Industria Medicamentului LP 1-4

INDUSTRIA MEDICAMENTULUI LP 1-4
ANUL V
1. Structura covalent a acizilor nucleici

1.35.1
Renaturarea termic se produce la temperaturi sub temperatura de topire, prin rcire brusc.
10.1.10 Acizii nucleici sunt polinucleotide realizate prin stabilirea de legturi van der Waals ntre nucleotidele ce se
succed n lan.
11.
Toate gruprile fosfat la pH bazic sunt ionizate i ncrcate negativ;
11.32.11 Denaturarea ADN-ului (nu) este perfect reversibil. prin restabilirea condiiilor de pH i temperatur la valori
fiziologice.
12.
Toate gruprile fosfat la pH acid sunt ionizate i ncrcate negativ;
12.29.
Denaturarea ADN-ului i e nsoit de o modificare a absorbiei la 200 nm, maxim de absorbie caracteristic
bazelor azotate libere i a celor din structura ADN-ului (la pH=7).
13.27.
La variaii mari de temperatur are loc ruperea legturilor covalente din structura ADN-ului.
14.
Legturile de hidrogen se stabilesc, invariabil, ntre o baz azotat purinic de pe o caten i alt baz purinic
de pe cealalt caten.
14.30.
Cantitatea de lumin absorbit de ADN-ul nativ dublu helicoidal este mai mic dect cea absorbit de bazele
purinice i pirimidinice izolate, acest efect hipercrom datorndu-se mascrii pariale a bazelor stivuite care
interacioneaz ntre ele.
15.
Legturile de hidrogen se stabilesc, invariabil, ntre o baz azotat pirimidinic de pe o caten i alt baz
azotat pirimidinic de pe cealalt caten.
15.16.
Adenina se leag de timin prin trei legturi de hidrogen, iar guanina de citozin prin trei legturi.
16.7. Inelele glucidice, legate prin resturi fosfat conAstituie scheletul intern al dublului helix, n timp ce bazele azotate
hidrofobe, sunt orientate spre interior i perpendicular pe axa helixului.
17.17.
Adenina se leag de timin prin dou legturi de hidrogen, iar guanina de citozin prin dou legturi.
18.
Adenina se leag de timin prin trei legturi de hidrogen, iar guanina de citozin prin dou legturi.
18.2. Gruparea 5'-OH a unui nucleotid este legat la gruparea 3'-OH a nucleotidului urmtor printr-o legtur
fosfotriesteric.
19.
19.10.
2.33.2
Adenina se leag de guanin prin dou legturi de hidrogen, iar guanina de citozin prin trei legturi.
Toate gruprile fosfat la pH= 7 sunt ionizate i ncrcate pozitiv;
Catenele, odat complet separate, nu pot reface dublul helix originar prin renaturare.
20.
Adenina se leag de citozin prin dou legturi de hidrogen, iar guanina de citozin prin trei legturi.
21.
Adenina se leag de timin prin dou legturi de hidrogen, iar guanina de timin prin trei legturi.
22.
Adenina se leag de timin prin dou legturi de hidrogen, iar guanina de adenin prin trei legturi.
23.
Adenina se leag de timin prin dou legturi de hidrogen, iar guanina de timin prin trei legturi.
25.
Cele dou catene polinucleotidice (nu) sunt identice (ci complementare), n sensul c, adeninei dintr-o caten i
va corespunde ntotdeauna timina din cealalt caten, iar guaninei-citozina.
26.
La variaii mari de pH are loc ruperea legturilor covalente din structura ADN-ului.
3.28.3
La variaii mari de pH sau de temperatur are loc ruperea legturilor covalente din structura ADN-ului.
31.
Denaturarea are ca efect previzibil hipocromicitatea, respectiv creterea capacitii de absorbie n UV la 260
nm i poate fi monitorizat urmrind modificarea absorbiei n cursul procesului.
4. Dou lanuri polinucleotidice sunt antiparalele atunci cnd unul evolueaz n direcia 5'-3', iar cellalt n direcia 3'5'.
4.24.4
Adenina se leag de timin prin dou legturi de hidrogen, iar guanina de citozin prin patru legturi.

5.
ANUL V
Numrul de baze purinice este egal cu cel de baze pirimidinice (A+C=T+G);
5.13.5
Solubilitatea ADN-ului n ap se datoreaz tocmai orientrii gruprilor fosfat spre interiorul duplexului.
6.9.6 Inelele glucidice, legate prin resturi fosfat constituie scheletul extern al dublului helix, n timp ce bazele azotate
hidrofobe, sunt orientate spre interior i paralel cu axa helixului.
7.6.7 Dou lanuri polideoxiribonucleotidice antiparalele se rsucesc helicoidal i n acelai sens n jurul unui ax
comun, formnd un dublu helix cu orientare spre dreapta.
8. Inelele glucidice, legate prin resturi fosfat constituie scheletul extern al dublului helix, n timp ce bazele azotate
hidrofobe, sunt orientate spre extern i perpendicular pe axa helixului.
8.3.8 Fiecare caten ADN are dou capete: captul 5' la care gruparea OH de la C5' este liber i captul 3' la care
gruparea OH de la C3' (nu) este angajat ntr-o legtur internucleotidic.
9.34.9
Renaturarea termic se produce la temperaturi peste temperatura de topire, prin rcire progresiv.
Acizii nucleici sunt polinucleotide realizate prin stabilirea de legturi covalente ntre nucleotidele ce se succed n lan.
Adenina se leag de timin prin dou legturi de hidrogen, iar guanina de citozin prin trei legturi.
Cantitatea de lumin absorbit de ADN-ul nativ dublu helicoidal este mai mic dect cea absorbit de bazele purinice i
pirimidinice izolate, acest efect hipocrom datorndu-se mascrii pariale a bazelor stivuite care
interacioneaz ntre ele.
Catenele, fie i complet separate, pot reface dublul helix originar prin renaturare.
Cele dou catene polinucleotidice nu sunt identice ci complementare, n sensul c, adeninei dintr-o caten i va
corespunde ntotdeauna timina din cealalt caten, iar guaninei-citozina.
Denaturarea ADN-ului este perfect reversibil prin restabilirea condiiilor de pH i temperatur la valori fiziologice.
Denaturarea ADN-ului i e nsoit de o modificare a absorbiei la 260 nm, maxim de absorbie caracteristic bazelor
azotate libere i a celor din structura ADN-ului (la pH=7).
Denaturarea are ca efect previzibil hipercromicitatea, respectiv creterea capacitii de absorbie n UV la 260 nm i poate
fi monitorizat urmrind modificarea absorbiei n cursul procesului.
Dou lanuri polideoxiribonucleotidice antiparalele se rsucesc helicoidal i n acelai sens n jurul unui ax comun,
formnd un dublu helix cu orientare spre dreapta.
Dou lanuri polinucleotidice sunt antiparalele atunci cnd unul evolueaz n direcia 5'-3', iar cellalt n direcia 3'-5'.
Fiecare caten are dou capete: captul 5' la care gruparea OH de la C5' este liber i captul 3' la care gruparea OH de
la C3' nu este angajat ntr-o legtur internucleotidic.
Gruparea 5'-OH a unui nucleotid este legata la gruparea 3'-OH a nucleotidului urmtor printr-o legtur fosfodiesteric.
Inelele glucidice, legate prin resturi fosfat constituie scheletul extern al dublului helix, n timp ce bazele azotate
ANUL V
La variaii mari de pH sau de temperatur are loc ruperea legturilor de hidrogen din structura ADN-ului.
Legturile de hidrogen se stabilesc, invariabil, ntre o baz azotat purinic de pe o caten i una azotat pirimidinic de
pe cealalt caten.
Legturile de hidrogen se stabilesc, invariabil, ntre o baz azotat purinic de pe o caten i una azotat pirimidinic de
pe cealalt caten.
Numrul de baze purinice este egal cu cel de baze pirimidinice (A+G=T+C);
Renaturarea termic se produce la temperaturi sub temperatura de topire, prin rcire progresiv.
Renaturarea termic se produce la temperaturi sub temperatura de topire, prin rcire progresiv.
Solubilitatea ADN-ului n ap se datoreaz tocmai orientrii gruprilor fosfat spre exteriorul duplexului.
Stabilitatea dublului helix e asigurat att de interaciunile hidrofobe dintre bazele azotate ct i de legturile de hidrogen
ce se stabilesc ntre bazele azotate de pe o caten i cele complementare de pe cealalt caten;
Stabilitatea dublului helix e asigurat numai de interaciunile hidrofobe dintre bazele azotate. ct i de legturile de
hidrogen ce se stabilesc ntre bazele azotate de pe o caten i cele complementare de pe cealalt caten;
Toate gruprile fosfat la pH= 7 sunt ionizate i ncrcate negativ;
2. ADN - ELECTROFOREZA n gel de agaroz

1.13.1
pH;
10.
La adaugarea soluiei care conine ADN-ul, albastrul de brom fenol se coloreaz n rou datorit schimbrii de
Loading buffer-ul conine zaharoz care va da o anumit greutate ADN-ului meninndu-l n gel;
10.15.10
Factorii care influeneaz electroforeza ADN-ului sunt: mrimea moleculei de ADN, concentraia gelului,
conformaia ADN-ului, prezena bromurii de etidium n gel, tamponul, voltajul aplicat, numrul deprobe migrate.
11.9.11 Agaroza este un polimer linear compus din reziduuri alternative de D i L-galactoz reunite prin legturi a(1-4)
i b(1-3) glicozidice;
12.6. Bromura de etidiu nu are proprieti mutagene i cancerigene, motiv pentru care se folosete curent n
laboratoarele de genetic.
13.2.
La aplicarea unui cmp electric moleculele de ADN vor migra ctre catod datorit sarcinii gruprilor fosfat.
14.
Albastrul de brom fenol permite vizualizarea probelor n gel.
14.21.
Transluminatorul folosit pentru vizualizarea probelor de ADN migrate electroforetic i tratate cu bromur de
etidiu folosete radiaii IR.
15.19.
Rata de migrare a fragmentelor de AND depinde invers proportional de voltajul aplicat.
ANUL V
16.16.
Intercalarea bromurii de etidiu, care este ncrcat negativ, ntre bazele azotate din ADN va duce la o scdere a
sarcinii electrice a ADN-ului i a ratei de migrare a complexului ADN-colorant;
17.5.
18.23.
Pentru evidenierea ADN-ului se pot folosi vaporii de bromur de etidium.

Bromura de etidiu se adaug n gel pn la o coloraie slab albastr.
19.11.
Loading buffer-ul conine glucoz care va da o anumit greutate ADN-ului meninndu-l n gel;
2.12.2
Loading buffer-ul conine fructoz care va da o anumit greutate ADN-ului meninndu-l n gel;
22. Sarcina global a moleculei de bromur de etidiu este neutr.

3. La aplicarea unui cmp electric moleculele de ADN vor migra ctre polul ncrcat negativ datorit sarcinii gruprilor
fosfat.
3.8.3
Bromura de etidiu se adaug n gel pn la o coloraie slab verde.
4.18.4
Intercalarea bromurii de etidiu, care este ncrcat pozitiv, ntre bazele azotate din ADN va duce la o scdere
a sarcinii negative a ADN-ului i o cretere a ratei de migrare a complexului ADN-colorant;
5.7.5
Sarcina global a moleculei de bromur de etidiu este negativ.
6.4.6 La aplicarea unui cmp electric moleculele de ADN vor migra datorit sarcinii pozitive a gruprilor fosfat.
7.1.7 Electroforeza este o metod simpl i eficient pentru secvenierea, identificarea i purificarea fragmentelor de
ADN de 0,5-25 Kb.
8.20.8
Vizualizarea probelor de ADN migrate electroforetic i tratate cu bromur de etidiu se face folosind un
luminator.
9.17.9
Intercalarea bromurii de etidiu, care este ncrcat pozitiv, ntre bazele azotate din ADN va duce la o cretere
a sarcinii negative a ADN-ului i a ratei de migrare a complexului ADN-colorant;
Agaroza este un polimer linear compus din reziduuri alternative de D i L-galactoz reunite prin legturi a(1-3) i b(1-4)
glicozidice;
Albastrul de brom fenol permite vizualizarea frontului de migrare n gel.
Bromura de etidiu are proprieti mutagene i cancerigene, motiv pentru care se folosete curent n laboratoarele de
genetic.
Bromura de etidiu se adaug n gel pn la o coloraie slab roz
Bromura de etidiu se adaug n gel pn la o coloraie slab roz.
Citirea probelor - Transluminator UV.
Citirea probelor - Transluminator UV.
Electroforeza este o metod simpl i eficient pentru separarea, identificarea i purificarea fragmentelor de ADN de 0,525 Kb.
Factorii care influeneaz electroforeza ADN-ului sunt: mrimea moleculei de ADN, concentraia gelului, conformaia
ADN-ului, prezena bromurii de etidium n gel, tamponul, voltajul aplicat.
Intercalarea bromurii de etidiu, care este ncrcat pozitiv, ntre bazele azotate din ADN va duce la o scdere a sarcinii
negative a ADN-ului i a ratei de migrare a complexului ADN-colorant;
La adaugarea soluiei care conine ADN-ul, albastrul de brom fenol se coloreaz n albastru datorit schimbrii de pH;
La aplicarea unui cmp electric moleculele de ADN vor migra ctre anod (polul ncrcat pozitiv) datorit sarcinii
negative a gruprilor fosfat.
ANUL V
Loading buffer-ul conine sucroz care va da o anumit greutate ADN-ului meninndu-l n gel;
Pentru evidenierea ADN-ului se poate folosi o soluie de bromur de etidium.
Rata de migrare a fragmentelor de AND depinde direct proportional de voltajul aplicat.
Sarcina global a moleculei de bromur de etidiu este pozitiv.
Sarcina global a moleculei de bromur de etidiu este pozitiv.
3. Clonarea ADN
11.1.11 Recombinarea genetic reprezint un schimb de informaie genetic ntre dou genoame avnd ca rezultat
crearea de molecule de ADN combinat.
1.36.1
Enzima este livrat de productor i pstrat n glicogen 50%.
10.
Enzimele de restricie sunt endo-deoxiribonucleaze care acioneaz asupra unei secvene specifice de ADN
dublu catenar prin hidroliza unei legturi fosfotriesterice pe cele dou catene de ADN.
10.37.10
Cantitatea de enzim de restricie trebuie s fie peste 10%.
11.
dublu catenar prin hidroliza unei legturi fosfodiesterice pe una din cele dou catene de ADN.
12.
dublu catenar prin sulfonarea unei legturi fosfodiesterice pe cele dou catene de ADN.
12.7. Plasmidul este o molecul mare de ADN circular, dublu catenar care se replic independent de cromozomul
celulei gazd.
13.34.
Enzima este livrat de productor i pstrat n glicocol 50%.
14.26.
Exist 4 clase de enzime de restricie.
15.
LIGAREA este un proces de unire a dou fragmente de ADN folosind o enzim specific numit ligaz i
susinut energetic de GTP.
15.19.
Protecia mpotriva distrugerii propriului ADN se realizeaz de ctre ADN-metiltransferaze care transfer
grupri metil la guanin i citozin.
16.8. Enzimele de restricie sunt endo-ribonucleaze care acioneaz asupra unei secvene specifice de ADN dublu
catenar prin hidroliza unei legturi fosfodiesterice pe cele dou catene de ADN.
17.
n cazul clonrii, dac ligarea celor dou fragmente de ADN nu are loc cu formarea unui plasmid
recombinat circular, atunci fragmentul de ADN introdus n bacterii va fi legat de enzimele de restricie ale gazdelor.
17.31.
Enzimele de restricie izolate din organisme diferite, dar cu secvene de recunoatere diferite se numesc
IZOSCHIZOMERI.
18.32.
Factorii de care depinde restricia sunt: enzima, tamponul, timpul, temperatura, gradul de umectare a
gelului.
19.13.
LIGAREA este un proces de clivare a dou fragmente de ADN folosind o enzim specific numit ligaz
i susinut energetic de ATP.
2.
Genomul este totalitatea genelor cuprinse n ADN-ul unei celule.
2.33.2
Dac se lucreaz cu 2 enzime care taie la temperaturi diferite se vor face restricii concomitente.

20.
Protecia mpotriva distrugerii
grupri metil la uracil i citozin.
21.
grupri metil la timin i citozin.
22.
grupri metil la adenin i guanin.
23.
grupri metil la adenin i uracil.
ANUL V
propriului ADN se realizeaz de ctre ADN-metiltransferaze care transfer

25.
27.
28.
Enzime de restricie din clasa a 2-a recunosc secvene de 40 la 60 de nucleotide.
29.
Enzime de restricie din clasa a 2-a recunosc secvene de sute de nucleotide.
3. Vectorul poate fi definit ca plasmidul sau virusul n al crui ADN se introduce un fragment de ADN strin.
3.30.3
Enzimele de restricie izolate din organisme identice, dar cu secvene de recunoatere identice se numesc
IZOSCHIZOMERI.
35.
Enzima este livrat de productor i pstrat n glicol 50%.
39.
O unitate catalitic reprezint cantitatea de enzim care catalizeaz transformarea a 1 mol substrat / secund;
4. Plasmidul este o molecul mic de ADN liniar, dublu catenar care se replic independent de cromozomul celulei
gazd.
4.24.4
Protecia mpotriva distrugerii propriului ADN se realizeaz de ctre ADN-metiltransferaze care transfer
grupri metil la adenin i timin.
40.
O unitate de enzim de restricie reprezint cantitatea de enzim care ntr-o minut diger un microgram de
ADN ntr-un amestec final de reacie de 50 L.
41.
O unitate de enzim de restricie reprezint cantitatea de enzim care ntr-o secund diger un microgram de
ADN ntr-un amestec final de reacie de 50 L.
42.
O unitate de enzim de restricie reprezint cantitatea de enzim care ntr-o or diger un miligram de ADN
ntr-un amestec final de reacie de 50 L.
44.
O unitate de enzim de restricie reprezint cantitatea de enzim care ntr-o or diger un micromol de ADN
5. Plasmidul este o molecul mic de ADN circular, monocatenar care se replic independent de cromozomul celulei
gazd.
5.18.5
Protecia mpotriva distrugerii propriului ADN se realizeaz de ctre ADN-metilrestrictaze care transfer
grupri metil la adenin i citozin.
6. Plasmidul este o molecul mic de ADN circular, dublu catenar care se replic dependent de cromozomul celulei
gazd.
6.16.6
TRANSFECIA este procedeul de introducere a ADN-ului recombinat n celulele plasmidiale.
7.14.7
LIGAREA este un proces de unire a dou fragmente de ADN folosind o enzim de restricie i susinut
energetic de ATP.
8.43.8
O unitate de enzim de restricie reprezint cantitatea de enzim care ntr-o or diger un milimol de ADN
9. Enzimele de restricie sunt endo-deoxiribonucleaze care acioneaz asupra unei secvene specifice de ADN
monoatenar prin hidroliza unei legturi fosfodiesterice pe cele dou catene de ADN.
9.38.9
O unitate enzimatic reprezint cantitatea de enzim care catalizeaz transformarea a 1 mol substrat /
secund.
Cantitatea de enzim de restricie trebuie s fie sub 10%.
Dac se lucreaz cu 2 enzime care taie la temperaturi diferite se vor face restricii separate.
Enzima este livrat de productor i pstrat n glicerol 50%.
ANUL V

Enzime de restricie din clasa a 2-a recunosc secvene de 4, 5 sau 6 nucleotide.
Enzime de restricie din clasa a 2-a recunosc secvene de 4, 5 sau 6 nucleotide.
Enzimele de restricie izolate din organisme diferite, dar cu secvene de recunoatere identice se numesc
IZOSCHIZOMERI.
Enzimele de restricie izolate din organisme diferite, dar cu secvene de recunoatere identice se numesc
IZOSCHIZOMERI.
Enzimele de restricie sunt endo-deoxiribonucleaze care acioneaz asupra unei secvene specifice de ADN dublu catenar
prin hidroliza unei legturi fosfodiesterice pe cele dou catene de ADN.
Factorii de care depinde restricia sunt: enzima, tamponul, timpul, temperatura, gradul de umectare a gelului.
GENOMUL este totalitatea genelor cuprinse n cromozomii unei celule.
n cazul clonrii, dac ligarea celor dou fragmente de ADN nu are loc cu formarea unui plasmid recombinat circular,
atunci fragmentul de ADN introdus n bacterii va fi digerat de enzimele de restricie ale gazdelor.
LIGAREA este un proces de unire a dou fragmente de ADN folosind o enzim specific numit ligaz i susinut
energetic de ATP.
energetic de ATP.
energetic de ATP.
O unitate catalitic reprezint cantitatea de enzim care catalizeaz transformarea a 1 mol substrat / secund
O unitate de enzim de restricie reprezint cantitatea de enzim care ntr-o or diger un microgram de
amestec final de reacie de 50 L.
ADN ntr-un
ADN ntr-un
ADN ntr-un
ADN ntr-un
ADN ntr-un
O unitate enzimatic reprezint cantitatea de enzim care catalizeaz transformarea a 1 mol substrat / minut;
Plasmidul circular este tiat cu una sau mai multe enzime de restricie i ligat in vitro cu un fragment de ADN strin care
conine gena de interes i care are capete compatibile.
ANUL V
Plasmidul este o molecul mic de ADN circular, dublu catenar care se replic independent de cromozomul celulei gazd.
Plasmidul poate fi tiat cu una sau mai multe enzime de restricie i ligat in vitro cu un fragment de ADN strin care
Protecia mpotriva distrugerii propriului ADN se realizeaz de ctre ADN-metiltransferaze care transfer grupri metil la
adenin i citozin.
adenin i citozin.
adenin i citozin.
adenin i citozin.
adenin i citozin.
adenin i citozin.
adenin i citozin.
Recombinarea genetic reprezint un schimb de informaie genetic ntre dou genoame avnd ca rezultat crearea de
molecule de ADN recombinat.
TRANSFECIA este procedeul de introducere a ADN-ului recombinat n celulele bacteriene.
Vectorul poate fi definit ca plasmidul sau virusul n al crui ADN se introduce un fragment de ARNm strin.
4. PCR - Polymerase chain reaction
1.40.1
10.28.10
11.
11.21.11
ADN-ul template n concentraii mari poate accelera reacia de PCR.

La sfritul reaciei de PCR probele se menin la temperatura camerei, timp nelimitat.
Amplificarea reprezint o cretere cantitativ a unui fragment de ADN primer.
Fiecare ciclu de reacie PCR are 4 etape.
12.
Amplificarea reprezint o cretere cantitativ a unui fragment de ADN retroviral.
12.14.
Extensia se face n direcia 5`- 3` de ctre ADN-ligaz care adaug nucleotidele complementare ADN-ului
matri unitate cu unitate pornind de la primer.
13.
Extensia se face n direcia 3`- 5` de ctre ADN-polimeraz care adaug nucleotidele complementare ADNului matri unitate cu unitate pornind de la primer.
13.7. PCR este o tehnic de amplificare in vivo a unor secvene specifice de ADN prin extensia simultan a celor 2
primeri complementari ai lanului de ADN.
14.1. ADN polimeraza este o enzim care sintetizeaz catena complementar a unui fragment de "ADN monocatenar
matri" n direcia 3' - 5' pornind dintr-o regiune dublucatenar.
15.
Extensia se face n direcia 5`- 3` de ctre ADN-polimeraz care adaug nucleozidele complementare ADNului matri unitate cu unitate pornind de la primer.
ANUL V
15.10.
Amplificarea reprezint o cretere calitativ a unui fragment de ADN de interes.
16.
Extensia se face n direcia 5`- 3` de ctre ADN-polimeraz care adaug nucleotidele complementare ADNului plasmidial unitate cu unitate pornind de la primer.
16.4. PCR-ul utilizeaz 3 primeri.
17.
Extensia se face n direcia 5`- 3` de ctre ADN-polimeraz care adaug nucleotidele complementare ADNului matri primer cu primer pornind de la primer.
17.38.
Polimerazele sunt inactive n absena calciului.
18.
Extensia se face n direcia 5`- 3` de ctre ADN-polimeraz care adaug nucleotidele complementare ADNului matri unitate cu unitate pornind de la dreapta.
18.34.
Pfu-polimeraza este format din dou subuniti (una renatureaz i cealalt corecteaz erorile).
19.25.
n general 250-300 de cicluri sunt suficiente pentru o amplificare optim.
2. ADN polimeraza este o enzim care sintetizeaz catena complementar a unui fragment de "ADN bicatenar matri"
n direcia 5' - 3' pornind dintr-o regiune dublucatenar.
2.39.2
Concentraiile mari de magneziu cresc fidelitatea polimerazelor.
22.
23.
27.
29.
La sfritul reaciei de PCR probele se menin la -10C, timp nelimitat.
3. ADN polimeraza este o enzim care sintetizeaz catena complementar a unui fragment de "ADN monocatenar
matri" n direcia 5' - 3' pornind dintr-o regiune monocatenar.
3.32.3
Activitatea Taq-polimerazei nu poate genera mutaii n timpul amplificrii.
31.
Taq-polimeraza (nu) are posibilitatea de a se autocorecta.
35.
Pfu-polimeraza este format din dou subuniti (una denatureaz i cealalt corecteaz erorile).
36.
Polimerazele sunt inactive n absena manganului.
4.30.4
5.
La sfritul reaciei de PCR probele se menin la 4C, timp de 12 ore.
PCR-ul utilizeaz 1 primer.
5.24.5
6. PCR-ul utilizeaz 3 primeri.

6.20.6
Primerul este un oligonucleotid complementar cu o secven adiacent regiunii care va fi amplificat
aparinnd ADN-ului plasmidial.
7.19.7
Primerul este un oligonucleotid tamplate cu o secven adiacent regiunii care va fi amplificat aparinnd
ADN-ului matri.
8. PCR este o tehnic de amplificare in vitro a unor secvene specifice de ADN prin extensia simultan a celor 3
8.37.8
Polimerazele sunt active n absena magneziului.
9. PCR este o tehnic de amplificare in vitro a unor secvene specifice de ADN prin clivarea simultan a celor 2
9.33.9
Pfu-polimeraza este format din dou subuniti (una polimerizeaz i cealalt renatureaz).
Activitatea Taq-polimerazei poate genera mutaii n timpul amplificrii.

ADN polimeraza este o enzim care sintetizeaz catena complementar a unui fragment de "ADN monocatenar matri"
ANUL V
ADN-ul template n concentraii mari poate inhiba reacia de PCR.
Amplificarea reprezint o cretere cantitativ a unui fragment de ADN de interes.
Concentraiile mari de magneziu scad fidelitatea polimerazelor.
Extensia se face n direcia 5`- 3` de ctre ADN-polimeraz care
unitate cu unitate pornind de la primer.
adaug nucleotidele complementare ADN-ului matri


La sfritul reaciei de PCR probele se menin la 4C, timp nelimitat.
PCR este o tehnic de amplificare in vitro a unor secvene specifice de ADN prin extensia simultan a celor 2 primeri
complementari ai lanului de ADN.
PCR-ul utilizeaz 2 primeri.
Pfu-polimeraza este format din dou subuniti (una polimerizeaz i cealalt corecteaz erorile).
10
ANUL V
Polimerazele sunt inactive n absena magneziului.

Primerul este un oligonucleotid complementar cu o secven adiacent regiunii care va fi amplificat aparinnd ADNului matri.
Primerul este un oligonucleotid complementar cu o secven adiacent regiunii care va fi amplificat aparinnd ADNului matri.
Taq-polimeraza nu are posibilitatea de a se autocorecta.
Tehnica PCR permite cretere a cantiti de ADN ntr-o rat de la 50 ng la 1 g.
Tehnica PCR permite cretere a cantiti de ADN ntr-o rat de la 10 mg la 1 g.
Tehnica PCR permite cretere a cantiti de ADN ntr-o rat de la 50 nmol la 1 mol.
Tehnica PCR permite cretere a cantiti de ADN ntr-o rat de la 50 L la 10 mL.
11

Industria Medicamentului LP 1-4

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Industria Medicamentului LP 1-4

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

INDUSTRIA MEDICAMENTULUI LP 1-4

1. Structura covalent a acizilor nucleici