Sunteți pe pagina 1din 3

MVP laborator nr.

3
October 26, 2011
Sterilitatea reprezinta absenta de pe suprafata sau din interiorul unor substante
lichide, solide sau gazoase a microorganismelor vii capabile de multiplicare (bacteria,
virusuri, paraziti, fungi);notiunea nu exclude toxinele bacteriene sau substante chimice.
Sterilizarea este ansamblul de metode prin care se realizeaza omorarea sau
indepartarea microorganismelor vii de pe suprafata sau din interiorul substratului lichidian,
solid sau gazos.

Cerinte ale unei sterilizari corecte


1. Alegerea metodei de sterilizari optime cea mai ieftina; cea mai rapida ;cea care sa
conserve proprietatile materialului respectiv.
2. Alegerea aparatului corespunzator din punct de vedere al performantei tehnice,
dar si a costurilor economice.
3. Alegerea agentului sterilizant actiune bactericida in conditii date
4. Curatarea riguroasa a materialelor inainte de sterilizare pt a reduce cat mai mult
incarcatura microbiana a acestuia.
5. Controlul sterilizarii
6. Pastrarea materialelor sterilizate in dulapuri inchise etans, curate, uscate, in
ambalajul in care s-a efectuat sterilizarea.

Clasificarea metodelor de sterilizare


I.
Sterilizarea prin caldura
a) Prin caldura uscata
Incalzirea pana la incandescenta omoara bacteriile prin carbonizare. Se foloseste
pt instrumentarul metalic din laborator:

Ansa bacteriologica se tine in degetele 1, 2, 3 ale mainii drepte, ca pe un


creion; ansa contaminata se introduce initial in baza flacarii becului Bunsen si se mentine
cateva secunde, apoi se introduce in mijlocul flacarii, pana ce flacara devine incandescent;
se fac miscari de pendulare ptr a incalzi pana la incandescent tot firul de nichelina al
ansei.
Utilizarea aerului cald in etuve termoreglabile cuptoare Poupinel = un cuptor
paralelipipedic, cu pereti dublii, unde circula aerul cald; in partea inferioara se afla
sistemul de incalzire cu curent electric sau combustibil gazos; in interior se afla rafturi de
metal unde se vor aseza materialele si un sistem de ventilare pt uniformizarea aerului
cald; in peretele superior se afla un termometru cu jumatatea superioara la exterior.
Sterilizarea corecta = 170o -180o C 1 ora
Se deschide usa; se aseaza materialul pe raft la distanta intre ele si fata de pereti;
se inchide usa; se deschide sursa si cand temperatura ajunge la 170 o 180o C
Se foloseste la sticlarie; instrumente metalice netaioase; pulberi anorganice; unele
substante uleioase.
Controlul parametrilor; se examineaza hartia si vata de ambalaj (sa fie ingalbenite);
daca sunt arse = contin gudroane cu proprietati bactericide.
OBS: usa se deschide doar dupa racier; deschiderea imediata = spargerea sticlariei,
datorita variatiunii bruste de caldura.
b) Prin caldura umeda incalzirea la autoclav (cazan metalic, cilindric, acoperit cu un
invelis de fonta si are un capac masiv de bronz, inchis cu buloane si etanseizat cu o
garnitura de azbest si cauciuc; pe circumferinta are un manometru; un robinet de apa;
robinet de vapori; o palnie; tub de nivel si o supapa de siguranta; in partea inferioara se
afla sursa de caldura; in interior se gasesc cosuri (galeti) metalice in care se pun

MVP laborator nr.3


October 26, 2011
materialele sterilizate; se introduce apa distilata prin palnie, urmarindu-se tubul de nivel,
robinetul de apa fiind deschis; se inchide capacul strangand buloanele riguros; robinetul
de vapori se lasa deschis; se porneste sursa de caldura, incep sa iasa vapori intermittent
prin robinetul de vapori; in acest moment, robinetul se inchide; se urmareste cresterea
presiunii (1-1,5 atm) care corespunde unei temperaturi de 120 o C timp de 30 minute; se
inchide sursa, se lasa sa se raceasca, urmarindu-se manometrul; cand acesta se afla la 0,
se deschide robinetul de vapori; cand numai ies vapori, se deschide capacul.
Se sterilizeaza material textile, substante inflamabile, galeti de infecte.
Controlul parametrilor (pres -> temperatura + durata); folosirea martorilor biologici
= suspensii de spori bacterieni la care se cunosc temperature de distrugere sic ea de
germinare = Stearotest 120 contine un material de cultura violet unde se afla spori de
Bacillus stearotermophyllus; fiolele se introduce printre materialele de sterilizat si se scot
la sfarsitul sterilizarii; martorii se introduce in baie de apa la 56 o c 24 h.
Daca lichidul este violet, => sterilizarea este corecta; daca lichidul este tulbure sau
galben, sterilizarea este incorecta, adica sporii au fost viabili si au germinat.
Martorii chimici sunt fiole cu substante chimice care au temperature de topire
apropiata de temperatura autoclavului: ac benzoic = 121 o C; sulf sublimatul = 119o C. daca
temperatura s-a atins, martorul isi schimba culoarea la final.
II.
Sterilizarea cu substante chimice pentru materiale care nu rezista la caldura
a) Substante gazoase in industrie pt medicamente, pulberi, uleiuri, instrumentar de
unica folosinta.
Metoda necesita incinte special si asigurarea unor conditii stricte de
temperatura, umiditate si temperatura: ex: oxid de etilena; formaldehida, bromura de
metil;
b) Substante lichide sterilizare prin imersie = pt instrumentar metalic; intr-un
recipient se scufunda complet instrumentul, se acopera cu un capac etans si se respecta
perioada; obiectul se foloseste imediat; alcool etilic 70 o C, alcool propilic 45oC, compusi
halogenati, oxigenati
III.
Filtrarea sterilizanta nu ucide bacteriile, ci doar le indeparteaza. Se folosesc
filter cu porozitati cunoscute din diverse materiale. Lichidul rezultat dupa filtrare se poate
insamanta pe medii de cultura pt verificarea sterilitatii. Pt lichidele biologice, solutii
injectabile, medii de cultura, lichide la nivel industrial.
IV.
Sterilizarea cu radiatii este f scumpa, folosita in conditii industriale si situatii
exceptionale. Se folosesc radiatii gama de cobalt sau fascicule de electroni.
OBS: flambarea nu este o metoda de sterilizare, ci o masura de protectie
suplimentara folosita pt materiale deja sterilizate. Consta in trecerea obiectului prin
flacara becului Bunsen pt lame, pipete din sticla, gura unor recipiente din sticla.

Metode de reducere a incarcaturii microbiene


I.

Pasteurizarea consta in incalzirea unor alimente lichide la o anumita temperatura,


un anumit interval de timp.
a) Joasa 60-65 oC 30 minute
b) Medie 70-75o C 10-20 minute
c) Inalta 85-90o C 5-6 minute
II.
Ultrapasteurizarea consta in injectarea brusca a unor vapori supraincalziti la 150 o C
intr-un lichid aflat in curgere turbulent (lapte).

MVP laborator nr.3


October 26, 2011
III.
Tyndalizarea = incalzirea repetata 3 zile successive la 56 o 100oC in conserve si pt
mediile de cultura bogate in albumina.
IV.
Fierberea este optima cu apa distilata in care se adauga borax sau carbon de
sodium 2%, pt cresterea punctului de fierbere al apei.
V.
Lampa bactericida pt aerul din incapere se realizeaza fara personae in incapere
sau cu ochelari speciali; poate produce arsuri.

Examenul coproparazitologic
Identificarea elementelor parazitare in materiile fecale; inainte de aceasta
examinare sunt necesare urmatoarele precautii:
Pacientul nu trebuie sa consume minim 3 zile, alimente cu celuloza sau samburi.
Sa nu consume medicamente opace sau colorate si uleioase.
Metode:
1. Directe efectuarea unor preparate native (intre lama si lamela) cu ser
fiziologic si solutie Lugol. Cele doua tipuri de preparat sunt complementare. Preparatul cu
ser fiziologic e util pt evidentierea trofozolitilor, care nu sunt ucisi de aceasta substanta.
Preparatul cu solutie Lugol este iodo-iodurata, utila pt chisturile de protozoare si oua de
helminti, deoarece coloreaza in brun, nuclei. Se amesteca circular.
Metode de concentrare prin flotare solutie cu afinitate specifica mare astfel incat
elementele parazitare sa pluteasca la suprafata lichidului. Ex: metoda willis hung.
Intr-un cristalizor se pun 20 ml NaCl solutie suprasaturata si 2 gr materii fecale. Se
omogenizeaza, apoi cu o pensa se aseaza o lamela pe suprafata lichidului, care se lasa sa
pluteasca 30 minute. Apoi cu pensa, lamela se aplica pe o lama => preparatul native pt
microscop.
Metode prin sedimentare folosite pt oua grele de paraziti. Ex:metoda Ritchie/formoleter.
Intr-o eprubeta 10 ml NaCl si 10 gr materii fecale. Amestecul se filtreaza prin 2
straturi de tifon apoi se centrifugheaza la 1500 rpm timp de un minut. Se inlatura
supernatantul. Peste sediment se pun 10 ml formol 10% si se lasa 5 min la temperatura
camerei. Apoi se mai pun 3 ml eter, se centrifugheaza la 1500 rpm timp de 2 minute =>
stratificare in 4 straturi.
Stratificarea in 4 straturi si sedimentul e un prep native din care se pract metode
speciale cultivarea pe med loeffler amibe, amprenta anala oxiuri si cultiv pe carbine la
strongiloides si anchilostomae