Sunteți pe pagina 1din 46

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

DETERMINAREA CONCETRAIEI SOLUIILOR PRIN SPECTROFOTOMETRIE DE


ABSORBIE N DOMENIUL VIZIBIL
1. Scopul lucrrii
Determinarea concentraiei unei soluii de acridin-orange prin msurarea extinciei (la
corespunztoare maximului de absorbie) cu ajutorul unui spectrofotometru n domeniul
vizibil.
2. Principiul lucrrii
Spectrofotometria reprezint o clas larg de metode de investigare. Ea face parte
dintr-o clas i mai mare i anume clasa metodelor spectrometrice. Orice metod
spectrometric nregistreaz i msoar spectre n general electromagnetice. Un spectru
reprezint totalitatea valorilor unei mrimi ce caracterizeaz un sistem. n cazul unui spectru
electromagnetic acesta reprezint totalitatea lungimilor de und (frecvenelor) pe care un
sistem le poate emite sau absorbi. Atunci cnd un sistem absoarbe radiaii electromagnetice
el trece pe un nivel energetic superior iar cnd emite pe unul inferior. Condiia (de
rezonan) ce trebuie ndeplinit este:
h=Es-Ei
unde Es = energia nivelului superior, Ei = energia nivelului inferior, iar = frecvena radiaiei.
Din condiia de rezonan rezult c sistemele pot absorbi aceleai radiaii pe care le
pot i emite. Vom obine deci, practic, aceleai informaii fie c analizm ce emite sistemul
fie c nregistrm ce absoarbe.
Dac lungimile de und emise sau absorbite au valori ntr-un domeniu cvasicontinuu
obinem spectre de benzi iar dac variaz discontinuu sunt spectre de linii. Spectrele de linii
sunt n general specifice substanelor n stare atomic n timp ce spectrele de benzi sunt, n
general, specifice substanelor n stare molecular. Din legea absorbiei luminii:
I=I010-cd (legea BEER-LAMBERT)
unde I0 = intensitatea luminii incidente pe prob, I = intensitatea luminii emergente din prob,
= coeficient specific de absorbie zecimal (depinde de natura substanei i de lungimea de
und a luminii incidente), c = concentraia substanei absorbante, d = grosimea probei se
poate defini extincia (E):
E = lg

I0
= cd
I

Din definiia extinciei se vede c putem determina concentraia unei substane


msurnd extincia. Pentru ca precizia msurtorii s fie ct mai bun extincia trebuie
msurat la lungimea de und () corespunztoare maximului de absorbie al substanei.
Stabilirea maximului de absorbie se face trasnd curba de absorbie E=f(). Stabilind
lungimea de und la care substana prezint maximul de absorbie putem trasa graficul
E=f(c) cu valorile extinciei msurate la corespunztoare maximului de absorbie. Graficul
trebuie s fie o dreapt care trece prin origine. Odat trasat graficul putem determina
concentraia necunoscut prin msurarea extinciei soluiei la aceeai i interpolare sau
extrapolare pe grafic.
n locul trasrii graficului putem determina ecuaia dreptei de regresie (metoda celor
mai mici ptrate) E=a+bc cu ajutorul programului existent pe calculator iar apoi vom
determina concentraia necunoscut prin nlocuirea extinciei corespunztoare n ecuaia
dreptei.

43

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Descrierea aparaturii
Schema bloc a unui spectrofotometru este reprezentat n Fig. 25:

Fig. 25 Schema bloc a spectrofotometrului


S = sursa de radiaii care trebuie s emit toate din domeniul investigat (n cazul nostru
este un bec cu incandescen ce emite lumin alb).
M = monocromator, alege din ce emite sursa o singur (poate fi cu prism, cu reea de
difracie sau filtre).
B = solventul (blanc) folosete la etalonarea de T=100%
P = proba pentru care msurm E (sau T)
D = detectorul transform lumina n curent electric n cazul nostru este o fotocelul dar la
aparatele mai performante poate fi un fotomultiplicator sau fotodiod.
A = amplificator
I = nregistrator, microampermetru gradat liniar n pentru transmisie i logaritmic pentru
extincie.

Fig. 26 a) Spectrofotometrul Spekol


3. Mod de lucru cu spectrofotometrul Spekol
1. din butonul 2 se alege (pentru trasarea curbelor de absorbie se vor face msurtori
ntre 430 i 530 nm cu citiri din 10 n 10 nm).
2. n cuva aparatului se introduce eprubeta cu solventul (apa distilat)
3. se pune comutatorul 1 pe poziia 0
4. din butonul 3 se regleaz acul aparatului de msur pentru a indica transmisia T=0 %
5. se pune comutatorul 1 pe poziia I
6. din butonul 4 se regleaz acul aparatului de msur la indicaia T=100 %
7. se introduc pe rnd eprubetele cu soluii i se citete extincia E pe scala de sus a
aparatului de msur (scal logaritmic de la dreapta la stnga)
8. se repet toate operaiile pentru celelalte

44

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Fig. 26 b) Spectrofotometrul HELIOS


Mod de lucru cu spectrofotometrul HELIOS

Se pornete aparatul din butonul de pornire i se ateapt circa 5 minute pentru ca


aparatul s i fac verificrile
1. din butonul 3 se alege modul absorban (extincie)
2. se introduce eprubeta cu ap distilat (B)
3. din butoanele 1 se alege lungimea de und (se vor face citiri ntre 430 i 530 nm din
5 n 5 nm)
4. se apas butonul 2 (aparatul va face automat reglrile de 0 i 100)
5. se introduc pe rnd eprubetele cu soluii iar pe ecranul nregistratorului (I) se citesc
absorbanele (extinciile) sau se printeaz prin apsarea butonului 4
6. se modific lungimea de und i se repet toate operaiile
Interpretarea rezultatelor
Pe aceeai hrtie se traseaz graficele
E=f()
pentru fiecare soluie. Soluiile fiind de aceeai natur forma graficelor trebuie s fie
aceeai i curbele trebuie s aib un maxim la aceeai lungime de und. Cu valorile
extinciei corespunztoare (aceeai pentru soluii indiferent de concentraie) la care sau obinut maximele de absorbie se traseaz graficul E=f(C). Pe grafic, prin interpolare
sau extrapolare, se determin concentraia necunoscut. Cu rezultatele individuale
obinute de fiecare student se va face calculul erorilor (cu ajutorul programului de
prelucrare statistic).

45

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Cu programul de regresie se calculeaz parametrii a i b ai ecuaiei E=a+bC,


iar apoi se calculeaz concentraia necunoscut. n final se compar concentraia
calculat cu cea determinat grafic.
Metode spectrofotometrice utilizate n medicin:
Numele
Informaii
Informaii (aciuni)
metodei
(aciuni)
Indirecte
Directe
Distrugerea celulelor
Gama-terapie
Absorbia
(preponderent cele
(cobaltoterapie)
radiaiilor n
canceroase)
esuturi
Scintigrafia
nregistrarea
Determinarea distribuiei
emisiei de radiaii radioizotopilor introdui
n organism
Radiografie
Absorbia
Imagini ale organelor
radiaiilor X n
interne dense (esut
esuturi
osos)
Tomografie
Absorbia razelor Imagini a oricrei seciuni
computerizat cu X n esuturi
prin corp
raze X
Spectrofotometrie Absorbia acestor Determinarea
radiaii de ctre
concentraiilor diferitelor
molecule
molecule
Oximetrie
Absorbia
Determinarea raportului
radiaiilor roii i
Coxihemoglobin/Chemoglobin
infraroii de ctre total
snge
Rezonan
Absorbia
Urmrirea proceselor n
electronic de
microundelor de
care apar radicali liberi
spin (RES)
ctre radicalii
liberi aflai n
cmp magnetic
Detalii privind procesele
Tomografie RMN Absorbia
n care sunt implicate
funcional
radioundelor de
(local)
ctre nuclee cum aceste nuclee
ar fi P31, Na23,
F119
Imagini in seciune prin
Imagistica
prin Absorbia
tomografie
de radioundelor de corp, orientate sub orice
ctre nucleele de unghi
rezonan
hidrogen plasate
magnetic
nuclear
(IRM, n cmp magnetic
RMN)
Absorbia
Spectroscopia
Informaii
privind
prin
rezonan radioundelor de metabolii
(creatina,
magnetic in vivo ctre nuclee cum colina, N-acetilaspartat,
ar fi H1,
(MRS)
P31, lactat etc.), suprapuse pe
imagine anatomic
Na23, Fl19

Semnificaii
Clinice
Terapia cancerului

Diagnostic funcional al
organului
Diagnosticarea fracturilor,
fisurilor etc.
Imagini cu detalii de ordinul
milimetrului (mai ales pe
esuturi dense)
Diagnosticarea diferitelor
maladii (ex. diabetul)
msurnd concentraii
Monitorizarea gradului de
oxigenare a sngelui
Se sper c se vor putea
urmri procesele metabolice

Informaii privind etapele i


cinetica proceselor

Imagini
cu
informaii
anatomice i de evideniere
a proceselor patologice

Informaii privind procese


tumorale; cnd gradul de
malignitate crete, cresc
nivelele de colin, lactat i
scad NAA i creatinina.
Aplicaii
n
patologia
sistemului nervos, prostata.

46

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

DETERMINAREA COEFICIENTULUI DE TENSIUNE SUPERFICIAL


1. Scopul lucrrii
Determinarea coeficientului de tensiune superficial pentru o substan tensioactiv
folosind stalagmometrul Traube.
2. Principiul lucrrii
Tensiunea superficial este cauzat de atracia dintre moleculele de lichid. In
volumul de lichid fiecare molecul interacioneaz cu moleculele vecine prin fore egale pe
toate direciile, rezultanta acestor fore fiind nul. La suprafaa lichidului moleculele nu sunt
la fel de intens atrase de moleculele mediului (gaz, vid sau alt lichid) de deasupra lichidului
i ca urmare toate moleculele din stratul superficial sunt supuse unei fore de atracie
rezultant indreptat spre interior, care este echilibrat numai de rezistena lichidului la
compresiune. Suprafaa stratului superficial, acioneaza n multe cazuri ca o membran
elastic, ca de exemplu la baloanele de spun. Lichidul va alege acea form pentru care
energia dat de interaciunile moleculelor n contact va fi minim, adic va alege suprafaa
minim, deoarece astfel se asigur un numr minim de vecini, deci de interaciuni. Acest
fapt explic forma picturilor i a suprafeelor libere de lichid.
Aceste fore de tensiune superficial explic comportarea lichidelor pe diverse
suprafee solide. Forele n punctele de contact ale lichidului cu celelalte medii determin
unghiurile de contact dintre lichid i celelalte medii. Unghiul de contact este mrginit de
tangenta la suprafaa lichidului i suprafaa solidului. Meniscurile concave au unghiul de
contact mai mic de 900 iar meniscurile convexe au unghiurile de contact mai mari de 900.

Fig. 27 Lichidele care ud suprafeele au


forele rezultante de atracie (dintre
moleculele de lichid-lichid, lichid-solid,
lichid-gaz) orientate n sensul intinderii
lichidului

Fig. 28 Lichidele care nu ud suprafeele au


forele rezultante de atracie (dintre moleculele
de lichid-lichid, lichid-solid, lichid-gaz) orientate
n sensul strngerii lichidului ca ntr-o
membran

Fig. 29 Forele de interaciune dintre


moleculele din stratul superficial dau
rezultante
orientate spre volumul de lichid,
comportndu-se ca o membran elastic

Fig. 30 Plutirea unui obiect usor pe suprafaa


unui lichid se datoreaz echilibrului dintre
greutatea lichidului i forele de tensiune
superficiale laterale, care sunt paralele cu
suprafaa n punctul de contact cu lichidul

Experimental se dovedete c forele de tensiune superficial depind numai de


lungimea conturului de contact dintre dou medii diferite l, constanta de proporionalitate
fiind numit coeficient de tensiune superficial .
F= l

47

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Fora de tensiune superficial este tangent la suprafaa lichidului n contact cu alt


mediu i perpendicular pe conturul de contact.
Se poate calcula energia potenial superficial nglobat n stratul superficial cu
ajutorul lucrului mecanic efectuat pentru a mri suprafaa stratului superficial pna la S:
L= - S
Din formule se poate deduce coeficientul de tensiune superficial ca fiind egal cu
lucrul mecanic necesar pentru mrirea suprafeei libere a unui lichid cu o unitate.
= - L/S
Coeficientul de tensiune superficial se msoar n N/m i se gsete n tabele
pentru diverse lichide. Acest coeficient scade cu cresterea temperaturii.
Dintre toate lichidele, cu excepia mercurului, apa are cel mai mare coeficient de
tensiune superficial =73x10-3 N/m.
Presiunea la suprafee curbe de lichid

Fig. 31 Pelicula de lichid i forele de tensiune superficial


Forele de tensiune superficial, care acioneaz asupra unei pelicule de lichid,
determin o presiune suplimentar, conform ecuaiei Young-Laplace:

1
1

+
p =
R
R
2
1
unde p este diferena de presiune pe feele peliculei i R1 i R2 sunt razele de curbura ale
peliculei.

Fig. 32 Imaginea lichidului n contact cu un perete solid. Fora rezultant


(a forelor de coeziune i de adeziune) este perpendicular pe suprafaa lichidului,
n apropierea peretelui: lichidul nu ud; b) lichidul ud
Suprafaa curba a lichidului exercit o presiune suplimentar pozitiv sau negativ,
dup cum suprafaa este convex sau concav. De exemplu ntr-un tub capilar de sticl
introdus n mercur, nivelul mercurul rmne sub nivelul mercurului din exteriorul tubului i
invers, urc n cazul unui tub de cupru, ca n Fig. 33.

48

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Fig. 33 Acelai lichid poate s ude un material i s nu ude altul


Ascensiunea lichidului ntr-un vas capilar este dat de formula lui Jurin, dedus
pornind de la egalitatea greutii coloanei de lichid din vas cu forele de tensiune
superficial:
h=2 cos/(gr)
unde este densitatea lichidului, cos este unghiul de racordare i r este raza tubului
capilar.
Tensiunea superficial scade n general cu creterea temperaturii lichidului, atingnd
o valoare critic de 0 la temperatura critic. La dizolvarea unui solvit n ap, coeficientul de
tensiune superficial al acesteia poate s rman neschimbat, s creasc usor sau s
scad, n funcie de structura molecular a solvitului. Astfel zaharul n soluie nu are nici un
efect, srurile anorganice mresc tensiunea superficial, alcoolul reduce tensiunea
supeficial, surfactanii reduc tensiunea superficial pn la o valoare minim sub care nu
mai au nici un efect. Substanele care micoreaz tensiunea superficial a apei se numesc
tensioactive. Substanele care dizolvate n ap mresc sau nu-i modific tensiunea
superficial a apei, se numesc tensioinactive. Traube consider c tensioactivitatea
substanelor din seria omoloag (alcooli, acizi organici) este cu att mai pronunat cu ct
lanul atomilor de carbon este mai lung.
Importana tensiunii superficiale n biologie
9 Fenomenele superficiale joac un rol important la nivelul alveolelor pulmonare.
Stratul superficial al apei care cptuete alveolele pulmonare are tendina s strng
lichidul i ca urmare s expulzeze aerul din alveole. Exist nsa celulele epiteliale
specializate (celule epiteliale alveolare de tip II), care ocup 10% din suprafaa alveolelor
pulmonare i secret un surfactant agent tensioactiv de suprafa care reduce mult
tensiunea superficial. Surfactantul este un amestec complex de fosfolipide, proteine, ioni.
Componentul responsabil pentru scderea tensiunii superficiale este dipalmitoil-lecitina, care
nu se dizolv n lichidul alveolar ci se rspndete pe suprafaa acestuia deoarece molecula
sa are o parte hidrofil ndreptat spre lichidul alveolar i o parte hidrofob orientat spre
aerul alveolar. Se formeaz astfel o fa lipidic hidrofob, care are tensiunea superficial de
la 1/12 la 1/2 din tensiunea superficial a apei pure, (73x10-3 N/m). Pentru alveolele de
100m, cptuite cu surfactant pulmonar normal, presiunea determinat de tensiunea
superficial (p2/r) este de 3 mmHg iar fr surfactant presiunea este de 13,5 mm Hg.
Aceast reducere asigur presiunea transpulmonar necesar meninerii plmnilor n stare
de expansiune n timpul respiraiei, cnd suprafaa alveolar a plmnului variaz cu 7 m2 .
9 Unele lichide biologice au proprietatea de a-i reface tensiunea superficial scazut
datorit prezenei unor substane tensioactive, proprietate numit de tensiotampon, ntlnit
i la serul i plasma din snge. Fenomenul se datoreaz prezenei ionilor de Ca++ din snge,
care formeaz compleci insolubili netensioactivi cu substana tensioactiv, precum i
datorit moleculelor proteice, care adsorb substana tensioactiv. Prin aceste mecanisme
homeostatice plasma pastreaz aproximativ constant tensiunea superficial.

49

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

9 Tensiunea superficial are importan n circulaia periferic a sngelui prin vasele


capilare. Exist mecanisme de reglare a diametrelor vaselor sanguine la schimbarea
poziiei, care asigur oxigenarea corespunztoare a creierului.
9 Valorile stabilite pentru principalele lichide din organism sunt date n tabelul de mai
jos:
Plasma oxalat
Ser sanguin
Lichid cefalo-rahidian
Saliva
Urina

75,2 x10-3 N/m


64,2-68 x10-3 N/m
73,9 x10-3 N/m
70 x10-3 N/m
58,3-72,6 x10-3 N/m

3. Mod de lucru
Din cauza faptului c tensiunea superficial manifest diverse efecte exist mai
multe metode de msurare a coeficientului de tensiune superficial. Aceasta se poate
determina prin metode dinamice (la suprafaa de lichid care se formeaz) i prin metode
statice (suprafee formate deja). La lichidele pure tensiunea superficial static este egal cu
cea dinamic. La dizolvarea unei substane tensioactive de obicei tensiunea superficial
static este uor mai mic dect cea dinamic deoarece imediat dup formarea suprafeei
de lichid ncepe s se adsoarb substana tensioactiv.
Metoda stalagmometric
Este o metoda dinamic prin care se msoar tensiunea superficial a picturilor
care se formeaz i se desprind la captul unui stalagmometru (picurtor).
Picturile formate la un orificiu capilar se desprind atunci cnd fora de tensiune
superficial orientat n sus este cel puin egal cu greutatea picturii care se formeaz.

r
r
F = G

unde F = l = 2r reprezint fora de tensiune superficial la orificiul cu raza r, 2r este


conturul orificiului, iar G=mg=vg=gV/n este greutatea picturii exprimat n funcie de
densitatea picturii i de volumul v al picturii. Acest volum poate fi calculat din raportul
dintre volumul V care se scurge din balonul de sticla ntre cele dou repere i numrul de
picturi. Din aceast ecuaie se obine:
= gV/(2rn)
Raza capilarului este dificil de msurat i de aceea se face experimentul cu un lichid cu
tensiunea superficial cunoscut, de exemplu ap distilat. Astfel se las s curg mai nti
acelai volum de ap distilat prin tub i se numr picturile, apoi se face experimentul cu
lichidul cu tensiunea superficial necunoscut. Mrimile referitoare la apa distilat sunt
indicate prin indicele 0. Se mpart formulele scrise pentru cele dou lichide membru cu
membru, astfel:
=gV/(2rn)
0=0gV/(2rn0)
0=0,073 N/m
/0= n0/0n
De unde se determin tensiunea superficial a lichidului necunoscut:

= 0

n0
0 n

Materiale necesare:
- Stalagmometru
- Lichidul de cercetat
- Lichidul de referin (ap distilat)
- Pahare Berzelius

50

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

- Densimetru
Descrierea aparatului:
n Fig. 34 este prezentat stalagmometrul Traube. Acesta are forma unui tub de sticl
cu un balon ncadrat ntre dou repere pentru a delimita volumul de lichid care se scurge la
captul inferior al tubului sub form de picturi.

Fig. 35 Pictura se
desprinde atunci cnd
greutatea ei depaete fora
de tensiune superficial

Fig. 34 Stalagmometrul Traube


Pentru lichidul de referin i cel de cercetat se vor determina:
Echivalentul stalagmometric (numrul de diviziuni
corespunztor unei picturi de lichid);
Numrul de picturi cuprinse ntre dou repere.

ale

stalagmometrului

Determinarea echivalentului stalagmometric


1. Capul stalagmometrului se introduce ntr-un pahar, care conine lichidul de referin i se
aspir lichid pn la umplerea lui;
2. Se scoate stalagmometrul din pahar, apoi se scurge o pictur;
3. n momentul n care se desprinde pictura se citete i se noteaz diviziunea pn la care
ajunge lichidul;
4. Se scurge urmtoarea pictur i se noteaz diviziunea care indic noul nivel al lichidului
din stalagmometru;
5. Numrul de diviziuni dintre cele dou scurgeri reprezint echivalentul stalagmometric al
lichidului (e).

51

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Exemplu : n momentul desprinderii primei picturi meniscul lichidului se afl n dreptul


diviziunii 15, iar n momentul desprinderii celei de-a doua picturi meniscul lichidului se afl
n dreptul diviziunii 33. Echivalentul stalagmometric al lichidului este 18 diviziuni, deci o
diviziune reprezint 1/18 dintr-o pictur de lichid.
Observaie:
Pentru precizia rezultatului, se recomand determinarea echivalentului stalagmometric prin
numrarea diviziunilor ce corespund la 10 picturi. Valoarea echivalentului stalagmometric
se va obine prin mprirea numrului de diviziuni la 10.
Determinarea numrului de picturi cuprins ntre dou repere
1. Lichidul este determinat s urce n tub prin aspirarea aerului din tub cu ajutorul unei pare
de cauciuc, dup ce s-a scufundat extremitatea inferioar a tubului ntr-un pahar cu lichidul
de studiat. Dupa ce lichidul a umplut balonul se scoate tubul din paharul cu lichid i se las
lichidul din tub s picure napoi n pahar. Se numr picturile care corespund volumului de
lichid V.
2. Se repet msurtoarea de 10 ori i se face media.
3. Se repeta experimentul cu lichidul de referin (apa distilat).
4. Dup ce s-au numrat picturile lichidului de referin i ale celui pentru care trebuie
calculat coeficientul de tensiune superficial, se nlocuiesc datele experimentale n formul,
obinnd astfel valoarea cautat pentru coeficientul de tensiune superficial necunoscut.

52

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

DETERMINAREA COEFCIENTULUI DE VSCOZITATE RELATIVA A LICHIDELOR


1. Scopul lucrarii
Folosind vscozimetrul Ostwald se va determina coeficientul de vscozitate relativ
n raport cu apa a unor soluii.
2. Principiul lucrarii
Pentru a a descrie rezistena fluidelor la curgere se folosete mrimea fizic numit
vscozitate. Fluidele opun rezisten la micarea obiectelor imersate n fluid, dar i la
micarea straturilor de fluid, care au viteze diferite ntre ele. Pentru un lichid aflat n curgere
laminar ntr-un tub de curent (Fig. 36), fora de frecare vscoas este definit drept fora de
frecare intern dintre straturile moleculare ale lichidului, care alunec unele pe suprafaa
celorlalte i se exprim prin formula:

F = A

v
r

unde A este aria lateral a straturilor n contact (aria lateral a cilindrului),

v
este numit
r

gradientul transversal al vitezei iar este un coeficient de proporionalitate caracteristic


fiecrui lichid, numit coeficient de vscozitatea absolut sau dinamic.

Figura 36
Ca mrime vectorial fora de vscozitate are direcia tangent la straturile de lichid
i sensul opus micrilor relative ale straturilor de lichid ntre ele. Coeficientul de vscozitate
poate fi obinut din formula forei de vscozitate:

F
v
A
r

adic este egal cu fora de frecare dezvoltat ntre dou straturi n micare ale unui lichid cu
suprafaa de 1m2 i un gradient de vitez de 1m/s. Coeficientul de vscozitate se msoar
n SI n Nm-2 s-1. Aceast unitate de msur se numete pascal secunda [Pas] i este
folosit rar. Poise-ul [P] este unitatea de msura folosit n tehnic i tiin, dup numele
fiziologului francez Jean Louis Poiseuille.
1 pascal secund (Ps)= 10 poise (P)
Distribuia vitezelor ntr-un fluid vascos n curgere laminar printr-un tub este conform
figurii 37:

Fig. 37 Distributia vitezelor straturilor adiacente de fluid in curgere laminara


Conform legii Poisseulle Hagen debitul volumic Q =

V
cu aceast distribuie de viteze va
t

avea expresia:

53

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

p R 4
t
=
Q=
8 l
V
din care se poate calcula coeficientul de vscozitate:

p R 4 t
=

8l
V
Se poate aprecia de cte ori este mai vscos un lichid dect apa cu ajutorul
vscozitaii relative definit prin raportul dintre vscozitatea lichidului cercetat i vscozitatea
apei:

r =

l
0

n tabelul de mai jos sunt date vscozitile ctorva substane cunoscute.


Vscozitaile unor substane
Substana
T (C)
Alcool etilic
20
Alcool izopropilic
20
Alcool metilic
20
Snge
37
Ser sanguin
37
Urina
37
Glicerina
40
Mercur
15
Lapte
25
Ulei
20
Ap
0
Ap
20
Ap
40
Ap
100
Aer
15
Hidrogen
0
Azot
0
Oxigen
0
Sticla la temperatura camerei
Sticla la temperatura de topire

(mPas)
1.1
2.4
0.59
3-4
1.21-2.14
1-1.14
280
1.55
3
84
1.79
1.00
0.65
0.28
17.9
8.42
16.7
18.1
1018 - 1021
1012.4

Factorii care influeneaz vscozitatea i importana vscozitaii


9 Vscozitatea este o caracteristic de material. Vscozitatea apei la 20 C este 1.0020
mPas. Cele mai multe lichide au vscozitatea cuprins ntre 1 si 1000 mPas, iar gazele
au vscozitatea ntre 1 si 10 Pas. Experimental se constat c vscozitatea variaz cu
temperatura. Pentru lichidele simple vscozitatea scade cu creterea temperaturii
(pentru ca forele intermoleculare sunt mai slabe cnd temperatura este mai mare din
cauza micarii de agitaie termic). Vscozitatea gazelor crete cu temperatura
deoarece crete numrul de ciocniri dintre molecule i dezordinea micrii moleculare
devine mai mare.
9 Vscozitatea este n mod normal independent de presiune, dar vscozitatea lichidelor
la presiuni extreme crete (apa devine un gel la presiuni foarte mari). Vscozitatea
gazelor este aproape independent de presiune i densitate.
9 Unele geluri au proprietatea de a se lichefia atunci cand sunt agitate, proprietate numit
de tixotropie (de exemplu ketchup-ul). Vscozitatea fluidelor tixotropice scade pna la o
valoare constant atunci cnd sunt agitate. Alte substane au proprietatea de a deveni
mai vscoase pe msur ce sunt agitate (sunt reopectice), de exemplu cleiurile.

54

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

9 Vscozitatea lichidelor este cu cteva ordine de mrime mai mare dect vscozitatea
gazelor.
9 n mecanica fluidelor se folosete numrul Reynolds definit ca raportul dintre fora de
inerie i fora de frecare vscoas. n funcie de valoarea sa se clasific domeniile de
curgere n: curgerea laminar pentru valori mici ale numrului Reynolds (pn la 2000),
ntre 2000 i 3000 nu este definit domeniul de curgere i la valori mari ale numrului
Reynolds (peste 3000) curgerea se consider turbulent.
9 Vscozitatea lichidelor din organismului uman este important pentru existena acestuia.
Vscozitaile relative in raport cu apa ale principalelor lichide biologice sunt:
Snge
3,9-4,6
Ser sanguin
1,21-2,14
Lichid cefalo-rahidian
1,014
Urina
1-1,14
Vscozitaile relative ale acestor lichide variaz cu vrsta. De exemplu vscozitatea sngelui
uman variaz astfel:
0-10 ani
3,9
35-50 ani
4,9
50-80 ani
4,6
Exist stri patologice provocate de creterea vscozitii sngelui, determinat de
creterea proteinelor serice, aa cum se ntlnete n sindromul hipervscozitii.
Vscozitatea sngelui este mrit i n alte boli de snge precum policitemia. In anemii
vscozitatea este redus. Vscozitatea sngelui este determinat de hematocrit (Ht),
proteinemie, temperatur.
3. Mod de lucru
n lucrarea de laborator se face determinarea vscozitaii unui lichid cu ajutorul
vscozimetrului Ostwald, folosind legea Poisseulle Hagen care stabilete debitul volumic al
unui lichid ce se scurge printr-un tub capilar sub aciunea presiunii hidrostatice

p = gh

Din aceasta lege s-a dedus coeficientul de vscozitate al lichidului cercetat:

ghR 4 t
l =

8l
V
unde: este densitatea lichidului;
g este acceleraia gravitaional;
h este diferena de nivel a lichidului n cele dou ramuri;
R este raza capilarului;
l este lungimea tubului capilar;
V este volumul balonului.
Mrimile legate de geometria tubului (h, l, V) pot fi obinute realiznd experimentul cu
ap distilat, pentru care se cunoate coeficientul de vscozitate (la temperatura camerei
t=260 C vscozitatea apei este 0 = 0,887 10 3 Ns / m 2 = 0,887 mP ):

0 =

0 ghR 4 t

8l
V

Vscozitatea relativ a lichidului cercetat este:

r =

l
t
=
0 0 t 0

Msurnd pe rnd timpii de scurgere ai lichidului i apei prin tub i cunoscnd


densitaile lichidului i apei, se calculeaz vscozitatea absolut a lichidului.

l = r 0 = r

t
0 t 0

55

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Descrierea dispozitivului experimental

Figura 38. Vscozimetrul Ostwald


Materiale necesare
- Vscozimetrul Ostwald
- Cronometru
- Pahare Berzelius
- Densimetru
- Soluii de cercetat
n Fig. 38 se prezint vscozimetrul Ostwald. Acesta este un tub de sticl n form de
U cu dou baloane de sticl pe fiecare ramur, la nlimi diferite. Una din ramuri este mai
larg i are balonul n partea inferioar iar cealalt ramur, care este realizat dintr-un tub
capilar, are balonul n partea superioar. n partea superioar a tubului capilar se gsete o
par de cauciuc pentru aspirarea lichidului n balon.
Se vor urma etapele:
1. Se spal vscozimetrul Ostwad cu ap distilat i se usuc.
2. Se toarn lichidul de cercetat prin ramura mai larg pna ce se umple tubul cu lichid
pna la un nivel situat ntre cele dou baloane.
3. Se aspir lichidul n balonul superior cu ajutorul parei de cauciuc, apoi este lsat liber s
se scurg n ramura cealalt.
4. Se msoar cu ajutorul cronometrului timpul de scurgere t a lichidului din balonul
superior ntre cele doua repere de pe sticl.
5. Se repet experimentul cu ap distilat, msurnd timpul de scurgere t0.
6. Se determin densitile lichidului i apei distilate cu densimetrul i apoi se calculeaz
r si l .

56

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

MODIFICAREA CONDUCTIVITII ELECTRICE


A UNEI SOLUII N TIMPUL PROCESULUI DE DIFUZIE
1. Scopul lucrrii
Se msoar conductivitatea electric a unei soluii de NaCl i se urmrete variaia
sa n timpul difuziei ionilor Na+ i Cl- printr-o membran permeabil ce separ dou
compartimente n care se afl soluii de NaCl cu concentraii diferite.
2. Principiul lucrrii
Conductivitatea electric a unui material conductor reflect abilitatea acestuia de a
conduce curentul electric. Spunem c un conductor avnd lungimea de 1 m i aria seciunii
de 1 m2 are conductivitatea de 1 -1m-1 dac aplicnd o tensiune de 1 V la capetele sale,
prin conductor va circula un curent electric de intensitate 1 A. Relaia care definete
conductivitatea electric a unui material conductor este urmtoarea:

1 l

R S

unde R este rezistena electric a materialului, l este lungimea conductorului, iar S aria
seciunii acestuia.
n cazul unei soluii, aceasta va conduce curentul electric cu att mai bine cu ct
numrul de ioni din soluie va fi mai mare, deci conductivitatea soluiei crete odat cu
concentraia sa.
Dispozitivul experimental cuprinde o cuv cu dou compartimente separate de o
membran permeabil la ionii substanei dizolvate n soluie (NaCl) i un sistem de
componente electrice (fire conductoare, rezistene electrice, surs de tensiune alternativ),
ca n Fig. 39.

Fig. 39 Schema punii Kohlrausch


n cele dou compartimente ale cuvei se pun soluii cu concentraii diferite: c1 = 1/20
N n compartimentul C1 i c2 = 1/30 N n compartimentul C2. Datorit diferenei de
concentraie dintre cele dou soluii, ionii Na+ i Cl- vor migra prin membrana permeabil,
dinspre soluia mai concentrat spre soluia mai diluat. Sensul fluxului de difuzie va fi deci

57

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

dinspre C1 spre C2. Ca urmare, concentraia ionilor n soluia din C2 va crete n timpul
difuziei, deci conductivitatea soluiei din C2 crete, iar rezistena electric scade n timp. La
nceput, diferena de concentraie dintre soluii este cea mai mare i de aceea difuzia este
foarte rapid. n timpul difuziei, aceast diferen se micoreaz din ce n ce mai mult, ca
urmare difuzia devine din ce n ce mai lent. Procesul de difuzie nceteaz atunci cnd
concentraiile ambelor soluii devin egale (se atinge starea de echilibru). Deci, dup un timp
suficient de lung, conductivitatea i rezistena electric a soluiei din C2 nu se mai modific
(rmn constante, atingnd valoarea de echilibru).
Cu ajutorul circuitului electric reprezentat mai sus se msoar rezistena electric R a
coloanei de lichid cuprinse ntre cei doi electrozi, astfel nct n ecuaia de mai sus, aplicat
la acest caz particular, l reprezint distana dintre electrozi, iar S suprafaa electrozilor.
n dispozitivul experimental se folosete o surs de curent alternativ pentru a evita
depunerile de substan pe electrozi prin procesul de electroliz n curent continuu (n acest
caz ar exista pierderi de ioni din soluie i nu s-ar putea urmri procesul real de difuzie).
Pentru a msura rezistena soluiei din cuv se folosete metoda Kohlrausch: se
variaz poziia punctului C pe conductorul AB pn cnd se obine echilibrul punii. Pentru
aceasta se variaz poziia cursorului pe dispozitivul indicator pan cnd valoarea curentului
I5, citit cu ajutorul unui ampermetru, devine minim. Dei, teoretic, aceasta ar trebui s fie
zero la echilibru, n practic nu se obine cu exactitate poziia punctului C corespunztoare
echilibrului, iar n plus dispozitivul de msur, nefiind legat la pmnt, msoar tensiuni
reziduale de pe firele de legtur.
n condiiile de echilibru al punii se determin valoarea raportului l4/l3 al lungimilor
segmentelor AC i CB ale firului conductor AB, conform figurii:

Fig. 40
Valoarea rezistenei fixe R2 este cunoscut.
Se poate arta c la echilibrul punii

Rsol R4
=
.
R2
R3

ntruct rezistena unui conductor de lungime l este direct proporional cu l, obinem

Rsol = R2

l4
,
l3

deci,

Rsol = R2

n
100 n

Cunoscnd valoarea rezistenei soluiei (Rsol) i cea a unei soluii etalon (Re) se poate
determina conductivitatea soluiei, sol.
Ca soluie etalon se folosete o soluie de KCl 1/20 N avnd conductivitatea e =
0.058 -1m-1, pentru care se determin rezistena Re prin metoda Kohlrausch.
Deoarece distana dintre electrozi (l) i suprafaa acestora (S) nu depind de natura
soluiei din compartimentul C2, mrimea
K = l/S

58

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

este specific cuvei C2, fiind denumit constanta celulei de conductivitate, care nu depinde
de natura sau concentraia soluiilor din cuve. Rezult

K = e Re = sol Rsol
deci:

sol =

K
Rsol

3. Mod de lucru
1. Se realizeaz circuitul electric conform Fig. 39.
2. Se noteaz pe caiet valoarea rezistenei fixe R2 care a fost folosit.
3. Se introduce soluie de KCl 1/20 N n compartimentul C2 al cuvei. Se determin rezistena
Re a acestei soluii etalon, prin metoda Kohlrausch. Se pornete sursa de tensiune i se
rotete butonul de reglare a poziiei cursorului pn cnd ampermetrul indic o valoare
minim. Se noteaz valoarea ne indicat de cursor pe scala gradat. Se golete cuva.
4. Se calculeaz rezistena soluiei etalon: Re = R2

ne
.
100 ne

5. Se calculeaz constanta celulei K = e Re folosind valoarea e = 0.058 -1m-1.


6. Se introduce soluie de NaCl 1/20 N n compartimentul C1 i soluie de NaCl 1/30 N n
compartimentul C2.
La diferite momente t = 0, 2, 4 min., se determin rezistena Rsol prin metoda
Kohlrausch: se noteaz valoarea n indicat de cursor n poziia de echilibru a punii i se
calculeaz Rsol = R2

n
K
. Apoi se calculeaz conductivitatea sol =
.
100 n
Rsol

7. Se continu msurtorile pn cnd se obine starea staionar (adic valoarea sol nu se


mai modific).
8. Se completeaz tabelul de mai jos cu valorile obinute:
t (min.)
n
sol (-1m-1)
Rsol ()
0
2
4
...
9. Se reprezint grafic sol (t).
La momentul t = 0, conductivitatea soluiei din cuva C2 este minim, apoi ncepe s
creasc n timpul difuziei. Creterea este cea mai rapid la nceput, apoi devine din ce n ce
mai lent. Dup un timp suficient, se atinge o valoare constant att pentru Rsol ct i pentru
sol. Ca urmare, se obine o dependen sol (t) de forma:

Fig. 41 Variatia in timp a conductivitatii

59

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

ELECTROCARDIOGRAMA
1. Scopul lucrarii
Const n nregistrarea unei electrocardiograme folosind computerul.
2. Principiul lucrrii
Electrocardiograma este nregistrarea grafic a activitii electrice a muchiului
cardiac. n timpul unui ciclu cardiac, fibrele musculare ce compun cele dou atrii i cei doi
ventriculi sunt activate ntr-o manier specific, ordonat, ce are ca rezultat funcionarea
normal a inimii. n fiecare moment, activitile electrice ale tuturor acestor fibre se compun
vectorial i dau ca rezultant vectorul cardiac, ce caracterizeaz activitatea miocardului din
momentul respectiv. nregistrarea electrocardiografic a acestui vector rezultant este foarte
important din punct de vedere medical, deoarece poate da informaii despre:
- orientarea anatomic a cordului,
- dimensiunea relativ a atriilor i a ventriculilor,
- tulburri de conducere i de ritm cardiac,
- prezena i localizarea ischemiei miocardului,
- efecte datorate concentraiei modificate a electroliilor,
- influena anumitor medicamente.
Activitatea electric a cordului poate fi nregistrat, ca orice semnal electric, cu
ajutorul electrozilor. Aceti electrozi se plaseaz pe suprafaa corpului i nregistreaz la
nivelul tegumentelor variaiile cmpului electric creat de miocard.
Prin urmare,
electrocardiograma va reprezenta nregistrarea proieciei vectorului rezultant pe anumite
drepte de referin (axe de derivaie), determinate de poziia electrozilor respectivi.
Aparatul utilizat pentru nscrierea electrocardiogramei se numete electrocardiograf.
Odat cu construirea primului electrocardiograf, n 1903, Einthoven a stabilt primul sistem de
derivaii. El a realizat cel mai simplu circuit nchis, un triunghi echilateral (triunghiul lui
Einthoven), plasnd electrozii pe umrul drept, pe umrul stng i n regiunea pubian (fig.
1a). n acest circuit nchis se poate considera c centrul electric cardiac se afl n centrul
triunghiului i c cei trei electrozi sunt plasai la distan egal de cord. Acest sistem de
electrozi nregistreaz proiecia n plan frontal a vectorului cmp electric iar diferena de
potenial dintre doi electrozi reprezint proiecia acestui vector pe linia ce unete cei doi
electrozi. Astfel au fost introduse cele trei derivaii standard, care delimiteaz triunghiul lui
Einthoven: D1, D2 i D3. Ele sunt numite derivaii bipolare deoarece fiecare utilizeaz cte
doi electrozi cu pondere egal, aflai la distan egal de cord. Convenional, D1
nregistreaz diferena de potenial B-A, D2 nregistreaz diferena de potenial C-A i D3
nregistreaz diferena de potenial C-B (Fig. 42b). Cum suma diferenelor de potenial ntre
punctele A, B i C trebuie s fie egal cu zero (conform legii a doua a lui Kirchoff), rezult
c:
D1 + D3 = D2,
relaie cunoscut sub numele de legea lui Einthoven.

60

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

D1

D2

D3

+
C

Fig. 42.a) Poziia electrozilor ce formeaz triunghiul lui Einthoven. b) Definirea


celor trei derivaii standard i a polaritii lor.
Analiza scalar a electrocardiogramei
Electrocardiograma scalar reprezint nregistrarea n timp a diferenei de potenial
dintre doi electrozi. Ea este caracterizat de segmente, deflexiuni i intervale (fig. 2). Atunci
cnd cei doi electrozi au acelai potenial, pe electrocardiogram va apare un segment (o
linie izoelectric). Cnd depolarizarea cardiac se deplaseaz ctre electrodul pozitiv, pe
electrocardiogram se va nregistra o deflexie n sus (o und pozitiv), iar cnd vectorul
depolarizare este orientat ctre electrodul negativ, pe electrocardiogram se va nregistra o
deflexie n jos (o und negativ). Intervalele reprezint durata acestor deflexiuni i
segmente.
Activarea miocardului este realizat de stimulul produs de nodul sinusal. Acesta este
situat la jonciunea dintre atriul drept i vena cav superioar i este constituit din celule
diferite de cele ale miocardului, dotate cu cel mai nalt automatism. Aceste celule se
depolarizeaz spontan periodic (aproximativ 70/minut) si genereaz poteniale de aciune,
dup care se repolarizeaz la valorile iniiale. Potenialele astfel generate se propag n
masa atriului drept prin fasciculele internodale James, producnd depolarizarea i contracia
acestuia. Totodat, stimulul avanseaz ctre atriul stng prin fasciculul interatrial Bachman.
Datorit vitezei mari cu care este transmis excitaia electric (0,8-1 m/s), cele dou atrii
sunt activate aproape simultan.
Depolarizrii atriale i corespunde pe electrocardiogram unda P. Ea este, n mod
normal, monofazic, avnd o form rotunjit, o durat de 0,08-0,11s i o amplitudine de 0,10,25mV. Schimbri ale acestor parametri pot semnala stri patologice. O und P bifid, cu
o durat mai mare, se ntlnete n cazul hipertrofiei atriale stngi iar o und P ascuit, cu o
amplitudine crescut dar cu o durat normal, se ntlnete n cazul hipertrofiei atriale
drepte.
Depolarizarea atriilor este urmat de repolarizare. Spre deosebire de depolarizare,
ns, repolarizarea atriilor, lipsit de energia imprimat de stimul, se desfoar lent i
genereaz poteniale electrice foarte slabe. Aceste poteniale nu se nregistreaz practic pe
electrocardiogram dect sub forma unei linii izoelectrice.
Dup strbaterea atriilor, excitaia electric ajunge la nodul atrioventricular. Acesta
este situat ntre orificiul sinusului coronarian, septul membranos i inseria valvulei septale a
tricuspidei. Celulele acestui nod acioneaz, de asemenea, ca un generator spontan de
poteniale electrice, ns cu o frecven mai mic (aproximativ 40/minut). Centrul cu
frecvena mai mare (nodul sinusal) l depolarizeaz pe cel cu frecvena mai mic (nodul

61

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

atrioventricular), impunndu-i propria frecven. De la nivelul nodului atrioventricular,


depolarizarea este transmis prin intermediul fasciculului His i apoi rspndit foarte rapid
prin reeaua Purkinje n masa celor doi ventriculi, producnd contracia simultan a acestora.
Intervalul PQ este delimitat de nceputul undei P i nceputul undei Q, reprezentnd
timpul necesar ca stimulul pornit de la nodul sinusal s strbat cele dou atrii, s ajung la
nodul atrioventricular i s-l depolarizeze. Durata sa este n mod normal de 0,12-0,20s. O
prelungire acestui interval se ntlnete n cazul unor tulburri de conducere (blocaj
atrioventricular etc.).
Procesului de activare ventricular i corespunde pe electrocardiogram complexul
QRS. Acesta este alctuit dintr-o succesiune de trei unde de form triunghiular, cu pante
abrupte i unghiuri ascuite: unda Q (negativ), unda R (pozitiv) i unda S (negativ).
Complexul QRS are tipic o durat de 0,06-0,10s. Modificarea formei complexului QRS
poate indica prezena unor tulburri de conducere (bloc intraventricular) iar mrirea
amplitudinii sau a duratei lui sunt ntlnite n cazul unor hipertrofii ventriculare.
Segmentul ST este delimitat de sfritul undei S i nceputul undei T. El reprezint o
combinaie de poteniale finale de depolarizare i iniiale de repolarizare ventricular, care se
anuleaz prin nsumare, determinnd o linie izoelectric. Durata normal a intervalului ST
este de aproximativ 0,15s.
Procesul de repolarizare ventricular se desfoar lent, comparativ cu cel de
depolarizare.
Sensul de orientare al vectorului electric corespunztor repolarizrii
ventriculare este acelai ca n cazul depolarizrii ventriculare (de la endocard spre epicard).
Din aceast cauz, unda T care este nregistrat pe electrocardiogram n timpul
repolarizrii ventriculare este o deflexie pozitiv. Ea are o form rotunjit i o durat de
0,15-0,30s. n anumite stri patologice apare supradenivelarea segmentului ST i o und T
negativ (infarctul miocardic).

T
P
ST
PQ

Q
S
QRS

Fig. 43 Aspectul electrocardiogramei normale, ilustrnd cele mai importante


deflexiuni, segmente i intervale.
Analiza vectorial a electrocardiogramei
Datorit faptului c activitatea electric a cordului este o mrime vectorial, simpla
nregistrare electrocardiografic a diferenelor de potenial dintre electrozi nu este suficient
pentru determinarea acestui vector. Pe fiecare din cele trei derivaii ce constituie triunghiul
lui Einthoven se va obine o electrocardiogram.

62

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Fig. 44

Aceste electrocardiograme vor reprezenta proieciile vectorului cardiac pe cele trei


derivaii (Fig. 45) i vor fi, evident, diferite ntre ele (de exemplu depolarizarea ventricular
determin complexul QRS n D1, dar numai undele R i S sunt nregistrate n D2 i D3, cu
unda R cea mai ampl n D2). Determinarea vectorului cardiac, att ca modul dar mai ales
ca direcie (axa electric), este extrem de important. n practica medical se calculeaz:
- pentru depolarizarea atrial (reprezentat prin unda P), vectorul mediu rezultant (P) i axa
electric electric medie a activrii atriale (P),
- pentru depolarizarea ventricular (reprezentat prin complexul QRS), vectorul mediu
rezultant (QRS) i axa electric medie a activrii ventriculare (QRS),
- pentru repolarizarea ventricular (reprezentat prin unda T), vectorul mediu rezultant (T) i
axa electric electric medie a repolarizrii ventriculare (T).
Pentru obinerea unor informaii ct mai precise despre funcionarea cordului, n
practic se mai utilizeaz i alte derivaii, cum ar fi derivaiile unipolare ale membrelor,
derivaiile unipolare ale planului orizontal (precordiale) etc.

D1

D2

D3

C
Fig. 45 Vectorul cardiac i proieciile lui pe cele trei derivaii bipolare ce
delimiteaz triunghiul lui Einthoven.
3. Mod de lucru
nregistrarea electrocardiogramei se va face cu ajutorul unei interfee conectate la
computer. Aceast interfa permite achiziionarea de ctre computer a semnalelor electrice

63

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

provenite de la electrozi i afiarea electrocardiogramei pe cele trei derivaii standard. n loc


de modul de conectare al electrozilor descris de Einthoven, pentru comoditate, n practic se
prefer plasarea electrozilor pe membre (braul drept, braul stng i piciorul stng). De
asemenea, se utilizeaz i un alt electrod, legat la pmnt (plasat pe piciorul drept), pentru
eliminarea curenilor parazii, provenii de la surse de tensiune exterioare organismului.
1. Se verific conectarea interfeei la computer i se pornete computerul.
2. Programul de nregistrare a electrocardiogramei se gsete n directorul D:\CASSY i se
numete ecg.exe. Aadar, se tasteaz D: i <ENTER>, apoi se folosete comanda cd
cassy i <ENTER>. Cu ajutorul comenzilor dir/w sau dir/p se poate afia coninutul
directorului curent. Se tasteaz ecg i <ENTER> i astfel se lanseaz n execuie
programul respectiv.
3. Dup afiarea mesajelor de ntmpinare, cu tasta <ESC> se intr n meniul principal.
Diferitele opiuni se pot activa cu ajutorul tastelor <F1>-<F9> sau cu ajutorul tastelor cu
sgei urmate de <ENTER>. Tasta <F10> (Help) afieaz descrierea tuturor acestor
opiuni.
4. Cele patru benzi elastice se fixeaz strns n jurul braelor i gambelor, astfel nct
electrozii s realizeze un contact bun cu partea ventral a braelor i partea dorsal a
gambelor. Cele patru cabluri se fixeaz astfel:
- conectorul rou la braul drept,
- conectorul galben la braul stng,
- conectorul verde la gamba stng,
- conectorul negru la gamba dreapt.
5. n meniul principal, se poate modifica durata nregistrrii cu <F3> (Select measurement
time) iar amplitudinea nregistrrii se poate modifica prin schimbarea scalei cu <F2>
(Select measurement range).
6. Dup tastarea <F1> (Start measurement) este afiat meniul Select measurement
quantities, din care se poate selecta nregistrarea electrocardiogramei pe cte una din
derivaiile standard (ECGI, ECGII, ECGIII) sau pe toate trei concomitent (ECG I-III).
Tasta <F1> (Automatic) pornete nregistrarea, ce va decurge pn cnd se tasteaz din
nou <F1> (Stop). Tasta <F2> (Start) realizeaz o nregistrare numai pe durata
programat, oprirea fcndu-se automat la sfritul acesteia. Este important ca n timpul
msurtorilor s se limiteze micrile pentru a evita artefactele.
7. Dup terminarea nregistrrii electrocardiogramei, se revine n meniul principal cu tasta
<ESC>. Msurtorile pot fi salvate n directorul D:\STUD1 selectnd din meniul <F8> (Disk
operation) opiunea Save measurement.
8. Comanda <F6> (Evaluate in graph) afieaz curbele nregistrate. Tasta <F10> (Help)
afieaz detalii despre operaiunile ce pot fi efectuate.
9. Se observ undele i segmentele principale ale electrocardiogramei. Se msoar
duratele acestora precum i duratele intervalelor PQ, QT i ST. Se msoar amplitudinile
undelor P, R i T i se noteaz dependena acestor amplitudini de derivaia pe care au fost
nregistrate.

64

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

DETERMINAREA COEFICIENTULUI DE ATENUARE AL UNOR ECRANE DE


PROTECIE MPOTRIVA RADIAIEI
1. Scopul lucrrii
Scopul lucrrii de fa este studierea atenurii radiaiilor prin diverse materiale, prin
calcularea coeficientului de atenuare liniar .
2. Principiul lucrrii
Sursele radioactive sunt tot mai des ntlnite i, n afara surselor de radiaii X i
folosite pentru diagnostic i terapie i activitii unor produi naturali ca Ra i Rd, sunt
reprezentate de reactoare nucleare, acceleratoare de particule, surse de cobalt i cesiu
pentru terapia cancerului precum i de ali produi de uz medical i industrial.
Radiaiile ionizante (X, , , , neutroni) acioneaz prin mecanisme directe i
indirecte producnd leziuni biochimice ce genereaz o serie de modificri histologice diferite
funcie de doza i timpul expunerii. Efectul biologic al aceleiai doze este dependent de rata
administrrii: o singur doz administrat rapid poate fi fatal, n timp ce aceeai doz
administrat n sptmni sau luni poate fi tolerat fr nici un efect msurabil.
n mod obinuit iradierea medical este mai mic dect 0 ,05 Gy (frecvent <0,01 Gy),
iar cea natural 1-2 mGy/an, nivel fr efecte msurabile asupra organismului.
Probabilitatea unui efect crete cu doza total i rata administrrii, ea fiind foarte mare dac
doza administrat depete civa Gy. Doze foarte mari produc necroze tisulare. Doze mari
dar subletale interfer cu proliferarea celular, scad numrul mitozelor, duc la hipoplazie,
atrofie, eventual fibroz (unele celule sunt capabile nc de mitoze, dar pot produce celule
anormale una-dou generaii pn mor).
Aria expus iradierii este, de asemenea, important: doze administrate uniform
ntregului corp de pn la 2 Gy nu au efect letal, la 4,5 Gy mortalitatea este de 50%, iar
peste 6 Gy decesul este aproape sigur. n acelai timp zeci de Gy aplicai n perioade lungi
de timp (de exemplu n terapie) pot fi tolerai cnd sunt iradiate volume limitate ale corpului.
Distribuia dozei administrate este de asemenea important: prin folosirea unor
ecrane protectoare, plasarea sursei n interiorul tumorii sau iradierea din mai multe direcii
convergente n zona acesteia se ncearc protejarea zonelor radiosensibile.
Radiosensibilitatea esuturilor scade n ordine de la stnga la dreapta astfel: esutul
limfoid gonade mduva roie epiteliul digestiv epiderm esut hepatic epiteliul
alveolar epiteliul renal celule endoteliale (pleur, pericard) celule nervoase celule
osoase muchi, esut conjunctiv.
n tabel sunt enumerate principalele manifestri clinice ale iradierii:
Efecte acute >30 Gy: predomin sindromul cerebral (fatal): grea, vom, tremor, convulsii
(imediate)
>4 Gy: sindrom gastrointestinal (deces n cteva ore): grea, vom, diaree,
deshidratare, colaps
2-10 Gy: sindrom hematopoetic: sngerri, anemie, susceptibilitate la infecii
Ru de iradiere (dup radioterapie, n special abdominal): grea, diaree,
anorexie, dureri de cap, tahicardie

Efecte
Expunere prelungit/repetat la doze mici: amenoree, infertilitate, anemie,
intermediare leucopenie, trombocitopenie, cataract
Doze mai mari, localizate: cderea prului, atrofia pielii, keratosis. Injurii de
organ apar mai frecvent dup depirea dozelor n radioterapie: pneumonie de
iradiere, deteriorarea funciei renale, miopatii, mielopatii, fibroze, ulcere
cronice, perforaii intestinale.
Efecte
Somatice:cancer de tiroid, piele, os, leucemii
tardive
Genetice: mutaii transmise urmailor

65

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Actualmente, radiaiile ionizante au aplicaii multiple n medicin: radiodiagnostic,


radioterapie, sterilizare. Este necesar monitorizarea atent att a pacienilor ce beneficiaz
de aceste aplicaii (exist protocoale ce stabilesc doza total, doza aplicat la o singur
edin, intervalul dintre edine etc.) ct i a personalului medical.
Cel mai bun mod de a ne proteja fizic mpotriva radiaiilor ionizante exterioare este s
evitm zonele n care se gsesc astfel de surse de radiaii. n situaia n care acest lucru nu
este posibil (anumit personal medical), va trebui s utilizm ecrane de protecie. Aceste
ecrane de protecie interacioneaz cu radiaiile ionizante, atenundu-le i astfel diminueaz
cantitatea de radiaii ce ajunge la corpul nostru.
Pentru protecia mpotriva radiaiilor ionizante, n mod uzual se folosesc diferite
ecrane, n funcie de tipul radiaiei:
- (nuclee de heliu) - sunt suficieni civa centimetri de aer sau o foaie de hrtie.
- (electroni) - sunt suficiente ecrane din metale uoare (aluminiu, cupru), plastic (plexiglas),
sticl.
- Fotoni sau X - de obicei se utilizeaz ecrane din plumb.
- Neutroni (n special cei produi n reactoarele nucleare) - se utilizeaz mai multe ecrane,
primul din ap grea (pentru ncetinirea lor), apoi un ecran din cadmiu (cu care neutronii
interacioneaz prin reacii nucleare, producnd, printre altele, fotoni - pe care apoi i
atenum utiliznd ecrane din plumb).
La trecerea unui fascicul de radiaii printr-un anumit material, intensitatea fasciculului
incident scade conform urmtoarei legi de atenuare:

I = I 0 e d
unde:
- I0, I reprezint intensitatea fasciculelor de radiaii incident respectiv emergent.
- reprezint coeficientul de atenuare liniar a radiaiei (depinde de natura materialului din
care este alctuit ecranul dar i de natura i energia radiaiei).
- d reprezint distana parcurs de radiaie prin material.
Avnd n vedere c intensitatea fasciculului depinde direct proporional de numrul
de particule nregistrat de detector:
N=g I,
unde g este un factor ce depinde de caracteristicile geometrice ale detectorului i de distana
detector-surs, formula de mai sus este echivalent cu urmtoarea:

N = N 0 e d
unde:
- N0, N reprezint numrul de particule incidente respectiv emergente.
3. Mod de lucru
n prezenta lucrare se folosesc surse - radioactive, ecrane sub forma unor plcue
de cupru, aluminiu, plumb i plastic, precum i un detector de radiaii conectat la un
computer.
Sursele radioactive se prezint sub forma unor plcue metalice sau recipiente
metalice discoidale, de mici dimensiuni, n interiorul crora se afl radioizotopii. Sursele
radioactive sunt pstrate n recipiente din plumb iar cele n containere de plexiglas.
Detectorul de radiaii utilizat n prezenta lucrare este contorul Geiger-Mller. El d
informaii despre intensitatea radiaiilor ce provin de la o anumit surs radioactiv prin
nregistrarea ionilor produi de radiaie n gazul din interiorul detectorului.
Computerul, care ndeplinete funcia de numrtor de particule (un dispozitiv
electronic ce numr impulsurile electrice provenite de la detectorul de radiaii).
Numrtoarele de particule au diverse reglaje, putnd realiza numrarea particulelor pe
diferite perioade de timp i putnd stabili un prag de energie de la care particulele s fie
nregistrate.

66

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Rata de numrare va consta dintr-un anumit numr de pulsuri nregistrate ntr-un


anumit interval de timp. Rata de numrare nu este ntotdeauna aceeai, datorit faptului c
dezintegrarea radioactiv este un fenomen statistic, aleator. Din aceast cauz, va trebui s
facem mai multe msurtori i apoi media acestora.
Se vor urma etapele:
1. Se verific conectarea interfeei la computer i se pornete computerul.
2. Se lanseaz n execuie programul poisson.exe, ce se gsete n folderul CASSY.
3. Dup afiarea mesajelor de ntmpinare, cu tasta <ESC> se intr n meniul principal.
Diferitele opiuni se pot activa cu ajutorul tastelor <F1>-<F9> sau cu ajutorul tastelor cu
sgei urmate de <ENTER>. Tasta <F10> (Help) afieaz descrierea tuturor acestor
opiuni. n meniul principal, se poate modifica intervalul de timp pentru numrarea pulsurilor
cu <F3> (Select gate time), care se va fixa la 10s. Numrul maxim de msurtori efectuat
(n) i numrul maxim de pulsuri nregistrate n msurtori (x) se poate schimba cu <F4>
(Select max n and x). Se vor face cte zece msurtori (n=10).
4. Se msoar fondul natural de radiaii (n mediul nconjurtor exist n permanen radiaii,
ns n limite care nu afecteaz n mod normal negativ organismul), 10 msurtori a cte
10s fiecare, obinndu-se astfel Nfn, ce se va scdea din toate msurtorile ulterioare.
5. Dup tastarea <F1> (Start new measurement) este afiat graficul care reprezint
numrul de pulsuri (x) nregistrat la fiecare msurtoare. Tasta <F1> (Start/Stop after 10
measurements) pornete nregistrarea, ce va decurge pn cnd s-au efectuat cele 10
msurtori.
6. Se revine n meniul principal cu tasta <ESC>. Comanda <F6> (Evaluate in graph)
afieaz msurtorile. Cu tasta <F4>, computerul marcheaz pe grafic media msurtorilor
i cu <ALT> <F4> computerul calculeaz aceast medie. Astfel se obine Nfn.
7. Se aeaz sursa radioactiv sub detectorul de radiaii astfel nct distana surs-detector
s fie de 2-3 cm (poziia sursei i a detectorului nu vor fi modificate n msurtorile
ulterioare). Se msoar radiaiile fr ecran, ca la pasul precedent, obinndu-se astfel N0.
Din N0 se scade fondul natural de radiaii Nfn, obinndu-se astfel N0 ef.
8. Se msoar radiaiile cu ecrane de diverse grosimi (care se obin prin suprapunerea
ecranelor din acelai material), obinndu-se astfel Ni. Dup efectuarea celor 10 msurtori
pentru fiecare grosime de material, din rezultatul final pentru respectiva grosime se scade
fondul natural de radiaii Nfn, obinndu-se astfel Ni ef.
9. Pentru fiecare grosime a ecranului, folosindu-se valorile N0
coeficientul de atenuare liniar i, folosind formula:

ln

N ief
N 0ef

ef

i Ni ef, se calculeaz

= d

10. Din valorile lui i pentru diferite grosimi ale ecranului se calculeaz , care reprezint
coeficientul de atenuare liniar pentru materialul respectiv. Coeficientul de atenuare liniar
este o constant de material.
Rezultatele se trec ntr-un tabel, conform modelului prezentat mai jos.

Fr
ecran

Material

Grosime
(m)

N0

d=0

N0 =

N 0 N f = N 0 ef

67

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Material

Material

Grosime
(m)
di

N1-1 =

di

N2-1 =

...

Ni-j

Nf

N i N f = N ief

...

Se poate calcula eficacitatea


11. Se reprezint grafic curba N = N (d ) (Fig.
ecranului,
folosind formula:
46). Se va obine o funcie exponenial
N 0 ef N def
descresctoare.

E=

Fig. 46 Scderea exponenial a numrului de


particule emergente funcie de grosimea
ecranului strbtut

N 0ef

100

obinndu-se un numr ce indic


procentul din radiaiile incidente care
sunt oprite de ecran. Se vor compara
eficacitile diferitelor ecrane.
De asemenea, de pe grafic se
poate obine grosimea ecranului la care
cantitatea de radiaii se reduce la
jumtate (d1/2).
Din grosimea de njumtire
(d1/2) se poate calcula coeficientul de
atenuare al materialului respectiv fa de
radiaiile utilizate conform relaiei:

ln 2
d1 / 2

68

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

DETERMINAREA COMPUTERIZAT A TENSIUNII ARTERIALE I A PULSULUI


CARDIAC
1. Scopul lucrrii
n cadrul acestei lucrri experimentale, se vor nregistra cu ajutorul computerului
tensiunea arterial i pulsul cardiac.
2. Principiul lucrrii
Pulsul i tensiunea arterial sunt manifestri ale activitii mecanice a inimii,
depinznd totodat i de starea patului vascular.
Presiunea arterial poate msurat direct sau indirect, modul direct implicnd
introducerea n arter a unui cateter prevzut cu un manometru. Se obine o curb de
variaie a presiunii n timp (Fig. 47).

Fig. 47 Variaia n timp a presiunii arteriale

Poriunea ascendent a curbei ncepe odat cu deschiderea valvei aortice i


corespunde ptrunderii sngelui n artere (energia potenial nmagazinat prin destinderea
pereilor elastici arteriali va fi transmis coloanei sangvine n diastol). La sfritul sistolei
ventriculare presiunea scade, revine puin n momentul nchiderii valvei aortice i scade
treptat pn la un minim numit presiune diastolic. Depresiunea dinaintea nchiderii valvei
aortice reprezint incizura dicrot. Metoda se folosete rar, n serviciile de terapie intensiv
i atunci mai ales pentru msurarea presiunilor n circulaia pulmonar.
Metodele indirecte (palpatorie, auscultatorie, precum si cea oscilometric) utilizeaz
un manon pneumatic nfurat fie pe bra, fie pe ncheietura minii sau pe deget i
conectat la un manometru.
Metoda auscultatorie const n auscultarea (cu ajutorul unui stetoscop) a
zgomotelor produse n vecintatea n vecintatea unei artere situate sub manon,
concomitent cu varierea presiunii aerului n manon. Cnd presiunea n manon este mai
mare dect presiunea sistolic, lumenul arterei brahiale este complet nchis datorit presiunii
exterioare i nici un zgomot nu este auzit. Cnd presiunea aerului devine mai mic dect
presiunea sistolic i mai mare dect cea diastolic apar deschideri (n timpul sistolei
ventriculare) de scurt durat ale lumenului vascular; zgomotele auzite se datoreaz
vrtejurilor aprute n coloana de snge care trece printr-un lumen ngustat, precum i
vibraiilor peretelui arterei brahiale silite s se deschid i s se nchid succesiv. Cnd
presiunea aerului din manon devine egal sau mai mic dect presiunea diastolic, artera
nu se mai nchide (nici mcar n diastol) iar zgomotele dispar.
Practic, dup ce este plasat pe braul pacientului, manonul este umflat cu aer
(folosindu-se n acest scop o par din cauciuc) pn ce presiunea citit pe manometru este
cu aproximativ 20 mm Hg peste valoarea la care zgomotele n stetoscop au disprut, apoi
aerul este lsat s ias (lent). n momentul apariiei primelor zgomote pe manometru se
citete presiunea sistolic, iar n momentul dispariiei lor se citete presiunea diastolic.

69

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Fig. 48 Variaia presiunii aerului din manon


Metoda palpatorie este asemntoare, dar urmrete momentul apariiei pulsului la
nivelul arterei brahiale n timpul decomprimrii treptate a aerului din manon. Presiunea citit
pe manometru n acest moment corespunde presiunii arteriale sistolice (metoda nu permite
determinarea valorilor diastolice).
Metodele (semi)automate folosesc n locul stetoscopului un traductor
mecanoelectric (de exemplu, un cristal piezoelectric capabil s separe pe suprafee sarcini
opuse atunci cnd este supus unei presiuni mecanice). n cazul dispozitivelor semiautomate
umflarea manonului se face manual i apoi se ateapt pn ce rezultatele sunt afiate pe
un ecran cu cristale lichide; de obicei este msurat n paralel i pulsul.

Fig. 49 Tensiometru cu mercur (stnga), tensiometru cu manometru aneroid (dreapta)

n general se folosesc dispozitive complet automate sau semiautomate (Fig. 50). n


cazul dispozitivelor semiautomate umflarea manonului se face manual i apoi se ateapt
pn ce rezultatele sunt afiate pe un ecran cu cristale lichide; de obicei este msurat n
paralel i frecvena pulsului.
Metoda d rezultate calitativ inferioare fa de cea ausculatorie, dar are avantajul c
poate fi aplicat fr ca operatorul s aib cunotine medicale, de exemplu pentru
urmrirea tensiunii arteriale la domiciliu. De asemenea, fiind complet automat, se poate
folosi pentru monitorizarea ambulatorie pe 24 de ore (informaia este stocat electronic i
poate fi ulterior prelucrat pe computer), precum i n seciile de chirurgie i terapie
intensiv.

70

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Fig. 50 Tensiometru electronic automat

Standardul de aur pentru msurarea tensiunii arteriale este manometrul cu mercur.


Alte tipuri de tensiometre trebuie calibrate periodic (cel puin anual) fa de un manometru cu
mercur.
Variaii ale presiunii arteriale:
1. Fiziologice:
- cu mrimea arterei: cu ct artera este mai mic, presiunea este, de asemenea,
mai mic (de ex. la nivelul arterei radiale presiunea este mai mic dect la nivelul arterei
brahiale);
- cu poziia corpului: este minim in poziie culcat, este mai mare n poziie
eznd i maxim n poziie ortostatic;
- n poziie ortostatic presiunea este mai mic n arterele cerebrale dect n cele
ale membrelor inferioare (ex: daca n poriunea iniial a aortei este de 120 mmHg, n
arterele cerebrale este de aproximativ 80 mmHg, iar n artera dorsal a piciorului poate
atinge 200 mmHg, pentru o persoan de nlime normal). Cauza este reprezentat de
presiunea suplimentar exercitat de coloana de snge sub aciunea gravitaiei (presiunea
hidrostatic);
- n timpul efortului fizic aerob (izotonic) crete presiunea sistolic, iar cea
diastolic rmne constant sau scade uor;
- n timpul efortului fizic anaerob (izometric) cresc ambele valori; de aceea, acest
gen de efort este, n general, contraindicat la persoane cardiace;
- stress-ul psihic poate duce la creterea presiunii arteriale;
- cu vrsta: la natere este de aproximativ 60/40 mmHg, la un an de 80/60
mmHg; presiunea arterial crete apoi, progresiv, pn la pubertate, cnd se stabilizeaz la
valorile adultului. La vrstnici presiunea normal are aceleai valori ca la adultul tnr;
- exist, de asemenea, variaii circadiene complexe ale presiunii (pe parcursul
zilei i n timpul somnului), i, de asemenea, n cursul sarcinii.
2. Patologice:
Hipertensiunea arterial este o boal cronic i se caracterizeaz prin valori mai
mari dect cele normale ale presiunii arteriale care se menin pe termen lung. n majoritatea
cazurilor, nu se cunoate cauza exact a bolii i aceasta nu poate fi vindecat definitiv,
medicaia urmrind doar reducerea valorilor presionale pe perioada tratamentului.
Reprezint, alturi de diabet, unul dintre cei mai importani factori de risc pentru infarct i
accident vascular cerebral, ceea ce este adevrat chiar pentru valori moderate (ex. 150/100
mmHg), la care pacientul nu are, de obicei, nici un fel de simptom. Tratamentul variaz de la
o simpl reducere a consumului de sare pn la asocieri complexe de medicamente
antihipertensive; acesta trebuie urmat toat viaa.
Creterile mari i rapide ale presiunii arteriale sunt, de asemenea, periculoase i
trebuie tratate agresiv.
Hipotensiunea arterial este mai puin clar definit; se consider c o persoan
este hipotensiv dac prezint simptomele caracteristice (ameeli, senzaie de lein).

71

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Acestea pot aprea chiar la scderi mici, de ex. de 20 mmHg sub valorile obinuite ale
persoanei respective, chiar dac aceste valori sunt mai mari dect normalul. De cele mai
multe ori apare datorit deshidratrii sau supradozrii tratamentului antihipertensiv. Are
frecvent caracter ortostatic (apare doar cnd pacientul se ridic din pat). Valori de 100/60
mmHg sau chiar mai mici sunt frecvent ntlnite la tineri i sunt de cele mai multe ori
normale.
Scderile mari i brute ale presiunii arteriale (astfel nct presiunea medie scade
sub 60 mmHg), nsoite de semne de hipoperfuzie (suferin a organelor datorit aportului
insuficient de snge oxigenat), poart denumirea de oc. Acesta se poate produce datorit
hemoragiei sau deshidratrii (oc hipovolemic), datorit unei reacii alergice extrem de
puternice (oc anafilactic) etc. ocul este o condiie acut, care amenin viaa pacientului i
este ntotdeauna o urgen.
Pulsul arterial poate fi simit prin compresia unei artere pe un plan profund dur i
aduce informaii att asupra activitii cardiace (frecvena, ritm, debit), ct i asupra
sistemului vascular (de exemplu asupra permeabilitaii sau elasticitii pereilor arteriali). Prin
monitorizarea pulsului cu ajutorul unui traductor electromecanic se obine o curb
(carotidogram) asemntoare cu cea obinut prin msurarea direct a tensiunii arteriale;
n Fig. 52 sunt artate carotidograma normal i modificrile ei n modificrile suferite n
cteva situaii patologice.
Pulsul hipochinetic (hipovolemii, pericardit) se caracterizeaz printr-o amplitudine
redus datorit volumului mic de snge ejectat n sistol (volum-btaie). n stenoza aortic
sever apare pulsul parvus et tardus cu amplitudine mic (volum-btaie mic) i
ntrzierea punctului maxim (pant lent ascendent) datorit obstruciei. n insuficiena
aortic, datorit volumului-btaie exagerat, exist dou vrfuri palpabile n sistol (pulsul
bisferiens); primul este datorat expulziei sngelui n aort, al doilea apare prin reflectarea
undei n periferie. n cazul cardiomiopatiei hipertrofice aspectul de puls bisferiens se
datoreaz unei scurte scderi a presiunii la mijlocul sistolei prin obstrucia cii de ejecie a
ventricului stng cauzat de contracia septului interventricular hipertofiat. Pulsul
hiperchinetic (insuficiena mitral, defect septal ventricular, persisten canal arterial,
anemie, febr) este un puls cu amplitudine mare datorit volumului-btaie crescut. Pulsul
dicrotic apare n cardiomiopatiile dilatative; exist dou unde palpabile, una n sistol i una
n diastol. n cazul pulsului alternant ntlnit n unele cazuri de insuficien ventricular
stng sever exist o alterare a amplitudinii undei pulsatile (fiecare und normal este
urmat de una cu amplitudine redus), n pofida unui ritm cardiac regulat. Sunt implicate
alterri ale contractilitii, pre- i postsarcinei ventriculare (de exemplu scderea presiunii
arteriale asociat cu o btaie slab duce la scderea a rezistenei la ejecie a ventricului
stng pentru urmtoarea btaie i viceversa).

Fig. 51 Pulsoximetru

nregistrarea automat a pulsului se face cu ajutorul unui traductor (cristal


piezoelectric) amplasat la nivelul degetului. De obicei, aceast nregistrare se face n paralel
cu msurarea saturaiei n oxigen a sngelui arterial (aparatul numit puls-oximetru) sau se
prefer urmrirea ritmului cardiac n paralel cu monitorizarea electrocardiografic.

72

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Fig. 52 Inregistrarea pulsului la nivelul carotidei. A aspect normal; B puls


hipochinetic (hipovolemii, pericardit); C - puls parvus et tardus (stenoza aortic); D
puls bisferiens (insuficiena aortic, cardiomiopatia hipertrofic); E puls hiperchinetic
(insuficiena mitral, defect septal ventricular, persisten canal arterial, anemie, febr); F
puls dicrotic (cardiomiopatii dilatative) ; G puls alternant (insuficien ventricular stng
sever
3. Mod de lucru
Se verific conectarea interfeei la calculator. Se pornete calculatorul. Iniial vor fi
cerute identitatea (username) i parola (password); se tasteaz stud1, apoi stud.
Programele de msurare a tensiunii arteriale i pulsului sunt aflate n directorul D:\CASSY.
Se tasteaz D: , apoi se folosete comanda cd\CASSY. Cu ajutorul comenzilor dir/w sau
dir/p se poate afia coninutul directorului curent. Dup fiecare tastare (comand) se apas
tasta <ENTER>.
a. Msurarea tensiunii arteriale

1. Dup intrarea n directorul D:\CASSY se tasteaz blood, se apas <ENTER> i se


ateapt afiarea mesajelor de ntmpinare. Se apas orice tast, apoi tasta <ESC> pentru
a intra n meniul principal. Cu ajutorul tastelor cu sgei i a tastei <ENTER> sau apsnd
tastele F1 - F9 se pot activa principalele opiuni. Se apas <F10> (HELP) pentru descrierea
opiunilor posibile. Se revine n meniul principal cu <ESC>. Inial trebuie stabilit directorul n
care vor fi salvate rezultatele msurtorilor; se alege din meniu opiunea disk operations,
apoi change path name i se nlocuiete directorul D:\CASSY\FILES cu D:\STUD1; se
revine apsnd <ESC>.
2. Se nfoar manonul tensiometrului n jurul braului. Traductorul mecanoalectric trebuie
plasat anterior, aproximativ n dreptul locului de proiecie al arterei brahiale. Manonul este
conectat printr-un furtun la o pomp de cauciuc prevzut cu o supap. Rotind spre stnga
butonul pompei se mpiedic ieirea aerului din manon.
3. Se apas tasta F1 (start measurement). Se observ c n partea dreapt a ecranului este
indicat tensiunea din manon (n milimetri coloan de mercur). Se umfl manonul pn la
180-200mmHg apoi se apas din nou tasta F1 pentru a ncepe msurtoarea. Se rotete
spre dreapta butonul pompei astel nct se obine o vitez de decompresie convenabil.
4. Pe ecran se pot observa concomitent scderea presiunii n manon i oscilaiile surprinse
de traductor. Acestea cresc n amplitudine cnd presiunea aerului din manon scade sub
presiunea sistolic, sunt diminuate cnd se apropie de presiunea diastolic i aproape
dispar cnd presiunea exercitat de manon este sub presiunea diastolic. Este important

73

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

ca n timpul msurtorii s se limiteze micrile pentru a evita artefactele. Odat ce acestea


s-au terminat se revine n meniul principal (apsnd <ESC>). Msurtoarea poate fi salvat
n directorul stud1 (opiunea save measurement din meniul disk operations).
5. Apsnd tasta F6 (evaluate in graph) se revine la graficul anterior unde <F1> va marca
presiunile sistolice i diastolice iar <ALT> <F1> le va afia numeric. Prin apsarea <F10> se
obin detalii despre alte operaiuni ce pot fi efectuate: suprapunerea unei grile, selectarea i
analiza unei poriuni din grafic, adugarea unor comentarii.
b. Msurarea pulsului
Fiierul executabil este numit pulse.exe i se afl n directorul D:\CASSY.
Traductorul se plaseaz la nivelul unui deget.
Exist mai multe posibiliti: 1. Afiarea digital a numrului de bti pe minut.
Opiunea se selecteaz prin apsarea tastei F1. 2. Reprezentare grafic (tasta F2). Se
poate alege (<F3>) ntre un grafic ce reprezint numrul btilor dintr-un interval de timp i
unul ce permite msurarea timpului dintre bti. Evaluarea n grafic (<F6>) permite unele
opiuni ca afiarea unor valori medii sau selecia i analiza anumitor intervale. Posibilitile
de prelucrare sunt detaliate n meniul Help (tasta F10).
Aplicaii
Msurarea presiunii arteriale i palparea pulsului sunt obligatorii n cursul examinrii
oricrui pacient. n repaus, presiunea arterial nu trebuie s depeasc valoarea de 140 /
90 mm Hg. O mrime frecvent folosit n clinic este presiunea arterial medie

+ 2 PAdiastolica
PA
PAmediu = sistolica

a crei valoare nu trebuie s scad sub 60 mm Hg.


Aparatele automate permit urmrirea presiunii arteriale i a pulsului pe perioade mai
lungi i sunt mai frecvent folosite intraoperator sau n seciile de terapie intensiv. Exist i
dispozitive portabile (monitorizare Holter) care permit urmrirea pe 24 de ore, fiind utile de
exemplu pentru monitorizarea eficienei unui tratament medicamentos. Informaia este
stocat pe disc magnetic i poate fi ulterior prelucrat pe computer.

74

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

VIZUALIZAREA I MSURAREA SEMNALELOR ELECTRICE CU AJUTORUL


OSCILOSCOPULUI CATODIC
1. Scopul lucrrii
n cadrul acestei lucrri de laborator se urmrete familiarizarea studenilor cu
osciloscopul catodic, aparat foarte des ntlnit n practica de laborator i cea medical. Cu
ajutorul acestuia se vor nregistra caracteristicile unui semnal electric.
2. Principiul lucrrii
Osciloscopul catodic (=OsC) este un instrument electronic de msur care permite
vizualizarea unor diferene de potenial sub forma unui grafic bidimensional pe ecranul unui
tub catodic prin asocierea parametrilor semnalului electric cu poziia unui spot luminos pe
ecran. Astfel, el asociaz pe axa orizontal (axa timpului) distane proporionale cu timpul i
pe axa vertical distane proporionale cu diferena de potenial, fcnd acest instrument util
n evaluarea evoluiei n timp a potenialelor unui semnal. Pentru semnalele repetitive, el
permite msurarea frecvenei i amplitudinii acestora.
Principiul de funcionare al osciloscopului catodic:
Semnalul electric analizat aplicat la intrarea aparatului este prelucrat de blocul de
preamplificare i este apoi aplicat intrrii unui amplificator Ay. Acesta produce la ieire o
tensiune proporional cu cea analizat dar mrit cu un factor de amplificare care poate fi
reglat din butonul de comanda V/div. Tensiunea produs de amplificatorul Ay este aplicat
plcilor de deflexie Y pe vertical i produce un cmp electric care deviaz fasciculul de
electroni produs de tunul de electroni. Ca urmare a devierii acestui fascicul, spotul luminos
cauzat de impactul electronilor cu substana fluorescent de pe ecran i modific poziia cu o
amplitudine proporional cu tensiunea aplicat la intrarea oscilospului.
Pentru studierea dinamicii semnalelor de intrare, tensiunea de intrare este exprimat ca
o funcie de timp Uy(t); fasciculul de electroni descrie sub aciunea combinat a celor 2 cmpuri
electrice o micare bidirecional, iar pe ecran apare graficul funciei traiectoriei Uy(Ux), unde Ux
este proporional cu variabila timp datorit generatorului bazei de timp i produce deplasarea
pe orizontal a spotului de electroni cu o vitez v = f(t).
Alctuirea osciloscopului catodic (Fig. 53)
Componentele esentiale ale osciloscopului catodic sunt:
Tubul catodic,
Preamplificatorul semnalului de intrare analizat,
Amplificatoarele sistemului de deflexie,
Generatorul bazei de timp,
Blocul de sincronizare,
Generatorul intern de semnale de calibrare.
Tubul catodic este principala component a OsC.
Acesta este, n principiu, o incint vidat coninnd o surs ce genereaz un fascicul ngust
de electroni care lovesc un ecran fluorescent, i un sistem de deviere a acestui fascicul n
funcie de parametrii semnalului investigat.
Elementele tubului catodic sunt urmtoarele:
- Tunul de electroni,
- Sistemul de deflexie,
- Ecranul fluorescent (8)
Tunul de electroni este format din civa electrozi metalici dintre care ultimii 3 de form
cilindric:
1) un termocatod care emite la incandescen un nor de electroni
2) un cilindru Wehnelt care comad intensitatea fasciculului de electroni
3) un anod de focalizare care asigur ingustimea fasciculului de electroni
4) un anod de accelerare care asigur energia cinetic a electronilor

75

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Tubul catodic
Placi

Tunul de

Fig. 53 Alctuirea tubului catodic al OsC


Sistemul de deflexie este format din 2 condensatoare plane (2 perechi de plci) pe care se
aplic o tensiune proporional cu cea studiat i care au rolul de a devia fasciculul de
electroni n plan vertical (plcile orizontale (5) de deflexie Y, i n plan orizontal - plcile
verticale (6) de deflexie X).
Ecranul (8) este o suprafa de sticl acoperit pe faa intern cu un strat fluorescent care
emite lumin la ciocnirea electronilor accelerai.

PreAmp

Uy

Ux

Placi
deflexie
Y
Ay

V/div

Ax

Sincronizator
Ref

Placi
deflexie X

Baza de
timp

Nivel
Fig. 54 Schema bloc a Osciloscopului Catodic

Preamplificatorul semnalului analizat este un bloc complex care are rolul de a


prelucra (filtra, atenua etc.) semnalul brut de intrare (Uy) pregtindu-l pentru amplificare
precum i de a furniza un semnal blocului de sincronizare pentru baza de timp. De

76

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

asemenea, acest bloc permite modificarea gradat a dimensiunii imaginii pe ecran, permind
reglarea sensibilitii de msur pe vertical cu ajutorul unui comutator gradat n V/div.
Amplificatoarele sistemului de deflexie, notate n schema bloc (Fig. 54) cu Ay
pentru cel pe vertical i respectiv Ax pentru cel pe orizontal, folosesc tensiuni foarte mari,
proporionale cu cea a semnalului analizat (Ay) sau a semnalului produs de generatorul
bazei de timp (Ax), necesare pentru obinerea unor deviaii semnificative ale spotului de
electroni. n principiu, s-ar putea aplica direct tensiunea semnalul analizat pe plcile de
deflexie, dar datorit vitezei mari a electronilor, deviaia acestora ar fi insesizabil n lipsa
unei tensiuni de ordinul kV.

Fig. 55 Osciloscopul catodic


Generatorul bazei de timp, (notat Baza de timp) produce un semnal periodic n
dini de fierstru aa cum se vede n Fig. 56, i are rolul de a asigura deplasarea spotului
luminos pe orizontal de la stnga la dreapta pn la extremitatea ecranului cu vitez
constant i reglabil i revenirea acestuia la nceputul cursei. n poriunea ascendent a
pantei graficului, tensiunea pe plcile de deflexie orizontal crete i produce deplasarea
spotului luminos pe orizontal de la stnga la dreapta pe toat laimea ecranului (spotul
baleiaz ecranul i este vizibil). Momentul la care spotul luminos a atins marginea dreapt a
ecranului coincide cu maximul curbei (punctul ade inflexiune superior al curbei). Dup
atingerea acestui punct spotul revine la marginea stng a ecranului datorit scderii brute a
tensiunii pe plcile de deflexie orizontal pn la valoarea minim (primul punct de inflexiune
inferior bal graficului) corespunztoare marginii stngi a ecranului. ntre momentul atingerii
marginii stngi a ecranului i nceputul cursei vizibile corespunznd celui de-al doilea punct de
inflexiune inferior c de pe grafic, exist o perioad de laten a crei durat este controlat de
sincronizator. Perioada de repetiie a impulsurilor bazei de timp poate fi reglat discret cu un
comutator gradat n uniti de timp/div.

77

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Cursa
vizibila

b c
Timp de
latenta

Revenirea
spotului
Fig. 56 Semnalul periodic n dini de fierstru al generatorului bazei de timp
Blocul de sincronizare (sincronizatorul) are rolul de a compara semnalul de la
intrarea amplificatorului de deflexie Y cu o valoare de referin presetat (Ref) i de a
comanda n funcie de nivelul semnalului de intrare sincronizarea generatorului bazei de
timp, evitnd astfel sincronizarea cu semnale parazite i/sau desincronizarea lui. Condiia ca
imaginea de pe ecranul osciloscopului s fie stabil este ca frecvena bazei de timp s fie un
submultiplu sau multiplu ntreg al frecvenei semnalului vizualizat. Blocul de sincronizare
asigur stabilitatea raportului dintre cele dou frecvene prin sincronizare intern, funcie de o
valoare de referin care se poate regla manual cu ajutorul unui buton de nivel (Nivel) .
Calibrarea OsC
Pentru o msurtoare corect, OsC trebuie mai nti calibrat pe ambele axe. Acest
lucru se realizeaz cu ajutorul unor semnale de calibrare, de amplitudine i frecven
cunoscute i standardizate, generate de surse externe sau interne.
OsC moderne sunt prevzute cu un generator intern de semnale de calibrare
integrat, folosit ca surs de semnale cu caracteristici cunoscute necesare calibrrii
aparatului nainte de de folosire.
Folosind butonul de sincronizare se regleaz nivelul semnalului de referin pentru
sincronizarea frecvenei semnalului cu cea a generatorului bazei de timp, i se realizeaz
stabilizarea imaginii (imaginea rmne nemicat pe ecran).
Reglarea amplificrii pe vertical i pe orizontal se face cu butoanele care comand
amplificatoarele de deflexie, modificnd factorii de amplificare ai acestora.
Reglarea amplificrii pentru deflexia Y pe vertical se face cu butonul V/div care
seteaz tensiunea corespunztoare unei diviziuni verticale a grilei de pe ecran, astfel nct
semnalul s fie extins ct mai mult pe vertical (pentru a avea o sensibilitate de msur
maxim), dar limitele superioar i inferioar ale acestuia trebuie s se gseasc n interiorul
grilei de pe ecran. Amplitudinea se va determina numrnd diviziunile de pe gril
corespunznd semnalului. Reglarea se va face cu butonul V/div astfel ca valoarea msurat
a amplitudinii adic cea corespunznd mrimii imaginii pe ecran - s corespund exact
valorii amplitudinii cunoscute a semnalului de referin aplicat.
Reglarea amplificrii pentru deflexia X pe orizontal se face cu butonul T/div care
seteaz timpul corespunztor unei diviziuni orizontale a grilei de pe ecran, astfel nct
semnalul s fie extins ct mai mult pe orizontal (pentru a avea o sensibilitate de msur
maxim), dar limitele laterale ale acestuia trebuie s se gseasc n interiorul grilei de pe
ecran. Reglarea se va face cu butonul T/div astfel ca valoarea msurat a perioadei
semnalului de referin adic cea corespunznd mrimii imaginii pe ecran - s corespund
exact valorii perioadei cunoscute a semnalului de referin aplicat.
Amplificarea pe orizontal se seteaz adecvat msurrii semnalului de analizat
funcie de viteza de variaie a tensiunii analizate, o lrgire a bazei de timp permind
vizualizarea i analizarea unor evenimente care se petrec foarte rapid.

78

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Blocul de preamplificare a semnalului de intrare analizat are i un circuit care permite


eliminarea componentei continue a unui semnal. n cazul msurrii unor semnale la care
este important componenta continu (msurtori n curent continuu etc.), acest circuit
poate fi untat prin manevrarea unui levier n poziia cc (sau dc).
Utilizarea osciloscopului catodic n practica medical
n principiu, osciloscopul se poate folosi la analiza oricror fenomene electrice care
nsoesc sau sunt generate de activitai fioziologice ale organismului uman.
De asemenea, dac se realizeaz n prealabil conversia fenomenelor de alt natur
n variaii de potenial, se deschide o palet practic nelimitat de fenomene care pot fi
analizate cu ajutorul osciloscopului catodic.
O prim aplicaie a osciloscopului catodic a fost vizualizarea (nc din anul 1960), a
variaiilor de potenial electric generate de activitatea electric a miocardului (EKG) culese cu
ajutorul unor electrozi plasai n contact cu pielea. n acelai tip de aplicaii se nscriu analiza
activitii electrice nervoase (electroencefalografie), analiza activitii electrice musculare
(electromiografie) etc.
Datorit rezoluiei temporale foarte bune, cea mai important utilizare a
osciloscoapelor catodice este analiza fenomenelor electrice care au loc cu vitez foarte
mare i care genereaz variaii de potenial foarte mici, cum ar fi activitatea unor canale
ionice, cinetica unor reacii chimice sau fotochimice, evidenierea transportului prin
membrane, studiul propagrii sunetului n urechea medie, studiul potenialelor de aciune
generate de contactul unor molecule odorante cu mucoasa olfactiv, descrcarea de
mediatori chimici n sinapsele neuronale etc.
n aceste aplicaii osciloscoapele catodice nu au fost nc nlocuite dect de
osciloscoapele digitale sau de cele computerizate.
3. Mod de lucru
Se vor msura cu ajutorul osciloscopului din laborator:
- tensiunea continu la bornele unei baterii sau acumulator,
- tensiunea alternativ la bornele de ieire ale unui transformator de reea,
- frecvena tensiunii alternative la bornele unui transformator de reea,.
- tensiunea alternativ la ieirea unui circuit de filtrare,
1. Dup calibrarea prealabil pe ambele axe a osciloscopului se va proceda la efectuarea
msurtorilor. Pentru fiecare parametru msurat se vor efectua 10 msurtori (replicate),
valorile se vor trece ntr-un tabel i se va calcula valoarea parametrului msurat prin
efectuarea mediei aritmetice a valorilor obinute n cele 10 msuratori replicate efectuate.

2. Pentru msurarea tensiunii continue ca cea de la bornele unei baterii sau a unui
acumulator, se va manevra nti levierul corespunztor de pe panoul frontal al osciloscopului
n poziia cc (sau dc) i apoi se vor conecta sondele sau clemele crocodil la bornele
bateriei.
3. Pentru msurarea tensiunii alternative ca cea de la bornele de ieire (ale circuitului
secundar) ale unui transformator de reea, se va manevra nti levierul corespunztor de pe
panoul frontal al osciloscopului n poziia ca (sau ac) i apoi se vor conecta sondele sau
clemele crocodil la bornele de ieire ale transformatorului.
4. Tensiunea se va determina prin numrarea diviziunilor de pe axa vertical corespunznd
amplitudinii semnalului (distana dintre maximul i minimul amplitudinii semnalului exprimat
n diviziuni de pe ecran) i nmulind acest numr cu valoarea n uniti de tensiune a unei
diviziuni conform setrii amplificrii din butonul V/div.
5. Frecvena se va determina msurnd perioada T a acelui semnal prin numrarea
diviziunilor de pe axa orizontal corespunznd perioadei (distana dintre dou maxime
exprimat n diviziuni de pe ecran) i nmulind acest numr cu valoarea n uniti de timp a
unei diviziuni conform setrii din butonul t/div. Se vor nota parametrii semnalului (tensiunea
i frecvena) i se va observa forma semnalului.

79

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

6. Dup analizarea caracteristicilor semnalului nefiltrat livrat direct de secundarul


transformatorului, se vor analiza caracteristicile semnalului filtrat de un circuit de filtrare i se
vor urmri aceeai parametrii, precum i eficiena filtrrii.
7. Pe ecranul osciloscopului se vor urmri semnalele electrice n diferite puncte ale unui
montaj simplu de redresare i filtrare. Schema montajului este dat n Fig. 54, acesta fiind
format dintr-un transformator cobortor de tensiune, un redresor monoalternan (o diod) i
un condensator de filtrare. Montajul se alimenteaz la 220 V c.a.

Fig. 54 Montajul de redresare i filtrare


1. Transformator, 2. Diod redresoare, 3. Condensator de filtrare, 4. ntreruptor,
A, B, C puncte de msurare, D punct de referin (mas)

n secundarul transformatorului (n punctul A) apare o tensiune sinusoidal, cu


frecvena de 50Hz (frecvena reelei) i amplitudinea dat de raportul de transformare al
transformatorului n (Fig. 55 a).

VA =

220
V
n

Datorit faptului c prin diod trece curent numai pe semialternana pozitiv, n


punctul B (avnd ntreruptorul 4 deschis) apare tensiunea redresat monoalternan
(Fig. 55 b).
Dac se nchide ntreruptorul 4, condensatorul 3 se ncarc la creterea tensiunii pe
semialternana pozitiv (atunci cnd dioda conduce), urmnd ca la scderea tensiunii (tot pe
semialternana pozitiv, ns atunci cnd dioda nu conduce) acesta s se descarce,
furniznd tensiune n circuit. Constanta de timp la descrcare este = R C , n care C este
capacitatea condensatorului iar R este rezistena de sarcin, n cazul nostru rezistena de
intrare a osciloscopului. Astfel, n punctul de msur C apare tensiunea filtrat
(vezi Fig. 55 c).

Fig. 55 Formele de und n diferitele puncte ale montajului de redresare i filtrare


a. Tensiunea n secundarul transformatorului, b. Tensiunea redresat monoalternan,
c. Tensiunea filtrat

80

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

DETERMINAREA CONCENTRAIEI UNEI SOLUII OPTIC ACTIVE PRIN METODA


POLARIMETRIC
1. Scopul lucrrii
Determinarea concentraiei unei soluii optic active cu ajutorul unui polarimetru. Se va
utiliza faptul c o substan optic activ rotete planul de polarizare al luminii cu un unghi
direct proporional cu concentraia acesteia n soluie.

Directia de oscilatie

2. Principiul lucrrii
Unda este o perturbaie a unei stri de echilibru care se deplaseaz (propag) n
timp dintr-o regiune n alta. Dac perturbaia are loc pe o direcie paralel cu direcia de
deplasare a perturbaiei, unda se numeste und longitudinal (un exemplu este unda
sonor) (Fig. 56a). Dac perturbaia are loc pe o direcie perpendicular pe direcia de
deplasare a perturbaiei, unda se numete und transversal (un exemplu sunt radiaiile
electromagnetice din care face parte i radiaia luminoas) (Fig. 56b).
Spre deosebire de fenomenele de interferen i difracie care apar la toate tipurile
de unde, fenomenul de polarizare apare doar la undele transversale.
Unda luminoas const n oscilaii a 2 cmpuri, electric i magnetic. n studiul
fenomenelor optice este important componenta electric, de aceea componenta magnetic
este neglijat.

Directia de propagare a oscilatiei

(a)

(b)

Fig. 56: (a) unda sonor const n compresii i decompresii succesive ale mediului pe care l
strabate. Unda sonor este o und longitudinal. (b) Unda luminoas este o und
transversal. Intensitatea cmpului electric variaz pe o direcie perpendicular pe direcia
de deplasare a undei (componenta magnetic a undei este neglijat n cadrul acestei
prezentri).

Sursele de lumin conin atomi ce pot ctiga energie prin diverse procese i care
elibereaz ulterior aceast energie prin dezexcitare, cu emisie de radiaie luminoas
(radiaie electromagnetic cu lungime de und ntre 450nm i 750nm). Datorit agitaiei
termice, moleculele ce conin aceti atomi au orientri spaiale aleatoare astfel c lumina
emis este compus din radiaii cu diverse orientri ale cmpului electric. De remarcat c,
indiferent de direcia pe care variaz intensitatea cmpului electric, aceasta se va pstra
totdeauna perpendicular pe direcia de deplasare a undei (Fig. 57).
Lumina a crei direcie de oscilaie a intensitii cmpului electric (E) are o orientare
aleatoare se numete und nepolarizat. Lumina emis de soare, de un bec electric sau de
flacra unei lumnri, toate sunt exemple de lumin nepolarizat.
Dac, prin diverse metode, se selecteaz doar anumite direcii de oscilaie ale lui E
atunci unda se numete parial polarizat. Dac se selecteaz o singur direcie de oscilaie
a lui E atunci unda se numete total polarizat.

81

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

(a)
(b)
Figura 57: Unda electromagnetica (lumina) (a) lumina nepolarizat, vectorul intensitate cmp
electric variaz ca orientare (pentru simplitate s-au reprezentat doar 3 orientari), (b) aceeai
lumin nepolarizat vzut de pe direcia ei de propagare (radiaia se deplaseaz
perpendicular pe planul foii), se observ distribuia uniform, aleatoare a vectorului E.
Exist mai multe metode de a obine unde parial/total polarizate. Dintre ele
menionm folosirea de filtre de polarizare, fenomenele de reflexie i refracie a luminii.
1. Folosirea de filtre de polarizare. Un filtru de polarizare poate fi un material
constituit din lanuri de molecule lungi (polimeri) aranjate astfel inct s fie paralele unele cu
altele, n acest mod permind trecerea selectiv a radiaiei luminoase.
2. Reflexia: atunci cnd lumina cade pe suprafaa de separaie dintre 2 medii diferite
(indici de refracie diferii, n1 i n2), o parte a undei se ntoarce din mediul din care a venit
(raz reflectat) iar o alt parte trece n cel de-al doilea mediu (raz refractat). S-a observat
c exist o predilecie pentru urmtorul fenomen: n radiaia reflectat se regsesc n
majoritate unde al cror cmp electric variaz perpendicular pe planul de inciden (planul
care conine raza incident i normala la suprafa) iar n radiaia refractat se gsesc
majoritar unde al cror cmp electric variaz paralel cu planul de inciden (Fig. 58). Dac
se ndeplinete o anume condiie, este posibil chiar ca radiaia reflectat s conin doar
unde cu E variind perpendicular, iar n radiaia refractat s se gseasc exclusiv unde cu E
variind paralel cu planul de inciden. Aceast condiie este ca ntre raza reflectat i cea
refractat s existe un unghi de 900. n acest caz, unghiul se numete unghi Brewster iar
tangenta sa este egal cu raportul dintre indicii de refracie ai celor 2 medii.
tgBrewster = n2/n1

Figura 58: Obinerea luminii polarizate prin reflexie. Radiaia reflectat este polarizat
perpendicular pe planul de inciden (planul foii), radiaia refractat este polarizat
paralel cu planul de inciden.

3. Refracia: unele cristale (sruri de calciu, de ex. spat de Islanda), dei sunt transparente
la lumin, au valori diferite ale vitezei de deplasare a luminii n interiorul lor, funcie de

82

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

direcia pe care se deplaseaz aceasta. Aceste cristale au proprietatea de a descompune n


2 fascicole independente lumina incident (birefringen) iar aceste dou fascicole se
deplaseaz pe direcii diferite n interiorul cristalului. Unul din fascicole trece nedeviat i are
proprietatea c E variaz perpendicular pe planul de inciden. Cellalt fascicol este deviat
fa de direcia undei incidente i are proprietatea c E variaz pe o direcie paralel cu
planul de inciden. Dac un astfel de cristal se taie intr-un anume mod, se poate face n aa
fel inct una din componente s fie complet absorbit de cristal i doar una dintre
componente s strbat cristalul (Fig. 59). Cristalul transform astfel lumina nepolarizat
ntr-o lumin total polarizat. Un astfel de cristal se numete nicol iar n experimentul ce
urmeaz, polarizorul i analizorul, pri eseniale ale sistemului studiat, sunt nicoli.

Figura 59: Obinerea luminii total polarizat prin refracie. Unele cristale (sruri de calciu,
de ex. spat de Islanda) prezint fenomen de birefringen. Dac sunt tiate i lipite
ulterior intr-un anume fel, una din radiaii poate fi absorbit n cristal prin reflexie total
(raz ordinar) iar radiaia care strabate cristalul este total polarizat (raza
extraordinar).

Am prezentat pn acum fenomenul de polarizare liniar n sensul c o substan


poate avea proprietatea de a transforma o lumina nepolarizat ntr-una pentru care E are o
singur direcie de oscilaie (Fig. 60). Exist ns i fenomenul de polarizare rotatorie care
const n rotirea planului de polarizare al luminii atunci cnd un fascicol de lumin polarizat
liniar cade pe suprafata unui anume tip de substan (vectorul E al undei, la trecerea prin
acea substan, descrie o traiectorie elicoidal) (Fig. 58). Astfel de substane ce rotesc
planul de polarizare al luminii sunt numite substane optic active. n experimentul ce
urmeaz, substana optic activ se va gsi n tubul cu substana de analizat dar i lama
dicroic (cristalul de turmalin) ce se va interpune pe o parte a fascicolului de lumin, este
tot o substan optic activ.

Figura 60: Fenomenul de polarizare rotatorie: dac pe suprafaa unor substane cade o
lumina polarizat liniar, acele substane au proprietatea de a roti planul de polarizare al
luminii (aceste substane sunt optic active).

83

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Un exemplu de polarizare liniar folosit n practic sunt ochelarii cu filtru polarizor.


Dac direcia de transmisie a luminii prin filtru este vertical, acesta nu va lsa s treac
lumina reflectat pe suprafee orizontale, cum ar fi asfaltul unei osele, suprafaa unui lac
etc. Lumina reflectat pe o suprafa orizontal este preponderent polarizat orizontal
(perpendicular pe planul de inciden) conform comportrii descrise mai sus. Prin blocarea
luminii polarizate orizontal se reduce senzaia neplcut de strlucire pe care o d lumina
reflectat pe suprafaa unei osele sau suprafaa unui lac.
Exist, de asemenea, n natur, substane care pot roti planul de polarizare al unei
unde polarizate (substane optic active). Rotirea spre dreapta a planului de polarizare o
realizeaz aa numitele substane dextrogire, rotirea spre stnga, substanele levogire.
Unele substane de acest tip sunt folosite n metabolism, cele dextrogire fiind rapid
metabolizate (de exemplu, glucoza) n timp ce substanele levogire sunt metabolizate n timp
lung i constituie, de fapt, depozite energetice (de exemplu, fructoza).
Unghiul cu care o substan optic activ rotete planul de polarizare este direct
proporional cu concentraia c a substanei i cu grosimea stratului l a stratului de substan
folosit. Constanta de proporionalitate [] se numeste putere rotatorie specific i este o
constant de material. Folosind aceasta dependen se poate determina concentraia
soluiei optic active.
= []lc
3. Mod de lucru
Pentru efectuarea msurtorilor este nevoie de urmtoarele aparate i substane:
Polarimetru
Soluii de glucoz de concentraii diferite.
Ap distilat.

Polarimetrul este instrumentul care permite msurarea unghiului cu care o substan


optic activ rotete planul luminii polarizate; este format dintr-un sistem de polarizare a
luminii numit polarizor (P) i un sistem de analiz a planului de polarizare al luminii numit
analizor (A), ntre care se plaseaz cuva cu soluia de studiat (S) (Fig. 61). Polarizorul i
analizorul sunt nite nicoli.
Dac ntre polarizor i analizor se afla doar cuva cu soluia de substan optic activ,
atunci, pentru a avea luminozitate maxim la ieirea luminii din analizor va trebui ca
analizorul s fie rotit cu acelai unghi cu care substana optic activ rotete planul luminii
polarizate. Dac, dupa obinerea luminozitii maxime, se face citirea unghiului cu care
analizorul a fost rotit, acest unghi reprezint, de fapt, unghiul cu care substana optic activ a
rotit planul de polarizare al luminii. Totui, pentru ochiul uman este dificil s aprecieze, cu
exactitate, momentul n care se obine, dintr-o plaj de valori apropiate, valoarea maxim a
unei intensiti luminoase. De aceea, pentru a crete gradul de precizie a citirii unghiului sub
care a fost rotit planul luminii polarizate de ctre substana optic activ, se introduce, ca
element de contrast, o zona central diferit ca intensitate luminoas, produs prin
introducerea unei lame dicroice (Q) (lam care posed dicroism circular, altfel spus, poate
roti planul unei radiaii luminoase polarizate) (Fig. 61). Aceast lam va roti planul luminii
polarizate ce iese din polarizor astfel c lumina care iese din lama dicroic va avea un unghi
de nclinare a planului ei de polarizare fa de direcia la ieirea din polarizor, pe care l
notm cu .
Ochiul uman este capabil s aprecieze mult mai uor gradul de contrast dintre 2
zone luminate diferit dect maximul sau minimul de luminozitate al unei arii singulare. n

84

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

cazul prezentei lucrri, lama dicroic se afl situat n zona central a fascicolului de lumin
polarizat crend contrast ntre cele 2 zone.

d
. . . ..
.
.
.. . . . . . ....
. . . . ..
. .. .
.
.. . .. .. .. .. ..
Figura 61: Schema constructiv a unui polarimetru.

S presupunem c n sistemul studiat se afl doar polarizorul i analizorul (nicoli). S


mai presupunem c analizorul este orientat pe direcia pe care este polarizat lumina ce
iese din polarizor. n aceast situaie, iluminarea cmpului vizual al analizorului este maxim
(luminozitate exprimat de valoarea lui E). Dac n zona central a fascicolului se introduce
lama dicroic, aceasta va roti planul luminii polarizate i, n consecin, zona central din
cmpul vizual al analizorului va fi mai intunecat i anume, egal cu Ecos. Dac n acest
moment rotim analizorul cu un unghi /2 atunci ntreaga suprafa va deveni egal luminat i
anume egal cu Ecos(/2). Valoarea acestui unghi se poate citi pe vernierul analizorului,
polarimetrul fiind astfel construit inct aceast poziie a analizorului s fie considerat poziia
de 0 (Fig. 64).

Figura 62: Polarimetrul folosit n cadrul lucrrii practice pri componente.

85

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Fig. 63: Dac E este intensitatea cmpului electric al luminii la ieirea din polarizor iar
ntre polarizor i analizor exist un unghi oarecare atunci vizorul analizorului va fi
iluminat cu o mrime egal cu Ecos (mrimea AB n figur).

(a)
(b)
Fig. 64: n situaia n care nu avem substan optic activ n tubul polarimetrului iar
analizorul are aceeai inclinare a axei optice precum polarizorul, zona central va fi mai
intunecat dect zonele superioar i inferioar din cauza interpunerii, pe fascicolul
central, a lamei dicroice ce rotete planul de polarizare a luminii cu un unghi (a).
Pentru egalizarea iluminrii vizorului se rotete analizorul cu unghiul /2. Aceasta trebuie
s fie poziia de 0 a analizorului, pe parcursul experimentului (b).
La introducerea substanei optic active (o soluie a unei substane organice), planul de
polarizare a luminii va fi rotit cu un unghi suplimentar, . Pentru a obtine o iluminare
uniform si, deci, pentru a compensa efectul substanei optic active i al lamei dicroice,
analizorul trebuie rotit cu unghiul ( + /2). n acest moment se citete pe vernierul
analizorului valoarea unghiului (dac se consider valoarea de 0 cea n care s-a compensat
deja prezena lamei dicroice, valoarea citit este chiar valoarea unghiului )

(a)

(b)

86

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Fig. 65: Atunci cnd se introduce substan optic activ n tub, aceasta va roti planul de
polarizare a luminii ce iese din polarizor cu un unghi (a). Dac se consider poziia de
0 a analizorului cea n care fusese deja rotit cu unghiul /2, atunci, pentru a compensa
efectul substanei optic active din tub, va trebui s rotim analizorul cu unghiul . n acest
moment se obtine o iluminare uniform n vizorul analizorului (b).

Ca mod de lucru efectiv se urmresc paii:


1. Se umple tubul polarimetrului cu ap distilat avnd grij s nu ramn nici o bul de aer,
feele strbtute de lumin se usuc bine i apoi se introduce n polarimetru. Se pune la
punct imaginea cmpului vizorului i se citete unghiul de rotaie al planului de polarizare al
luminii prin rotirea analizorului pn la egalizarea luminozitii celor 3 zone (zona central i
zonele de deasupra i de dedesubt). Polarimetrele sunt astfel construite nct n aceast
configuraie unghiul citit s fie 00. n cazul n care indicatorul nu indic 00, se va nota unghiul
de corecie.
2. Odat aparatul pus la punct, se scoate tubul i se nlocuiete apa distilat cu soluia optic
activ de concentraie cunoscut. Se introduce tubul n aparat i privind prin ocular se
observ c n cmpul vizual plajele nu mai sunt egal luminate. Acest fenomen este datorat
soluiei optic active din interiorul tubului care a rotit planul luminii polarizate.
3. Pentru a afla valoarea unghiular cu care substana optic activ a rotit planul luminii
polarizate, se rotete analizorul spre dreapta sau spre stnga pn la uniformizarea
iluminrii cmpului optic. n acest moment se citete valoarea unghiului din care se scade
unghiul de corecie.
4. Se procedeaz ca mai sus pentru celelalte dou soluii optic active de concentraii
cunoscute i respectiv pentru soluia de concentraie necunoscut cx. Pentru fiecare soluie
se fac 10 msuratori.
5. Se traseaz grafic dependena unghiului de concentraia cx, folosind metoda celor mai
mici ptrate.
6. Prin interpolare grafic se determin concentraia necunoscut cx.
Lumina polarizat se folosete i n microscoapele cu polarizare. Acestea au un
polarizor sub condensorul de lumin aflat dedesubtul platinei i un analizor deasupra
obiectivului. In clinic, polarimeterele sunt folosite pentru determinarea concentraiilor de
glucoz i de albumin din urin precum i pentru constatarea i dozarea glucozei din
lichidul cefalorahidian. Alte aplicaii sunt n diagnosticul gutei, boal n care se modific
metabolismul acidului uric i care este insoit de formarea de depozite de cristale de urai
de monosodiu n piele. Aceste cristale sunt birefringente i apar sub forma unor ace n
lumin polarizat (Fig. 66). n cadrul bolii genetice Fabry se formeaz depozite de
glicosfingolipide n pereii vaselor de snge i ca sedimente n urin. La microscopul cu
lumin polarizat, aceste sedimente apar sub forma crucii Malteze, fiind birefringente (Fig.
67).

Fig. 66: Cristale de urat de monosodiu


aciforme (prezente n gut), vzute la
microscopul cu lumin polarizat.

Fig. 67: Depozite de glicosfingolipide n


boala genetic Fabry (sedimente n urin)
vzute la microscopul cu lumin polarizat.

87

LUCRRI PRACTICE DE BIOFIZICA

Bibliografie
1. Biofizic Lucrri practice, D. Ionescu, J. Vinersan, I. Bran, D. Sulic, B. Negreanu,
V. Brc, R. Matei, sub redacia Prof. Dr. Constana Ganea, Editura Universitar
Carol Davila, ISBN 973-708-077-7, Bucureti (2005)
2. Biofizic medical Lucrri practice, Irina Bran, Adrian Iftime, Diana Ionescu,
Rzvan Matei, Bradu Negreanu, Dan Sulic i Jean Vinersan, sub redacia Prof. Dr.
Dan Eremia, Ed. Tehnoplast Company, Bucureti, 2001
3. Biofizic i fizic medical - Lucrri practice i demonstraii colectivul Catedrei de
Biofizic sub redacia Prof. Dr. V. Vasilescu, Institutul de Medicin i Farmacie,
Bucureti, Catedra de Biofizic, 1984
4. Curs de biofizic medical, Dan Eremia, Universitatea de Medicin i Farmacia
"Carol Davila", Catedra de Biofizic, Bucureti, 1993
5. Curs de Biofizica, Ganea C., www:http//biofizica.univermed-cdgm.ro
6. Dicionar de Fizic, Editura Enciclopedic Romn, Bucureti, 1972
7. Electricitate, Constana Ganea, Editura Universitar Carol Davila, Bucureti, 1999
8. Electricitate i magnetism Lucrri practice, Diana Ionescu, Elena Ne, Editura
Universitar Carol Davila, Bucureti, 2003
9. Electricitate i magnetism, E. M. Purcell, Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti,
1982
10. Fizic, F. W. Sears, M.W. Zemanski, H.D. Young, Editura Didactic i Pedagogic,
Bucureti, 1983
11. Fizic medical, S. Bainglass, Editura medical, Bucureti, 1956
12. Lucrri practice de fizic sub redacia V. I. Iveronova, Editura Tehnic, 1953
13. Lucrri practice de fizic molecular, Sabina tefan, Universitatea din Bucureti,
2003
14. Lucrri practice de optic, Universitatea din Bucureti, Facultatea de Fizic, Catedra
de optic, spectroscopie, plasm, laseri, 1985
15. Methods in Modern Biophysics, Bengt Nlting, Springer, 2003
16. Note de curs de termodinamic, Donald B. Melrose, coala de Fizic, Universitatea
din Sydney
17. Physik fr Mediziner, F. Hillenkamp, K. Kupka, W. Pohlit, D. Rossberg, M. Wenz, E.
Dietz, Johann Wolgang Goethe Universitt Frankfurt am Main, Institut fr
Biophysik, 1998
18. Principii de biofizic uman, Constantin Dimoftache i Sonia Herman, Editura
Universitar Carol Davila, Bucureti, 2003
19. Principiile fizice ale aparaturii medicale, Sonia Herman, Editura Teora, 2000
20. Sisteme termodinamice complexe, V. V. Scev, Editura tiinific i Enciclopedic,
Bucureti, 1982.
21. Teoria erorilor de msurare i metoda celor mai mici ptrate, Marin Tiron, Editura
Tehnic, Bucureti, 1972

88

S-ar putea să vă placă și