FUNDAMENTO

La cromatografa por adsorcin es una tcnica de separacin e

identificacin selectiva de sustancias qumicas, su principio es la
diferente retencin que experimentan los componentes de una mezcla,
al ser ms o menos adsorbidos por los elementos de una fase
estacionaria (adsorbente de carcter polar) situada en una columna y
cuando son arrastrados por un fluido (Eluyente) apolar. Se utiliza con
fines analticos (identificacin de sustancias) y preparativos (de
aislamiento).

OBJETIVOS
-Entender el funcionamiento de la cromatografa por adsorcin
-Realizar el perfil de elucin para comprobar que esta tcnica fue til y
satisfactoria en la separacin de Azul de Metileno y Fluorescena.

RESULTADOS:
Tabla 1. Valores de Absorbancia obtenidos para la separacin de Fluorescena
y Azul de Metileno.

Volumen de elucin

Fluorescena

Azul de Metileno

(ml)

A493

A668

0.003

0.009

1.740

12

0.852

15

0.445

18

0.083

21

0.038

24

0.029

27

0.048

30

0.011

33

0.010

36

0.009

39

0.014

42

0.011

45

0.004

48

0.012

51

0.005

54

0.004

57

0.082

60

0.005

63

0.008

66

0.007

69

0.013

72

1.556

0.008

75

1.531

0.006

78

0.656

0.019

81

0.240

0.168

84

0.166

0.049

87

0.051

0.007

90

0.038

0.0041

93

0.027

0.005

96

0.012

0.022

99

0.012

0.013

Perfil de Elucin de Fluorescena y Azul de Metileno

2
1.8
1.6
1.4
1.2
Absorbancia

Fluorescena A493

Azul de Metileno A668

0.8
0.6
0.4
0.2
0
Volumen (ml)

Grafica 1. Perfil de Elucin segn datos obtenidos.

DISCUSIN DE RESULTADOS:
Procedimos a la separacin de una mezcla compuesta de dos colorantes,
azul de metileno y fluorescena por lo que empleamos almina como
adsorbente.
En base al perfil de elucin, se observa en la grfica que, los puntos
mximos de cada curva no se traslapan, lo que nos indica que la
separacin de ambos colorantes fue realizada de manera satisfactoria.
En las lecturas realizadas en el espectrofotmetro a una longitud de
onda de 668 nm con el Azul de Metileno, se aprecia un mximo a los 9
ml y a partir del volumen de 21 ml y hasta el final de la determinacin
se observan algunos picos en la absorbancia, pero que no representan
un valor significativo. Recordemos que en este tipo de cromatografa de
adsorcin las fases mviles ms fuertes (mayor poder de elucin) son las
ms polares, mientras que los disolventes apolares o poco polares son
dbiles (poco poder de elucin). As pues empleando el agua destilada
como fase mvil el azul de metileno es el nico analito eluido mientras
que la fluorescena es fuertemente retenida por la fase estacionaria.
En la segunda lectura a 493 nm para la fluorescena, se aprecia que en
los primeros volmenes obtenidos no existe una absorbancia como tal y
comienza a presentar un incremento real a los 72 ml y al pasar de los
87 ml fue disminuyendo; para la elucin se utiliz el regulador de
fosfatos (K2HPO4) como fase mvil, ya que el mismo modifica las cargas
de las almina cida llevando a esta a la neutralidad provocando que las
interacciones entre la fase estacionaria y la fluorescena disminuyan
considerablemente lo que permite el paso del colorante travs de la
columna. Esta longitud de onda fue utilizada, debido a que la
fluorescena presenta su mxima absorbancia a 493 nm.
El hecho de que los analitos hayan sido coloreados nos permiti ver el
ensanchamiento de la banda cromatogrfica conforme desciende a lo
largo de la columna.

CONCLUSIONES:
Se entendi el funcionamiento de la cromatografa por adsorcin gracias
al perfil de elucin lo que nos indico en que punto ocurri dicho
aislamiento, por lo que el proceso de separacin entre el Azul de
Metileno y la Fluorescena se llevo acabo de forma adecuada. Tambin
ser importante considerar la afinidad que presentan los componentes
de la mezcla a separar con la fase mvil; adems de elegir el eluyente
correcto.

PREGUNTAS EXTRAS
1.Especifique
y
defina
los
elementos
cromatogrfico para esta separacin.

del

Sistema

Soporte: Columna de vidrio su funcin es la de retener la fase

estacionaria.

Fase estacionaria: Sustancia que esta fija en la cromatografa;

es este caso utilizamos Almina cida (pH5).

Fase mvil: Son las sustancias que se mueven a travs de la

columna de forma definida. Para este procedimiento utilizamos
agua destilada (H2O) y Regulador de fosfatos (K2HPO4).

Muestra (Analito): Sustancia que se pretende separar, el analito

fue una mezcla con azul

2.- Defina el termino de adsorcin y empleando formulas,

esquematice las fuerzas intermoleculares participan en el
proceso de separacin.
Se define como la tendencia de un componente del sistema a
concentrarse en la superficie de un adsorbente provocado por fuerzas de
atraccin como Van Der Waals, cargas parciales, cargas formales y
tambin
por
enlaces
qumicamente
puros.

Azul de Metileno

Fluorescena

3.- Considerando las propiedades de solubilidad de los

colorantes. Indique que modificaciones hara para invertir el
orden de elucin.
Se puede realizar un cambio de eluyente, invirtiendo el orden; de este
forma la almina no interactuara con la fluorescena y saldra en primer
lugar cambiar el tipo de adsorbente por almina bsica ya que23233
no interaccionara con la fluorescena y esta eluira primero; por lo tanto
el azul de metileno quedara en la fase estacionaria debido a las
interacciones fsicas con la almina.

SNTESIS DEL LIBRO EL PERIQUILLO SARNIENTO

El Periquilo Sarniento es el personaje principal; sus paps lo convierten
en una persona floja, hipcrita y soberbia. Pues desde que naci, ellos le
daban todo lo que l quera y decide convertirse en fraile para ganar
dinero sin trabajar pero no le gust porque tena que hacer muchas
actividades y ayunar, por lo decide fingir estar enfermo para salir del
convento.

Cuenta que gast el dinero de su pap en fiestas, y aunque su mam le

deca que deba cambiar, a l no le importo. Para ganar dinero, se
aprovecha de las personas o se lo gana robando o engaando, lo meten
a la crcel como consecuencia de las malas amistades, ah conoce a
Antonio y se hace su amigo, y l lo ayuda. Mas adelante un escribano le
pide que trabaje para l y lo ayuda a salir de la crcel, tambin se hace
pasar por doctor, pero es descubierto. Periquillo se casa con Mariana,
pero su matrimonio fracasa porque se le acaba el dinero e ignoraba
mucho a su esposa. Ella y su hijo se mueren mientras daba a luz,
desesperado busca ayuda con sus amigos, pero todos se la niegan.
Periquillo encuentra ms trabajos para ganar dinero, pero siempre los
perda por ser flojo y aprovecharse de las personas. Se arrepiente de
todo lo que ha hecho y se emborracha. Trata de suicidarse, pero no
puede Y Una persona de la tercera edad se compadece de l y le ayuda.
Casi al final busca ms ayuda, pero sus amigos se la niegan. Periquillo
visita a Pelayo, su amigo sacerdote, y se confiesa con l y le ayuda a
mejorar su vida y a ser honesto; poco tiempo despus se casa y tiene
hijos, y escribe su historia para que a sus hijos no les pase lo mismo que
a l.
Nos da a entender que en la vida nunca es tarde para enderezar el
camino y la lectura de este libro me resulto muy provechosa, pues a
pesar de que estamos en una poca llena de tecnologas uno se da
cuenta que la ideologa y costumbres del mexicano no han cambiado
mucho por lo que es aconsejable no tomar a la ligera los consejos de las
personas mayores.
"Slo se ve bien con el corazn; lo esencial es invisible para los
ojos"
Antoine de Saint-Expery
Siempre hay un camino cuando se sabe mirar con los ojos de la
inteligencia.
Kalimn
BIBLIOGRAFA:
Castellan, G. W. 1974. Fisicoqumica. Mxico, 818 pp.
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/Cromatografia.pdf
P. Molina Buen Da, Universidad, Secretariado de Publicaciones.
Prcticas de Qumica Orgnica, 22 pp.

Fernndez de Lizardi, J. Joaqun. El Periquillo Sarmiento. Editorial Esfinge. Primera

edicin. 1993. Mxico.