Sunteți pe pagina 1din 260

MORFOLOGIA i

STRUCTURA
BACTERIILOR
CURSURILE 5 i 6

Bacteriile sunt microorganisme


unicelulare cu structur de tip
procariot

CARACTERELE DIFERENIALE ale


CELULELOR PROCARIOTE i EUCARIOTE

CELULE PROCARIOTE

CELULE EUCARIOTE

Organisme
cu acest tip
de
organizare

Bacterii, cianobacterii
(alge albastre-verzi)

Fungi, protozoare,
plante i animale

Perete
celular

Rigid, cu structur chimic


caracteristic.
Absent la bacteriile din clasa
Mollicutes

Rigid: chitin (fungi),


celuloz (alge verzi i
plante superioare).
Absent la celulele
animale.

CELULE PROCARIOTE

CELULE
EUCARIOTE

Nucleu

PRIMITIV (nucleoid sau


material nuclear),
nedelimitat de membran
proprie i lipsit de nucleol

TIPIC (,,adevrat)
separat de
citoplasm prin
membrana nuclear
i cu nucleol

Cromozom

UNIC=o molecul de ADN


circular, dublu catenar

1; numr constant
pentru fiecare
specie

Tipul de
diviziune
obinuit

Diviziune direct (binar,


sciziparitate)

Diviziune indirect
(mitoza) cu faze
caracteristice

CELULE
PROCARIOTE

CELULE
EUCARIOTE

nmulire sexuat Rar, prin


conjugare

Frecvent:
gamei
haploizi(meioz)
zigot diploid

Cureni
citoplasmatici

Prezeni

(,,parasexualitate)

Abseni
(excepional,
foarte slabi)

CELULE
PROCARIOTE

CELULE
EUCARIOTE

Reticul
endoplasmatic

Absent

Prezent, cu
organizare
caracteristic

Mitocondrii
Aparat Golgi

Absente

Prezente

Organe de
locomoie

Facultative: cili
(flageli) externi
sau interni

Facultative: cili
sau flageli cu
organizare
complex

Seciune schematic
printr-o celul bacterian
procariot
eucariot

Sec iune schematic


printr-o celul

Formele biologice ale


bacteriilor

Unele specii bacteriene pot exista n natur sub


dou forme biologice alternative:

celula bacterian propriu-zis =


forma vegetativ , dotat cu toate nsuirile
caracteristice speciei din care face parte i

sporul bacterian=

forma de
rezisten i de conservare a speciei n condiii
ostile, improprii vieii. Spre deosebire de celula
vegetativ biologic activ, sporul bacterian este o
form dormand caracterizat prin absena funciilor
de multiplicare i a celor biosintetice.

MORFOLOGIA
CELULEI
BACTERIENE

FORMA BACTERIILOR
Forma bacteriilor este controlat genetic, dar
este influenat de factorii de mediu
(temperatur, pH, compoziia mediului de
cultur etc.) i de vrsta culturii

Morfologia bacteriilor se apreciaz numai pe


culturi tinere (proaspete) de 18-24 ore.
.(ex: b.rujetului)

Dup forma celulei, bacteriile pot fi


grupate n patru categorii

principale

BACTERII
SFERICE=COCI

CILINDRICE=BACILI

VIBRIONI

SPIRALATE

SPIRILI

PTRATE

SPIROCHETE

Forme posibile la bacterii

1.coc sferic; 2.coc oval; 3.coc asimetric cu un pol ascuit i unul rotunjit; 4.coc
asimetric reniform; 5.form cocoid; 6.cocobacil; 7.bacil fin; 8.bacil asimetric n
form de mciuc; 9.bacil cu capetele retezate; 10.bacil cu capetele rotunjite;
11.vibrion; 12.spirochet cu spire mari; 13.spirochet cu spire mici; 14. bacterii
ptrate

MODALITILE DE GRUPARE A CELULELOR


BACTERIENE
La cele mai multe specii bacteriene, celulele fiice rezultate
n urma diviziunii se separ i rmn independente.
La unele specii, majoritatea celulelor-fiice nu se despart
timp de una sau mai multe generaii, formnd constant
grupri caracteristice cu valoare taxonomic.

Modul de grupare al bacteriilor este


determinat de:

- poziia planurilor succesive de


diviziune i
- tendina celulelor-fiice de a
rmne unite una sau mai multe generaii.

Modalitile de grupare a cocilor

Diplococul - rezult prin

diviziunea celulelor n planuri


paralele, celulele fiice rmnnd
grupate cte dou;

Streptococul (coci n
lan)- diviziuni succesive n

planuri paralele i persistena


legturilor ntre celulele-fiice pe
parcursul mai multor generaii;

Tetrada -

Sarcina -

Stafilococul - planuri

patru celule
rezultat din dou diviziuni
succesive n planuri
perpendiculare;
opt coci sub
forma a dou tetrade suprapuse,
rezultai din trei diviziuni n
planuri perpendiculare: al doilea
pe primul i al treilea pe primele
dou;
succesive de diviziune n direcii
diferite.

1.

1. Streptococcus (Diplococcus) pneumoniae.


pyogenes 3. Neisseria sp.(M.E.)
4.Enterococcus sp.

2. Streptococcus

5. Staphylococcus sp. (M.O.)


(M.E.)

6. Staphylococcus sp.

Modalitile de grupare a
BACILILOR

1.diplobacil; 2.grupare
n forma literei V;
3.streptobacil;
4.filament; 5.filament cu
citoplasm granular;
6.form ramificat;
7.grupare n palisad;
8. grupare n
ideograme chinezeti.

1.Bacillus anthracis
perfringens
2. Arcanobacterim pyogenes

3. Clostridium
4. Actinomyces sp.

BACTERII COCOIDE i COCOBACILARE


1. Listeria sp.

2. Pseudomona aeruginosa

BACTERII SPIRALATE
1. Leptospira sp. (M.E.)
ntunecat)

2. Leptospira sp. (M.O. n cmp


3. Vibrio sp.

BACTERII PTRATE

CONSTANTELE FIZICE ALE


CELULEI BACTERIENE

Dimensiunile bacteriilor variaz n funcie de specie i


se msoar n micrometri (m):
1mm=1000 m 1 m =10 mm

- lungimea = 0,3 15 m (bacteriile filamentoase ajunnd pn la 500 m)


- diametrul transversal = 0,1 1,5 m

B. mici
0,3 1,5/0,1 0,5 m
B. medii
2 3/0,5 1 m
B. mari
10 - 15/1 1,5 m

Suprafaa celulei bacteriene


- un coc cu =1 m are 3,15 m
- B. anthracis =33 m
- Brucella sp. = 0,25 m

Volumul celulei bacteriene poate fi apreciat cu


ajutorul formulelor de calcul aplicate corpurilor geometrice.

V = 0,003 m (Mycoplasma spp.) 7,068 m


(B. megatherium)

(V= 0,003 x 10 cm 7,068 x 10 cm )

STRUCTURA
CELULEI
BACTERIENE

Celula bacterin este


constituit din
coninut (citoplasma
i structurile intracitoplasmatice)

i
nveliuri

Unele specii bacteriene sunt


prevzute n plus cu

organite de micare
(cilii sau flagelii)
i/sau cu
organite de aderen
( pilii sau fimbriile)

STRUCTURA CELULEI
BACTERIENE
NVELI URILE
MEMBRANA
CITOPLASMATIC

PERETELE
CELULAR

CAPSULA,
GLICOCALIXUL

MEMBRANA CITOPLASMATIC sau membran


celular - component esenial a tuturor bacteriilor, acoper de
jur mprejur citoplasma. Membrana celular +citoplasma =
PROTOPLASTUL BACTERIAN

Examinat la M.E. , apare ca o formaiune


triplu stratificat, cu o grosime de 7,5 10
nm, constituit dintr-un strat
electronotransparent subire , delimitat de
ambele pri de cte un strat mai gros,
electronoopac.

CELULA BACTERIAN ELECTRONOMICROGRAFIE

Structura chimic a membranei celulare :


- strat dublu de fosfolipide
- proteine
- glucide (glicolipide, glicoproteine)

Semnificaia biologic (rolul) a membranei


citoplasmatice la bacterii

Excret enzimele hidrolitice (n lipsa lizozomilor, digestia este


extracelular).
Transportul transmembranar selectiv al nutrienilor i cataboliilor cu
ajutorul sistemelor de transport i a permeazelor.
Unicul sediu al enzimelor lanului respirator.
Particip la replicarea genomului n procesul de diviziune celular.
Particip la sinteza peretelui bacterian i formarea septului
transversal care separ celulele dup diviziune.
Mezozomii invaginaii ale membranei spre interiorul celulei
mresc suprafaa funcional a acesteia.

Mezozomii = invaginaii ale membranei spre interiorul


celulei

STRUCTURA CELULEI
BACTERIENE

NVELIURILE
MEMBRANA
CITOPLASMATIC

PERETELE
CELULAR

CAPSULA ,
GLICOCALIXUL

PERETELE CELULAR

Peretele nvelete protoplastul bacterian, are o


grosime de 15 30 nanometri i este rigid (cu

meninnd
astfel forma celulelor bacteriene.
excepia spirochetelor, care au perete flexibil)

Pe baza prezenei sau absenei peretelui celular i


a nsuirilor sale, G i b b s o n i M u r r a y au
propus clasificarea regnului Procaryotae n trei
subdiviziuni:
1.Mollicutes bacteriile fr perete
(micoplasmele) 2.Firmicutes bacteriile Gram
pozitive cu peretele gros.
3.Gracilicutes bacteriile Gram
negative cu peretele mai subire.

Peretele bacterian este format din:

- STRAT BAZAL =PEPTIDOGLICAN

(MUREIN) similar ca

compoziie chimic la toate


bacteriile i

- STRAT AL structurilor speciale


care difereniaz grupe mari de bacterii.

I. Structura de baz=PEPTIDOGLICANUL

Peptidoglicanul sau mureina (lat. murus = zid) este


format din macromolecule lungi de
dizaharide aminate (N-acetilglucozamin i
acid N-acetilmuramic) dispuse paralel i legate ntre
ele prin puni polipeptidice (n care dipeptidul
D-alanin-D-alanin este esenial), realiznd o reea
rezistent care ncorseteaz protoplastul.

Semnificaia biologic a
peptidoglicanului(rolul):
-protecie mecanic prin echilibrarea presiunii osmotice
mari din citoplasma bacterian (5-20 atmosfere).

CONFIGURAIA I STRUCTURA
CHIMIC A PEPTIDOGLICANULUI

Sinteza peptidoglicanului este


controlat de enzime prezente pe faa
extern a membranei citoplasmatice numite

proteine de legare a penicilinelor


(Penicilina , analog structural al D-alanin-

se fixeaz pe ele
inhibnd sinteza
peptidoglicanului).
D-alanin,

Peretele bacterian condiioneaz

prin structura sa, modul n care


se coloreaz protoplastul n coloraiile
pe care le numim difereniale :

GRAM i ZIEHL-NEELSEN

COLORAIA GRAM difereniaz bacteriile n:

GRAM pozitive-cele care rein


violetul de geniana(colorantul
Gram) -i GRAM negative - cele
care se decoloreaz sub aciunea soluiei de
alcool-aceton (pierd colorantul Gram)
recolorndu-se apoi cu

fuxin, n rou.

COLORAIA ZIHL-NEELSEN difereniaz bacteriile n:


- acidorezistente
- neacidorezistente

PERETELE BACTERIAN de tip


GRAM POZITIV

Peptidoglicanul reea tridimensional, groas


(50% din greutatea uscat a peretelui), cu ochiuri
strnse
Structurile speciale asociate peptidoglicanului
sunt:
de perete (legai de peptidoglican)
- Acizii teichoici<
de membran (a.lipoteichoici)
- Acizii teichuronici
- Polizaharide
- Proteine

Peptidoglicanul GRAM +
(structur tridimensional)
puni de tetrapeptide unite prin lanuri pentapeptidice

Semnificaia biologic structurilor


speciale GRAM +:

Acizii teichoici:
- stabilizeaz i ntresc peretele bacterian;
- leag ionii de Mg+necesari funcionrii enzimelor
membranei celulare;
- sunt antigene de suprafa pentru subtiparea
serologic a bacteriilor Gram +.
- reprezint factori de virulen prin aderena bacteriei
la celulele gazd

Acizii teichuronici

(conin acid uric i polizaharide):

- reprezint antigene de suprafa pentru subtiparea


serologic a unor Gram+ ( streptococi, lactobacili)

Polizaharidele } - antigene de
suprafa (ex.

poliz. C are specificitate de grup20 grupe


serologice la streptococi)

- factori de virulen(ex:

poliz.C cu specificitate de gr.A Ac r. imunologice ncruci ate


cu glicoproteinele cardiace)

Proteinele } - antigene de suprafa


- factori de virulen (ex:

proteina M la Streptococcus pyogenes are rol antifagocitar i de


aderen la receptorii celulari ai gazdei ; implicat n patogenia
RAA i carditei reumatismale ).

PERETELE BACTERIAN de tip


GRAM NEGATIV

Peptidoglicanul (COMPLEX PEPTIDOGLICANLIPOPROTEINE)dispus profund n reea


bidimensional, subire (15-20% din greutatea
uscat a peretelui), cu ochiuri laxe
Structurile speciale asociate peptidoglicanului
sunt:
- Membrana

extern n care predomin


lipopolizaharidele (LPS).
- molecule proteice : porinepori
proteine de transport
enzime

Peptidoglicanul GRAM
GRAM+)

( comparativ cu

Peretele celular (M.E.)


GRAM GRAM +

Lipopolizaharidele (LPS)- heteropolimeri lineari:


- Lipidul A, cu o structur similar la grupe mari de bacterii
(acidul -hidroximiristic pentru Enterobacteriaceae; acidul hidroxidecanoic pentru Pseudomonadaceae);
- Componenta polizaharidic alctuit din:
- un miez polizaharidic comun tuturor Gram (-) (Atg
Rimportant activator al complementului pe cale alternativ);
- un lan de zaharide repetate cu specificitate chimic i
antigenic - Atg

O - care mparte

speciile n

grupe serologice.
LPS=ENDOTOXINA bacteriilor G-

SPAIUL PERIPLASMIC

Este prezent ntre membrana


citoplasmatic i membrana extern a
peretelui celular Gram negativ
Conine:
- peptidoglicanul;
- enzime digestive i de inactivare
a unor antibiotice;
- proteine de legare a penicilinelor
(PLP).

PERETELE BACTERIAN de tip


ACIDOREZISTENT

Peptidoglican
Structuri speciale (60% lipide)particulariti de
colorabilitate a protoplastului:
- nu se coloreaz prin metoda Gram;
- se coloreaz la cald cu soluie de fuxin
(metoda Ziehl-Neelsen);
- rezist la decolorarea cu acizi i alcooli.

BACTERII ACIDO-ALCOOLO-REZISTENTE
(Mycobacterium spp., Nocardia spp.)

Structurile speciale asociate peptidoglicanului


la bacteriile acido-alcoolo-rezistente

Arabinogalactanul rol de
endotoxin
Acizii micolici confer
acido-rezistena (n funcie de
lungimea catenei: 70-90 atomi
de C la Mycobacterium; 40-60,
la nocardii)
Lipoarabinomananii induc:
- reacia de tip granulomatos
- metaplazierea macrofagelor
celule Langhans, celule
epiteloide.
Micozidele protejeaz
micobacteriile de enzimele
lizozomale ale macrofagelor

Semnificaia biologic a
peretelui bacterian

prin rigiditatea sa, asigur meninerea formei


celulelor bacteriene;
ndeplinete rol protector fa de factorii
nocivi de mediu, n special fa de ocul
osmotic, avnd n vedere c mediile de via
ale bacteriilor sunt hipotone n raport cu
coninutul celulei bacteriene;

prin porii si, mediaz schimbul de substane


ntre mediu i celul;
particip la procesul de cretere i diviziune
celular, urmnd membrana citoplasmatic n
formarea septurilor transversale care separ
celula-mam n cele dou celule-fiice;

conine receptori pentru bacteriofagi i


bacteriocine;
conine enzime autolitice care se activeaz n
momentul sporulrii elibernd sporul prin liza
sporangiului i n momentul germinrii,
determinnd liza nveliurilor sporale

PROTOPLATII i
SFEROPLATII
Aciunea unor ageni muralitici (LIZOZIM, PENICILINE)
asupra celulelor bacteriene, n medii osmotice protectoare,
determin transformarea lor n protoplati i sferopla ti.

Protoplatii :
- sunt celule bacteriene nude, lipsite de perete celular,
rezultate din bacterii Gram pozitive;
- au o form sferic, indiferent de forma iniial a
bacteriei;
- sunt foarte sensibili la ocul osmotic;
- NU sunt reversibili n lipsa agentului care a indus
defeciunea.

Sferoplatii:

- rezult din bacteriile Gram negative;


- pstreaz poriuni din peretele celular;
- au capacitatea de a-i resintetiza
peretele celular n medii de cultur optime,
lipsite de factorul care a indus defeciunea

STRUCTURA CELULEI
BACTERIENE
NVELIUL
MEMBRANA
CITOPLASMATIC

PERETELE
CELULAR

CAPSULA ,
GLICOCALIXUL

CAPSULA

Este o formaiune extraparietal, prezent


numai la unele specii bacteriene i numai n
anumite condiii de mediu.
Speciile patogene capsuleaz:
- n organism
- pe medii de cultur cu snge, ser
sanguin, plasm, lichid ascitic, etc.

Bacteriile capsulogene care intereseaz


patologia veterinar sunt:
- Bacillus anthracis,
- Streptococcus pneumoniae,
- Klebsiella pneumoniae ,
- Clostridium perfringens,
- Pasteurella multocida.

Pe baza aderenei la peretele celular, a


grosimii i consistenei, se pot distinge patru
tipuri de capsul:
- microcapsula (Pasteurella multocida);
- capsula propriu-zis (Bacillus anthracis i
Streptococcus pneumoniae);
- substana capsular moale;
- zooglea

Tipurile de structuri capsulare


la bacterii

Streptococcus pneumoniae
( M.O)
(M.E )

Bacillus anthracis
M.O. coloraia GIEMSA

Capsula bacterian

Compoziia chimic
98% AP + 2%

POLIZAHARIDE

POLIPEPTIDE

(ACID HIALURONIC
Str. pneumoniae)

(ACID D- GLUTAMIC
B. anthracis)

Semnificaia biologic a
capsulei

Protejeaz celula bacterian fa de aciunea


unor factori nocivi:
- fagocitoz (rol antifagocitar);
- desicaie.

GLICOCALIXUL

Este o structur mai simpl dect capsula,


constituit dintr-o reea de fibre de natur
poliglucidic cu aspect de psl.
Este prezent numai la unele tulpini bacteriene, deci
nu este caracter taxonomic.
Pentru bacteriile patogene, glicocalixul constituie un
factor de colonizare a diverselor epitelii, avnd rol n
meninerea unor infecii urinare i intestinale.
Confer bacteriilor rezisten fa de bacteriofagi i
bacteriile prdtoare.

STRUCTURA CELULEI
BACTERIENE

CONINUTUL
CITOPLASMA

MATERIALUL

GENETIC

CITOPLASMA

Format din 80% AP .


Are consisten de gel.
Nu prezint cureni citoplasmatici i n consecin,
nici deplasri evidente ale elementelor componente.
Este lipsit de mitocondrii, aparat Golgi i reticul
endoplasmatic propriu-zis.
Reprezint sediul materialului genetic i al unor
structuri cu caracter de granule, incluzii i
vacuole.

Ribozomii sau granulele


lui Palade:
- granule sferice, cu diametrul de 10-20 nm;
- numrul lor este de ordinul zecilor de mii;
- sunt alctuii din acid ribonucleic (65%) +
proteine (30-35%);
- constituie sediul sintezei proteinelor;
- sintezele pot fi inhibate de unele antibiotice
(streptomicina, neomicina, tetraciclinele);
- n faza de cretere activ a celulei bacteriene
se formeaz conglomerate de ribozomi, numite
polizomi sau poliribozomi, elementul de legtur
reprezentndu-l filamentele fine de ARN mesager.

Incluziile

Structuri inerte, prezente inconstant n citoplasma


bacteriilor.
Reprezint materiale de rezerv.
Sunt formate din polimeri organici (amidon,
glicogen, acid poli--hidroxibutiric), cristale de
substane anorganice (sulf, carbonat de calciu) i
polimeri anorganici (ex. incluziile de
polimetafosfat = granule de volutin =corpusculii
Babe-Ernst - colorate mai intens dect restul
citoplasmei).

Cromatoforii

Prezeni la bacteriile fotosintetizante


Conin pigmeni fotosintetizani
Sunt organite specializate n procesele de
biosintez prin mecanisme analoage
fotosintezei plantelor.

Vacuolele

Sunt variabile ca mrime (0,3 0,5 m) i


numr (6-20/celul), fiind mai frecvent
ntlnite la celulele tinere.
Conin lichide cu rol n reglarea presiunii
osmotice, sau gaze.

Vacuole cu gaz la o bacterie


acvatic
(M.E.)

Pigmenii

Sunt substane colorate prezente n


citoplasma bacteriilor cromogene.
Speciile patogene pentru om i animale,
productoare de pigmeni sunt:
Staphylococcus aureus, Pseudomonas
aeruginosa, Rhodococcus equi,
Mycobacterium tuberculosis.

n funcie de structura chimic pigmenii


bacterieni se mpart n:

Pigmeni fenazinici: fluoresceina

Pigmeni carotenoizi : lutexina,

i
piocianina , prezente la mai multe specii din
genul Pseudomonas;
xantina, licopenul, sintetizai n principal de
ctre stafilococi;

Pigmeni melanici, de culoare brun,


frecveni la bacteriile fixatoare de azot din
genul Azotobacter;

Pigmeni antocianici, elaborai de


actinomicete;

Derivai pirolinici de tipul clorofilelor,


prezeni la bacteriile fotosintetizante.

Dup localizarea pigmenilor n celul i


posibilitile de difuzare n mediu, bacteriile
cromogene se clasific n:

Bacterii cromofore, a cror pigmeni rmn


cantonai la locul sintezei;
Bacterii cromopare, ai cror pigmeni sunt
eliminai n mediu, colorndu-l.

Staphylococcus sp.
Streptococcus sp.

Semnificaia biologic a pigmenilor


bacterieni

Pigmenii carotenoizi protejeaz bacteriile de


aciunea radiaiilor ultraviolete.
Piocianina i unii pigmeni elaborai de
actinomicete se comport ca antibiotice,
intervenind n fenomenele de antagonism microbian.
Flavoproteina produs de Lactobacillus delbrueckii
i ftiocolul produs de Mycobacterium phlei sunt
vitamine.
Clorofila prezent la bacteriile fotosintetizantetransform energia luminoas n energie de legare
chimic n cursul procesului de fotosintez.

practica identificrii
bacteriilor, prezena
pigmenilor este un
criteriu taxonomic
valoros i uor decelabil.

STRUCTURA CELULEI
BACTERIENE
CURS nr.7

CONINUTUL
CITOPLASMA

MATERIALUL

GENETIC

MATERIALUL GENETIC

Materialul genetic la bacterii este constituit din

Material genetic nuclear


i

Plasmide

Materialul genetic
nuclear
Reprezint nucleul celulei bacteriene:

nedelimitat de membran nuclear

- lipsit de nucleol

- format dintr-un singur cromozom care nu

sufer modificri de tip mitotic n cursul diviziunii


celulare

,,nucleoid, ,,genom bacterian,


,,nucleoplasm ,,nucleozom, ,,cromozom
bacterian

NUCLEUL (schi)
Procariot
Eucariot

NUCLEUL (M.E.)
Procariot
Eucariot

Structura cromozomului bacterian:


1

molecul ADN dublu-catenar


circular cu o lungime de 1000-2000 m care
ocup 5-16% din volumul celulei deoarece este

condensat prin spiralare,


superspiralare i pliere n jurul unui
miez ARN care menine cromozomul n
stare compact.

glucide i lipide n cantiti mici

Plasmidele

Sunt molecule mici de ADN dublu catenar,


independente de cromozom (material genetic
auxiliar sau extracromozomal).
Sunt caracteristice pentru celula procariot.
Reprezint aproximativ 1% din mrimea i
masa molecular a cromozomului.
Sunt, n majoritatea lor, transferabile de la o
celul bacterian la alta n cadrul
fenomenului de conjugare.

Att cromozomul ct i plasmidele


au posibilitatea de autoreplicare
semiconservativ
Replicarea plasmidelor are loc independent
de cea a cromozomului.

Semnificaia biologic a
materialului genetic
Determin caracterele care definesc
fiecare specie bacterian i asigur
transmiterea lor ereditar.
Avnd n vedere posibilitatea de transfer a
plasmidelor, ele au un rol major n procesul
de circulaie a informaiei genetice n cadrul
populaiilor bacteriene, care are ca rezultat o
mai bun adaptare a acestora la condiiile de
mediu.

ORGANITELE DE MICARE
ale bacteriilor:
I.
FLAGELII
II. FILAMENTELE AXIALE

Celula bacterin este


constituit din
coninut (citoplasma i
structurile intracitoplasmatice)

i
nveliuri

Unele specii bacteriene sunt


prevzute n plus cu

organite de micare
(cilii sau flagelii)
i/sau cu
organite de aderen
( pilii sau fimbriile

I. FLAGELII (CILII)
Organite externe filamentoase de
form cilindric, cu diametrul de
12-25 nanometri i lungimea de
25-30 micrometri.
Sunt prezente la bacteriile alungite
bacili, vibrioni, spirochete i

foarte rar la formele cocoide.

BACTERII CILIATE (M.E.)

Dup prezena, numrul i dispunerea cililor pe


suprafaa celulei bacteriene, se disting urmtoarele
categorii de bacterii:
- atricha (neciliate);
- monotricha (un cil dispus polar);
- amfitricha (cte un cil la ambii poli);
- lofotricha (un smoc de cili la unul din
poli)
- peritricha (numeroi cili amplasai pe
toat suprafaa celulei)

Prile componente ale unui


cil (schi) :

corpusculul bazal
(componenta prin care cilul se
ataeaz de celula bacterian)

articulaia sau crligul (o


zon flexibil care se interpune ntre
corpuscul i filament.)

filamentul extracelular
sau flagelul propriu-zis
(reprezint partea flexibil, n
general spiralat a cilului).

Corpusculul bazal
La bacteriile Gram pozitive este compus din 2
discuri :

discul M (de membran), numit i rotor,


dispus n grosimea membranei
citoplasmatice, care se rotete liber n spaiul
membranar

discul S , sau stator, cu o poziie


supramembranar.

La bacteriile Gram negative apar 2 discuri


supimentare:

discul P n stratul de peptidoglican


discul L , flotant n membrana extern

Mecanismul de
funcionare
a
cililor

In determinarea direciei de deplasare


intervin mecanisme de tip chimiotactic.
Chimiotaxia bacteriilor este controlat de
receptori membranari specifici care fixeaz
atractani (molecule utile) sau repelani
(molecule nocive) i genereaz un semnal.
Semnalul corpusculului bazal flux de
protoni dintre discurile M i S sensul
rotaiei inelelordirecia deplasrii:
- apropierea de atractani
- ndeprtarea de repelani

Cu ajutorul cililor, bacteriile se pot deplasa


cu viteza de 20-80 micrometri pe secund.
Bacteriile realizeaz o micare de
rostogolire cnd cilii se rotesc n sensul
acelor de ceasornic i o deplasare n linie
dreapt cnd acetia se rotesc n sens
antiorar.

II. FILAMENTELE AXIALE

Analogii flagelilor, prezeni la spirochete.


Sunt cuprinse n spaiul periplasmic (endoflageli).
Au inserie polar , extremitatea liber fiind dirijat
spre poriunea mijlocie a protoplastului.
Leptospirele au 2 filamente axiale care formeaz un
ax n jurul jurul criua se nfoar protoplastul.
Treponemele i boreliile au pn la 200 filamente
axiale subiri.

Endoflagelii spirochetelor

Examenul mobilitii
bacteriilor:

1. punerea n eviden a cililor n frotiuri colorate prin


metode speciale;
2. examenul mobilitii n preparate umede lamlamel (la spirochete);
3. cultivarea bacteriei ntr-o coloan de geloz
moale nsmnat prin nepare (vezi mediul MIU).
4.punerea n eviden a fenomenului de ,,roire prin
nsmnare pe suprafaa agarului turnat n placa
Petri, ntr-un singur cadran sau n centrul plcii.

Testarea mobilitii bacteriilor


Fig.1: stnga -bacterie imobil (a cultivat doar pe linia de
nsmnare); dreapta- bacterie mobil (turbiditatea mediului
=cultur n toat masa agarului).

Fig.2 : ,,roirea,, unei bacterii mobile pe suprafaa agarului

Proteus spp.(cele mai mobile bacterii)


A. - roirea n valuri concentice a unei tulpini nsmnate n
centrul plcii;

Compoziia chimic a
flagelilor

FLAGELINA protein cu masa molecular


de 40000 daltoni

FLAGELINA = Atg. ,,H(germ.huchen=vl,


membran) cu specificitate de tip

(ex.: E.coli - 56 serotipuri)

PILII (FIMBRIILE)

Pilii (fimbriile)
(lat. pilus = pr ; fimbria = franjuri ).

Organite filamentoase rigide mult mai subiri


i mai scurte dect cilii dar mult mai
numeroase.
Vizibili numai la microscopul electronic.
Nu posed corpuscul bazal.
n funcie de morfologie, numr i funcie, se
deosebesc 6 tipuri de pili:
I - V = fimbrii
F (sexual) = pili

Fimbriile

Formaiuni tubulare compacte, fr canal


Dimensiuni : 1-20 m lungime /3-14 nm diametru.
Dispuse pericelular, uneori polar sau bipolar, numrul lor
variind ntre 1 i 1000 per celul.
Sinteza fimbriilor este controlat de gene cromozomale
Creterea lor se face prin depunere de fimbrilin - o
protein cu masa molecular de 16600 daltoni la
extremitatea liber a filamentului.

Fimbrilina = Atg ,,F, cu specificitate


de tip (ex., E.coli 5 serotipuri: F1,
F2...F5; )

Fimbriile au rol de
adezine la receptorii
specifici de pe suprafaa
mucoaselor i a altor
substraturi, fiind
considerate factori de
patogenitate.

Escherichia coli bacterie ciliat i


fimbriat
electronomicrografie (M.E.)

Escherichia coli (M.E.)


Aderena la epiteliul intestinal
urmat de invazie

Aderena

Pilii ,,F"

Structuri tubulare strbtute de canal axial, n


structura crora intr o fosfoglicoprotein (pilina),
ale crei molecule sunt ansamblate dup o simetrie
helicoidal.
Sunt codificai de o plasmid numit factorul ,,F (de
fertilitate sau de sex), care confer celulei purttoare
proprietatea de donor de material genetic sau celul
mascul (F+).
Rolul pililor ,,F este analog organului copulator,
deoarece prin lumenul lor are loc transferul de ADN
de la o celul bacterian F+ la una F- n cadrul
procesului de conjugare - o form primitiv de
sexualitate, singura posibil la bacterii

FIZIOLOGIA
BACTERIILOR

Compoziia chimic a
celulei
bacteriene

Compoziia chimic elementar a bacteriilor, sub


aspectul coninutului n elemente biogene, nu difer
de a celorlalte organisme vii.
O celul bacterian conine aproximativ 3000-6000
molecule diferite:
- compui anorganici (ap i sruri
minerale (50%)
- compui organici cu diverse grade
de complexitate structural (50%).

Compuii anorganici
Apa

75-80 % din greutatea umed a celulei


bacteriene, n care se gsete sub form
liber sau legat inseparabil de alte structuri
chimice.
Ea constituie mediul care asigur vehicularea
substanelor nutritive i a metaboliilor,
precum i desfurarea reaciilor chimice
care stau la baza proceselor vitale.

Srurile minerale

asigur reglarea presiunii osmotice la nivelul


membranei citoplasmatice;
realizeaz sistemul tampon adecvat meninerii
pH-ului optim al mediului celular;
activeaz unele sisteme enzimatice, rol de
coenzim, pe care l ndeplinesc mai ales ionii de
Cu i de Mg;
Rol plastic (intr n structura unui important numr
de constituieni celulari) .

Compuii organici
Glucidele

4 25% din greutatea celulelor bacteriene


uscate, n funcie de specia bacterian, vrsta
culturii i compoziia chimic a substratului nutritiv.
200 tipuri de molecule, incluznd mono-, di-, tri- i
polizaharide.
n structura bacteriilor nu intr celuloza.
ndeplinesc rol energetic i plastic

Lipidele

1 20 % din greutatea uscat a bacteriilor: gliceride,


fosfatide, steride i ceruri. O lipid frecvent ntlnit
sub form de incluzii citoplasmatice este poli-hidroxibutiratul.
Fosfatidele i cerurile sunt prezente cu precdere
la bacteriile acido-alcalo-alcoolo-rezistente din genul
Mycobacterium.
Sterolii constituie o particularitate a micoplasmelor.
Alturi de glucide, constituie rezervele nutritive ale
celulei bacteriene cu un potenial energetic
crescut.

Acizii nucleici

ADN -15 din coninutul celulei, fiind constituientul


cromozomului bacterian i al plasmidelor .
ARN : ARN mesager, ARN de transport sau solubil
i ARN ribozomal.
ARN-ul total constituie 10 20 % din greutatea
uscat a celulei.
Rolul biologic al acizilor nucleici este acelai la toate
organismele vii.

Proteinele

60% din greutatea uscat a bacteriilor. Ele se


gsesc att n stare pur ct i sub form de
complexe lipo- sau glicoproteice.
Din punct de vedere al rolului pe care l ndeplinesc,
proteinele bacteriene pot fi grupate n :
- proteine
- proteine

constitutive

enzimatice
(enzimele bacteriene)

Enzimele
bacteriene=catalizatori ai
reaciilor
metabolice
Constituie, n ansamblul
lor, aparatul sau

echipamentul enzimatic al celulei bacteriene,


caracteristic pentru fiecare specie bacterian

criteriu taxonomic de baz.


Enzimele bacteriene prezint caracterele generale
ale tuturor enzimelor i anume:
- sunt eficiente n cantiti extrem de mici;
- au o mare specificitate de substrat.
- se regsesc nemodificate la sfritul
reaciei;

Enzimele pot fi:


Simple
Conjugate - enzima activ (holoenzima)
este format din dou componente, inactive
cnd se gsesc separat:
1. apoenzima (proteina care
determin specificitatea reaciei) i
2. coenzima (ioni metalici,
substane organice, vitamine, etc.)

Reaciile mediate enzimatic


parcurg urmtoarele etape :

substratul intr n contact cu situsul activ specific;


se formeaz un complex substrat-enzim, temporar;
moleculele substratului sunt transformate prin
rearanjarea atomilor, desfacerea structurii moleculare
sau combinarea cu o alt molecul substrat;
moleculele substratului transformat, respectiv produii
de reacie, se separ de enzim;
enzima eliberat poate reaciona din nou cu o molecul
de substrat.

Reacia de combinare a dou


molecule mediat de enzime

Activitatea enzimelor este


influenat de factorii de mediu (temperatur, pH,
prezena inhibitorilor enzimatici etc.).

Inhibitorii enzimatici pot fi:


- necompetitivi (srurile metalelor grele,
cianurile, acidul tanic, acidul tricloracetic etc.);
- competitivi = antimetabolii, sunt substane
cu structuri spaiale identice cu ale
substratului specific enzimei intr n
competiie cu substratul, fixndu-se pe situsul
activ al enzimei pe care l blocheaz ireversibil
substratul rmne nemodificat

Inhibarea

activitii enzimelor
bacteriene prin antimetabolii
st la baza utilizrii unor
medicamente cu aciune
bacteriostatic cum sunt
sulfamidele.

Clasificarea enzimelor
bacteriene

I. Dup locul de aciune :


exoenzime, sintetizate n celul i eliminate
n exterior;
endoenzime nedifuzabile n mediu, care pot
fi decelate n filtratele culturilor lizate.

II. Dup permanena sintezei lor:


enzime constitutive, elaborate permanent de
bacterie indiferent de substratul pe care se dezvolt;
enzime inductive (mutative) inexistente n mod
obinuit la o anumit specie bacterian. Ele apar
consecutiv unei mutaii, iar sinteza lor are loc numai
la mutanta respectiv.
enzime adaptative (inductibile), sintetizate numai
n prezena unui anumit substrat.

Enzime inductibile la E. coli


operon, represor

CURS nr.8

Nutriia la
bacterii

NUTRIIA = preluarea din mediul extern i


asimilarea nutrienilor necesari
metabolismului.
Nutrienii = substane organice i anorganice
ale cror soluii pot traversa membrana
citoplasmatic, urmnd s participe la
reaciile metabolice care asigur creterea i
nmulirea celulei bacteriene.

Nutrienii rezult din substanele


prezente n mediul de via a bacteriilor
prin:
- simpl solvire (sruri minerale, CO2, O2);
- o prealabil digestie
extracelular realizat de hidrolazele bacteriene
(proteaze, lipaze, amilaze) n cazul substanelor complexe cu
molecul mare (proteine, lipide, poliglucide, polinucleotide).

Accesul substanelor nutritive n


celula bacterian

Nutrienii traverseaz nveliurile celulei bacteriene:


-peretele celular - la nivelul porilor, prin difuzie
pasiv;
difuzie pasiv
- membrana celular difuzie facilitat
translocaie de grup
transport activ

Difuzia transmembranar pasiv


(film)

Se limiteaz la substanele a cror molecule nu


depesc 0,6 0,8 nm :
- ap,
- gaze (O2, CO2),
- acizi grai,
- substane liposolubile
- ioni
Se realizeaz fr consum de energie

Fora de propulsie gradientul


concentraie

Difuzia facilitat

Se realizeaz cu
participarea
proteinelor-carrier
viteza de traversare a
moleculelor dizolvate
este de cteva sute de
ori mai mare n raport
cu difuzia pasiv.

Difuzia facilitat se desfoar n trei faze:

1. recunoaterea i legarea specific a substanei transportate


de ctre proteina-purttor;
2. translocaia substanei prin membran;
3. disocierea complexului substan-purttor, de partea
opus a membranei.

Transportul nutrienilor prin difuzie facilitat se


realizeaz n ambele sensuri (n sau din celul),
fr consum de energie.

Fora de propulsie gradientul de


concentraie

Proteinelepurttor faciliteaz difuzia


transmembranar atta timp ct de o parte i de
cealalt a membranei exist o diferen de
concentraie a substratului respectiv.

Translocaia de grup

Transport mediat de proteinele-carrier.


n cursul transportului prin membrana
citoplasmatic are loc transformarea chimic
a substanelor.
Transformarea const ntr-un proces de
fosforilare, mediat de un complex enzimatic
numit sistemul fosfotransferazei.

Datorit faptului c produsul ptruns n celul


nu se acumuleaz, deoarece difer chimic de
cel iniial, transportul poate continua fr
consum de energie chiar i atunci cnd
concentraia intracelular a substratului
modificat este mult mai mare .

Intervine n transportul glucozei, sub form


de glucozo-6-fosfat i a altor glucide i
polialcooli: fructoza, sorboza, manoza,
respectiv sorbitolul, manitolul, etc.
Spre deosebire de difuzia facilitat,
transportul este unidirecional; glucidele
fosforilate nu pot fi eliminate din celul,
deoarece sub aceast form nu mai au
afinitate pentru proteinelepurttor.

Transportul activ

Procesul prin care diferite substane solvite (glucide,


aminoacizi, peptide, nucleotide, ioni) sunt
,,pompate n celul prin membrana citoplasmatic,
acumulndu-se nemodificate chimic, n concentraii
de sute i mii de ori mai mari dect n exterior.
Transportul se realizeaz cu ajutorul permeazelor,
care intervin activ consumnd energie, deoarece
transportul substanelor se face mpotriva
gradientului de concentraie.

Transportul activ are o importan deosebit n


procurarea de nutrieni din mediile n care acetia se
gsesc n concentraii mici i n meninerea unor
concentraii interne relativ constante a diferiilor
metabolii n raport cu fluctuaiile mari din mediul
extern.
Primul sistem de transport activ identificat este cel al
-galactozidpermeazei la E. coli, care poart situsul
de recunoatere i de transport al lactozei.

Exigene i tipuri nutritive la


bacterii

In raport cu sursa de energia pe care o


utilizeaz n procesele de nutriie, bacteriile se
ncadreaz n dou tipuri principale:
tipul fototrof, care utilizeaz energia luminoas,
transformnd-o n energie de legare chimic cu
ajutorul unor pigmeni asemntori clorofilei, i
tipul chimiotrof, lipsit de pigmeni fotosintetizani,
care i procur energia prin reacii de
descompunere a unor substane organice sau
anorganice cu eliberarea energiei pe care o conin.

Dup sursa de carbon, se difereniaz :


tipul litotrof (lith = piatr) sau autotrof cruia i
aparin bacteriile capabile s-i sintetizeze toi
constituenii celulari plecnd de la carbon anorganic
(CO2 );
tipul organotrof (heterotrof ) n care se
ncadreaz bacteriile dependente de materia
organic, care nu se pot dezvolta dect n prezena
substanelor organice ca surse de energie i C.

Ansamblnd cele dou criterii,


fotoautotrofe
(fotolitotrofe)
Bacteriile fototrofe <
fotoorganotrofe
(fotoheterotrofe)

chimioautotrofe
(chimiolitotrofe)
Bacteriile chimiotrofe <
chimioorganotrofe
(chimioheterotrofe)

Bacteriile chimioorganotrofe
(majoritatea bacteriilor
Sursele de carbon organic : glucidele i
patogene)

polialcoolii i ntr-o proporie mai redus


diferii acizi organici, cetonele, lipidele, acizii
grai etc.
Sursele de azot organic : aminoacizi, uree,
peptone, proteine.
Unele bacterii patogene pot folosi i surse de
azot anorganic: amoniacul rezultat din
hidroliza ureei sau din reducerea nitrailor n
nitrii i a nitriilor n amoniac.

Pe lng carbon i azot, toate bacteriile au


nevoie de:
- macroelemente (P, S, O, H, K, Mg,
Fe, Ca, Mn etc.) i
- microelemente (Cu, Zn, Mo etc.),
acestea din urm fiind indispensabile
activitii unor enzime.

Exist bacterii patogene care nu sunt


capabile s-i sintetizeze anumii metabolii
eseniali (vitamine, aminoacizi, baze azotate
purinice i pirimidinice etc.)
Ei au fost numii factori de cretere, n cazul
unei nevoi permanente, i factori de
plecare, n cazul cnd substana respectiv
este necesar doar la izolare.

De exemplu, bacteriile din genul Haemophilus


reclam unul sau doi factori de cretere i anume :
factorul X sau hematina, prezent n hematii, astfel
c sursa de factor X curent folosit n laborator este
sngele hemolizat;
factorul V reprezentat NAD sau NADP, care se
gsete n esuturi animale i vegetale, bacterii i
levuri (frecvent utilizndu-se extractul de drojdie de
bere).

Cunoaterea necesitilor nutritive


ale diferitelor specii bacteriene
permite utilizarea unor medii de
cultur adecvate, pentru izolarea
acestora din produsele patologice.

Metabolismul
bacterian

catabolismul
energetic {

Metabolismul <

respiraia
de sintez (anabolism).

Catabolismul

Cuprinde reaciile prin care compuii


organici cu structur complex sunt
degradai n substane simple prin
ruperea legturilor chimice ce
nmagazineaz energie i eliberarea
acesteia.

Eliberarea energiei prin reaciile catabolice se realizeaz


treptat, n trei faze.

FAZA I

Are loc extracelular, sub acunea hidrolazelor .


Compuii organici cu structur complex sunt
degradai n compui simpli :
- proteinele aminoacizi,
- polizaharidele monozaharide,
- lipidele glicerol i acizi grai.
Se elibereaz mai puin de 1% din energia total a
macromoleculelor, care se pierde sub form de cldur.

FAZA

II

Aminoacizii, monozaharidele i acizii grai


rezultai n prima etap sufer o degradare incomplet cu
formarea de produi intermediari (amoniac, acid piruvic,
acizi grai inferiori, etc.), CO2 i ap.
Energia eliberat reprezint ~ 1/3 din energia total a
substraturilor iniiale.
In aceast faz, glucoza cea mai important surs de
energie - poate fi metabolizat pe diverse ci (glicoliz,
calea Entner-Doudoroff sau calea hexozomonofosfatului)
dar produii finali nu sunt foarte diferii.
In mod similar, aminoacizii pot fi catabolizai pe ci
diferite, ns, indiferent de calea utilizat, rezultatul const
n formarea de acetil-Co A sau de intermediari ai ciclului
acizilor tricarboxilici (ciclul Krebs) .

FAZA III

Produii intermediari sunt descompui


prin reacii de oxidoreducere

biologic= respiraia celular.

Rezult cantitatea maxim de energie


In multe cazuri, degradarea se oprete la
produii intermediari, care sunt introdui n
filiera reaciilor anabolice, sub aciunea
enzimelor biosintetizante

Respiraia celular= procesul de oxidoreducere a


substanelor n celula vie n scopul eliberrii energiei pe
care o conin.

Prin oxido-reducere se nelege pierderea


atomilor de H (e i H +) din molecula unei
substane chimice (S) care se oxideaz
elibernd energie i transferul lor ctre o
substan acceptoare (A) care se reduce,
conform ecuaiei:

SH2 A< => S AH2


energie

Caracteristicile oxidoreducerii
biologice
1. oxidarea are loc prin dehidrogenare etapizat;
2. hidrogenul este preluat treptat de dehidrogenaze
(sistemul transportor de electroni) - enzime care se
reduc i se oxideaz succesiv prin preluarea, respectiv
cedarea H,de la una la alta pn la un acceptor final de
electroni de H care poate fi:
- oxigenul molecular (O2) = r.aerob;
- un compus anorganic (NO3-, SO4-, S...) = r. anaerob;
- o substan organic = fermentaie;

Desfurarea succesiv a reaciilor de


oxidoreducere asigur:

- eliberarea fracionat a energiei din


nutrienii oxidai;
- stocarea excesului de energie n
molecule de ATP prin cuplarea lanului
respirator cu fosforilarea oxidativ.

1. Respiraia aerob (oxibiotic) =


proces de de oxidare complet a
nutrienilor cu ajutorul oxigenului
molecular ca acceptor final de H
i eliberarea unei cantiti mari de
energie

2. Respiraia anaerob
(anoxibiotic) n care acceptorul
final de H poate fi orice
substan anorganic, exceptnd
oxigenul (NO3-, SO4-, S, CO2);

3. Fermentaia = oxido-reducere n condiii


de anaerobioz n care energia este obinut prin
utilizarea compuilor organici, att ca donatori ct
i ca acceptori de electroni.
Spre deosebire de respiraia aerob, n cursul
fermentaiei se elibereaz o mic parte din energia
coninut n substrat, rezultnd numeroi produi
de degradare parial. Acetia variaz foarte mult
n raport cu substratul i calea metabolic .

Sistemul transportor de
electroni de H(dehidrogenazele
bacteriene)
In funcie de structura chimic i ordinea n care intr n

aciune, enzimele respiratorii bacteriene se ncadreaz n trei


grupe.

1. Grupa dehidrogenazelor piridinice =

enzimele ale cror coenzime sunt NAD (nicotinamid-adenindinucleotid) i NADP (nicotinamid-adenindinucleotidfosfat).


SH2 + NAD (NADP)S + NADH2(NADPH2)

NAD i NADP sunt uor disociabile de apoenzimele lor,


fiecare putnd participa succesiv la numeroase reacii de
oxido-reducere, dup cuplarea lor cu diferite apoenzime.

2. Grupa dehidrogenazelor flavinice =


enzimele respiratorii flavoproteice, care
conin o grupare solid fixat (cofactor),
reprezentat n majoritatea cazurilor de
FAD (flavin-adenin-dinucleotid). La
bacteriile aerobe, aceste enzime
ndeplinesc rolul de transportori de hidrogen
ntre dehidrogenazele piridinice i citocromi.

De la dehidrogenaze, indiferent de natura lor, atomii de hidrogen

electronii (e) citocromilor, iar ei trec n


mediul celular sub form de protoni (H + ).
cedeaz

3. Sistemul citocromilor -un grup de


emzime conjugate, coninnd fiecare un
grup solid fixat numit ,,hem, n care fierul
poate fi oxidat i redus n mod reversibil
prin ctigarea sau pierderea unui electron:
+
eFe+++ < = > Fe++

A-reacii

de oxido-reducere la bacteriile aerobe, care utilizeaz o serie


complet de transportori de electroni; B metabolism aerob cu utilizarea
exclusiv a flavinei ca transportor intermediar; C transportul de electroni
n procesele fermentative, realizat obinuit de un singur transportor (NAD
sau NADP).

Stocarea energiei
suplimentare prin cuplarea respiraiei celulare cu
fosforilarea oxidativ

In

funcie de modalitatea utilizat


pentru eliberarea energiei i de
comportamentul fa de oxigenul
molecular, bacteriile pot fi
grupate n
5 tipuri respiratorii:

1. Bacteriile strict

sau obligatoriu
aerobe

Folosesc O2 ca
acceptor final de
hidrogen, avnd
sistemul citocromilor
bine reprezentat
(citocromi de tipurile a,
a3 , b, c, c1).

2. Bacteriile strict sau


obligatoriu anaerobe

Sunt lipsite de enzimele


respiratorii din categoria
citocromilor, implicit de
citocromoxidaz (O2O2)
S 2 + H2+ O2 H2 O2
(produs toxic)

Nu dispun de catalaz i
peroxidaz:
H2 O2 +catalazH2 O + O2

H2O2+2 (H)+peroxidaz2 H2 O

ANAEROSTAT

3. Bacteriile
aerobe, anaerobe
facultativ - bacterii
aerobe care i-au
dezvoltat capacitatea
de a supravieui n
absena oxigenului.

4. Bacteriile
anaerobe,
aerotolerante sunt
bacteriile anaerobe la
izolare, care n subculturi
devin tolerante fa de
oxigen (fig.d).
Un exemplu tipic l
constituie specia
Clostridium perfringens.

5. Bacteriile microaerofile
(Campylobacter spp,
Helicobacter spp., Brucella
spp. .a.) au nevoie de o
cantitate de oxigen mai
redus dect concentraia
existent n aer
Cultivarea reclam
incubatoare cu atmosfer
reglabil (oxigen 5-7%,
bioxid de carbon 8-10% i
azot 85% ) sau tehnica
lumnrii.

Metod simpl de incubare a


bacteriilor microaerofile

Anabolismul
Anabolismul const reacii enzimatice,
desfurate n trepte, prin care se efectueaz
sinteza constituienilor celulari pornind de la
precursori reprezentai de produii
intermediari ai catabolismului sau de
substanele preluate direct din mediu.

Ca i procesele de catabolism, reaciile de


biosintez se realizeaz tot n trei faze care se
succed n sens invers :
producerea de subuniti care vor intra n
componena macromoleculelor specifice fiecrui
constituient celular;
activarea subunitilor cu ajutorul energiei
eliberate prin descompunerea compuilor
macroergici de tip ATP , n care a fost stocat pe
parcursul degradrii diferiilor compui;
formarea de macromolecule prin polimerizarea
sau condensarea subunitilor activate.

Cile catabolice i anabolice pentru un anumit


substrat nu sunt complet reversibile.
Reaciile anabolice au ca punct de plecare, de cele
mai multe ori, compui intermediari foarte diferii de
cei care rezult din catabolismul compusului
respectiv.
Enzimele implicate sunt parial diferite.
Exemple:
1. catabolismul serinei duce la formarea de piruvat, n
timp ce sinteza ei ncepe de la 3-fosfoglicerat;
2.histidina este catabolizat la -cetoglutarat, iar
sinteza ei este iniiat de la ribozo-5-fosfat .

CURS nr.9

CRETEREA I
MULTIPLICAREA
BACTERIILOR

,,Ceea ce ncearc s fac fr


ntrerupere o bacterie, sunt dou
bacterii. Iat, pare-se sigurul su el,
singura sa ambiie. Visul fiecrei celule:
s devin dou celule."
FRANOIS IACOB

CRETEREA BACTERIILOR

Celula bacterian crete n volum prin


depunerea substanelor rezultate n
metabolismul de biosintez i sporirea
coninutului n ap.
Creterea se poate realiza uni- sau
multidimensional, n funcie de locul i
modalitatea de dispunere a substanelor nou
sintetizate.

Posibiliti teoretice de
cretere a celulei bacteriene

1 celula bacterian imediat dup diviziune; 2 creterea la


o singur extremitate; 3 la ambele extremiti; 4 - n zona
septului transversal; 5 prin intususcepiune; 6 prin
depunere de substan n zona periferic a celulei.

In cursul creterii celulei


bacteriene:

raportul suprafa/volum se micoreaz treptat;


circulaia substanelor CELUL MEDIU devine
mai dificil;
aportul de substane nutritive satisface din ce n ce
mai puin exigenele metabolice ale celulei;
echilibrul chimic al celulei bacteriene se altereaz;
atunci cnd disproporia dintre suprafa i volum
atinge un punct critic, raportul lor adecvat se
restabilete prin diviziunea celulei.

diviziunea celular este o form de reglare a


activitii celulei bacteriene.

MULTIPLICAREA BACTERIILOR

Spre deosebire de organismele


pluricelulare, la care multiplicarea
celulelor duce la mrirea taliei
individului, la bacterii i la toate
celelalte organisme unicelulare, ea
are ca rezultat creterea numrului
de indivizi i implicit a populaiei
respective.

MODALITI DE MULTIPLICARE

1. Multiplicarea prin diviziune direct


majoritatea bacteriilor
2. Multiplicarea prin corpi elementari
chlamidiile
3. Multiplicarea prin ramificare,
fragmentarea filamentelor (micoplasme) ,
nmugurire, spori - actinomicetele

DIVIZIUNEA DIRECT
(diviziunea simpl,
sciziparitatea)
La bacteriile de form alungit (bacili,
spirochete), diviziunea se face
transversal dup un plan perpendicular
pe marele ax al celulei, n centrul
acesteia , rareori excentric.
La coci, diviziunea se poate realiza
dup dou, trei, sau mai multe planuri
perpendiculare sau paralele succesive.

Diviziunea celulei bacteriene este precedat i


iniiat de replicarea semiconservativ a ADN
cromozomal, n momentul n care corpii nucleari
nou formai sunt disponibili pentru segregare, astfel
nct cele dou celulesurori s fie nzestrate cu o
copie exact a genomului celulei parentale.
Spre deosebire de celulele eucariote, la care
separarea materialului nuclear se realizeaz graie
aparatului mitotic, la bacterii segregarea este
asigurat de mezozomii pe care membrana
citoplasmatic i formeaz prin invaginare pn la
nivelul fiecrui corp nuclear.

Separarea

celulei bacteriene n
cele dou celule-fiice se poate
realiza n dou moduri:
1. prin trangularea celulei
2. prin formarea unui sept transversal.

Sus schi
Jos imagine
M.E.

Diviziunea prin
trangulare,
caracteristic
bacteriilor care aparin
tipului cultural S

Sus schi
Jos imagine M.E.

Diviziunea prin sept


transversal se
ntlnete cu predilecie
la bacteriile aparinnd
tipului cultural rugos R

MULTIPLICAREA PRIN CORPI


ELEMENTARI

A fost descris la
chlamidii, bacterii la
care, pe lng
diviziunea direct,
exist posibilitatea
desfurrii unui ciclu
vital.

Dinamica multiplicrii
O cultur bacterian prezint n
bacteriilor
cursul existenei sale patru faze,

distincte prin viteza de multiplicare a


germenilor i prin numrul de celule
vii pe unitatea de volum:

multiplicrii

1. faza iniial de
adaptare (de
laten sau de
lag)
2. faza de
multiplicare
exponenial sau
logaritmic,
3. faza staionar
4. faza de declin

Fig.

curba

Multiplicarea n mediile
lichide.
Faza de laten

Este cuprins ntre momentul introducerii celulelor


bacteriene n mediu, prin nsmnare sau
transplantare i momentul cnd ncep s se
multiplice.
Este o perioad de adaptare la noile condiii,
eventual de modificare a acestora caracterizat prin
lipsa diviziunii i moartea unor celule bacteriene din
cauza neacomodrii.
Bacteriile viabile acumuleaz n celul metaboliii
eseniali i sistemele enzimatice necesare creterii.

Durata perioadei de adaptare este condiionat de


urmtorii factori:
- specia bacterian (la majoritatea speciilor dureaz
n medie dou ore, iar la bacilii tuberculozei, cteva
zile);
- calitatea nutritiv a mediului nsmnat i
diferenele fa de mediul din care provine inoculum);
- vitalitatea bacteriilor nsmnate.
In cazul sporilor, transformarea lor n celule vegetative
presupune uneori o prelungire a perioadei de laten.

Faza de multiplicare exponenial


sau logaritmic

Se caracterizeaz prin multiplicarea


celulelor bacteriene, la debut cu o vitez
progresiv mrit, apoi, ntr-un ritm
constant caracteristic fiecrei specii n
condiii bine definite (mediu de cultur,
temperatur, Ph etc.).

La majoritatea bacteriilor patogene i


condiionat patogene, n condiii optime,
diviziunile se succed la intervale de 2030 de minute vrsta unei generaii.

Excepie: bacilii
tuberculozei (3-15 ore).

In aceast faz, culturile bacteriene conin


celule tinere care prezint toate proprietile
morfo-fiziologice caracteristice speciei i o
intensitate maxim a tuturor proceselor vitale.
Datorit metabolismului foarte activ, ele sunt
considerabil mai sensibile la aciunea
agenilor antibacterieni (antibiotice,
chimioterapice) dect n celelalte faze ale
multiplicrii.

Durata fazei: - 6-10 de ore


- 15-60 de zile b. tuberculozei

Faza staionar

Urmeaz unei perioade de ~ 2 ore n care


multiplicarea nu se mai produce n progresie
geometric ci ntr-un ritm care scade
progresiv.
Incetinirea multiplicrii este determinat de:
1. scderea concentraiei nutrienilor;
2. acumularea metaboliilor toxici n
concentraii inhibitorii;
3. reducerea coninutului n oxigen;
4. realizarea unei concentraii maxime de
celule bacteriene pe unitatea de volum
(310 - 310 pe ml).
7

Are loc doar o multiplicare de nlocuire a


celulelor moarte, rata de cretere a
populaiei bacteriene fiind nul.
Durata fazei : cteva ore pn la 7-8
zile, n funcie de specie.

Faza de declin

-absena diviziunilor i moartea logaritmic a


celulelor bacteriene, pn la sterilizarea mediului.
Cauzele : - epuizarea substane nutritive,
- diminuarea rezervelor respiratorii
toxicitatea cataboliilor .
Bacteriile prezint:
- polimorfism accentuat,
- forme atipice
- afinitate tinctorial modificat.
Uneori apare fenomenul de reluare a creterii
(cretere criptic sau canibalism).

Multiplicarea bacteriilor pe
mediile solide.

Att pe suprafaa, ct i n profunzimea


mediilor solide, n urma multiplicrii bacteriilor
rezult aglomerri de milioane de celule,
care, n funcie de abundena inoculului i
activitatea aparatului ciliar, pot mbrca
macroscopic dou forme:
- colonia izolat i
- gazonul bacterian.

Colonia reprezint o mas compact de


celule, rezultate, de regul, din
multiplicarea unei singure celule bacteriene.
Dup declanarea fazei logaritmice, diviziunile se
distaneaz treptat, pe msur ce colonia crete,
deoarece ntre celulele bacteriene care o compun se
creeaz diferene privind posibilitile de acces la
substanele nutritive sau la oxigen (n cazul speciilor
aerobe), n funcie de poziia lor:
- la periferia coloniilor, limitrof mediului sau
- n centrul coloniei.
Celulele de la periferia coloniilor, care beneficiaz de
un aport optim de oxigen i de nutrieni, se
multiplic activ, n timp ce bacteriile din centrul
coloniei pot fi moarte.

Dezvoltarea unei colonii bacteriene este


condiionat, nu numai de interaciunile
celulelor individuale, ci i de influena
coloniilor vecine. Astfel, cu ct coloniile sunt
mai numeroase i mai dese, cu att sunt mai
mici, din cauz c se jeneaz reciproc prin
eliminarea de metabolii toxici i prin
diminuarea concentraiei nutrienilor.

Coloniile bacteriene difer prin form, relief,


margini, dimensiuni (0,1 mm - 3-4 mm),
suprafa, grad de opacitate, prezena sau
absena pigmentului etc.
Aceste particulariti au permis diferenierea
a dou tipuri principale de colonii:
- colonia de tip ,,S (engl. smooth=neted) i
- colonia de tip ,,R (engl. rough = rugos) .

Colonii de tip ,,S

Colonii de tip ,,R

Colonia de tip ,,S

Reprezint rezultatul multiplicrii n condiii optime, la majoritatea


speciilor bacteriene (excepie fac Bacillus anthracis, antracoizii i
Mycobacterium tuberculosis).
Este rotund, bombat, cu suprafaa neted i lucioas,
marginile regulate
Se detaeaz cu uurin de substrat i formeaz suspensii
omogene i stabile n soluie salin izotonic (NaCl 9%).
Bacteriile care formeaz astfel de colonii sunt dispuse izolat sau
n grupuri mici (diplo, lanuri scurte).
Prezint stratul structurilor speciale al peretelui bacterian i
capsula (n cazul speciilor capsulate), normal sintetizate. Prin
urmare, structura lor antigenic este complet, iar atunci cnd
aparin speciilor patogene, corespund formei virulente cu
patogenitate i rezisten la fagocitoz, maxime.
In bulion, aceste bacterii cresc repede, tulburndu-l uniform

Colonia de tip R

Este plat, cu suprafaa rugoas, zbrcit i marginile


neregulate. Aspectul se datoreaz tendinei celulelor de a forma
lanuri lungi sau filamente, care se ntretaie schimbndu-i
reciproc direcia i care formeaz bucle atunci cnd ntlnesc n
mediu un obstacol mecanic.
Este specific variantelor acapsulogene i bacteriilor
necapsulate ca specie, care i-au pierdut capacitatea de sintez
normal a structurilor speciale de perete. Drept urmare, aceste
bacterii au o structur antigenic incomplet i aparin, de
regul, variantelor cu patogenitate atenuat sau nevirulente.
Face excepie specia Mycobacterium tuberculosis, al crei tip
cultural la izolare este ,,R i la care pierderea capacitii de
sintez a factorului cord (o glicolipid din structura peretelui
celular) se nsoete de o variaie RS.
Coloniile de tip R formeaz suspensii neomogene n soluie
salin fiziologic, iar n bulion cresc aglutinat, formnd un
sediment la fundul tubului.

Gazonul sau pnza

reprezint cultura care


rezult prin confluarea
coloniilor n cazul
nsmnrilor
abundente, sau prin
invazia mediului de
ctre bacteriile cu
aparat ciliar foarte activ,
ca urmare a
fenomenului de roire
sau crare .

Culturi continue

. Deoarece numeroase bacterii


sunt utilizate la scar
industrial pentru obinerea
unor produse utile (vitamine,
enzime, hormoni, etc.), este
necesar conservarea fazei
logaritmice o lung perioad
de timp.
Acest deziderat se poate
realiza dac mediul de cultur
este renoit continuu,
concomitent cu eliminarea
produilor de catabolism.
La nivel de laborator, culturile
continue se pot obine cu
ajutorul unei instalaii speciale
numit chemostat

MORFOLOGIA I
BIOLOGIA SPORULUI
BACTERIAN

Sporul bacterian este o form de


conservare a unor specii bacteriene n
condiii nefavorabile, prin rezistena sa
crescut la factorii nocivi pentru celula
vegetativ.
Procesul de formare a sporului are loc n
interiorul celulei vegetative (endospor) i
poart denumirea de sporogenez. In condiii
de mediu optime are loc germinarea sporului,
din care va rezulta o nou celul vegetativ.

Sporogeneza la bacterii nu

reprezint

o cale de nmulire.
1 celul bacterian 1 spor

Excepie

fac actinomocetele,

singurele bacterii la care, ca i la ciupercile


microscopice, sporul reprezint o form de
reproducere.

Att sporogeneza ct i germinarea se


gsesc sub controlul unor gene
cromozomale (aproximativ 50) care
acioneaz alternativ, fiind represate sau
depresate de diveri factori interni sau din
mediul ambiant.
Speciile sporogene patogene pentru om i
animale aparin genurilor Bacillus i
Clostridium. Cocii, cu excepia speciei
Sporosarcina ureae , nu formeaz spori.

Sporogeneza-

procesul de formare n interiorul


celulei bacteriene a unei celule de tip nou, diferit din
punct de vedere chimic, enzimatic i fiziologic

In celula vegetativ, asupra genelor care codific acest proces


acioneaz inhibitor un represor sintetizat pe baza unor compui
chimici preluai din mediu. Cnd substanele respective sunt
epuizate i represorul nu mai este prezent n celul, genele sunt
depresate i se exprim fenotipic prin declanarea procesului de
sporogenez. Ali factori care influeneaz favorabil sporogeneza
sunt: anumite limite de temperatur (la Bacillus anthracis ntre
12 C i 42,5 C), uscciunea, prezena oxigenului la bacteriile
aerobe i absena lui la cele anaerobe, o anumit densitate a
germenilor pe unitatea de volum etc.
Sporogeneza evolueaz n trei faze succesive:

1. stadiul preparator,
2. formarea presporului
3. maturarea sporului

Stadiul preparator

Pregtirea celulei
pentru procesul de
sporogenez const n
replicarea
semiconservativ a
ADN-ului nuclear cu
formarea a doi
cromozomi distinci.

Formarea presporului

Formarea presporului
presupune, ntr-un stadiu
incipient, separarea celor
doi cromozomi printr-un
sept transversal rezultat
din invaginarea
membranei
citoplasmatice. Cele
dou segmente celulare
vor evolua pe ci diferite,
unul devenind prespor
iar cellalt, sporangiu.

Maturarea sporului
Se realizeaz prin urmtoarele
transformri care se petrec
n prespor:
morfogeneza nveliurilor
sporale;
apariia unor compui
chimici specifici, inexisteni
n celula vegetativ;
reducerea sensibil a
activitii metabolice;
dobndirea rezistenei la
factorii fizici i chimici fa
de care celula vegetativ
este sensibil.

Ultrastructura sporului

Inima sporului (smbure,


,,coreprotoplast sporal) cuprinde:
-sporoplasma,
corespunztoare citoplasmei
- nucleoplasma.
Membrana intern (intina)
similar membranei
citoplasmatice;
Cortexul sporal constituit din
peptidoglican modificat;
nveliul extern (exina sau
tunicile sporale), pluristratificat;
Exosporium, un nveli
suplimentar analog capsulei,
prezent numai la sporii anumitor
specii;

Spori M.E.

Raporturi posibile ntre spor i


sporangiu

Prin metoda Gram se coloreaz palid numai conturul


sporului, nu i coninutul. Pentru colorarea acestuia
sunt necesare metode energice, care presupun
colorarea la cald cu soluii concentrate, capabile s
impregneze structurile dense ale sporului.
In frotiuri, sporii se pot gsi liberi, ataai de celula n
care s-au format sau n interiorul acesteia, avnd
form rotund, oval sau cilindric.
In cazul cnd sporul rmne n interiorul sporangiului,
el poate fi aezat central, subterminal (n apropierea
unui capt), terminal (la unul din capete) sau lateral .

Diametrul sporului poate fi egal, mai mare sau mai mic n


comparaie cu diametrul transversal al celulei bacteriene. In
funcie de poziia sporului i raportul dintre cele dou diametre,
bacteriile sporulate pot adopta diferite forme cu semnificaie
taxonomic, i anume:
bacil nedeformat (bacteridie) cu sporul situat central,
caracteristic pentru bacteriile din genul Bacillus;
bacil deformat de sporii care depesc diametrul transversal al
celulei vegetative (clostridie), avnd aspect de:
- lmie, cnd sporul este situat central;
- sticl de lamp de petrol, cnd sporul este situat
subterminal;
- rachet de tenis sau b de chibrit, cu spor sferic
terminal;
bacil asimetric cu sporul excentric, caracteristic speciei Bacillus
laterosporus.

Bacillus anthracis
(spor central nedeformant)

Clostridium botulinum
(spor subterminal)

Clostridium tetani
(spor terminal)

Particularitile biochimice ale


sporului

Coninut mai redus n ap liber, sruri de


fosfor, sruri de potasiu i acizi nucleici.
Coninut mai mare de cistein, ioni de calciu
i ioni magneziu.
Prezena unor compui chimici abseni n
celula vegetativ: enzimele litice sporale i
acidul dipicolinic (circa 10% din greutatea
uscat a sporului), prezent sub form
dipicolinat de calciu.

Particularitile fiziologice ale


sporului

Sporul este o celul dormant, care:


- nu realizeaz schimburi de
substane cu mediul ambiant,
- nu crete
- nu se multiplic.

Insuirile biologice ale


sporului

Sporii bacterieni asigur supravieuirea speciei n natur, zeci,


sute, sau chiar mii de ani, prin rezistena foarte mare la:
- cldur
- radiaii
- uscciune
- substanele chimice.
De exemplu, sporii de Bacillus anthracis i pstreaz
capacitatea de germinare timp de peste 70 de ani i rezist
cteva ore la 120 C cldur umed i cteva minute la 180 C
cldur uscat.
Sporii altor specii i menin viabilitatea timp de o sptmn n
fenol 5% i mai multe sptmni n alcool.

Rezistena sporilor la factorii nocivi din mediul


extern este asigurat de un complex de factori dintre
care o importan major prezint :
starea de deshidratare (ap 40-50%, fa de 8090% la formele vegetative)
coninutul foarte sczut n ap liber; apa ,,legat
de diverse structuri nu poate participa la reaciile
chimice de denaturare i coagulare a proteinelor
prin cldur, antiseptice i dezinfectante ;
prezena unei cantiti mari de dipicolinat de calciu,
care are rolul de a modifica conformaia proteinelor
enzimatice, conferindu-le termostabilitate;
numrul mare de nveliuri protectoare.

Germinarea sporului

Germinarea sporului reprezint procesul de


transformare a sporului n celul vegetativ activ.
Germinarea este declanat de:
- umiditate
- o temperatur apropiat de optimum termic al
speciei,
-ocul termic (nclzirea brusc la 60- 800 C ),
- pH-ul cuprins ntre 6 i 8,
- prezena n mediu a glucozei, aminoacizilor,
nucleozidelor i a altor substane utile
metabolismului bacterian.

Germinarea se realizeaz n dou faze distincte:


1. iniierea germinrii, cnd sporul se mrete n
volum consecutiv absorbiei de ap i elimin n mediu
dipicolinat de calciu, peptidoglican i alte substane de origine
sporal, pierzndu-i majoritatea nsuirilor specifice.
2. distrugerea nveliurilor sporale de ctre
enzimele autolitice i trecerea n faza vegetativ prin reluarea
activitii metabolice i redobndirea tuturor nsuirilor
morfologice i fiziologice caracteristice celulei vegetative.
Au o aciune inhibant asupra germinrii: apa distilat, glicerina,
i unele antibiotice care interfereaz cu sinteza peretelui celular,
a proteinelor i a acizilor nucleici.

Implicaiile sporogenezei n
patologie i
epidemiologie
Bacteriile sporogene se caracterizeaz printr-o
existen saprofit. Nia ecologic natural a
speciilor sporulate patogene pentru om i animale
este solul. De aici, bacteriile pot ajunge accidental n
organism, provocnd mbolnviri cunoscute sub
denumirea generic de infecii telurice (antraxul,
tetanosul, crbunele emfizematos), sau n alimente,
unde elaboreaz toxine determind intoxicaii
alimentare(Clostridium botulinum) i toxiinfecii
alimentare (Bacillus cereus, Clostridium
perfringens).