BUN VENIT SI SUCCES IN NOUL AN

UNIVERSITAR!

Microbiologie
medical

Definiii
Microbiologia = tiina care se ocup cu studiul
microorganismelor.
Microorganism = organism unicelular care poate fi
pus n eviden numai cu ajutorul microscopului optic
sau electronic.
Puse n eviden pentru prima
dat de Antonius
van Leeuwenhoek (1632-1723).

Intemeietorii microbiologiei:

Luis Pasteur (1822-1895)

- Descoper natura microbian a proceselor de fermentare

-

anormal a vinului.
Face legatura ntre bolile vinului i unele boli infectocontagioase la animale i om.
Descoper numeroi ageni etiologici ai acestora.
Realizeaz vaccinuri prin inactivarea sau atenuarea
patogenitii unor microorganisme (rabie, antrax, holera
ginilor).

- Pune bazele sterilizrii i metodicii lucrului

aseptic.

Robert Koch (1843-1910)

A descoperit noi ageni etiologici ai infeciilor
la om i animale (tuberculoz, holer, antrax).
- A examinat microorganismele n preparate
fixate prin caldur i colorate cu colorani
bazici.
- A introdus mediile solide n practica
diagnosticului microbiologic.
- A reprodus experimental boli infecioase prin
inocularea agentului etiologic la animale de
laborator.
-

Robert Koch
-

A descris secvene experimentale pentru susinerea relaiei

cauzale ntre un microorganism i manifestrile de boal
(postulatele lui Koch):
microorganismul care a determinat boala este depistat la
toi bolnavii iar distribuia n organism corespunde
leziunilor caracteristice bolii;
microorganismul care a determinat boala poate fi izolat n
cultur pur i subcultivat pentru a fi studiat;
cultura pur inoculat la un animal receptiv reproduce
boala cu leziuni specifice de unde poate fi reizolat.

Luis
Pasteur

Robert Koch

Lumea microorganismelor
-

Microorganisme cu structur celular:

eucariote, constituite din celule cu structur

evoluat: fungi i protozoare;

procariote, constituite din celule cu structur
primitiv: bacterii i alge albastre-verzi.
-

Entiti acelulare, la limita viului: virusuri (strict

parazite intracelular).

Structura celulei bacteriene

-

Structuri constante
material nuclear sau nucleoid
citoplasm
membran citoplasmatic
perete celular
Structuri facultative
glicocalix
flageli
pili comuni (fimbrii) i pili sexuali
endospor

Structura celulei bacteriene schematic

STRUCTURA
BACTERIILOR

STRUCTURI ESENTIALE:
Materialul nuclear
Citoplasma
Membrana citoplasmatica
Peretele bacterian (exceptie:

Mollicutes - Mycoplasma)

Material nuclear
echivalentul nucleului celulelor eucariote, fr

membran nuclear i nucleol;

molecul circular unic de ADN (1000-2000
m) cu structur bicatenar complementar i
antiparalel;
pentru a ocupa un spaiu ct mai redus, dublul
helix este rulat n sens negativ sub efectul ADNgirazei;
unele bacterii au n citoplasm plasmide,

molecule mici circulare de ADN care confer

avantaje selective (e.g. rezistena la antibiotice,
producerea de toxine, etc.)

Material nuclear
funcii:

- reprezint suportul genetic al caracterelor

-

ereditare;
transmite informaia genetic la celulele fiice
prin autoreplicare;
transmite informaia catre ribozomi prin
heteroreplicare;

Cromozomul bacterian i
plasmidele

STRUCTURI ESENTIALE:
Materialul nuclear
Citoplasma
Membrana citoplasmatica
Peretele bacterian (exceptie:

Mollicutes)

Citoplasma

hidrogel coloidal ce prezint:

- o faz dispersant ce conine ap, substane
organice i sruri anorganice;
- o faz dispersat reprezentat de:
ribozomi, mai mici dect la celulele eucariote
(50S i 30S), sediul sintezelor proteice;
incluzii, acumulri de substane organice sau
anorganice.

Ribozomii

Ribozomii

Sintetizarea proteinelor

STRUCTURI ESENTIALE:
Materialul nuclear
Citoplasma
Membrana citoplasmatic
Peretele bacterian (excepie:

Mollicutes: Mycoplasma, Ureaplasma).

Membrana citoplasmatic
mrginete la exterior citoplasma;
constituit din dou straturi fosfolipidice n

care floteaz molecule proteice;

nu conine steroli (excepie micoplasmele);

Membrana citoplasmatic

Membrana citoplasmatic
la b.g.n.

Membrana citoplasmatic
funcii:

- barier osmotic, cu proprieti de

permeabilitate i transport selective;

- sediul metabolismului energetic;
- include enzime implicate n sinteza unor
structuri celulare;
- rol n chimiotaxie;
- structura i funcionalitatea pot fi afectate de
unele antibiotice i dezinfectante.

STRUCTURI ESENTIALE:
Materialul nuclear
Membrana citoplasmatica
Citoplasma
Peretele bacterian (excepie: nu

este prezent la Mollicutes)

Peretele celular

structur particular celulelor procariote;

nvelete protoplastul n contact intim cu

membrana citoplasmatic;
structura sa diferit condiioneaz comportamentul
bacteriilor n coloraiile difereniale: Gram i ZiehlNeelsen;
peptidoglicanul sau mureina reprezint
constituentul de baz, constant prezent la bacterii
(excepie chlamidiile i micoplasmele).

Compoziia peretelui dicteaz comportamentul

diferit in coloraia Gram

Coloraia Gram
Gram

negativ (roii)
Gram pozitiv (violet)

Bacterii Gram pozitiv Streptococcus

(coci sferici, n lanuri)

Bacterii Gram negativ b.g.n.

(Ex. Escherichia, Salmonella) (b.g.n., celule
inflamatorii)

Coloraia Ziehl- Neelsen

(b.a.a.r i ne-a.a.r.)

Peretele bacteriilor Gram (+)

Peretele bacteriilor Gram (-)

Structura peptidoglicanului

reea macromolecular alctuit din lanuri glicanice

legate prin puni peptidice;

este mai bine reprezentat cantitativ la bacteriile grampozitive;
lanurile glicanice sunt formate din alternana a dou
aminozaharuri: N-acetilglucozamina i acidul Nacetilmuramic;
lanuri tetrapeptidice constituite din alternana unor
aminoacizi n forma L sau D se leag de gruprile
carboxil ale acidului N-acetilmuramic ;
la bacteriile gram-pozitive unitile tetrapeptidice ale
lanurilor glicanice adiacente sunt legate prin puni
transversale polipeptidice.

Peptidoglicanul - BGN bidimensional;

puntea pentaglicanica, BGP tridimensional;
puni polipeptidice

Reeaua macromolecular alctuit din

lanuri glicanice legate prin puni peptidice

L-alanine
D-glutamic acid
L-lysine/Diaminopimelic acid
D-alanine
D-alanine

Peptidoglyca
n

Muramic acid

Glucosamine

Peptidoglican- schematic

Sinteza peptidoglicanului controlat de enzime

de pe suprafaa extern a membranei
citoplasmatice
(sunt proteinele de legare ale penicilinei PLP analog
strutural de D-ala-D-ala, se fixeaz pe PLP si inhib sinteza
peptidoglicanului)

Citoplasma

Membrana celulara
undecaprenol

zahar
amino
acid

Perete celular

Sinteza peptidoglicanului

Controlat de enzime de pe suprafaa extern a

membranei citoplasmatice:
transglicozilazele, leag cele 2 zaharuri;
transpeptidazele, catalizeaz formarea subunitilor i
punilor peptidice structuri care conin dipeptidul Dalanin-D-alanin.
Peretele bacterian este ancorat n MC, prin lanurile de
glican in formare.
Enzimele care controleaz sinteza peptidoglicanului sunt
denumite: proteinele de legare ale penicilinei PLP
analog strutural de D-ala-D-ala;
Penicilina se fixeaz pe PLP si inhib sinteza peptidoglicanului penicilina face parte dintrre antibioticele care
acioneaz asupra bacteriilor prin distrugerea peretelui.

Funciile petidoglicanului

structur rigid i rezistent, previne explozia

protoplastului n medii hipotone echilibreaz

presiunea osmotic intracelular (5-20 atm);
confer forma stabil caracteristic: coci, bacili,
cocobacili, spirili, spirochete;
particip la diviziunea celular;
reprezint inta de aciune pentru lizozim i unele
antibiotice.

Interes medical
sensibilitatea

la lizozim;
este inta unor antibiotice active
asupra peretelui bacterian (e.g.
penicilinele);
are proprieti antigenice i de
adjuvant imunologic.

Forma bacteriilor

Structuri speciale ale peretelui la

bacterii gram-pozitive

acizi teichoici (legai de peptidoglican) i

lipoteichoici (legai de membrana citoplasmatic)

polizaharide neutre (antigenele Lancefield la

streptococi)

proteine de suprafa cu funcie de

- adezine (implicate n ataare) sau cu
- efect antifagocitar (proteina M, proteina A proteine de
legare la fibronectin etc)

Structuri speciale ale peretelui la

bacterii gram-pozitive

acizi teichoici (legai de peptidoglican) i lipoteicoici

(legai de membrana citoplasmatic)

apar ca structuri fibrilare pe suprafaa celulei

au urmtoarele funii:
Ag de specificitate;
leag ioni de Mg i enzime autolitice;
se ataeaz de suprafaa celulelor eucariote (factori de

ataare/colonizare);
se leag de receptori de pe suprafaa macrofagelor, cu
eliberare de citokine proinflamatorii;
prezint receptori pentru bacteriofagi (virusuri ale bacteriilor)
sau bacteriocine (antibiotice produse de bacterii);

Structuri speciale ale peretelui la bacterii

gram-negativ
membrana extern reprezentat de

2 straturi asimetrice din fosfolipide;

stratul extern care include LPS (lipopolizaharidul),
molecul complex cu trei regiuni:
lipidul A (endotoxina);
core (miez) sau Ag R de natur polizaharidic;
Ag O, cu specificitate de grup, format din uniti
oligozaharidice repetate;
lipoproteine care leag membrana extern de
peptidoglican;

Structuri speciale ale peretelui la bacterii

gram-negativ
porine, molecule proteice n triplet care
formeaz pori pentru pasajul unor molecule
hidrofile;
- proteine cu rol n transportul specific al unor
molecule (vit. B12, aa, nucleozide);
- proteine receptor pentru complexul Fesiderofor, pentru bacteriofagi sau bacteriocine;
- proteine cu rol n patogenitate (adezine sau cu
efect antifagocitar).
-

Membrana extern
* Membrana extern oprete accesul spre protoplast
a unor substane cu greutate molecular mare i a
unor molecule hidrofobe potenial nocive.
* In consecin, bacteriile gram-negative sunt mai
rezistente dect cele gram-pozitive la dezinfectante,
antiseptice, antibiotice.

Spaiul periplasmic

situat ntre membrana extern i membrana

citoplasmatic;
conine peptidoglican, lipoproteine, proteine de
transport i enzime degradative (hidrolaze, enzime de
degradare a unor antibiotice);

enzimele stocate n spaiul periplasmic sunt

eliberate dup necesiti in mediul extracelular, spre
deosebire de bacteriile gram-pozitive care le
elibereaz imediat dup ce au fost sintetizate.

Structuri speciale ale peretelui la bacterii

a.a.r.
arabinogalactan, polizaharid cu unele proprieti ale endotoxinei;
acizi micolici acizi grai cu catene lung (C70-C90)
Complexul arabinogalactan acizi micolici confer:

comportarea particular n coloraia Ziehl-Neelsen ;

rezistena la factori de mediu (desicaie, dezinfectante, antibiotice) ;

lipide de suprafa (sulfolipide, fosfolipide, cord factor), cu rol in

patogenitate; complexul lipoarabinoglican si fosfilipide, induce reacia
tisular (formarea de granuloame, metaplazierea macrofagelor n celule
gigante celule Langhans i celule epitelioide)

micozide (sunt peptidoglicolipide, glicolipide), formeaz la exterior un

nveli, ce contribuie la supravieuirea in celule fagocitare (rezistent la
enzimele lizozomale din fagolizozomul M-lor).

Bacterii cu perete modificat

protoplati (la bacterii gram-pozitive ) i sferoplati (la bacterii

gram-negative);

apar sub efectul unor ageni inhibitori ai peptidoglicanului (lizozim,

antibiotice);
pot supravieui n medii hipertone, pot fi metabolic active dar nu pot s
se multiplice;
sferoplatii, n absena agentului inductor, pot reveni la forma de
origine.

forme L

apar spontan sau sub efectul unor ageni inductori (oc osmotic sau
termic, antibiotice);
pot s se multiplice (mai lent), dnd colonii cu aspect particular ( aspect
de ou prjit);
pot fi reversibile sau stabile.

Consecine
Este posibil ca n medulara renal, sub efectul
unor antibiotice beta-lactamice s apar sferoplati
care pot explica recderi ale infeciei renale dup
ntreruperea antibioterapiei.

Glicocalix

a treia structur de nveli, constiuit din

polizaharide ( la Bacilus anthracis structur
polipeptidic);
se prezint sub dou forme:
- capsula (glicocalix dens)
- glicocalix lax (slime)
funcii:
- confer rezisten la fagocitoz i ageni chimici
(complement, antibiotice);
- ligant la receptorii de pe suprafaa celulelor
eucariote;
- Ag de specificitate (Ag K).

Structura celulei bacteriene

-

Structuri constante
material nuclear sau nucleoid
citoplasm
membran citoplasmatic
perete celular
Structuri facultative
glicocalix
flageli
pili comuni (fimbrii) i pili comuni
endospor

Flageli

structuri filamentoase lungi i subiri, de natur proteic

(flagelina);
constituii din filament flagelar flexuos, articulat printr-un croet
la corpusculul/complexul bazal - cilindru axial asociat cu unul
sau dou perechi de inele (la gram-pozitivi: inelul M si S,
respectiv gram-negativi: inelele M si S, la care se adaug P i L);
M- flotant in ME, S supramembranar; P n stratul de
peptidoglican; L flotant n ME
numrul i dispoziia flagelilor reprezint un caracter taxonomic;
confer mobilitate bacteriilor (bacili, vibrioni, spirili,
spirochete);
prezint Ag cu specificitate de tip (Ag H).

FLAGELI (ME)

Fimbrii (pili comuni)

structuri fibrilare , mai scurte dect flagelii,
prezeni pe toat suprafaa unor bacterii
gram-negative;
constituite din subuniti proteice (pilina);
ader la receptori specifici celulari
(importani factori de colonizare);
pot funciona ca Ag specifice.

Pili sexuali

structuri fibrilare n numr mai redus, mai lungi

dect flagelii, cu extremitatea liber butonat;
au rol n transferul ADN prin conjugare.

Endospor

celul bacterian inactiv metabolic, cu citoplasma

deshidratat, protejat de structuri de suprafa
suplimentare (cortex, tunic, exosporium);
protoplastul deshidratat conine cantiti mari de
dipicolinat de Ca (confer termorezistena);
sporul este deosebit de rezistent la factori de
mediu (ageni fizici i chimici);
prezena, forma i dispoziia sporului constituie
criteriu taxonomic;
poate germina n condiii favorabile de mediu,
genernd bacteria de origine.

Sporularea versus
germinarea
Sporularea

-transformarea bacteriei
n spor n stare deshidratat,
supravieuire ndelungat.
Condiii favorabile germinarea: este
activat o autolizin a cortexului;
apa i nutrienii dufuzeaz spre
protoplast rehidratare ruperea
nveliurilor sporale eliberarea
bacteriei sub form vegetativ.

Patogenitatea bacteriilor
Patogenitate = ansamblul proprietilor biologice
ale unui microorganism care i permit s determine
nbolnvirea gazdei
Clasificarea bacteriilor n raport de patogenitate
- nepatogene (prezena lor nu determin nbolnviri)
- nalt patogene sau patogene primare (determin cel

mai frecvent nbolnviri la gazda normoreactiv dar

lipsit de aprare specific)

- condiionat patogene sau oportuniste (prezente pe

suprafeele de nveli, pot determina nbolnviri cnd
apar disfuncii ale barierelor de aprare antimicrobian
variaia genetic le confer factori de patogenitate)

Atributele majore ale unei bacterii

patogene

transmisibilitatea = posibilitatea de a
trece de la o gazd la alta;
infectivitatea = abilitatea de a
ptrunde, de a persista prin depirea
sau neutralizarea barierelor i
mecanismelor antimicrobiene, de a se
multiplica i de a invada el nsui sau prin
produsele sale organismul gazdei;
virulena = capacitatea
microorganismului de a vatama gazda.

Transmisibilitatea conferit de

- prezena endosporilor ce asigur indefinit supravieuirea

-

n condiii nefavorabile (specii Bacillus i Clostridium);

rezistena la condiii de desicaie ( Mycobacterium
tuberculosis, Staphylococcus aureus, Corynebacterium
diphtheriae etc);

- supravieuirea i chiar multiplicarea n medii umede

-

minimale nutritiv (specii din familia Enterobacteriaceae,

Pseudomonas aeruginosa);
adaptarea la transmiterea direct ( ex. transmitere sexual)
sau prin vectori biologici (artropode hematofage) n cazul
speciilor extrem de fragile n mediul extern ( Neisseria
gonorrhoeae, Treponema pallidum, specii Rickettsia, Borrelia).

Infectivitatea
1. Depirea barierelor externe de aprare
- discontinuiti ale tegumentului;
- discontinuiti ale stratului de mucus (la nivelul
plcilor Peyer);
- producere de neuraminidaz (determin hidroliza
stratului de mucus);
- producere de ureaz care neutralizeaz bariera
acid gastric (H. pylori, H. heilmannii);