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La tcnica de Schiff,

es una tincin que


se usa comnmente
en Histoqumica
1 Desparafinar e hidratar (xilol y decrecientes
alcoholes)

TCNICA DEL
PAS (cido
Perydico Schiff

Utiliza PAS, cido


perydico de Schiff,
es un colorante
incoloro pero que se
torna rojo estable al
contacto con los
grupos aldehdos.

2 cido perydico 0.5 % 5 min.


3 Lavar en agua .
4 Reactivo de Schiff 15- 30 min.
5 Aclarar en 3 baos de agua sulfurosa 2 min.
6 Lavar en agua corriente.
7 Deshidratar, aclarar y montaje

TECNICA

Tecnica

TINCIN DE GRAM
MODIFICADA
BROWN- BRENN

Desparafinar e hidratar al agua destilada


Tincin de Cristal Violeta por 1 minuto
Lavar en agua corriente
Aplicar lugol por 1 minuto

Es un tipo de tincin que se utiliza


para demostrar gram-negativas y
gram-positivos en el tejido

reactivos que se
utiliza

Lavar agua corriente


Decolorar con alcohol-Acetona (saca el exceso del colorante
Cristal Violeta)
Lavar en agua corriente
Tincin con Fucsina bsica durante 3 minutos.

Cristal Violeta al 1%
Lugol
Acetona
Fucsina bsica al 0,25
cido Pcrico Acetona

Lavar en agua corriente, y secar levemente la muestra.


Pasar rpidamente por 2 baos de acetona.
Pasar a la mezcla de cido Pcrico solucin acetona al 0,1%
hasta que aparezca un color rosado-amarillo en la muestra.
Pasar por 2 cambios de acetona

Desparafinar e hidratar
los cortes
cido peridico 5%, 10
min
Lavar con agua
destilada
Fucsina fenicada, 15 min
Decolorar en alcohol
cido al 50%
Lavar con agua
destilada
Hematoxilina, 10 min
Carbonato de litio,
azulamiento
Deshidratar, aclarar y
montar preparaciones
Resultados
BAAR: rojo. Ncleos:
azul semiamarillo.

TECNICA

TINCIN DE
ZIEHLNEELSEN

es una tcnica de tincin


diferencial rpida y
econmica, usada para
la identificacin de
bacterias cido-alcohol
resistentes (BAAR) en
cortes de tejido en
parafina.

Alcohol cido 1%:Acido


Clorhdrico1ml.Alcohol
ABS99ml.
Hematoxilina Acido
peridico al 5 %

Fucsina fenicada:
0,5 g .fucsina bsica
50 ml agua destilada
5 ml etanol absoluto
28,5 g.. cristales de
fenol derretidos

TCNICA DE GRIMELIUS
Se utilizan
principalmente para la
identificacin de las
clulas neuroendocrinas y
sus tumores, tambin para
la demostracin de fibras
de reticulina, melanina y
calcio
Tcnica:
1.-Desparafinar
hidratar.
2.-Solucin de Plata
58 a 60C3Hrs.
3.-Lavar en Agua.
4.-Solucin de
Hidroquinona 40
a 45C1:30Hrs.
5.-Lavar en Agua.
6.-Deshidratar, Aclarar
y Montar.

Resultados:
Grnulos Argirofilos
(formaciones de
proteina ) pardo,
Dorado o Negros..

Impregnacin:
Solucin de Plata 1%:
Nitrato de Plata al 1%...4ml.
Buffer de Acetato
(0.2mol)10ml.
Agua Bidestilada86ml
Reduccin:
Solucin de Hidroquinona.
Hidroquinona1gr.
Sulfato
de Sodio5gr.
Agua
Bidestilada100ml.

Es considerada como la
tcnica ms fiable y
prctica para detectar
amiloide y tambin se usa
para teir preparaciones
microscpicas,
especialmente en tinciones
para el citoplasma y
los eritrocitos

TECNICA
DEL ROJO
CONGO

Resultados: El
amiloide se tie
en rojo claro, y
brilla con luz
polarizada

TECNICA

1.- Cortes por congelacin 10


micras.
2.- Colocarlos en solucin de Rojo
congo al 1% en agua,- 30 min.
3.- Poner en carbonato de Litio (a
saturacin en agua)---15 seg.
4.- Lavar en alcohol de 80, hasta
que no arrastre mas colorante.
5.- Lavar en agua corriente 15 min.
6.- Teir con hematoxilina.
7.- Lavar en agua, deshidratar,
aclarar y montar.

Consisten en fibras muy finas de colgeno tipo


III, muy extendidas en el tejido conectivo.

Demuestran tanto las


fibras reticulares como
material de la
membrana basal.

Las membranas basales se


compone principalmente de
colgeno tipo IV y laminina.

Tinciones de
retculo

TECNICA

Se trata de una tcnica de impregnacin


argntica que utiliza como base fuerte el
hidrxido potsico y como agente reductor el
formol. 1- Fijacin: formalina al 10%. 2- Cortes:
en parafina, congelacin o en celoidina. 2 - 4
FORMOL AL 10%: 3min
LAVAR CON AGUA DESTILADA
CLORURO DE ORO AL 1/500: 10min
LAVAR CON AGUA DESTILADA
HIPOSULFITO SODICO AL 5%: 1min
LAVAR CON AGUA DESTILADA
PASAR POR AGUA CORRIENTE
ALCOHOL AL 96%: 2x5min
ALCOHOL AL 100%: 2x5min
XILENO Y MONTAR

XILENO: 2x10min
ALCOHOL AL 100%: 2x5min
ALCOHOL AL 96%: 2x5min
LAVAR CON AGUA CORRIENTE
PERMANGANATO POTASICO AL 1%: 2min
AGUA DESTILADA: 5min
ACIDO OXALICO AL 5%: Hasta que se decolore
LAVAR CON AGUA DESTILADA
ALUMBRE FERRICO AMONIO AL 2%: 2min
AGUA DESTILADA: 5min
SOLUCION DE PLATA AMONIACAL: 3min
LAVAR CON AGUA DESTILADA RAPIDAMENTE

TECNICA

Etanol de 50, 70, 80, 90, 96


y 100
Hematoxilina frrica de Weigert
Verde luz
Agua destilada

COMPONENTES

Tincin
tricrmica de
Masson

Se utilizan en combinacin con varios


colorantes aninicos

NCLEO
CITOPLASMA

Evaluacin del tipo y cantidad


de material extracelular
C OLGEN O

2x10 min en xileno para desparafinar


2x10 min en etanol 100
10 min en etanol 96
10 min en etanol 80
10 min en etanol 50
5 min en agua destilada
5 min en Hematoxilina frrica de Weigert (10 min si el colorante lleva ms de 5 das hecho)
5 min en agua corriente para diferenciacin.
3 min lavado en agua destilada
5 min en fucsina-escarlata.
2 min lavado en agua destilada
15 min en cido fosfomolbdico al 5% en agua destilada.
10 min en verde luz al 2 % (puede ser sustituido por azul de anilina).
Unos segundos en agua destilada.
3 min de diferenciacin con cido actico al 1% en agua destilada
Deshidratado rpido, unos segundos, en etanol de graduacin creciente: 80, 96 y 100
2x10 min en xileno
Montaje

Sim embargo la tincin de Gieson Verthoeff-van (VVG) es la ms popular porque es rpida


Las tcnicas tipo Weiger son bastantes especficas para la elastina, y son
consideradas por muchos como el mtodo de eleccin para la demostracin de
estas fibras extracelulares
Ambas tcnicas se suelen establecer en el contexto tricrmico.

TINCIN PARA FIBRAS


ELSTICAS

Hidratar
Hematoxilina de
Verhieff por 30
minutos
Lavar
Cloruro frrico al
1% una pasada
Picrofucsina una
pasada
Deshidratar con
alcohol al 50%
Aclarar con xilol
Montar

Ncleos celulares se tien de marrn a negro

PREPARACIN

Hematoxilina alcohlica
He ma t o xilin a ------------------------------------1 0 g r.
A lco h o l9 6 -------------------------------------1 0 0 ml

PROCEDIMIENTO

Solucin de Picrofucsina
Fu csin a cid a a l 1 % ----------------------------1 . 3 ml
- cid o p crico a sa tu ra ci n ---------------------- 9 .7 ml

Cloruro frrico al 10 %:
Clo ru ro f rrico ----------------------------------1 0 g r.
A g u a d e st ila d a ----------------------------------1 0 0 ml

Yoduro potsico al 10 %:
Y o d u ro p o t sico --------------------------------1 0 g r.
A g u a d e st ila d a ----------------------------------1 0 0 ml