Explorați Cărți electronice
Categorii
Explorați Cărți audio
Categorii
Explorați Reviste
Categorii
Explorați Documente
Categorii
TEMA PROIECTULUI:
DETERMINAREA VITAMINEI C PRIN METODA SPECTROFOTOMETRIC UV
Student:
One (Vilijencova) Andriana
MasterAn:I;Specializare:S.P.C.C.P.A
Coordonator:
Conf./ Dr: Muntean Edward
Cuprins:
Capitolul I.............................................................................................................................3
1.1
Introducere..............................................................................................................3
1.2
1.3
Proprietati fizice......................................................................................................4
1.4
Surse naturale..........................................................................................................5
1.5
Metode de obtinere.................................................................................................7
1.6
Capitolul II..........................................................................................................................10
2.1
Metode de analiza.................................................................................................10
2.2
Bibliografie:........................................................................................................................14
Capitolul I
1.1 Introducere
L-acid ascorbic (vitamina C), reprezint un antioxidant de exceptie ce contribuie activ la
frnarea proceselor degenerative din organism. Facnd parte din grupa vitaminelor hidrosolubile
(solubile in apa), acidul ascorbic se elimina n cantitati mari din organism. L-enantiomerul
acidului ascorbic se mai numete i vitamina C (numele de "ascorbic"vine de la proprietatea sa de
a preveni i vindeca scorbutul).
Vitamina C se poate prezenta sub forma de izomeri optici (R,S), datorita faptului c are n
structur un atom de carbon asimetric. Forma activa biologic a acidului ascorbic face parte din
seria L. Enantiomerul D este lipsit de semnificaie fiziologic.
Activitatea vitaminic a acidului ascorbic este determinat de prezena gruprii en-dolice
specifice, forma biologic activ fiind cea n care gruprile en-dolice sunt libere pentru a trece
reversibil n grupe cetonice.
Vitamina C, acidul ascorbic, este un acid organic cu proprieti antioxidante, implicat ntro serie de procese care se desfoar n celulele vii. n organismul uman vitamina C deine un rol
complex i important; protejeaz compuii biologic activi de degradri oxidative, ntrete
sistemul imunitar, stimuleaz procesele de biosintez a colagenului, hormonilor steroidici i a
unor neurotransmitori. Doza de 10 mg/zi previne avitaminoza C, ns raia zilnic recomandat
pentru un adult este de 60 mg. Lipsa vitaminei C din organism conduce la scorbut, denumit i
boala marinarilor, caracterizat prin gingivite (gingii cavernoase i inflamate), paradontoze,
pierderea dinilor, vase de snge fragile, neelastice, inflamarea articulaiilor i anemie.
1. Plante
Cantitatea de vitamina C din alimente provenite din plante depinde de:
condiiile solului
condiiile de pstrare
Urmtorul tabel arat abundena relativ a vitaminei C n plante crude. Cantitatea este
exprimat n mg la 100 grame de fruct sau legum:
1.5
Metode
de
obtinere
La nivel
sunt
aplicate
procedee,
industrial,
dou
anume:
biosinteza
cuplat cu
transformarea
chimic
(procedeul
Reichstein)
fermentaia,
dou
stadii.
Procedeul
Reichstein este
utilizat de
firmele
Takeda,
La
BASF,
Roche
const
transformarea
sorbitolului, obinut din glucoz, n sorboz, cu ajutorul unor bacterii (Acetobacter suboxidans,
Bacterium xylinum, Erwinia sp., Corynebacterium sp.), urmat de sinteza chimic a acidului
diaceton-gluconic i, n final, a acidului 2-ceto-gluconic. Acesta este transformat n vitamina C, n
mediu acid.
Obinerea vitaminei C prin fermentaie: prin acest procedeu, glucoza este transformat
direct n acid 2,5-diceto-gluconic, cu ajutorul unor tulpini mutante de Erwinia sp. Din acidul 2,5diceto-gluconic este biosintetizat, apoi acidul 2-ceto-gluconic, sub aciunea tulpinilor de
Corynebacterium sp. n 1989, n SUA, a fost elaborat procedeul de obinere a acidului 2-cetogluconic prin fermentaie ntr-un singur stadiu, utilizndu-se culturi mutante de Erwinia herbicola
pe substrat de glucoz, dar cu o productivitate inferioar procedeelor prezentate anterior. Acidul
2-ceto-gluconic, obinut prin fermentaia ntr-una sau dou stadii, este transformat chimic, n
final, n vitamina C, similar procedeului Reichstein. ns, indiferent de procedeul utilizat,
7
Acidul ascorbic se obine prin extracie din diferite materii prime vegetale, prin sintez
chimic, prin biosintez sau prin procedee combinate de sintez chimic i biosintez. Indiferent
de metoda de obinere, separarea i purificarea necesit numeroase etape, care implic consumuri
ridicate de materiale i energie. Soluia final din care trebuie extras acidul ascorbic conine
numeroase produse secundare, cel mai important dintre acestea fiind acidul 2-cetogluconic. n
ciuda faptului c fiecare etap a procesului decurge cu randamente de 90%, conversia global
glucozei n acid ascorbic nu depete 60%.
Capitolul II
2.1 Metode de analiza
Pentru determinarea acidului ascorbic din diferite tipuri de probe, au fost sugerate multe
tehnici analitice, toate bazndu-se pe caracterul reductor al analitului. Cromatografia lichid de
nalt performan (HPLC), metode spectrofotometrice, instrumente de electroforez capilar,
metode titrimetrice bazate pe titrare cu soluie oxidat (diclorofenol indofenol, iodat de potasiu
sau bromat de potasiu), metode biologice, electrochimice, fluorimetrice sau amperometrice,
bazate pe biosenzori, toate utilizate pentru determinarea vitaminei C.
Cu toate acestea, majoritatea prezint limitri n utilizare (unele sunt costisitoare, unele
necesit o pregtire special sau nu sunt suficient de sensibile i selective). Este dificil s alegi o
singur metod pentru a determina coninutul total al vitaminei C din produse alimentare, probe
biologice i farmaceutice, deoarece fiecare prob are propriile ei caracteristici i proprieti
specifice. Anumite metode sunt disponibile pentru a determina acidul ascoribic, dar foarte puine
din acestea sunt folosite pentru determinarea ambelor forme: acid ascorbic i acid
dehidroascorbic. Acest lucru se datoreaz faptului c cele 2 forme ale vitaminei C , acidul
ascorbic i forma sa oxidat ( acidul dehidroascorbic) posed proprieti chimice, optice i
electrochimice diferite. Cea mai cunoscut metod pentru determinarea coninutului total de
vitamina C din probele de alimente, este 2,4- dinitrofenil hidrazina (DNPH) (Riemschneider i
colab., 1976). Aceasta este o metod simplificat pentru determinarea simultan a acidului
ascorbic si a acidului dehiroascorbic; reacia de cuplare a colorantului 2,4-dinitrofenil hidrazina
cu vitamina C, urmat apoi de determinarea spectrofotometric.
Detecia electrochimic reprezint o metod alternativ atractiv pentru detecia speciilor
electroactive, datorita faptului c prezint o serie de avantaje, cum ar fi: usurin n manipulare,
miniaturizare, prezint o sensibilitate ridicat si un cost sczut. Detecia electrochimic poate fi
cuplat cu cromatografia lichid de nalt performan pentru a asigura o sensibilitate mare a
speciilor electroactive.
10
2.2
de metoda HPCL ( care are avantajul unei specificiti avansate, dar implic operaii relativ
laborioase), spectrofotometria UV, prezint avantajul unei execuii simple,directe i extrem de
sensibile.
Ca orice metoda, aceasta prezint i dezavantaje cum ar fi interferena ingredienilor.
Instrumente:
1. spectrofotometru
Shimadzu(model
UV-
1601):
Reacticvi:
acid acetic 5%
metafosforic 10%
soluie de tiouree 10%
soluie2,4-dinitrohidrazin
acid sulfuric 85%
soluie standard vitamina C ( acid ascorbic)
Pregtirea probei:
11
Reacii:
Acidul ascorbic este oxidat la acid dehidroascorbic prin aciunea apei de brom
Acidul L-dihidroascorbic reacioneaz cu 2,4-difenilhidrazina i produce o osazon care,
tratat cu H2SO4 formeaz o soluie de culoare roie.
Curba de calibrare:
Este construit prin reprezentarea grafic a concentraiei fa de absorbia corespunztoare:
12
13
Bibliografie:
1. http://ro.wikipedia.org/wiki/Acid_ascorbic
2. Constantin Banu Manualul inginerului din industra alimentara. Ed.
3.
4.
5.
6.
7.
Tehnica,Bucuresti,1998
http://www.scribd.com/doc/168821926/Determinarea-Vit-C
http://www.banglajol.info/index.php/BJSIR/article/viewFile/749/789
http://www.scritube.com/stiinta/chimie/Lucrare-de-disertaie-Dozarea-a2338722.php
http://euri.ro/2009/07/e300-acidul-ascorbic-vitamina-c/
http://www.mdpi.com/1424-8220/8/11/7097/pdf
14