UNIVERSITATEA DE TIINE AGRONOMICE I MEDICIN VETERINAR

BUCURETI

DISCIPLINA: CRETEREA BUBALINELOR

TEM PROIECT: BIOTEHNICI DE REPRODUCIE

Profesor coordonator: Livia Vidu

Student: Deliu Marian; Petrea Ctlin

CUPRINS

1.

2.

3.

4.

5.
6.
7.

1.Caracterele biologice ale bubalinelor .3

1.1. Caracterele morfologice.3
1.2. Caractere anatomo-fiziologice...3
1.3. Caractere reproductive...3
2.Caracteristici i particulariti ale fiziolgiei
reproduciei..4
2.1. Masculii.4
2.2. Femelele.....4
3.Managementul activitii de reproducie al bubalinelor..5
3.1. Programarea activitii de reproducie.
.5
3.2. Sisteme de mont i ftri...6
Biotehnologia identificrii femelelor n clduri i stabilirea momentului optim al
nsmnrii....6
4.1. Identificarea femelelor n clduri....7
4.2. Metode de identificare.....7
Biotehnica recoltrii materialului seminal la bivol.7
5.1. Pregatirea taurului pentru recoltare.....8
5.2. Recoltarea materialului seminal cu ajutorul vaginului artificial.........8
Biotehnologia inoculrii materialului seminal la bivoli..9
6.1. Istoricul nsmnrilor artificiale.....11
6.2. Inocularea spermei, metode de inoculare..12
Biotehnica transferului de embrioni la bubaline......13
7.1. Importana zooeconomic.14
7.2. Tehnica transferului...14
7.3. Criterii de alegere a donatoarelor..17
Bibliografie...20

CARACTERISTICILE BIOLOGICE ALE BUBALINELOR

Caracterele morfologice ale bubalinelor

Sub aspectul nfirii bubalinele prezint urmtoarele caractere:

dezvoltare corporal mare;

format corporal scurt;
profil corporal specific ( cap mare, coarne semilunare orientate napoi i n lturi, fruntea
larg i bombat, fa mai lung ca la taurine, maxilare puternice, gt subire i fr salb,
trunchi scurt dar adnc, membre solide ) ;
pielea foarte groas, cu structura specific ( lipsit de glande sudoripare )i glandele
sebacee dezvoltate;
pr scurt, rar i gros.

Caractere anatomo-fiziologice ale bubalinelor

tardivitate i longevitate ridicat ( dezvoltarea corporal de adult o atinge la 6-7 ani i

longevitatea pn la 30 de ani );
dimorfism sexual slab dezvoltat;
caracterul blnd dar uor iritabil i ncpnat ( se supune greu omului i se freest de
oameni necunoscui );
rusticitatea, rezisten la boli i sntatea sunt remarcabile ( se mbolnvete foarte rar de
tuberculoz i febra aftoas);
mecanismul de termoreglare este mai slab ( reacioneaz necorespunztor la cldur
extrem i frig );

Caracterele reproductive ale bubalinelor

vrsta de introducere la reproducie este mare ( 24-36 de luni);

durata de folosire la reproducie este ridicat ( 12-20 de ani la femele i 10 ani la
masculi);
durata gestaiei este lung (10,5-11 luni);
ftri eutocice i unipare;
intervalul ntre ftri mare ( 18-20 de luni);

CARACTERISTICILE I PARTICULARITILE FIZIOLOGIEI REPRODUCIEI

Masculii
3

La turmacii din tipul de balt, lungimea scrotului este n jur de 10 cm cnd este complet extins i
lipsit de constricie n punctul de ataare la planeul abdominal.
La turmacii de tipul riveran scrotul este mai voluminos i mai atrnnd, la locul de prindere
continundu-se cu o uoar trangulare.
Cu mas inferioar de peste 5 ori fa de tauri, testiculele au la turmaci cca 78g ( 75g cel stng i
79g cel drept ), cu diametrul tubului seminifer ntre 0,17 i 0,2 mm. n stare de relaxare,
testiculele atrn n sacul scrotal cu axa longitudinal orientate perpendicular pe lungimea
corpului i care, prin contractarea muschiului Cremaster, i modific orientarea cranio-caudal.
Menionm c la bivolii indieni testiculele coboar n scrot nainte de natere iar la celelalte
populaii testiculele coboar pn la vrst de 6 luni.
Penisul este cilindric i foarte bogat n esut erectile cu vrful ascuit i glandul slab dezvoltat.
Maturitatea de reproducie se realizeaz destul de trziu, vrst de utilizare la reproducie
prezentnd variaii foarte largi de la o ar la alt, fiind influenat ndeosebi prin tehnologia de
cretere.
Vrst de utilizare la reproducie n medie este de 3,7 n Egipt; 3,6 ani n Pakistan i India; n jur
de 2 ani n Italia iar n Romnia variaz ntre 2,6 ani i 3 ani.
n ceea ce privete via efectiv de reproducie a turmacilor este raportat o reducere apreciabil
a potenei dup vrst de 6-7 ani i o scdere pronunat a apetitului sexual dup 12 ani.
Ca mod de utilizare pentru monta natural un turmac deservete ntre 50 i 100 de bivolie ns
este recomandat c incatura de femele s fie mai redus, suprasolicitarea avnd ca efect
diminuarea calitativ a materialului seminal i respectiv reducerea ratei de concepie.

Femelele
Dei asemntor vacilor organul genital la bivolie prezint unele diferene importante n ceea ce
privete centura pelvin i structura vascular a acesteia, dimensiunea i masa diferitelor
segmente ale aparatului reproductiv.
Maturitatea sexual sau vrsta pubertii reprezint momentul n care femela este capabil s
produc gamei fecundabili. Din punct de vedere biologic, aceast poate fi definit n funcie de
diferite criterii, astfel:

sub raportul comportamentului sexual, care este marcat de apariia primului estru la
femele i de dorina de mperechere la masculi;
n funcie de apariia i producerea primului gamet;
n raport cu starea de steroidogeneza, marcat de apariia primei secreii de estrogeni.
4

Maturitatea de reproducie, echivalent cu vrst de utilizare la reproducie este o nsuire cu

implicaii nemijlocite asupra intervalului dintre generaii i a economicitii n exploatare. Cu
durata diferit, vrst de utilizare la reproducie a tineretului femel din Egipt este de 2-2,5 ani, n
Italia 28-30 de luni, n Bulgaria 30-33 de luni iar n Romnia 28 de luni.

Particularitile ciclului sexual la bivolie

Bivoliele se caracterizeaz printr-o activitate sexual poliestric, ciclic, structural pe aceleai 4
faze c la taurine, a cror caracteristici i semnificaii sunt asemntoare. n mod obinuit, durata
ciclului sexual este n jur de 21 de zile cu limite ce variaz n funcie de zona geografic:

Egipt 21,4 zile;

Thailanda 20-28 de zile;
Malaiezia 28-30 de zile;
Bulgaria 21 de zile.

MANAGEMENTUL ACTIVITII DE REPRODUCIE

Programarea activitii de reproducie

Una din msurile pentru sporirea efectivelor o reprezint utilizarea managamentului strategic
corespunztor particularitilor de reproducie a bubalinelor n reproducia bivolielor i al
tineretului femel. Un management eficient trebuie s aib la baz sistemul de programare stabilit
n funcie de o serie de factori i anume: baza tehnico material, de structura pe stri fiziologice a
efectivului matc, nivelul de producie urmrit i cerinele economiei de pia.
Organizarea i planificarea reproduciei n fermele sau cresctoriile de exploatare a bivolielor
urmrete obinerea unor producii mari i ct mai uniforme pe ntreag perioada a anului fiind
posibil atunci cnd 80% din efectivul matc este n perioada de producie iar peste 50% sunt
femele gestante.

Programarea activitii de reproducie a bivolielor i a tineretului femel

Coordonarea activitii de reproducie se realizeaz prin elaborarea anual a planului de monte i
ftri n care se are n vedere starea fiziologic a fiecrui individ. Planul de mont-nsmnri
5

artificiale se stabilete pe baza catagrafiei, pe categorii de vrst, iar n cadrul acestora pe

categorii ginecologice.
Catagrafia reprezint lucrarea tehnic anual cu ajutorul creia se fundamenteaz i elaboreaz
planul de monta i produi pentru anul urmtor. Derularea normal a activitii de reproducie
presupune stabilirea sistemului de programare a montelor i produilor, stabilirea momentului
optim de nsmnare, urmrirea i pregtirea materialului de reproducie.
Se cunosc dou sisteme de programare a bivolielor la mont i respectiv la ftare: sistemul de
mont i ftri sezoniere i sistemul de monte i ftri ealonate.
Sistemul de mont i ftri sezoniere
Acest sistem se aplic la bubalinele din tipul de balt, la cele pentru munc i la cele exploatate
pentru producia de carne. n cadrul acestui sistem planificarea montelor trebuie s fie fcut,
astfel nct ftrile s fie concentrate n perioada martie-iunie ( 70-75% ), cnd furajele din
cursul verii asigur punerea n valoare a capacitii fiziologice dedicate pentru secreia de lapte.
Acest sistem este indicat n fermele din zona deluroas i premontan care practic ngrarea
tineretului n sistem extensiv pe pune. Acest sistem de programare asigur i alte avantaje cum
ar fi valorificarea eficient a masei verzi i producii mai mari de lapte i ieftine.

Sistemul de monte i ftri ealonate

Acest sistem se aplic la bubalinele din tipul riveran, la cele din rasele ameliorate, n general la
cele exploatate pentru producia de lapte.
Acesta presupune programarea la mont i ftare a cte 20-30% din bivolie n fiecare trimestru
al anului adic meninerea n tot cursul anului a 80% din bivolie n lactaie i 20% n repaus
mamar. Acest sistem de programare a montelor i ftrilor asigur avantaje economice ( venituri
suplimentare n timpul iernii prin livrarea laptelui, economii la investiii pentru construcii ).
Reducerea procentului de bivolie n lactaie sub 70% indic deficiene n activitatea de
reproducie.
Sistemul de monte i ftri ealonate este recomandat n fermele i n cresctoriile cu baz
furajer adecvat, care pot asigura raii echilibrate, femelelor n lactaie i gestante pe tot
parcursul anului, precum i adposturi corespunztoare pentru malaci.

IDENTIFICAREA FEMELELOR N CLDURI I STABILIREA MOMENTULUI

OPTIM AL NSMNRII
6

Identificarea femelelor n clduri trebuie fcut cu mare grij pentru a evita pierderile de ciclu
care se pot ridica la peste 20%. Apariia i modul de manifestare a cldurilor sunt influenate de
condiiile de cretere i exploatare, dar i de starea de sntate a femelelor. Pentru depistarea
femelelor n clduri este necesar s se cunoasc timpul, locul, metodele i procedeele de
depistare. Timpul de manifestare al cldurilor este n medie de 16 ore i se recomand s se fac
dou observaii zilnice a cte 30 de minute, dimineaa i seara.
Pentru depistarea femelelor n clduri se folosesc metode biochimice, etologice, bilologicochimice i de laborator.

Metode biochimice

se bazeaz pe modificri anatomo fiziologice ce apar n timpul cldurilor. Mucoasa

vaginal se nroete i se edematiaza, vulv se nroete i din ea se scurge un lichid
sticlos, ugerul este edematiat, laptele i modific compoziia, scade producia.

Metode etologice
se bazeaz pe modificri comporamentale, animalele sunt nelinitite, devin atente la
zgomote, sunt uor speriate, mugesc frecvent, urineaz des i n cantitate mic, apetit
capricios, sete pronunat, inconvoaie spinarea, mic i ridic coada, fac micri
caracteristice actului sexual i accept saltul.

BIOTEHNICA RECOLTRII MATERIALULUI SEMINAL LA BIVOL

Recoltarea materialului seminal la bivol se face prin mai multe metode, printre care:
7

Recoltarea materialului seminal cu ajutorul vaginului artificial

- este o metod folosit cu succes n prezent, fiind folosit n centrele de nsmnri artificiale
ct i pe teren.
Principiul metodei const n realizarea artificial a condiiilor existente n vaginul natural al
femelei n clduri ( temperatura, presiune, lubrifiere ), condiii necesare pentru declanarea
reflexului de ejaculare.

Tehnica de lucru
Pentru recoltarea materialului seminal cu vaginul artificial este necesar efectuarea urmtoarelor
operaiuni: pregtirea vaginului artificial, pregtirea taurului, recoltarea propriu zis,
dezinfectarea materialelor folosite i a slii de recoltare.
Pregtirea vaginului artificial necesit o atenie deosebit deoarece numai un vagin corect
pregtit poate s realizeze condiiile existente n vaginul natural.

Aceast pregtire conine mai multe etape:

dezinfectarea vaginului artificial- se face prin autoclavare timp de 15 minute la presiune

de 1 atmosfer;
introducerea apei calde- apa trebuie s aib temperatura de 45-50 de grade Celsius;
fixarea paharului colector- se introduce prin orificiul paharului colector de ap cald i se
astup orificiul cu un dop de cauciuc;
lubrefierea cmii vaginale- se face la captul opus paharului colector, respectiv la
captul prin care taurul v-a introduce penisul;
introducerea aerului- se face prin dopul metalic al orificiului prin care s-a introdus ap
cald;

luarea temperaturii- se ia cu ajutorul termometrului care se fixeaz ntre dou falduri

formate de peretele interior al cmii vaginale. Temperatura trebuie s fie ntre 39-42
grade Celsius.

Componentele vaginului artificial: tubul vaginal, cma vaginal, inele fixatoare, paharul
colector , dispozitivul de fixare a paharului colector.

PREGTIREA TAURULUI PENTRU RECOLTARE

Operaiunea const n plimbarea taurului apoi urmat de toaleta regiunii prepuiale.

Plimbarea se face timp de 10-15 minute cu baston i inel nazal dar recomandat este ca plimbarea
s se fac cu diferite modele de carusele.
nainte de recoltare ntr-o alt ncpere regiunea furoului se spal bine cu ap cldu i spun iar
apoi se usuc. Cavitatea furoului este recomandat s fie splat cu o soluie de antibiotice cum ar
fi penicilin i streptomicin. Este necesar respectarea practic a unui regim naional de
recoltare, care s asigure meninerea potenialului de reproducie i exteriorizarea lui prin valori
corespunztoare ale parametrilor spermogramei.
Dup elaborarea etapelor de mai sus se trece la recoltarea propriu zis care presupune:
-introducerea i fixarea n stand a taurului manechin;
-aducerea taurului donator n sala de recoltare;
-taurul donator la vederea manechinului v-a executa saltul, moment n care operatorul v-a dirija
penisul taurului n vaginul artificial. Dup cteva micri taurul v-a ejacula printr-o micare
caracteristic crupei.
Alte metode de recoltare: recoltarea materialului seminal prin masajul veziculelor seminale i a
ampulelor canalelor deferente, recoltarea prin electroejaculare.
Dup recoltare, materialul seminal este supus unor serii de evaluri pentru determinarea
principalilor indicatori spermatici.
Examenul macroscopic se execut n paharul colector imediat dup recoltare, stabilind volumul
ejaculatului, culoarea, mirosul, aspectul ejaculatului.
Examenul microscopic

O monstr din totalul materialului recoltat este aezat pe suprafaa unei lamele microscopice,
apreciindu-se prezena sau absena spermatozoizilor, desimea i mobilitatea i energia de micare
a spermatozoizilor.
Conservarea spermei
Odat cu aplicarea nsmnrilor artificiale, a aprut i necesitatea conservrii spermei un timp
ct mai ndelungat n afara organismului. Sperma supus conservrii prin refrigerare sau
congelare este obinut de la masculi de mare valoare genetic, putnd fi transportat n locurile
unde este nevoie de reproductori valoroi. n vederea conservrii spermei se efectueaz diluarea
i rcirea spermei. Pentru a obine o conservare ct mai bun, aceste dou operaii trebuie fcute
n prima jumtate de ora dup recoltare. Prin diluarea spermei se urmrete pe de o parte mrirea
volumului ejaculatului(pentru a se putea nsmna un numr ct mai mare de animale), iar pe
de alt parte asigurarea pentru spermatozoizi a unui mediu nutritiv, care s asigure o pstrare ct
mai ndelungat a spermei. Mediile de dilutie trebuie s asigure condiii prielnice pentru
meninerea viabilitii spermatozoizilor. n general, diluantii sunt salini sau pe baza de lapte, n
component lor se introduce glbenu de ou.
REETE DE DILUANI:
Taur

Armsar

Ap distilat

100 g

100 g

Glucoz anhidr

1,2 g

5,76 g

Sulfat de sodiu

1,36 g

0,34 g

Pepton fr sare

0,5 g

0,2 g

Pentru sperma de taur i berbec se folosete foarte mult diluantul cu glbenu de ou i citrate de
sodiu. Pentru o bun conservare dup efectuarea dilurii spermei, amestecul este supus un timp
la o scdere treptat a temperaturii pn la +4 C. n prezent diluanii pentru sperm sunt produi
de mai multe centre sau uniti tip SEMTEST. n prezent nsmnarea artificial cu sperm
congelat se realizeaz n proporie de 80-90% la taurine i de 10-20% la rumegtoarele mici,
existnd tendina de generalizare a nsmnrilor artificiale la toate speciile de animale
domestice, inclusiv la psri.

BIOTEHNICA INOCULRII MATERIALULUI SEMINAL LA BIVOLI

10

Istoricul nsmnrilor artificiale

S-a relatat despre obinerea unui produs de la un armsar valoros (secolul XIV) dup preluarea
spermei cu un tampon de vat dup monta unei iepe i intoducerea lui imediat n vaginul unei
alte iepe n clduri.
nsmnrile artificiale reprezint o biotehnic a reproducerii animalelor, component a
manipulrilor genetice care asigura procesul genetic al efectivelor. Datorit creterii
semnificative a eficienei utilizrii materialului seminal prin aplicarea nsmnrilor artificiale
este posibil utilizarea la reproducere a celor mai valoroi genitori masculi testai dup
descenden i cu nsuiri morfo-productive care mresc presiunea de ameliorare a efectivelor.
Astfel, un taur testat, poate avea pe durata vieii ntre 100.000 i 200.000 produi , vierul, peste
1.000 ntr-un an, iar un armsar, peste 100 mnji pe sezon.
La speciile cu un interval mare ntre generaii, asocierea nsmnrii artificiale cu conservarea
prin congelare a spermei permite crearea unor bnci de material disponibile dup finalizarea la
taurii de 6 sau 7 ani, a testului de performare dup prima lactaie normal a fiicelor. n plus, peste
90% din caracterele morfo-productive, care au un determinism genetic, pot fi ameliorate prin
folosirea nsmnrii artificiale, dup stabilirea indicilor de heritabilitate. Afluirea masculilor
donatori n ferme specializate permite meninerea lor n condiii optime de sntate i ntreinere
cu producie seminal de calitate i ndemna de boli cu transmitere veneric (bruceloz,
tricomonoz , vibroza). Garantarea indemnitii spermei fa de principalele boli infectocontagioase face posibil schimbul interconditional de gene prin importul-exportul de material
seminal congelat (M.S.C) fr suportarea inconvenienelor prilejuite de carantin. Derularea
diferitelor etape de la nsmnarea artificial majoreaz substanial aportul factorului uman la
procesul reproducerii, fapt care face necesar ntocmirea i pstrarea unor evidente zootehnice
complete ,reducnd prin acestea pericolul transmiterii n descendeta a unor boli genetice.
Alte avantaje minore ale insamntarii artificiale se refer la reproducerea artificial a unor specii
monogene (vulpile) , hibridarea altor indivizi oportunand obinerea unor specii cu talie i
greutate corporal, care face posibil copulatia, reproducerea unor cini timizi sau care prezint o
erecie prematur a bulbilor perieni a celelor, care dei manifest estru i ovulatie seminal,
refuz s accepte masculii.
Dezavantajele nsmnrii artificiale constau n posibilitatea interferrii erorilor umane n toate
etapele prelucrrii, conservrii, transportului , depistrii esterului i inseminarea femelelor. Este
necesar existena unui personal nalt calificat, cu manualitate, cunotiine i care s ntocmeasc
riguros evidenele reproduciei.
Prin neglijarea profiloxiei, bolilor genetice, nsmnrile artificiale pot favoriza diseminarea
unor boli, cum ar fii boal chistic, sindromul spastic, absena libidoului i defecte de
coformatie. Inocularea artificial a materialului seminal este un procedeu care presupune
plasarea spermatozoizilor n tractusul genital femel n vederea obinerii unui produs de concepie
11

viabil, prin alte mijloace dect actul sexual propriu zis. Prin practic s-a demonstrat c cele mai
bune rezultate se obin cnd din doz de material seminal s-a inoculat n corpul uterin i n
poriunea anterioar a cervixului.
Inocularea materialului seminal la bivoli se poate realiza prin dou metode: metod cu
speculum vaginal i metod bimanual sau recto-vaginal.

INOCULAREA SPERMEI CU AUTORUL SPECUMULUI

Echipamentul necesar pentru aplicarea acestei metode este format din : speculum vaginal, model
PALANSKY, modificat de FILCOIANU, sau speculum tubular de metal, sticl sau material
plastic,prevzut cu suzeta de cauciuc (sau material plastic) i o lamp frontal . Pentru
imobilizarea bivolielor n clduri se utilizeaz un stand de nsmnri.
Tehnic de lucru const n efectuarea unei toalete sumare a vulvei i a regiunii perivulvare i
introducerea speculumului vaginal dup metod cunoscut. Prin introducerea i deschiderea
speculumului i apoi iluminarea orificiului vaginal al gtului cu ajutorul sursei luminoase se
fixeaz locul de depunere a spermei. Pipeta ce conine sperm pentru nsmnare se introduce
pe canalul cervical, pe o distan de 1-3 cm. nsminarea cervical cu ajutorul speculumului este
destul de simpl i uoar. Inconvenientul pe care-l prezint aceast metod const n faptul c
dup fiecare vac, speculumul trebuie curat i sterilizat. n cazul n care nu se face sterilizarea
specumului se pot rspndi unele boli genitale.

METODA RECTO-VAGINAL DE NLOCUIRE A SPERMEI

Ecipamentul necesar pentru aceast metod const din pipete de nsmnare i mnuile de
cauciuc, sau din material plastic. Metod recto-vaginal este foarte rspndit. Tehnica de lucru
const n introducerea minii protejate de o mnu n rectul animalului i fixarea cervixului prin
traversul rectal. Pipeta de insamntare se introduce apoi, cu cealalalta mna n vagin, i de aici
este ghidat cu ajutorul minii introduse n rect, n canalul cervical. Vrful pipetei se introduce
dirijat n sus sub un unghi de 20-30 grade , n canalul cervixului. Pentru nsuirea practic a
acestei metode este necesar o practic ct mai bun a tehnicienilor insamantatori. Aceast
metod s-a impus c o metod curent deoarece nu necesit o aparatur complicat. Pipeta de
nsmnare se schimb dup fiecare vac, iar mnuile se pot spala i dezinfecta uor. Prin
aceast metod se stimuleaz activitatea uterului i altor segmente ale organelor genitale, fapt

12

care probabil contribuie la obinerea unei fecunditi mai ridicate, dect prin metoda
speculumului.

BIOTEHNICA TRANSFERULUI DE EMBRIONI LA BUBALINE

Aspecte generale
Embriotransferul reprezint o biotehnic de reproducie care cuprinde o serie de tehnici ce
urmresc obinerea de produse din embrioni recoltai de la femele donatoare de ovule i
sincronizate n clduri care se transfer n stare proaspt sau congelat la femele receptoare cu
ciclu estral sincronizat.
Importana zooeconomic
Lucrrile lucrrile de selecie i ameliorare a efectivelor de animale sunt limitate de numrul
redus de produi care se obin de la o femel n cursul vieii sexuale i de intervalul dintre
13

generaii. Asupra animalelor valoroase ambii factori sunt frenatori, treptele ameliorrii
numrndu-se n generaii succesive.Transferul de embrioni d posibilitatea folosirii cu eficien
crescut a rezervelor de ovocite de la animale de nalta valoare zootehnic numite donatoare,
prin provocarea maturrii i eliberrii mai multor gamei femeli ( poliovulatie ) cu obinerea
unui numr mai mare de produi de la aceeai femel prin transferul embrionilor n uterul
femelelor receptoare.
Embriotransferul necesit dou perioade de gestaie. Transferul de embrioni la bivoli se afl n
stadiul de cercetare i dezvoltare, a fost printre primele cercetri care au fost efectuate de
specialiti americani, continuate de cercettori din Bulgaria i cei din Romnia.
Tehnica transferului de embrioni
Aceast necesit fluxul urmtor:

alegerea donatorilor i poliovulaia lor;

sincronizarea cldurilor;
fecundarea ovulelor in vitro prin nsmnarea artificial a donatoarelor;
prelevarea embrionilor i controlul calitii lor;
alegerea donatoarelor;

Prin donatoare se nelege femela din specia bubaline care produce embrioni dup ce a fost n
prealabil supus tratamentului hormonal ( poliovulaie sau superovulaie ) expulznd n acelai
timp mai multe ovule susceptibile de a fi fecundate.

14

C
15

RITERII DE ALEGERE A DONATOARELOR

Acestea sunt urmtoarele:

valoarea genetic -reprezint criteriul principal de selectare a donatorilor ntruct

transferul de embrioni constituie un mijloc important de intensivizare a produciei i mai
ales de maximizare a progresului genetic la bubaline;
starea de ntreinere i de sntate a bivolielor care trebuie s fie bun;
funcia de reproducie normal la bivolie att n privina aparatului genital ct i a
sistemului neuro-endocrin;
absena genelor nedorite cu deosebire letale;

Pregtirea donatoarelor const n urmtoarele :

urmrirea desfurrii parturiiei i asistarea acesteia;

executare examenului preliminar i observarea cldurilor timp de 9-14 zile;
anunarea telefonic a acestora i recoltarea unor probe de lapte n vederea examinrii lor;
aplicarea tratamentului hormonal pentru pentru inducerea poliovulaiei ( utilizarea PSMG
n doz de 500 UI/100kg sau FSH-40mg n a 10-a zi a ciclului estral sau folosirea
progesteronului n doz de 100mg/zi, timp de 10 zile urmat de tratamentul poliovular cu
PMSG sau FSH ).

Alegerea receptoarelor
Prin receptoare se nelege tineretul femel sau bivolie care nu au fost supuse transferului
hormonal pentru inducerea poliovulatiei.
Criterii de alegere a receptoarelor :

femele cu sntate bun, n special uterul neafectat i cu dezvoltare corporal optim;

femele capabile de a asigura eficient embriotransferului, echilibrate fiziologici cu
aptitudini maternale.

Dup alegerea receptoarelor sunt necesare msurile urmtoare;

organizarea de ferme MOET cu deosebire cu circuit nchis;

afluirea femelelor selectate spre fermele MOET;
aplicarea tratamentelor de sincronizare a cldurilor la donatoare i receptoare;
producerea, prelevarea, examinarea,depozitarea i conservarea embrionilor;

16

inseminarea receptoarelor cu embrioni ( cei congelai se decongeleaz ) avnd grij ca

receptoarele s se afle ntr un stadiu identic al ciclului ovarian, cu donatoarele;
ngrijirea corespunztoare i efectuarea diagnosticului de gestaie pe ct posibil mai
precoce, eventual prin ecografie.

Embrionii sunt colectai atunci cnd se gasec n cornul uterin,dup ieirea lor din oviduct (ntre
zilele 4-5). Cel mai frecvent, colectarea se realizeaz ntre zilele 6-8 dup fecundatie, de regul
n ziua a 7-a. Recoltarea embrionilor se face chirurgical i nechirurgical.
Mult timp, metoda chirurgical a fost singura utilizat. Tehnica operatorie presupunea
parcurgerea a dou etape: laparotomia, cu exteriorizarea aparatului genital n plag i recoltarea
propriu-zis a embrionilor prin splarea cu un lichid cu o compoziie special, a oviductelor
(dup un interval de timp mai mic de 3 zile dup nsmnare) sau a coarnelor uterine (dup un
interval de timp mai mare de 4 zile de la nsmnare). n prezent, metoda chirurgical de
recuperare a embrionilor la bivoli este abandonat, datorit inconvenientelor pe care le
prezint. Astzi, este generalizat metoda nechirurgical de prelevare a embrionilor, a crei
principiu const n splarea coarnelor uterine cu un mediu special preparat, splare care se
realizeaz n condiii de asepsie n a 7-a zi de la nsmnare. Tehnica nechirurgical de colectare
a embrionilor s-a perfecionat continuu, firme specializate produc pe scar industrial mediul de
recoltare, congelare, decongelare i ntreaga aparatur necesar recoltrii i transferului
embrionilor.
Tehnicile nechirurgicale de recoltare a embrionilor presupun mai multe operaii: contenia
femelei, anestezia, vidarea rectului, toaleta vulvei, identificarea prezenei corpilor galbeni pe
ovar, introducerea lichidului de splare n lumenul coarnelor uterine,splarea acestora,
recuperarea lichidului mpreun cu embrionii,identificarea i recuperarea embrionilor din lichidul
recuperat i supus decantrii i aprecierea morfologic a acestora. n condiii de ferm, recoltarea
embrionilor se face la locul undese gsete femela donatoare, dup ce n prealabil, vecinele
acesteia au fost ndeprtate. Femela se contentioneaza adecvat, astfel nct s-i fie limitate
micrile, trecerea sondei prin canalul cervical care este nchis, provocnd dureri animalului i
implicit, reacie de aprare. Pentru a suprima durerea, se practic anestezia epidural cu 4-6 ml
procain 2% sau cu 10 ml ludocain 1%, care blocheaz nervii coccidieni i ultimele perechi de
nervi sacrali . Acul se introduce ntre prima i a dou vertebr coccigian sau ntre ultima
vertebr sacral i prima vertebr coccigian, anestezia instalndu-se dup circa 10-15 minute i
dureaz n jur de 90 de minute, zonele insensibilizate fiind: coada,anusul, rectul, vulv, vaginul
i uterul.Se introduce, cu precauiile de rigoare, mna n rect, acesta se videaz de coninut, apoi
se apreciaz rspunsul femelei la tratamentul poliovulator, palpandu-se cu atenie ambele ovare
i numaradu-se corpii galbeni.

17

n cazul n care rspunsul la tratamentul de superovulare este pozitiv, se procedeaz cu precauie

la introducerea cateterului de tip Folley cu dou sau trei ci, prin conductul cervical pn n
cornul uterin. Pentru rigidizarea cateterului, se introduce pe lumenul acestuia un mandren (tij
metalic), care se menine pn se ajunge n lumenul cornului uterin, apoi se retrage. Cateterul
este introdus circa 5-8 cm de la bifurcaia coarnelor uterine, pe unul dintre acestea, apoi se
introduce de la exterior, cu sering, 8-15 ml de aer n scopul fixrii cateterului i pentru a
mpiedica refularea din cervix a lichidului de splare.Vasul din sticl, ce conine lichidul de
splare se suspend la 1,5 m de la sol i, prin cdere, acesta ajunge prin calea de admisie a
cateterului n coarnele uterine. Irigarea acestora se face continuu, calea de evacuare a lichidului
este conectat, printr-un tub de plastic,la vasul de colectare a mediului recuperat (de splare).
Recuperarea lichidului de splare se face prin calea de admisie (n cazul cateterului cu dou ci
la care s-a adaptat o pies n form literei S.
Recoltarea embrionilor prin metoda nechirurgical prevzut cu canal de admisie i evacuare al
lichidului, ramur de evacuarea lichidului fiind conectat la un filtru de colectare a crui orificii
au un diametru de 75cm, care are rolul de reinere a embrionilor, lichidul ce traverseaz filtrul
fiind colectat ntr-un recipient situat sub filtru.
Mediul folosit la splarea unui corn uterin: se folosete la splarea, n acelai mod, a celui de-al
doilea corn uterin. Cantitatea de mediu care se folosete pentru splarea unui corn uterin este de
300-500 ml, efectundu-se irigri repetate i un masaj transrectal permanent al cornului uterin
perfuzat.Exist diverse sonde de recuperare a embrionilor, imaginate de diveri cercettori, care
se bazeaz pe acelai principiu constructiv.
ntre momentul recuperrii embrionilor i cel al inoculri lor n uterul receptoarelor, zigoii
trebuie s fie meninui n via n condiii speciale i s fie manipulai n cele mai bune condiii
tehnice i igienice.Compoziia mediilor de recoltare i cultivare a embrionilor s-a modificat
frecvent n decursul timpului, pe msur ce cunotinele n domeniu au avansat i pe baza
multiplelor experiene ntreprinse.n ultimii ani s-a generalizat folosirea unei soluii tampon
fosfat -PBS (Fosfat bufferet salin) pentru splarea coarnelor uterine i pentru pstrarea
embrionilor recuperai. Acest lichid are un pH de 7,2, o presiune osmotic de 290 miliosmoli ce
conine multe iruri minerale,glucoz i protein (albumin bovin seric, 2-4 g/l, sau ser de viel
fetal de complementat 10% ).
Toate mediile, soluiile, serurile, enzimele i substanele crioprotectoare care vin n contact cu
embrionii trebuie s fie sterile. Tot materialul care nu se arunc (sonde colectoare, filtre,
recipieni din sticl,sonde de transfer, etc.) care necesit a fi sterilizate, se spal cu o soluie de
detergent netoxic, se cltete n ap distilat, se usuc i se nvelete n hrtie n vederea
sterilizrii. Alegerea metodei de sterilizare depinde de natur materialului (cldur uscat,
cldur umed, substane antiseptice,vapori de formol etc.). Rezultatele recuperrii embrionilor
depind n cea mai mare msur de abilitatea i antrenamentul operatorului. Proporia embrionilor
recuperai, oscileaz n medie, ntre 60-70% comparativ cu numrul de corpi galbeni identificai
18

pe ambele ovare. Dup colectarea embrionilor se injecteaz donatoarei o doz de PGF 2, care
are rolul de a liza corpii galbeni, evitndu-se astfel gestaia multipl.

19

BIBLIOGRAFIE

1. Mrginean, G. ; Velea, C. ( 2006 ) - Actualitate si perspectiv in cresterea Bubalinelor,

Editura Agrotehnica.
2. Georgescu, G. ( 2008 ) - Monografia creterii Bubalinelor din Romnia i pe plan
Mondial, Editura Ceres.
3. http://www.scritub.com/biologie/animale/PROIECT-DE-DIPLOMAInsamantari22421142415.php
4. http://www.fao.org/docrep/004/t0120e/T0120E02.htm
5. https://www.scribd.com/doc/61513325/Reproductive-Bio-TechnologiesBuffalo#download
6. http://www.scdb-dancu.ro/main/ro/depart/index.php
7. https://l.facebook.com/l.php?u=https%3A%2F%2Fwall.alphacoders.com%2Fsearch.php
%3Fsearch%3Dbuffalo&h=oAQG9WqWB

20