Sunteți pe pagina 1din 28

Terapia Genic

Genele
Se gsesc pe cromozomi
Cum se obtine o proteina:

ADNARN Proteine
Proteinele asigur marea majoritate a functiilor vitale
Cand sunt modificate cauzeaza disfunctii ale proteinelor
Dc exista o mutatie intr-o gena, codonul se va schimba,
aminoacidul codificat va fi altul; structura
tridimensionala schimbata va altera functia proteinei.

Imaginea unui cromozom

http://www.accessexcellence.org/RC/VL/GG/genes.html

Ce este terapia genic

Este o tehnic de corectare a


defectelor genice responsabile de
apatitia bolilor. Exist patru abordri:
1. Inserarea unei gene normale in vederea
compensarii unei gene nefuncionale.
2. Inlocuirea unei gene anormale pentru o
gena normala
3. O gena anormala reparata selectiv prin
mutaie invers
4. Schimbarea reglarii intre genele pereche.

Inceputul
Din 1980, cercetatorii au inceput
sa utilizeze terapia genica.
Au inserat gene umane in celulele
bacteriene.
Celula bacteriana a transcris i a
tradus informaiile ntr -o protein
Proteina a fost reintrodusa in
celulele umane

Primul caz
Prima terapie genica a fost realizata/aplicata in
14 Septembrie 1990.
Ashanti De Silva a fost tratata pentru SCID
imunodeficienta severa combinata

Medicii au indepartat celulele albe din sange , au


introdus gena lips n leucocite/WBC si le-au readus
in fluxul sangvin
Sistemul ei imunitar a fost consolidat
A functionat numai cteva luni

Cum functioneaza
Un vector elibereaza gena terapeutica n celula
int a unui pacient
Celulele int au fost infectate cu vectorul viral
Materialul genetic al vectorului este inserat n
celula int
Proteinele functionale sunt create din gena
terapeutica in vederea aducerii celulei la
starea normal

Imagine

http://encarta.msn.com/media_461561269/Gene_Therapy.html

Virusurile
Replicarea prin inserarea ADN-ului lor
ntr-o celul gazd
Terapia genica se poate folosi pentru
a introduce gene care codifica o
anumita caracteristica a unei
proteine
Patru tipuri diferite

Retrovirusurile
S-au creat copii de ADN dc din ARN-ul genomic
Retrovirusul trece prin reverstranscriere folosind
reverstranscriptaza i ARN-ul

Genomul viral dc se integreaza in genomul uman


utilizand integraza
Integraza insereaza gena oriunde neavand un situs
specific de actiune
Determina mutageneza prin insertie
gena perturba codul altei gene (diviziune necontrolata a
celulelor tumorale)
vectorii utilizati sunt derivati din HIV si sunt evaluati
pentru sigurana

Adenovirusuri

Sunt cu ADN genomic si produc infectii


respiratorii, intestinale, oculare la om

ADN-ul inserat nu a fost incorporat in genom


Nu s-a replicat
Trebuie reinserate cand se divid mai multe celule
Ex. Racelile comune

Adenovirus

http://en.wikipedia.org/wiki/Gene_therapy

Virusurile adenoasociate/parvovirusurile
Virusurile adeno-asociate sunt virusuri mici cu
ADNmc care insereaza materialul genetic intr-un
anumit punct de pe cromozomul 19
Familia parvovirusurilor nu declanseaza raspuns
imun al pacientului .
Capacitatea informationala redusa
Gena este intotdeauna activa, proteina fiind
exprimata chiar si cand nu este nevoie

Virusurile adenoasociate/parvovirusurile
Tratamentul hemofiliei: un vector putator al
genei este injectat intramuscular
determinand celula musculara sa produca
Factor IX, prevenind astfel sangerarea
Study by Wilson and Kathy High
(University of Pennsylvania), pacientii nu
au nevoie de injectii cu Factor IX mai mult
de un an.

Virusurile Herpes Simplex


Virusurile cu ADNdc care infecteaza
neuronii; ex. Herpes simplex virus tip 1

http://www.ucmp.berkeley.edu/alllife/virus.html

Optiuni Non-virale

Introducerea directa a
ADN-ului terapeutic

Legarea chimica a ADN-ului


de o molecula ce se va atasa
R specifici

Dar numai in anumite


tesuturi

ADN-ul este nghiit de


membrana celular
Eficienta redusa

Necesita mult ADN

Crearea de sfere de
lipide artificiale cu
miez apos, lipozomi

Poarta ADN-ul terapeutic


prin membrana

Incercarea de a introduce un
cromozom 47 alturi de
ceilali 46
Ar putea transporta o mulime
de informatii
Dar cum sa fie obtinuta/treaca
molecula mare prin
membrane?

Status actual
FDA nu a aprobat nici un produs de terapie genica umana
spre vnzare
Motive:
In 1999, Jesse Gelsinger de 18 ani a decedat cu insuficienta
multipla de organ la 4 zile dupa tratamentul pentru
deficienta de ornitintranscarboxilaza.
Decesul a fost declansat de respunsul imun sever la
purtatorul adenoviral
In ianuarie 2003 s-a oprit utilizarea vectorilor retrovirali
in celulele stem sangvine deoarece copiii au dezvoltat
sdr. leucemic dup un tratament de succes pentru
imunodeficiena combinat sever X-linkata

Probleme cu terapia genica


Durata scurta
Dificila integrarea rapida a ADN-ul terapeutic
n genom, iar diviziunea celulara rapida previne
terapia genica din timp
Ar fi trebuit s fie mai multe runde de terapie
Raspunsul Imun
Introducerea de noi molecule determina RI
RI exagerat cand un <infractor> intra in mod
repetat

Probleme cu terapia genica


Vectorii Virali
EA toxice, imune, inflammatorii
pot cauza boli
Afectiuni multigenice
Boli de inima , HTA, Alzheimer, artrita si
DZ-greu de tratat, deoarece sunt necesare
mai multe gene
Poate induce o tumori prin mutagenez
de inserie (dac integrarea are loc ntr-o
gena supresoare tumorale)

Esecul Terapiei Genice


Jesse Gelsinger, un pacient tratat prin terapie genica
pentru deficienta de OTC, a decedat in 1999.
La cateva ore dupa ce doctorii au inserat intr-un virus
terapeutic gena normala pentru OTC la nivel
intrahepatocitar, Jesse a dezvoltat febra mare.
Sistemul lui imun a iesit de sub control, sangele a
inceput sa coaguleze, concentratia de amoniac a
crescut, ficatul a devenit hemoragic, iar celulele albe in
numar exagerat de mare au blocat plamanii.
Aspectele legate de reglarea genica sunt intotdeauna
incerte dupa terapia genica

Esecul Terapiei Genice


Unul dintre EA ale terapiei genice este faptul
ca sistemul imun nu isi poate mentine
echilibrul dupa inserarea genei in genom.
Amplasarea unei gene n genom este
important pentru gradul de exprimare a genei
si pt reglarea ei (asa - numitul " efect de
pozitie " )

Terapia genica de succes in


Imunodeficienta Severa Combinata
Copiii cu SCI nu pot sa dezvolte un RI
adaptiv deoarece prezinta o deficient
profund a limfocitelor .
SCI este o boala recesiva X-linkata care
afecteaza numai baietii. La cealalta jumatate
de pacienti cu SCI, boala este AR cu mai
multe anomalii n sistemul imunitar

Terapia genica de succes in


Imunodeficienta Severa Combinata
O incercare anterioara de terapie genica
pentru ISC a avut succes la copiii cu ISC
cauzata de deficitul de adenozin deaminaza.
La acesti pacienti, celulele T periferice au
fost transduse cu un vector care poart gena
pentru adenozin deaminaz .

Terapia genica de succes in


Imunodeficienta severa combinata
Experimentul a fost extrem de laborios,
deoarece au fost modificate celulele mature
T periferice din snge i nu celulele stem ,
si , prin urmare, procedura trebuia s fie
repetat de mai multe ori.

Succesul Terapiei Genice intr-un trial


pentru boala Parkinson

Neurologix, o companie de biotehnologie a anuntat


faptul ca au finalizat cu succes studiul de faza I al
terapiei genice pentru boala Parkinson
Acesta a fost un studiu de 12 de pacienti, cu patru
pacienti pentru fiecare dintre cele trei doze testate.
Toate procedurile au fost efectuate sub anestezie locala
si toti cei 12 pacienti au fost externati din spital la 48 de
ore de la procedura, revenind dupa 12 luni.
Principalele obiective ale studiului in legatura cu
design-ul, siguranta si tolerabilitatea au fost indeplinite
cu succes. Nu s-au raportat EA postterapeutice

Succesul Terapiei Genice intr-un


trial pentru boala Parkinson
Procedura de transfer genic utilizand un vector
parvoviral, un virus care a fost utilizat in deplina
siguranta si in alte studii clinice de terapie genica that
has been used safely in a variety of clinical gene therapy
trials, si vehiculul care va fi folosit n toate produsele
companiei de prima generatie, inclusiv in epilepsia si
boala Huntington.
In studiul bolii Parkinson, Neurologix a folosit
procedura proprie de transfer genetic.

Descoperiri Recente
Genele intra n creier, folosind lipozomi acoperiti cu
polimer de polietilen glicol cu potential terapeutic
boala Parkinson
ARN-ul de interferenta in tratamentul bolii Huntington
siRNAs folosit pentru a degrada anumite secvente de
ARN
Proteina anormala nu se mai produce

Sunt necesari lipozomi mici care pot transporta ADN-ul


terapeutic prin porii membranei nucleare
Siclemia a fost tratata cu succes la soareci

http://www.wellesley.edu/Biology/Courses/219/Gen_news/i3_Gene_Therapy.jpg