Disciplina Bacteriologie, virusologie i parazitologie medical

Conspect tiinific la tema:

MICROBIOLOGIA CA OBIECT. SISTEMATICA, NOMENCLATURA
BACTERIILOR. ULTRASTRUCTURA, MORFOLOGIA
MICROORGANISMELOR.
METODA MICROSCOPIC DE DIAGNOSTIC.

Coninut:
1.
2.
3.
4.

1.
2.

Microbiologia ca obiect.
Sistematica, nomenclatura bacteriilor.
Ultrastructura, morfologia microorganismelor.
Metoda microscopic de diagnostic.
1. MICROBIOLOGIA CA OBIECT.
Microbiologie (mikros bios logos - mic, viu, studiu). Microbiologia studiaz
microorganismele i activitile lor.
Microorganisme / microbi organisme microscopice, cu dimensiuni de ordinul m (10-6
m) sau nm (10-9 m). Microorganisme reunesc bacteriile i alte tipuri de organisme: alge,
ciuperci microscopice (fungi, micete), protozoare, virusuri i ageni sub virali, de ex. prioni.
Termenul microb a fost utilizat n 1878 de chirurgul francez Charles-Emmanuel Sedillot.
Lumea microbian. Vrsta aproximativ fiind 1-1,5 mlrd ani.
Abundena i diversitatea fiind 60% din biomas; ap, aer, sol - scoara terestr la 15 km,
surse termale la 100 grade; 4000 specii descrise mai puin de 1% din aproximativ 106
specii necultivabile n laborator. Genomul Pseudomonas aeruginosa posed 5000 gene,
posed sisteme eficiente de percepere a lumii, comunicare i adaptare la condiii variate ale
mediului.
Microbiologia studiaz forma, structura, nutriia, metabolismul, creterea i multiplicarea
microorganisme (pentru a le identifica) i urmrete relaiile lor cu organismele-gazd i cu
mediul ambiant.
De ce studiem microorganismele?
Studiul microorganismelor patogene i oportuniste
Prevenirea i controlul maladiilor infecioase
Producerea antibioticelor
Obinerea medicamentelor prin tehnologii de ADN recombinant: streptokinaza, insulina,
vaccinuri, etc
Producerea alimentelor: unt, brnz, cacaval, chefir, yaurt, oet, alcool, cacao, cafea, etc.
Rol de insecticide biologice
Fabricarea plasticului biodegradabil
Descompunerea deeurilor i metanului
Extragerea metalelor din minerale
Asigurarea rolului major n ciclurile geochimice, etc
Disciplinile microbiologice n raport cu:
Particularitile biologice ale microorganismelor: Algologia, Protozoologia, Micologia,
Bacteriologia, Virologia
Implicaiile n activitile umane: Microbiologia medical, veterinar, industrial, alimentar,
Genetica microbian, Ecologia microbian, Microbiologia solului, Microbiologia marin,
Microbiologia cosmic, etc
Microbiologia medical studiaz:
Relaiile dintre microorganisme i gazda lor uman
Capacitile patogene ale microorganisme
Capacitile antiinfecioase ale gazdei
Principiile i metodele diagnosticului etiologic al infeciilor
2

 Bazele terapiei antimicrobiene

Bazele profilaxiei antimicrobiene
2. CLASIFICAREA I NOMENCLATURA MICROORGANISMELOR
Lumea microbian este extrem de divers, ceea ce determin necesitatea aranjrii lor n
grupe conform asemnrii lor.
Se disting 3 noiuni:
1. Taxonomie tiina despre clasificare
2. Clasificare aranjarea organismelor n grupe sau taxoni n funcie de asemnri sau nrudiri
3. Nomenclatura numirea tiintific a grupelor taxonomice conform unor reguli
internaionale.
Principalele grupe taxonomice (taxoni)
- Regn
- Tip/Diviziune
- Clas
- Ordin
- Familie
- Gen
- Specie (unitate fundamental)
Specia o grupare de tulpini bacteriene (sue/tulpini) cu multe caractere comune prin care
difer semnificativ de alte tulpini.
n cadrul speciilor pot fi delimitai taxoni infraspecifici (variante / tipuri),
care prezint diferene minore n activitatea biochimic sau fiziologic (biovar),
n structura antigenic (serovar),
n gradul de patogenitate (patovar),
n sensibilitatea la bacteriofagi (lizovar) sau la antibiotice (antibiovar).
Pot fi utilizai ca markeri epidemiologici pentru descifrarea unor epidemii (infecii
nozocomiale, toxiinfectii alimentare, etc)
Conform ultimei clasificri internaionale ale microorganismelor (Bergey's Manual of
Systematic Bacteriology, 2001) se disting:
I. Forme acelulare (virusuri, viroizi, prioni)
II. Forme celulare, repartizate n 3 domenii:
- Bacteria procariote (bacterii adevrate, eubacterii).
a) Bacterii cu perete celular fin, gram-negative;
b) Bacterii cu perete celular gros, gram-pozitive,
c) Bacterii lipsite de perete celular (micoplasme).
Nomenclatura microorganismelor
Numirea microorganismelor este stabilit de ctre Comitetul Internaional de Bacteriologie
Sistematic. Nomenclatura taxonilor are la origine un substantiv grec sau latin, care definete
cel mai evident caracter al mi microorganismelor studiate, la care se adaug un anumit sufix
latin.
Ordinul Actinomycetales, Spirochaetales
Familia Enterobacteriaceae, Spirochaetaceae
Genul Staphylococcus, Leptospira, Clostridium, Pseudomonas
Specia denumire binar (Gen + specie): Escherichia coli, Staphylococcus aureus,
Mycobacterium tuberculosis, etc.
3. MORFOLOGIA, ULTRASTRUCTURA MICROORGANISMELOR.
3

Bacteriile sunt organisme unicelulare procariote autonome, cu dimensiuni ntre 0,2 i 10 m

(Spirochaeta 250 m) i care difer esenial de celulele eucariote animale sau vegetale.
CELULE EUCARIOTE
CELULE PROCARIOTE
Aparatul nuclear nucleu cu nucleoli, Molecul de ADN circular, lipsa membranei
nconjurat de membran nuclear
nucleare
Celula se divide prin mitoz sau meioz
Diviziune binar
Lipsa peretelui celular (n caz de prezen Prezena peretelui celular ce conine
conine chitina sau celuloza)
obligator peptidoglican
Prezena organitelor celulare
Absena organitelor celulare,
citoplasma omogen, ne-compartimentat
2 tipuri de ribosomi n citoplasm i n Toi ribosomii sunt identici
mitocondrii sau cloroplaste

MORFOLOGIA BACTERIILOR
Morfologic se disting 4 grupe de bacterii:
1) Forme sferice (coci)
2) Forme cilindrice alungite (bastonae)
3) Forme ncurbate/spiralate
4) Bacterii polimorfe: Actinomyces, Rickettsia, Chlamydia, Mycoplasma
Formele sferice (coccus)
Micrococi (Micrococcus) celule izolate
Diplococi (Diplococcus) perechi (neisserii - bob de cafea, pneumococi - lanceolati)
Streptococi (Streptococcus) - lanuri
Tetracoci (Tetracoccus) cte 4 celule
Sarcine (Sarcina) pachete din 8-16-32 coci
Stafilococi (Staphylococcus) grmezi neregulate de coci
Formele cilindrice alungite (bastonae)
Bastonae sau bacterii propriu zise nu formeaz spori (Mycobacterium, enterobacterii,
etc);
Corynebacterium, bastonae cu capetele rotunjite bombate datorit pigmentului de
volutin;
Bacili bastonae mari cu capetele retezate, formeaz spori ce nu depesc diametrul
celulei (ex.: Bacillus anthracis). Posibil aranjarea n lanuri streptobacili
Clostridium bastonae cu capetele rotunjite, formeaz spori ce depesc diametrul
celulei (ex.: Clostridium tetani, Clostridium botulinum, C. perfringens, etc)
Formele ncurbate (spiralate)
Vibrion bastonae ncurbate n virgul (ex.: Vibrio cholerae)
Spirili ngroate cu flexiuni aranjate uniform, Campylobacter, Helicobacter 2 spire,
aspect de pasre n zbor (ex.: Campylobacter jejuni)
Spirochaeta celule spiralate, cu 5-25 spire, flexibile (ex.: Treponema, Leptospira,
Borrelia)
Formele filamentoase fac parte actinomicetele, care au fire ramificate ; miceliul lor poate
avea lungimea de 100600 nm i diametrul de 0,51,2 nm.
4

Actinomicetele snt productoare de antibiotice, unele genuri pot provoca mbolnviri la om

actinomicoze.
n ultrastructura celulei bacteriene se evideniaz urmtoarele pri: anvelopa n trei
straturi, citoplasm cu diferite incluziuni i substana nuclear, numit nucleoid. Structurile
suplimentare ale celulei bacteriene snt: capsulele, sporii, flagelii, pilele.
Anvelopa celulei const din stratul mucozitar extern, peretele celular i membrana
cltoplasmatic.
a) Stratul capsular mucozitar se afl la exteriorul celulei i execut funcia de protecie.
b) Peretele celular reprezint unul din elementele structurale principale ale celulei. El
asigur forma i desparte celula de mediul exterior. O proprietate important a peretelui
celular este permeabilitatea lui selectiv, care asigur ptrunderea n celul a substanelor
nutritive necesare (aminoacizi, glucide . a.) i evacuarea din celul a produselor metabolice,
peretele celular pstreaz n interiorul celulei presiunea osmotic constant. Rigiditatea
peretelui celular este asigurat de complexul de substane polizaharidice,numit muriin sau
peptidoglicani. Unele substane, cum ar fi lizozima, lezeaz peretele celular.
Peretele bacterian al bacteriilor Gram-pozitive difer ca structur i compoziie de cel al
bacteriilor Gram-negative, dei ambele conin peptidoglicani n structura peretelui.
(1) Bacteriile Gram-pozitive au un perete gros, alctuit, n primul rnd, dintr-un strat rigid de
peptidoglicani, precum i din acid teichoic. Cantitatea mare de peptidoglicani (70-80%)
confer bacteriilor Gram-pozitive sensibilitate la lizozim i la penicilin.
(a) Lizozimul hidrolizeaz specific peptidoglicanii ntre N-acetil- glucozamin i acidul
N-acetilmuramic.
(b) Penicilina inhib specific sinteza de peptidoglicani.
(2) Bacteriile Gram-negative au un perete bacterian mai subire dect al celor Gram pozitive, cu un coninut mult mai mic de peptidoglicani (pn la 20%) i fr acid
teichoic. Un strat complex numit membran extern, acoper peretele bacterian al
bacteriilor Gram-negative.
(a) Membrana extern a bacteriilor Gram-negative este mai groas dect stratul de
peptidoglicani i este compus din lipoproteine i din glicolipide ataate de
peptidoglicani.
(b) Membrana extern conine antigenul O, care este caracteristic bacteriilor Gram negative.
ndeprtarea peretelui bacterian, care protejeaz membrana citoplasmatic subiacent,
determin liz bacterian, deoarece membrana este incapabil s reziste presiunii
osmotice din natur.
Protoplatii
sunt forme bacteriene lipsite de perete, create artificial,
meninute n medii osmotice capabile s protejeze de liz bacterian. n medii hipotone
aceste celule se sparg, iar n medii hipertone se ratatineaz. Protoplatii provin din
bacterii Gram-pozitive.
Sferoplatii
sunt,
de
asemenea,
forme
bacteriene
create
artificial
prin ndeprtarea parial a peretelui. Peretele lor este lipsit de murein, ns conine
lipide. Datorit acestor lipide sferoplatii iau aspect sferic. Sferoplatii provin din
bacterii Gram-negative.
Rolurile peretelui bacterian:
a) Asigur forma bacteriei.
b) Asigur rezistena bacteriei la presiunea osmotic intracelular, de 16-25 atmosfere.
5

c) Are
rol
n
diviziunea
bacteriei,
participnd
la
formarea
septului
transvers.
d) Este sediul antigenelor care pot induce un rspuns specific (umoral sau celular) n
organismul n care ptrund bacteriile.
e) Este sediul unor receptori pentru ataarea altor celule (microfage, macrofage) sau a unor
proteine plasmatice (opsonine) i pentru fixarea unor virusuri (bacteriofagi).
f) Are rol important n patogenitatea germenilor, fiind sediul unor factori de patogenitate.
Membrana citoplasmatic. Membrana citoplasmatic (numit i membrana celular sau
membrana plasmatic) reprezint bariera dintre interiorul i exteriorul celulei. Are
grosimea de 50 i o structur obinuit de mozaic fluid. Membrana citoplasmatic are
permeabilitate selectiv. Sistemul de transport electronic, principalul sistem energetic al
celulei, este localizat la nivelul membranei citoplasmatice, fiind sediul respiraiei
bacteriene.
Mezozomii sunt invaginri complexe ale membranei citoplasmatice, observate la
majoritatea bacteriilor.
Pot avea form vezicular, tubular sau lamelar. Funcia lor nu este bine cunoscut, dar
se presupune c, fiind n contact cu nucleul prin captul lor intern, de aici pornete
semnalul de diviziune a nucleului. Acest semnal se declaneaz n momentul
n care raportul suprafa/volum se modific n favoarea volumului.
Componentele citoplasmatice. Principalele componente citoplasmatice sunt ADN-ul,
ribozomii i vacuolele. Citoplasm este un sistem coloidal dens, omogen ce conine
proteine, enzime, lipide, sruri minerale, pigmeni, glucide, vitamine.
Structura intracitoplasmatic variaz cu vrsta bacteriei. Citoplasm celulei tinere are
un aspect omogen, iar a celulei btrne are un aspect vacuolar.
l. ADN-ul. Celula bacterian nu are o membran nuclear, aspect caracteristic al celulelor
procariote.
a. ADN-ul nuclear este concentrat n citoplasm sub forma unui nucleoid. Nucleoidul este
format dintr-o molecul de ADN dublu-catenar, circular,cu un diametru de 20 i
o lungime de l mm, numit cromozom. Existena unui singur cromozom confer
caracterul de organism haploid bacteriei.
b. n anumite bacterii, n citoplasm exist i ADN extracromozomial
structuri numite plasmide), de asemenea circular, dar cu o molecul mult mai scurt
dect a ADN-ului cromozomial. Plasmidele conin n general gene implicate n rezistena
la antibiotice (factorul R) sau n codificarea altor funcii nevitale.
2. Ribozomii. Sunt structuri complexe compuse din ARN i proteine. Au un diametru de
aproximativ 20 nm. a. Coeficientul de sedimentare al ribozomilor bacterieni este 70 de
uniti Svedberg (70 S), ca la orice celul procariot. Funcia ribozomilor este de sintez
a proteinelor. Antibiotice precum streptomicina, tetraciclin i cloramfenicolul inhib
sinteza
de
proteine
n ribozomii bacterieni.
3. Granule de depozit (vacuole i incluziuni). Conin diveri metabolii de natur organic i
anorganic, care fie folosesc ca material necesar proceselor anabolice, fie sunt produse de
catabolism. Prezena lor i cantitatea n care se gsesc variaz n raport cu tipul de
bacterie, cu vrsta i cu activitatea metabolic. Citoplasm celulelor btrne nu mai este
omogen, ci devine granular prin acumularea unui numr mare de vacuole.
6

C. Structuri externe. Capsula, flagelii i pilii sunt structuri ce se gsesc n afara nveliului
bacterian. Sunt structuri facultative.
1.Capsula, nvelete unele bacterii, fiind nveliul situat cel mai la exterior. Este de natur
mucopolizaharidic, cel mai adesea; la unele bacterii capsula este de natur
mucoproteic, fiind compus din D-aminoacizi. n coloraia obinuit cu albastru de
metilen apare necolorat, ca un halou n jurul bacteriei sau grupului de bacterii.
Reprezint un factor de patogenitate. Antigenele capsulare au o mare specificitate.
2. Cilii i flagelii. Sunt prezeni la numeroase bacterii i reprezint un organ
de locomoie. Reprezint organe de micare i snt caracteristici bacteriilor baciliforme.
Lungimea lor depete considerabil lungimea celulei bacteriene. Flagelii pornesc de la
corpusculul bazai, dispus n citoplasm, i ies la suprafaa celulei. Viteza deplasrii
bacteriilor depinde de numrul i dispoziia flagelilor, de vrsta bacteriilor i influena
factorilor mediului exterior. Flagelul bacterian este compus dintr-un singur tip de protein,
numit flagelin. Flagelina este o protein contractil. Flagelinele reprezint antigeni cu
mare specificitate.
Unele bacterii au un singur flagel monotrih, altele prezint un mnunchi de flageli situat
la un pol al celulei- amfitrihi,la doi poli lofotrihi, iar altele prezint flageli (cili) pe
toat suprafaa - peritrihi.
3. Pilii. Sunt fibre proteice ce acoper complet suprafaa bacteriilor Gram- negative.
Pilii sunt de dou feluri: comuni i sexuali. Pilii comuni au originea la nivelul membranei
celulare i strbat peretele bacterian. Pilii comuni, numii i fimbrii, sunt compui dintr-un
singur tip de protein, cu molecula n form de filament helicoidal. Pe aceti pili exist
receptori ce recunosc numai anumite structuri din organism. Au rol n aderena bacterian
i, prin aceasta, intervin n patogenitate.
Pilii sexuali (factorul F). Sunt implicai n conjugarea bacterian, permind trecerea
materialului genetic de la o bacterie la alta. Au deci rol n mecanismele de variabilitate
genetica.
4. Sporul. Reprezint o form de rezisten prezent doar la anumite specii bacteriene
(de ex. la familia Bacillaceae). Forma sporului este sferic sau ovalar. Formarea sporului:
n jurul nucleului bacterian se dispun structuri ce conin H2O legat (dipicolinatul de Ca),
conferind o rezisten deosebit la variaiile de temperatur i la uscciune. n funcie de
specie, rezist la temperaturi de peste 100 C timp de 2-3 ore, n condiii favorabile sporul
germineaz trecnd n forma vegetativ.
Structurile sporului (de la exterior spre interior): exosporium, peretele sporal, cortexul
sporal (alctuit din lamele concentrice), ADN-ul cromozomial, sporal.
Rolul sporului este de a asigura perpetuarea speciei bacteriene n condiii nefavorabile, bacteria
trecnd n forma de rezisten - sporul. Nu are rol n multiplicare sau patogenitate.
4.METODA MICROSCOPIC DE DIAGNOSTIC.
Studiaz morfologia i structura bacteriilor, precum i caracterele lor tinctoriale
1. n stare nativ (preparate umede, necolorate: ntre lam i lamel, pictur suspendat). Studiaz
morfologia, mobilitatea bacteriilor, unele activiti (ex.: sporogeneza)
2. n frotiuri (preparate fixate i colorate)

III. Tehnici de colorare

Caracterele morfologice ajut identificarea germinilor. Acestea pot fi observate la microscopul
optic cu ajutorul frotiurilor preparate din produse patologice sau culturi bacteriene ce
7

se depun pe o lama de sticl, se usuc i se coloreaz. Caracterele morfologice se pot

modifica n condiii nefavorabile, n condiii optime, la celulele tinere caracterele se
pstreaz.
A. Coloraia cu albastru de metilen
Este o coloraie simpl, utilizndu-se un singur colorant. Se face n mod obligatoriu
pentru frotiurile efectuate din produse patologice deoarece prezint unele avantaje:
1. Poate evidenia germenii extracelulari, dar mai ales pe cei intracelulari.
2. Evideniaz germenii ncapsulai.
3. Pune n eviden relaiile dintre germeni i elementele figurate din produs.
B. Coloraia Gram
Se folosete n mod obligatoriu n diagnosticul bacteriologic. Este o metod complex cu
doi colorani i un decolorant, numit tehnica diferenial. Etapele coloraiei Gram se
deruleaz astfel:
1.Pe frotiul fixat se pune VIOLET DE GENIAN (colorant bazic) timp de
l minut. La sfritul acestui timp toi germenii vor fi colorai n violet.
Majoritatea bacteriilor au afinitate puternic pentru coloranii bazici, excepie
fcnd mycobacteriile i spirochetele.
2. Se adaug LUGOL care are rol de mordant (fixator de culoare).
3. Se scurge lugolul i se adaug un amestec de ALCOOL cu ACETON n
scopul decolorrii. Decolorarea dureaz 7-8 secunde.
Bacteriile cu un coninut mare de murein n perete (70-80%) rezist la decolorare, ns
cele cu un coninut mic de murein i mare de lipide se decoloreaz.
4. Urmeaz splarea cu ap de robinet.
5. Urmeaz recolorarea cu FUXIN 10% timp de l minut. Fuxina, colorant
rou, va recolora bacteriile decolorate.
6. Se spal lama cu ap, se usuc i apoi se examineaz la microscopul optic.
Bacteriile colorate n violet sunt Gram-pozitive, iar cele colorate n rou
sunt Gram-negative.
C Coloraia Ziehl-Nielsen
Mycobacteriile (bacilul tuberculozei, bacilul leprei) au n compoziia peretelui bacterian
acid micolic care le confer impermeabilitate pentru colorani. De aceea nu se pot colora
cu tehnica Gram.
Pentru aceti germeni, numii AAL (acid-alcoolo-rezisteni) se folosete o tehnic
special, coloraia Ziehl-Neelsen.
( l ) Se acoper lama n ntregime treime cu FUXIN concentrat i se nclzete de 3
ori l flacra pn la apariia vaporilor de ap, cu pauze de cate 2 minute.
2 ) Se scurge Fuxiua si se spal lama cu apa
(3) Urmeaz decolorarea cu soluie ACID-ALCOOL, timp de 2 minute.
(4) Se spal lama cu ap.
(5) Se recoloreaz cu ALBASTRU DE METILEN.
(6) Se spal lama cu ap, se usuc i apoi se examineaz la microscopul optic.
Comentariu: La sfritul timpului (2) toi germenii sunt colorai n rou, chiar i
mycobacteriile (la cldur acidul micolic din compoziia peretelui bac teri an devine
permeabil pentru fuxin).
La decolorare, la rece mycobacteriile vor fi impermeabile, deci nu se vor decolora. Toi
ceilali germeni, Gram-pozitivi sau Gram-negativi, se vor decolora, iar apoi se vor colora n
8

1.
2.
3.
4.
5.
1.

2.
3.
4.
1.
2.

3.
4.
5.
6.
7.
8.

albastru cu albastru de metilen. Imaginea la microscop ne prezint mycobacteriile de culoare

roie, pe un fond albastru.
D. Evidenierea granulelor de volutin dup metoda Neisser
Pe frotiul fixat n flacra arztorului se aplic pe 1-2 min albastru dup Neisser.
Se vars colorantul i se aplic cteva picturi soluie de Lugol pe 1 minut.
Preparatul se spal cu ap i se absoarbe excesul cu hrtie de filtru.
Suplementar se recolorarea cu soluie de hrizoidin sau vizuvin pe 2-3 minute.
Preparatul splat cu ap, uscat, se examineaz la microscop cu imersia.
E. Coloraia Burry Hinss cu evidenierea capsulei
Pe lama portobiect se aplic o pictur de tu diluat de 10 ori, n ia se diluiaz o pictur de
cultur, care se repartizeaz uniform pe toat suprafaa frotiului (exact ca i frotiul de snge),
apoi se usuc la temperatura camerei.
Preparatul se fixeaz prin metoda chimic cu ajutorul alcoolului sau clorurii de mercur, apoi
se spal cu ap.
Se aplic fuxina Pfeiffer timp de 3-5 minute, atent se spal cu ap i se usuc.
Se microscopiaz cu imersie.
J. Coloraia sporilor dup metoda Aujeszky.
Produsul microbian n pictur groas este expus la o margine de lam.
Pe frotiul uscat la temperatura camerei se toarn cteva picturi de soluie de acid clorhidric
0,5% i se nclzete 1-2 minute pn la apariia vaporilor, dup ce se vars excesul de acid
de pe preparat.
Preparatul se spl cu ap, se absoarbe excesul de ap i se fixeaz n flacra arztorului.
Se acoper lama cu soluie de fucsin Zeihl. Se nclzete n flacra arztorului pn la
emitere de vapori.
Se decoloreaz frotiul repetat cu alcool clorhidric (acid sulfuric 5%) pn rmne incolor
(cca 2 min).
Se spal abundent lama cu ap de robinet.
Se recoloreaz 3-5 minute cu soluie de albastru de metilen Loeffler.
Preparatul se spl cu ap, se absoarbe excesul de ap i se examineaz la microscop cu
imersia.
Bibliografie:

De baz:
1. Ch.Piatkin, Iu. Krivoein, Microbiologie, Ed. Lumina, Chiinu, 1993.
2. F.K Cerches, L.B.Bogoiavlenscaia, N.A.Belscaia Microbiologia, Chiinu, tiina, 1994.
3. Petru Galechi, Dumitru Buiuc, tefan Plugaru Ghid practic de microbiologie medical,
.I.P. tiina Chiinu, Editura tehnic Bucureti, 1997.
Suplimentar:
1. G.M.ub (sub redacia) Bazele bacteriologiei, virusologiei i imunologiei medicale, 2003.
2. Lucia Debeleac, M.C.Popescu Drnda, Microbiologie, Editura medical AMALTEA,
2003.
3. .. .
4. Buiuc D., Negu M., Tratat de microbiologie clinic, Bucureti, 1999.