METABOLISMUL

PROTEINELOR
ASPECTE GENERALE

METABOLISMUL AMONIACULUI
ASPECTE GENERALE
Amoniacul rezult n organism prin:
- dezaminarea oxidativ a aminoacizilor
- din proteinele alimentare sub aciunea bacteriilor intestinale
- din ureea prezent n lichidele din tractul gastrointestinal
Normal amoniemia: 10-20 g/100 ml
Intoxicaiile cu amoniac se manifest prin: - grea
- vrsturi
- convulsii
- coma prin hiperamoniemie
(cnd concentraia NH3 100 g/100 ml)

 Mecanism: sustragerea -Kg din ciclul celular i diminuarea ATP

Dovezi: nivelul Glu i Gln sunt crescute n creier n intoxicaiile cu
amoniac
Problem important: transportul NH3 prin snge n form netoxic

CICLUL GLUTAMINA-GLUTAMIC
La nivelul diverselor
esuturi (muchi, creier,
glande) are loc sinteza
glutaminei n prezena
glutamin-sintetazei

O
COOH
CH2
CH2

NH3
H2O
Glutaminsintetaz
Mg2+
ADP+Pa
ATP

NH2
CH2
CH2

CH NH2
CH NH2
Reacia este ireversibil,
iar amoniacul modulator pozitiv
COOH
COOH
Gln aminoacid propriu organismului (netoxic);
concentraia acestui aminoacid n snge este de 3-5
ori mai
mare dect a altor aminoacizi, ceea ce reflect importana lui
Glutamic

Glutamin
(glutamid)

 La ficat i rinichi glutamina sufer aciunea glutaminazei, care

elibereaz amoniacul,
convertit n uree
(la ficat) eliminat
prin urin i n ionul
amoniu (la rinichi)
eliminat de asemenea
prin urin

H2O

NH3

NH2
Formarea Gln calea major de ndeprtare a amoniacului
din creier
CH
Ureogeneza calea major de detoxifiere a ntregului organism2fa de amoniac
CH2
glutaminaz
CH NH2
COOH
Glutamin

COOH
CH2
CH2

CH NH2
COOH
Glutamic

MUSCHI
CREIER
GLANDE

SANGE

FICAT

RINICHI

aminoacizi
dezaminare
oxidativ
Glutamin
NH3

Gln

Glutamin

glutaminsintetaz
Glutamic

glutaminaz
Glu

Se poate vorbi de un adevrat

ciclu Glutamin-Glutamic

Glutamic

NH3
Ficat
Rinichi
+
NH4

Uree

Urin

Urin

CICLUL ALANINA-GLUCOZA
Alanina i glucoza contribuie la transportul amoniacului
prin snge
Transportul se face muchi ficat
Se realizeaz un ciclu:

MUSCHI

FICAT

SANGE

Aminoacizi
dezaminare
oxidativ
NH3

-Kg
GDH

Alanin

Ala

GPT

Glutamic

Alanin
GPT

Piruvat

Piruvat

-Kg
GDH
Glu
GDH

gluconeogenez

glicoliz
Glucoz

glucoz

NH3
Glucoz

ureogenez
Uree

Urin

UREOGENEZA. CICLUL KREBS-HENSELEIT

CICLUL ORNITINIC. ASPECTE GENERALE
Omul elimin 80-90% din azotul ingerat uree (ureotelice)
Ureogeneza caracteristici:
- are loc n ficat
- proces endoenergetic
- ciclu de 5 reacii enzimatice la care particip
5 aminoacizi
- reaciile au loc n mitocondrie i citosol
- are loc n mai multe etape

UREOGENEZA. ASPECTE GENERALE

Hepatocitele sunt singurele celule care exprim gena
ornitin-carbamil-transferazei, enzim a ureogenezei
(formarea citrulinei).
Azotul utilizat de hepatocite provine din toate celulele
organismului sub form de :
Glutamin care transport amoniacul ntr-o form
mai puin toxic
Ionii de amoniu, n cantitate mai mic, rezultnd din
dezaminrile intestinale.
Carbonul provine din bicarbonat.

UREOGENEZA
Enzimele se repartizeaz n matricea mitocondrial, citoplasm i
membranele RE.
Glutamina transport azotul pn n mitocondriile hepatocitare.
Un prim atom de azot este ncorporat de carbamil-fosfat n citrulin.
Al doilea atom de azot prsete mitocondriile sub form de
glutamat pentru a fi transaminat. Aspartatul obinut este condensat
cu citrulina pentru sinteza de arginin.
Hidroliza argininei pe membranele RE permite eliberarea ureei
direct n cisterne de unde va difuza n venele supra-hepatice.
-cetoglutaratul intr n mitocondrii participnd la gluconeogenez.
Poate fi aminat de GDH, ieind din nou pentru a forma aspartatul.
Citrina (transportor membranar al glutamatului) schimb glutamatul
contra unui aspartat care, dup transaminare, va participa la GNG.
Citrina particip la naveta malat/aspartat

UREOGENEZA

ETAPELE UREOGENEZEI
1. Formarea carbamoilfosfatului
Enzima: carbamoilfosfat-sintetaza, enzim biotinic,
modulat pozitiv de N-acetil-glutamic;
Carbamil-fosfat sintetaza I, mitocondrial, particip la
ureogenez; diferit de carbamil-fosfat sintetaza II,
citoplasmatic (sinteza nucleotidelor pirimidinice).
2ATP

2ADP+Pa
Mg2+

CO2 + NH3 + H2O

carbamoilfosfatsintetaza
(N-acetil-glutamic)

O C

NH2
O~ P

Carbamoilfosfatul

 Reacia are loc n dou etape:

- activarea CO2 prin legare de biotin
- CO2-biotinil-enzim reacioneaz cu NH3

(consum de ATP)
(consum de ATP)

Enzima localizat n mitocondrie

Enzima mitocondrial enzim alosteric modulat pozitiv de N-acetilglutamic

2. Formarea citrulinei
Enzima: ornitin-carbamoil-transferaz (OCT) numit i ornitin-transcarbamoilaz
Reacia are loc tot intramitocondrial

O C

NH2

Carena OCT st la originea unor sindroame de amoniemie, acumularea Gln n snge i hiperglutaminurie

NH2
(CH2)3
CH NH2
COOH
Ornitina

O C

NH2

OCT

O~ P
Carbamoilfosfatul

Pa

NH
(CH2)3
CH NH2
COOH
Citrulina

ornitin-carbamoil-transferaza
OCT este o enzim mitocondrial hepatocitar. Ornitina este un
aminoacid, omologul inferior al lizinei, care nu particip la
sinteza proteinelor. Intermediar al numeroaselor ci
metabolice, prezent n matricea mitocondrial.
OCT catalizeaz condensarea carbamil- fosfatului cu ornitina,
pentru sinteza citrulinei. Energia necesar sintezei este
furnizat prin hidroliza legturii bogat n energie a carbamilfosfatului.
Gena OCT este reprimat n toate celulele nafara
hepatocitelor, singurele celule capabile s catalizeze aceast
reacie indispensabil a ciclului ureogenetic.

3. Formarea acidului argininosuccinic

Enzima: argininosuccinat-sintetaza
Reacia citosol
2Pa
Reacia necesit ATP
pirofosfataz
ATP ADP+PPa

OH

HN C
NH
+

(CH2)3
CH NH2
COOH
Izocitrulin

COOH
CH2
COOH
Aspartic

NH CH

HN C

N CH
argininosuccinatsintetaz

COOH

NH

CH2
COOH

(CH2)3
CH NH2

COOH
Acid argininsuccinic

4. Formarea argininei
Enzima: argininosuccinaz
Reacia citosol
COOH
NH CH
HN C
NH

CH2
COOH

(CH2)3
CH NH2

COOH
Acid argininsuccinic

HN C
argininosuccinaz

NH2
NH

COOH

H
+

C
(CH2)3
H
HOOC
CH NH2
COOH
Arginin

Acid fumaric

5. Formarea ureei
Enzima: arginaza
Necesit Ca2+, Mn2+ i are specificitate absolut
Reacia citosol

HN C

NH2
NH

(CH2)3
CH NH2
COOH
Arginin

arginaz
H2O

O C

NH2

NH2
Uree

NH2
(CH2)3
CH NH2
COOH
Ornitina

UREOGENEZA - MECANISME
Mecanismul de aciune al carbamoilfosfat-sintetazei

Mecanism de aciune al argininosuccinat sintetazei

SINTEZA I
ROLUL
N-ACETILGLUTAMATULUI

UREOGENEZA CONCLUZII

Realizeaz detoxifierea organismului fa de amoniac

Amoniacul toxic mai ales pentru SNC
Cale consumatoare de energie
(4 legturi ~ pentru o molecul de uree)
Ureea eliminat prin urin (15-30 g/24 h)

UREOGENEZA DEFICITE ENZIMATICE

1. Deficitul de carbamoilfosfat-sintetaz (ereditar) cauzeaz hiperamoniemia de tip I
Consecine: - NH3 se acumuleaz n snge i esuturi
- esuturile consum cantiti mari de -Kg
- ciclul Krebs i producerea de ATP diminuate
- creierul resimte primul deficitul de ATP
- frecvent ntrzierea dezvoltrii mentale
2. Lipsa enzimei transcarbamoilaz este legat de cromozomul X i genereaz hiperamoniemia de tip II
Consecine: - hiperamoniemie
- intoleran la proteine
- n snge i urin sunt cantiti mari de Gln,
iar n esuturi cantiti mari de NH3

UREOGENEZA DEFICITE ENZIMATICE

3. Lipsa argininosuccinat-sintetazei conduce la citrulinemie
Consecine: - n snge i lichidul cerebrospinal se gsesc cantiti mari de citrulin
- citrulina se elimin masiv prin urin
4. Lipsa argininosuccinazei eliminare crescut de acid argininosuccinic prin urin
5. Absena arginazei hiperargininemie; crete nivelul Arg n snge i lichidul cerebrospinal

RELAIA CICLUL UREOGENETIC

CICLUL KREBS
Se realizeaz la mai multe niveluri:
1. La nivelul acidului fumaric, un intermediar al ciclului citric. Intrnd n ciclul citric fumaricul genereaz OAA, acesta prin transaminare Asp, care permite continuarea ureogenezei
2. Pe de alt parte:
Consumat n ciclul citric i implicit
deplasarea echilibrului spre dreapta
Consecine: - ciclul citric se intensific i genereaz ATP
- NH3 n exces i ATP activeaz carbamoilfosfat-sintetaza i implicit ureogeneza

Glu

GDH

-Kg + NH3

-Cetoglutaric

Glutamic
transaminare

Carbamoilfosfat

Aspartic
Citrulin

Oxalilacetic

CICLUL
UREOGENETIC
Argininosuccinic

Ornitin

Citrat

L-Malic
CICLUL
KREBS

Uree

Arginin

Izocitrat

Fumaric

-Cetoglutaric

Succinic

Succinil-CoA