LP. 7.

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL INFECIILOR

TRACTUSULUI RESPIRATOR SUPERIOR.
IDENTIFICAREA STREPTOCOCILOR BETA-HEMOLITICI.
I. OBIECTIVE
S cunoasc condiia microbiologic i microbiota indigen a tractusului respirator superior.
S cunoasc entitile nosologice i etiopatogenice.
S cunoasc agenii etiologici ai anginelor.
S tie cum se realizeaz diagnosticul de laborator al anginelor streptococice i identificarea
streptococilor -hemolitici.
II. CONDIIA ANATOMO-HISTOLOGIC A TRACTUSULUI RESPIRATOR SUPERIOR
Tractusul respirator superior (TRS): orificii nazale (narine), caviti nazale, nazofaringe (cu
cavitile conecte sinusurile paranazale, urechea medie i antrul mastoidian), orofaringe, laringele
superior.
Epiteliu stratificat nekeratinizat acoper cavitatea bucal, orofaringele i criptele amigdaliene.
Epiteliu de tip respirator (epiteliu pseudostratificat, ciliat, dublat cu un strat de mucus) acoper
urmtoarele zone: caviti nazale, nazofaringe, sinusurile paranazale, poriunea extraosoas a
trompei lui Eustachio.
Amigdalele acumulri de esut limfatic.
III. CONDIIA MICROBIOLOGIC A TRACTUSULUI RESPIRATOR SUPERIOR (vezi
curs microbiota indigen)
Ce este microbiota indigen?
Ce este contaminarea?
Ce este colonizarea?
Cine delimiteaz zonarea organismului n steril, contaminat sau colonizat?
Care sunt zonele colonizate i ocazional contaminate?
Care sunt principalele bacterii prezente n cavitile aero-digestive superioare?
IV.

ENTITI NOSOLOGICE
RESPIRATOR SUPERIOR

CONDIII

ETIOPATOGENETICE

TRACTUS

Infeciile TRS se manifest ca: rinite (cavitatea nazal), rino-faringite (cavitatea nazal
+nazofaringe), faringite (faringe), angin/faringo-amigdalit (faringe+amigdale), epiglotit
(epiglot), laringit (laringe), sinuzit (sinusuri), otit medie (ureche medie).
V.

ANGINA AGENI ETIOLOGICI

Virusuri 70%: rinovirusuri, adenovirusuri, virusuri gripale, virusuri paragripale, herpes simplex 1,
virusul Epstein-Barr, virusul Coxsackie
Bacterii 30%: Streptococcus pyogenes, ali streptococi piogeni C, G sau B, Chlamydophila
pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae, Corynebacterium dyphtheriae, Arcanobacterium
haemolyticum, Neisseria gonorrhoeae, asociaia fuso-spirilar.

VI.

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR N ANGIN se realizeaz prin metode directe

presupune examenul microbiologic al exsudatului faringian
1

Prelevat: exsudat faringian

Examenul uzual (de rutin) al exsudatului faringian vizeaz depistarea i identificarea
streptococilor beta-hemolitici.
Recoltare exsudat faringian:
Vezi LP 6, reguli de prelevare ale produselor destinate examenului microbiologic.
Cnd recoltm? Exsudatul faringian se recolteaz nainte sau dup 3 ore de la igiena cavitii
orale (past de dini, ap de gur) sau de la ingestia de alimente.
Cum recoltm? Cu ajutorul unui tampon de vat steril, vom preleva proba de la nivelul leziunii (se
urmresc zonele cu depozite purulente, cu ulceraii, cu false membrane de la nivelul faringelui i
amigdalelor).
Transport i conservare: tamponul cu exsudat faringian trebuie prelucrat n maxim 3 ore de la
prelevare. Dac se temporizeaz prelucrarea este necesar utilizarea unui mediu de transport.
Metode rapide de diagnostic direct:
Examenul microscopic nu se realizeaz. De ce?
Detecia de antigene de grup A (Streptococcus pyogenes) direct din prelevat prin reacii antigenanticorp (latexaglutinare).
Cultivarea
Mediul de cultivare: agar-snge.
nsmnare: Se utilizeaz tehnica de nsmnare n 4 cadrane: se descarc tamponul cu exsudat
faringian n primul cadran i apoi se epuizeaz cu ansa n celelalte 3 cadrane. nepm sau
seciomm scurt mediul la sfritul fiecrui cadran (pentru a crea condiii microaerofile).
Incubare: 37C, aerob, pentru 24 ore, cu prelungire la 48 de ore dac este necesar.
Citirea culturilor: se urmrete prezena coloniilor mici, cenuiu-transparente nconjurate de o
zon larg de -hemoliz (hemoliz complet).
Identificare (vezi i schema de mai jos):
Caractere microscopice coci ovalari gram pozitivi, aezai n perechi i lanuri
Caractere de cultur colonii mici, cenuiu-transparente, nconjurate de o zon larg de hemoliz, catalaz negative
IDENTIFICAREA STREPTOCOCILOR
Streptococii (coci care aparin genului Streptococcus): coci gram pozitivi, rotunzi sau ovalari (de
regul), aezai izolat, n perechi sau n lanuri de lungime variabil; sunt bacterii pretenioase
nutritiv, facultative, cu cretere rapid.
Clasificarea streptococilor poate fi realizat dup:
1. Tipul hemolizei pe agar-snge (liza hematiilor din mediul de cultur):
a. -hemolitici (se formeaz n jurul coloniei o zon larg de hemoliz complet);
b. -hemolitici (se formeaz n jurul coloniei o zon de hemoliz incomplet);
c. -hemolitici (nehemolitici).
2. Structura polizaharidului C = clasificarea antigenic Lancefield. Pe baza acestei clasificri s-au
identificat 20 de tipuri antigenice de streptococi: A-H i K-W.
IDENTIFICAREA STREPTOCOCILOR BETA-HEMOLITICI (aparin grupurilor Lancefield
A;B;C;G)
2

Identificare prezumtiv: testul de sensibilitate la BACITRACIN i TRIMETOPRIMSULFAMETOXAZOL (cotrimoxazol sau biseptol).

Testarea sensibilitii la
BACITRACIN
COTRIMOXAZOL

Grup A
Sensibil
Rezistent

Grup B
R
R

Grup C, G
R
S

Identificarea definitiv: antigenic cu seruri specifice de grup (latex aglutinare). Streptococi de

grup A (Streptococcus pyogenes) sau B sau C sau G.
Antibiograma: Streptococcus pyogenes i-a pstrat nemodificat sensibilitatea natural la
penicilin. Antibiograma se realizeaz i se comunic doar dac pacientul este alergic la penicilin.
VII.

COMUNICAREA REZULTATELOR

Absent streptococ -hemolitic;

sau
Prezent streptococ -hemolitic prezumtiv de grup A sau non-grup A (dac am realizat doar
identificarea prezumtiv prin testul de sensibilitate la Bacitracin)
sau
Prezent streptococ -hemolitic de grup A sau grup B sau grup C sau grup G (dac am realizat
identificarea antigenic).

ALGORITM DE IDENTIFICARE A STREPTOCOCILOR BETA-HEMOLITICI

Cultivare cultura pur colonii mici, -hemolitice
Frotiu
Coci gram pozitivi
Testul catalazei
Negativ(-)
Pozitiv (+)
Streptococcus spp.
-hemolitici

-hemolitici

Staphylococcus spp.
-hemolitici

Identificare prezumtiv (vezi mai sus tabelul cu sensibilitatea la bacitracin i biseptol)

Identificare definitiv (antigenic prin reacii Ag-Ac)