Sunteți pe pagina 1din 10

METABOLISMUL PIRUVATULUI

Piruvatul, care se formeaz prin degradarea glicolitic a glucozei, ocup o pozie de rscruce
important n metabolismul glucozei. Metabolizarea sa ulterioar depinde de circumstanele de
moment din esutul respectiv: (# 2)
n condiii aerobe: piruvatul este degradat prin decarboxilare oxidativ la acetil-CoA, care
apoi va fi degradat total n ciclul Krebs;
n condiii anaerobe, piruvatul este redus la lactat sub aciunea lactat dehidrogenazei;
n condiii de activare a gluconeogenezei (sinteza glucozei din compui neglucidici),
piruvatul este carboxilat la oxalacetat, care apoi se va transforma n glucoz.

Decarboxilarea oxidativ a piruvatului


Are loc n mitocondrie: piruvatul format prin glicoliz este transportat din citoplasm n
mitocondrie prin cotransport cu un proton, cu ajutorul simporterului piruvat/H+ localizat n
membrana mitocondrial intern.
Decarboxilarea oxidativ a piruvatului la acetil-CoA (#3) este catalizat de un complex
multienzimatic numit piruvat dehidrogenaza (PDH), alctuit din 3 enzime i 5 coenzime. (#4)
Avantajul organizrii mai multor enzime sub form de complex const n faptul c intermediarii
metabolici sunt transferai de la o enzim la alta (produsul unei enzime devine imediat substrat
pentru enzima urmtoare), astfel nct ei nu difuzeaz n celul; aceasta duce la o cretere
semnificativ a vitezei procesului.
Componena complexului PDH este urmtoarea: (#5)
Enzima

Coenzime necesare

Vitaminele din care provin

Piruvat dehidrogenaza (E1)

tiamin pirofosfat

tiamina (vitamina B1)

Dihidrolipoil transacetilaza (E2)

acid lipoic
coenzima A
FAD
NAD+

acid lipoic
acid pantotenic
riboflavina (vitamina B2)
nicotinamida (vitamina PP)

Dihidrolipoil dehidrogenaza (E3)

Decarboxilarea oxidativ a piruvatului are loc n 5 etape: (# 6)


Piruvatul reacioneaz cu TPP legat la E1 i sufer un proces de decarboxilare, rmnnd
ataat la TPP ca derivat hidroxi-etil (E1);
Gruparea hidroxi-etil este oxidat la un acid carboxilic (grupare acetil) (E1);
- cei 2 H ndeprtai n reacie reduc legtura disulfidic a acidului lipoic la 2 grupri SH,
formndu-se acidul dihidrolipoic;
- gruparea acetil este transferat de pe TPP pe acidul lipoic legat la E2 (este legat tioesteric
la una din cele dou grupri SH) se formeaz acidul acetil-dihidrolipoic i se regenereaz TPP;
Gruparea acetil este transferat pe coenzima A, rezultnd acetil-CoA (E2);
- energia liber degajat n reacia de oxidare anterioar este utilizat pentru formarea
legturii tioesterice macroergice din molecula acetil-CoA;
Acidul lipoic este regenerat prin oxidarea acidului dihidrolipoic cu ajutorul FAD (E3);
Prin transferul echivalenilor reductori de la FADH2 la NAD+ se formeaz, n final, NADH
+ H+ (E3).
Ecuaia reaciei globale a decarboxilrii oxidative a piruvatului sub aciunea PDH:
AUTOR S.l.Dr. ELENA PETRESCU-Disciplina de
1 Biochimie

Piruvat + CoASH + NAD+ acetilCoA + NADH+H+ + CO2


Reacia este puternic exergonic (G = 8 kcal/mol) i are caracter ireversibil n condiiile
din celul.
Reglarea activitii complexului PDH (# 7)
a) Reglare alosteric acetil-CoA i NADH (produi ai reaciei) inhib E1 din complex.
b) Reglare covalent are loc prin fosforilarea/defosforilarea la un rest de serin din
componena E1, sub aciunea PDH-kinazei i a PDH-fosfatazei:
- PDH-kinaza este activat alosteric de concentraii crescute de acetil-CoA, NADH i ATP;
- PDH-fosfataza este activat de ionii de Ca2+ (n muchi) i de insulin (n esutul adipos).
Activitatea PDH este sczut atunci cnd necesarul energetic al unui esut este satisfcut
pe seama lipidelor; astfel, n condiii de depleie glucidic (ntre prnzuri i n strile de post),
esuturile gluco-independente degradeaz acizi grai ca surs de energie se formeaz cantiti
crescute de acetil-CoA, NADH i ATP, care duc la inactivarea PDH prin mecanismele descrise.
Activitatea PDH este crescut n condiii de abunden glucidic: n asemenea condiii
degradarea acizilor grai este redus scade cantitatea de acetil-CoA, NADH i ATP dispare
efectul acestora de inhibare a activitii PDH piruvatul format n cantiti mari prin degradarea
glucozei va putea fi degradat eficient la acetil-CoA, care apoi va fi antrenat spre degradare total n
ciclul Krebs.
Activarea PDH de ctre ionii de Ca2+ (ca urmare a activrii directe a PDH-fosfatazei) are
o importan particular n muchiul scheletic: creterea concentraiei Ca2+ n cursul contraciei
musculare are ca efect i activarea complexului PDH, favoriznd degradarea glucozei ca surs de
energie.
n esutul adipos, activarea PDH-fosfatazei de ctre insulin duce la activarea
complexului PDH, acesta fiind unul din modurile n care insulina exercit o influen pozitiv
asupra metabolizrii glucozei n scop energogen.

CICLUL KREBS
Ciclul Krebs (numit i ciclul acidului citric sau ciclul acizilor tricarboxilici, descris de ctre
Hans Krebs) reprezint calea de degradare oxidativ a acetil-CoA rezultat din catabolismul
glucozei, al acizilor grai i al unor aminoacizi; deci acest proces metabolic reprezint o cale final
comun pentru degradarea aerob a celor trei categorii de combustibili metabolici. .
Reaciile ciclului Krebs au loc n mitocondrie, enzimele fiind localizate n matricea
mitocondrial, libere sau ataate de membrana mitocondrial intern. (8)
1. Condensarea acetil-CoA cu oxalacetatul, cu formare de citrat
Procesul debuteaz cu o condensare aldolic ntre acetil-CoA i oxalacetat: carbonul metilic
al acetil-CoA este legat la carbonul carbonilic al oxalacetatului; intermediar se formeaz citril-CoA,
care este hidrolizat rapid la citrat i coenzima A. Reacia este catalizat de citrat sintaz.
Hidroliza intermediarului tioesteric macroergic (citril-CoA) face ca reacia s fie puternic
exergonic, deci echilibrul su este net n favoarea citratului; acest fapt este esenial pentru
funcionarea ciclului Krebs, ntruct concentraia oxalacetatului n celul este redus.
2. Transformarea citratului n izocitrat
Aconitaza catalizeaz un proces reversibil de deshidratare a citratului la cis-aconitat, urmat
de adiia apei la dubla legtur n aa fel nct se formeaz izocitratul. Dei citratul are o molecul
AUTOR S.l.Dr. ELENA PETRESCU-Disciplina de
2 Biochimie

simetric, aconitaza reacioneaz cu acesta ntr-o manier asimetric (are un situs activ asimetric),
astfel nct cei 2 C care vor fi pierdui n etapele ulterioare nu deriv din acetil-CoA, ci din
oxalacetat (abia n rundele ulterioare ale ciclului Krebs se vor elimina cei 2 C ai acetil-CoA).
3. Conversia izocitratului n -cetoglutarat
Izocitrat dehidrogenaza (ICDH) catalizeaz oxidarea izocitratului n prezen de NAD+, cu
formarea unui intermediar numit oxalo-succinat, care apoi se decarboxileaz la -cetoglutarat.
Exist dou izoenzime ale ICDH:
- ICDH - NAD+ dependent, care se gsete n mitocondrii i acioneaz n ciclul Krebs;
- ICDH - NADP+ dependent, care are localizare dubl (mitocondrial i citosolic) i care
are rol n generarea NADPH (ce va servi ca agent reductor n reacii anabolice reductive).
4. Decarboxilarea oxidativ a -cetoglutaratului la succinil-CoA
Acest proces este catalizat de -cetoglutarat dehidrogenaz (KG-DH), care este un
complex enzimatic asemntor, din punct de vedere structural i funcional, cu piruvat
dehidrogenaza (este alctuit din 3 enzime i 5 coenzime: TPP, acid lipoic, coenzima A, FAD i
NAD+). n aceast reacie, energia liber degajat n procesul de oxidare este conservat sub forma
legturii tioesterice din succinil-CoA (legtur de tip macroergic: G pentru hidroliza succinilCoA este 8,6 kcal/mol).
5. Transformarea succinil-CoA n succinat
n aceast reacie, energia eliberat prin scindarea legturii tioesterice din succinil-CoA este
utilizat pentru sinteza legturii fosfat-macroergice din GTP sau ATP. Reacia este catalizat de
succinat tiokinaza (succinil-CoA sintetaza), care are dou izoenzime:
- una specific pentru ADP (distribuit n toate esuturile);
- o alta specific pentru GDP (localizat n esuturile implicate n procesul gluconeogenezei
- ficat i rinichi - care utilizeaz GTP n una din reaciile sale).
Acesta reprezint un proces de fosforilare la nivel de substrat: energia eliberat prin
decarboxilarea oxidativ a -cetoglutaratului este conservat n legtura tioesteric a succinil-CoA,
fiind apoi utilizat pentru sinteza ATP din ADP i Pi.
GTP format n aceast reacie (sub aciunea succinat tiokinazei specifice pentru GDP) poate
ceda un fosfat ADP-ului, pentru a genera ATP, ntr-o reacie reversibil catalizat de nucleozid
difosfat kinaza: GTP + ADP
GDP + ATP.
6. Dehidrogenarea succinatului la fumarat
Succinatul se dehidrogeneaz n prezena coenzimei FAD, sub aciunea succinat
dehidrogenazei, cu formarea acidului fumaric (izomerul trans). Aceast enzim este legat de
membrana mitocondrial intern i reprezint complexul II din lanul transportorilor de electroni.
7. Hidratarea fumaratului la malat
Fumaraza (fumarat hidrataza) catalizeaz o reacie de hidratare a fumaratului; enzima are o
stereospecificitate ridicat: acioneaz numai asupra izomerului trans (acidul fumaric), nu
acioneaz asupra izomerului cis (acidul maleic).
8. Dehidrogenarea malatului la oxalacetat
Malat dehidrogenaza catalizeaz reacia de dehidrogenare, n prezen de NAD+, a
malatului, cu regenerarea oxalacetatului. n condiii standard, echilibrul reaciei este net spre
formarea malatului (G = 7,1 kcal/mol). n condiiile din celula vie, oxalacetatul este ndeprtat
continuu din reacie prin angajare n reacia citrat sintazei dintr-o nou rund a ciclului Krebs; n
consecin, concentraia oxalacetatului este meninut la valori foarte sczute, ceea ce duce la
direcionarea reaciei malat dehidrogenazei spre formarea oxalacetatului.
AUTOR S.l.Dr. ELENA PETRESCU-Disciplina de
3 Biochimie

Rezultatul net pentru o rund a ciclului Krebs:


- o molecul de acetil-CoA intr n ciclu i 2 molecule de CO2 sunt eliberate;
- o molecul de oxalacetat este utilizat pentru a forma citrat (n prima reacie a ciclului) i o
molecul de oxalacetat este regenerat (n ultima reacie) aceasta poate ncepe o nou rund de
reacii;
- n consecin, o molecul de oxalacetat poate asigura oxidarea unui numr considerabil de
molecule de acetil-CoA, ntruct se regenereaz la finalul fiecrei runde a ciclului (s-ar putea
considera c oxalacetatul are un rol catalitic n cadrul ciclului Krebs); ntr-adevr, oxalacetatul se
gsete n celul n concentraii mici, dar aceste cantiti mici de oxalacetat pot asigura degradarea
unor cantiti mari de acetil-CoA.
Ecuaia global a ciclului Krebs:
Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + ADP + Pi + 2H2O
2 CO2 + 3 (NADH+H+) + FADH2 + ATP + CoA-SH

ROLURILE CICLULUI KREBS


Ciclul Krebs are un rol central n cadrul metabolismului, care nu se limiteaz doar la
oxidarea acetil-CoA; el este un proces amfibolic, avnd caracter dublu: catabolic i anabolic.
1. Latura catabolic a ciclului Krebs const n degradarea acetil-CoA, cu generare de ATP.
(9)
Exist 4 reacii de oxidare n ciclul Krebs (3 NAD+-dependente i una FAD-dependent);
energia liber degajat n aceste reacii este conservat sub forma a 3 molecule de NADH i a unei
molecule de FADH2; aceste coenzime reduse vor transfera echivalenii reductori n lanul
respirator, cuplat cu fosforilarea ADP => sintez de ATP (3 molecule pentru fiecare molecul de
NADH i 2 molecule pentru FADH2, deci n total 11 molecule de ATP sintetizate n procesul
fosforilrii oxidative).
n reacia succinat tiokinazei se sintetizeaz 1 molecul de ATP prin fosforilare la nivel
de substrat.
Bilanul energetic global al ciclului Krebs este, deci, de 12 molecule de ATP.
2. Latura anabolic a ciclului Krebs const n faptul c unii intermediari ai si servesc ca
precursori pentru o varietate larg de produi, n cadrul unor procese de biosintez. (10) ce vor fi
discutate la capitolele specifice.
ETAPELE DEGRADRII TOTALE A GLUCOZEI
n anaerobioz, molecula de glucoz este degradat parial (pn la lactat), cu generarea a
2 molecule de ATP.
n aerobioz, glucoza este degradat total, la CO2 i H2O, cu implicarea mai multor etape:
1. Glicoliza pn la piruvat;
2. Decarboxilarea oxidativ a piruvatului la acetil-CoA;
3. Oxidarea acetil-CoA la CO2 n ciclul Krebs.
Ca urmare a desfurrii celor trei procese se genereaz ATP n dou moduri:
- prin reacii de fosforilare la nivel de substrat (dou n glicoloz i una n ciclul Krebs);
- n reaciile de dehidrogenare din cadrul celor trei etape are loc conservarea energiei
eliberate sub forma coenzimelor reduse NADH i FADH2; acestea se vor reoxida n lanul
respirator, ducnd la sintez de ATP n procesul fosforilrii oxidative.
Bilanul energetic al degradrii totale, aerobe, a moleculei de glucoz: (11)
AUTOR S.l.Dr. ELENA PETRESCU-Disciplina de
4 Biochimie

1. Glucoz piruvat (glicoliza):


- reaciile de fosforilare la nivel de substrat 2 ATP
- reacia gliceraldehid-3-P dehidrogenazei: 2 x NADH 2 x 3 ATP = 6 ATP n procesul
fosforilrii oxidative
=> bilan al glicolizei desfurate n condiii aerobe: 2 + 6 = 8 ATP.
2. Piruvat acetil-CoA (reacia piruvat dehidrogenazei):
- 2 x NADH 2 x 3 ATP = 6 ATP n procesul fosforilrii oxidative.
3. Acetil-CoA 2 CO2 (ciclul Krebs):
- 2 x 12 ATP = 24 ATP.
Total: 8 + 6 + 24 = 38 ATP.
Realiznd o comparaie ntre bilanul energetic al degradrii anaerobe a glucozei, prin
glicoliz la lactat (2 ATP) i bilanul degradrii totale aerobe (38 ATP), se observ c degradarea
aerob permite eliberarea ntregii cantiti de energie liber coninut n molecula de glucoz i
conservarea acesteia sub form de ATP, deci are o eficien energetic mult mai mare n comparaie
cu degradarea anaerob, care elibereaz doar aproximativ 5% din energia moleculei de glucoz.
Ca o concluzie, n celule exist dou ci de sintez a ATP-ului:
n condiii aerobe, cea mai mare parte a ATP-ului se produce n procesul fosforilrii
oxidative: aceasta este calea major, d.p.d.v. cantitativ, de sintez a ATP-ului n celul;
n condiii anaerobe, fosforilarea oxidativ nu poate avea loc singura posibilitate de
generare a ATP-ului este fosforilarea la nivel de substrat (deci aceast cale, minor d.p.d.v.
cantitativ, dobndete un rol major n condiii de anaerobioz).
REACII ANAPLEROTICE (12)
Sunt reacii care au rolul de a aproviziona ciclul Krebs cu intermediari care au fost
ndeprtai din acest proces pentru reacii biosintetice (n limba greac ana nseamn din nou,
iar pliro nseamn a umple, a completa). n condiii normale, ntre procesele care ndeprteaz
unii compui din ciclul Krebs i cele care reintroduc aceti compui napoi n ciclu exist un
echilibru, astfel nct concentraiile intermediarilor din aceast cale metabolic rmn relativ
constante. Depleia unora din intermediarii ciclului Krebs nu ar mai permite funcionarea sa optim.
1. Piruvat carboxilaza (PC) catalizeaz principala reacie anaplerotic, ce duce la generarea
de oxalacetat necesar pentru angajarea acetil-CoA spre degradare n ciclul Krebs. (13)
Reacia de carboxilare a piruvatului se realizeaz cu participarea biotinei (o vitamin
hidrosolubil) n calitate de coenzim. Piruvat carboxilaza este activat alosteric de acetil-CoA
(enzima are o activitate foarte redus n absena acestui modulator); astfel, pe msur ce acetil-CoA
se formeaz prin catabolismul glucozei sau al acizilor grai, ea asigur automat propria sa degradare
n ciclul Krebs prin formarea de oxalacetat.
2. Malic enzima catalizeaz carboxilarea reductiv a piruvatului, n prezen de NADPH, cu
formare de malat. (13)
Atunci cnd se desfoar de la malat spre piruvat, reacia genereaz NADPH, care este
donor de echivaleni reductori pentru reacii de biosintez reductiv.
3. Oxidarea glutamatului sub aciunea glutamat dehidrogenazei (GDH) duce la formarea
de -cetoglutarat.

AUTOR S.l.Dr. ELENA PETRESCU-Disciplina de


5 Biochimie

REGLAREA CICLULUI KREBS


Viteza de desfurare a ciclului acizilor tricarboxilici depinde de urmtorii factori: (#10)
1. Disponibilitatea de substrate: acetil-CoA i oxalacetat.
Atunci cnd, n urma degradrii glucozei (sau a altor substrate energogene), se formeaz
cantiti mari de acetil-CoA, activitatea ciclului Krebs va fi crescut. Acetil-CoA are i rolul de
activator alosteric al piruvat carboxilazei, ce catalizeaz principala reacie anaplerotic, n care se
formeaz oxalacetatul necesar pentru angajarea acetil-CoA n ciclul Krebs.
2. Disponibilitatea de NAD+ (n forma oxidat), necesar n trei din cele patru reacii de
dehidrogenare din cadrul ciclului.
Meninerea unei cantiti adecvate de NAD+ depinde de reoxidarea NADH (format n cele
trei reacii de dehidrogenare) n lanul respirator; viteza de desfurare a lanului respirator depinde
de disponibilitatea de ADP, deci de starea energetic a celulei:
- stare energetic joas (tradus prin [ATP] i [ADP] ) disponibilitatea mare de ADP
va duce la creterea vitezei fosforilrii oxidative accelerarea oxidrii NADH n lanul respirator
=> creterea cantitii de NAD+ n forma oxidat aceasta va permite creterea vitezei ciclului
Krebs;
- stare energetic nalt (tradus prin [ATP] i [ADP] ) scderea disponibilitii ADP
va duce la scderea vitezei fosforilrii oxidative ncetinirea oxidrii NADH n lanul respirator
=> cantitii de NAD+ n forma oxidat scderea vitezei ciclului Krebs.
Aadar, viteza de desfurare a ciclului Krebs este strns corelat cu viteza lanului
respirator i a fosforilrii oxidative.
3. Activitatea celor trei enzime care catalizeaz reaciile exergonice din cadrul ciclului
Krebs: citrat sintaza, izocitrat dehidrogenaza, -cetoglutarat dehidrogenaza.
Enzima

Modulatori pozitivi

Citrat sintaza

ADP

Izocitrat dehidrogenaza

ADP

-cetoglutarat dehidrogenaza

Modulatori negativi
ATP
NADH
Citrat
ATP
NADH
NADH
Succinil-CoA

a) Citrat sintaza - este modulat alosteric:


- pozitiv de ctre ADP;
- negativ de ctre ATP, NADH i citrat (produs al reaciei).
b) Izocitrat dehidrogenaza - este cel mai important punct de control al ciclului acizilor
tricarboxilici (etapa limitant de vitez). Aceast enzim cheie este modulat alosteric:
- pozitiv de ctre ADP;
- negativ de ctre ATP i NADH.
c) -cetoglutarat dehidrogenaza - este inhibat alosteric de ctre NADH i succinil-CoA
(produs al reaciei).
Existena unor cantiti mari de ATP n celul semnific satisfacerea necesitilor energetice
ale celulei; ATP-ul determin scderea vitezei de desfurare a ciclului Krebs prin inhibarea
alosteric a dou dintre enzimele supuse controlului metabolic.
AUTOR S.l.Dr. ELENA PETRESCU-Disciplina de
6 Biochimie

Concentraii mari de ADP n celul semnific depleia rezervelor de ATP; ADP-ul


determin accelerarea ciclului Krebs prin activarea a dou dintre enzime, n felul acesta genernduse noi cantiti de ATP.
Acumularea de NADH (ca urmare a scderii reoxidrii sale n lanul respirator) duce la
inhibarea activitii celor trei enzime reglatorii.
Acumularea de citrat (produs de reacie al citrat sintazei) i de succinil-CoA (produs de
reacie al -cetoglutarat dehidrogenazei) determin inhibiia feed-back a celor dou enzime.
Ca o concluzie, principalii factori care regleaz viteza de desfurare a ciclului Krebs sunt
rapoartele [NADH]/[NAD+] i [ATP]/[ADP], care reflect starea energetic a celulei:
- o stare energetic nalt este asociat cu valori crescute ale celor dou rapoarte, care
determin ncetinirea ciclului Krebs, ducnd la diminuarea produciei de ATP;
- o stare energetic joas este asociat cu valori sczute ale celor dou rapoarte, care
determin accelerarea ciclului Krebs, ducnd la refacerea rezevelor de ATP ale celulei.(14)
Aceast modalitate de reglare se ncadreaz n mecanismul general de corelare a ritmului
degradrii combustibililor metabolici cu ritmul utilizrii ATP ca surs de energie.

SISTEME DE TRANSPORT AL ECHIVALENILOR REDUCTORI


DIN CITOSOL N MITOCONDRIE
n condiii aerobe, NADH-ul format n reacia gliceraldehid-3-P dehidrogenazei din
glicoliz (proces citosolic) este reoxidat n lanul respirator mitocondrial. n acest scop, NADH
trebuie s treac din citoplasm n mitocondrie, ns membrana mitocondrial intern este
impermeabil pentru NADH. Din acest motiv, sunt necesare sisteme de transport al echivalenilor
reductori din NADH citosolic spre matricea mitocondrial pe o cale indirect, cu ajutorul aanumitelor navete.
Funcionarea acestor sisteme de transfer se bazeaz pe existena unor dehidrogenaze cu
localizare dubl, citosolic i mitocondrial.(15,16)
1. Naveta malatului:
- NADH reduce oxalacetatul la malat sub aciunea malat dehidrogenazei (MDH) citosolice;
- malatul este transportat n mitocondrie cu ajutorul transportorului malat/-cetoglutarat;
- n matrice, malatul este oxidat la oxalacetat, echivalenii reductori fiind transferai pe
NAD+ sub aciunea MDH mitocondriale NADH format va fi oxidat n lanul respirator
generarea a 3 molecule de ATP;
- oxalacetatul se ntoarce n citosol sub form de aspartat (format printr-o reacie de
transaminare).
2. Naveta glicerol-fosfatului:
- NADH reduce dihidroxiaceton-fosfatul la glicerol-3-P sub aciunea glicerol-3-P
dehidrogenazei citosolice (NAD+-dependent);
- o glicerol-3-P dehidrogenaz (FAD-dependent) legat de faa extern a membranei
mitocondriale interne transfer echivalenii reductori de pe glicerol-3-P pe FAD, cu formare de
FADH2; ulterior acetia sunt transferai pe coenzima Q din lanul respirator, n final generndu-se 2
molecule de ATP.

AUTOR S.l.Dr. ELENA PETRESCU-Disciplina de


7 Biochimie

CALEA PENTOZ-FOSFAILOR
Calea pentoz-fosfailor (numit i untul hexoz-monofosfailor) este o cale de metabolizare a
glucozei care constituie o alternativ la degradarea acestui compus prin glicoliz. n majoritatea
esuturilor, soarta principal a glucozo-6-fosfatului este degradarea prin glicoliz la piruvat, urmat
de degradarea n continuare a acestuia, cu generare de ATP. n unele esuturi, are o importan
particular metabolizarea glucozei pe calea pentoz-fosfailor, care are roluri complet diferite de cele
ale glicolizei.
Acest proces are loc n citoplasm i cuprinde 2 faze:
faza oxidativ (ireversibil)
faza neoxidativ (reversibil).
I. Faza oxidativ (transformarea hexoz-P n pentoz-P) (17)
ncepe cu o reacie de dehidrogenare a glucozo-6-fosfatului n prezen de NADP+, cu
formare de 6-fosfo-gluconolacton i NADPH + H+, sub aciunea catalitic a glucozo-6-fosfat
dehidrogenazei. Glucono-lactonaza catalizeaz apoi hidroliza lactonei, cu formare de acid 6-fosfogluconic.
Urmeaz o nou dehidrogenare NADP+-dependent urmat imediat de decarboxilare, ntr-o
reacie catalizat de 6-P-gluconat dehidrogenaza, cu generarea unei noi molecule de NADPH + H+
i a unei pentoze: ribuloz-5-fosfat.
Ribulozo-5-P se poate transforma n alte dou pentoze prin dou reacii de izomerizare: (18)
- prin epimerizare sub aciunea fosfopentoz-epimeraze se transform n xiluloz-5-P (care
conine o inversiune la C3);
- printr-o izomerizare cetoz-aldoz sub aciunea fosfopentoz-izomerazei se tranform n
riboz-5-P.
Ecuaia global a primei etape a cii pentoz-fosfailor este:
Glucoz-6-P + 2 NADP+ + H2O
Riboz-5-P + CO2 + 2 NADPH + 2 H+
II. Faza neoxidativ (transformarea pentoz-P n hexoz-P) (19)
n aceast faz au loc o serie de rearanjri ale scheletelor de C ale pentozelor fosforilate
formate n prima etap, care vor realiza reciclarea pentoz-fosfailor la hexoz-fosfai, permind
astfel oxidarea continu a glucozo-6-P.
Produii fazei neoxidative a untului pentoz-fosfailor, fructozo-6-P i gliceraldehida-3-P,
pot urma n continuare dou ci: (20)
- prin parcurgerea ctorva etape din gluconeogenez, se pot transforma n glucoz-6-P,
aceasta putndu-se angaja din nou n faza oxidativ a cii pentoz-P;
- prin angajare n procesul glicolizei, cei doi compui sunt degradai la piruvat sau lactat.
Bilanul global al celor dou faze ale cii pentoz-fosfailor const n degradarea a 3
molecule de glucoz-6-P la dou molecule de fructoz-6-P i o molecul de gliceraldehid-3-P.
Multiplicnd cu 2, se ajunge la urmtoarea ecuaie global (avnd n vedere c una din cele
dou molecule de gliceraldehid-3-P se poate izomeriza la dihidroxiaceton-P, iar cele dou trioze
formeaz mpreun o molecul de fructoz-1,6-P2, care apoi se transform n fructoz-6-P): (#8)
6 G-6-P + 12 NADP+ + 7 H2O

5 F-6-P + 6 CO2 + 12 NADPH + 12 H+ + Pi


5 G-6-P

Bilanul net const, deci, n oxidarea total a unei molecule de glucoz-6-P la 6 CO2:
AUTOR S.l.Dr. ELENA PETRESCU-Disciplina de
8 Biochimie

Glucoz-6-P + 12 NADP+ + 7 H2O

6 CO2 + 12 NADPH + 12 H+ + Pi

IMPORTANA CII PENTOZ-FOSFAILOR


Calea pentoz-fosfailor nu prezint importan din punct de vedere energetic, ci rolurile sale
constau n producerea a doi compui cu roluri eseniale n celule: NADPH i riboz-5-fosfat.
1. Producerea de NADPH - utilizat ca donor de echivaleni reductori pentru urmtoarele
scopuri:
Procesele de biosintez reductiv: biosinteza de acizi grai, colesterol, hormoni steroizi;
astfel, untul este activ n esuturile n care au loc asemenea procese: ficat, esut adipos, glanda
mamar n lactaie, glandele corticosuprarenale i gonade.
Detoxifierea xenobioticelor (substane strine organismului: medicamente sau substane
toxice) la nivel hepatic. Acest proces presupune, ntr-o prim etap, hidroxilarea compuilor
respectivi sub aciunea unui sistem monooxigenazic, cu participarea oxigenului molecular, a
NADPH i a citocomului P450:
RH + O2 + NADPH + H+ ROH + NADP+ + H2O
Reducerea glutationului oxidat, cu meninerea n celul a unor rezerve adecvate de glutation
redus (GSH, un tripeptid: -glutamil-cisteinil-glicina); reacia este catalizat de glutation reductaz.
La rndul su, GSH este implicat n descompunerea peroxidului de hidrogen sub aciunea glutation
peroxidazei (enzim ce necesit seleniu n calitate de cofactor). H2O2 este un agent oxidant
puternic, care poate ataca membranele celulare, ducnd la lezarea acestora. Contracarnd aciunea
peroxidului de hidrogen, GSH este unul din componentele importante ale echipamentului de aprare
anti-oxidant al celulelor, avnd efect protector asupra membranelor celulare. (21)
Calea pentoz-P are o importan particular n eritrocit, unde reprezint singura surs de
NADPH (n alte esuturi mai exist alte dou posibiliti de sintez a NADPH: reacia malicenzimei i reacia izocitrat dehidrogenazei NADP+-dependente).
n cazul unui deficit genetic al glucozo-6-P dehidrogenazei, scade generarea de NADPH n
eritrocit, ceea ce afecteaz negativ activitatea glutation reductazei i duce la scderea rezervelor de
glutation redus.

Ca urmare, scade capacitatea de descompunere a peroxidului de hidrogen, iar acumularea


acestuia determin lezarea oxidativ a membranei plasmatice a eritrocitului (hemoliz); reducerea
duratei de via a hematiilor se manifest sub forma anemiei hemolitice. (22)
2. Sinteza de riboz-5-P - precursor utilizat n biosinteza de nucletide. Acestea, la rndul
lor, reprezint unitile structurale ale acizilor nucleici, intr n componena unor coenzime (NAD+,
FAD, coenzima A) i a nucleotidelor macroergice implicate n stocarea i transferul energiei libere
(ATP, GTP, UTP, CTP).

Reglarea activitii cii pentoz-fosfailor: (23)


1. Glucozo-6-P dehidrogenaza este inhibat de NADPH, produs al reaciei.
2. Insulina determin inducia celor dou dehidrogenaze NADP+-dependente care
acioneaz n faza oxidativ a untului.
Glucozo-6-P are dou posibiliti de metabolizare: glicoliza i calea pentoz-fosfailor.
Alegerea uneia sau a alteia din cele dou ci, la un moment dat, depinde de necesitile de ATP,
respectiv NADPH n acel esut:
AUTOR S.l.Dr. ELENA PETRESCU-Disciplina de
9 Biochimie

- Atunci cnd esutul folosete activ NADPH n procesele de biosintez reductiv, se


menine o concentraie ridicat a NADP+ n celul aceasta permite funcionarea optim a G-6-P
dehidrogenazei; pe de alt parte, scderea concentraiei NADPH duce la eliberarea G-6-P
dehidrogenazei de sub aciunea sa inhibitorie. Ca urmare, va crete viteza de desfurare a untului.
- Atunci cnd NADPH se formeaz mai rapid dect este utilizat, va crete n celul
concentraia NADPH acesta inhib G-6-P dehidrogenaza, ceea ce va duce la scderea vitezei de
desfurare a untului. n aceste condiii, glucozo-6-fosfatul se va angaja preponderent n procesul
glicolizei.
Modul n care se desfoar calea pentoz-fosfailor n diverse esuturi depinde de
necesitile relative de NADPH i riboz-5-P n esutul respectiv. Astfel, sunt posibile trei situaii
distincte:
n esuturile n care necesarul de NADPH i cel de riboz-5-P sunt relativ egale (cum este
ficatul) untul se poate opri la finalul fazei oxidative, izomeraza transformnd ribulozo-5-P n
riboz-5-P, iar faza neoxidativ nu se mai desfoar.
Dac necesarul de NADPH este mai mare dect necesarul de riboz-5-P (cum se ntmpl,
de exemplu, n esutul adipos) faza oxidativ este activ i produce NADPH n cele dou reacii
de dehidrogenare, iar ribozo-5-P este ndeprtat prin angajare n faza a doua a untului. Fructozo-6P i gliceraldehida-3-P formate la finalul acestei faze sunt transformate n glucoz-6-P, care intr
din nou n faza oxidativ, genernd cantiti suplimentare de NADPH;
Dac necesarul de riboz-5-P este mai mare dect cel de NADPH (ntr-un esut precum
muchiul) dei faza I a untului are activitate foarte redus, este posibil, totui, sinteza de
riboz-5-P pornind de la fructoz-6-P i gliceraldehid-3-P (care sunt obinui din glicoliz), prin
parcurgerea n sens invers a fazei neoxidative a untului (care are caracter reversibil). Ca urmare,
nu este necesar s existe o cale a pentoz-fosfailor complet funcional pentru ca un esut s poat
sintetiza riboz-5-P.

AUTOR S.l.Dr. ELENA PETRESCU-Disciplina10


de Biochimie