Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
TECNICAS HISTOLGICAS
TITULO:
CONTROL DE CALDAD Y BIOSEGURIDAD EN HISTOTECNOLOGA
TEMA:
RECONOCIMIENTO DE UN LABORATORIO DE ANATOMA PATOLGICA
TERCER SEMESTRE
1. RESUMEN
La Anatoma Patolgica estudia las alteraciones morfolgicas, tanto macro-micro y
ultramicroscpicas que se producen durante la enfermedad, y se diferencia de la patologa
general que estudia las alteraciones fisiolgicas asociadas a la enfermedad.
El laboratorio de natomia patolgica debe contar de varias arias las cuales estn
conformadas por equipos que se utilizaran en los procesos para obtener cortes histolgicos
los cuales nos servirn para realizar informes que posteriormente ayudaran a un buen
diagnostico
La estacin de inclusin de parafina es el primer paso despus de obtener la muestra a ser
procesada.
El micrtomo es un equipo automatizado encargado de producir cortes histolgicos en
micras, siendo uno de los pasos ms importantes en el procesamiento de muestras
El bao de flotacin ser el siguiente paso en donde se expender el corte obtenido del
micrtomo
Las estufas histolgicas tendrn la funcin de desparafinizar la muestra obtenida en la
estufa
Como ltimo paso es la tincin a travs de las bateras de tincin pues despus de realizar
ese proceso todo estar listo para la observacin.
La utilidad de la Anatoma Patolgica es a diferentes niveles, como el diagnstico y el
estudio de la patogenia de las lesiones: el conjunto de los procesos que conducen a la
aparicin de las lesiones, por qu se producen y sus consecuencias.
2. OBJETIVOS
2.1.Objetivos generales
2.1.1. Identificar el rea de anatoma patolgica
2.2.Objetivos especficos
2.2.1. Realizar reconocimiento del rea total requerida y distribucin para un
laboratorio de anatoma patolgica.
2.2.2. Observar los equipos y materiales necesarios en cada rea de trabajo en
un laboratorio de anatoma patolgica.
2.2.3. Clasificar cada uno de los desechos generados dentro del rea de
anatoma patolgica.
4. FUNDAMENTO TERICO
Fijacin
La fijacin es esencialmente un mtodo para la preservacin de la morfologa y
composicin qumica de la clula. Durante la fijacin, las sustancias albuminoides del
tejido pasan del estado sol, como se encuentran en vida, al de gel, cuyo contenido de agua
es menor. De esta manera, se detienen los procesos posmortem y las estructuras se
conservan con un mnimo de artificios, preparndolas para tratamientos ulteriores.
Procesamiento de tejidos
Obtencin del tejido Los tejidos se pueden obtener de diferentes formas: Biopsia
Autopsia
Fijacin En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar los
cambios post-mortem. Unos de los fijadores mas usado es el Formol al 10%
(Formaldehido) formol
Inclusin Se debe lavar el tejido para quitar exceso de fijador, luego se deshidrata y se
pasa por un lquido intermediario que es miscible con la parafina. Infiltracin En este paso
la muestra se coloca en parafina liquida, de manera que se impregne con ella. Inclusin
Aqu se forman bloques de parafina y dentro de estos bloques estn las muestras a estudiar.
Se deja enfriar para que adquiera dureza.
Corte Tallado Previo al corte, se debe tallar el bloque para el obtener secciones adecuadas
en el micrtomo. El micrtomo es un instrumento que permite obtener cortes muy
delgados de muestra (5m). micrtomo
Corte Los cortes se obtienen seriados, uno tras otro, obteniendo una cinta. Luego se echan
a un bao de flotacin para que se estiren y se rescatan con un portaobjetos, que luego se
calienta para evaporar el agua y que los cortes queden adheridos.
Tincin Las placas se tien con la tcnica de hematoxilina/eosina u otra especial. La
muestra debe desparafinarse y pasar por una serie de soluciones. Finalmente, las muestras
se deshidratan y se montan para ser vistas al microscopio.
La parafina es una sustancia de aspecto ceroso que est formada por mezclas de
hidrocarburos saturados. A temperatura ambiente es slida y su punto de fusin puede
variar entre 40 C y 70 C segn la composicin de la mezcla de hidrocarburos. As,
parafinas ms duras a temperatura ambiente tienen un punto de fusin mayor, mientras que
las ms blandas uno menor. Es recomendable una dureza mayor para incluir muestras ms
duras. Las parafinas ms usadas tienen un punto de fusin en torno a los 60 C. Podemos
tambin modificar las caractersticas de las parafinas aadiendo sustancias para variar su
dureza, viscosidad, fragilidad, etctera.
La parafina no es miscible con agua, mientras que todos los tejidos estn formados
principalmente por agua. Adems, la mayora de los fijadores son soluciones acuosas. Esto
implica que para que la parafina lquida pueda penetrar completamente en el tejido ha de
sustituirse el agua por un solvente orgnico. Esto se consigue mediante la deshidratacin
del tejido en alcoholes, normalmente etanol, de gradacin creciente hasta alcohol de 100.
Posteriormente se transfiere el tejido a un lquido que es miscible tanto con el alcohol de
100 como con la parafina, denominado sustancia intermediaria, como es el benceno,
xileno, tolueno o el xido de propileno, entre otros. Estas sustancias son normalmente
aclarantes por lo que comprobando la translucidez de la pieza podemos cerciorarnos de la
penetracin de la sustancia intermediaria en el tejido. El tiempo de incubacin de la pieza
en algunos de estos lquidos intermediarios como el tolueno o xileno no debe ser excesivo
puesto que estas sustancias endurecen la pieza y crean problemas al hacer las secciones.
Por ltimo se pasa el tejido a parafina previamente licuada en una estufa regulada a la
temperatura apropiada para dicho tipo de parafina. Se dan tres pasos por parafina lquida
para favorecer una completa sustitucin del lquido intermediario por la parafina. El tiempo
que dura dichos pasos depende de lo voltil que sea el lquido intermediario y lo grande que
sea nuestra pieza. Ser mayor cuanto menos voltil es el lquido intermediario o mayor sea
la muestra de tejido. Hay que tener en cuenta que un tiempo excesivo en parafina puede
endurecer el tejido. Tras el embebimiento completo de la muestra se vierte parafina lquida
en un molde, se introduce la muestra y se coloca segn la orientacin deseada de corte y se
deja solidificar a temperatura ambiente.
Microtoma
La posicin del microtomo en el laboratorio es importante.
Coloque el microtomo en un lugar estable, lejos de rfagas de aire, puertas y puntos
de paso. Cualquier movimiento del aire debido a los equipos de aire acondicionado
u otras causas puede hacer que el tratamiento de la seccin sea muy difcil.
Es preferible utilizar un banco ajustable en altura y una silla ergonmica.
Es muy importante que el personal no est distrado al usar el microtomo por los
riesgos de lesionarse con cuchillas extremadamente afiladas.
Al colocar los microtomos en un laboratorio debera considerarse el potencial para
interactuar con otros miembros del personal.
Es preferible tener un suelo antideslizante en las inmediaciones de los micrtomos
porque, inevitablemente, los fragmentos de parafina caern al suelo y pueden
originar
una
superficie
resbaladiza.
Muchos
laboratorios
usan
esterillas
5. PROCEDIMIENTO
5.1. Recibir la informacin sobre el rea, distribucin y elementos que deben
integrar el laboratorio de anatoma patolgica.
5.2. Observar conocer y poner en prctica la generacin y eliminacin de desechos.
5.3.Elaborar un manual de desechos en un laboratorio de anatoma patolgica.
6. TCNICA
6.1. Describiremos cada rea, cada equipo que conforman las mismas, los
protocolos utilizados en la presente practica en lo que se refiere al
reconocimiento del rea de anatoma patologa
7. OBSERVACIONES
7.1. Hemos observado cada rea en el cual se divide o debe contar un laboratorio de
anatoma patolgico iniciando con la estacin de inclusin de tejido en parafina
en donde se prepara la parafina lo cual nos permitir realizar la siguiente fase ,
este equyipo contiene tres partes calientes y una fra contiene unas casetas, que
llegan de la ASP(procesamieto de tejidos), hay que tomar en cuenta mucho la
calibracin, consta de
Este equipo consta de varias partes como la cuchilla de micrtomo que son
sumamente afilados, tenemos bloqueos o seguros para evitar accidentes,
Como siguiente equipo tenemos el bao de flotacin que tiene una superficie
externa e interna de tefln que guarda y preserva cierta temperatura, esto servir
para cuando ya tengamos los finos cortes de tejidos en donde se expandera y
despus lo pescaremos con una placa de forma rpida
8. CONCLUSIONES
8.1. Hemos identificado las reas de un laboratorio de anatoma patolgica como la
estacin de inclusin de parafina, el micrtomo, Bao de flotacin, estufas
9. RECOMENDACIONES
9.1.Utilizar las prendas o barreras de proteccin como son: mandil, guantes,
mascarillas, gorro, botas desechables, etc.
9.2. En caso de desconocimiento preguntar a los superiores sobre el funcionamiento
del equipo
9.3.Tener cuidado con la manipulacin de cada parte del equipo ya que son
sumamente peligrosos debido a sus cuchillas o algunas otras caractersticas
9.4.Tener en cuentas los seguros que cada equipo ofrece para evitar accidentes
10.ANEXOS
Anexo 1.-equipo 1
Anexo 2. Equipo 2
Ilustracin 2. Micrtomo
Anexo 3. Equipo 3
Anexo 4. Equipo 4
Anexo 5. Equipo 5
11.SITIOS WEB
11.1. http://www.leicabiosystems.com/fileadmin/img_uploads/histology_systems/
2010/Microtomy_booklet_spanish_online.pdf
11.2. http://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/18704/1/HISTOLOGIA_P2.pdf
11.3. http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/1-proceso.php
11.4. http://www.msal.gob.ar/inc/images/stories/downloads/Capacitacion/Cursos_
y_Talleres/Curso_de_anatomia_patologica/2__Obtencion_de_Muestras_y_Procesamiento_Histologia_-__Maciel__SAP_Modo_de_compatibilidad.pdf