REZUMAT

Importana farmaceutic a speciei Digitalis lanata Ehrh. a fost stabilit la

nceputul secolului XX, cnd s-a constatat c frunzele acesteia sunt mai bogate n heterozide
cardiotonice dect cele de Digitalis purpurea, la ora actual, costituind materia prim de baz
din care se extrag glicozidele digitalice (Ciulei, 1993).
Frunzele de degeel lnos (Digitalis lanata) nu se utilizeaz ca atare, sub form
proaspt sau uscat, ci servesc ca materie prim pentru extragerea unor principii active, care
intr n componena unor medicamente administrate n insuficiena cardiac, avnd o aciune
tonifiant asupra miocardului.
Lanatoglicozidele sunt de 3-5 ori mai active dect purpureaglicozidele, obinute
din Digitalis purpurea, efectul lor este de o durat mai scurt, eliminndu-se mai rapid din
organism.
n prezent, toate medicamentele cardiotonice, la noi n ar, se obin numai din
frunzele de Digitalis lanata, industria noastr produce o gam larg de astfel de produse:
Lanatozid C, Nidactil (acetil digitoxin), Digoxin (desacetil lanatozid C) i altele, derivate ale
acestora.
Gama larg de medicamente cardiotonice este necesar nu numai pentru a avea la
ndemn preparate care acioneaz mai rapid sau mai lent, cu efecte de mai scurt sau de
lung durat, ci i pentru a se putea continua tratamentul atunci cnd apar fenomene de
intoleran.
Frunzele de digital au i o aciune diuretic datorit prezenei n compoziia lor a
saponozidelor i flavonelor, efectul cardiotonic i diuretic persistnd timp de aproape dou
sptmni dup administrarea preparatelor.
Frunzele proaspete, recoltate naintea nfloririi plantelor, se utilizeaz i n
tratamente homeopatice: n primul rnd ca remediu cardiotonic, dar i n afeciuni ale

aparatului urinar, retenia de ap din organism, contra depresiei nervoase, a tulburrilor de

somn, migrenelor, hepatitei, icterului i prostatitei.
Din frunzele de degeel (Folium Digitalis) se prepar tinctura, extractul uscat i
infuzia, aciunea terapeutic a preparatelor, datorndu-se complexului de glicozide
cardiotonice, digitoxina, gitoxina i gitaloxina. n literatura de specialitate exist numeroase
procedee de extracie a glicozidelor, oficializat de Farmacopea Romn sau din alte ri.
Teza de doctorat cu titlul ,,Contribuii la studiul efectului unor ageni
mutageni chimici asupra unor caractere morfo-fiziologice i biochimice la degeelul
lnos (Digitalis lanata) este extins pe 186 de pagini i este format, n conformitate cu
prevederile legale actuale, din dou pri principale i cuprinde cinci capitole, la care se
adaug introducerea, rezumatul, bibliografia, tabele, figuri i grafice.
Prima parte reprezint o sintez a datelor bibliografice cu privire la tema tezei de
doctorat, la cadrul natural, condiiile climatice din anii de experimentare, materialul i
metodele de cercetare, iar cea de a doua parte prezint rezultatele cercetrilor proprii, cu
privire la subiectul tezei de doctorat.
n urma documentrii, am constatat c literatura de specialitate strin este destul
de bogat n ceea ce privete cercetrile privind sistematica, tehnologia de cultivare i
compoziia chimic a acestei plante.
n Romnia, cercetrile referitoare la ameliorarea speciei Digitalis lanata Ehrh.
sunt ns modeste.
Avnd n vedere importana speciei Digitalis lanata Ehrh., ne-am propus s
inducem o variabilitate mai mare a principalelor caractere morfo-fiziologice i a celor
biochimice, prin utilizarea unor mutageni chimici, prin tratamente asupra seminelor i n
perioada de vegetaie, la nivelul meristemelor apicale, n diferite concentraii i timpi de
expunere.
n afar de sporirea cantitii de frunze/plant (producia de drog), principalul
criteriu de selecie, n vederea obinerii unor forme noi, va fi cel chimic, respectiv cantitatea
de glicozide cardiotonice.
n urma tratamentelor cu ageni mutageni chimici, s-au studiat, efectele acestora,
funcie de concentraiile folosite, asupra unor caractere morfo-fiziologice i biochimice:
apariia unor modificri morfologice ale plantelor de degeel (mrimea i forma frunzelor,
numrul frunzelor n cadrul rozetei la plantele din anul I de vegetaie, greutatea frunzelor
proaspete i a acestora dup uscare), indici biochimici (azotul aminic liber, zaharuri totale,

zaharuri reductoare i izoenzime) i indici fiziologici (activitatea catalazei, durata perioadei

de vegetaie, rezistena la boli i duntori etc).
Pe parcursul anilor 2007-2010, s-au efectuat cercetri i observaii care au
urmrit:
- creterea variabilitii speciei Digitalis lanata Ehrh. prin inducerea unor mutaii
cu ajutorul substanelor chimice;
- comportarea unor mutante n vederea identificrii de forme biologice valoroase,
n ceea ce privete productivitatea i coninutul ridicat n principii active;
- determinarea fazelor de cretere i dezvoltare a plantelor n condiiile pedoclimatice din zona Moldovei.
- evaluarea efectului indus de substanele chimice, asupra particularitilor morfofiziologice i biochimice la speciei Digitalis lanata Ehrh.
Materialul biologic a fost reprezentat de soiul de degeel lnos Lanata 1, creat de
Silva, F., (1974), la S.C.P.M.A. Fundulea. Soiul a fost omologat n anul 1974 i renregistrat
n anul 1999 n Catalogul Oficial al Soiurilor de Plante de Cultur din Romnia.
Seminele din soiul Lanata 1 au provenit de la Societatea Biofarm natura
naturans Biculeti Curtea de Arge.
Soiul Lanata 1 este caracterizat printr-un polimorfism destul de accentuat sub
aspectul unor caractere morfo-fiziologice, produce n jur de 1600 kg/ha frunze uscate, cu un
coninut mediu de 0,21% lanatozid C, depind cu aproape 55% coninutul mediu n acest
principiu activ, populaiile locale de degeel lnos.
Materialul biologic, respectiv seminele de degeel lnos au fost tratate cu trei
substane chimice, n cte patru concentraii fiecare: acidul 2,4 D (0,01%, 0,02%, 0,03% i
0,04%), bromura de etidium (0,01%, 0,02%, 0,03% i 0,04%) i colchicina (0,01%, 0,02%,
0,03% i 0,04%) .
Tratamentele au fost aplicate la semine, cu timp de aciune de 3, 6 i respectiv 12
ore, nainte ca acestea s fie semnate n cmp. Chimiosensibilitatea s-a studiat n laborator,
prin efectuarea ctorva teste referitoare la capacitatea de germinare a seminelor.
Investigaiile citogenetice au fost realizate pe meristeme radiculare obinute prin
germinarea seminelor, iar preparatele microscopice au fost obinute prin metoda elaborat de
Feulgen n anul 1924 (rdea, 2003).

Cu ajutorul metodelor citogenetice, pe parcursul experimentelor, s-a determinat

frecvena i spectrul aberaiilor n ana-telofaza mitozei i s-a evideniat intensitatea diviziunii
celulare sub aciunea substanelor mutagene prin calcularea indicelui mitotic.
Cercetrile citogenetice s-au realizat n laboratorul de Genetic al USAMV Iai.
Studiul chimic calitativ i cantitativ al frunzelor, s-a realizat pe extracte
metanolice i diclormetanice, prin cromatografie n strat subire i HPLC, la cele 9 linii
reinute n urma seleciei n cadrul INCDSB/CCB ,,Stejarul Piatra-Neam.
Studiul chimic calitativ a apelat la cromatografia pe strat subire pentru trei grupe
de principii active importante din punct de vedere farmacologic:
flavonoide
acizi fenolici
compui triterpenici
Determinarea procesului de biosintez a glucidelor din frunze a urmrit
evidenirea capacitii de adaptare la mediu i diferenele evideniate ntre variantele de
tratament n urma aciunii substanelor chimice mutagene.
n cazul cercetrilor enzimatice, determinarea activitii catalazei n frunze i flori
s-a realizat prin metoda gazometric n laboratorul de Genetic al USAMV Iai.
Analizele biochimice i citogenetice, au constituit un criteriu de selecie a celor
mai bune linii care s poat fi propuse ulterior spre omologare i recomandare n producie.
Datele obinute n urma observaiilor i determinrilor efectuate au fost prelucrate
statistic conform modelelor consacrate, menionate n literatura de specialitate.
Sensibilitatea la agenii mutageni a speciei Digitalis lanata Ehrh., s-a determinat
n trei repetiii, prin calcularea procentual a energiei germinative i a ritmului de cretere a
rdcinielor i tulpinielor.
Semnificaiile diferenelor dintre variantele tratate i martor au fost determinate
prin metoda diferenelor limit (DL 5%, 1% i 0,1%).
Pentru interpretarea datelor experimentale privind efectul agenilor mutageni
asupra caracterelor morfo-fiziologice i biochimice din punct de vedere statistic s-au folosit
funciile standard de statistic ale componentei Microsoft Excel a grupului de programe
Microsoft Office 10 pentru sistemul de operare Windows XP.
Pentru determinarea aciunii mutagenilor chimici asupra plantelor de Digitalis
lanata Ehrh., s-au folosit cteva teste recomandate de literatura de specialitate. Astfel, s-au
determinat modificrile rezultate ca urmare a tratamentelor cu substane chimice, asupra unor
parametri biometrici i anume: numrul de frunze pe plant, greutatea frunzelor pe plant.

Din cauza numrului deosebit de mare de linii rezultate n urma tratamentelor, au

fost reinute 9 linii, considerate valoroase pentru caracterele cantitative n ceea ce privete
producia de frunze de la fiecare variant de tratament efectuat la nivelul seminei.
Elementele de biometrie analizate au prezentat variabilitate sub influena
tratamentelor aplicate fa de martorul netratat cu diferene mici nesemnificative din punct de
vedere statistic.
Activitatea catalazei a fost stimulat de cele trei substane chimice studiate, n
majoritatea cazurilor nregistrndu-se o cretere a activitii acestei enzime, exprimat n
U.C., pe msura creterii concentraiilor
n ceea ce privete efectul indus de tratamentul cu substane chimice asupra
coninutului n glucide din frunze la specia Digitalis lanata Ehrh., la toate concentraiile celor
trei substane folosite n experien, cantitatea de diglucide nregistreaz cele mai mari valori
n cazul tratamentelor aplicate la semine cu timp de aciune 6 ore.
Timpul de aciune i creterea concentraiei substanelor contribuie la diminuarea
procesului de acumulare a poliglucidelor solubile n cazul acidului 2,4 D i a bromurii de
etidium.
Cantiti apreciabile de poliglucide insolubile s-au nregistrat n cazul
tratamentelor efectuate la semine timp de 6 si 12 ore i apoi de tratamentele efectuate timp de
3 ore.
Colchicina a influenat favorabil fotosinteza iar concentraiile aplicate au avut un
rol stimulator asupra procesului fotosintetic.
Concentraia clorofilelor este corelat negativ cu cea substanelor. Acest lucru
sugereaz c la concentraii mici ale substanei, efectele toxice sunt mai puin specifice, n
timp ce la concentraii mari depind de aceasta.
Analiza coninutului n polifenoli a materialului vegetal (frunze), pentru anii 2007
i 2010, a evideniat prezena principiilor active (acizi polifenolici i flavonoide), n
conformitate cu etaloanele utilizate. Analiza cumulat a acizilor fenolici a evideniat faptul c
s-au nregistrat valori sczute ale acestui parametru comparativ cu martorul netratat doar n
cazul tratamentului cu colchicin (3 ore).
Media celor doi ani a pus n eviden n cazul tratamentelor cu colchicin (6 ore),
acumularea celei mai mari cantiti de digoxina.
Colchicina a stimulat sinteza acizilor fenolici la tratamentele aplicate pe seminte
n cazul tratamentelor de 6 ore.

Bromura de etidium a stimulat acumularea n frunze a acestor substane la

tratamentele de 3 ore, dup care s-a putut observa o diminuare a procesului de biosintez pe
msur ce timpul de acine al substanei a fost crescut (6 ore).
n concluzie, condiiile climatice ale zonei Iai satisfac cerinele degeelului
lnos fa de cldur i umiditate, i se poate afirma c din acest punct de vedere specia i
poate desfura integral ciclul de vegetaie, iar tratamentele aplicate nu au influenat fazele
de vegetaie, ele realizndu-se la toate variantele n acelai timp.