Curs 4 CACT

Mecanismul de aciune al cisplatinului (continuare)

Acest rezultat conduce la ideea c PGMM joac un rol important n
activitatea cisplatinului de distrugere a celulelor, efect care poate fi
deasemenea operaional n celulele mamiferelor.
Exist dou ipoteze privind rolul PGMM n manifestarea citotoxicitii
cisplatinului. Prima presupune c ADN-ul modificat cu speciile platinei
deturneaz proteinele de la situsurile normale de legare ca factori de
transcripie i aceasta conduce la moartea celulei. A doua ipotez
sugereaz c proteinelor celulare ecraneaz aducii cu platin fa de
reparare care are loc ca urmare cu vitez mai mic dect cea normal
(Fig. 1). Cele dou mecanisme pot aciona simultan.

Fig. 1. Intercalarea restului de fenilalanin din PGMM n partea hidrofob

a zonei cu platina legat la dou baze guanin
Aducii platinai ai ADN-ului care nu sunt reparai n celule determin
apoptoza (moartea programat a celulei), care n final conduce la digestia
ADN-ului de ctre enzimele endonucleaze.
De ce celulele normale nu sunt distruse de cisplatin? Sunt i acestea, dar
enzimele reparatorii n celulele normale probabil pot decupa platina i
corecta zona distrus. Ca urmare selectivitatea combinaiilor complexe
ale platinei n atacarea celulelor tumorale comparativ cu celulele normale
se datoreaz faptului c celulele tumorale sunt deficitare n mecanisme de
reparare ale ADN-ului.

Rezistena celulelor tumorale la tratamentul cu cisplatin

Dezvoltarea rezistenei celulare dup tratament prelungit cu cisplatin
poate fi o problem clinic. Cele mai importante mecanisme de
rezisten sunt:
(i) viteza mic de transport de-a lungul membranei celulare deoarece
platina este pompat n afara celulei de ctre o glicoprotein
transmembranar. Aceasta face ca gradul de acumulare al speciilor cu
platin, n celul, s fie mic;
(ii) formarea de aduci nereactivi cu liganzii tiolici de tipul glutationului
i metalotioneineinei;
Este cunoscut faptul c Pt(II) formeaz legturi puternice cu liganzii cu
atom donor-S cu meniunea c legturile de tip Pt-tiolat (resturi de Cys
din GSH sau MT) sunt mai stabile comparativ cu cele de tip Pt-S
tioeteric (Met). Ca urmare medicamentele cu platin n componen sunt
inactivate in celule prin coordinare la atomul de S de tip tiolat al cisteinei
din glutation, care este abundent (concentraii millimolare n celule) i
metalotionein. n plus i histidina N 3(His) poate fi de asemenea un situs
de legare al platinei la proteine.
(iii) repararea ADN-ului distrus de ctre enzimele care decupeaz i
repar.
Toxicitatea cisplatinului
Toxicitatea cisplatinului este asociat cu viteza mare de hidroliz care
permite apoi, prin substituirea moleculelor de ap, interacia cu ali
bioliganzi nainte de a ajunge la ADN-ul int.
Toxicitatea se manifesta prin afectarea rinichilor datorit inhibrii
enzimatice prin legarea platinei la gruprile tiolice ale acestor specii. De
aceea se recomand administrarea unor combinaii cu sulf ca
dietilditiocarbamat de sodiu, tiouree i chiar diuretice pentru a mpiedica
aceast interacie.

CH3CH2
N
CH3CH2

C
SNa

Dietilditiomalonatul de sodiu
O prezentare simplificat a modului de aciune al medicamentelor pe baz
de platina asupra celulelor este prezentat n Figura 2.

Rezistenta
Apoptoza si moartea
celulei
Rezistenta
Inactivare

Reduce gradul de patrundere

al platinei in celula

GSH MT

Pt

Aduct protejat fata

de reparare

Nereparare

Pt
Rezistenta
Activare

Aduct cu ADN
Combinatie complexa a
platinei activa

Medicament cu platina

Decupare
Reparare

Rezistenta

Hidroliza

Fig. 3. Situsurile implicate n interacia cisplatinului cu celula i

mecanismul de rezisten
Strategii noi de obinere a speciilor antitumorale cu platin
Dup ce s-a stabilit eficacitatea i profilul toxicologic al analogilor din
generaia a doua s-au sintetizat i studiat mai muli analogi din generaia a
treia. Dup reducerea toxicitii prin intermediul medicamentelor din
generaia a doua (carboplatin, oxaliplatin), apariia rezistenei ncruciate
i faptul c nici unul dintre aceste medicamente nu se poate administra pe
cale oral a condus la cercetri pentru aceast generaie de medicamente.
Combinaiile complexe ale platinei care prezint moduri de legare la
ADN distincte i diferite de cisplatin ar putea prezenta activitate
antitumoral mai bun pe liniile celulare rezistente la cisplatin.
S-au studiat din acest punct de vedere combinaii cu liganzi aminici
diferii, o molecul de amoniac i o amin organic, pornindu-se de la
ideea c liganzi aminici diferii pot conduce la o interacie diferit cu
AND-ul.
Pentru combinaii complexe de tipul cis-[Pt(NH3)2AmCl] (unde Am este
un derivat de piridin, pirimidin, guanin sau anilin) s-a evideniat
activitate fa de S 180 la oareci.
Din acest categorie de compui face parte picoplatinul.

Cl

H3N
Pt
N

Cl
CH3

Picoplatinul este o combinaie complex a Pt(II) cu liganzi micti de tip

amoniac i 2-metilpiridin (picolin)]. n cazul cisplatinului reaciile de
substituie cu tiolii se desfoar printr-un mecanism asociativ.
A

Cl

Cl

+Y
Pt
A

Pt
A

Cl

A
Cl

Pt
Cl

Cl
A

Pt
A

Cl
Pt
A

Cl

Cl
Cl

Impedimentele sterice induse prin nlocuirea unei molecule de amoniac

cu piridin substituit cu metil transform acest mecanism dintr-unul
asociativ ntr-unul disociativ i acesta face ca viteza de substituie s fie
de aproximativ cinci ori mai mic comparativ cu cisplatinul ceea ce
conduce astfel la un timp mai mare n care medicamentul ajunge la
ADN-ul int.
Testele s-au efectuat pe un set de linii celulare ovariene sensibile la
combinaii ale platinei i care prezentau toate mecanismele de dobndire
a rezistenei la cisplatin. Studiile au artat c picoplatinul are activitate
similar cu cisplatinul pe aceste linii celulare i nu genereaz
nefrotoxicitate. Interesant este i faptul c picoplatinul este deasemenea
biodisponibil pentru administrare oral.
Picoplatinul se afl acum n teste clinice pentru tratamentul cancerului
pulmonar, al celui colorectal i de prostat.
Pentru obinerea de combinaii complexe care s produc leziuni ale
ADN-ului mai rezistente la mecanismele reparatorii naturale i care s
aib eficien mai mare n lupta mpotriva tumorilor rezistente la alte
tratamente s-au studiat i izomerii trans ai speciilor cu platin(II) precum
i speciile polinucleare.
Analogul trans al cisplatinului, trans-diammindicloroplatina(II)
(transplatinul), este inactiv, inactivitate asociat cu viteza mare de

ndeprtare a leziunilor monofuncionale generate de acesta pe ADN prin

mecanismul de decupare i reparare.
Substituirea unuia sau a ambilor liganzi de tip amoniac n transplatin cu
liganzi mai voluminoi a generat specii cu citotoxicitate mrit. Liganzii
voluminoi pot ntrzia reaciile de substituie a celor doi anioni clorur
reducnd astfel reaciile nedorite ale platinei cu componentele celulare i
facilitnd interacia cu AND-ul. Liganzii nelabili din aceste combinaii
complexe se pot clasifica n trei categorii: amine plane aromatice,
alchilamine i iminoeteri.
H3CO
C
Cl

CH3
Pt

Pt
HN
H3C

Cl

NH

Cl

Cl

C
OCH3

trans-diclorobispiridin

trans-diclorobisiminoeter platina(II)

Aceti compui sunt n general mai activi comparativ cu analogii cis

mpotriva liniilor celulare reszistente la cisplatin. Recent s-a observat c
citotoxicitate semnificativ mpotriva liniilor celulare ovariene reszistente
la cisplatin pentru o serie de compui trans-Pt(II)-derivai de piperazin.
H3C

H
N

H
N
Pt 2+

N
H

N
H

CH3

Aceste combinaii complexe cationice sunt foarte solubile n ap i se

leag mai rapid la AND i interacia acestora cu proteinele celulare are
loc cu vitez mult mai mic comparativ cu cisplatinul i analogii neutrii ai
acestuia.
O alt clas de combinaii complexe ale platinei care se leag la ADN
diferit de cisplatin o reprezint cea a speciilor polinucleare. Aceti
compui conin doi, trei sau patru ioni de platin cu configuraii cis i/sau
trans iar ca puni ntre ionii de platin se folosesc n general poliamine
alifatice. Din acest categorie s-au sintetizat i caracterizat i combinaii
complexe cu formula general [{PtClm(NH 3)3-m}ndiamin] (unde m = 03,
n= 24 iar diamina este H2N(CH2)pNH2 cu p = 49).

Cl

NH2

(CH2)n

NH2

Pt

Cl

Cl

Pt

Cl

H3N

NH3

NH2

(CH2)n

NH2

Pt
H3N

Cl

Cl

Pt
Cl

Cl

NH3

2+

H3N

NH2

(CH2 )6

NH2

Pt

Pt
NH3

Cl

NH3

H3N

Cl

Aceste specii n funcie de numrul anionilor Cl interschimbabili pot s

genereze leziuni mono-, di- sau trifuncionale ale ADN-ului.
Combinaia complex reprezentativ trinuclear BBR3464, a intrat n
faza a doua a testelor clinice i prezint activitate mpotriva cancerului
pancreatic, pulmonar i a melanoamelor.
4+

Cl

H3N

NH3

(CH2 )6

NH2

Pt

Pt
H3N

NH2

NH2

(CH2 )6

Pt
NH3

NH2

NH3

H3N

Cl

BBR 3464
Faza II a testelor clinice cu BBR3464 a fost terminat n 2003 dar acestea
nu au condus la rezultate similare cu cisplatinul, probabil datorit legrii
i degradrii BBR3464 de ctre proteinele citoplasmatice.
n prezent se studiaz i alte metode de introducere a combinaiilor
complexe tri- i dinucleare ale platinei n celule, inclusiv utilizarea de
lipozomi i anticorpi.
nc din perioada de cutare a analogilor cisplatinului din generaia a
doua au fost studiate speciile Pt(IV) ca urmare a faptului c aceste specii
sunt mai stabile cinetic i ca urmare mai inerte la substituie comparativ
cu speciile Pt(II).
Iproplatinul, cu liganzi hidroxil axiali, prezint nefrotoxicitate mai
sczut comparativ cu cisplatinul, dar a avut eficacitate mai redus
comparativ cu carboplatinul n cazul testelor pe animale.
H2 OH
Cl
(CH3)2CH N
Pt
(CH3)2CH N
Cl
H2 OH

Iproplatin
6

Pentru obinerea unei specii care s se poat administra oral s-au studiat
combinaii ale Pt(IV) cu liganzi aminici diferii, o molecul de amoniac i
o amin organic n timp ce prin utilizarea unor liganzi de tip carboxilat
s-a urmrit s se mreasc lipofilicitatea.
H3N
N
H2

OCOCH3
Cl
Pt
Cl
OCOCH3

Satraplatin
S-a reuit s se obin un medicament biodisponibil pentru administrare
pe cale oral, satraplatinul, cu un ligand amoniac, unul ciclohexilamin i
cu liganzi acetat n poziiile axiale.
Aceast combinaie complex este eficient deasemenea mpotriva
tumorilor umane implantate la oareci care au gena p53 mutant. Gena
p53 este un suprimant tumoral care codific o fosfoprotein nuclear,
care mediaz rspunsul celular mpotriva stresului genotoxic inclusiv la
tratamentul cu cisplatin. Peste 60% din cancerele umane se caracterizeaz
prin nefuncionarea p53. Ca urmare, activitatea compusului mpotriva
celulelor cu p53 mutant face ca acesta s fie un medicament anticancer
foarte bun.
Compusul este solubil n ap, soluie salin i octanol (solvent utilizat
pentru determinarea lipofilicitii prin intermediul coeficientului de
repartiie) i prin administrare oral pstreaz activitatea anti-tumoral.
Din 2007, satraplatinul se afl n faza a treia a studiilor clinice pentru
cancerul de prostat.