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Esterilizacin

I.

Introduccin
Se denomina esterilizacin al proceso por el cual se obtiene un producto libre de
microorganismos viables. El proceso de esterilizacin debe ser diseado, validado y
llevado a cabo para asegurar que es capaz de eliminar la carga microbiana del
producto o un desafo ms resistente.
Dado que la esterilidad no puede demostrarse de manera absoluta sin causar la
destruccin completa de todas las unidades del lote de producto terminado, se define
la esterilidad en trminos probabilsticos, en donde la probabilidad de que una unidad
de producto est contaminada es aceptablemente remota. Se considera que un
producto crtico es estril cuando la probabilidad de que un microorganismo est
presente en forma activa o latente es igual o menor de 1 en 1.000.000 (coeficiente de
seguridad de esterilidad.
Los agentes que matan microbios son denominados microbicidas (cida= matar) o
ms comnmente denominados germicidas. Si el agente especficamente destruye
bacterias, es llamado bactericida; si mata hongos es denominado fungicida. Tras una
exposicin del objeto esterilizado al aire o a sus alrededores, ste se habr
contaminado de nuevo con microorganismos.
Los mtodos trmicos de esterilizacin son comnmente los ms utilizados para
eliminar los microorganismos, incluyendo las formas ms resistentes como lo son las
endoesporas.
En definitiva es el proceso mediante el cual se alcanza la muerte de todas las formas
de vida microbianas, incluyendo bacterias y sus formas esporuladas altamente
resistentes, hongos y sus esporos, y virus. Se entiende por muerte, la prdida
irreversible de la capacidad reproductiva del microorganismo.
Se trata de un trmino absoluto, donde un objeto est estril o no lo est, sin rangos
intermedios.

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II. Requisitos de infraestructura
La Central de Esterilizacin CE debe cumplir con ciertos requerimientos
generales como contar con agua destilada o desmineralizada permanentemente que
ser usada tanto para la limpieza como para alimentar los autoclaves de vapor; los
pisos y paredes deben ser de materiales lavables, que no desprendan fibras ni
partculas; los techos debern ser construidos de manera que no queden ngulos
expuestos y presenten una superficie nica (ngulos sanitarios) para evitar la
condensacin de humedad, polvo u otras posibles causas de contaminacin.
No se permitir la instalacin de ventiladores en la CE, pues generan gran
turbulencia de polvo en el aire y tambin microorganismos que se proyectan desde
el piso a las mesas de trabajo. Es deseable que el ambiente mantenga una
temperatura estable entre 18C y 25C, una humedad relativa ambiente de 35-50%.
Mayor temperatura y humedad favorecen el crecimiento microbiano, y por debajo
de los niveles recomendados, pueden quedar afectados determinados parmetros de
la esterilizacin, como la penetracin del agente esterilizante.
II.1. Seccin de acondicionamiento, empaquetamiento, preparacin y
esterilizacin
A esta seccin ingresarn los objetos completamente limpios y secos.
Aqu, el instrumental y los equipos son revisados para velar por su
limpieza, integridad y funcionalidad. El trnsito de las personas ser
estrictamente controlado, y slo quien est adecuadamente vestido
ingresar al rea. Los dispositivos, las cajas de instrumentos, la ropa, etc.
son preparados para el proceso de esterilizacin. Debe tener: pisos y
paredes lavables, sillas, lupas para confirmacin de la limpieza, lavamanos
para el personal, estante para mantener el material no estril.
II.2. Seccin de almacenado del material estril
A esta seccin ingresar nicamente el equipo o instrumental estril,
envuelto, para ser colocado en estantes abiertos o armarios cerrados. Todos
los paquetes estriles deben ser almacenados a una distancia mnima de 30
centmetros del piso. El trnsito de las personas est prohibido, y slo el
personal autorizado y adecuadamente vestido ingresar al rea. Debe
tener: Pisos y paredes lavables, armarios para guardar el material despus
del proceso de esterilizacin, antes de la entrada contar con un lavamanos
para el personal.
II.3. rea de apoyo
Esta seccin debe estar constituida, al menos, por: Un vestidor, para el
cambio de la ropa de calle, resguardo de la misma y de los objetos
personales. Un rea de depsito de los productos qumicos, detergentes y
productos de limpieza. Esta rea debe contar con una pileta adicional para
el lavado de los accesorios utilizados en la limpieza del ambiente

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II.4. Transporte y procesamiento de instrumental contaminado crtico o

semicrtico.
Los instrumentos contaminados deben ser manejados con cuidado para
evitar lesiones percutneas (en piel no intacta, o membranas mucosas de los
ojos, nariz y boca), para lo cual deben ser colocados en recipientes
inmediatamente despus de su uso para su posterior transporte al rea de
procesamiento.
El procesamiento de instrumentos requiere mltiples etapas para conseguir la
esterilizacin o desinfeccin de alto nivel. La esterilizacin es un proceso
complejo que requiere de equipo especializado, infraestructura fsica
adecuada, personal calificado que reciba formacin continua permanente y
un seguimiento regular para el aseguramiento de la calidad.
La correcta limpieza, embalaje, procedimientos, mtodos de carga del
esterilizador, esterilizacin o mtodos de alto nivel de desinfeccin se deben
seguir para asegurar que un instrumento est debidamente procesado y
seguro para su reutilizacin en los pacientes.
II.5. Limpieza y descontaminacin
II.6.
La limpieza debe preceder a cualquier tipo de desinfeccin y proceso de
esterilizacin, debe involucrar la remocin de desechos, as como la
descontaminacin orgnica e inorgnica. La eliminacin de los desechos y la
descontaminacin se logra ya sea por lavado con un agente tensoactivo,
detergente y agua; si el residuo visible o la materia orgnica o inorgnica, no
se elimina, interferir con la inactivacin microbiana y puede poner en
peligro el proceso de desinfeccin o esterilizacin.
Despus de la limpieza, los instrumentos deben ser enjuagados con agua para
eliminar el residuo qumico o detergente. Las salpicaduras deben
minimizarse durante la limpieza y desinfeccin. Antes de la desinfeccin o
esterilizacin definitiva, los instrumentos deben ser manejados como
contaminados.
Si la limpieza no se realiza inmediatamente, los instrumentos se mantendrn
en remojo en un recipiente con tapa resistente a la puncin con detergente, o
un limpiador enzimtico evitando as el secado del material y facilitando la
limpieza y ahorrando tiempo. El lavado del instrumental se realizar con un
cepillo de mango largo para mantener las manos lejos de los instrumentos y
para evitar lesiones por instrumentos cortantes. Los instrumentos
cortopunzantes reutilizables (fresas, limas, etc.) deben depositarse en
contenedores diferentes del recipiente donde se deposita el resto del
instrumental, de no poseer estos contenedores debe contar con pinzas para
retirar estos elementos.

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II.7.

Preparacin y Empaque

Este procedimiento se llevar a cabo en la seccin de empaque

dispuesta para este fin, all debe verificarse que los instrumentos y otros
suministros se encuentren perfectamente limpios y se clasifican para su
empaque, teniendo en cuenta que cuando un paquete es abierto y expuestos
al aire, eventualmente puede contaminarse, porque permite la exposicin al
polvo y organismos transportados por el aire, perdiendo por tanto su estado
estril.
No olvidar que los instrumentos articulados deben empacarse abiertos y
desbloqueados. Los materiales de empaque deben ser diseados para el tipo
de proceso de esterilizacin que utiliza.
Entre ellos encontramos: envolturas de esterilizacin tejidos y no tejidos,
bolsas plsticas o de papel, recipientes, cubetas de instrumental perforadas
que permiten la penetracin del agente de esterilizacin y mantienen la
esterilidad del material procesado despus de la esterilizacin y durante su
transporte y almacenamiento.
Todo paquete debe presentar un control de exposicin, una identificacin o
rotulado del contenido, servicio, lote, caducidad e iniciales del operador.
Esta etapa comprende la inspeccin y verificacin de los artculos, la
seleccin del empaque, el empaque propiamente dicho, el sellado, la
identificacin del paquete y la evaluacin del mismo.
a. Materiales de empaque
El material de empaque debe: cumplir con las normas nacionales,
internacionales u otra normativa vigente a la fecha, ser adecuado para el
mtodo de esterilizacin usado, debe permitirla penetracin del agente
esterilizante, confiable, no ser un vehculo bacteriano, durable, eficiente
al usar, a prueba de integridad, resistente a la abrasin, rotura y
humedad, repelente al agua, resistente a los lquidos, fcil de abrir,
flexible, estar libre de perforaciones, an las ms pequeas, estar libres
de toxinas o colorantes, ni desprender pelusas o fibras, no reaccionar con
el agente esterilizante, permeable al agente esterilizante, no reaccionar
con el material que se empacar, no desprender olor, econmico y
disponible. El uso de tambores metlicos, papel de diario y envoltorios
de material reciclado estarn prohibidos.

b. Criterios para seleccionar un sistema de empaque

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El propsito principal que debe alcanzar cualquier material para
envolver es, bsicamente, el de contener los objetos, mantener la
esterilidad de su contenido y facilitar su presentacin asptica. Al mismo
tiempo, debe ser econmicamente efectivo.
Existen algunos factores a tener en cuenta para la seleccin del sistema
de empaque a utilizar
-

Para calor hmedo

Se recomiendan los siguientes envoltorios como pueden ser
- cajas organizadoras metlicas con perforaciones.
- cajas organizadoras metlicas con filtro.
- cajas plsticas con perforaciones y termorresistentes.
- cajas organizadoras plsticas con filtro y termorresistentes,
- frascos y tubos de vidrio con tapn de gasa y papel, papel grado
mdico, bolsas doble faz papel grado mdico/polietileno, tejido
140 hebras/pulgada2 o algodn doble, polipropileno y
policarbonatos y papel crepado.

c. Elementos utilizados para el empaque

Material de empaque a utilizar:
- Cinta adhesiva de control qumico externo.
- Indicador o integrador qumico interno.
- Protectores de instrumentos cortopunzantes.
- Selladora en el caso de utilizar empaques mixtos.
- Empaques mixtos o simples de polietileno.
d. Modelos de empaque
Se reconoce mundialmente la confeccin manual de los siguientes
modelos para el empaque de los productos de uso mdico:
- Tipo sobre: para elementos pequeos, redondeados y livianos. La
apertura se hace sobre la mano del operador.
-

Tipo rectangular: para elementos grandes y pesados (cajas de

instrumentos y paquetes de ropa). La apertura se hace sobre la mesa.

Bolsas de papel: existe un considerado rango de tamaos que

requieren plegarse y sellarse con cinta o por sellado con calor por
medio de mquinas. Deben ser de papel grado mdico, con fuelle
que facilite la apertura asptica, poseer la cara interna satinada, si
posee testigo qumico impreso, debe ser indeleble al vapor. El
adhesivo de las bolsas debe ser resistente a los procesos de
esterilizacin.

Mangas o papel ventana (papel - film): Es un empaque que tiene

slo un frente transparente y se encuentra sellado a un papel por

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accin del calor. Pueden estar formados por polister y polietileno, o
polister y polipropileno.
e. Identificacin del paquete o rotulado
El rotulado debe ser claro, fcil de interpretar y conocido por los
usuarios debe estar identificado con los siguientes datos:
-

Nombre del responsable

Nombre del contenido
Nmero de la carga
Fecha de esterilizacin
Fecha de caducidad

La adecuada rotulacin del paquete permite una identificacin de la

carga almacenamiento, perodo de caducidad y posibilidades de rastrear
los paquetes esterilizados en caso que ocurran problemas de orden
tcnico con el equipamiento o algn evento infeccioso atribuido a la
falla del proceso de esterilizacin.
Se pueden usar para ello etiquetas adhesivas o cinta adhesiva, cdigo de
barras o una etiquetadora manual. Se debe establecer un sistema de
registro de almacenamiento y distribucin de los artculos y todos los
usuarios deben conocer este sistema de registro.
III.

Tcnicas de Esterilizacin
Para esto contamos con procedimientos fsicos o qumicos. Estos ltimos ya han
sido vistos al considerar los desinfectantes de alto nivel. Los procedimientos fsicos
se dividen en energticos y mecnicos.
Dentro de los primeros se encuentran: el calor y las radiaciones, dentro de los
segundos, la filtracin.

III.1.

Destruccin de microorganismos mediante calor.

La energa trmica es la forma ms efectiva de esterilizacin. Esta puede

utilizarse como calor hmedo o seco.

III.1.1. calor hmedo

Al igual que los procesos de desinfeccin, la esterilizacin trmica
destruye a los microorganismos en forma gradual; es por esto que no hay
un nico mecanismo de accin, sino ms bien la suma de distintos eventos

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complejos que se van sucediendo a medida que aumenta la temperatura.
As, aunque el efecto final de la esterilizacin por calor hmedo a 121C es
la desnaturalizacin y coagulacin de las protenas, son importantes otros
mecanismos de destruccin, que justifican la utilizacin de calor hmedo a
temperaturas inferiores, como veremos ms adelante.
El primer efecto letal sera la produccin de rupturas de cadena nica en el
ADN que provocaran la muerte celular por activacin o liberacin de
enzimas con actividad de endonucleasas. El punto crtico aqu, para la
supervivencia de la clula sera su capacidad para reparar la lesin, funcin
que depende del estado gentico y fisiolgico de la bacteria.
A medida que aumenta la temperatura se agregara la prdida de la
integridad funcional de la membrana citoplsmica, lo que producira
interferencias en el intercambio con el medio externo, los procesos
respiratorios y la sntesis proteica. Por ltimo, las temperaturas ms
elevadas activaran ribonucleasas que degradando el ARNr producen la
prdida de viabilidad de las clulas expuestas.
Las temperaturas a la cual puede usarse el calor hmedo son: Por debajo
de 100C - pasteurizacin A 100C - ebullicin y tindalizacin Por encima
de 100C - autoclavado y pasteurizacin lo cual se utiliza para la
destruccin de grmenes patgenos, con resistencia trmica similar o
inferior a M.tuberculosis, Brucella y Salmonella.
a. Autoclavado
Se utiliza vapor de agua a 121C durante 15'o 20'. Esta temperatura se
logra si se obtiene una presin de una atmsfera relativa (dos
atmsferas absolutas), ya que el aumento de la presin provoca
aumentos proporcionales en el punto de ebullicin del agua. Es el
mecanismo de destruccin microbiana ms efectivo, y bien utilizado
asegura esterilizacin. El equipo que se utiliza es la autoclave, del cual
existen distintos tipos, como son:
- Vertical de manejo manual.
Consta de dos recipientes cilndricos, uno externo con tapa de cierre
hermtico que se asegura por mltiples tornillos y uno interno donde
se pone el material a esterilizar. El recipiente externo contiene
adems, una vlvula de seguridad, un manmetro o termmetro y
una llave de salida o escape. La fuente de calor puede venir incluida
en el
equipo, como una resistencia elctrica o se le suministra
aparte desde
abajo, generalmente mediante gas.
- Que opera por gravedad.
Son equipos elctricos, automticos o manuales. El vapor se produce
dentro de una doble pared y se libera desde la parte superior de la
autoclave, de manera de desplazar por gravedad el aire hacia abajo, y
promover su escape por una llave de salida inferior. Como

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precaucin debe introducirse el vapor lentamente para que no se
caliente el aire
al salir. Luego del purgado, las etapas son iguales a
las de la autoclave vertical.
- De esterilizacin rpida.
Son automticos y consiguen un ciclo de esterilizacin en 20'. Si
bien en sus partes fundamentales son similares a los anteriores, su
funcionamiento es diferente. Poseen una bomba de vaco que extrae
rpidamente el aire del equipo. De este modo se reduce la presin;
cuando esta llega a 15 o 20 mmHg, se libera el vapor, que en estas
condiciones se distribuye en forma homognea por todo el espacio
en breves minutos. En estas autoclaves, se puede reducir el tiempo
de esterilizacin a 3' ya que se puede llevar la presin a 3 Atm.
absolutas (134C).

Mediante el autoclavado se pueden esterilizar una gran variedad

de objetos y lquidos, siempre que no contengan por Ej.: antibiticos
que pueden perder actividad, protenas que coagulen, azcares que se
caramelicen, etc. As se esterilizan guantes, telas, algodn, papel,
lquidos, filtros, algunos plsticos y gomas, etc.
Los lquidos a esterilizar deben estar fraccionados en frascos cerrados
pero con la tapa de rosca floja, de modo que pueda salir el aire y entrar
el vapor.
Aquellos materiales que no se encuentren dentro de algn recipiente
que los proteja de la re contaminacin al sacarlos del autoclave,
debern ser envueltos con una doble capa de papel, de manera de
formar pequeos paquetes; entre estos objetos se encuentran: guantes,
ropa, placas de Petri, pipetas, tubos de ensayo, etc.
Se debe de tener cuidado de no sobrecargar el autoclave, de manera tal
que los paquetes y frascos impidan el flujo libre del vapor.

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No se deben esterilizar por este mtodo equipos que resulten corrodos
por el agua como instrumentos metlicos. Tampoco polvos o aceites
ya que son impermeables al vapor

III.1.2.Calor Seco
El mecanismo de accin es diferente al del calor hmedo. El calor
seco (o desecacin en general) provoca desnaturalizacin de protenas,
lesiones por oxidacin y efectos txicos por niveles elevados de
electrolitos. La accin letal es el resultado del calor trasmitido desde el
material con el cual los microorganismos estn en contacto, y no desde el
aire caliente que los rodea.
Existen tres formas principales de esterilizacin por calor seco: flambeado,
incineracin y mediante la utilizacin del horno Pasteur. Hablaremos
solamente de esta ltima. Para ello se necesita alcanzar mayor tiempo y
temperatura que en el autoclave, debindose mantener un objeto a 160C
durante 2hs. El motivo de estos incrementos estaran dados porque la
ausencia de agua disminuira el nmero de grupos polares de las cadenas
peptdicas, lo que dara mayor estabilidad a las molculas bacterianas, por
lo que se requerira mayor energa para abrirlas.
a. Horno Pasteur o Poupinell
Consiste en un recinto metlico de doble pared con aislante entre
ambas (para evitar la prdida de calor) y una puerta. La fuente de calor
suele ser elctrica y est incorporada. Posee un ventilador que facilita
la circulacin del aire caliente, para homogeneizar la temperatura. Un
termmetro (con alcance mnimo de 200C) visible desde afuera,
registra la temperatura del interior del recinto. Por calor seco se pueden
esterilizar: materiales de inyectables, vidrios, instrumentos quirrgicos
y objetos metlicos, as como aceites, vaselinas y polvos, que como ya
se ha dicho son impermeables al vapor.
-

Precauciones
Colocar paquetes pequeos y espaciados, para no interferir con la
difusin del calor.
La recarga del horno debe hacerse cuando este se encuentre fro, de
lo contrario su interior alcanzar la temperatura antes que el
material a esterilizar, por lo que se medir mal el tiempo.

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Principales Caractersticas de los Mtodos de Esterilizacin por

Autoclavado y Poupinell

III.2.

Esterilizacin por Radiaciones

Con este fin pueden utilizarse tanto las radiaciones ultravioletas (UV)
como las ionizantes y rayos infrarrojos. Con respecto a la naturaleza de la luz se
acepta una combinacin entre la teora cuntica y la electromagntica. Es decir,
que existe una partcula indivisible (denominada cuanto) constituida por un
fotn que se desplaza a travs del espacio describiendo una trayectoria
ondulatoria La energa de un fotn es inversamente proporcional a la longitud de
onda de la radiacin, sabiendo que longitud de onda es la distancia que existe
entre dos puntos correspondientes de la trayectoria ondulante. Parte de esta
energa es absorbida por los sistemas biolgicos cuando estos son expuestos a las
radiaciones. La fraccin de energa absorbida es directamente proporcional a la
intensidad de la radiacin, al tiempo de exposicin a la misma y a un coeficiente
de absorcin que es caracterstico de cada material.
Veremos qu sucede a nivel molecular cuando las radiaciones interactan con la
materia. Cuando la radiacin incidente tiene energa suficiente puede elevar el
nivel energtico de los electrones, hasta el punto de arrancarlos de su orbital
(producindose ionizaciones). Si la energa es menor, los electrones aumentan su
nivel de energa pero slo temporalmente, volviendo a su estado inicial luego de

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un perodo de tiempo. Este estado elevado de energa se denomina estado
excitado. La molcula excitada podr transferir ese exceso de energa a otras, en
forma de energa vibratoria (producindose calor); o disiparla en forma de
radiacin electromagntica. Debido a la relativamente baja cantidad de energa
que son capaces de transmitir los rayos UV, slo afectan a los electrones de los
tomos perifricos de las molculas, producindose solo estados de excitacin.
- Las radiaciones ionizantes son las que pueden extraer electrones de sus
orbitales. - Los rayos infrarrojos slo pueden provocar energa vibratoria, por lo
que slo
generan calor.
a. Radiaciones UV
Mecanismo de accin: el principal mecanismo del efecto letal de la luz
UV sobre las bacterias, se atribuye a su absorcin por el ADN y el resultante
dao de este.
As provocan la formacin de uniones covalentes entre los residuos de
pirimidina adyacentes pertenecientes a la misma cadena, lo que provoca la
formacin de dmeros de pirimidina de tipo ciclobutano. Esto produce
distorsiones en la forma del DNA e interfiere en el apareamiento normal de
las bases.
El resultado final es la inhibicin de la sntesis de ADN y secundario a esto,
inhibicin del crecimiento y la respiracin.
-

Aplicaciones
Estas radiaciones pueden producirse artificialmente con lmparas de
vapor de mercurio. Son igualmente efectivas para Gram (+) y Gram(-).
Su principal uso es para esterilizar el aire y superficies, ya que no
penetran en slidos y lo hacen pobremente en lquidos.
Se utilizan para la esterilizacin de materiales descartables como
jeringas, agujas, materiales para vas, etc.

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III.3.

Controles de esterilizacin

a. Controles fsicos
Estn relacionados al operario que realiza el procedimiento y la
vigilancia de ciertos parmetros como: presin, tiempo, temperatura, etc.
b. Controles qumicos
Consiste en tiras de papel con una sustancia que cambia de color al ser
expuesto a la temperatura correspondiente. La ventaja de este mtodo, es la
rapidez con que se sabe el resultado, ya que es inmediato. La gran
desventaja es que dice poco sobre el tiempo de exposicin, por lo que no
asegura un procedimiento correcto. Estos controles deben utilizarse en todos
los ciclos de esterilizacin
c. Controles biolgicos
Consisten en exponer esporos bacterianos al ciclo de esterilizacin y
luego verificar su viabilidad. Son los ms seguros.
Dentro de una ampolla se encuentra un medio de cultivo apropiado para el
desarrollo de las bacterias en estudio. Por fuera de esta, un tubo plstico,
contiene una cinta de papel marcador de pH, impregnado con esporos de
bacterias capaces de resistir temperaturas cercanas a los procesos realizados.
Se utilizan esporos de Bacillus estearothermophilus en el autoclave y de
B.subtilis en la poupinell.
Este sistema se coloca dentro del paquete menos accesible ya sea para el
calor o el vapor. Finalizado el ciclo de esterilizacin, se rompe la ampolla
(por presin manual sobre el tubo), esto pone en contacto el medio con los
esporos) y se incuba en un bao (a 60C para Bacillus estearothermophilus y
a 37C para B.subtilis) durante ms de 48hs.
Si existen microorganismos viables, su metabolismo provocar un cambio
de pH que har virar el color del marcador, revelando el fallo del
procedimiento, por lo que deber volverse a esterilizar todo. Este tipo de
controles debe realizarse peridicamente, o cuando se dude de la efectividad
del procedimiento.
d. Almacenamiento y vencimiento del material esterilizado
El almacenamiento debe cumplir los siguiente tems

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Lugar seco, limpio y libre de polvo.
Alejada de reas sucias o contaminadas.
Temperatura ambiental recomendada entre 18 y 22c
Humedad ambiental 35%- 59%.
Evitar sol directo, calor excesivo, humedad exagerada.
Evitar corrientes de aire.
Revestimientos deben ser lisos, lavables y de bordes redondeados.
Aire filtrado con filtro mnimo de 80% eficiencia.
Renovacin de aire: 10 recambios por hora.
La duracin de los elementos estriles, tiempo de confiabilidad de la
conservacin de la esterilizacin, depende directamente de las
caractersticas del empaque, el lugar de almacenamiento, condiciones de
transporte, y de manipulacin de los productos estriles.
El material esterilizado manejado y almacenado incorrectamente, durar
estril solo un instante.