunt calea digestiv, respiratorie, urogenital i
conjunctival. Ele sunt prevzute cu diverse mecanisme de clearance a particulelor strine (lacrimi,
mucus, micrile cililor vibratili etc.) care se opun aderenei microbilor. Microorganismele care reuesc
s ptrund pe aceste ci dispun de mecanisme speciale de aderen , ce dep esc mecanismele
rezistenei naturale.
Prima relaie care se stabilete ntre microorganismul infectant i gazda sa este ataarea
microorganismului de suprafaa celulelor.
Aderena microbilor de organismul gazd presupune prezena unei sau mai multor adezine
microbiene prezente pe peretele bacterian i un receptor pe celula eucariot. Adezinele bacteriene sunt
fimbriile i adezinele nefimbiale.

1.1. Fimbriile
Fimbriile sunt oligomeri proteici care apar ca apendici filamentoi la suprafaa celulei bacteriene.
Ele sunt alctuite din subuniti proteice cu masa molecular de 17.000 Da i dintr-o component
proteic minor. Sinteza fimbriilor este influenat de condiiile de mediu, mai ales de temperatur i
de factori ce influeneaz rata de dezvoltare a culturii microbiene. Subunitile proteice ale fimbriilor pot
fi supuse unei variaii antigenice care scap bacteria de rspunsul imun al gazdei.
fimbriile de tip 1, sau pilii comuni, sunt prezente la multe specii de Enterobacteriaceae. Ele se
leag de glicoconjugaii din membrana citoplasmatic a celulelor gazd ce conin manoz.
fimbriile P sunt prezente pe tulpinile de Escherichia coli pielonefritogene. Receptorul pentru aceste
fimbrii sunt glicolipidele ce conin dou molecule alturate de galactoz prezente n membrana
celulelor epiteliului urinar.
fimbriile S s-au evideniat la tulpinile de E.coli implicate n meningite i se ataeaz de
glicoconjugaii ce conin acid sialic.
fimbriile K88 i K89 se gsesc la tulpinile de E.coli enterotoxigene ce produc diaree. Receptorii
celulelor sensibile conin acid sialic i lactoz.
Aceeai tulpin de Escherichia coli poate conine mai multe tipuri de fimbrii codificate de anumite

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


zone cromozomiale sau plasmidice. Aceast diversitate genetic permite adaptarea tulpinii la condiii
diferite oferite de organismul gazd.
fimbriile ce conin N-metilfenilalanin au fost evideniate la o serie de genuri de bacterii gramnegative, cum sunt Pseudomonas (bacilul piocianic), Neisseria (gonococ i meningococ), Bacteroides,
Vibro etc.

1.2. Adezine nefimbriale


La unele microorganisme s-au pus n eviden componente nefimbriale care asigur funcia de
adezine. Astfel, Salmonella typhimurium i Bordetella pertussis au la suprafaa lor o hemaglutinin care
le asigur ataarea de celulele int.
Capsula unor microbi faciliteaz uneori ataarea bacteriilor de celulele gazd pe lng faptul c
este un factor de inhibiie a nglobrii microbilor de ctre fagocite.
Pe de alt parte, unele substane din organism pot facilita la rndul lor aderena bacteriilor. Astfel,
fibronectina, o glicoprotein plasmatic ce se gse te i n spaiul extracelular, are proprietatea de a
adera la suprafeele mucoase. Unele bacterii care ptrund n organism ader la rndul lor de
fibronectin i prin intermediul ei de suprafaa celulelor epiteliale. Astfel de microorganisme sunt
Streptococcus pyogenes (streptococul beta-hemlolitic de grup A), Staphylococcus aureus, Treponema
pallidum, situsul lor de legare fiind ns diferit.

2. FACTORI DE INVAZIE MICROBIAN


Diseminarea bacteriilor n organsim se poate face pe mai multe ci:
din aproape n aproape, prin intermediul unor exoenzime i a unor elemente structurale ale
bacteriilor;
prin endocitoz i translocare;
pe cale sanghin sau/i limfatic.

2.1. Exoenzime
Bacteriile secret numerose exoenzime dintre care o parte, agresinele, faciliteaz invazia n
esuturi. Astfel:
hialuronidaza, sau factorul de difuziune este o enzim ce hidrolizeaz acidul hialuronic din
substana fundamental a esutului conjunctiv permind ptrunderea prin esut a unor
bacterii ca, de pild: Streptococcus pyogenes , S.aureus i Clostridium welchii;
coagulaza, enzim asemn toare trombinei este produs de toate tulpinile de S.aureus. Ea
protejeaz stafilococii, pe de o parte prin formarea unor bariere de fibrin n jurul stafilococilor i
a leziunilor produse ce acetia iar, pe de alt parte prin inactivarea unor substane bactericide
prezente n serul sanguin;
fibrinolizina secretat, de exemplu, de Streptococcus pyogenes i S.aureus favorizeaz
difuzarea infeciei prin lizarea fibrinei ce se formeaz n jurul leziunilor produse de bacteriile
respective;
enzimele hidrolitice (lipaze, proteaze, nucleaze) sunt secretate de toate speciile bacteriene
indiferent de patogenitatea lor. Nu toate sunt implicate n patogenitate, dar unele dintre ele joac
un rol n virulen ca, de pild, colagenaza produs de Cl.welchii, care este implicat n
patogeneza gangrenei gazoase, neuraminidaza prezent la multe bacterii i virusuri. Aceasta din
urm hidrolizeaz mucoproteinele de pe suprafaa celulelor, expunndu-le atacului;

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


enzimele citolitice cum sunt hemolizinele i leucocidinele. Astfel, de pild, Streptococcus
pyogenes secret streptolizina O cu aciune litic asupra hematiilor ce provin de la diverse
specii animale.
Invazivitatea bacteriilor nu este un proces pe deplin lmurit. Pe lng exoenzimele amintite, un rol
important l au unele componentele de nveli ale bacteriilor ca, de pild, capsula (Streptococcus
pneumoniae, Bacillus anthracis), unele proteine de suprafa (proteina M a streptococului betahemolitic
de grup A) etc. Aceste componente protejeaz bacteriile de nglobare de ctre fagocite.

2.2. Endocitoza i translocarea


Unele bacterii au un habitat extracelular fiind astfel mai accesibile mecanismelor de aprare
antiinfecioas a organismului pe cnd altele se nmulesc n interiorul celulelelor avnd deci un
habitat intracelular. Dintre acestea o parte au un habitat facultativ intracelular (bacilul Koch, Brucella
etc.) iar altele un habitat obligatoriu intracelular (Chlamydia trachmomatis).
Habitatul intracelular plaseaz bacteriile ntr-un mediu bogat n substane nutritive, le scutete de
competiia cu alte microorgansime i n acelai timp le protejeaz de rspunsul imun. Cele mai
invazive bacterii sunt cele cu habitat intracelular deoarece supravieuirea lor n diverse celule i mai ales
n fagocite favorizeaz diseminarea lor n organism. Astfel odat ptrunse n celule fagocitare, bacteriile
ajung prin intermediul acestora la ganglionii limfatici iar apoi n circulaia general. La adpostul
fagocitelor, unii germeni pot trece bariera hematoencefalic.
Ptrunderea bacteriilor n celula gazd se face prin endocitoz . O serie de bacterii ptrund n
celule doar temporar, pentru a fi apoi ejectate. Acest proces se numete translocare.
Microorgansimele cel mai bine studiate ce invadeaz celulele organismului gazd prin translocare
sunt cele din genul Salmonella, Shigella, Yersinia, Escherichia coli i Bordetella.
Shigella ptrunde n organism pe cale fecal-oral i invadeaz celulele epiteliale ale mucoasei
colice producnd inflamaie i leziuni tisulare.
Invazia acestor celule presupune participarea microfilamentelor din citoplasma celulei gazd i a
metabolismului bacterian. Shigella este internalizat n cadrul unei incluzii formate din membrana
celular i care este lizat imediat dup endocitarea ei de ctre celula gazd. Bacteriile sunt eliberate
n citoplasm din aceste incluzii sub aciunea unei enzime litice care se aseaman cu hemolizinele.
Dup ce shigelele se gsesc libere n citoplasm, ele blocheaz desf urarea metabolismului celular
i se multiplic rapid. Urmeaz distrugerea celulei gazd i infectarea celulelor invecinate.
Genele ce codific proprietatea de a invada celulele (genele ipa: invasion plasmid genes) sunt
situate pe un plasmid de virulen.
Salmonelele sunt translocate de celulele epiteliale ale mucoasei intestinale spre straturile mai
profunde. Ele sunt endocitate tot sub forma unor vacuole, care nu sunt lizate, ci rmn intacte n interiorul
celulelor. Vacuolele vor fi ejectate la polul bazal al epiteliului intestinal. Cel mai frecvent sunt invadate
celulele epiteliului intestinal ale ileonului terminal i celuele M ale plcilor lui Peyer. Salmonelele au i ele
plasmide de virulen care codific supravieuirea n celula gazd, dar nu i ptrunderea.

3. TOXINE BACTERIENE
Toxinele bacteriene sunt substane solubile cu efect toxic asupra organismului. Ele se mpart n
exotoxine, pe care bacteriile le secret n mediul nconjurtor ca un produs al metabolismului propriu, i
endotoxine, care fac parte din structura peretelui celular la bacteriiile gram-negative i sunt eliberate n
mediu numai dup moartea bacteriei.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


3.1. Exotoxine
Exotoxinele bacteriene sunt proteine biologic active cu o toxicitate de regul foarte ridicat. Unele
dintre ele sunt cele mai puternice otrvuri cunoscute.
Exotoxinele sunt puternic imunogene i se transform prin nvechire i sub aciunea formolului n
derivai imunogeni, dar netoxici, numite anatoxine. Fiind netoxice, dar imunogene, anatoxinele constituie
baza vaccinrii mpotriva bolilor produse de bacterii toxigene (tetanos, difterie).
Unele bacterii, ca, de pild, baciul difteric, tetanic, botulinic, holeric, au ca singur factor de
patogenitate toxigeneza, iar tabloul clinic este caracteristic toxinei respective.
Exotoxinele bacteriene sunt formate din dou domenii funcionale polipeptidice legate prin puni
disulfurice, fragmentul A i B. Fragmentul B nu este toxic dar asigur ataarea toxinei de receptorii
specifici de pe membrana citoplasmatic a celulei int facilitnd ptrunderea n celul a fragmentului A
care este toxic. Dup aciunea lor, exotoxinele se mpart n:
toxine care blocheaz sinteza proteinelor celulare. Aici se ncadreaz toxina difteric,
rspunztoare n totalitate de simptomatologia din difterie. O singur molecul de toxin difteric este
suficient pentru a omor celula n care a ptruns;
neurotoxine. Din aceast categorie fac parte cele mai puternice exotoxine, exotoxina tetanic i
exotoxina botulinic. Exotoxina tetanic provoac paralizia spastic a musculaturii striate prin inhibarea
eliberrii inhibitorilor sinaptici ai transmiterii nervoase. Moartea se produce prin paralizia muchilor
respiratori. Toxina botulinic, pe de alt parte, produce paralizia flasc a musculaturii netede, moartea
survenind tot prin paralizia muchilor respiratori;
toxine ce modific metabolismul celulei. Aceste toxine nu duc la moartea celulei, ci la modificarea
unei funcii ale acesteia. Le amintim pe cele care cresc nivelul de AMP ciclic: toxina holeric, toxina
termolabil a E.coli, toxina produs de Bordetella pertussis etc.

3.2. Endotoxine
Endotoxina este lipopolizahardul (LPZ) din membrana extern a peretelui celular al bacteriilor gramnegative i joac un rol important n patogenia infeciilor produse de aceste microorgansime. Ea este
cartea de vizit a bacteriilor gram-negative.
Structura endotoxinei. LPZ sau endotoxina se compune din 3 uniti: un glicofosfolipid ce se
numete lipidul A, o parte numit core format din zaharuri, etanolamin i acid fosforic i antigenul O ,
un lan lung, de zaharide, mai puin obinuite, specific de specie. Partea activ este lipidul A, celelalte
avnd rol de carrier. Lipidul A, singur, este inert fiind insolubil n ap, dar devine activ n combinaie cu
celelalte componente ale exotoxinei. Efectele endototoxinei nu sunt specifice speciei, ci sunt identice
indiferent de la ce bacterii gram negative provine.
Efectele endotoxinei. Ea se elibereaz numai dup distrugerea bacteriilor. n cantiti mici
produce reacii de alarm benefice organismului, cum sunt: febra, activarea complementului pe cale
alternativ, activarea macrofagelor i stimularea limfocitelor B. n cantiti mari, ns, produce ocul
endotoxic ce poate evolua fatal.
Reaciile de alarm
febra. Endotoxina acioneaz ca un pirogen atunci cnd n esuturi apare un numr suficient de
mare de bacterii gram-negative care s le permit contactul cu circulaia sanguin. 100 ng de
endotoxin injectate iv. induc febra, ceea ce corespunde unui numr de aproximativ 10 milioane
de bacterii. Endotoxina determin reacia febril prin aciunea ei asupra macrofagelor care vor
secreta pirogeni endogeni (interleukina I, Tumor Necrosis Factor);
activarea complementului. Endotoxina activeaz direct complementul pe cale alternativ, ceea

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


ce favorizeaz liza bacteriilor i chemotaxia fagocitelor n focarul infecios. Astfel, se vor
acumula PMN sub aciunea C5a i vor fagocita bacteriile opsonizate de C3b. Eliberarea
anafilatoxinelor n cantiti fiziologice (C3a i C5a) duce la creterea permeabilitii capilare
i degranularea mastocitelor. Se produce astfel rspunsul inflamator;
activarea macrofagelor. Sub aciunea endotoxinei, macrofagele vor secreta enzime lizozomale n
cantiti crescute, intensificndu-i fagocitoza. S- a constatat, de asemenea, c macrofagele,
activate de endotoxin, sunt capabile s distrug unele celule tumorale. Acest aspect, legat de
tratamentul anticanceros, este foarte studiat n prezent;
stimularea limfocitelor B . Interleukina I secretat de macrofagele activate de endotoxin induce
proliferarea limfocitelor B. Din acest considerent, endotoxina este considerat un
imunomodelator.
ocul endotoxic.Reaciile descrise anterior fac parte din rezistena antiinfecioas. n situaia
cnd dep esc anumite limite, ele devin foarte nocive organismului. Acest aspect se ntlnete uneori n
septicemiile cu bacili gram-negativi, cnd n organism se elibereaz cantiti mari de endotoxin i se
produce ocul endotoxic. Acesta se caracterizeaz prin hipotensiune, coagulare intravascular
diseminat, evoluia fiind grav. ocul endotoxic poate aprea i n cazul administrrii unor perfuzii n
care endotoxina provine de la bacili gram negativi omori prin sterilizare. Deci, perfuziile trebuie s fie
lipsite total de germeni pentru a exclude posibilitatea existenei endotoxinei.

4. MECANISME DE ELUDARE A REZISTEN EI


ANTIINFEC IOASE
Se apreciaz c fiecare dintre noi face n timpul vieii cel puin 150 de infecii, mai mult sau mai
puin evidente clinic. Producerea lor dovedete c imuntatea antiinfecioas a organismului nu
constituie o barier impermeabil pentru microorganisme, care sunt capabile s dezvolte diferite
mecanisme prin care s ocoleasc aceast aprare.
Microorganismele patogene nu sunt accidente ale evoluiei, ci rezultatul adaptrii lor la condiiile
de via pe care le ofer organismul pe care l paraziteaz. Apariia unor infecii pn nu de mult
necunoscute, ca, de pild, boala legionarilor, SIDA, sindromul ocului toxic, diareea hemoragic
produs de virusul Ebola etc., dovedesc adaptabilitatea deosebit a microorganismelor i capacitatea lor
de a exploata orice bre n rezistena antiinfecioas a organismului.
Aceast adaptabilitate se opune aprrii antiinfecioase naturale reprezentate n principal de
complement i fagocitoz i aprrii dobndite care este imunitatea umoral i celular.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Procesul infecios este rezultatul interaciunii a dou componente: agentul infecios
infectant cu factorii si de patogenitate i organismul cu mijloacele sale de aprare. Se
poate afirma c fiecare infecie este o ntrecere ntre viteza de multiplicare a
microorganismelor i cea de mobilizare a mecanismelor de aprare antiinfecioas la
care se adaug influena factorilor de mediu.
1. Patogenia infeciilor
n orice infecie au loc urmtoarele evenimente:

contaminarea (ntlnirea cu agentul infecios),

ptrunderea i multiplicarea n organismul gazd prin eludarea rezistenei


antiinfecioase,

producerea injuriilor morfologice i funcionale, care se datoreaz n parte aciunii


directe a agentului infecios i n mod paradoxal, cel mai frecvent, reaciilor de aprare
ale organismului,

deznodmntul infeciei, care poate fi vindecarea cu sau fr sechele, exitusul


sau coexistena pe timp ndelungat a celor doi parteneri ai infeciei: agentul infecios i
organismul.
n majoritatea infeciilor, evenimentele descrise mai sus se petrec consecutiv, ntr-o
perioad limitat de timp. n infeciile produse de germenii condiionat i accidental
patogeni, ce provin din flora normal a organismului, contaminarea, ptrunderea i chiar
i colonizarea (multiplicarea la locul de intrare) se petrec cu mult timp nainte ca infecia
s se declaneze. Durata intervalului pn la producerea acesteia depinde n mare
msur de statusul imunitar ale gazdei care poate permite sau nu producerea unei
infecii cu aceti germeni.
Aceste etape sunt nsoite de mecanismele de aprare antiinfecioas ale gazdei, ceea
ce deosebete agenii infecioi fiind maniera n care sunt capabili s eludeze aceste
mecanisme.
1.1. Contaminarea
Prima ntlnire a organismului cu microbii se produce n momentul naterii, ftul ducnd
o via intrauterin steril din punct de vedere microbiologic. El este aprat de
membranele fetale iar placenta permite ptrunderea unui numr foarte redus de
microorgansime din circulaia mamei, cum sunt, de pild, unele virusuri (rubeolic,
rujeolos, citomegalic, HIV etc.), bacterii (Treponema pallidum) i unii parazii
(Toxoplasma gondi).
n timpul naterii nou-nscutul vine n contact cu microorganismele prezente n canalul
vaginal i pe pielea mamei. El nu este expus acestei contaminri total neprotejat ci
motenete de la mam, pe cale sanguin, un repertoriu bogat de anticorpi la care se
adaug cei din colostrul i laptele matern. Acetia i asigur o protecie relativ fa de
infecii pn cnd va ncepe s-i dezvolte propriile mecansime de aprare
antiinfecioas.
Din microorgansimele cu care organismul vine n contact pe parcursul existenei sale, o
parte vor dispare de pe suprafaa organismului, o parte vor coloniza pielea i mucoasele

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


i doar o mic parte vor produce infecii propriu-zise.
Contaminarea poate fi endo i exogen.
Infeciile exogene sunt cele care rezult n urma contactului cu agentul infecios din
mediul nconjurtor. Agenii infecioi pot contamina organismul n cele mai variate
mprejurri: pe cale alimentar, respiratorie, contact sexual, manevre medicale,
promiscuitatea cu animalele, mucturile de insecte etc. Modul de contaminare
sugereaz aproape ntotdeauna i posibilitile de prevenire nespecifice ale infeciei. n
infeciile exogene produse de germenii nalt patogeni, timpul care trece de la
contaminare pn la apariia simptomatologiei clinice este n general bine definit
(perioada de incubaie).
Infeciile endogene rezult n urma contaminrii cu germeni de pe suprafaa
mucoaselor i a pielii. Aceste microorgansime produc infecii dac traverseaz barierele
anatomice i ptrund n esuturi. Astfel, bacilul coli face parte din flora normal a
intestinului, dar dac ptrunde n cile urinare, va determina apariia unei infecii la
acest nivel.
Pe de alt parte, ageni infecioi din flora normal a organismului, care nu produc
infecii la individul sntos, le vor produce la indivizi cu deficiene imune (supui unui
tratament imunosupresor, cu deficiene imune genetice, cu deficiene imune dobndite).
n ambele situaii contaminarea are loc cu mult nainte de producerea infeciei propriuzise.
1.2. Ptrunderea
Microorganismele ptrund n organismul gazd:

n zone anatomice care sunt n relaie direct cu exteriorul, fr


traversarea barierelor epiteliale, cum sunt tubul digestiv, cile respiratorii, cile urinare,
cile genitale, conjunctiva etc. Astfel de microorgansime sunt, de pild, Vibrio cholerae
(holera), Bordetella pertussis (tusea convulsiv), Corynebacterium diphteriae,
Escherichia coli (infeciile urinare) etc.,

n esuturile profunde cu trecerea microorganismelor prin barierele


anatomice reprezentate de piele i mucoase. Unele microorganisme pot trece direct
prin pielea intact cum sunt leptospirele i unii viermi, ca, de exemplu, filariile, iar altele
pot traversa epiteliul mucoasei respiratorii, digestive, a tractului genitourinar i
conjunctiva,

direct n snge sau n esuturile profunde prin leziuni traumatice, muctura


unor animale (virusul rabic, Pasteurella multocida), nepturile unor insecte
(Plasmodium falciarum) sau prin diverse acte medicale efectuate fr respectarea
normelor de asepsie (HIV, virusul .hepatitei B, rickettsii etc.).
1.3. Multiplicarea
Numrul de microorgansime care ptrund n organism (mrimea inoculului) este n mod
obinuit prea mic pentru a produce simptome. Agenii infecioi trebuie s nving
mecanismele de aprare antiinfecioas ale gazdei i s se nmuleasc la un nivel
corespunztor pentru ca prezena lor n organism s se fac simit. n general,
microorganismele se multiplic mai ncet in vivo dect in vitro, tocmai din cauza

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


reaciilor de aprare pe care le declaneaz.
Intervalul care trece de la ptrunderea agenului infecios pn la apariia
simptomatologiei clinice se numete perioad de incubaie.
Un aspect foarte important, determinant n evoluia infeciei, este sediul multiplicrii
microorgansimelor: extra- sau intracelular. Microorgansimele cu habitat extraclelular
sunt supuse aciunii complementului, lizozimului, anticorpilor, fagocitozei etc., pe cnd
cele cu habitat intracelular sunt protejate de aceti factori, nmulirea lor fiind protejat.
Eliminarea lor din organism se face prin distrugerea celulelor n care se afl, ceea ce
atrage dup sine producerea unor leziuni tisulare.
1.4. Localizarea infeciei
Un proces infecios poate fi localizat atunci cnd germenii se multiplic ntr-o zon
relativ limitat a organismului, ca, de pild, un abces sau furuncul.
Infecia se poate propaga de la poarta de intrare prin continguitate din aproape n
aproape i prin diseminare la distan pe cale sanguin sau/i limfatic. n cel din urm
caz rezult infecia sistemic sau generalizat. Dintr-un proces infecios localizat,
germenii pot fi vehiculai de snge sau limf la diferite organe iniiind o localizare
secundar.
Un aspect particular al diseminrii microbilor n organism este transportul mediat
celular i translocarea. Transportul mediat celular este modalitatea pe care o folosesc
microorganismele care rezist digestiei intracelulare a fagocitelor (de exemplu,
chlamydiile, gonococii etc.). Ele se vor nmuli n aceste celule i vor fi vehiculate la
distan. Translocarea este proprietatea unor germeni de a traversa un epiteliu pentru a
ajunge n circulaie (de exemplu, bacilul tific este translocat de ctre celulele epiteliale
ale mucoasei digestive i ajunge n circulaie).
Prezena bacteriilor n snge se numete bacteriemie iar multiplicarea lor n snge
septicemie.
Toxemia este prezena n snge a unei toxine secretate sau eliberate de microb fie n
afara organismului (toxina botulinic prezent n conserve), fie n organism (endotoxina
bacteriilor gram-negative cnd se produce o liz masiv a acestora n snge).
2. ETAPELE EVOLUTIVE ALE INFECIEI
Infeciile au n general urmtoarele etape evolutive:

perioada de incubaie este intervalul de timp care trece de la ptrunderea


microbului n organism pn la apariia primelor simptome. Durata ei depinde att de
microorganism ct i de rezistena organismului. n funcie de durata medie a perioadei
de incubaie deosebim boli cu perioad de incubaie scurt de 1-7 zile (toxinfecii
alimentare, meningite, difterie, gonoree etc.), cu incubaie medie de 8-21 de zile
( febra tifoid, tetanos etc.) i cu incubaie lung de zeci de zile (hepatita B, 60-180
de zile) i foarte lung de ani de zile (tuberculoz, SIDA, lepr etc.).
Bolile infecioase ciclice (cu evoluie regulat), ca de pild rujeola, rubeola, varicela,
variola etc., au o perioad fix de incubaie.

debutul bolii reprezint apariia primelor simptome i poate fi brusc sau


insidios.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

perioada de stare. n aceast perioad se manifest semnele clinice i


paraclinice caracteristice bolii.

perioada de convalescen n care se refac leziuni i se restabilesc funciile


perturbate. Aceast perioada este important deoarece acum pot apare recderi,
complicaii sau cronicizarea infeciei. n cazul unei evoluii favorabile se produce
vindecarea cu sau fr sechele. n cazuri nefavorabile, boala evolueaz spre exitus
sau spre cronicizare.
3. EFECTELE NOCIVE ALE INFECIEI
3.1. Alterri organice i funcionale datorate
agenilor infecioi
Alterri mecanice. Obstruciile mecanice se datoreaz reaciei inflamatorii a gazdei ca
rspuns la prezena microorganismului. Orice organ tubular poate fi obstruat n anumite
infecii, uneori cu urmri nefaste. Este cunoscut obstrucia cilor respiratorii care se
poate produce n difterie. Ptrunderea germenilor dintr-o infecie a urechii medii la
meninge poate duce la dilatarea ventriculilor cerebrali prin obstruarea circulaiei LCR.
Alterrile mecanice sunt mai frecvente n infeciile parazitare. Dac agenii infecioi au
dimensiuni mari i sunt n numr suficient, ei pot obstruciona unele ci anatomice
vitale. Astfel, Ascaris lumbricoides, un vierme intestinal cu o lungime de 15-35 cm i un
diametru de 0,5 cm, poate obstrua un canalicul biliar, iar dac se gsete n numr
mare produce un ghem care obstrueaz tubul digestiv.
Distrugere celular. Efectul distruciei celulare depinde de celulele implicate, de
numrul lor i de viteza cu care se evolueaz infecia. Uneori, efectul distrugerii celulare
este evident macroscopic ca, de pild, n gangrena gazoas1.
Bacteriile distrug celulele prin toxinele pe care le secret i care sunt otrvuri foarte
puternice. Acestea acioneaz fie n apropierea porii de intrare (Shigella asupra celulelor
epiteliului intestinal), fie la distan de locul unde sunt produse ( Corynebacterium
diphteriae). La aciunea toxinelor se mai adaug cea a enzimelor hemolitice i
leucolitice.
Virusurile cu efect citopatogen produc liza celulelor n care se nmulesc. Astfel, virusul
poliomielitic distruge neuronii motori din coarnele anterioare ale mduvei, ceea ce poate
duce la paralizii motorii definitive.
Alterri farmacodinamice ale metabolismului. Unele infecii evolueaz fr leziuni
celulare. Cu toate acestea ele pot fi foarte grave, ca, de exemplu, tetanosul, botulismul
i holera, cauzate de toxinele bacteriilor respective prin alterarea metabolismului celular.
Toxina tetanic modific metabolismul celulelor motoare ducnd la paralizii spastice, iar
cea botulinic interfereaz eliberarea de acetilcolin la nivelul sinapselor colinergice
rezultatul fiind paralizia flasc. n ambele cazuri moartea se produce prin paralizia
muchilor respiratori.
Toxina holeric crete nivelul de AMP-ciclic n celulele epiteliului intestinal, ceea ce are
ca rezultat eliminarea unor cantiti mari de ap n intestin cu producerea consecutiv a
diareei. Moartea survine prin deshidratare.
3.2. Alterri datorate reaciilor de aprare antiinfecioas

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


De cele mai multe ori simptomele infeciilor nu sunt produse numai de microorganismul
infectant, ci i de reaciile gazdei.
Puroiul. Cea mai frecvent consecin a inflamaiei este puroiul, care const dintr-un
amestec de leucocite vii i distruse, bacterii i un exudat. El rezult n urma migrrii
rapide a leucocitelor polimorfonucleare neutrofile n focarul infecios, stimulate de
substane chemotactice produse chiar de bacterii dar i de esuturi sau PMN. Dup
distrugerea lor, leucocitele elibereaz n jur hidrolaze puternice din granulaiile
lizozomale. Aceste enzime lezeaz esuturile nvecinate, extinznd zona afectat.
Abcesul. Cnd puroiul se constituie ntr-o colecie, vorbim de un abces. De exemplu,
furunculul se produce prin obstrucia unei glande sebacee, ceea ce ofer stafilococului
auriu, prezent n mod normal pe piele, oportunitatea de a se nmuli eficient i de a
produce infecia. Localizarea unui abces este esenial pentru prognostic. Astfel,
furunculele cutanate sunt dureroase, dar prognosticul nu este grav n general, pe cnd
localizarea unui abces la nivel cerebral este fatal. Pacienii cu deficiene genetice ale
funciilor leucocitare sufer de infecii purulente recurente, neatintingnd vrsta
adolescenei chiar i n condiiile unui tratament corect cu antibiotice.
Reacia de faz acut. Prezena bacteriilor n esuturi elicit o reacie generalizat
cunoscut sub denumirea de rspuns de faz acut i care este un mecanism al
rezistenei antiinfeciose naturale. Dac intensitatea acestei reacii depsete nivelul
fiziologic, ea determin tulburri foarte grave.
Bacteriile induc secreia IL-1 care acioneaz asupra centrului termoreglrii, rezultatul fiind febra. IL-1
stimuleaz, de asemenea, sinteza unor substane numite prostaglandine care i ele acioneaz asupra
centrului termoreglrii i sunt responsabile de starea general de disconfort pe care o resimim n
timpul unei infecii.
Endotoxinele bacteriilor gram-negative pot induce i ele rspunsul de faz acut. n
doze mici, endotoxinele produc febr i mobilizeaz unele mecansime de aprare
antiinfecioas.
n cantiti mari, ele induc ocul endotoxic i coagularea intravascular diseminat.
Rspunsul imun la infecii este umoral i celular i n anumite condiii poate avea un
efect nociv asupra organismului.
Rspunsul umoral. Infecia induce formarea de anticorpi specifici. n circulaie i n
esuturi anticorpii se combin cu agenii infecioi sau cu unele produse ale acestora
(toxine, enzime etc.). Aceste complexe antigen-anticorp vor induce, n mod normal, un
rspuns inflamator prin intermediul sistemului complement n scopul eliminrii agenilor
nfectioi sau a neutralizrii produilor lor toxici.
Rspunsul umoral nu are ntotdeauna un efect protector. La persoane cu predispoziie
alergic este posibil sensibilizarea organismului fa de anumite antigenele bacteriene
ceea ce duce la instalarea unor stri de hipersensibilitate mediate umoral (de tip I, II
sau III). Astfel, de pild, sunt foarte bine cunoscute mecanismele umorale prin care se
produc complicaiile alergice poststreptococice cum sunt cardita reumatismal
(hipersensibilitate de tip II) i glomerulonefrita acut (hipersensiblitate de tip III).
Rspunsul celular mediat de limfocitele T citotoxice, K, NK i macrofage poate depi n

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


intensitate limitele fiziologice fiind asociat cu inflamaia cronic. Acest aspect se
ntlnete mai frecvent n infeciile cu germeni cu habitat predominent intracelular
(tuberculoz, lepr) i virusuri.
Se poate, ns, afirma c leziunile induse de reaciile rezistenei antiinfecioase sunt un
pre care merit a fi pltit, deoarece disfunconalitatea sistemului imun are urmri
catastrofale. Stau mrturie miile de bolnavi de AIDS.
4. MANIFESTRILE CLINICE ALE INFECIEI
Manifestrile clinice ale infeciei sunt multiple, fiind influenate de o serie de variabile,
cum sunt factorii genetici ai gazdei i ai agenilor infecioi, doza infectant, calea de
ptrundere, factorii de patogenitate ai microbilor, rezistena antiinfecioas a gazdei,
considerente anatomice, factorii de mediu i de ali factori pn n prezent necunoscui.
Unele infecii au, n general, acelai tablou clinic la majoritatea indivizilor (holer, cium,
dizenterie, rabie etc.). Alteori, evoluia este diferit n funcie de rezistena individului i
patogenitatea agentului infecios. Astfel, la unii indivizi infecia poate fi urmat de
starea de boal, deci evolueaz cu manifestri clinice, iar la cei la care organismul
este capabil s-i mobilizeze rapid i eficient mijloacele de aprare, meninnd
multiplicarea agenilor infecioi la un prag sczut, de o infecie inaparent, care va
determina doar modificri imunologice, decelabile prin teste de laborator. ntre aceste
dou extreme exist diferite nuane care pot fi reprezentate sub forma unui iceberg.
Un exemplu ilustrativ este infecia cu virus poliomielitic. La majoritatea populaiei
infectaia este inaparent, iar la un mic procentaj (2/500) evolueaz ca boal infecioas
major n urma creia rezult paralizii musculare definitive.
Dup aspectul evolutiv, infeciile sunt acute, cronice, latente i lente.
Infeciile acute evolueaz ntr-un timp limitat, rezultatul fiind n general vindecarea.
Exemple de infecii acute sunt boile infecto-contagioase ale copilriei (rujeol, varicell,
rubeol, orellion etc.).
n infeciile cronice agentul patogen acioneaz timp ndelungat n organism. Ele
rezult fie din cronicizarea unei infecii acute (hepatita B), fie n urma infeciei cu
germeni care dau boli cu evoluie cronic (tuberculoz, sifilis, lepr etc.).
Infeciile latente sunt infecii n care agentul infecios se gsete n organism pentru o
perioad ndelungat, se nmuleste intermitent i produce recidive (infecia herpetic).
Infeciile lente afecteaz ncet i progresiv sistemul nervos central. Unele sunt de
natur viral, ca, de exemplu, panencefalita subacut sclerozant produs de virusul
rujeolic. Altele ca, de exemplu, encefalopatia Jacob-Creutzfeldt, au o etiologie
infecioas neclar. Se presupune c ar fi produse de prioni.
5. NOIUNI DE EPIDEMIOLOGIE A INFECIILOR
Epidemiologia bolilor infecioase se ocup cu studiul apariiei, etiologiei, rspndirii i
profilaxiei acestora. n funcie de spaiu i timp, infeciile apar:

sporadic: cazuri izolate necorelate n timp i spaiu;

epidemic: cazuri numeroase ce apar ntr-un timp scurt i ntr-o zon geografic
limitat (holer, febr tifoid, cium);

pandemic: cazuri foarte numeroase ntr-o perioad de timp fr limite geografice

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


(pandemiile de grip, SIDA);

endemic: cazuri relativ frecvente, limitate n spaiu i nelimitate n timp.


Noiunile cele mai importante legate de epidemiologia infeciilor sunt:

morbiditatea: numrul de mbolnviri noi la un numr dat de locuitori (10.000,


100.000);

incidena: numrul de mbolnviri noi ntr-o perioad dat de timp;

prevalena: numr de infecii la un moment dat ntr-o colectivitate;

mortalitate: numrul deceselor printr-o anumit infecie raportat la un anumit


numr de locuitori;

letalitate: numrul de decese raportat la numrul de persoane infectate;

index de manifestare: numrul de boli clinic aparente raportat la numrul total de


persoane infectate.
5.1. Rezervorul de germeni
Sursa sau rezervorul de germeni poate fi un organism viu sau un obiect neanimat care
permite supravieuirea sau chiar multiplicarea acestora.
Rezervorul uman. Principalul rezervor viu de germeni este organismul uman. Orice
bolnav care are o infecie este un purttor de germeni patogeni. Importani sunt, ns,
purttorii sntoi care reprezint surse oculte de infecie pentru persoanele din jurul
lor. Aceast stare se produce la persoane la care germenii se multiplic la poarta de
intrare fr s produc manifestri clinice u nici imunologice (purttorii de streptococi
beta-hemolitici de grupA). Mecanismul prin care microbii colonizeaz organismul fr sl afecteze este nc neclar. Nu trebuie confundat starea de purttor sntos cu cea de
purttor aparent sntos la care semnele clinice sunt minime sau absente, dar sunt
prezente semnele biologie i imunologice (purttori de virus hepatitic B).
Rezervorul uman de germeni joac un rol important n rspndirea multor infecii, cum
sunt infeciile streptococice, febra tifoid, difteria, gonoreea, sifilisul, poliomielita,
hepatita, SIDA etc.
Rezervorul animal. Att animalele slbatice ct i cele domestice pot constitui sursa
multor infecii. Bolile comune omului i animalelor se numesc antropozoonoze.
Transmiterea poate avea loc prin contactul direct cu animalul infectat, prin contactul cu
unele produse animale (piei, blnuri - crbune pumonar), consumul de carne infectat
(crbune intestinal), muctura animalelor (rabie), neptura unor insecte (malaria) etc.
Rezervoarele neanimate. Cele dou mari rezervoare neaminate sunt apa i solul. Astfel,
solul este sursa infeciilor produse de unii fungii patogeni, precum i de sporii bacteriilor
strict anaerobe (spori de bacil tetanic i botulinic). Apa se contamineaz de la materiile
fecale ale omului i animalelor.
5.2. Transmiterea agenilor infecioi
Agenii infecioi se transmit n general prin 4 modaliti:
Transmiterea direct a agentului infecios este posibil de la omul bolnav la cel
sntos prin:

contact direct prin atingere (rujeol, varicell, variol etc.), srut (mononuleoz
infecioas, hepatita B), contact sexual (sifilis, gonoree, SIDA etc.),

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z

contact indirect prin obiecte care au venit n contact cu bolnavul, ca, de pild,
batiste, lenjerie, vesel, termometre, siringi infectate etc.,

prin picturile lui Pflgge pe care bolnavul le rspndete n timpul strnutului


i a tusei (virusurile gripale, paragripale etc.).
Transmiterea prin vehiculi obinuii se refer la transmiterea agenilor infectioi pe
cale hidric (salmonelle, shigelle), alimentar (botulism, toxiinfecii alimentare), prin
snge(hepatita B, citomegalia, SIDA) etc.
Transmiterea prin vectori. Cei mai importani vectori sunt artropodele. Unele dintre
ele, ca de pild mutele, sunt vectori mecanici care transport agenii infecioi dintr-un
loc n altul. Vectorii biologici sunt cei care particip activ la transmiterea agentului
infectios. Astfel, unele artropode inger agentul infecios n timp ce sug sngele
persoanei infectate (de pild, narul anofel, care transmite malaria), gzduind o parte
a ciclului evolutiv al acestuia i transmindu-l prin neptur altei persoane.
5.3. Profilaxia bolilor infecioase
Dat fiind c profilaxia bolilor infecioase are consecine economice importante i este
mplicat n sfera particular a fiecrui individ, se impune reglementarea legal a
msurilor ce se aplic. La baza acestor msuri st raportarea infeciilor la centrele de
referin, cum sunt la noi n ar Centrele de Igien i Sntate Public, care la rndul
lor le transmit la OMS.
Msurile profilactice au ca principal scop ntreruperea transmiterii ageniilor etiologici ai
unei infecii. Aceste msuri sunt:

nespecifice, care presupun izolarea sursei de infecie, deci a bolnavului i


instituirea la nevoie a carantinelor. Carantinarea nseamn izolarea bolnavilor i a
persoanelor care vin n contact direct cu acetia pe o perioad egal cu incubaia bolii
respective i se aplic la anumite infecii, cum sunt holera, ciuma, febrele hemoragice
(V. Ebola) etc. La aceste msuri se adaug cele de dezinfecie i sterilizare,

specifice, care constau n imunizare activ (vaccinare), imunizare pasiv prin


seroterapie i chimioprofilaxie.
6. INFECIA NOSOCOMIAL
Infecia nosocomial (hospitalism, infecie interioar, infecie intraspitaliceasc) este o
infecie pe care o persoan o contracteaz cursul spitalizrii. Agenii etiologici ai acestor
infecii fac parte, n general, din flora condiionat patogen, fiind denumii i germeni
oportuniti. Cel mai des sunt implicate bacterii care, n spital, devin multirezistente la
antibiotice i i cresc virulena. Speciile mai frecvent ntlnite sunt E.coli, Klebsiella,
Enterobacter, Pseudomonas aeruginosa, S.aureus, stafilococi coagulazo negativi etc.
Acestea pot produce infecii urinare, infecii ale plgilor postoperatorii, infecii ale
tractului respirator inferior, septicemii etc.
Sursa de germeni poate fi endogen, din propria flor, sau exogen, cnd provine de la
personalul medical sau mediul nconjurtor. Este cunoscut portajul ridicat de S.aureus la
personalul din spital. Infeciile nosocomiale se pot produce i ca urmare a unor manevre
medicale invazive, cum sunt bronhoscopiile, cistoscopiile, cateterismele, respiraia
asistat etc. De asemenea, unele soluii medicamentoase se pot infecta cu germeni

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


multirezisteni, ca, de pild, colirele care se contamineaz foarte uor cu bacil piocianic.
Tulpinile microbiene izolate n spitale sunt un indicator valoros al respectrii regulilor de
igien, iar rezistena lor la antibiotice reflect n mod direct competena personalului
medical n chimioterapia antiinfecioas.
7. PRINCIPII DE DIAGNOSTIC A INFECIILOR
Diagnosticul unei infecii presupune identificarea agentului etiologic. De corectitudinea
diagnosticului depinde evoluia clinic a infeciei i ansa de vindecare a bolnavului. n
lipsa unui diagnostic etiologic, tratamentul antiinfecios va fi empiric, ceea ce va avea ca
urmare:
o evoluie trenant a infeciei,
scderea ansei unui diagnostic etiologic corect dup administrarea
empiric de antibiotice,
expunea nemotivat a pacientului la efectele toxice ale antibioticelor.
Diagnosticul de laborator al unei infecii presupune:
1. Diagnosticul bacteriologic ce const n esen din examenul direct al produsului
patologic pe preparate colorate, izolarea germenilor pe medii de cultur i identificarea
lor pe baza caracterelor culturale, biochimice, antigenice etc.
Examenul microscopic al produselor este foarte important deoarece prezena celulelor
inflamatoare (leucocite) confirm diagnosticul de infecie.
Interpetarea rezultatelor obinute att prin examinarea direct ct i prin cultur trebuie
s in cont de zona anatomic din care s-a recoltat produsul, de flora normal
prezent, deoarece n multe infecii, mai ales n cele produse de germeni condiionat
patogeni, implicaia etiologic a acestora este dificil. Astfel, de exemplu, izolarea
salmonelelor din materiile fecale are ntotdeauna o semnificaie patologic, pe cnd a
bacilului coli care face parte din materiile fecale, doar n anumite situaii.
Examenul direct i izolarea germenilor n vederea diagnosticului se face nainte de
administrarea de antibiotice.
2. Diagnosticul serologic pune n eviden anticorpii fa de un anumit microb. Se
efectueaz atunci cnd agentul etiologic bnuit nu se cultiv sau se cultiv greu (de
exemplu, n sifilis, hepatit, SIDA etc.) i determin un rspuns umoral interpretabil.
Att n diagnosticul bacteriologic ct mai ales n cel serologic se utilizeaz o serie de
tehnici imunologice, cum sunt reaciile de aglutinare, precipitare, de fixare a
complementului, imunofluorescena, imunodifuzia, Elisa, radioimunodozare, WesternBlot). Cu ajutorul lor se pun n eviden:

anticorpi fa de agentul etiologic (sifilis, SIDA, febra tifoid, infecii cu


Streptococcus pyogenes, Mycoplasma pneumoniae, Rickettsia prowazeki, Legionella
pneumophyla etc.),

antigene prezente n organism produse de agenii infecioi cauzali (antigenul


HBs, Hbe n hepatita viral B, Chlamydia trachomatis n secreiile genitale etc.).
Datele obinute de laboratorul de bacteriologie i imunologie trebuie coroborate
ntotdeauna cu cele obinute de medicul clinician care cunoate istoricul bolii, contextul
n care s-a produs, elemente care ne ajut n alegerea cii optime de diagnostic i

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


tratament.

1. IMUNIZAREA ARTIFICIAL ACTIV I PASIV


De-a lungul existenei sale omul s-a integrat tot mai complex n sistemul su ecologic alturi de
numeroase microorganisme, unele dintre acestea fiind patogene sau condiionat patogene. Rolul
fundamental n cadrul reaciei de aprare a individului este deinut de sistemul su imunitar.
Utilizarea serurilor i vaccinurilor, alturi de antibiotice i chimioterapice, reprezint o arm
esenial n profilaxia i tratamentul unor boli infecioase. Descoperirea i utilizarea vaccinurilor a
constituit cel mai mare progres n lupta cu bolile infecioase, vaccinarea permind crearea unei
imuniti similare cu cea determinat de boala natural.

1.1. Imunizarea prin vaccinare


Practica imunizrii artificiale a pornit de la observaiile epidemiologice empirice realizate de-a
lungul mileniilor, mai ales n China i India i care atestau faptul c fotii bolnavi de variol nu se mai
mbolnvesc cu ocazia unui nou contact infectant. Acelai lucru se ntmpla i cu o parte din contacii
bolnavilor de variol. Aa se ajunge la ideea imunizrii prin procedeul numit variolizare (transferul
coninutului pustulelor variolice la indivizi sn toi ).
Primul vaccin, vaccinul viral antivariolic, a fost aplicat n 1798 de ctre Edward Jenner, care a
mbinat metoda empiric inspirat de variolizare cu observaiile populare, conform crora mulgtorii de
vite cu leziuni pustuloase contactate de la animalele cu vaccina erau rezisteni la variol.
Bazele tiinifice ale profilaxiei n bolile infecioase au fost puse de Louis Pasteur care a preparat
vaccinul antiholer a ginilor, anticrbunos i n 1885 vaccinul antirabic.
Vaccinul reprezint un preparat antigenic obinut dintr-un agent patogen specific sau
puternic nrudit cu acesta, capabil s induc la un subiect receptiv un rspuns imun artificial,
protector fa de agresiunea microbian.
n raport cu starea agenilor patogeni (modul de preparare) i natura componentelor antigenice,
vaccinurile se pot clasifica n :
vaccinuri corpusculare preparate din ageni patogeni vii atenuai (microbieni, virali),
vaccinuri corpusculare preparate din ageni patogeni omori sau inactivai (microbieni, virali),
vaccinuri preparate din:
a) componente microbiene purificate (produse ale metabolismului microbian),
b) fraciuni sau subuniti structurale ale microorganismelor (polizaharide capsulare,
componente ale peretelui bacterian, subuniti antigenice virale),
vaccinuri sintetice
vaccinuri clonate sau biosintetice obinute cu ADN- recombinant.
Vaccinuri corpusculare preparate din ageni patogeni vii atenuai Majoritatea vaccinurilor vii
atenuate sunt vaccinuri virale, cele bacteriene fiind mai puine. Vaccinurile vii sunt vaccinuri complete ce
conin tulpini microbiene sau virale selectate pentru nivelul redus i stabil al virulenei. Scopul atenurii
este de reducere a virulenei pn la un nivel foarte sczut, pentru a nu afecta organismele vaccinate,
dar care asigur meninerea infeciozitii (imunogenitii) necesare unei o stimulri antigenice
suficiente pentru producerea unui rspuns imun adecvat.

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Practic s-a utilizat un singur vaccin preparat cu virus natural, virusul Vaccina (Cowpox virus), capabil
s induc o imunitate de lung durat, fa de virusul variolei (Smallpox virus), cu care este nrudit
antigenic.
Atenuarea virusurilor se efectueaz n mod curent prin trecerea lor pe organisme-gazd nenaturale
sau cultivarea ndelungat n culturi de celule animale. Atenuarea bacteriilor se face prin cldur,
mutagenaz chimic (bacil tific), pasaje timp ndelungat pe medii de cultur (bacil tuberculos) etc
La persoanele sn toase, administrarea acestor vaccinuri produce o infecie inaparent urmat,
n general, dup o singur inoculare, de instalarea unei imuniti mediate umoral (prin anticorpi) i/sau
mediate celular (prin limfocite T reactive specifice).
Vaccinuri corpusculare preparate din ageni patogeni omori sau inactivai. Aceste
vaccinuri sunt reprezentate de suspensii sau produse obinute din particule bacteriene sau virale totale la
care, prin diverse procedee fizice sau chimice, s-a realizat eliminarea (neutralizarea) selectiv a
infeciozitii cu meninerea nemodificat a proprietilor imunogene. Inactivarea se efectueaz prin
factori fizici (cldur, radiaii UV) i chimici.
Administrarea acestor vaccinuri induce doar un rspuns imun mediat umoral prin anticorpi.
Vaccinuri preparate din componente microbiene. Vaccinurile preparate din componente
bacteriene pot fi:
a) Produse microbiene purificate, ca de pild anatoxinele. Anatoxinele sunt toxine bacteriene
detoxifiate prin nvechirea la cldur cu formol 4%.
Anatoxina difteric i tetanic sunt cele mai eficiente anatoxine utlizate n vaccinare. mpreun cu
Bordetella pertussis inactivat formeaz un trivaccin cunoscut (Di-Te-Per). Cu anatoxina preparat din
subunitatea B a toxinei holerice la care s-au adugat bacili omori s-au obinut rezultate
promitoare. S- a preparat, de asemenea, anatoxin din neurotoxina secretat de Clostridium
botulinum.
b) Fraciuni sau subuniti structurale ale microorganismelor (polizaharide capsulare, componente
ale peretelui bacterian, subuniti antigenice virale). Acestea sunt preparate vaccinale constituite din acei
componeni structurali (subuniti) care sunt responsabili de rspunsul imun. Avantajele constau n
eliminarea reaciilor postvaccinale iar dezavantajele n obinerea unei imuniti celulare slabe,
necesitatea asocierii de adjuvani i costul ridicat.
Vaccinuri sintetice. Se obin prin sinteza in vitro a fraciunilor polipeptidice care reprezint
antigenele sau epitopii specifici vaccinani ai unor microorganisme prin reproducerea att a secvenei
ct i configuraiei spaiale a epitopului natural. Pentru a deveni antigene complete, fraciunile sintetice
trebuie cuplate cu un carrier. Aceste vaccinuri sunt nc obiect de studiu experimental.
Vaccinuri obinute cu ADN-recombinant (vaccinuri clonate sau biosintetice). Sunt preparate n
scopul obinerii de fraciuni antigenice imunogene purificate a cror administrare s exclud reaciile
adverse i complicaiile postvaccinale.
Prin tehnica ADN- recombinant, genele care codific proteinele (antigenele) componente ale
vaccinului sunt selecionate, izolate i introduse n genomul unei celule vector: bacterie (E. Coli), levur
(Saccharomices cerevisiae) sau celule de mamifere capabile apoi s le sintetizeze n cantiti
industriale.
n anul 1982 s-a propus o modificare ingenioas a acestei tehnici, i anume: se cloneaz un vector
(virus, bacterie) cu gena productoare de antigen i se introduce n organism. Microorganismul purttor
al genelor se multiplic n organism i va produce cantiti suficiente de antigen necesare imunizrii
fr a produce o infecie clinic manifest. Primul astfel de vector propus a fost virusul vaccinia datorit
faptului c are un genom suficient de mare ca s suporte inseria unor gene fr s se produc
modificri n structura i funcionalitatea sa. Virusul a fost, ns, prsit deoarece majoritatea

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


populaiei este imunizat fa de acest virus, el fiind, deci, rapid eliminat din organism, iar pe de alt
parte produce complicaii. Dintre bacteriile folosite ca vectori menionm tulpini de Salmonella typhi
avirulente utilizate n vaccinarea fa de unele infecii enterice i BCG.
Vaccinul viitorului va consta probabil dintr-un singur vector viral sau bacterian care va avea inserat n
genomul su toate genele ce codific antigenele necesare unei imunizri eficiente i care se
administreaz o singur dat.
n prezent ns, vaccinurile se administreaz n mod repetat pentru a produce o imunizare eficient.
n raport cu numrul antigenelor nrudite sau diferite n acelai preparat, vaccinurile pot fi:
vaccinuri monovalente care provin de la o singur specie bacterian sau viral (toate
vaccinurile);
vaccinuri asociate care reprezint o asociere a vaccinurilor contra mai multor boli, asociere care
trebuie s asigure eficacitatea fiecruia dintre vaccinuri, iar reaciile adverse s nu fie mai
frecvente i mai grave dect cele cunoscute pentru fiecare vaccin n parte. Astfel de vaccinuri
sunt, de pild, vaccinul antidiftero-tetanic (vaccin bilvalent), diftero-tetano-pertussis (vaccin
trivalent), antimeningococic (tetravalent) etc.
n raport cu asocierile vaccinale posibile, se recunosc dou tipuri de vaccinuri:
combinate, realizate cu vaccinuri asociate anterior (prin procesul tehnologic) sau n momentul
folosirii, n aceeai sering, fiind inoculate n acelai loc;
simultane, administrare pe ci variate i n zone diferite
Indicaiile de vaccinare sunt generale, selective i elective.
vaccinrile generale vizeaz toat populaia infantil sau adult n raport cu un program de
vaccinare stabilit n funcie de gravitatea i prevalena ntr-o ar a anumitor infecii. De exemplu, n
Romnia, vaccinrile anti-tetanic, anti-difteric, anti-tuberculoas, anti-pertussis, anti-poliomielitic
sunt obligatorii.
vaccinrile selective vizeaz grupe de populaie cu risc crescut de a contacta o anumt
infecie. De exemplu, vaccinrile anti-gripal, anti-pneumococic, anti-meningococic se practic n
colectiviti.
vaccinrile efective vizeaz pacieni sau categorii de pacieni la care anumite infecii sunt
mai frecvente i mai grave dect n populaia general. De exemplu, vaccinul anti-pseudomonas la
pacienii ari, vaccinul anti-gripal la pacieni cu afeciuni respiratorii cronice, la cei cu diabet zaharat.
Calea de administrare a vaccinurilor este n general parenteral, dar aceast cale nu stimuleaz
producerea de anticorpi IgA secretori. De aceea, cnd bariera imun a mucoaselor este esenial
pentru o protecie bun, vaccinurile atenuate trebuie administrate pe cale oral pentru a stimula
producerea de IgA secretor.
Complicaiile vaccinrilor:
1. - boala infecioas indus prin vaccinuri vii la persoane cu deficiene ale aprrii imune.
Boala infecioas prin tulpini bacteriene sau virusuri atenuate este foarte rar la persoane sn toase
datorit controalelor riguroase pe care le impune astzi avizarea unui vaccin.
2. - accidente alergice sunt reaciile anafilactice, reacii de tip Arthus, reacii citolitic-citotoxice i
reacii mediate celular. Acestea se pot datora impuritilor antigenice provenite din substratul pe care se
cultiv tulpina vaccinant sau chiar antigenelor vaccinante.
Contraindicaiile vaccinrilor sunt temporare i definitive. Dintre cele temporare menionm
sarcina, bolile febrile acute. Cele permanente se refer la pacienii cu imunodeficiene, la care chiar i
tulpinile atenuate pot produce infecia i la pacienii hipersensibilizai la antigenele vaccinante.

1.2. Imunoprofilaxia prin seruri terapeutice

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


Serurile sunt produse biologice cu un coninut bogat n anticorpi specifici fa de unul sau mai
muli ageni patogeni i se folosesc pentru blocarea procesului infecios la subiecii infectai cu
agentul patogen respectiv.
Serurile confer imunitate pasiv (fr participarea sistemului celular imunocompetent). Imunitatea
prin transfer de anticorpi este rapid (deoarece serul conine anticorpi gata formai), dar de scurt
durat (n medie 10-15 zile pentru serurile heterologe i 20-30 zile pentru serurile omologe), timp necesar
proteinei strine s se elimine din organism.
Dup provenien , serurile sunt de dou categorii:
Serurile omologe se obin de la om, fie de la convalesceni de boli infecioase i se numesc
seruri de convalescent, fie de la persoane imunizate activ, n mod special i se numesc seruri
hiperimune.
Serurile omologe nu se mai folosesc astzi sub aceast form, ci sub form de imunoglobuline
(gamaglobuline) specifice, extrase din aceste seruri.
Imunoglobulinele extrase din amestecuri diferite de plasm (de la mai muli donatori aduli normali)
se numesc imunoglobuline normale, sau gamaglobuline umane standard, care conin aproape numai
fraciunea IgG fa de microorganismele care infecteaz majoritatea populaiei.
Gamaglobulinele obinute din seruri de convalescent sau din serul unor voluntari umani
hiperimunizai cu un anumit antigen (prin vaccinare sau administrare de anatoxin) se numesc
imunoglobuline umane specifice anti-, urmate de numele antigenului corespunztor (de exemplu:
imunoglobulin uman specific antitetanos). Se mai numesc i gamaglobuline umane hiperimune.
Administrarea gamaglobulinelor specifice au avantajul c necesit un numr redus de injecii,
realizeaz un aport mai mare de anticorpi care se menin n organism un timp mai ndelungat (10-14
sptmni) i se pot administra n mod repetat fr riscul sensibilizrii.
Serurile heterologe se obin pe animale (cal, iepure, oaie) hiperimunizate n mod activ cu diferite
vaccinuri i antitoxine. Avantajul acestor seruri este c titrul poate fi precis dozat. Dezavantajul este c
pot produce sensibilizarea manifestat prin reacii foarte grave (anafilactice sau de tip boala serului).
Pentru a evita la bolnavi aceste manifestri de sensibilizare, trebuie testat, nainte de tratament,
reactivitatea fiecrui organism fa de proteina strin. n acest scop se fac injecii (intradermice i
apoi subcutanate) cu concentraii crescnde de ser (1/10.000-1/10) pn se ajunge la ser brut. n
absena reaciei locale (eritem) se poate administra serul terapeutic. n caz contrar se face
desensibilizarea.
Acest dezavantaj a fost redus prin purificarea i concentrarea acestori seruri, pentru ndeprtarea
albuminelor responsabile n cea mai mare parte de producerea reaciilor de sensibilizare.
n prezent, toate serurile heterologe se livreaz purificate, concentrate, ceea ce nseamn c ntrun volum mic i pentru o cantitate sczut de proteine se obine un coninut crescut de anticorpi.
Dup compoziie, serurile se clasific n:
seruri antibacteriene (ser antimeningococic),
seruri antitoxice (ser antidifteric, antitetanic, antigangrenos, antibotulinic, antipiocianic),
seruri mixte : antibacterian + antitoxic (ser anticrbunos),
Dup scop, serurile se clasific n seruri administrate profilactic (seroprofilaxie) i seruri
administrate curativ.
De exemplu, la copiii contaci cu un bolnav de difterie se administreaz preventiv ser imun
antidifteric. Pentru a obine ns o imunizare mai puternic i durabil, seroprofilaxia se continu cu
vaccinarea, n cazul de fa cu anatoxin difteric.
Imunizarea pasiv are caracter de urgen n urmtoarele cazuri:

www.cartiaz.ro Carti si articole online gratuite de la A la Z


protecia pacienilor cu a-gamaglobulinemie fa de infeciile cu bacterii piogene, sau cu
unele virusuri n condiii de risc crescut pentru infeciile respiratorii,
protecia persoanelor nevaccinate n condiii de risc crescut pentru tetanos sau pacieni cu
plgi traumatice, arsuri, avort septic,
gangren gazoas - pacieni cu plgi traumatice,
la contaci de hepatit viral B dup expunerea acut prin contactul mucoaselor cu snge
HBS +,
terapia unor toxiinfecii i intoxicaii : difterie, tetanos, botulism, muc tur de erpi
veninoi.