Sunteți pe pagina 1din 15

Indicatorii

Sunt substante chimice care se folosesc pentru a


evidentia punctul de echivalenta ale reactiilor,punct in
care isi modifica o proprietate usor peceptibila.
Indicatorii se clasifica in functie de echilibrele de reactie
care se produc intre titrant si substanta din Solutia de
analizat.
Indicatorii sunt:
Acido-bazici
De precipitare
De complexare
Indicatorii sunt caracterizati de 2 parametri pe baza
carora sunt alesi in momentul utilizarii lor.
Intervalul de viraj(reprezinta intervalul de valori ala
ph in care se inregistreaza modificarea culorii)
Exponentul indicatorului(reprezinta ph la care
jumatate din indicatori se va transforma)

Indicatorii acido-bazici
1

Trebuie sa indeplineasca urmatoarele conditii:


Schimbarea de culoare sa fie reversibila
Schimbarea de culoare sa se produca brusc(ph
cat mai mic)
Puterea de culoare sa fie mare chiar pentru
concentratii mici de indicatori
Solubilitatea in apa astfel incat solutia sa fie
sufficient de colorata
Schimbarea de culoare sa se produca la
adaugarea unor cantitati mici de acizi sau baze
Sa fie stabili in concentratiile obisnuite de lucru
Indicatorii de ph: simpli ,micsti ,universali
Indicatorii micsti-reprezinta un amestec de mai
multi indicatori care au in schimb un singur punct
de viraj.
Indicatorii universali-reprezinta un amestec de
mai multi indicatori cu intervale de viraj
diferite,dar care acopera toata plaja de ph-uri.

Rezerva alcalina
2

Reprezinta totalitatea alcalilor pe care sangele ii


pune la dispozitia acizilor care atunci cand ajung in
torentul circulator trebuie sa fie neutralizati pentru
a nu modifica ph sangvin.
Principiul metodei
Prin adaugarea unei cantitati de acid azotic in ser
sau plasma se elibereaza o cantitate de dioxid de
carbon legat de alcali iar excesul de acid se
trateaza cu o solutie de hidroxid de sodium de
aceeasi normalitate.
Valori normale: 22-29 mili echivalenti gram /litru
Variatii patologice
valori scazute ale R.A se gasesc in acidoze
metabolice si acidoze respiratrii ,astm

Determinarea proteinelor totale prin


metoda biuret
3

Principiul metodei
Reactia biuretului se bazeaza pe formarea unor compusi
intre legatura peptidica a proteinelor si ionul de Cu din
reactivul biuret in mediul alcalin cu formarea unui
complex colorat albastru-violet.Intensitatea culorii
obtinute este direct proportional cu concentratia
proteinelor in proba de analizat.
Valoare normale: 6-8 g%
Variatii patologice
(valorori scazute)
malnutritie,malabsorbtie,maldigestie,ciroza
hepatica,peritonita
(valori crescute) diaree,deshidratare,stari
febrile,diabet insipid,tuberculoza.

Dozarea colesterolului total prin metoda


enzimatica
4

Principiul metodei
Metoda permite dozarea colesterolului total fplosind
un system enzimatic format din colesterolesteraza,colesterol-oxidaza si peroxidaza.Prin metoda
enzimatica,colesterolul este determinat
calorimetric,concentratia colesterolului fiind direct
proportional cu extinctia citita la 505 nm.
Valori normale:160-200 mg%
Variatii patologice:
Valori crescute:hipotiroidie,sindrom
nefrotic,guta,dibet zaharat,alcoholism,anorexie
nervoasa.
Valori scazute:malabsorbtie,maldigestie,carente
alimentare,afectiuni hepatice(ciroze).

Metoda de dozare enzimatica a ureei cu ureaza


5

Principiul metodei
Ureea este hidrolizata sub actiunea ureazei si este
transformata in amoniac si dioxid de carbon.In mediul
alcalin ioniide amoniu impreuna cu salicilatul si
hipocloritul de sodium formeaza un compus de culoare
verde,fotometrabil.Intensitatea culorii este direct
proportionala cu concentratia ureei.
Valori normale: sange 20-40 mg%
urina 24-30 mg%
Variatii patologice:
Valori crescute:tumori
renale,hidronefroza,insuficienta renala acuta sau
cronica
Valori scazute:insuficienta hepatica grava

Determinarea creatininei serice(metoda Jaffe)


Principiul metodei
6

Creatinin in mediul puternic alcalin reduce acidul


picric la acid picramic de culoare galben-portocalie
fotometrabil.Intensitatea culorii este direct
proportionala cu concentratia creatininei.
Valori normale: in sange: 0,6-1,1 mg %(barbati)
0,5-0,9 mg %(femei)
in urina: 1-1,5 g/24 h
Variatii patologice:
Valori crescute: insuficienta cardiaca
congestive,diabet zaharat,diabet
insipid,guta,miopatii,afectiuni hepatice.
Valori scazute:insuficienta renala cronica.

Metoda de dozare a acidului uric cu uricaza


Pricipiul metodei

Acidul uric este transformat de uricaza in alantoina si


apa oxigenata care sub actiunea peroxidazei oxidaza 2,4diclor-fenol-sulfonatul si 4-amino-antipirina formand un
derivat de chinona de culoare rosu-violet.Intensitatea
culorii derivatului obtinut este direct proportionala cu
concentratia acidului uric.Uricaza este o enzima cu
specificitate absoluta de substrat,actionand numai asupra
acidului uric.

Valori normale: in sange 3,5-7,5 mg % (barbati)


2,5-6,5 mg % (femei)
in urina: 0,25-0,8 g/24 h (adulti)
Variatii patologice: enzimopatii,guta,leziuni tubular
renale,afectiuni hepatice severe,mielom multiplu.

Determinarea lipidelor totale prin metoda cu


vanilina-acid fosforic
Principiul metodei
Sub actiunea acidului sulfuric concentrate,in prezenta
acidului fosforic si a vanilinei,lipidele serice formeaza la
cald un complex colorat in roz,fotometrabil.Intensitatea
coloratiei obtinute este direct proportionala cu
concentratia lipidelor totale din ser.
Valori normale :500-700 mg %
Variatii patologice:
Valori crescute: insuficienta
hepatica,diabet,pancreatita acuta
Valori scazute: infectii acute,anemie,malabsorbtie

Testul timol (metoda Mac Lagan)


Principiul metodei
Prin adaugarea solutiei tampon saturate de timol,la o
proba de ser apare o turbiditate in cazul in care
globulinele sunt crescute sau albuminele sunt
scazute.Turbiditatea se datoreaza aparitiei unui complex
timol-globulinic-fosfolipidic.
Valori normale: 0-4 unitati
Variatii patologice: ciroza hepatica,endocardita acuta,TBC
pulmonar,mielom multiplu,infectii virale.

Testul cu sulfat de zinc


Principiul metodei
O solutie tamponata de sulfat de zinc adaugata la o proba
de ser determina cresterea turbiditatii serului in cazul
prezentei gama-globulinelor in cantitate
crescuta.Turbiditatea aparuta se datoreaza formarii unui
complex metal gama-globuline si urme de beta-globuline.
Valori normale: 2-9 unitati turbidimetrice
Variatii fiziologice: valorile apar crescute la persoanele
varstnice (pana la 12 unitati) si scazute in primele 6 luni
de viata extrauterina.

10

Influenta temperaturii asupra activitatii enzimatice


Principiul metodei
Amilaza salivara este activa la 37 grade dar prin fierbere
se inactiveaza si nu mai are actiune hidrolitica asupra
amidonului.
Interpretarea rezultatelor
In eprubeta cu saliva nefiarta,enzima activa descompune
amidonul la maltoza,care reduce reactivul Fehling la oxid
cupros de culoare rosu caramiziu.
In eprubeta cu saliva fiarta in care amilaza din saliva a
fost distrusa prin fierbere,amidonul nefiind hidrolizat la
maltoza,aceasta nu reduce reactivul Fehling iar continutul
din eprubeta ramane albastru.

Influenta Ph asupra activitatii enzimatice


Principiul metodei
Amilaza salivara are activitatea maxima la un Ph specific
care se poate pune in evidenta prin hidroliza amidonului
intr-o gama de ph-uri realizate de sistemul tampon.
Interpretarea rezultatelor
Ph-ul optim al activitatii amilazei salivare se gaseste in
eprubeta colorata galben-roscat deoarece in aceasta
11

hidroliza amidonul a avut loc pana la maltoza si


maltodextrine.
Eprubetele colorate in albastru indica prezenta
amidonului nehidrolizat iar cele colorate in violet si brun
dovedesc o hidroliza partial pana la stadiul de dextrine.

Determinarea activitatii (TGP)prin metoda


enzimatica
Principiul metodei
Substraturile participante in reactia catalizata de TGP
sunt:L-alanina si alfa-cetoglutaratul.Piruvatul rezultat din
reactie in prezenta lactat dehidrogenazei va reactiona cu
NADH ducand la formarea NAD si L-lactat.
Valori normale: 2-16,5 unitati
Variatii patologice:
Hepatita virala acuta,hepatite cornice,ciroze,icter
mechanic
Cresterea ALAT este mult mai importanta decat
cresterea ASAT in hepatitele infectioase datorita
lezarii membranelor celulare
Cresterea ASAT este mai importanta decat cresterea
ALAT in hepatopatiile infiltrative datorita lezarii
membranelor celulare si mitocondriale.

12

Determinare activitatii (TGO) prin metoda


enzimatica
Principiul metodei
Substraturile participante in reactia catalizata de ASAT
sunt L-aspartatul si alfa-cetoglutaratul.Oxalacetatul
rezultat din reactive in prezenta malat-dehidrogenazei va
reactiona cu NADH ducand la formarea NAD si L-malat.
Variatii normale: 2-20 unitati

Variatii patologice ASAT:


Cresteri de 10-100 ori ale ASAT fata de valorile
normale se intalnesc in:infarct miocardic,hepatita
virala acuta
Cresteri moderate:hepatite cronice,dupa
traumatisme,interventii chirurgicale,anemii
hemolitice severe

13

Masurarea diurezei
Diureza este volumul de urina emis in 24 h si reprezinta
echilibrul intre pierderea de lichide si aportul exogen si
endogen de lichide.
Principiul metodei
Masurarea cntitatii de urina emisa spontan in 24 h cu
cilindru gradat
Valori normale: 1200-1500 ml (barbati)
1000-1200 ml (femei)
Variatii fiziologice: diureza variaza cu varsta,cantitatea de
lichide ingerate si starea de hidratare a organismului
Variatii patologice:
diabet insipid,diabet zaharat
cauze renale: TBC renal,pielonefrita cronica
oligurie: regim alimentar sec,transpiratie
abundenta,effort fizic crescut
anurie: hemoragii masive,avorturi septice

14

15