AO DE LA CONSOLIDACIN DEL MAR DE GRAU

UNIVERSIDAD NORBERT WIENER

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

PRODUCTO N 1
EXAMEN MICROBIOLOGICO Y REPORTE DE CONTROL
MICROBIOLOGICO DE PRODUCTOS FARMACEUTICOS
NO ESTERILES.

INTEGRANTES:

ABAD LOPEZ, MIGUEL

DIAZ SANCHEZ, DEYSI
SANCHEZ BUSTAMANTE, ERICK
SILVA LOPEZ, JOSUE
VEGA TORRES, MIREYDA

DOCENTE:
BIOLOGA MONICA VELARDE

LIMA-PERU
2016

EXAMEN MICROBIOLOGICO Y REPORTE DE CONTROL

MICROBIOLOGICO DE PRODUCTOS FARMACEUTICOS NO
ESTERILES

INTRODUCCION

Los productos farmacuticos no estriles

permiten un mximo de carga

microbiana, pero debe haber ausencia total de patgenos. La cantidad y tipo de

microorganismos permitidos se especifica en normas de calidad provenientes de
farmacopeas extranjeras. En este tipo de productos no es requisito la
apirogenicidad.
Estos productos pueden ser comprimidos: Tabletas y grageas. No comprimidos:
Cpsulas, polvos. Homogneos: Soluciones (oral, nasal, Otica, tpica), jarabe,
elixir Heterogneos: Emulsin. Suspensin. Aerosoles Semislidos Ungento
oftlmico Cremas, ungentos, pomadas, SENF Implantes, supositorios y geles.
Parches transdrmicos, bombas pellets osmticas
Los productos farmacuticos no estriles estn propensos a contaminarse con
microorganismos por una mala utilizacin de las buenas prcticas de manufactura
(BPM), o por falta de capacitacin por parte del personal. Estos productos se
contaminan a menudo con bacterias, mohos y levaduras durante el transcurso de
su proceso de manufactura: Por ejemplo en la pesada, fabricacin, llenado,
almacenamiento, as como durante su uso.
La contaminacin de los productos farmacuticos no estriles, puede tener el
potencial de disminuir o inactivar la actividad farmacolgica y teraputica del
principio activo y por ende representar un peligro de gran riesgo para la salud de
la persona que est en tratamiento con frmacos; adicionalmente la presencia de
estos microorganismos dependiendo de su capacidad para producir enfermedad

en huspedes susceptibles pueden ocasionar infecciones no esperadas o

enfermedades que afecten al paciente o consumidor de estos medicamentos no
estriles.
Por otra parte, la presencia de microorganismos en estos medicamentos podra
con llevar a cambios en las caractersticas fsicas y qumicas que conduciran a
que el producto deteriorado no sea apto para el consumo humano, afectando y
perjudicando con ello la imagen del laboratorio fabricante.
Es por ello, que el control de calidad de los productos farmacuticos no estriles,
deben ser sometidos a un riguroso anlisis microbiolgico que demuestre que
cumplen con las especificaciones establecidas por los organismos oficiales, para
garantizar que los productos son adecuados para el uso al que estn destinados.
Este anlisis o control microbiolgico de las materias primas y de los productos o
medicamentos no estriles, involucra la realizacin de dos tipos de ensayos:
a.

Recuentos

microbianos,

referidos

bsicamente

al

recuento

total

de

microorganismos aerobios y el recuento total de mohos y levaduras.

b. Investigacin de microorganismos especficos: bacterias Gram negativas
tolerantes a bilis, Escherichia coli, Salmonella, Pseudomonas aeruginosa,
Staphylococcus aureus, Clostridium, y Candida albicans.

JUSTIFICACION

El siguiente reporte se justifica en la gran importancia que debe de tener un

anlisis microbiolgico en la produccin de productos farmacuticos no
estriles, para as garantizar la calidad del producto, eficacia de la accin y
efecto teraputico; y la seguridad del producto hacia la poblacin.
Los medicamentos no estriles son productos susceptibles a contaminacin
con microorganismos como bacterias, mohos, levaduras, entre otros. La
contaminacin puede producirse debido a materias primas en mal estado,
una calidad higinica deficiente en el proceso de fabricacin por operarios,
ambientes, superficies, agua, en el proceso de envasado o empaquetado
(Genaro, 2003).
Productos contaminados con microorganismos pueden acarrear daos a la
industria generando altos costos debido a que los microorganismos pueden
degradar el principio activo del producto o los excipientes alterando la
composicin del medicamento; lo cual puede generar que se realicen
devoluciones, reproceso o destruccin del medicamento, donde se ve
afectado el nombre de la empresa generando desconfianza en el
consumidor y en algunas ocasiones hasta procedimientos legales.

CONCEPTOS BSICOS

MANUALES DE PROCEDIMIENTOS.
Un manual se define como un instrumento al servicio de la calidad y de la
capacitacin que involucra a todo el personal de laboratorio, en el cual se
describen las actividades que deben seguirse en la realizacin de las funciones, y
cuyo propsito es pasar de una tradicin oral a una escrita.
Para asegurar que la informacin generada por los resultados del laboratorio sea
precisa y oportuna, se propone incluir la normalizacin y estandarizacin de los
procedimientos.

LIMITES MICROBIANOS.
Los lmites microbianos son las pruebas por medio de las cuales se estima un
nmero de microorganismos aerobios, mohos y levaduras presentes en
especialidades farmacuticas y determinar si dichas especialidades estn exentas
de ciertos microorganismos patgenos, estas especialidades incluyen:
Materia Prima
Producto en Proceso
Producto Terminado.
Esta es una prueba que permite darle proteccin al consumidor, ya que asegura la
calidad microbiolgica del producto. Por lo que la industria farmacutica reconoce
la necesidad de un control microbiolgico de estos productos desde el punto de
vista: salud pblica, estabilidad del producto y financiero

MICROORGANISMOS INDICADORES
Los microorganismos indicadores son aquellas especies cuya presencia indica
que los medicamentos estuvieron expuestos a condiciones que pudieron
determinar la llegada a los mismos, de microorganismos peligrosos y permitir la
proliferacin de especies patgenas o toxignicas.
La finalidad por la que se usan los microorganismos indicadores como reveladoras
de prcticas de higiene inadecuadas es precisamente para poner de manifiesto
determinadas condiciones de tratamiento o manipulacin de los medicamentos
que suponen un peligro potencial.
Los microorganismos de este gnero ms comunes son los siguientes:
Bacterias aerobias mesofilas: Son microorganismos que crecen a 37 C y cuyos
recuentos se obtienen en placas, los cuales, si son altos, indican la posible
proliferacin de organismos patgenos dentro de los medicamentos y al mismo
tiempo, indican que los medicamentos van a alterarse muy pronto.
Escherichia coli y coliformes: La E.coli es una bacteria cuyo hbitat natural es el
tracto digestivo del hombre, por lo tanto, su presencia en los medicamentos, es un
indicador de contaminacin directa o indirecta de origen fecal, lo que implica la
presencia simultnea de bacterias patgenas como
Salmonella typhi, Shigella spp, Vibrios spp y Entamoeba spp (estas ltimas no
se analizan comnmente en el laboratorio a los productos farmacuticos no
estriles).
Los coliformes son buenos indicadores de una limpieza y desinfeccin no
adecuada o de una industrializacin o tratamiento de medicamentos incorrectos,
favoreciendo la multiplicacin de microorganismos patgenos.
Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa en medicamentos se
interpreta como indicativo de contaminacin a partir de la piel, boca y fosas

nasales de los manipuladores de los medicamentos, as como tambin de

material, equipos sucios y de ineficiente temperatura de conservacin.

CARACTERISTICAS DE LOS MICROORGANISMOS.

ESCHERICHIA COLI
Es un bacilo corto que puede formar cadenas y que reacciona negativamente a la
tincin de Gram. Es anaerobio facultativo, mvil por flagelos peritricos (que rodean
su cuerpo), no forma esporas, es capaz de fermentar la glucosa y la lactosa y su
prueba de IMVIC es ++--.
E. coli y la mayor parte de las bacterias intestinales forman colonias circulares
mconvexas y lisas con bordes definidos. La E. coli O157:H7 es una de cientos de
cepas de la E. coli. Aunque la mayora de las cepas son inocuas y viven en los
intestinos de los seres humanos y animales saludables, esta cepa produce una
potente toxina y puede ocasionar una enfermedad grave. Se diferencia de las
otras E. coli en que no fermenta el sorbitol, no crece a 44 C y no produce glucoronidasa.
E. COLI ENTEROPATOGNICA (ECEP):
Es el agente causal predominante de diarrea en nios que viven en pases en vas
de desarrollo. ECEP interacciona con las clulas epiteliales produciendo una
lesin histopatolgica caracterstica conocida como adherencia / destruccin o
lesin A/E. La temperatura ptima de crecimiento del microorganismo es de 37 C
con un intervalo de crecimiento de 4 a 10C. Su pH ptimo de crecimiento es de
7.0 a 7.5 con un pH mnimo y mximo de crecimiento de 4.0 y 8.5
respectivamente.

STAPHYLOCOCCUS AUREUS
Son clulas esfricas, gram positivas, cuyo dimetro vara de 0.5 a 1.5 m; en
frotis teidos aparecen en grupos irregulares en forma de racimos. Crecen mejor
en condiciones aerobias, pero son anaerobios facultativos; la temperatura de
crecimiento es de 30 a 37 C; no son mviles y no forman esporas.
El S. aureus es una bacteria gram positiva redondeada, que aparece como
elemento aislado, formando parejas ttradas o agrupaciones irregulares en forma
de racimos. Pertenece a la familia Micrococaceae. Dentro del gnero, se
reconocen al menos 20 especies diferentes, siendo el S. aureus la que con ms
frecuencia produce infecciones en el hombre.
Los Staphylococcus se tien fcilmente con colorantes bsicos y son fuertemente
gram positivos. La mayora de las cepas no son capsuladas, sin embargo, el S.
aureus forma cpsulas; morfolgicamente puede ser evidente, o bien detectarse
mediante mtodos inmunolgicos. En medios slidos el crecimiento es abundante;
las colonias son desde translcidas a opacas, con algunas variaciones en el perfil
y en el margen de la colonia; estas variaciones son tiles para la diferenciacin.
Algunos Staphylococcus producen pigmentos carotenoides, formando colonias de
color amarillo-dorado, amarillo-limn o cremoso. La pigmentacin se da ms a
menudo en S. aureus, siendo ms o menos constante en los aislados primarios.
S. aureus forman colonias grises a amarillo dorado intenso, producen catalasa,
fermentan con lentitud muchos carbohidratos y producen cido lctico pero no
gas.
PSEUDOMONAS AERUGINOSA PSEUDOMONAS AERUGINOSA
Es una bacteria Gram-negativa, aerbica, con motilidad unipolar. Es un patgeno
oportunista para los humanos, lo es tambin para las plantas.
La Pseudomona aeruginosa es frecuentemente y preliminarmente identificada por
su apariencia perlada y olor a grapa in vitro.

La identificacin definitiva frecuentemente incluye identificar la produccin de

ambas piocianina y fluoresceina como su habilidad de crecer a 42 C.
La biosntesis de piocianina es regulada por mecanismos homeostticos, asociada
a la colonizacin de P. aeruginosa en los pulmones de los pacientes con fibrosis
qustica. Este patgeno oportunista de individuos immunocomprometidos, infecta
el tracto pulmonar, el urinario, tejidos, heridas, y tambin causa otras infecciones
de sangre.
SALMONELLA SPP.
Las Salmonellas son bacilos gram negativos, la mayor parte de ellas son mviles y
tiene flagelos pertricos. Estos microorganismos crecen con facilidad en medios
sencillos, pero casi nunca fermentan la lactosa o la sacarosa, forman cido y a
veces gas a partir de la glucosa y manosa, suelen producir H 2S, sobreviven a la
congelacin en el agua durante periodos prolongados, son resistentes a ciertos
productos qumicos ( Ej. verde brillante, tetrationato de sodio y desoxicolato de
sodio ) que inhiben a otras bacterias intestinales; por lo tanto estos compuestos
son de utilidad para su inoculacin en los medios de cultivo con objeto de aislar a
Salmonella spp del excremento.
HONGOS
Los mohos son hongos filamentosos multicelulares cuyo crecimiento en la
superficie de los alimentos se suele reconocer fcilmente por su aspecto
aterciopelado o algodonoso; la parte principal de su crecimiento suele tener un
aspecto blanco, aunque puede tener colores distintos, color oscuro o color humo.
El talo o cuerpo vegetativo de los mohos est formado por una masa filamentosa
ramificada y entrelazados llamados hifas denominndose micelio al conjunto de
estas hifas.
En general en comparacin con la mayora de las levaduras y de las bacterias, la
mayora de mohos necesitan menor cantidad de humedad disponible.

La mayora de los mohos podran considerarse, mesfilos, es decir que son

capaces de crecer bien a temperaturas normales. Para la mayora de los mohos la
temperatura ptima de crecimiento se encuentra alrededor de los 25 a 30 C,
aunque algunos crecen bien a temperaturas comprendidas entre los 35 y los 37 C
a temperaturas superiores. Algunos mohos son psictrofos, es decir crecen
bastante bien a temperaturas inferiores a la de congelacin. Unos pocos son
termfilos, es decir crecen a temperaturas elevadas. Los mohos son aerobios,
necesitan de oxgeno para crecer, esto es cierto por lo menos en los mohos que
crecen en la superficie. Casi todos los mohos capaces de crecer dentro de un
amplio intervalo de concentraciones de iones H+ (pH comprendido entre 2 y 8.5),
aunque la mayora crece mejor a pH cido.
LEVADURAS
El termino levadura se emplea de forma habitual, si bien su definicin resulta
difcil. En el sentido que aqu se emplea, se refiere a aquellos hongos que
generalmente no son filamentosos, sino unicelulares y de forma ovoide u esferoide
y que se reproducen por gemacin o por fisin.
Caracteres morfolgicos.
Forma y estructura. La forma de las levaduras pueden ser desde esfricas hasta
ovoides

alimonada,

periforme

cilndrica,

triangular

incluso

alargada,

constituyendo un verdadero micelio o un falso micelio. Se diferencian tambin en

cuanto a su tamao.
Caracteres de los cultivos.
En la mayora de los casos, el crecimiento en masa de las levaduras no resulta
apropiado para identificar estos microorganismos, no obstante, el aspecto del
crecimiento de los microorganismos tienen importancia cuando estos producen un
moteado pigmentado en la superficie.
Las Levaduras son oxidativas, fermentativas o bien su actividad metablica es a la
vez ambos tipos. En la superficie de un lquido, las levaduras oxidativas pueden

crecer en forma de pelcula, de velo o de espuma y por ello se denominan

levaduras formadoras de pelculas.
Propiedades fisiolgicas.
La mayora de las levaduras necesitan ms humedad que los mohos. El intervalo
de temperatura de crecimiento de la mayora de las levaduras es, en general
parecido a la de los mohos, con una temperatura optima en torno a los 25- 30 C y
una temperatura mxima en torno a los 35-47 C. Algunas especies son capaces
de crecer a temperaturas de 0 C o inferiores. Una reaccin cida del medio
prxima a un pH de 4 a 4.5 estimula el crecimiento de la mayora de las levaduras,
mientras que en medios bsicos no crecen bien a no ser que se hayan adaptado a
los mismos. Las levaduras crecen mejor en aerobiosis aunque las especies de tipo
fermentativo son capaces de crecer, aunque lentamente en anaerobiosis.

PRUEBAS DE LMITES MICROBIANOS EN PRODUCTOS

FARMACUTICOS NO ESTRILES
Estas pruebas se basan en la capacidad de determinar la presencia de
microorganismos a travs del uso de medios de cultivo: nutritivos, de
enriquecimiento, selectivos y/o diferenciales, capaces de permitir su recuperacin
a partir de materias primas o productos no estriles y/o de evidenciar ciertas
caractersticas

bioqumicas,

producto

del

metabolismo

de

los

diferentes

microorganismos a investigar.

Para muestras slidas que se disuelven en gran medida pero no totalmente

Recuento total de microorganismos aerobios

Mtodo en placa
Mtodo tubos mltiples
Prueba de ausencia de Staphylococcus aureus
Prueba de ausencia de Pseudomona aeruginosa
Prueba de ausencia de Salmonella spp
Prueba de ausencia de Escherichia coli
Recuento total combinado de hongos y levaduras.

Para muestras liquidas en solucin o suspensin en agua o un vehculo

hidroalcohlicas con menos del 30% y slidos de disolucin fcil.

Recuento total de microorganismos aerobios

Mtodo en placa
Mtodo tubos mltiples
Prueba de ausencia de Staphylococcus aureus
Prueba de ausencia de Pseudomona aeruginosa
Prueba de ausencia de Salmonella spp
Prueba de ausencia de Escherichia coli
Recuento total combinado de hongos y levaduras

Para muestras de ceras, cremas, ungentos y lquidos inmiscibles con agua.

Recuento total de microorganismos aerobios

Mtodo en placa
Mtodo tubos mltiples
Prueba de ausencia de Staphylococcus aureus
Prueba de ausencia de Pseudomona aeruginosa
Prueba de ausencia de Salmonella spp
Prueba de ausencia de Escherichia coli
Recuento total combinado de hongos y levaduras

Para muestras lquidas en forma de aerosol

Recuento total de microorganismos aerobios

Mtodo en placa
Mtodo tubos mltiples
Prueba de ausencia de Staphylococcus aureus
Prueba de ausencia de Pseudomona aeruginosa
Prueba de ausencia de Salmonella spp
Prueba de ausencia de Escherichia coli
Recuento total combinado de hongos y levaduras

IMPORTANCIA DE LOS EXAMENES MICROBIOLOGICOS EN

PRODUCTOS FARMACEUTICOS NO ESTERILES.
A. Detectar y evaluar puntos crticos de contaminacin microbiolgica en cada
etapa de fabricacin de los productos farmacuticos no estriles.
B. Calidad de excelencia de fabricacin de los productos farmacuticos no
estriles
C. Garantizar la inocuidad de los productos antes de salir al mercado.

D. Controlando la contaminacin microbiana, se evita la inactivacin de la

E.
F.
G.
H.

actividad teraputica de los principios activos.

Evitar cambios fsicos y qumicos a causa de la contaminacin microbiana.
Hacer cumplir la BPM y BPL
Control de calidad de medios de cultivos.
Monitorizar controles microbiolgico, equipos y al personal involucrado en

los exmenes microbiolgicos.

I. Manejo de farmacopeas.

CONCLUSIONES
Todo laboratorio que realiza anlisis microbiolgicos en medicamentos no
estriles deben contar con un manual de procedimientos que contengan
todas las tcnicas especficas para evaluar los diferentes tipos de muestras.
Que los procedimientos para el anlisis microbiolgico estn hechos por
profesionales altamente capacitados siguiendo los protocolos establecidos
en su manual de procedimientos de cada laboratorio, y que se cumplan
todos los pasos de los procedimientos para evitar errores en los anlisis y
as garantizar resultados fidedignos.
Los ensayos microbiolgicos deben ser realizados y supervisados por una
persona experimentada, calificada en microbiologa o su equivalente. El
personal debe tener entrenamiento bsico en microbiologa y experiencia
prctica relevante antes de ser autorizado a realizar el trabajo que implican
los ensayos microbiolgicos.

RECOMENDACIONES
La presencia de contaminantes microbianos en preparados farmacuticos
no estriles puede afectar su actividad teraputica y la salud del paciente.
Por esta razn, en la industria farmacutica, es de vital importancia
controlar las poblaciones microbianas (tipo y nmero) mediante un estricto
control ambiental, limpieza y sanitizacin de reas, y equipos de
fabricacin, as como la aplicacin de prcticas adecuadas de higiene del
personal que interviene en los procesos de fabricacin, sumado al
tratamiento de materias primas no estriles al ingresar a la planta y la

implementacin de Buenas Prcticas de Manufactura a lo largo de todo el

proceso de fabricacin, almacenamiento y distribucin de preparados
farmacuticos.
Que los laboratorios

que

realizan

anlisis

microbiolgicos

los

medicamentos no estriles cuenten con manuales de procedimientos

normalizados y validados, basados en libros oficiales vigentes.

BIBLIOGRAFIA

Brock T.D. Madigan M.T. Martenko J.J. y Parker J. (Eds) Biologa de los
microor-ganismos. 8 Edicin. Prentice Hall International. (1999).
Laura Margarita Perilla Jimnez. (Tesis doctoral). Verificacin de la aptitud
de las pruebas de recuento microbiano y pruebas de microorganismos

especficos para productos terminados elaborados en Anglopharma S.A.

2013
Archila

Jimenes, R. Propuesta de un manual de procedimientos

microbiolgicos para pruebas de limites microbianos en productos

farmacuticos no estriles.(tesis doctoral). San Salvador: Universidad del
Salvador - Facultad de Farmacia y bioqumica, 2009.