Ecotoxicitate Lemna Pag 41

ROMNIA
MINISTERUL EDUCAIEI NAIONALE

UNIVERSITATEA VASILE ALECSANDRI DIN BACU
FACULTATEA DE INGINERIE
PROGRAMUL DE STUDII DOCTORALE
INGINERIA MEDIULUI
Calea Mreti, nr. 157, Bacu 600115
Tel. +40-234-542411, tel./fax +40-234-545753
www.ub.ro;email:rector@ub.ro
STUDII ECOTOXICOLOGICE PRIVIND

NMOLUL DE EPURARE STABILIZAT
ANAEROB
Conductor de doctorat:
Conf. univ.dr.ing. Iuliana Mihaela Lazr
Doctorand:
Biolog Dumitra Rducanu
BACU 2014
Cuprins
Cuprins........................................................................................................................................................3
Mulumiri....................................................................................................................................................5
Justificareatemeiiprezentareascopuluiiaobiectivelortezeidedoctorat..........................................7
Structuratezeidedoctorat........................................................................................................................8
Capitolul7.REZULTATELETESTELORDEECOTOXICITATEALENMOLULUIDEEPURARESTABILIZAT
ANAEROBTRATATPRINDIFERITEMETODEFIZICOCHIMICELANIVELPROCARIOTBACTERII..............11
7.1.Numrultotaldeagenipatogeniidentificainurmatratamentelorcuradiaiiionizantedetip
alfa........................................................................................................................................................11
7.2.Numrultotaldeagenipatogeniidentificainurmatratamentelorcuradiaiiultraviolete.....12
7.3.Numrultotaldeagenipatogeniidentificainurmatratamentelorcumicrounde...................13
7.4.Numrultotaldeagenipatogeniidentificainurmatratamentelorcuultrasuneteanmolului
deepurarestabilizatanaerob..............................................................................................................14
7.5.Numrultotaldeagenipatogeniidentificainurmapasteurizrii............................................15
7.6.Numrultotaldeagenipatogeniidentificainurmatratamentelorchimice............................15
7.7.Rezultatulantibiogrameipentrutulpinileinvestigate..................................................................18
7.7.1.RezultatulantibiogrameipentrutulpinaE.coli(a)iSalmonellasp(b).........................18
7.7.2.RezultatulantibiogrameipentrutulpinilebacterieneizolateISO..................................19
7.8.Rezultateprivindcaracterizareatulpinilorbacterieneizolatedinprobeledenmolstabilizat
anaerobsupusetratamentuluifizicichimic.......................................................................................19
7.9.Analizaspectralatulpinilorbacterieneizolate(ISO)dinprobeledenmolstabilizatanaerob
supusetratamentuluifizicichimic.....................................................................................................20
ANAEROBTRATATPRINDIFERITEMETODEFIZICOCHIMICELANIVELEUCARIOTPLANTE....................28
8.1.Rezultateletestelordeecotoxicitatelaceap(AlliumcepaL.)var.galben................................28
8.1.1.Rezultateprivindstudiulaberaiilorcromozomialelaceap(AlliumcepaL.)var.galben
indusedetratamenteleaplicatenmoluluideepurarestabilizatanaerob.............................28
8.1.2.Rezultateprivinddatelebiometriceobinutelaceap(AlliumcepaL.)indusede
tratamenteleaplicatenmoluluideepurarestabilizatanaerob.............................................31
8.2.RezultateletestelordeecotoxicitateasupragruluicomunsoiulDropia(TriticumaestivumL.)34
8.2.1.RezultateletestelordeecotoxicitateaferenteparametrilorbiometriciVariaiaEC....34
8.2.2.Rezultateletestelordeecotoxicitateaferenteparametrilorbiometrici.Variaia
variabilelorindependente........................................................................................................35
8.2.3.Rezultateletestelordeecotoxicitateaferenteparametrilorbiochimicianalizailagrul
comun(TriticumaestivumL.)soiulDropia...............................................................................40
8.3.RezultateletestelordeecotoxicitateasupraspecieiLemnaminorL............................................41
3
8.3.1.Rezultateleinvestigaiilorprivindtestuldeecotoxicitateacutanmoluluideepurarepe
linti(LemnaminorL.)............................................................................................................41
8.3.2.Rezultateleinvestigaiilorprivindvariaiaarieifrondelorlalinti(LemnaminorL.)n
funciedetratamenteiconcentraie......................................................................................42
8.3.3.Rezultateleinvestigaiilorprivindtestuldebioacumulareametalelorgrele(Cd,Cr,Cu,
Ni,Pb,Zn)dinnmoluldeepurarestabilizatanaerobdectrelinti(LemnaminorL.)........45
ANAEROBTRATATPRINDIFERITEMETODEFIZICOCHIMICELANIVELEUCARIOTANIMALE(Eiseniasp.)
..................................................................................................................................................................51
9.1.Rezultateletestelordesupravieuire............................................................................................51
CAPITOLUL10.CONCLUZII.......................................................................................................................55
10.1.Evaluareagraduluideecotoxicitatealnmoluluideepurarestabilizatanaerob.......................55
10.2.Evaluareagraduluideecotoxicitatealnmoluluideepurarestabilizatanaerobtratat
suplimentar..........................................................................................................................................55
10.2.1.TratamentulcuradiaiiultravioleteUVC......................................................................56
10.2.2.Tratamentuldepasteurizare........................................................................................56
10.2.3.Tratamentulcuultrasunete..........................................................................................56
10.2.4.TratamentulcumicroundeMW..................................................................................57
10.2.5.Tratamentuldeiradierealfa........................................................................................57
10.2.6.Tratamentelechimice...................................................................................................57
10.2.7.Influenaconcentraiei.................................................................................................57
Posibilitidedezvoltareulterioar.........................................................................................................59
Contribuiioriginale..................................................................................................................................59
Valorificarearezultatelorobinutenperioada20122014:....................................................................60
ArticolepublicatenrevistecotateISI..................................................................................................60
ArticolencursdeevaluarepentrupublicarenrevistecotateISI......................................................60
Articolpublicat:ProceedingsConferinInternaional......................................................................61
ArticolencursdeevaluarepentrupublicarenrevisteindexateBDI:................................................61
ArticolepublicatenrevisteindexateBDI............................................................................................61
PrezentrincadrulConferinelorNaionaleiInternaionale:...........................................................61
Participarelacontractedecercetarenaionale:..................................................................................63
Bibliografie...............................................................................................................................................64
Mulumiri
Adresez respectoase mulumiri i deosebit recunotin doamnei confereniar univ.dr.

ing.
Iuliana
Mihaela
Lazr,
coordonatoarea
tiinific
acestei
lucrri,
pentru
profesionalismul i atitudinea riguroas cu care s-a implicat n coordonarea activitii de

cercetare i n elaborarea acestei teze de doctorat.
Mulumesc distinilor membri ai comisiei de evaluare, prof.univ.dr.ing. Maria
Gavrilescu i prof.univ.dr. Geta Rnoveanu pentru acceptul de a evalua aceast tez de
doctorat i pentru disponibilitatea de a participa la susinerea public. Alese gnduri de
mulumire adresez domnului profesor univ. dr. ing. Valentin Nedeff, pentru observaiile i
sugestiile oferite pe parcursul perioadei de pregtire a tezei de doctorat, pentru materialul
bibliografic pus la dispoziie, pentru bunvoin i amabilitate.
Doamnei confereniar univ dr Irina Ifrim i doamnei lector univ dr Ioana tefnescu
care mi-au rspuns cu mult amabilitate, promptitudine i profesionalism la toate problemele
legate de chimie, le adresez sincere mulumiri. Pentru ajutorul oferit pe toat perioada derulrii
experimentelor, le mulumesc n mod deosebit doamnei dr. Ema Maria Faciu i d-rei drd.
Elena Goldan, dar i tuturor colegilor doctoranzi din cadrul colii doctorale n Ingineria
mediului, care mi-au fost alturi. De asemenea domnului profesor univ dr.ing. Marius Stamate
i doamnei lector dr. Iuliana Caraman le adresez sincere mulumiri pentru sprijinul oferit n
realizarea i interpretarea experimentelor fizice.
Doamnei ing. Gabriela Horgan i ntregii echipe din cadrul Laboratorului Staiei de
Epurare Bacau le adresez respectoase mulumiri pentru amabilitatea i disponibilitatea
domniilor sale.
Colegilor din Departamentul de Biologie Ecologie i Protecia Mediului le adresez
multe mulumiri i sentimente de profund recunotin, pentru atmosfera plcut i pentru
sprijinul necondiionat oferit n realizarea activitii de cercetare tiinific. Doamnei lector
univ. dr. Daniela Nicu i adresez sincere mulumiri pentru profesionalismul i amabilitatea cu
care a rspuns n realizarea i interpretarea analizelor citogenetice.
Nu n ultimul rnd doresc s-mi exprim gratitudinea fa de familia mea, cei care sunt
motivul i raiunea mea de a fi.
Justificarea temei i prezentarea scopului i a obiectivelor tezei de doctorat
Managementul nmolului constituie o problem complex, pe msur ce standardele de

mediu devin tot mai restrictive. Din aceast perspectiv, activitatea de epurare a apelor uzate
trebuie asociat cu aciunea de valorificare i/sau depozitare controlat a nmolurilor rezultate
din proces. n Uniunea European, strategia de mediu privind nmolurile rezultate n urma
epurrii apelor uzate susine minimizarea producerii acestora, ct i implementarea unor
metode de tratare cu eficien crescut, n vederea reciclrii. nc din etapa de proiectare a
staiilor de epurare, o atenie deosebit este acordat acestui subprodus, costul prelucrrii
nmolului deinnd o pondere substanial din valoarea costului total de investiie i exploatare.
Criteriile socio-economice i legislative sunt alte aspecte de care trebuie s se in cont n
gestionarea corect a acestor categorii de deeuri.
Obiectivul major al tratrii nmolurilor n staia de epurare l constituie evitarea
impactului negativ al polurii mediului i a sntii umane. Calitatea nmolurilor difer foarte
mult n funcie de proveniena apelor uzate oreneti ce intr n proces, fiind aproape
imposibil predictibilitatea compoziiei, implicit a modului de gestionare al acestora.
Respectndu-se principiului precauiei, pentru prelucrarea nmolului de epurare nu pot fi
elaborate reete universal valabile i aplicabile.
n contextul dezvoltrii durabile se impune necesitatea mbuntirii tehnicilor adoptate
n privina eliminrii i/sau valorificrii nmolului de epurare, n concordan cu criteriile
legislative i economice specifice fiecrei ri, utilizarea n agricultur fiind o msur agreat
de Uniunea European ca cea mai bun practic de mediu.
n prezent, n cadrul staiei de epurare din municipiul Bacu, nmolurile sunt
valorificate parial prin producere de biogaz. Gestionarea corect a problemei nmolurilor
rezultate din staia de epurare Bacu necesit dezvoltarea de strategii cu opiuni multiple i
diversificate, fiind o provocare att pentru oficialitile municipiului, ct i pentru universitile
sau institutele de cercetare din zon.
Valorificarea nmolurilor n agricultur, silvicultur sau pentru refacerea terenurilor
degradate, dei agreat i preferat n multe state ale lumii este totodat o metod vulnerabil i
controversat, ce necesit nc numeroase explorri interdisciplinare. Dei valoarea fertilizant
a nmolului este recunoscut, valorificarea acestuia ntmpin att obiecii de ordin igienicosanitar, ct i de ordin etic datorit prezenei nedorite a metalelor grele i altor categorii de
poluani.
n acest studiu ne propunem s evalum in situ impactul ecotoxicologic al unui deeu
biodegradabil, respectiv nmolul de epurare stabilizat anaerob, nencadrat n prezent ntr-o
categorie de folosin din punct de vedere al posibilitilor de valorificare n Romnia. Acest
produs a fost supus suplimentar unor tratamente fizice i chimice i evaluat din punct de vedere
al gradului de ecotoxicitate, din perspectiva valorificrii acestuia. Din literatura de specialitate
au fost selectate, ca nivel de studiu pentru aceste teste, organizarea celular de tip procariot
(bacteriile) i organizarea celular de tip eucariot (plante i animale).
Scopul principal al acestei teze de doctorat l reprezint evaluarea ecotoxicologic
a nmolului de epurare stabilizat anaerob.
n plan secundar s-a urmrit:
a) testarea efectelor ecotoxicitii induse nmolului de epurare stabilizat anaerob prin
aplicarea suplimentar a unor tratamente fizico-chimice;
b) evidenierea efectelor ecotoxicologice induse de fiecare tratament aplicat
suplimentar.
7
Obiectivele principale ale acestei teze de doctorat sunt urmtoarele:

caracterizarea din punct de vedere ecotoxicologic al nmolului de epurare stabilizat
anaerob;
realizarea unor tratamente fizice i chimice adecvate pentru igienizarea suplimentar a
nmolului de epurare stabilizat anaerob;
evaluarea ecotoxicitii nmolului de epurare stabilizat anaerob tratat suplimentar pe
diferite nivele de organizare ale lumii vii;
realizarea de comparaii critice privind gradul de ecotoxicitate a nmolului de epurare
stabilizat anaerob, n funcie de tratamentul suplimentar aplicat.
Obiectivele secundare ale acestei teze de doctorat sunt urmtoarele:
Identificarea tipurilor de tratamente fizice i chimice cu aplicabilitate n acest domeniu, din
literatura de specialitate;
Identificarea celor mai eficiente tratamente fizice (pasteurizare, iradiere cu radiaii alfa,
ultrasunete, microunde) i chimice (CaO, CaCO3, NaOH, uree) din punct de vedere
sanogen;
Evaluarea efectelor mutagene ale nmolului de epurare stabilizat anaerob supus
tratamentelor la nivel celular pe urmtoarele plante test: ceap (Allium cepa L.) varietatea
galben, grul comun soiul Dropia (Triticum aestivum L.);
Evaluarea efectelor fitotoxice ale nmolului de epurare stabilizat anaerob la nivelul unor
parametri de cretere i dezvoltare pe urmtoarele plante test: grul comun soiul Dropia
(Triticum aestivum L.) i linti (Lemna minor L.);
Evaluarea efectele ecotoxicologice ale nmolului de epurare stabilizat anaerob asupra
microorganismelor;
Compararea eficienei tratamentelor fizico-chimice aplicate nmolului de epurare stabilizat
anaerob din punct de vedere ecotoxicologic.
Structura tezei de doctorat
Teza de doctorat este structurat n trei pri principale, respectiv partea de

fundamentare tiinific a cercetrii, metodologia cercetrii i partea de cercetare aplicativ.
Cele 10 capitole ale prezentei teze de doctorat nsumeaz un numr de 238 pagini, 99 de figuri,
34 de tabele, 27 relaii matematice i 201 referine bibliografice.
Prima parte de fundamentare tiinific a tezei conine trei capitole i este destinat
analizei managementului i tratamentelor aplicate nmolurilor de epurare provenite de la
staiile de epurare. Gestionarea durabil a acestor sisteme coloidale complexe, cu o compoziie
eterogen ce impune cunoaterea caracteristicilor generale, sunt aspecte prezentate n Capitolul
1. Cantitatea total de nmol de epurare netratat produs n Romnia este n continu cretere,
situaia pe regiuni reflectnd un trend ascendent, constatare ce impune identificarea unor soluii
optime de eliminare sau/i de valorificare ale acestora. n acest context, a fost elaborat o
analiz a stadiului cunoaterii, la nivel naional i internaional privind procesele tehnologice i
procedeele de tratare la care este supus nmolul de epurare provenit de la staiile de epurare
(Capitolul 2). Pentru a evidenia efectele subacute i nivelele de contaminare ce nu sunt
observabile, dar produc leziuni fiziologice sunt utilizai indicatorii de toxicitate. Datorit
riscurilor multiple generate de manipularea nmolurilor de epurare, este necesar a fi evaluat
potenialul ecotoxicologic prin calcularea indicatorilor specifici, subiect abordat n Capitolul 3
al tezei de doctorat.
Partea a II-a conine metodologia cercetrii i este structurat n trei capitole ce

prezint materialele i metodologia specific studiului ecotoxicitii nmolului de epurare
stabilizat anaerob, pe diferite nivele de organizare ale lumii vii. n vederea creterii valorii
atribuite nmolului de epurare stabilizat anaerob i a reintegrrii n circuitul natural al materiei,
s-au cutat soluii tehnice suplimentare de tratare. Astfel, n Capitolul 5 sunt descrise tehnicile
ce investigheaz schimbrile structurale sau morfologice cauzate de utilizarea nmolului de
epurare stabilizat anaerob la nivelul speciei Triticum aestivum L. (grul comun) soiul Dropia, i
al speciei Lemna minor L.. Testele ecotoxicologice propuse n acest studiu prezint cu destul de
mult claritate impactul nmolului de epurare stabilizat anaerob pe termen scurt (toxicitate
acut), dar i pe termen lung (toxicitate cronic). Analiza de design experimental mpreun cu
analiza componentelor principale au fost principale instrumentele de analiz statistic a datelor
(Capitolul 6). Astfel de metode pot evalua rapid msura n care efectele induse de anumite
tratamente fizice si chimice aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob pot mri sau
micora gradul de toxicitate al produsului testat.
Partea a III-a constituie partea de cercetare aplicativ a tezei. Aceasta este organizat
pe trei capitole ce sumarizeaz i discut rezultatele testelor de ecotoxicitate ale nmolului de
epurare stabilizat anaerob tratat prin diferite metode fizice i chimice, la nivel: procariot
bacterii (Capitolul 7), la nivel eucariot plante (Capitolul 8) i la nivel eucariot-animale
(Capitolul 9).Cuantificarea gradului de ecotoxicitate este stabilit prin intermediul indicatorilor
de output specifici, la nivelul fiecrui organism test utilizat. Nmolul de epurare stabilizat
anaerob conine o microflor patogen cu risc de transfer n diferite ecosisteme i cu efecte
negative din punct de vedere a durabilitii i sustenabilitii acestora. Aceste efecte se pot
manifesta ntr-un timp scurt, mediu sau pe o durat mare de timp, concomitent cu efectul de
bioacumulare al metalelor grele sau a altor categorii de poluani. Astfel de studii sunt necesare
n calcularea riscului de mediu i sntate, n vederea reutilizrii acestei categorii de produse
reziduale.
Teza de doctorat se finalizeaz cu principalele concluzii generate de investigaiile
efectuate asupra potenialului toxic al nmolului de epurare stabilizat anaerob, aspect ce
nu trebuie neglijat n opiunile de management ale acestui produs, mai ales n condiiile n
care, n prezent, nu exist criterii de clasificare n vederea utilizrii n agricultur.
Sintetiznd concluziile prezentate n cadrul acestei teze de doctorat: ,,Studii
ecotoxicologice privind nmolul de epurare stabilizat anaerob,, pot fi desprinse urmtoarele
posibiliti de dezvoltare ulterioar a temei de cercetare: crearea unei baze de date spectrale ale
tulpinilor bacteriene izolate cu posibilitatea identificrii rapide a acestora; promovarea
introducerii testelor ecotoxicologice n criteriile de selecie ale nmolurilor pentru utilizare n
diferite domenii; elaborarea unui ghid de realizare a testelor ecotoxicologice pentru testarea
altor deeuri; propunerea unor tratamente de igienizare suplimentare a nmolului de epurare
stabilizat anaerob, n cadrul staiei de epurare.
Teza aduce contribuii originale relevante, att pentru nelegerea necesitii
cuantificrii indicatorilor de ecotoxicitate, dar i din perspectiva soluiilor tehnice privind
reducerea gradului de toxicitate al nmolului de epurare stabilizat anaerob. Una dintre
contribuiile originale ale tezei este adaptarea ghidurilor OECD 208 i 227 de testare a
substanelor poluante pentru evaluarea toxicitii nmolului de epurare stabilizat anaerob.
Propunerea cu privire la introducerea investigaiilor citogenetice, ca test de importan major
n cadrul studiilor de ecotoxicitate realizate pe nmolul de epurare stabilizat anaerob, cu
posibilitatea aplicrii i pe alte categorii de produse, este o alt contribuie original. Evaluarea
rapid a gradului de toxicitate asociat fiecrui tip de nmol de epurare stabilizat anaerob tratat
suplimentar, ca rezultat al analizei spectrale n infrarou, de asemeni, constituie un alt mod de

abordare original.
Aceast tez de doctorat are la baz sinteza cercetrilor realizate pe plan naional i
internaional n acest domeniu, precum i rezultatele originale ale cercetrilor elaborate de
ctre autoare n perioada 2012-2014, i valorificate astfel:2 lucrri publicate n reviste cotate
ISI cu factor de impact, 3 lucrri n evaluare n reviste cotate ISI cu factor de impact i 2 n
reviste cotate BDI; 1 lucrare publicat integral n volumul unei conferine internaionale; 7
lucrri publicate n reviste indexate BDI; 29 lucrri prezentate la conferine naionale i
internaionale; 2 proiecte de cercetare naionale, ca membr n colectiv.
Not: La redactarea rezumatului s-au pstrat aceleai notaii pentru capitole,
paragrafe, figuri, tabele i ecuaii utilizate n textul tezei de doctorat.
10
Capitolul 7. REZULTATELE TESTELOR DE ECOTOXICITATE ALE

NMOLULUI DE EPURARE STABILIZAT ANAEROB TRATAT PRIN DIFERITE
METODE FIZICO-CHIMICE LA NIVEL PROCARIOT - BACTERII
7.1.Numrul total de ageni patogeni identificai n urma tratamentelor cu radiaii
ionizante de tip alfa
Expunerea nmolului stabilizat anaerob la radiaiile ionizante de tip alfa generate de un
dispozitiv cu Am241(Fig. 7.1) a determinat o reducerea numrului total de germeni/de 90%
dup 20 de minute de la iradiere,comparativ cu martorul. La 60 de minute timp de iradiere
numrul total de germeni/este redus cu 95,94% fa de proba martor, iar la 120 minute efectul
este maxim. Sursa de Americiu 241 folosit are o activitate de 330 Bq.
Fig. 7. 1 Reprezentarea grafic a variaiei cu timpul de expunere a numrului total de germeni/din

nmolul stabilizat anaerob supus iradierii alfa
Tratamentul de iradiere alfa a probelor s-a realizat ntr-o incint vidat, astfel nct
putem presupune c majoritatea particulelor alfa emise de surs au ajuns la inta de iradiere
aflat n direcia acesteia, inta aflndu-se la o distan de surs de maximum 2 mm. Parcursul
radiaiei alfa n aer este de aproximativ 3,4 cm [172]. Prin scderea presiunii n incinta de
msurare, parcursul particulelor crete la valori de ordinul metrilor. Pe de alt parte, n ap
parcursul radiaiei alfa este de 38m [172].
Dac presupunem c geometria experimental este aleas astfel nct 1/3 din
radioactivitatea sursei s fie util n iradiere, atunci n fiecare secund n int ptrund 110.000
particule alfa.
Energia medie a particulelor alfa este 5,4618 MeV [173], deci cantitatea de energie
eliberat n int este 5,4681106x 110.000 x 1,610-19=9,6210-8J.
Pentru a calcula doza, trebuie s estimm masa de substan n care se disip aceast
energie. Considernd inta de o consisten apropiat apei, atunci parcursul radiaiei alfa este de
38 m, iar suprafaa expus este dat de suprafaa unui disc cu diametrul de 10 mm, se obine o
mas de substan iradiat de 5,9610-8kg. Doza calculata D=Energia/masa=1,61 J/Kg (Gy).
Aceast doz are o valoare foarte mare, datorit caracteristicii radiaiei alfa de a
interaciona foarte puternic cu materia. Pentru radiaia gama, ar fi fost necesar o surs
radioactiv mult mai puternic, iar timpii de iradiere mult mai mari pentru aceeai doz.
11
Fig. 7. 2 Reprezentarea grafic a variaiei numrului de patogeni din nmolul stabilizat anaerob supus
iradierii alfa n funcie de timpul de expunere
Agenii patogeni heterotrofi aerobi, tulpini identificate pe medii selective de SS-agar

(Salmonella spp), Eosine Metilene Blue (E. coli) i McConkey (coliformi totali) au manifestat
urmtorul comportament la tratamentul de iradiere alfa:
la o iradiere alfa de 30 minute avem o reducere a coliformilor totali cu 94% i de 96% la o
iradiere de 60 min comparativ cu martorul;
Salmonella spp prezint o reducere fa de martor de 99,60% n numai 30 de minute de
iradiere alfa;
E coli manifest o rezisten mai mare comparativ cu Salmonella spp, dup 30 de minute de
tratament manifestnd o reducere de 96,42% i de 98,67% dup 60 de minute;
n concluzie, se poate aprecia faptul c iradierea alfa aplicat nmolului de epurare
stabilizat anaerob prezint un efect de igienizare cu o eficien de 94% dup aproximativ 30 de
minute de la aplicare. Doza absorbit de ctre celulele bacteriene este de 2903 J/Kg (Gy), iar
pentru 60 de minute de aplicare doza absorbit este de 5807 J/Kg (Gy). La 120 de minute de
aplicare cu o doz absorbit de radiaii de 11614 J/Kg (Gy), celulele bacteriene au fost distruse
n totalitate.
7.2. Numrul total de ageni patogeni identificai n urma tratamentelor cu radiaii
ultraviolete
Expunerea la radiaii ultraviolete (Fig. 7.3 a) produc o reducere a numrului total de
germeni fa de martor de 53,79% dup o or de tratament, de 78,86% dup 2 ore i de 97,89%
la trei ore.
12
b
Fig. 7. 3 Reprezentarea grafic a variaiei cu timpul de expunere a numrului total de germeni (a) i a
numrului de heterotrofi aerobi patogeni/ (Salmonella spp, E coli) (b) din nmolul stabilizat anaerob
supus iradierii cu ultraviolete
Reducerea numrului de heterotrofi patogeni (Fig. 7.3b) a fost de 7 % pentru coliformi

totali, de 13,26 % pentru E. coli i de 96,22% pentru Salmonella spp la tratamentul cu
ultraviolete aplicat timp de o or, comparativ cu martorul. Dup 2 ore de tratament reducerea
este semnificativ pentru Salmonella sp (98,80%) iar pentru E. coli i grupul coliformilor
reducerea este de 50% fa de martor. Efectul indus de radiaiile ultraviolete la nivelul celulei
bacteriene [59] se manifest prin pierderea permeabilitii membranei celulare, n acest mod
fiind perturbat funcionarea celulei sau prin denaturarea proteinelor i inactivarea unor enzime
la lungimea de und de 250-280nm.Fa de tratamentul cu radiaii ionizante, eficiena
tratamentului cu ultraviolete este mai sczut, manifestndu-se abia dup trei ore de la
aplicarea tratamentului pentru fiecare grup analizat. Aplicabilitatea practic ns a acestor dou
categorii de tratamente efectuate nmolului de epurare stabilizat anaerob este limitat,
necesitnd o infrastructur adecvat.
7.3. Numrul total de ageni patogeni identificai n urma tratamentelor cu microunde
Tratamentul cu microunde a unei cantiti de 5 g de nmol stabilizat anaerob s-a realizat
la o putere de 750 W i a determinat o reducere a numrului de bacterii din nmolul de epurare
stabilizat anaerob de 93,92 % la un timp de expunere a nmolului de 1 minut i de 98% dup 2
minute de expunere (Fig. 7.4.) comparativ cu proba martor.
Fig. 7. 4 Reprezentarea grafic a variaiei cu timpul de expunere a numrului total de germeni din
nmolul stabilizat anaerob supus tratamentului cu microunde
Asupra heterotrofilor patogeni, grupul coliform, Salmonella spp i E. coli (Fig. 7.5)
eficiena tratamentului cu microunde este foarte bun, producnd o reducere cu 99% dup
numai 2 minute de tratament a grupelor analizate.
13
Fig. 7. 5 Reprezentarea grafic a variaiei cu timpul de expunere a numrului de heterotrofi aerobi

patogeni/ (Salmonella spp, E coli) (b) din nmolul stabilizat anaerob supus tratamentului cu microunde
7.4. Numrul total de ageni patogeni identificai n urma tratamentelor cu ultrasunete a

nmolului de epurare stabilizat anaerob
Tratamentul cu ultrasunete realizat pe un eantion de 250 mL nmol de epurare
stabilizat anaerob a determinat reducerea microflorei mezofile totale (Fig.7.6a) cu 44,38% la
15 minute de tratament, cu 79 % la 30 minute i 94,95% la 60 minute. Se poate remarca faptul
c mrirea timpului de aciune al ultrasunetelor este corelat cu reducerea agenilor patogeni
mezofili aerobi i cu un grad crescut de biodegradabilitate al nmolului, aspect util din punct de
vedere energetic [68].
Grupul coliformilor a manifestat o reducere fa de proba martor (Fig. 7.6.b) de 52,32%
la varianta experimental de nmol de epurare stabilizat anaerob tratat timp de 15 minute; de
60,13% la varianta experimental tratat timp de 30 minute; de 75,61% la varianta
experimental tratat timp de 60 minute i de 93% la varianta experimental tratat timp de 120
minute de tratament.
b
supus tratamentului cu ultrasunete
14
7.5. Numrul total de ageni patogeni identificai n urma pasteurizrii

Folosirea pasteurizrii ca metod de tratament pentru reducerea agenilor patogeni la o
cantitate de 250 mL de nmol stabilizat anaerob i-a dovedit eficiena la un timp minim de
aplicare de 15 min (Fig.7.7. a-b). Eficiena de igienizare pentru microflora total (Fig. 7.7a) a
fost de 94,04% fa de proba martor. Pentru grupul total coliformilor reducerea a fost de
95,06% la 15 min de tratament aplicat nmolului stabilizat anaerob i de 99,86% pentru 30
minute de tratament. (Fig. 7.7b),
b
supus pasteurizrii
Tratamentele de pasteurizare, ultrasunete i microunde discutate anterior au fost

realizate pe acelai lot martor de nmolul de fermentare stabilizat anaerob.
Se poate remarca c toate aceste tratamente fizice aplicate nmolului de fermentare
stabilizat anaerob au efect negativ asupra dezvoltrii agenilor patogeni eficiena lor fiind
influenat i de cantitatea de nmol utilizat n lucru, dar i de parametri de lucru.
7.6. Numrul total de ageni patogeni identificai n urma tratamentelor chimice
Tratamentele chimice au fost realizate pe acelai lot de nmol conform procedurii
indicate la metodologia de lucru, folosindu-se acelai martor.
Numrul total de microorganisme (Fig. 7.8 a-d) s-a redus cantitativ comparativ cu
proba martor la toate cele patru categorii de substane chimice folosite n tratamentul nmolului
de fermentare stabilizat anaerob cu urmtoarele particulariti:
Tratamentul cu uree se dovedete a fi cel mai eficient n proporiile utilizate n acest
studiu din punct de vedere al parametrului numr total de microorganisme pentru toate
variantele de timp analizate. La 120 minute timp de reacie al nmolului de fermentare
stabilizat anaerob cu CaO, CaCO3, NaOH, efectul bactericid devine evident (>90%) fa de
proba martor.
15
d
Fig. 7. 8 Reprezentarea grafic a variaiei cu timpul de expunere a numrului total de germeni din
nmolul stabilizat anaerob supus tratamentelor chimice cu CaO ( a), CaCO3 (b), NaOH (c), uree
(UR)(d)
16
Reducerea agenilor patogeni heterotrofi (Fig. 7.9 a-d) s-a manifestat diferit pe
grupele de microorganisme identificate pe medii selective comparativ cu proba martor.
d
Fig. 7. 9 Reprezentarea grafic a variaiei cu timpul de expunere a numrului de heterotrofi aerobi
patogeni/ (Salmonella spp, E coli) din nmolul stabilizat anaerob supus tratamentelor chimice cu CaO
(L) (a), CaCO3 (b), NaOH (c), uree (UR) (d)
17
Eficiena tratamentului cu substane chimice privind inhibarea creterii (efect

bacteriostatic) sau distrugerea agenilor patogeni (efect bactericid) comparativ cu proba martor
(nmolul de epurare stabilizat anaerob) crete pe msur ce amestecul este lsat s acioneze n
timp. Stabilirea dozelor maxime de substane chimice i a timpului optim de aciune pentru
atingerea standardelor de folosire a nmolului de epurare stabilizat anaerob n agricultur n
este una din problemele actuale de cercetare n domeniu [81, 176] deoarece un adaos prea mic
sau prea mare de substane chimice perturb microflora normal a solului, cu repercusiuni n tot
ecosistemul.
Tratamentele fizice nu pot fi comparate ntre ele din perspectiva rezultatelor obinute n
urma analizelor microbiologice cantitative, respectiv al determinrii numrului de ageni
patogeni din motive de ordin experimental. Nu s-a putut expune la tratamentele suplimentare
aceeai cantitate de nmol. Cel mult se poate aprecia pentru fiecare tratament n parte eficiena
din punct de vedere bactericid fa de martor, respectiv nmolul stabilizat anaerob. n ceea ce
privete tratamentele chimice rezultatele pot fi comparate. Eficiena cea mai ridicat din punct
de vedere bactericid fa de martor este atribuit tratamentului cu uree, respectiv de 99,10%
dup un timp de contact dup 120 de minute.
7.7. Rezultatul antibiogramei pentru tulpinile investigate
7.7.1. Rezultatul antibiogramei pentru tulpina E. coli (a) i Salmonella sp (b)
O alt abordare n acest studiu privind testele ecotoxicologice realizate la nivel procariot
i a tratamentelor aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob a fost efectuarea unor teste
ce au ca scop reacia de sensibilizare a tulpinilor patogene (E coli i Salmonella spp) dar i a
tulpinilor izolate n urma tratamentelor fizico-chimice.
A fost aplicat un test simplu, al antibiogramei efectuate prin metoda Kirby-Bauer [123],
test ce permite identificarea sensibilitii microorganismului fa de un antibiotic testat. In urma
analizei tulpina bacterian poate fi sensibil, rezistent sau indiferent la antibioticul testat.
Tulpinile patogene izolate dup fiecare categorie de tratament aplicat nmolului de epurare
stabilizat anaerob, E. coli (Fig. 7.10) i Salmonella spp (Fig. 7.11) devin dup anumite
tratamente aplicat nmolului de epurare stabilizat anaerob susceptibile la aciunea unui
antibiotic comparativ cu proba martor. Proba martor este reprezentat de tulpina bacterian
izolat din nmolul de epurare stabilizat anaerob netratat. Gruparea celor dou tulpini patogene
izolate (Fig. 7.10, Fig. 7.11) din nmolul de epurare tratat fizico-chimic n: sensibile, rezistente
i indiferente la aciunea antibioticelor testate se face respectnd cerinele specificate de
productorul microcomprimatelor de antibiotic.
Fig. 7. 10 Rezultatul antibiogramei pentru tulpina E. coli identificate pe probele de nmol stabilizat
anaerob la aciunea antibioticelor testate (CN10,CZ30,STX25, CL30, N30)
18
Tratamentul cu ultraviolete aplicat nmolului de epurare stabilizat anaerob a crescut

gradul de sensibilitate al tulpinilor de E. coli izolate pe msura creterii timpului de aplicare la
toate categoriile de antibiotice testate.
Tratamentul cu microunde nu schimb foarte mult reacia fa de antibioticul testat,
efectul bactericid al acestuia fiind demonstrat anterior.
Tratamentul de pasteurizare aplicat nmolului de epurare stabilizat anaerob induce o
sensibilitate a tulpinii E coli fa de N30-neomycin cu 31,57% comparativ cu proba martor.
Tratamentele chimice aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob cu foarte mici
variaii schimb comportamentul tulpinilor de E. coli pentru microcomprimatele CL30cephalexin i N30-neomycin comparativ cu proba martor.
Se poate remarca faptul c reacia tulpinilor bacteriene patogene prezente n nmolul de
epurare stabilizat anaerob poate fi modificat de aciunea unui factor fizico-chimic ce
acioneaz asupra nmolului, acest fapt necesitnd atenie sporit n diferite situaii de
gestionare a nmolului de epurare stabilizat anaerob pentru a nu periclita sntatea mediului i
a omului.
7.7.2. Rezultatul antibiogramei pentru tulpinile bacteriene izolate ISO
O alt abordare a ecotoxicitii manifestate la nivelul microflorei prezente n nmolul
de epurare stabilizat anaerob a fost ilustrat prin intermediul antibiogramelelor efectuate pe
tulpini izolate ISO (Fig 7.12) n mod aleatoriu din nmolul de epurare stabilizat anaerob tratat
i netratat. Aceast analiz ne poate indica mrimea efectelor induse de tratamentul aplicat
nmolul de epurare stabilizat anaerob la nivel procariot.
Pentru a avea o precizie a datelor ecotoxicologice (doz-efect) realizate pe baza
sensibilitii tulpinilor bacteriene la antibiotice studiile pot fi continuate pentru fiecare dintre
tulpinile patogene i nepatogene izolate din nmolul stabilizat anaerob tratat i netratat, n
scopul identificrii dozei de antibiotic [177, 178] corespunztoare concentraiei minime
inhibitorii.
Fig. 7. 11 Rezultatul antibiogramei pentru tulpinile ISO izolate din probele de nmol stabilizat anaerob
supus tratamentelor fizico-chimice (alfa, L, MW,UR, US, UVC) la aciunea antibioticelor testate
(CN10,CZ30,STX25, CL30, N30)
7.8. Rezultate privind caracterizarea tulpinilor bacteriene izolate din probele de nmol
stabilizat anaerob supuse tratamentului fizic i chimic
Asupra tulpinilor izolate din nmolul de epurare stabilizat anaerob (ISO) a fost efectuat
o caracterizare obligatorie n procesul de identificare al speciilor. Din raiuni materiale nu au
putut fi realizate testele biochimice care pot confirma apartenena bacteriilor la un grup
sistematic. Nefiind un studiu strict de microbiologie, datele prezentate le considerm ca fiind
19
suficiente pentru o caracterizare primar. Aspectele culturale ale coloniilor, coloraia Gram,
testul oxidazei, observaiile microscopice asupra formei celulelor n preparate native sunt
cteva dintre evalurile fcute asupra tulpinilor izolate (ISO) din nmolul de epurare stabilizat
anaerob. Ca element de noutate propunem o analiz spectral a culturilor ISO, analiz ce va fi
discutat n subcapitolul urmtor.
Din totalul tulpinilor izolate un procent de 57,14% tulpini sunt Gram pozitive (G+) cu
diferite moduri de dezvoltare a culturii bacteriene formate pe un mediu uzual de geloz i sunt
n totalitate OXI+. Prezena acestor categorii de tulpini bacteriene izolate din aerosolii din
fermele de porci [179] sau din diferite dejecii si excremente [180], ceea ce poate fi valabil n
cazul nmolului utilizat n studiu care este un rezultatul activitii unei staii de epurare
oreneti. Un procent de 42,85% din tulpinile izolate din nmolul de epurare stabilizat anaerob
sunt Gram negative (G-). De remarcat este faptul c din nmolul de epurare stabilizat anaerob
au fost izolate doar specii oxidazo-pozitive (OXI+), specii ce aparin Pseudomonadaceaelor
[181].
Caracterizarea primar a tulpinilor izolate este insuficient pentru plasarea tulpinilor
ntr-un grup sistematic, nsa ofer informaii privind impactul tratrii nmolului de epurare
stabilizat anaerob asupra gradului de supravieuire i de dezvoltare al microorganismelor
mezotrofe aerobe.
Pentru a asigura o buna caracterizare a tulpinilor izolate (ISO) s-a recurs n prezentul
studiu ca element de noutate pentru caracterizarea microflorei nmolului stabilizat anaerob prin
analiza spectral n infrarou.
7.9. Analiza spectral a tulpinilor bacteriene izolate (ISO) din probele de nmol stabilizat
anaerob supuse tratamentului fizic i chimic
Caracteristicile structurale i compoziionale ale tulpinilor bacteriene izolate n cultur
pur provenite din nmolul de epurare stabilizat anaerob au fost identificate folosind tehnica
spectroscopic n Infrarou cu Transformat Fourier FTIR.
Au fost investigate tulpinile bacteriene izolate n cultura pur prezente nainte ct i
dup aplicarea suplimentar a unor tratamente fizico-chimice nmolului de epurare stabilizat
anaerob. Tratamentele aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob pentru care au fost
izolate aceste tulpini au fost: iradierea cu ultraviolete (UVC), iradierea cu radiaii ionizante de
tip alfa (Alfa), cu ultrasunete (US), cu microunde (MW), tratarea cu CaO (L) i cu uree (UR).
A fost izolat i o tulpina ca fiind cea mai des ntlnite n nmolul stabilizat anaerob netratat.
Fiecare spectru nregistrat corespunztor tulpinilor izolate a fost prelucrat din punct de
vedere matematic (s-a utilizat derivata a doua, funcie ce permite evidenierea maximelor
ascunse) [182].
nregistrarea spectrelor obinute la bacteriile izolate pe un mediu uzual de geloz
nutritiv s-a realizat prin transferul unei pri din colonie cu instrumente sterile, astfel nct s
se evite contaminarea probelor. S-a utilizat interfaa Golden Gatecu reflexie total atenuat
ATR a spectrofotometrului de absorbie n infrarou Tensor 27, Bruker.
Spectrele au fost nregistrate pe domeniul 4000 550 cm-1, cu o rezoluie de 4 cm-1 i
36 de scanri. Dup nregistrarea fiecrui spectru a fost curat suprafaa accesoriului ATR cu
metanol 99%. nainte de nregistrarea fiecrei probe (obinut n triplicat) s-a nregistrat
spectrul aerului (background). Datele spectrale obinute au fost ulterior prelucrate cu softwareul ORIGIN versiunea 9.
Pentru a putea realiza o evaluare corect a datelor spectrale pentru nceput au fost
supuse analizei spectrale probele de nmol netratat suplimentar (N) precum probele de nmol
sterilizat suplimentar (NS) (Fig. 7.13a), derivatele de ordin 2 ale mediului nutritiv Geloza G
(Fig. 7.13b), ale nmolului N (Fig. 7.13 c) i ale nmolului NS (Fig. 7.13d) obinut n urma
sterilizrii suplimentare prin autoclavare, respectndu-se procedurile standardizate [132].
Msurtorile s-au efectuat n domeniul spectral 550 cm-1 4000 cm-1.
20
0.30
0.25
N
NS
Absorbanta
0.20
0.15
0.10
0.05
0.00
-0.05
-0.10
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
Numar de unda(cm-1)
a
0.0004
0.0000
612
1618
586
-0.0004
400
563
600
800
1000
1200
1400
1629
1637
1651 1682
-0.0002
1562
Derivata a doua
0.0002
1600
1800
2000
2200
-1
Numar de unda (cm )
21
0.004
Derivata a doua
0.003
0.002
0.001
0.000
702
-0.001
-0.002
563
1599
586
1589
572
1562
-0.003
1538
400
600
800
1000
1200
1400
1600
1800
2000
2200
-1
Numar de unda(cm )
c
0.0006
NS
Derivata a doua
0.0004
0.0002
0.0000
-0.0002
670
563
-0.0004
-0.0006
600
800
1652
1635
1562
1619
586
572
400
1686
640
1000
1200
1400
1600
1800
2000
2200
-1
Numar de unda (cm )
d
Fig. 7. 12 Spectrul de absorbie n ATR funcie de numrul de und pentru probele de nmol de
epurare stabilizat anaerob (N) i nmol de epurare stabilizat anaerob suplimentar tratat prin
autoclavare (NS) (a); Derivata a2-a a spectrului ATR n funcie de numrul de und pentru
probele de Geloz nutritiv (b), N (c) i NS (d)
Din Fig 7.13 a se observ c spectrul ATR pentru nmolul NS difer substanial de
spectrul nmolului N (n care microorganismele sunt viabile) n domeniul spectral 2000 cm-1
550 cm-1. Aceast constatare se confirm n urma efecturii derivatei de ordinul 2 a spectrelor
iniiale ale gelozei, N i al celui sterilizat suplimentar prin autoclavare NS. Prin urmare, se
22
poate afirma c n domeniul spectral 2000 cm-1 550 cm-1 se pot identifica diferenele dintre
spectrele fiecrei tulpini bacteriene investigate. Domeniul spectral ales este diferit de cel
utilizat n literatura de specialitate [183].
Din Figura 7.13 c-d se observ diferene majore ntre spectrele nmolului N i a celui
tratat suplimentar prin autoclavare NS n dou domenii distincte 550 cm-1 875cm-1 (I) i 990
cm-1 1633cm-1(II). Deoarece domeniul fingerprint este considerat de cei mai muli autori [183185] ca fiind atribuit intervalului 1800 cm-1 550 cm-1, ne-am propus s analizm mai detaliat
spectrele tulpinilor izolate n acest domeniu spectral.
Benzile din domeniul I sunt cauzate n principal de legturile carbonului. Maximele din
regiunea de la 586 cm-1 corespund vibraiilor de deformare a legturilor C-H n afara planului.
Cel de al doilea domeniu II, specific nmolurilor N i NS (Fig.7.14 c-d),prezint dou
particulariti la 1537 cm-1 i la 1560 cm-1ce corespund gruprilor Amide II.
Pentru a caracteriza tulpinile bacteriene izolate din punct de vedere al structurii
moleculare au fost studiate spectrele ATR ale acestora n domeniul 550 cm-1 1800 cm-1.
Scopul acestor analize a fost de a identifica amprenta (fingerprint) fiecrei tulpini
bacteriene care a rmas rezistent la tratamentul aplicat.
Datorit faptului c n domeniul 550 cm-1 800 cm-1 nu s-au remarcat particulariti
bine definite, domeniul de investigare s-a redus la 900 cm-1 1700 cm-1. Pentru ca rezultatele
investigaiilor particularitilor tulpinilor izolate s nu interfere cu mediul nutritiv pe care au
fost crescute tulpinile izolate s-au identificat i caracteristicile spectrale ale gelozei G (mediul
nutritiv pentru tulpinile izolate) (Fig.7.14b).
Caracterizarea la nivel de structur molecular a tulpinii cel mai frecvent ntlnit n
nmolul de epurare stabilizat anaerob i a tulpinilor bacteriene cele mai frecvent ntlnite n
nmolul de epurare stabilizat anaerob supus unor tratamente fizico-chimice pentru o igienizare
suplimentar este prezentat n Fig. 7.14. a-g.
n plus, pentru a putea evidenia diferenele dintre structurile moleculare ale tulpinilor
izolate rezistente la diferite tratamente s-a sintetizat n Tabelul 7.7 atribuirea principalele benzi
rezultate din analiza derivatei de ordinul 2 a spectrului iniial de absorbie funcie de numrul
de und n regiunea 700-1800 cm-1.
Limita de eroare a numerelor de und n care am considerat ca fiind aceleai benzi de
absorbie a fost de 15 cm-1 conform literaturii de specialitate [189].
Tabel 7. 1 Atribuirea benzilor de absorbie FTIR ale bacteriilor izolate din nmolul de epurare
stabilizat anaerob nainte i dup tratamentele suplimentare aplicate
Principalele benzi de absorbie FTIR (cm-1) al fiecrei tulpini
bacteriene rezistente la tratamente
ISO
ISO1
ISO2
ISO3
ISO4
ISO5
ISO6
916
974
1060
1074
1233
1231
1270
1353
1354
Referine
Atribuire
Inel riboz
ADN
COC, POC vibraii de
ntindere simetric a
polizaharidelor
PO2 vibraii de ntindere
simetric a ADN-ului i
fosfolipidelor
asimetric a ADN-ului i
fosfolipidelor
asimetric a ADN-ului i
fosfolipidelor
C-O, C-H, N-H vibraii de
ntindere
[185]
[185]
[190]
[185,
190]
[190]
[190]
[184]
23
Principalele benzi de absorbie FTIR (cm-1) al fiecrei tulpini

bacteriene rezistente la tratamente
ISO
ISO1
ISO2
ISO3
ISO4
ISO5
ISO6
1372
1387
1409
1442
1449
Referine
Atribuire
CH2 vibraii de ndoire ale
lipidelor
COO vibraii de ntindere
simetric a catenelor laterale
ale aminoacizilor i acizilor
grai
CH2 vibraii simetrice de
ndoire ale lipidelor
CH3 vibraii asimetrice de
ndoire ale lipidelor
Amide II (vibraie de ndoire
N-H cuplat cu vibraia de
ntindere a legturii C-N)
Amide II
1419
1459
1502
1502
1520
1518
[190]
[190]
[190]
[185]
[191]
[184]
Proba ISO4 are dou minime la 1518 cm-1 i 1575 cm-1 nguste i de o intensitate mare.
Acestea sunt atribuite gruprilor funcionale Amide II (Fig. 7.14e). Probele ISO i ISO3 (Fig.
7.14a,d) au dou minime comune la ~1548 cm-1 i la ~1642 cm-1. Datorit faptului ca minimul
de la 1642 cm-1 se regsete i n mediul nutritiv la 1637 cm-1, el va fi exclus ca i item de
identificare a tulpinii. La fel se va proceda i cu numrul de und 1353 cm-1 care se regsete
n dou tulpini diferite (ISO2 la 1353 cm-1i ISO5 la 1354 cm-1), cu 1563 cm-1 (G la 1562 cm-1,
ISO1 la 1572 cm-1, ISO2 la 1563 cm-1, ISO4 la 1575 cm-1 i ISO5 la 1563 cm-1) (Tabel 7.7).
n concluzie singurul numr de und din regiunea propus de noi de 900-1530 cm-1(RS)
pentru a fi investigat n vederea caracterizrii tulpinilor bacteriene eliminat a fost cel de la
1353 cm-1. Celelalte benzi eliminate nu aparin regiunii selectate de noi (RS) i argumenteaz
n plus corectitudinea domeniului ales.
Derivata a doua
0.0001
ISO
0.0000
-0.0001
1372
1459
1548
1502
-0.0002
1300
1400
1500
1592
1600
1642
1700
-1
Numar de unda (cm )
24
IS01
Derivata a doua
0.0002
0.0000
-0.0002
1387
1442
1662
-0.0004
1520
1572
1300
1400
1500
1600
1700
1800
Numar de unda (cm-1)
Derivaata a doua
0.0001
ISO2
0.0000
1537
1444
1233
1074
-0.0001
1409
916
974
800
900
1563
1353
1000 1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700
ISO3
Derivataadoua
0.00005
0.00000
1231
-0.00005
1543
1100
1200
1300
1400
1500
1639
1600
1700
-1
Numar de unda (cm )
d
25
0.0005
Derivataadoua
ISO4
0.0000
1626
1518
-0.0005
1575
1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700 1800 1900 2000
e
ISO5
Derivata a doua
0.00005
0.00000
-0.00005
1563
1354
1419
-0.00010
1100
1200
1300
1400
1500
1600
1700
1800
Derivata a doua
ISO6
0.00000
1532
1752
1502
1060
-0.00005
1270
831
800
1000
1200
1400
1600
1800
g
Fig. 7. 13 Derivata a doua a spectrului de absorbie funcie de lungimea de und atribuit regiunii 8001800 cm-1 pentru tulpina ISO (a), ISO1 (b), ISO2 (c), ISO3 (d), ISO4 (e), ISO5 (f), ISO6 (g) din care a
fost extras spectrul gelozei
26
Se observ c n spectrele pentru tulpinile izolate n domeniul 900-1530 cm-1 nu se

regsesc benzile caracteristice ale nmolului i nici ale mediului nutritiv (Geloza) (Tabelul 7.6).
n aceste condiii vom propune regiunea 900-1530 cm-1 ca domeniu de referin pentru
a diferenia din punct de vedere a structurii moleculare tulpinile bacteriene izolate din nmolul
de epurare rezistente la tratamente.
n plus propunem urmtoarele numere de und specifice tulpinii izolate din nmolul
netratat ISO (1372 cm-1, 1459 cm-1) i tulpinilor izolate rezistente la tratamente ISO2 (916 cm1
, 974 cm-1, 1074 cm-1), ISO3 (1231 cm-1), ISO6 (831 cm-1, 1060 cm-1, 1270 cm-1).
Spectrul molecular al tulpinilor ISO1 i ISO4 nu ne permite evidenierea cu uurin a
unor benzi caracteristice pentru identificarea bacterian.
Analiza componentelor principale ACP n domeniul 900-1530 cm-1
Asupra datelor nregistrate cu ajutorul spectroscopiei IR, a fost realizat o evaluare
statistic a componentelor principale. Scopul analizei componentelor principale ACP este acela
de a grupa variabilele rspuns (n acest caz, spectrul ATR nregistrat ntre 900 i 1530 de cm-1)
n funcie de sursele de influen.
Aceast analiza factorial a fost realizat utilizndu-se metoda ACP de extracie a
factorilor, urmat de metoda de rotaie Varimax cu normalizare Kaiser i s-a aplicat variabilelor
standardizate corespunztoare intensitilor ATR nregistrate pentru fiecare tulpin n parte. n
urma rezultatelor ACP cele 3 componente principale extrase explic mpreun 96% din
variana total. Dup rotaia factorilor, 42% din variana total este explicat de primul factor,
n timp ce al doilea factor acoper 39% (Fig.7.15).
Fig.7. 15 Scorurile factorilor principali rezultai n urma analizei ACP realizate la spectrele celor 7
tulpini izolate din nmolul de epurare stabilizat anaerob nainte i dup tratamentele fizico-chimice
aplicate suplimentar
Se observ caracteristici comune spectrale ntre bacteriile izolate din nmolul de epurare
stabilizat anaerob i acelai nmol expus la radiaii ionizante alfa timp. Acest rezultat infirm
rezultatul anterior obinut din analizele microbiologice. Se poate recomanda utilizarea metodei
de analiz ATR pentru verificarea rapid, suplimentar a existenei tulpinilor bacteriene
rezistente ntr-un nmol igienizat.
n plus se poate diferenia sau n unele cazuri chiar identifica rapid tulpinile izolate
rezistente la tratamente aplicate nmolului de epurarea stabilizat anaerob n domeniul spectral
de referin 900-1530 cm-1.
27

METODE FIZICO-CHIMICE LA NIVEL EUCARIOT PLANTE
8.1. Rezultatele testelor de ecotoxicitate la ceap (Allium cepa L.) var. galben
8.1.1. Rezultate privind studiul aberaiilor cromozomiale la ceap (Allium cepa L.) var.
galben induse de tratamentele aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob
Studiul aberaiilor cromozomiale este deosebit de complex, acestea fiind asociate cu o
serie de factori intrinseci sau extrinseci ce pot cauza apariia lor. La plante, aberaiile
cromozomiale sunt vizibile n preparatele citogenetice analizate la microscopul optic n anatelofaza mitozelor radiculare [192], astfel:
fragmente acentrice care sunt lipsite de centromer i care nu migreaz la cei doi poli ai
celulei, fiind metabolizai dup o serie de diviziuni succesive. Pierzndu-se materialul
genetic se produce un dezechilibru de dozaj la nivelul genelor. Dac segmentul deletat
este de dimensiuni mici i nu conine gene de importan major, celula poate
supravieui. Deleiile cu informaie esenial pentru activitatea celular care afecteaz o
mare parte a cromozomului vor determina moartea celulelor respective;
fragmente centrice de tipul cromozomilor inelari aprute n urma a dou deleii
terminale la nivelul unui cromozom. Aceste fragmente cromozomiale inelare particip
la diviziune avnd centromerul cromozomului, dar fiind lipsite de telomeri;
inele acentrice rezultate din unirea unor fragmente cromozomiale mari; acestea sunt
lipsite de centromer;
punile cromozomiale formate din reunirea a doi sau mai multor cromozomi ce au
suferit deleii terminale. Aceste puni cromozomiale rmn vizibile ntre cele dou mase
cromatidice separate n ana-telofaz;
micronuclee;
cromozomi retardatari - la care centromerul nu se prinde de fusul de diviziune, astfel
neputnd migra la polii celulei i dezechilibrnd n acest mod repartiia cromozomilor
ntre cele dou celule fiice formate;
ana-telofaze tripolare, tetrapolare, multipolare dezorganizate determinate de formarea
fusului de diviziune cu 3,4 sau mai muli poli. n acest mod cromatidele surori migreaz
n 3,4 sau mai multe direcii, ceea ce duce la repartizarea inegal a materialului genetic
ntre celulele fiice rezultate;
aberaii cromozomiale asociate de tipul: puni cu fragmente, puni cu cromozomi
retardatari, puni cu micronuclee, etc.
La specia Allium cepa L. tratat cu nmol de epurare au fost identificate o parte dintre
aberaiile cromozomiale menionate anterior, imagini care sunt redate n Fig. 8.1. a-j.
28
a. Ansamblu de celule aflate n diviziune (40X)

la specia Allium cepa L.
c. Interfaza cu micronucleu
b. Puni i cromozomi expulzai

(foto original)
d. Ana-telofaza cu cromozom expulzat
e. Ana-telofaza cu punte
f. Telofaza cu fragment
g. Profaza (control)
h. Metafaz (control)
29
i. Profaz i ana-telofaz (control)
j. Telofaz (control)
Fig. 8. 1 Aberaii cromozomiale ntlnite la specia Allium cepa L., respectiv profaz (i), telofaz (j),
telofaz cu fragment (f), anatelofaz cu punte (e), interfaza cu micronucleu(c) (foto original)
Reprezentarea grafic a procentului fazelor diviziunilor mitotice pentru fiecare variant

experimental este redat n Fig. 8.2, cea privind indicele mitotic n Fig. 8.3 i cea privind
procentul de aberaii cromozomiale n Fig. 8.4.
Fig. 8. 2 Reprezentarea grafica a procentului fazelor diviziunilor mitotice pentru fiecare variant
experimental
Fig. 8. 3 Reprezentarea grafic a indicelui mitotic exprimat n procente pentru fiecare variant
experimental
30
Fig. 8. 4 Reprezentarea grafic a aberaiilor cromozomiale exprimat n procente pentru fiecare

variant experimental analizat
Aa cum s-a menionat, s-au identificat la unele variante experimentale cu nmol de

epurare stabilizat anaerob tratat suplimentar fizico-chimic i netratat aberaii cromozomiale:
metafaze dezorganizate, metafaze cu cromozomi expulzai, profaze i interfaze cu micronuclei,
profaze cu mugure nuclear.
8.1.2. Rezultate privind datele biometrice obinute la ceap (Allium cepa L.) induse de
tratamentele aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob
Datele biometrice obinute la ceapa tratat cu diferite soluii de nmol de epurare
stabilizat anaerob, tratat i netratat au fost analizate statistic prin metoda de regresie Partial
Least Squares Regression (PLSR) realizat cu ajutorul softului UNSCRAMBLE.
Se pot remarca din analiza graficului din Fig. 8.10 a. corelaiile existente ntre tipul
tratamentelor i celelalte variabile analizate.
Factorul 1 explic 35% din variaia datelor biometrice i prezint o corelaie pozitiv cu
variantele experimentale de nmol tratat prin pasteurizare (PM, PJ, PI) i cu parametrul
concentraie nmol Con_N(%). n acelai grafic se poate observa prezena unei corelaii
negative ntre tipul de tratament (Factor 1) i probele de nmol netrat (N).
Factorul 2 (indicele mitotic) se coreleaz pozitiv cu martorul (AD) pentru toate
variabilele analizate i negativ cu varianta experimental n care s-a utilizat nmol netratat (N)
(Fig. 8.10 c). Corelaii negative se pot observa i n cazul variabilei concentraie nmol i
pentru tipul de tratament PM (Fig. 8.10 c). n graficul din Fig. 8.10 d se poate observa o
corelaie foarte puternic (R>0,9) ntre Factor 2 (indice mitotic) i proba martor (AD), aspect ce
confirm validitatea experimentului. Se mai pot identifica corelaii pozitive, semnificative din
punct de vedere statistic, cu parametrii biometrici masa total rdcini i masa bulbi.
Factorul 3 (dimensiunile biometrice) prezint corelaii pozitive cu tratamentele de
pasteurizare medie i joas i o corelaie negativ cu tratamentul de pasteurizare nalt
indiferent de concentraia nmolului, aspect evideniat n graficul din Fig. 8.10 e.
Se poate observa din graficul prezentat n Fig. 8.10f o puternic corelaie negativ ntre
Factorul 3 (dimensiunile biometrice) i tratamentul de pasteurizare nalt (PI), dar i o corelaie
pozitiv ntre numrul de rdcini i tratamentele de pasteurizare medie i joas.
31
32
f
Fig. 8. 5 Contribuia variabilelor independente la Factorului 1 (a), Factorului 2 (c), Factorului 3 (e) i
corelaiile dintre variabilele independente i cele dependente corespunztoare Factorului 1 (b),
Factorului 2 (d), Factorului 3 (f)
33
8.2. Rezultatele testelor de ecotoxicitate asupra grului comun soiul Dropia (Triticum
aestivum L.)
Investigaiile realizate au avut drept scop identificarea i evaluarea impactului
nmolului de epurare stabilizat anaerob, dar i a tratamentelor fizico- chimice aplicate
nmolului de epurare stabilizat anaerob la nivelul grului comun (Triticum aestivum L.) soiul
Dropia.
A fost evaluat impactul ecotoxicologic al nmolului de epurare stabilizat anaerob tratat
i netratat asupra procesului de germinare, cretere i dezvoltare la specia Triticum aestivum L.
soiul Dropia. Pentru a sublinia impactul nmolului de epurare stabilizat anaerob tratat i
netratat la aceast plant n studiu au fost variai parametrii concentraie nmol (10%, 25%,
50%, 75%, 100%); timp de contact al cariopselor de gru cu produsul testat (6h, 12h i 24h) i
tip tratament nmol de epurare stabilizat anaerob.
Testele realizate la nivel de plantul (experimentul a durat 14 zile) au avut drept scop
cuantificarea gradului de toxicitate acut la gru, parametri pe baza crora s se realizeze
predicii cu privire la impactul ecotoxicologic al nmolului de epurare stabilizat anaerob tratat
i netratat. Acest studiu realizat la scar de laborator pe grul comun, soiul Dropia poate
constitui punctul de referin al unor studii complexe cu durat ndelungat pe un cmp de
cercetare, n care s fie testate cele mai bune variante de tratamente aplicate nmolului de
epurare stabilizat anaerob cu rezultate semnificative statistic i de ce nu al unor colaborri cu
institutele de cercetare din zon (de exemplu Institutul de cercetare Secuieni-Nem).
8.2.1. Rezultatele testelor de ecotoxicitate aferente parametrilor biometrici Variaia EC
Pentru a cuantifica msura n care nmolul de epurare stabilizat anaerob a influenat
pozitiv sau negativ procesele fiziologice de germinare, cretere i dezvoltare la aceast specie
testat, au fost calculai indicii de inhibiie pentru parametrii biometrici pentru creterea
tulpinilor (It) (%) i pentru rata de germinare la 14 zile (Igr14) (%) [85, 195].
Din analiza variantelor experimentale, cu ajutorul softului GraphPrism s-a calculat
parametrul ecotoxicologic EC50 (Fig. 8.11).
Fig. 8. 6 Curba de variaie neliniar dintre stimularea indicelui de inhibiie al creterii prii aeriene la
plantulele de gru obinute din cariopsele inute n contact cu nmol netratat i logaritmul concentraiei
de nmol. Metoda de fitare aleas a fost metoda robust. RSDR (Abaterea standard a reziduurilor
metodei robust) este precizat
Valoarea concentraiei pentru care se observ o cretere cu 50% a It la plantulele de

gru obinute din cariopsele inute n contact cu nmol netratat fa de varianta martor (ap
distilat) scade o dat cu creterea timpului de contact (Fig. 8.11) de la 73,89% la 40,77%.
Aceeai constatare se remarc i pentru indicele de inhibiie a ratei de germinare la 14 zile (Fig.
8.12), caz n care valoarea concentraiei scade de la 67,7% la 38,81% odat cu creterea
timpului de contact.
34
Fig. 8. 7 Curba de variaie neliniar dintre stimularea indicelui de inhibiie a ratei de germinare Irg14
la plantulele de gru obinute din seminele inute n contact cu nmol netratat (N) i logaritmul
concentraiei de nmol.
Pentru indicele de inhibiie a ratei de germinare la 14 zile, Igr14 valorile pozitive indic
un efect de stimulare al nmolului asupra acesteia. Aceste aspecte se coreleaz direct
proporional cu mrimea i vigoarea plantulelor de gru.
8.2.2. Rezultatele testelor de ecotoxicitate aferente parametrilor biometrici. Variaia
variabilelor independente
Obiectivul general al acestui studiu este de a analiza efectele principale ale variabilelor
independente (tip de tratament, concentraie i durata de contact cu nmolul) asupra variabilelor
dependente (date biometrice i biochimice). Pentru acest lucru s-a aplicat o analiz statistic de
tip Experimental Design (DOE). Analiza DOE modific controlat variabilele de intrare n
scopul de a obine cantiti maxime de informaii cu privire la relaiile de cauz i efect, cu o
dimensiune minim a eantionului.
n plus, analiza DOE genereaz informaii privind efectul diverilor factori asupra unei
variabile de rspuns i n unele cazuri poate fi capabil s determine parametrii optimi pentru
aceste elemente. n cazul grului, au fost msurate rspunsurile dup efectuarea experimentelor
ecotoxicologice specifice. Valorile de rspuns (date biometrice i date biochimice) au fost
centralizate ntr-o foaie de lucru Excel i apoi au fost importate n Unscrambler ca tabel de date
rspuns. Primul pas a fost acela de crea designul i apoi de a importa variabilele de rspuns.
Urmtorul pas, dup importul valorilor de rspuns a fost efectuarea primului control, cum ar fi
cel de statistic descriptiv, analizndu-se corect efectul produs.
Analiza de varian (ANOVA) este o tehnic statistic utilizat pentru a investiga i
modela relaia dintre o variabil de rspuns i una sau mai multe variabile independente. Astfel,
ANOVA este un ansamblu de metode utilizate n analiza observaional a datelor
experimentale, date ce depind de mai multe variabile independente ce acioneaz simultan.
Scopul unei analize ANOVA este de a identifica cele mai importante dintre variabilele
independente aplicate unui proces la un moment dat i apoi de a estima efectele lor. Pentru
fiecare experiment proiectat s-a efectuat o analiza de varian ANOVA. Din tabelul generat s-a
verificat validitatea modelului pentru toate variabilele de rspuns.
Valoarea p a modelului trebuie s fie mai mic de 0,05. Mrimea efectului, r,
parametru calculat suplimentar din tabelul ANOVA cuantific magnitudinea efectului studiat
35
se coreleaz cu p-value i poate fi: fr efect (r 0,2), efect sczut (0,2r 0,5), efect mediu
(0,5r 0,7), efect puternic (r0,7).
Cazul 1:
VARIABILE INDEPENDENTE:
Tip_tratament (A)
Concentraie (%) (B)
Timp_contact (H) (C)
VARIABILE DEPENDENTE
Variabila biometric: la nivel de rdcin: lungimea maxim a rdcinii care este
lungimea principal (Lmax-rad).
Analiza de varian ANOVA s-a realizat pentru variabilele independente A, B i C.
Valoarea p a modelului este mai mic de 0,05 ceea ce confirm validitatea acestuia.
Din graficul dependenei variabilei tipul de tratament asupra Lmax-rad (Fig. 8.13) se
observ un efect mediu n cazul tratamentelor cu ultraviolete, n special la UVC2 (r=0,564,
p=0,001).
Fig. 8. 8 Reprezentarea grafic a efectului indus de tratamentul aplicat nmolului de epurare stabilizat
anaerob asupra parametrului lungime maxim rdcin.
n concluzie, pentru cazul 1 variabila de rspuns este influenat semnificativ statistic

(p=0,001) de tipul de tratament. Se remarc tratamentul cu ultraviolete (UVC2) ca avnd
influena ce-a mai mare asupra parametrilor biometrici analizai.
Cazul 2:
Tip_tratament (A)
Concentraie (%) (B)
VARIABILE DEPENDENTE :
Variabila biometric: la nivel de tulpin, respectiv lungimea medie a tulpinii
Reprezentarea grafic a efectului indus de tipul de tratament aplicat nmolului de
epurare stabilizat anaerob, asupra parametrului lungime medie tulpina (Fig. 8.14) confirm
faptul c parametrul lungime medie tulpin nu este influenat de alegerea tipul tratamentului
aplicat nmolului de epurare stabilizat anaerob.
36
Fig. 8. 9 Reprezentarea grafic a efectului indus de tipul de tratament aplicat nmolului de epurare
stabilizat anaerob, asupra parametrului lungime medie tulpina
Cazul 3:
Tip_tratament (A)
Concentraie (%) (B)
Variabile rata de germinare la 3zile (Rg3) i rata de germinare la finalul experimentului
(Rg14).
Fig. 8. 10 Reprezentarea grafic a efectului indus de concentraie aplicat nmolului de epurare

stabilizat anaerob, asupra parametrului rata de germinare Rg3
Concentraia de nmol stabilizat anaerob are un efect de stimulare pentru parametrul de

rspuns rata de germinare la 3 zile (Rg3), la procente de 25% i 75% nmol dup care se
observ un trend descendent (Fig 8.15). Influena concentraiei asupra ratei de germinare este
una puternic (r=0,804, p=0,001).
Analiza ANOVA corespunztoare variabilei de rspuns rata de germinare la 14 zile
Rg14 i variabilele independente tip tratament (A), concentraie (B), timp de contact (C)
prezint un p semnificativ statistic pentru toate modelele analizate.
Concentraia nmolului de epurare are o influen puternic asupra Rg14 (r=0,861
p=0,000) (Fig 8.16).
37
Fig. 8. 11 Reprezentarea grafic a efectului indus de concentraie aplicat nmolului de epurare

stabilizat anaerob asupra parametrului rata de germinare Rg14
110
100
90
80
70
60
50
40
N
PJ
PM
PI
A: Tip_tratament
UVC1
UVC2
UVC3
Fig. 8. 12 Reprezentarea grafic a efectului indus de tipul de tratament aplicat nmolului de epurare
stabilizat anaerob, asupra parametrului rata de germinare Rg14
Aa cum se poate observ n graficul din Fig. 8.17, efectul asupra rata de germinare la
14 zile (Rg14) este maxim n situaia nmolului tratat cu ultraviolete, timp de trei ore de
expunere UVC3. Influena tipului de tratament n acest caz este puternic (r=0,695, p=0,002).
Cazul 4:
Tip_tratament (A)
Concentraie (%) (B)
Variabile biochimice: la nivel de cantitate antioxidani, respectiv concentraia total
fenolilor, flavonoizi, green parameter i raportul cla/clb
Timpul de contact (Fig. 8.18) al cariopselor de gru cu variantele de nmol tratat i
netratat influeneaz semnificativ statistic (p=0,000) variabila de rspuns coninut de total
fenoli din plantulele de gru crescute pe diferite variante de nmol de epurare stabilizat anaerob
tratat fizic i chimic i nesupus tratamentelor suplimentare. Influena timpului de contact n
acest caz este puternic (r=0,933, p=0,000).
38
Fig. 8. 13 Reprezentarea grafic a efectului indus de timpul de contact cu nmolul stabilizat anaerob,
asupra coninutului de fenoli.
De asemenea, tipul tratamentului aplicat nmolului (p = 0,5590) i concentraia (p =

0,6622) produc un efect nesemnificativ asupra variabilei de rspuns coninut de flavonoizi din
plantulele de gru crescute pe diferite variante de nmol de epurare stabilizat anaerob tratat
fizico-chimic i netratat.
n schimb, timpul de contact al cariopselor de gru cu variantele de nmol tratat i
netratat produc un efect semnificativ statistic privind variabila de rspuns coninut de flavonoizi
aa cum n graficului din Fig. 8.19. Influena timpului de contact n acest caz este puternic
(r=0,950, p=0,000).
Fig. 8. 14 Reprezentarea grafic a efectului indus de timpul de contact cu nmolul stabilizat anaerob,
asupra coninutului de flavonoizi.
Concluzii: O modelare statistic de tip DOE (Design Experimental) asupra datelor

experimentale obinute la grul comun (Triticum aestivum L.) soiul Dropia a fost realizat cu
scopul de a observa impactul unei variabile independente asupra rspunsului generat la nivelul
plantei i cuantificat prin parametrii biometrici i biochimici msurai.
Din analiza de varian ANOVA pentru variabilele de rspuns la nivelul biometriei
rdcinii se observ clar efecte induse de variabila independent tip de tratament pentru
aproape toate variantele experimentale i de concentraie n cazul proceselor metabolice care
au loc n cazul proceselor germinative. Tipul de tratament influeneaz clar procesele de
cretere la nivel de parte subteran a plantei. Din analiza de varian ANOVA pentru variabila
de rspuns la nivelul biometriei tulpinii nu se observ nici un efect indus de variabilele
independente tip de tratament, concentraie i timp de contact.
Din analiza de varian ANOVA pentru variabilele de rspuns la nivel de antioxidani
total fenoli i flavonoizi se identific efectele semnificative statistic induse de variabila
independent timp de contact. Acesta influeneaz cantitatea de total fenoli i flavonoizi
39
sintetizat n plantulele de gru. Concentraia intervine n cazul proceselor germinative (efect

maxim la 25% concentraie nmol).
Putem concluziona c nmolul de epurare stabilizat anaerob tratat produce o stimulare a
gradului de germinare, favorizeaz creterea i dezvoltarea plantulelor de gru ntr-o anumit
concentraie, dar efectul poate deveni stresant pentru plant, aspect remarcat de coninutul de
antioxidani ce crete odat cu creterea timpului de contact.
8.2.3. Rezultatele testelor de ecotoxicitate aferente parametrilor biochimici analizai la
grul comun (Triticum aestivum L.) soiul Dropia
Pentru fiecare variant experimental, n acest studiu s-a calculat cantitatea de
flavonoizi exprimat prin coninutul de quercitin (mg/g) (Fig. 8.20), respectiv a coninutul de
total fenoli, exprimat prin cantitatea de acid galic (mg /g) (Fig. 8.21).
Fig. 8. 15 Variaia coninutului de flavonoizi (quercitina) (mg/g) msurat la toate variantele

experimentale folosite in studiu (N,PI,PJ,PM,UVC1,UVC2,UVC3) comparativ cu martorul AD.
40
Fig. 8. 16 Variaia coninutului de total fenoli (acid galic) (mg/g) msurat la toate variantele
experimentale folosite in studiu (N, PI, PJ, PM, UVC1, UVC2, UVC3) comparativ cu martorul (AD)
La o concentraie mic (25%) tratamentul cu pasteurizare medie i cel cu ultraviolete timp de

2h pot avea un efect pozitiv dar numai la un timp redus de contact (6h).
8.3. Rezultatele testelor de ecotoxicitate asupra speciei Lemna minor L.
8.3.1. Rezultatele investigaiilor privind testul de ecotoxicitate acut a nmolului de
epurare pe linti (Lemna minor L.)
Rezultatele testului de ecotoxicitate realizat asupra speciei Lemna minor L. au vizat
identificarea modului de aciune a nmolului de epurare stabilizat anaerob asupra unor
parametri de cretere, precum i particularitile datorate tratamentelor aplicate suplimentar
nmolului de epurare stabilizat anaerob.
Interpretarea rezultatelor obinute a fost realizat cu ajutorul aplicaiilor StatGraph i
PrismaGraph, versiunea 5 pentru Windows.
Rspunsul ecotoxicologic manifestat de linti la tratamentul cu nmol ICx/ECx
reprezint concentraia la care are loc inhibarea/stimularea creterii parametrului monitorizat cu
x% [196]. Pentru fiecare variant experimental analizat au fost calculai o serie de parametri
ca: viteza de cretere (VSC) i doza de inhibiie (IC10, IC25, IC50) sau stimulare (EC50)
comparativ cu proba martor, la care substratul de cretere a fost apa distilat.
Gradul de stimulare/inhibare a creterii la specia Lemna minor L. aflat n contact cu
nmol de epurare stabilizat anaerob i nmol tratat suplimentar fizico-chimic n diferite
concentraii este evideniat n Fig.8.25.
41
AD
Fig. 8. 17 Viteza specific de cretere (VSC) la specia Lemna minor L. n contact cu nmolul de
epurare stabilizat anaerob tratat i netratat
Ierarhia tratamentelor prezentat n ordinea descreterii gradului de toxicitate al

nmolului asupra vitezei specifice de cretere la linti pentru IC10 este: UVC3 i US > UVC1
> UVC2 > PJ > PM > PI.
n concluzie, tratamentele suplimentare aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob
cu ultrasunete i cel cu ultraviolete reduc cel mai mult gradul de toxicitate iniial al nmolului.
Singurul tratament pentru care gradul de toxicitate (IC10) este mai mare dect al
nmolului netratat este cel cu NaOH aspect reflectat i n Fig 8.25.
8.3.2. Rezultatele investigaiilor privind variaia ariei frondelor la linti (Lemna minor
L.) n funcie de tratamente i concentraie
Suprafaa frondelor a fost calculat cu ajutorul programului NX 7.5 dezvoltat de
compania Siemens PLM Software. Pentru fiecare variant s-a utilizat drept martor suprafaa
frondelor lintiei crescute pe substrat de ap.
Nmolul netratat (Fig. 8.26) prezint un efect de stimulare a creterii frondelor
manifestat la finalul experimentului fa de variantele iniiale tratate cu doze diferite de nmol.
Astfel, cea mai mare valoare a creterii parametrului investigat, de 76,99 % o regsim la
varianta tratat cu 12.5 mg/L nmol de epurare stabilizat anaerob, iar cea mai mic valoare de
9,86% s-a obinut n cazul variantei tratate cu 200 mg/L.
Fig. 8. 18 Variaia mediilor ariilor frondelor plantelor de linti crescute pe probe cu nmol de epurare
stabilizat anaerob funcie de concentraia nmolului
42
n cazul tratamentului cu ultrasunete (Fig. 8.27) suprafaa frondelor se mrete de la

26,77 mm2 la 92,862 mm2. Se nregistreaz o cretere maxim a suprafeei frondelor, respectiv
de 81,40% la utilizarea a 12,5 mg/L nmol de epurare stabilizat anaerob tratat.
stabilizat anaerob tratat cu ultrasunete funcie de concentraia nmolului
stabilizat anaerob tratat prin pasteurizare nalt funcie de concentraia nmolului
Expunerea suplimentar la ultraviolete a nmolului de epurare stabilizat anaerob (Fig.

8.31-8.33) induce acelai mod de stimulare a suprafeei fondelor manifestat diferit funcie de
concentraia nmolului utilizat.
stabilizat anaerob expus la ultraviolete 1h funcie de concentraia nmolului
43
Pentru tratamentul cu CaO (Fig.8.34) se observ un maxim la concentraia de 50 mg/L

i un minim la concentraia de 100 mg/L.
n situaia tratrii cu NaOH (Fig. 8.35) se remarc cea mai bun cretere la a suprafeei
foliare la concentraia de 3,125mg/L.
Fig. 8. 24 Variaia mediilor ariilor frondelor plantelor de linti crescute pe probe cu nmol de
epurare stabilizat anaerob tratat cu CaO funcie de concentraia nmolului
44
Fig. 8. 25 Variaia mediilor ariilor frondelor plantelor de linti crescute pe probe cu nmol de
epurare stabilizat anaerob tratat cu NaOH funcie de concentraia nmolului
8.3.3. Rezultatele investigaiilor privind testul de bioacumulare a metalelor grele (Cd, Cr,
Cu, Ni, Pb, Zn) din nmolul de epurare stabilizat anaerob de ctre linti (Lemna minor
L.)
Pentru a evalua eficient gradul de bioacumulare al metalelor grele s-a efectuat analiza
de varian ANOVA considernd ca:
Tip_tratament (A)
Concentraie (%) (B)
VARIABILE DEPENDENTE:
Randamentele de extracie a metalelor grele (Cd, Cr, Cu, Ni, Pb, Zn)
Validitatea modelului (p<0,05) pentru toate variabilele de rspuns s-a verificat din
tabelul generat, selectndu-se modele semnificative din punct de vedere statistic pentru toate
metalele grele analizate.
n etapa urmtoare s-a analizat efectul pe care tipul de tratament, respectiv concentraia
de nmol l-au avut asupra randamentului de extracie a metalelor grele analizate utiliznd testul
Design Experimental (DOE).
Gradul de intensitate a efectului este dat de parametrul r calculat din tabelul ANOVA
cu urmtoarele semnificaii: r ntre 0 i 0.2 efect nesemnificativ; r ntre 0.2 i 0.5 efect
mediu; r ntre 0.5 i 0.7 efect mare; r ntre 0.7 i 1 efect puternic [165].
Efectul asupra randamentului de extracie a Cd
Din analiza parametrilor rezultai (Tabelul 8.8) se poate concluziona c alegerea att a
tipului de tratament (p<0,01), ct i a concentraiei (p<0.01) influeneaz gradul de
bioacumulare a Cd n cazul speciei Lemna minor L. (model Linear, p=0.0001).
Tabel 8. 1 Rezultatele analizei varianei (testul ANOVA) pentru randamentul de fitoextracie al Cd
ANOVA R_ Cd
ANOVA
Model
Error
Corr. tot
Variabile
Tip_tratament (A)
Concentraie (B)
DF
16,0000
48,0000
64,0000
MS
16202,6300
3992,43700
F-ratio
4,0583
p-value
0,0001
12,0000
4,0000
11940,6700
28988,4900
2,9908
7,2609
0,0034
0,0001
45
ANOVA R_ Cd
ANOVA
DF
MS
F-ratio
p-value
Model Check
Mean
Linear
16,0000
16202,6300
4,0583
0,0001
Se poate remarca gradul bun de extracie pentru Cd n cazul tratamentelor fizice aplicate
nmolului de epurare stabilizat anaerob, cu un maxim manifestat la tratamentul cu ultraviolete
(UVC1), respectiv cel termic (PJ), comparativ cu tratamentele chimice.
n ceea ce privete concentraia folosit n lucru, efectul maxim a fost obinut n situaia
utilizrii dozelor mici de nmol.
n literatura de specialitate [197], Cd este un biomarker utilizat n testele de
ecotoxicitate realizate pe Lemna minor L. Propunem pentru nmolul de epurare stabilizat
anaerob tratat prin diferite metode fizico-chimice utilizarea acestui metal ca i biomarker n
studiile de ecotoxicitate.
Efectul asupra randamentului de extracie a Cr
tipului de tratament (p=0,00), ct i a concentraiei (p<0.05) influeneaz gradul de
bioacumulare al Cr n cazul speciei Lemna minor L. (model Linear, p= 0.000).
Tabel 8. 2 Rezultatele analizei varianei (testul ANOVA) pentru randamentul de fitoextracie al de
extracie a Cr
ANOVA
Model
Error
Corr. tot
Variabile
Tip_tratament
(A)
Concentraie
(B)
Model Check
Mean
Linear
DF
16,0000
48,0000
64,0000
ANOVA R_ Cr
MS
F-ratio
192,2543
4,9672
38,7048
p-value
0,0000
12,0000
210,3637
5,4351
0,0000
4,0000
137,9260
3,5635
0,0127
16,0000
192,2543
4,9672
0,0000
Cromul este un microelement esenial ntr-o anumit doz pentru creterea i

dezvoltarea speciei Lemna minor L., participnd la foarte multe procese fiziologice (biosinteza
clorofilei, fotofosforilarea oxidativ, mediaz diferite activiti enzimatice) [198].
Folosirea acestuia ca biomarker pentru estimarea efectului indus de tratamentele
aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob poate da indicaii precise, msurabile privind
gradul de tolerant al speciei luate n studiu fa de prezena nmolului de epurare, informaii
ce pot fi extrapolate la nivelul ntregului ecosistem.
Este evident faptul ca tratamentul cu ultrasunete favorizeaz fitoextracia acestui
microelement ntr-o manier suportat de planta analizat.
46
Efectul asupra randamentului de extracie a Cu

Din analiza parametrilor rezultai (Tabelul 8.10) se poate concluziona c doar alegerea
tipului de tratament (p<0.01) influeneaz gradul de bioacumulare a Cu n cazul speciei Lemna
minor L. (model Linear, p<0.05).
Din analiza efectului variabilei Tipul de tratament asupra randamentului de extracie al
Cr (Fig. 8.40) se poate concluziona c acesta este unul mediu (r=0,428; p=0,0074), tratamentele
nmolului de epurare stabilizat anaerob tratat cu ultrasunete (US) i microunde (MW) avnd
influena cea mai bun asupra randamentului de extracie. De asemenea, se poate observa c o
serie de tratamente prezint un efect de fixare al Cu, cel mai pronunat manifestndu-se n cazul
tratamentelor chimice.
Tabel 8. 3 Rezultatele analizei varianei (testul ANOVA) pentru randamentul de fitoextracie al Cu
ANOVA
Model
Error
Corr. tot
Variabile
Tip_tratament (A)
Concentraie (B)
Model Check
Mean
Linear
DF
16,0000
48,0000
64,0000
ANOVA R_ Cu
MS
122,5240
59,5653
F-ratio
2,0570
p-value
0,0278
12,0000
4,0000
160,5483
8,4510
2,6953
0,1419
0,0074
0,9657
16,0000
122,5240
2,0570
0,0278
Fig. 8. 26 Dependena randamentului de fitoextracie al Cu n funcie de tipul de tratament
Efectul nesemnificativ al variabilei Concentraia nmolului de epurare stabilizat

anaerob asupra randamentului de extracie al Cr (r= 0,185; p=0,9657 nesemnificativ statistic)
se poate observa din Figura 8.41.
47
Fig. 8. 27 Dependena randamentului de fitoextracie al Cu de concentraia nmolului (g/L)
n ceea ce privete comportamentul speciei Lemna minor L. fa de Cu prezent n

nmolul de epurare, remarcm c tratamentele fizice de sonicare i cele n care s-au folosit
microundele sunt tratamente ce favorizeaz fitoextracia acestui element.
Folosirea acestei plante n procesele de recuperare a metalelor prezente n mediu este un
alt aspect intens studiat n prezent [198], capacitatea de biosorbie a Lemnei minor L. putnd fi
comparat cu cea a algelor, drojdiilor sau a argilelor i a altor tipuri de materiale naturale
folosite pentru epurarea apelor uzate industriale.
Recomandm n acest sens testarea i aplicarea tratamentelor i a concentraiilor care au
evideniat un bun randament de fitoextracie n epurarea apelor uzate industriale cu un coninut
sporit de Cu.
Efectul asupra randamentului de extracie a Ni
tipului de tratament (p<0.05), ct i a concentraiei (p=0,00) influeneaz gradul de
bioacumulare a Ni n cazul speciei Lemna minor L. (model Linear, p= 0.000).
Tabel 8. 4 Rezultatele analizei varianei (testul ANOVA) pentru randamentul de fitoextracie al Ni
ANOVA
Model
Error
Corr. tot
Variabile
Tip_tratament (A)
Concentraie (B)
Model Check
Mean
Linear
DF
16,0000
48,0000
64,0000
12,0000
4,0000
ANOVA R_ Ni
MS
2148,2160
101,0236
F-ratio
21,2645
p-value
0,0000
223,2014
7923,2610
2,2094
78,4298
0,0262
0,0000
2148,2160
21,2645
0,0000
16,0000
Din analiza efectului variabilei Tipul de tratament asupra randamentului de extracie al

Ni se poate concluziona c acesta este unul mediu (r=0,394; p=0,0262), efectul obinut n urma
aplicrii tratamentelor fiind mai mic dect n cazul nmolului netratat (N).
Din analiza efectului variabilei Concentraia nmolului de epurare stabilizat anaerob
asupra randamentului de extracie al Ni se poate concluziona c acesta este unul foarte puternic
(r=0,975; p=0,000), scznd odat cu creterea concentraiei.
48
Concluzia studiului privind capacitatea de fitoextracie a acestui metal din nmolul de

epurare stabilizat anaerob supus tratamentelor fizico-chimice este confirmat i de literatura de
specialitate [199, 200] privind comportamentul speciei Lemna minor L. ca biomarker de mediu
sau ca material adsorbant pentru apele uzate industriale.
Efectul asupra randamentului de extracie a Pb
Din analiza parametrilor rezultai (Tabelul 8.12) se poate observa c doar alegerea
concentraiei (p= 0.000) influeneaz gradul de bioacumulare a Pb n cazul speciei Lemna
minor L. (model Linear, p= 0.000), efectul tipului de tratament fiind nesemnificativ din punct
de vedere statistic (p>0,05)..
Tabel 8. 5 Rezultatele analizei varianei (testul ANOVA) pentru randamentul de fitoextracie al Pb
ANOVA
Model
Error
Corr. tot
Variabile
Tip_tratament (A)
Concentraie (B)
Model Check
Mean
Linear
ANOVA R_ Pb
MS
3086,0560
257,2451
F-ratio
11,9966
p-value
0,0000
12,0000
4,0000
423,7122
11073,0900
1,6471
43,0449
0,1101
0,0000
16,0000
3086,0560
11,9966
0,0000
DF
16,0000
48,0000
64,0000

asupra randamentului de extracie al Pb (Fig. 8.45), se poate observa c acesta este unul foarte
puternic (r=0,957; p=0,000), scznd odat cu creterea concentraiei.
Studii privind capacitatea de fitoextracie a Pb din diferite soluii apoase n care avem
prezent acest metal [200] confirm utilitatea folosirii speciei Lemna minor L. ca bioindicator.
Astfel se certific necesitatea evaluri cantitilor de Pb regsite n probele de Lemna
crescute pe diferite variante de nmol de epurare stabilizat anaerob tratat fizic i chimic.
Efectul asupra randamentului de extracie a Zn

Din analiza parametrilor rezultai (Tabelul 8.13) se poate remarca c alegerea att a
tipului de tratament (p<0.05), ct i a concentraiei (p=0,00) influeneaz gradul de
bioacumulare a Zn n cazul speciei Lemna minor L. (model Linear, p= 0.000).
Tabel 8. 6 Rezultatele analizei varianei (testul ANOVA) pentru randamentul de fitoextracie la Zn
ANOVA
Model
Error
Corr. tot
Variabile
Tip_tratament (A)
Concentraie (B)
Model Check
ANOVA R_ Zn
DF
MS
16,0000
443,9113
48,0000
46,4424
64,0000
12,0000
4,0000
115,5552
1428,9800
F-ratio
9,5583
p-value
0,0000
2,4881
30,7688
0,0127
0,0000
49
ANOVA
Mean
Linear
DF
16,0000
ANOVA R_ Zn
MS
443,9113
F-ratio
p-value
9,5583
0,0000

asupra randamentului de extracie al Zn, se poate remarca c acesta este unul puternic (r=0,941;
p=0,000), scznd odat cu creterea concentraiei.
Toate tratamentele aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob favorizeaz
fitoextracia Zn de ctre specia Lemna minor L.
Condiiile n care acest proces de fitoextracie al Zn se manifest n natur sau n
laborator reprezint subiectul de analiz a multor studii realizate pe Lemna minor L. n prezent,
[201] elaborndu-se modele predictive complexe, n care acest metal este analizat n diferite
combinaii chimice i concentraii, deoarece comportamentul plantei se poate manifesta diferit.
Utilitatea studiului pentru capacitatea de fitoextracie a speciei Lemna minor L. pentru
nmolul de epurare stabilizat anaerob supus tratamentelor fizico-chimice se reflect n msura
n care un tratament sau altul favorizeaz fitoextracia metalelor.
Cantitatea n care aceste metale se pot regsi la anumite nivele ale lanului trofic al
consumatorilor este dictat i de factorii iniiali. n cazul studiat de noi, cel al tratamentelor
aplicabile nmolului de epurare stabilizat anaerob, n scopul valorificrii acestuia sau chiar i al
eliminrii lui n mediu trebuie respectat principiul precauiei n ceea ce privete gradul de
toxicitate.
50

METODE FIZICO-CHIMICE LA NIVEL EUCARIOT - ANIMALE (Eisenia sp.)
9.1. Rezultatele testelor de supravieuire
Din analiza rezultatelor obinute n urma testrii nmolului de epurare stabilizat
anaerob i a celui supus unor tratamente suplimentare respectiv: tratamentul de expunere la
ultraviolete, la pasteurizare, tratamentul cu ultrasunete, cu microunde, tratamentele chimice ca
CaO, NaOH, CaCO3 i uree asupra rmelor roii (Eisenia sp) se pot obine informaii valoroase
referitoare la impactului acestui produs asupra mediului natural.
Utilizarea rmelor este preferat pentru testele de ecotoxicitate la nivelul solului,
deoarece acest grup se afl la baza multor reele trofice i reprezint 60-80% din biomasa total
a pturii epigee cu rol fundamental pentru meninerea structurii i fertilitii solului, pentru
reciclarea nutrienilor dar i n bioacumularea poluanilor [171].
Respectnd metodologia de lucru prezentat n subcapitolul 5.5. s-au remarcat mai
multe situaii cu privire la indicele de supravieuire al rmelor roii (Eisenia sp).
Validitatea testului, a fost asigurat de un indice de supravieuire a organismelor test n
proba martor de 90%.
Comparativ cu proba martor (Fig. 9.1, Fig 9.2) variantele experimentale cu diferite doze
de nmol de epurare stabilizat anaerob i a celui tratat suplimentar fizico-chimice au sczut
indicele de supravieuire al rmelor. Aceasta indic un grad de toxicitate cauzat de nmolul de
epurare stabilizat anaerob. Efectele negative reflectate n numrul de indivizi afectai (mori)
variaz att n funcie de tipul tratamentelor aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob ct
i de concentraia acestuia folosit n lucru.
n cazul utilizrii nmolului de epurare netratat, indicele de supravieuire al rmelor
roii pentru varianta experimental n care s-a utilizat 10% nmol de epurare stabilizat anaerob
a sczut fa de proba martor. ncepnd cu varianta experimental unde am utilizat peste 25%
nmol de epurare stabilizat anaerob netratat, efectele toxice manifestate asupra indivizilor au
fost evidente chiar din prima zi, la cteva ore de la montarea experimentului.
Efectele nmolului de epurare stabilizat anaerob tratat suplimentar prin pasteurizare;
Folosirea unei doze de 10% nmol de epurare stabilizat anaerob tratat prin pasteurizare
nalt (PI) (Fig 9.1) a produs un minim al efectului negativ n ziua a 2-a de observaie i un
maxim de efect n a 14-a zi de observaie fa de proba martor.
Tratamentele de pasteurizare ale nmolului de epurare stabilizat anaerob la variantele
experimentale tratate cu doze de 25% (Fig 9.1) au avut comparativ cu proba martor, un minim
de efect negativ pentru tratamentul de pasteurizare nalt (PI) ncepnd cu ziua a 2-a de
observaii i un maxim al efectului negativ n ziua a 9-a.
Tratamentul de pasteurizare medie (PM) a produs un minim de efect negativ nc din
prima zi de observaii fa de control i un maxim n ziua a 9-a de observaii. Pasteurizarea
joas (PJ) a indus un efect minim de afectare a lotului experimental n ziua a 2-a de observaii
i maxim n ziua a 9-a comparativ cu martorul.
Efectele nmolului de epurare stabilizat anaerob tratat suplimentar prin expunere la
ultraviolete;
Expunerea la radiaii ultraviolete a nmolului de epurare stabilizat anaerob a indus
urmtoarele situaii privind efectele negative la variantele experimentale; expunerea la
ultraviolete a nmolului stabilizat anaerob timp de 1h (UVC 1) cu o doz de nmol de 10%, a
avut un efect minim manifestat n ziua a7-a i un maxim n ziua a 11-a fa de martor.
51
Doza de 25% nmol de epurare stabilizat anaerob tratat cu ultraviolete UVC1 a produs
efecte minime negative nc din prima zi de observaie i un maxim n ziua a 9-a de observaii
fa de proba martor.
Expunerea nmolului de epurare stabilizat anaerob la ultraviolete (UVC2) a determinat
pentru 10% nmol aplicat un efect minim negativ manifestat din ziua a 6-a comparativ cu proba
martor i un maxim n ziua a 14-a de observaie.
Pentru doza de nmol de epurare stabilizat anaerob UVC2 de 25% utilizat n lucru s-a
identificat la proba martor nc din prima zi un efect negativ i un maxim n ziua a 9-a.
La variantele experimentale tratate cu radiaii ultraviolete timp de 3 ore UVC3, efectele
negative observate au avut un minim pentru variantele experimentale de 10% n ziua a 6-a i un
maxim n ziua 13-a de observaii. Pentru variantele n care am folosit 25% nmol tratat prin
expunere la radiaii ultraviolete UVC3 un maxim al efectelor negative a fost observat n ziua a
9-a fa de martor.
microunde;
Tratamentul cu microunde (MW) aplicat nmolului de epurare stabilizat anaerob a
manifestat efecte negative asupra indivizilor observai la 10% nmol tratat cu un minim
observat n ziua a 6-a i un maxim observat n ziua a 14-a.
La 25% nmol tratat (MW) un minim a fost nregistrat n ziua a 3-a de observaii i un
maxim n ziua a 9-a de observaii fa de martor.
ultrasunete;
Tratamentul cu ultrasunete a produs la probele cu 10% nmol de epurare stabilizat
anaerob un minim de efecte negative manifestat n ziua a 6-a de observaii i un maxim pentru
ziua a 14-a. Odat cu creterea dozei de nmol la 25% la acest tratament efectul manifestat
asupra rmelor observat n ziua a 2-a s-a nregistrat un minim fat de control i un maxim n
ziua a 10-a de observaii.
Efectele nmolului de epurare stabilizat anaerob tratat suplimentar cu ajutorul
substanelor chimice
Tratamentul chimic cu CaO al nmolului de epurare stabilizat anaerob a produs pentru
10% doz de nmol de epurare tratat utilizat un minim al efectelor negative incepnd cu
prima zi i un maxim al efectului observat n a 10-a zi de experiment.
Creterea procentului de nmol folosit n studiu la 25% a determinat o reducere cu 50%
a numrului de indivizi nc din prima zi,iar efectul negativ maxim a fost observat n a 4-a zi de
experiment.
Tratamentul chimic al nmolului de epurare stabilizat anaerob cu CaCO3 a avut un
efect asemntor tratamentului cu CaO, n sensul c la 10% procent de nmol utilizat efectul
negativ s-a manifestat nc din prima zi cu un maxim n ziua a 11-a fa de martor. Variantele
experimentale cu 25% nmol tratat au manifestat un efect negativ nc din prima zi i un
maxim observat n ziua a 5-a.
Tratamentul chimic al nmolului de epurare stabilizat anaerob cu NaOH prezint pentru
variantele tratate cu 10% nmol tratat un minim al efectelor negative observate nc din prima
zi iar n ziua a 4-a acest efect a fost maxim. Variantele cu 25% nmol de epurare stabilizat
anaerob cu NaOH manifest efecte negative nc din prima zi cu un maxim n ziua a 4-a de
observaie comparativ cu martorul.
Tratamentul cu uree a nmolului de epurare stabilizat anaerob a determinat o reducere
cu 30% fa de martor din prima zi de observaie i un maxim al efectelor negative observat n
ziua a 4-a de experiment pentru variantele tratate cu 10% nmol tratat chimic. La 25% procent
de utilizare a nmolului tratat n experiment efectele negative au fost observate nc din prima
zi, iar maximul a fost observat n a 8-a zi. Prin analiza fcut asupra fiecrei variante
52
experimentale putem concluziona ca existena rmelor este influenat n mod direct de

cantitatea i calitatea nmolului utilizat n experiment.
Indicele de supravieuire calculat pentru rmele roii (Eisenia sp.) prezentat n tabelele
9.1-9.4 i 9.7 i analiza statistic a datelor obinute la variantele experimentale asociate
tratamentelor aplicate nmolului sunt semnificative din punct de vedere statistic (p=0,000).
Tratamentele suplimentare aplicate nmolului stabilizat anaerob ce intervin n creterea
ratei de supravieuire comparativ cu a nmolului netratat sunt urmtoarele : pasteurizarea medie
(PM), pasteurizarea nalt (PI), pasteurizarea (PJ), expunerea la ultraviolete (UVC) i
microunde (MW). In cazul utilizrii unei doze de nmol de epurare stabilizat anaerob de
concentraie 25%, toate tratamentele aplicate au crescut indicele de supravieuire al indivizilor
test comparativ de varianta experimental cu nmolul netratat.
Fig. 9 1 Indicele de supravieuire a speciei Eisenia sp. corespunztoare concentraiei de 10% nmol de
epurare utilizat n experiment.
53
Fig. 9 2 Indicele de supravieuire a speciei Eisenia sp corespunztoare concentraiei de 25% nmol de

Fig. 9 3 Indicele de supravieuire a speciei Eisenia sp corespunztor concentraiei de 50 % nmol de

La 50% adaos de nmol de epurare stabilizat anaerob, aa cum reiese i din graficul
prezentat n Fig. 9.3, indicele de supravieuire pentru toate variantele experimentale scade
foarte mult, inclusiv la varianta control.
54
CAPITOLUL 10. CONCLUZII

10.1. Evaluarea gradului de ecotoxicitate al nmolului de epurare stabilizat anaerob
Prezenta tez de doctorat abordeaz un subiect deosebit de interesant, de actualitate, n
concordan cu probleme de mediu privind implementarea unor metode de tratare cu eficien
crescut a nmolurile rezultate n urma epurrii apelor uzate.
Aceast categorie a nmolului de epurare stabilizat anaerob prezint un potenial toxic
care nu trebuie neglijat n opiunile de management ale acestui produs, mai ales n condiiile
n care n prezent nu exist criterii de clasificare n vederea utilizrii n agricultur. Acest tip
de nmol conine o microflor patogen cu risc ridicat de transfer n diferite ecosisteme i cu
efecte negative din punct de vedere a durabilitii i sustenabilitii acestora. ncadrat n
categoria deeurilor biodegradabile, nmolul de epurare stabilizat anaerob este un subprodus
al staiilor de epurare, a crui potenial patogen prezent un risc de sntate pentru om, dar i
pentru mediu. Efectele ecotoxicologice se pot manifesta ntr-un timp scurt, mediu sau pe o
durat mare de timp, concomitent cu efectul de bioacumulare al metalelor grele sau a altor
categorii de poluani prezeni.
Cea mai mic concentraie la care a fost observat un efect asupra parametrului msurat
indice mitotic (LOEC) este de 1%.
n urma experimentelor s-a putut constata un potenal toxic al nmolului de epurare
stabilizat anaerob la toate nivele de organizare analizate (procariot i eucariot), mai ales la
concentraii mari de utilizare.
Nmolul de epurare stabilizat anaerob la concentraii mai mari de 25% prezint un risc
toxic manifestat la nivel celular prin apariia aberaiilor cromozomiale cu efecte negative
manifestate la nivelul biologiei plantei.
La gru, nmolul de epurare stabilizat anaerob a avut efect de inhibiie a creterii i
dezvoltrii la doze mari de utilizare.
Testele de ecotoxicitate ale nmolul de epurare stabilizat anaerob pe rmele roii
(Eisenia sp) atest o reducere a indicelui de supravieuire ncepnd cu doza de 25% nmol de
epurare stabilizat anaerob administrat. La o concentraie mai mare de 50% efectul toxic
nregistrat este maxim.
10.2. Evaluarea gradului de ecotoxicitate al nmolului de epurare stabilizat anaerob
tratat suplimentar
Cercetrile efectuate n cadrul acestei teze de doctorat pornesc de la premisa c nmolul
de epurare stabilizat anaerob este un mixt de compui valoroi (nutrieni), dar i de poluani
(metale grele, microorganisme patogene), iar gradul de ecotoxicitate ce poate fi stabilit doar la
nivelul organismelor test utilizate este deosebit de important n vederea reutilizrii acestuia.
Au fost investigate din punct de vedere al rspunsului ecotoxicologic urmtoarele
variante suplimentare de igienizare aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob: expunerea
la radiaii ionizante (alfa) i non-ionizante (ultraviolete, microunde i ultrasunete), tratamentele
termice (pasteurizare nalt, medie i joas) i tratamentele chimice (adaos de NaOH CaO,
CaCO3, uree). Cercetarea a avut drept scop creterea valorii atribuite nmolului de epurare
stabilizat anaerob, respectiv a reintegrrii acestuia n circuitul natural al materiei.
S-a observat c tratamentele suplimentare aplicate nmolului de epurare stabilizat
anaerob au avut efecte diferite din punct de vedere al gradului de toxicitate manifestat.
55
n continuare este prezentat o sintez a rezultatelor obinute, organizat pe fiecare

tratament n parte.
10.2.1. Tratamentul cu radiaii ultraviolete UVC
Are efect sanogen (de igienizare) maxim dup trei ore de aplicare a radiaiilor
ultravioletelor (peste 95%) n cazul germenilor E. coli i Salmonella spp i de doar 84% n
cazul coliformilor totali, fapt confirmat i de analiza spectral.
Crete sensibilitatea la antibiotice n cazul E. coli (la antibioticele testate CN10gentamicine i N30-neomycin dup dou ore, CZ30-cefazolin, SXT25- sulphamethoxazol i
CL30-cephalexin dup trei ore de aplicare a tratamentului).
Stimuleaz creterea rdcinilor i are un efect pozitiv asupra ratei de germinare la gru
dup 14 zile. S-a observat, de asemenea, o uoar cretere a coninutului de flavonoizi i fenoli,
a coninutului de pigmeni asimilatori i de aminoacizi.
Nu determin un efect de inhibiie a vitezei de cretere la linti, indiferent de
concentraia dozei de nmol aplicat.
La doze (26 kJ/m2) i concentraii reduse (mai mici de 24,24 g/L) prezint un maxim de
efect n fitoextracia Cd la aceeai specie, comparativ cu celelalte tratamente sau cu nmolul
netratat.
Indicele de supravieuire n cazul rmelor roii crete fa de nmolul netratat la 10% i
25% concentraie utilizat.
Pentru a fi aplicat n staiile de epurare sau la utilizatori (fermieri) sunt necesare
amenajri de infrastructur costisitoare.
10.2.2. Tratamentul de pasteurizare
Are efect sanogen (de igienizare) maxim dup 30 de minute de aplicare (peste 99.8%) n
cazul germenilor, E. coli i Salmonella spp. i de doar 84% n cazul coliformilor totali.
Crete sensibilitatea la antibiotice n cazul E. coli (CN10-gentamicine, CZ30-cefazolin
CZ30-cefazolin, N30-neomycin) i Salmonella spp (CN10-gentamicine, SXT25sulphamethoxazole, N30-neomycin).
Pasteurizarea nalt asigur un indice mitotic ridicat la toate variantele de concentraie
analizate i are un efect de stimulare a vitezei de cretere a plantelor analizate comparativ cu
nmolul netratat, pentru concentraii mici, dar crete coninutul de flavonoizi, pigmeni
asimilatori i de aminoacizi.
Pasteurizarea joas crete vizibil randamentul de fitoextracie a Cd, comparativ cu
nmolul netratat. n plus, s-a observat c pasteurizarea medie influeneaz uor scderea
coninutul de fenoli n plante, mai ales la concentraii mari (peste 50%). Nici acest tratament
termic, indiferent de durat, nu influeneaz fitoextracia Pb.
Tratamentele de pasteurizare (nalt i medie) majoreaz cel mai mult indicele de
supravieuire n cazul rmelor roii la o concentraie de 10% nmol.
10.2.3. Tratamentul cu ultrasunete
Are efect sanogen (de igienizare) maxim dup 60 min de aplicare (peste 95%) n cazul
germenilor Salmonella, i dup 120 min (peste 90%) n cazul coliformilor totali i E coli.
Crete sensibilitatea la antibiotice n cazul E. coli (CN10-gentamicine dup 15 min,
N30-neomycin dup 30 min i SXT25- sulphamethoxazole dup 60min), i n cazul tulpinilor
de Salmonella spp (CN10-gentamicine dup 60 min i N30-neomycin dup 120 min).
Nu s-a observat un efect de inhibare a vitezei de cretere a plantelor (linti) pentru nici
una dintre concentraiile dozei de nmol aplicate.
Se observ un efect maxim n fitoextracia Cu, Cr i Zn comparativ cu celelalte
tratamente sau cu nmolul netratat. Acest tratament nu influeneaz fitoextracia Pb.
56
Tratamentul cu ultrasunete este utilizat n staii de epurare n scopul creterii randamentului de

obinere a biogazului.
10.2.4. Tratamentul cu microunde MW
Este utilizat n staiile de epurare pentru inactivarea speciilor patogene i creterea
capacitii de deshidratare a nmolului. De asemeni, se studiaz modul de utilizare al acestui
tratament pentru creterea biodegradabilitii nmolului.
Are efect sanogen (de igienizare) maxim dup 2 minute de aplicare (peste 98%) n cazul
tuturor agenilor patogeni analizai. Crete sensibilitatea la antibiotice n cazul E. coli (CN10gentamicine) i nu are efect n cazul tulpinilor de Salmonella spp.
S-a observat un efect puternic la nivelul fitoextraciei Cu.
n urma tratamentului cu microunde se nregistreaz cea mai mare valoare a indicelui
de supravieuire n cazul rmelor roii, la o concentraie utilizat de 25% nmol.
10.2.5. Tratamentul de iradiere alfa
Este singurul tratament pentru care s-a obinut un efect de igienizare de 100% a
nmolului pentru o expunere de 120 min i valori de peste 90% dup numai 20 min. Dar
rezultatele de la analiza spectral infirm aceast constatare.
Datorit complexitii infrastructurii necesare pentru aplicarea acestui tratament la scar
industrial, n prezent este utilizat doar n cazul testelor de laborator.
10.2.6. Tratamentele chimice
Toate tratamentele chimice au efect sanogen (de igienizare) maxim dup 120 min de
aplicare (peste 95%) n cazul tuturor agenilor patogeni analizai. Cresc ns rezistena la
antibiotice, att n cazul E coli, ct i n cazul tulpinilor de Salmonella spp.
n plus sunt clar mai toxice dect tratamentele fizice la nivelele de organizare eucariote
investigate.
Tratamentul cu NaOH a prezentat un efect de inhibiie a creterii i dezvoltrii la
plantele analizate, indiferent de concentraie.
Toate tratamentele aplicate au prezentat un efect inhibitor n cazul fitoextraciei Cu i
reduc randamentul de fitoextracie comparativ cu nmolul netratat pentru celelalte metale grele
analizate.
Din analiza literaturii de specialitate se poate concluziona c tratamentele chimice
aplicate nmolului prezint un risc ridicat de a perturba microflora normal a solului, mai ales
n situaia folosirii unor doze necorespunztoare de substane chimice.
10.2.7. Influena concentraiei
La concentraii mici de utilizare nmolul netratat are un efect stimulator, att din punct
de vedere al ratei de germinare, ct i din punct de vedere al dezvoltrii plantelor analizate.
Aplicarea unor tratamentelor suplimentare poate majora acest efect (de exp. pasteurizare nalt,
expunerea la ultrasunete i ultraviolete). ns aplicat n concentraii mari, nmolul netratat are
un efect de inhibare al dezvoltrii plantelor ce se reflect n creterea cantitii de antioxidani
sintetizai. Reducerea toxicitii nmolului a fost observat i din analiza indicelui de
supravieuire al rmelor roii, pentru concentraii mici. n aceste situaii s-a remarcat o cretere
a ratei de supravieuire la tratamentele de pasteurizare, expunerea la microunde, ultraviolete i
ultrasunetele. La concentraii mari de utilizare se observ clar o cretere a toxicitii, mai ales la
tratamentele chimice..
57
Rata de extracie a metalelor grele din nmol este influenat puternic de concentraia
dozei de nmol n cazul Ni, Pb i Zn (r> 0.95) i puternic n cazul Cd i Cr (r> 0.6). Nu se
observ o corelaie ntre concentraia utilizat i randamentul de fitoextracie al Cu.
Astfel de experimente pot evalua rapid msura n care efectele induse de anumite
tratamente fizice i chimice aplicate nmolului de epurare stabilizat anaerob sau de
concentraia utilizat pot mri sau micora gradul de toxicitate al reziduului analizat.
Cercetrile efectuate n cadrul acestei teze de doctorat sunt deosebit de utile n evaluarea
ulterioar a riscului de mediu i sntate, pentru aceast categorie de produse reziduale.
58
Posibiliti de dezvoltare ulterioar

Sintetiznd concluziile prezentate n cadrul acestei teze de doctorat ,,Studii
ecotoxicologice privind nmolul de epurare stabilizat anaerob,, pot fi desprinse urmtoarele
posibiliti de dezvoltare ulterioar a temei de cercetare:
crearea unei baze de date spectrale ale tulpinilor bacteriene izolate din nmolul de
epurare stabilizat anaerob cu posibilitatea identificrii rapide a acestora;
promovarea introducerii testelor ecotoxicologice n criteriile de selecie ale nmolurilor
pentru utilizare n agricultur, silvicultur;
elaborarea unui ghid de realizare a testelor ecotoxicologice corespunztoare testrii i a
altor categorii de produse (deeuri);
identificarea soluiilor tehnice de promovare i de realizare a celui mai eficient
tratament fizic sau chimic suplimentar aplicat nmolului de epurare stabilizat anaerob n
cadrul staiei de epurare;
dezvoltarea i promovarea acelor proceduri tehnice de tratare suplimentar a
nmolurilor stabilizate anaerob optime utilizrii ulterioare a nmolului de epurare n
agricultur.
Contribuii originale
1. Realizarea unei sinteze privind nmolul de epurare stabilizat anaerob rezultat din
activitatea de epurare a apelor uzate publicat n articolul:Theoretical studies regarding to
disposal and utilization of the sewage sludge from municipal wastewater treatment plants,
Proceedings of the Union of Scientist, Fifth Conferince, Energy efficiency and agricultural
engineering, ISSN 1311-9974/ pg 356-369, Ruse, Bulgaria 17-18 mai 2013. Acest subiect a
fost continuat ntr-un alt articol, aflat n curs de publicare, intitulat: SWOT analysis about the
use of sewage sludge as an agricultural fertilizer, International Journal of Arts & Sciences,
(2014).
2. Toate experimentele efectuate n cadrul testelor ecotoxicologice, corespunztoare
grupului procariot i eucariotelor, au fost adaptate din ghidurile OECD de testare a substanelor
poluante. Concluziile au fost prezentate ntr-un articol publicat n revista Environmental
Engineering and Management Journal, 2014, Vol.13, No. 7, 1693-1706: Ecotoxicological
assesment of anaerobic stabilized sewage sludge subject to sanitization treatments. Subiecte
diferite ale acestei teme au fost prezentate n cadrul unor simpozioane naionale i
internaionale, astfel:
8e Colloque Franco Roumain de Chimie Applique (CoFrRoCA), ENSCM,
Montpellier, France (15 - 18 septembrie 2014)-Evaluation de la toxicit des boues d'puration
pre-fermentees;
Second International Conference on Natural and Anthropic Risks (ICNAR 2014), Bacu
(6-7 iunie 2014)-Estimation of microbiological effects induced by radiation on sewage
sludge;
Safety Engineering and Disaster Management (ELSEDIMA) International Conference
Cluj 18-19 septembrie 2014-Lifelong learning education from environmental toxicology and
risk assessment perspective, Environmental Legislation;
International Conference of Applied Sciences, Chemistry and Chemical Engineering
(CISA), Bacu (15-18 Mai 2013)-Aquatic environment behavior influenced by the presence of
sewage sludge;
Le troisime colloque francophone Pluridisciplinaire sur les Matriaux,
lEnvironnement et lElectronique (PLUMEE), Bacu (22-25 Mai 2013)-Surveillance du
dveloppement Ceratopteristh alictroides dans les eaux pollues par les boues d'puration;
59
The 10th International Conference Oproteh, Bacu (23 25 Mai 2013)-Effect of acid
rain on spinach growth planting in different soil types.
3. O abordare personalizat, cu privire la evaluarea subprodusele rezultate din
activitatea de epurare a apelor uzate a municipiului Bacu o constituie alegerea nmolului de
epurare stabilizat anaerob, drept material de cercetare. Concluziile au fost prezentate n cadrul
conferinei IJAS International Conference, University of Malta (2-6 Martie 2014): A SWOT
analysis about the use of sewage sludge as an agricultural fertilizer i Ecologia si protectia
ecosistemelor, Ediia a X-a (EPE), Bacau, (7-9 noiembrie 2013): The influence of different
treatment types applied to the sewage sludge on the growth of the Triticum aestivum L. Dropia
cultivar.
4. Propunerea cu privire la introducerea investigaiilor citogenetice ca test de importan
major n cadrul studiilor de ecotoxicitate realizate pe nmolul de epurare stabilizat anaerob, cu
posibilitatea aplicrii i pe alte categorii de produse, s-a concretizat ntr-o prezentare poster la
Natural and Anthropic Risks Second Edition (ICNAR), Bacu (6-7 iunie 2014): Cytogenetic
analyses on Allium cepa L.subject to sewage sludge treatment.
5. Propunerea unei metode rapide de analiz a microbiotei prezente la nivelul nmolului
de epurare stabilizat anaerob prin tehnica de spectroscopie n infrarou. Concluziile acestor
studii sunt n curs de evaluare: FTIR screening of resistant bacteria from anaerobic stabilized
sewage sludge subject to additional physical and chemical treatments.
6. Tratamentele fizice i chimice suplimentare propuse n cadrul acestei teze i
identificarea celor mai eficiente din punct de vedere sanogen i ca reacie mai puin toxic la
nivelul viului constituie un alt mod de abordare original. Astfel, se vor putea completa
informaiile existente despre aceste deeuri, n situaia utilizrii n agricultur. n plus, studiile
de ecotoxicitate realizate la nivelul nmolului de epurare stabilizat anaerob i suplimentar tratat
fizic i/sau chimic ne permite stabilirea corect a dozei i a modului de aplicare n agricultur,
silvicultur sau pe terenuri degradate.
O atenie special trebuie acordat metalelor grele care au capacitatea de bioacumulare,
nivelul fitotoxic nefiind echivalent cu cel zootoxic. Legat de acest subiect al toxicitii
metalelor grele a fost publicat un articol: Observations concerning the effects of the foliar
application of copper on some physiological processes of Calendula officinalis L. species.
Valorificarea rezultatelor obinute n perioada 2012-2014:
Articole publicate n reviste cotate ISI

1. Dumitra Rducanu, Ioana Stefanescu, Ifrim Irina, Sorina Zirnea, Daniela Nicuta, Ioan
Viorel Rati, Iuliana Lazar, Ecotoxicological assesment of anaerobic stabilized sewage
sludge subjected to sanitization treatments, Environmental Engineering and Management
Journal, 2014, Vol.13, No. 7, 1693-1706;
2. Aristide Guillaume Silapeux Kamda, Elie Fokou, Mercy Bih Achu Loh, Dumitra
Rducanu, Germain Kansci, Irina Ifrim, Iuliana Lazar, Protective effect of edible
cucurbitaceae seed extract from Cameroon against oxidative stress, Environmental
Engineering and Management Journal, 2014, Vol.13, No. 7, 1721-1727;
Articole n curs de evaluare pentru publicare n reviste cotate ISI
1. Dumitra Raducanu, Iuliana Caraman, Gabriel Lazar, Marius Stamate, Camelia Ureche,
Viorel Rati, Iuliana Lazar, FTIR screening of resistant bacteria from anaerobic stabilized
sewage sludge subject to additional physico-chemical treatments, Spectroscopy Letters, n
evaluare;
2. Stve Olugu Voundi, Maximilienne Nyegue, Iuliana Lazar, Dumitra Raducanu,
Florentine Ndoye, Marius Stamate, Chantal Menut and Franois-Xavier Etoa, Effect of
60
essential oils on germination and growth of pathogenic and spoilage Bacillus, Foodborne
Pathogens and diseases, n evaluare;
3. Iuliana Caraman, Sorina Zirnea, Dumitra Rducanu, Gabriel Lazar, Iuliana Lazar,
Spectral investigation of phosphorus compounds in Spinacia Oleracea using Fourier
Transform Infrared method, Spectroscopy Letters, n evaluare;
Articol publicat: Proceedings Conferin Internaional
1. Dumitra Rducanu,Valentin Nedeff, Narcis Barsan, Alexandra Dana Chitimus, Emilian
Florin Mosnegutu, Theoretical studies regarding to disposal and utilization of the sewage
sludge from municipal wastewater treatment plants, Proceedings of the Union of Scientist,
Fifth Conferince, Energy efficiency and agricultural engineering, ISSN 1311-9974/ pg
356-369, Ruse, Bulgaria 17-18 mai 2013.
Articole n curs de evaluare pentru publicare n reviste indexate BDI:
1. Dumitra Rducanu, Ioana Stefanescu, Liliana Mata, Venera Cojocariu, Iuliana Lazar,
Particular pedagogical tools for teaching a practical course that involves unpredictable
health risk, International Journal of Arts & Sciences,in evaluare;
2. Dumitra Rducanu, Valentin Nedeff, Stelian Cartacuzencu, Marius Stamate, Viorel Ioan
Rati, Iuliana Lazar, SWOT analysis about the use of sewage sludge as an agricultural
fertilizer, International Journal of Arts & Sciences,in evaluare;
Articole publicate n reviste indexate BDI
1. Maria Prisecaru, Dumitra Rducanu, Florian Prisecaru 2014 -Preliminary studies on the
antimicrobial potential of some herbal esential oils, Studii i Cercetri Stiinifice ale
Universitii Vasile Alecsandri din Bacu, Seria Biologie Vegetal Martie 2014
Biologie 23/1 , ISSN 1224 919X p 29-35;
2. Nicoleta Bdlu, Maria Prisecaru, Ioan Viorel Rai, Dumitra Rducanu 2014 Observations concerning the effects of the foliar application of copper on some
physiological processes of Calendula officinalis L.species, Studii i Cercetri Stiinifice
ale Universitii Vasile Alecsandri din Bacu, Seria Biologie Vegetal, Martie 2014
Biologie 23/1 ISSN 1224 919X p 16-21;
3. Ioan Viorel Rai, Dumitra Rducanu, Nicoleta Bdlu 2014 - Studies of viral
proliferation on apples cultivars: Jonathan, Voinea and Golden delicious, Studii i
Cercetri Stiinifice ale Universitii Vasile Alecsandri din Bacu, Seria Biologie
Vegetal, Martie 2014 Biologie 23/1, ISSN 1224 919X, p 99-103;
Prezentri n cadrul Conferinelor Naionale i Internaionale:
1. Dumitra Rducanu, Irina Ifrim, Alisa Arus, Narcis Birsan, Valentin Nedeff, Iulia Lazar,
Physico-chemical and microbiological characterization of sewage sludge resulted from
wastewater treatment plant of Bacau County, Effect of acid rain on spinach growth
planting in different soil types, The 10th International Conference Oproteh, Bacu (23
25 Mai 2013);
2. Dumitra Rducanu, Aristide Guillaume Silapeux Kamda, Ioana Gherman, Sorina
Zrnea, Irina Ifrim, Elie Fokou, Daniela Nicuta, Iulia Lazar, Effect of acid rain on spinach
growth planting in different soil types, The 10th International Conference Oproteh,
Bacu (23 25 Mai 2013);
3. Eve Jeanne Cabo, Dumitra Rducanu, Ema Ficiu, Sorina Zrnea, Irina Ifrim, Camelia
Ureche, Gabriel Lazar, Iulia Lazar, Surveillance du dveloppement Ceratopteristh
alictroides dans les eaux pollues par les boues d'puration, Le troisime colloque
francophone Pluridisciplinaire sur les Matriaux, lEnvironnement et lElectronique
(PLUMEE), Bacu (22-25 Mai 2013);
4. Eve Jeanne Cabo, Dumitra Rducanu, Ema Ficiu, Sorina Zrnea, Camelia Ureche, Irina
Ifrim, Gabriel Lazar, Iulia Lazar, Aquatic environment behavior influenced by the
61
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
presence of sewage sludge, International Conference of Applied Sciences, Chemistry and

Chemical Engineering (CISA), Bacu (15-18 Mai 2013);
Dumitra Rducanu, Daniela Nicuta, Ioana Stefanescu, Valentin Nedeff, Iulia Lazar,
The influence of different treatment types applied to the sewage sludge on the growth of
the Triticum aestivum L. Dropia cultivar , Ecologia si protectia ecosistemelor , Ediia a
X-a (EPE), Bacau, (7-9 noiembrie 2013);
Rati Ioan Viorel, Dumitra Rducanu, Rosu Ana-Maria,Badaluta Nicoleta, Stoica Ionut
Viorel, Miron Neculai Doru, Nistor Ileana Denisa, Zavada Ramona Mihaela,Influence of
ASFACBC04 biostimulator in quality and productivity of sour and sweet cherry fruits,
Ecologia si protectia ecosistemelor , Ediia a X-a (EPE), Bacau, (7-9 noiembrie 2013);
Dumitra Rducanu, Valentin Nedeff, Stelian Cartacuzencu, Marius Stamate, Iuliana
Mihaela Lazar, A SWOT analysis about the use of sewage sludge as an agricultural
fertilizer, IJAS International Conference,University of Malta (2-6 Martie 2014);
Dumitra Rducanu, Ioana Stefanescu, Liliana Mata, Venera Cojocariu, Iuliana Mihaela
Lazar, Particular pedagogical tools for teaching a practical course that involves
unpredictable health risk, IJAS International Conference,University of Malta (2-6 Martie
2014);
Voundi Olugu Steve Henri, Dumitra Rducanu, Arus Vasilica Alice, Sorina Zrnea,
Brice Ulrich Saha Foudjo,Stamate Marius, Rati Ioan Viorel, Lazar Iuliana, Influence of
sterilization techniques on soil agrochemical properties, International Conference of
Applied Sciences, Chemistry and Chemical Engineering (CISA), Bacu (7-9 Mai 2014);
Dumitra Rducanu, Steve Henri Voundi Olugu, Lucie Leme Banock, Marius Stamate,
Ioan Viorel Rati, Maria Prisecaru, Iuliana Lazar, Variation of physico-chemical and
biological parameters after different methods of soil sterilization Second International
Conference on Natural and Anthropic Risks (ICNAR 2014), Bacu (6-7 iunie 2014);
Dumitra Rducanu, Voundi Olugu Steve Henri, Marius Stamate, Maria Prisecaru, Lucie
Leme Banock, Ioan Viorel Rati, Iuliana Mihaela Lazar, Estimation of microbiological
effects induced by radiation on sewage sludge, Second International Conference on
Natural and Anthropic Risks (ICNAR 2014), Bacu (6-7 iunie 2014);
Daniela Nicu, Dumitra Rducanu, Iuliana Mihaela Lazr , Cytogenetic analyses on
Allium cepa L.subject to sewage sludge treatment, Natural and Anthropic Risks Second
Edition (ICNAR) , Bacu (6-7 iunie 2014);
Jean Baptiste Hzounda Fokou, Pierre Michel Jazet Ndongmo, Madeleine Nina Ngo
Mback, Dumitra Rducanu, Iuliana Caraman, Emmanuel Bassene, Fabrice Fekam
Boyom, Iuliana Lazar, Caractrisation spectroscopique des huiles essentielles de quatres
Ocimum dorigine Camerounaise, Second International Conference on Natural and
Anthropic Risks (ICNAR 2014), Bacu (6-7 iunie 2014);
Lucie Leme Banock, Claudine Ntsama Essomba, Dumitra Rducanu, Iuliana Caraman,
Larissa Abologo Azeme, Charles Felix Bilong Bilong, Iuliana Mihaela Lazar,
Biodegradation of gasoline and diesel by bacteria isolated from Cameroons coast water,
Second International Conference on Natural and Anthropic Risks (ICNAR 2014), Bacu
(6-7 iunie 2014);
Ana-Maria Rosu, Ramona Mihaela Zavada, Ionel Marcel Popa, Neculai Doru Miron,
DumitraRducanu, Ileana Denisa Nistor , Etude comparative des activites antifongiques
des extraits de basilic et de thym, 8e Colloque Franco Roumain de Chimie Applique
(CoFrRoCA ), ENSCM, Montpellier, France (15 - 18 septembrie 2014);
Dumitra Rducanu, Jean Baptiste Hzounda Fokou,Steve Voundi, Ioana Stefanescu,
Viorel Ioan Rati, Irina Ifrim, Iuliana Lazar, Evaluation de la toxicit des boues
d'puration pre-fermentees , 8e Colloque Franco Roumain de Chimie Applique
(CoFrRoCA ), ENSCM, Montpellier, France (15 - 18 septembrie 2014);
62
17. Dumitra Rducanu, Ioana Stefanescu, Irina Ifrim, Iuliana Caraman, Iuliana Lazar,
Lifelong learning education from environmental toxicology and risk assessment
perspective, Environmental Legislation, Safety Engineering and Disaster Management
(ELSEDIMA) International Conference Cluj 18-19 septembrie 2014;
Participare la contracte de cercetare naionale:
1. Cercetari privind stabilirea celor mai bune solutii pentru fertirigare in pomicultura,
prin utilizarea stimulatorului de crestere ASFAC-BC 0-4 si determinarea actiunilor
nutritionale, biostimulente si fiziologice ale acestuia. Nr 7816/24.05.2013 cu SC.
ROMCHIM PROTECT SA, Director: Prof univ dr ing. Rati Ioan Viorel, Membri:
Badaluta Nicoleta, Dumitra Rducanu, Stoica Ionut (2013);
2. Cercetri privind stabilirea celor mai bune soluii pentru fertirigare n pomicultura,
prin utilizarea stimulatorului de cretere ASFAC-BC 0-4 i determinarea influenei
acestuia asupra produciei de fructe la speciile: mr, cire, viin i prun Nr.
11/05.05.2014 cu SC. ROMCHIM PROTECT SA - Director: Prof univ dr ing. Rati Ioan
Viorel, Membri: Badaluta Nicoleta, Dumitra Rducanu, Stoica Ionut, Prisecaru Maria
(2014).
63
1.
2.
3.
5.
6.
7.
8.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
17.
18.
32.
33.
34.
35.
Bibliografie
Paian, C.A. and M. Goian, Apa uzat i nmolul orenesc- posibiliti de utilizare n
agricultur. 2006, Timioara: Ed. Mirton. 243.
Institutul de Studii i Proiectri Energetice Bucureti, Studiu pentru analiza situaiei
actuale a efectelor utilizrii nmolurilor de la staiile de epurare n agricultur. 2004,
Ministerul Mediului i Gospodririi Apelor-Institutul de Studii i Proiectari Energetice
Bucureti,.
Stoicescu, A., Tratarea i eliminarea nmolurilor provenite de la staiile de epurare.
Ecoterra, 2011. 28: p. 169-174.
Berkesy, C., et al., Studiu privind posibilitile de valorificare a nmolurilor provenite
din staiile de epurare oreneti. Ecoterra, 2009. 20: p. 22-24.
Direcia Generala AM POS Mediu, Strategia naional de gestionare a nmolurilor de
epurare, Cod proiect: POSM/6/AT/I.1.2010. 2012.
Pintea, I.I., Cercetri privind influena nmolurilor de la staiile de epurare oreneti
asupra culturilor de lucern, in Facultatea de Agricultura. 2012, Universitatea de
tiine Agricole i Medicin Veterinar Cluj-Napoca.
Brsan, N., V. Nedeff, and G. Lazr. Studies and research for increase treatment
capacity of domestic wastewater in small plants. in Proceedings of the 12th
Internaional Conference on Environmental Science & Technology CEST. 2011.
Rhodes Island, Dodecanese, Greece.
Simionescu, C.M., Epurarea biologic a apelor uzate. 2009, Bucureti: Editura Matrix
Rom.
Rojanschi, V. and T. Ozman, Cartea operatorului din staii de epurare a apelor uzate.
Vol. 1. 1997, Bucureti: Ed. Tehnic.
Leonard, I., et al., Metodologie de utilizare a namolului orasenesc in agricultura. 2007,
Ed. Solness: Timisoara.
Fytili, D. and A. Zabaniotou, Utilization of sewage sludge in EU application of old and
new methodsA review. Renewable and Sustainable Energy Reviews, 2008. 12(1): p.
116-140.
Elser, T., Perspective methods of sewage sludge utilisation for energy production, in
Faculty of Mechanical Engineering, Institute of Process and Environmental
Engineering. 2011, University of Technology BRNO. p. 28.
Ministerul Mediului i Gospodririi Apelor (M.M.G.A), Ordinul nr. 344 din 16 august
2004 pentru aprobarea Normelor tehnice privind protecia mediului i n special a
solurilor cnd se utilizeaz nmolurile de epurare n agricultur. 2004.
Asociatia de Standardizare din Romania, SR CR 13864 Recomandri pentru pastrarea
si extinderea utilizrii nmolurilor i cile de eliminare. 2002.
Gerba, C.P. and I.L. Pepper, Chapter 24 - Wastewater Treatment and Biosolids Reuse,
in Environmental Microbiology (Second Edition), R.M.M.L.P.P. Gerba, Editor. 2009,
Academic Press: San Diego. p. 503-530.
Werle, S. and R.K. Wilk, A review of methods for the thermal utilization of sewage
sludge: The Polish perspective. Renewable Energy, 2010. 35(9): p. 1914-1919.
Singh, R.P. and M. Agrawal, Potential benefits and risks of land application of sewage
sludge. Waste Management, 2008. 28(2): p. 347-358.
Kelessidis, A. and A.S. Stasinakis, Comparative study of the methods used for treatment
and final disposal of sewage sludge in European countries. Waste Management, 2012.
32(6): p. 1186-1195.
Bruce, A.M., A.H. Havelaar, and P. L'Hermite. Desinfection of Sewage Sludge:
Tehnical, Economical and Microbiological aspects. in Proceedings of a Workshop
1982. Zurich.
64
36.
37.
38.
39.
40.
41.
42.
43.
44.
47.
48.
49.
50.
51.
53.
54.
56.
57.
58.
59.
62.
63.
Dima, M., Epurarea apelor uzate urbane. 2005, Iai: Ed. Tehnopress. 526.
Liu, H., et al., Acidogenic fermentation of proteinaceous sewage sludge: Effect of pH.
Water Research, 2012. 46(3): p. 799-807.
Appels, L., et al., Principles and potential of the anaerobic digestion of waste-activated
sludge. Progress in Energy and Combustion Science, 2008. 34(6): p. 755-781.
Chen, Y., J.J. Cheng, and K.S. Creamer, Inhibition of anaerobic digestion process: A
review. Bioresource Technology, 2008. 99(10): p. 4044-4064.
Rojanschi, V. and T. Ozman, Cartea operatorului din staii de epurare a apelor uzate.
1997, Bucureti: Ed. Tehnic.
Jacob, A.K., M.J. Willis, and A.P. Hardman, Method for the simultaneous transport and
pasteurization of other publications sewage sludge. 1990: United States Patent.
Coultry, J., E. Walsh, and K.P. McDonnell, Energy and economic implications of
anaerobic digestion pasteurisation regulations in Ireland. Energy, 2013. 60: p. 125128.
Arthurson, V., Proper Sanitization of Sewage Sludge: A Critical Issue for a Sustainable
Society. Applied and Environmental Microbiollogy, 2008. 74(17): p. 5267-5275.
Pickworth, B., et al., Large scale reality of sewage sludge pasteurisation and thermal
hydrolysis, in Odd Egil. 2000, Solheim, Black & Veatch Limited.
Allievi, L., et al., Inactivation of fecal bacteria in sewage sludge by alkaline treatment.
Bioresource Technology, 1994. 49(1): p. 25-30.
Bezak-Mazur, E., L. Dbek, and E. Ozimina, Assessing the Sorption Capacity of
Sewage Sludge with Respect to Organic Halogen Derivative Compounds. Polish
Journal of Environmental Studies, 2010. 19(4).
Zafar, L., et al., Potential of Waste Water Sludge as Environmental-Friendly Manure
after UV-Treatment. Research Journal of Environmental and Earth Sciences, 2012.
4(10): p. 917-922.
Wojciechowska, E., Application of microwaves for sewage sludge conditioning. Water
Research, 2005. 39(19): p. 4749-4754.
Yao, Y., et al., Perception of volatiles produced by UVC-irradiated plants alters the
response to viral infection in nave neighboring plants. Plant Signaling & Behavior,
2012. 7(7): p. 741-745.
Wang, J. and J. Wang, Application of radiation technology to sewage sludge
processing: A review. Journal of Hazardous Materials, 2007. 143(12): p. 2-7.
Yu, Q., et al., Physical and chemical properties of waste-activated sludge after
microwave treatment,. Water Research, 2010. 44(9): p. 2841-2849.
Mironescu, M., L. Oprean, and I.D. Mironescu, Improving the microbiological quality
and hygiene of wastewater sludge using microwaves. Analele SNBC, 2008. 13: p. 307311.
Kim, I. and Y.-Y. He, Ultraviolet radiation-induced non-melanoma skin cancer:
Regulation of DNA damage repair and inflammation. Genes & Diseases, (0).
Matsumura, Y. and H.N. Ananthaswamy, Toxic effects of ultraviolet radiation on the
skin. Toxicology and Applied Pharmacology, 2004. 195(3): p. 298-308.
Bara, C., Iuliana, Radiaia ultraviolet factor mutagen fizic. Efectele iradierii cu UV la
fasole (Phaseolus vulgaris L.). 2009, Iai: Editura Universitatii Al. I. Cuza. 330..
Stamate, M., Surse de radiaii i tehnici de protecie - note de curs. 2014, Universitatea
"Vasile Alecsandri" din Bacau.
Swinwood, J.F. and B.K. Wilson. Commercial applications of irradiation, waste
recycling and treatment processe. in Proc. Symp, Karlsruhe IAEA. 2011. Vienna.
65
64.
65.
66.
68.
71.
75.
76.
78.
79.
80.
81.
82.
83.
84.
85.
86.
87.
88.
92.
93.
95.
Sato, S., O. Tokunaga, and H. Arai, Hashimoto, S., . Applications of isotope and
radiation in conservation of the environment,. in Proc. Symp, Karlsruhe,. 1992. IAEA,
Vienna, .
Singh, B. and P.S. Datta, Effect of low dose gamma irradiation on plant and grain
nutrition of wheat. Radiation Physics and Chemistry, 2010. 79(8): p. 819-825.
Chiang, Y., et al., Influence of gamma irradiation on microbial load and antioxidative
characteristics of Polygoni Multiflori Radix. Process Biochemistry, 2010.
Pilli, S., et al., Ultrasonic pretreatment of sludge: A review. Ultrasonics sonochemistry,
2010. 18(1): p. 1-18.
Bouchet, F. and Y. Boulard, Ultrastructural changes following treatment with a
microwave pulse in the oocysts of Eimeria magna Penard 1925. Parasitology Research,
1991. 77(7): p. 585-589.
Ashokkumar, M., et al., Cryptosporidium and Cryptosporidiosis Second Edition.
Ultrasonic treatment of Cryptosporidium oocysts. Water Science Technology, 2003. 47:
p. 173-177.
Zhang, H., Sludge treatment to increase biogas production. 2010.
Khanal, S.K., et al., Ultrasonic conditioning of waste activated sludge for enhanced
aerobic digestion, in Proceedings of IWA Specialized Conference - Sustainable Sludge
Management: State of the Art, Challenges and Perspectives. 2006: Moscow, Russia. p.
29-31.
Akram, J., N. Nafise, and F. Mahdi, Comparison of aerobic and lime stabilization
methods for evaluation of sewage sludge reuse. Journal of Environmental Science and
Technology, 2011. 4: p. 182-190.
Mihalikov, K., et al., The effects of organic selenium supplementation on the rumen
ciliate population in sheep. Folia Microbiology, 2005. 50 (4): p. 353-356.
Czechowski, F. and T. Marcinkowski, Sewage sludge stabilisation with calcium
hydroxide: Effect on physicochemical properties and molecular composition. Water
Research, 2006. 40: p. 1895-1905.
Winker, M., et al., Fertiliser products from new sanitation systems: Their potential
values and risks. Bioresource Technology, 2009. 100: p. 4090-4096.
Sylwan, I., A technique for sanitizing sewage sludge - Urea treatment with dual
advantages 2010, SLU, Uppsala, Sweden,: Department of Energy and Technology.
Beltran, E.M., et al., Impact of Sewage Sludge Compost Utilization on Chemical
Properties of Olive Grove Soils. Compost Science and Utilization, 2006. 14(4): p. 260.
Beltrn, E.M., et al., Effect of the sewage sludge compost application on ammonium nitrogen content of an olive grove soil, in 12th ISCO Conference. 2002: Beijing.
Oros, V., Ecotoxicology involved in environmental engineering and risk assessment
entrepreneurship. Ingineria Mediului i Antreprenoriatul Dezvoltrii Durabile 2012.
1(1).
Tarazona, J.V. and M.J. Ramos-Peralonso, Ecotoxicology, in Encyclopedia of
Toxicology (Third Edition), P. Wexler, Editor. 2014, Academic Press: Oxford. p. 276280.
Truhaut, R., Ecotoxicology and Environmental Safety-Ecotoxicology: Objectives,
Principles and Perspectives. Vol. 1. 1977.
Molnr, M. and V. Feigl, Environmental toxicology-part 1. 2013, Budapest: Budapest
University of Technology and Economics 10-21.
Oros, V., Elements of Ecotoxicology and Ecotoxicological Tests (In Romanian). 2011,
Cluj Napoca: Risoprint.
Karen, F., et al., New methodological improvements in the Microtox solid phase
assay. Chemosphere, 2012. 86(1): p. 105.
66
96.
99.
100.
105.
106.
108.
109.
110.
111.
114.
115.
116.
117.
119.
121.
122.
123.
125.
126.
Wani, S.A., S. Chand, and T. Ali, Potential Use of Azotobacter Chroococcum in Crop
Production: An Overview. Current Agriculture Research Journal, 2013. 1(1): p. 35-38.
OECD 33, Series on Testing and Assessment, in Harmonised Integrated Classification
System for Human Health and Environmental Hazards of Chemical Substances and
Mixtures. 2001.
Baumgarten, A. and H. Spiegel, Phytotoxicity (Plant tolerance). 2004, Vienna: Agency
for Health and Food Safety.
OECD 221, Guidelines for the Testing of Chemicals, in Lemna Sp. Growth Inhibition
Test. 2006.
Tedesco, S.B. and H.D. Laughinghouse, Bioindicator of Genotoxicity: The Allium cepa
Test, in Environmental Contamination, Dr. Jatin Srivastava, Editor. 2012.
Fuentes, A., et al., Ecotoxicity, phytotoxicity and extractability of heavy metals from
different stabilised sewage sludges. Environmental Pollution, 2006. 143(2): p. 355-360.
Moreira, R., J.P. Sousa, and C. Canhoto, Biological testing of a digested sewage sludge
and derived composts. Bioresource Technology, 2008. 99(17): p. 8382-8389.
Ramrez, W.A., et al., Toxic effects of digested, composted and thermally-dried sewage
sludge on three plants. Bioresource Technology, 2008. 99(15): p. 7168-7175.
Ratte, H.T., M. Hammers-Wirtz, and M. Cleuvers, Chapter 7 Ecotoxicity testing, in
Trace Metals and other Contaminants in the Environment, B.A. Markert, A.M. Breure,
and H.G. Zechmeister, Editors. 2003, Elsevier. p. 221-256.
Christofoletti, C.A., A. Francisco, and C.S. Fontanetti, Biosolid Soil Application:
Toxicity Tests under Laboratory Conditions. Applied and Environmental Soil Science,
2012. 2012: p. 1-9.
Samuel, O.B., F.I. Osuala, and P.G.C. Odeigah, Cytogenotoxicity evaluation of two
industrial effluents using Allium cepa assay. African Journal of Environmental Science
and Technology, 2010. 4(1): p. 21-27.
Souza, L.F.B., et al., Genotoxic potential of aqueous extracts of Artemisia verlotorum
on the cell cycle of Allium cepa. International Journal of Environmental Studies, 2010.
67(6): p. 871-877.
Tanti, B., et al., Studies on the Cytotoxic Effect of Oil Refinery Sludge on Root
Meristem. Eurasian Journal Sustainable Agriculture, Advances in Environmental
Biology, 2009. 3(1): p. 10-14.
Bucuresteanu, M. and F. Florea, The differential elimination of the noxes from the
polluted waters by different species of ecological plants, in Lucrarile Simpozionului alX-lea de Microbiologie si Biotehnologie. 2004, Ed. Corson: Iasi. p. 497-507.
Forster-Carneiro, T., V. Riau, and M. Prez, Mesophilic anaerobic digestion of sewage
sludge to obtain class B biosolids: Microbiological methods development. Biomass and
Bioenergy, 2010. 34(12): p. 1805-1812.
Tata, A. and F. Beone, Hospital waste sterilization: A technical and economic
comparison between radiation and microwaves treatments. Radiation Physics and
Chemistry, 1995. 46(46, Part 2): p. 1153-1157.
Dunca, S., et al., Microbiologie aplicat. 2004, Iai: Ed. Tehnopress.
Lin, C.Y. and C.H. Lay, A nutrient formulation for fermentative hydrogen production
using anaerobic sewage sludge microflora. International Journal of Hydrogen Energy,
2005. 30(3): p. 285-292.
Akbar, A. and A.K. Anal, Prevalence and antibiogram study of Salmonella and
Staphylococcus aureus in poultry meat. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine,
2013. 3(2): p. 163-168.
67
127.
130.
131.
132.
134.
137.
138.
139.
142.
146.
147.
149.
152.
155.
156.
158.
159.
160.
161.
162.
164.
Soriano, F., Aspectos farmacocinticos y farmacodinmicos para la lectura

interpretada del antibiograma. Enfermedades Infecciosas y Microbiologa Clnica,
2002. 20(8): p. 407-412.
Cardona, M., Modulation spectroscopy. 1969, New York: Academic Press. 432.
Singh, R., et al., Removal of sulphate, COD and Cr(VI) in simulated and real
wastewater by sulphate reducing bacteria enrichment in small bioreactor and FTIR
study. Bioresource Technology, 2011. 102(2): p. 677-682.
Schmitt, J. and H.-C. Flemming, FTIR-spectroscopy in microbial and material analysis.
International Biodeterioration & Biodegradation, 1998. 41(1): p. 1-11.
Gheorghi, G., Bazele geneticii. 1999, Bacu: Editura Alma Mater.
Bialowiec, A. and P.F. Randerson, Phytotoxicity of landfill leachate on willow Salix
amygdalina L. Waste Management, 2010. 30(89): p. 1587-1593.
Lamhamdi, M., et al., Effect of lead stress on mineral content and growth of wheat
(Triticum aestivum) and spinach (Spinacia oleracea) seedlings. Saudi Journal of
Biological Sciences, 2013. 20(1): p. 29-36.
Brling, K., M. Hunsche, and G. Noga, Use of bluegreen and chlorophyll fluorescence
measurements for differentiation between nitrogen deficiency and pathogen infection in
winter wheat. Journal of Plant Physiology, 2011. 168(14): p. 1641-1648.
Lazar, I.M., et al., Evaluation of growth parameters and spectroscopic indexes of
canola from seeds subjected to non- ionizing radiation stress. Environmental
Engineering and Management Journal, 2012. 11(12): p. 2211-2221.
Tekaya, M., et al., Changes in the profiles of mineral elements, phenols, tocopherols
and soluble carbohydrates of olive fruit following foliar nutrient fertilization. LWT Food Science and Technology, 2014. 59(2, Part 1): p. 1047-1053.
Barrera-Garca, D., et al., Transfer of volatile phenols at oak wood/wine interface in a
model system, in Developments in Food Science, L.P.B. Wender and P. Mikael Agerlin,
Editors. 2006, Elsevier. p. 449-452.
Blainski, A., G.C. Lopes, and J.C. Palazzo de Mello, Application and analysis of the
Folin Ciocalteu Method for the determination of the total phenolic content from
Limonium Brasiliense L. Molecules, 2013. 18: p. 6852-6865.
Zhang, D.-Y., et al., Aqueous two-phase extraction and enrichment of two main
flavonoids from pigeon pea roots and the antioxidant activity. Separation and
Purification Technology, 2013. 102(0): p. 26-33.
Wang, L., et al., Flavonoid composition, antibacterial and antioxidant properties of
tartary buckwheat bran extract. Industrial Crops and Products, 2013. 49(0): p. 312-317.
da Costa Csar, I., et al., Quantitation of genistein and genistin in soy dry extracts by
UV-Visible spectrophotometric method, in Qumica Nova. Qumica Nova.
Guru, M., Botanica sistematic. 2007, Bacau: Editura Alma Mater. 302.
Uysal, Y., Removal of chromium ions from wastewater by duckweed, Lemna minor L.
by using a pilot system with continuous flow. Journal of Hazardous Materials, 2013.
263, Part 2(0): p. 486-492.
Varian, I., Varian AA 240FS Analysis Manual. 2007, Varian. Inc.,.
Langdon, C.J., et al., As-resistance in laboratory-reared F1, F2 and F3 generation
offspring of the earthworm Lumbricus rubellus inhabiting an As-contaminated mine
soil. Environmental Pollution, 2009. 157(11): p. 3114-3119.
Owojori, O.J. and A.J. Reinecke, Differences in ionic properties of salts affect saline
toxicity to the earthworm Eisenia fetida. Applied Soil Ecology, 2014. 83(0): p. 247-252.
Molina, M.J., et al., Stabilisation of sewage sludge and vinasse bio-wastes by
vermicomposting with rabbit manure using Eisenia fetida. Bioresource Technology,
2013. 137(0): p. 88-97.
68
165.
168.
169.
170.
173.
177.
178.
181.
184.
187.
188.
192.
193.
194.
195.
196.
197.
198.
199.
200.
201.
Field, A., Discovering Statistics using SPSS. . 2006, London: SAGE Publications Ltd.
Samprit Chatterjeea and I. Olkinc, Nonparametric estimation for quadratic regression.
Statistics & Probability Letters 2006 76 p. 11561163.
Gheorghe, D. Regresia neliniara. 2012 [cited 2013 28.12]; Available from:
http://www.scribd.com/doc/94086954/Regresia-neliniara-1.
Fox, J. Cox Proportional-Hazards Regression for Survival Data. Appendix to An R and
S-PLUS Companion to Applied Regression, 2002.
Martin, M., S., Radioactive data files. Janis-Nea radioacttive data, 2005.
Reinthaler, F.F., et al., Antibiotic resistance of E. coli in sewage and sludge. Water
Research, 2003. 37(8): p. 1685-1690.
Baquero, F., J.-L. Martnez, and R. Cantn, Antibiotics and antibiotic resistance in
water environments. Current Opinion in Biotechnology, 2008. 19(3): p. 260-265.
Becker, B., C. Weiss, and W.H. Holzapfel, An evaluation of the use of three phenotypic
test-systems
for
biochemical
identification
of
Enterobacteriaceae
and
Pseudomonadaceae. Food Control, 2009. 20(9): p. 815-821.
Movasaghi, Z., S. Rehman, and I.u. Rehman, Fourier Transform Infrared (FTIR)
Spectroscopy of Biological Tissues. Applied Spectroscopy Reviews,, 2008. 43: p. 134179.
Smidt, E., K. Bhm, and M. Schwanninger, The Application of FT-IR Spectroscopy in
Waste Management, in Fourier Transforms - New Analytical Approaches and FTIR
Strategies, G. Nikolic, Editor. 2011, InTech.
Movasaghi, Z., S. and I.U. Rehman, Fourier Transform Infrared (FTIR) Spectroscopy
of Biological Tissues. Applied Spectroscopy Reviews,, 2008. 43: p. 134-179.
E.Doroftei, L. Miron, and M. Rotaru, Efectul mutagen al metalelor grele cupru i
cadmiu la Allium cepa,. Facultatea de tiine Ale Naturii i tiine Agricole,
Universitatea Ovidius Constana,, 2008. Vol. XIII,(Analele SNBC): p. 225-229,.
Leme, D.M. and M.A. Marin-Morales, Allium cepa test in environmental monitoring: A
review on its application. Mutation Research/Reviews in Mutation Research, 2009.
682(1): p. 71-81.
Carit, R. and M.A. Marin-Morales, Induction of chromosome aberrations in the Allium
cepa test system caused by the exposure of seeds to industrial effluents contaminated
with azo dyes. Chemosphere, 2008. 72(5): p. 722-725.
Du, W., J. Jiang, and C. Gong, Primary Research on Agricultural Effect of Sludge
Impact of Sludge Application on Crop Seeds Germination and Seedling Growth.
Procedia Environmental Sciences, 2012. 16(0): p. 340-345.
Salazar, C., A.M. El-Arabi, and J.J. Schmidt, EC50 and IC50 Measurements of TRPM8
in Lipid Bilayers. Biophysical Journal, 2012. 102(3, Supplement 1): p. 344a-345a.
Li, T.Y. and Z.T. Xiong, Cadmium-induced colony disintegration of duckweed (Lemna
paucicostata Hegelm.) and as biomarker of phytotoxicity. Ecotoxicology and
Environmental Safety, 2004. 59(2): p. 174-179.
Park, A., et al., A novel bioassay using root re-growth in Lemna. Aquatic Toxicology,
2013. 140141(0): p. 415-424.
Saygideger, S., et al., Adsorption of Cd(II), Cu(II) and Ni(II) ions by Lemna minor L.:
Effect of physicochemical environment. Journal of Hazardous Materials, 2005. 126(1
3): p. 96-104.
Horvat, T., et al., Toxicity assessment of heavy metal mixtures by Lemna minor L.
Science of The Total Environment, 2007. 384(13): p. 229-238.
Demim, S., et al., CCD study on the ecophysiological effects of heavy metals on Lemna
gibba. Ecological Engineering, 2013. 57(0): p. 302-313.
69

Ecotoxicitate Lemna Pag 41

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Ecotoxicitate Lemna Pag 41

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

ROMNIA

MINISTERUL EDUCAIEI NAIONALE

STUDII ECOTOXICOLOGICE PRIVIND

Adresez respectoase mulumiri i deosebit recunotin doamnei confereniar univ.dr.

profesionalismul i atitudinea riguroas cu care s-a implicat n coordonarea activitii de

Justificarea temei i prezentarea scopului i a obiectivelor tezei de doctorat

Managementul nmolului constituie o problem complex, pe msur ce standardele de

Obiectivele principale ale acestei teze de doctorat sunt urmtoarele:

Teza de doctorat este structurat n trei pri principale, respectiv partea de

Partea a II-a conine metodologia cercetrii i este structurat n trei capitole ce

suplimentar, ca rezultat al analizei spectrale n infrarou, de asemeni, constituie un alt mod de

Capitolul 7. REZULTATELE TESTELOR DE ECOTOXICITATE ALE

Fig. 7. 1 Reprezentarea grafic a variaiei cu timpul de expunere a numrului total de germeni/din

Agenii patogeni heterotrofi aerobi, tulpini identificate pe medii selective de SS-agar

Reducerea numrului de heterotrofi patogeni (Fig. 7.3b) a fost de 7 % pentru coliformi

Fig. 7. 5 Reprezentarea grafic a variaiei cu timpul de expunere a numrului de heterotrofi aerobi

7.4. Numrul total de ageni patogeni identificai n urma tratamentelor cu ultrasunete a

7.5. Numrul total de ageni patogeni identificai n urma pasteurizrii

Tratamentele de pasteurizare, ultrasunete i microunde discutate anterior au fost

Eficiena tratamentului cu substane chimice privind inhibarea creterii (efect

Tratamentul cu ultraviolete aplicat nmolului de epurare stabilizat anaerob a crescut

Numar de unda (cm )

Numar de unda (cm )

Principalele benzi de absorbie FTIR (cm-1) al fiecrei tulpini

Numar de unda (cm )

Numar de unda (cm-1)

1000 1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700

Numar de unda (cm-1)

Numar de unda (cm )

Numar de unda (cm-1)

Numar de unda (cm-1)

Numar de unda (cm-1)

Se observ c n spectrele pentru tulpinile izolate n domeniul 900-1530 cm-1 nu se

Capitolul 8. REZULTATELE TESTELOR DE ECOTOXICITATE ALE

a. Ansamblu de celule aflate n diviziune (40X)

b. Puni i cromozomi expulzai

d. Ana-telofaza cu cromozom expulzat

i. Profaz i ana-telofaz (control)

Reprezentarea grafic a procentului fazelor diviziunilor mitotice pentru fiecare variant

Fig. 8. 4 Reprezentarea grafic a aberaiilor cromozomiale exprimat n procente pentru fiecare

Aa cum s-a menionat, s-au identificat la unele variante experimentale cu nmol de

Valoarea concentraiei pentru care se observ o cretere cu 50% a It la plantulele de

n concluzie, pentru cazul 1 variabila de rspuns este influenat semnificativ statistic

Fig. 8. 10 Reprezentarea grafic a efectului indus de concentraie aplicat nmolului de epurare

Concentraia de nmol stabilizat anaerob are un efect de stimulare pentru parametrul de

Fig. 8. 11 Reprezentarea grafic a efectului indus de concentraie aplicat nmolului de epurare

De asemenea, tipul tratamentului aplicat nmolului (p = 0,5590) i concentraia (p =

Concluzii: O modelare statistic de tip DOE (Design Experimental) asupra datelor

sintetizat n plantulele de gru. Concentraia intervine n cazul proceselor germinative (efect

Fig. 8. 15 Variaia coninutului de flavonoizi (quercitina) (mg/g) msurat la toate variantele

La o concentraie mic (25%) tratamentul cu pasteurizare medie i cel cu ultraviolete timp de

Ierarhia tratamentelor prezentat n ordinea descreterii gradului de toxicitate al

n cazul tratamentului cu ultrasunete (Fig. 8.27) suprafaa frondelor se mrete de la

Expunerea suplimentar la ultraviolete a nmolului de epurare stabilizat anaerob (Fig.

Pentru tratamentul cu CaO (Fig.8.34) se observ un maxim la concentraia de 50 mg/L

Cromul este un microelement esenial ntr-o anumit doz pentru creterea i

Efectul asupra randamentului de extracie a Cu

Fig. 8. 26 Dependena randamentului de fitoextracie al Cu n funcie de tipul de tratament

Efectul nesemnificativ al variabilei Concentraia nmolului de epurare stabilizat

Fig. 8. 27 Dependena randamentului de fitoextracie al Cu de concentraia nmolului (g/L)

n ceea ce privete comportamentul speciei Lemna minor L. fa de Cu prezent n

Din analiza efectului variabilei Tipul de tratament asupra randamentului de extracie al

Concluzia studiului privind capacitatea de fitoextracie a acestui metal din nmolul de

Din analiza efectului variabilei Concentraia nmolului de epurare stabilizat anaerob