Pentru evidenierea raportului dintre esuturile lignificate i cele
nelignificate se folosete colorarea cu floroglucin n mediu de acid clorhidric. n
seciunile astfel preparate, pereii lignificai ai celulelor se coloreaz n rou. Cel mai complex studiu microscopic const n examinarea seciunilor n reactiv Steimetz. Datorit compoziiei sale complexe, acesta asigur att clarificarea seciunilor prin cloralhidrat, alcool i glicerin, ct i colorarea selectiv a esuturilor. Astfel sulfatul de anilin coloreaz n galben esuturile lignificate; sudanul III coloreaz n rou sau portocaliu uleiul volatil, picturile de ulei gras, rezinele, membranele cutinizate i ceroase, latexul; alaunul de fier III i amoniu d precipitate sau coloraii cu taninurile sau compuii fenolici; iodul coloreaz amidonul n albastru-violaceu; mucilagiile i gumele din esuturi se identific datorit aspectului sidefat sau sticlos conservat n alcool i glicerin, iar cristalele de oxalat de calciu se identific sub form de cristale de sulfat de calciu datorit ionilor sulfat din reactiv. n cazul de fa, s-a folosit o colorare simpl, folosind carmin alaunat.
Fixarea Pentru conservarea preparatelor microscopice timp ndelungat, cele mai des folosite medii de includere sunt masa gelatinoas i balsamul de Canada.
Montarea seciunilor n masa gelatinoas
nainte de montarea seciunilor, pentru a evita apariia bulelor de aer n preparat, se nlocuiete apa din seciunile colorate i splate prin trecerea lor succesiv prin soluii de glicerin: ap n urmtoarele proporii: 1:2, 1:1, 2:1 i apoi n glicerin pur. Din glicerin seciunile se aduc pe centrul unei lame. Cu un ac spatulat sau cu o spatul mic se desprinde din masa gelatinoas un fragment cubic (ale crui dimensiuni se aleg n funcie de mrimea seciunii i a lamelei) care se aduce pe lam, peste seciune. Lama se nclzete uor la flacra unei spirtiere sau pe o plac de nclzire metalic, special, pn cnd masa gelatinoas se topete. Trebuie evitat fierberea i carbonizarea masei gelatinoase care ar duce la formarea bulelor de aer i la distrugerea esuturilor. n cazul n care totui apar bule de aer, ele sunt nlturate prin atingerea lor cu vrful unui ac spatulat nroit la flacra unei spirtiere. Dup ce i eventualele bule de aer au fost ndeprtate, preparatul se acoper cu o lamel. Lamela se prinde cu dou degete de dou laturi opuse, se sprijin cu cea de-a treia latur pe lam i se nclin pn atinge mediul de includere. Apoi se las s cad uor peste preparat, pentru a evita nglobarea altor bule de aer[3] [6].
CONCLUZII
1. Lucrarea de licen intitulat ,,Contribuii la cunoaterea speciei Cannabis
sativa L., sintetizeaz rezultatele cercetrilor teoretice i practice n vederea elucidrii importanei speciei de-a lungul timpului. 2. Scopul lucrrii a fost de a aduce n lumin efectele benefice, dar i cele nedorite ale speciei Cannabis sativa L. 3. Lucrarea este structurat n dou pri: una general, teoretic i una practic, fiind format din cinci capitole. 4. n primul capitol se reliefeaz cteva date generale despre bolile n care se folosete ca remediu, sau adjuvant cannabisul (diabetul zaharat, glaucomul, spasmele musculare, holera). S-a subliniat importana folosirii cannabisului n fiecare dintre aceste boli. 5. Capitolul II aduce n lumin drumul parcurs de cnep de-a lungul mileniilor, de la popoarele antice pn la lumea civilizat. 6. Capitolul III prezint generaliti legate de specia Cannabis sativa L., respectiv: etimologia; ncadrarea sistematic; date generale privind ncrengtura, clasa, ordinul i familia din care face parte; descrierea i variabilitatea speciei. 7. Capitolul IV se refer la compoziia chimic, aciunea farmacodinamic i proprietile toxice ale celor mai importani compui, dar i medicamentele n care se regsesc. 8. n partea practic s-a realizat studiul anatomic al organelor vegetative ale speciei. n acest scop, planta a fost recoltat la maturitate deplin, dintrun lan n apropierea Rezervaiei Naturale Pdurea Hagieni, jud. Constana. Fragmentele pentru analiz au fost introduse n alcool pentru conservare. Un exemplar a fost uscat i se pstreaz n custodia Laboratorului de Biologie Vegetal din cadrul Facultii de Farmacie. 9. Seciunea transversal prin rdcin a evideniat o structur de tip primar, cu contur circular, ce prezint elemente specifice de tip fascicule liberolemnoase. 10.Seciunea transversal prin tulpin are conturul circular costat i un nceput de structur secundar. 11.Seciunea prin frunz s-a realizat att la nivelul petiolului, dar i limbului. Sunt specifici perii tectori. 12.Din analiza anatomic macroscopic i microscopic a organelor vegetale, se poate concluziona c specia este Cannabis sativa. 13.Lucrarea de licen conine 87 pagini dactilografiate, 41 figuri - din care 11 poze color, 4 tabele.
14.La ntocmirea lucrrii s-au consultat 49 titluri bibliografice.