ARTIKEL ILMIAH

PRAKTIKUM BIOKIMIA
IDENTIFIKASI ASAM AMINO

OLEH
TJOKORDA GDE PUTRA WIRAMA
1313031053

JURUSAN PENDIDIKAN KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS PENDIDIKAN GANESHA
2016
IDENTIFIKASI ASAM AMINO
Tjokorda Gde Putra Wirama
Jurusan Pendidikan Kimia, Fakultas MIPA, UNDIKSHA
Jalan Udayana, Singaraja-Bali
Email: coktheyndut@gmail.com
ABSTRAK
Tujuan percobaan ini adalah untuk mengidentifikasi asam-asam amino yang terdapat dalam
larutan protein (albumin telur) serta dapat mengidentifikasi jenis asam amino yang terdapat dalam
sampel unknown. Metode yang digunakan adalah metode uji kualitatif dengan cara uji reaksi Millon,
Hopkins-Cole, Ninhidrin, PbS, dan Nitroprusida. Dari hasil percobaan diperoleh bahwa pada albumin

telur mengandung asam amino tirosin, triptopan, asam -amino bebas, asam amino yang dalam
struktur asam aminonya mengandung belerang. Sampel unknown A mengahasilkan uji positif pada uji
Nitroprusida yang menandakan adanya asam aminosistein. Sampel unknown F menghasilkan uji
positif pada uji Ninhidrin yang menandakan adanya asam -amino bebasseperti tirosin, tiptopan,
fenilalanin, glisin dan lain-lain kecuali prolin.Pada sampel unknown G mengahasillkan uji negatif
pada semua uji asam amino yang menandakan tidak terkandung asam amino.
Kata kunci :asam amino, larutan albumin telur, sampel unknown
ABSTRACT
The purposeof thisexperimentisidentify the amino acids contained in the protein solution (egg
albumin) and can identify the types of amino acids contained in the unknown sample. The method used
is a qualitative test method by means of Millon reaction test, Hopkins-Cole, Ninhydrin, PbS, and
Nnitroprusside test. From the experimental results obtained that the egg albumin-containing amino
acid tyrosine, tryptophan, -amino acids is free amino acids in the structure of the amino acid
containing sulfur. Unknown sample A positive test result in the nitroprusside test indicating the
presence of the amino acid cysteine. Unknown sample F produces a positive test on Ninhydrin test
indicating the presence of -amino acids such as tyrosine free, tiptopan, phenylalanine, glycine and
others except proline. In the unknown sample G aimlessly negative test for all test the amino acids that
indicates not contained amino acids.
Keywords: amino acids, egg albumin solution, samples of unknown

PENDAHULUAN
Protein adalah polimer yang terdiri atas
monomer-monomer asam -amino yang
dihubungkan dengan ikatan peptida. Sebuah
molekul protein mengandung ratusan atau
bahkan ribuan unit asam amino. Unit-unit
itu akan membentuk berbagai macam
kombinasi yang jumlahnya hampir tidak
terbatas, sehingga jumlah jenis protein yang
ada juga tidak terbatas (Frieda, 2002).
Protein merupakan salah satu kelompok
bahan makronutrien. Tidak seperti bahan
makronutrien lainnya (karbohidrat, lemak),
protein ini berperan lebih penting dalam
pembentukan biomolekul daripada sumber
energi. Namun demikian apabila organisme
sedang kekurangan energi, maka protein ini
dapat juga di pakai sebagai sumber energi.

Semua protein, baik yang berasal

dari bakteri yang paling tua atau yang
berasal dari kehidupan yang tertinggi
dibangun dari rangkain dasar yang sama
dari 20 asam amino yang berikatan kovalen
dalam urutan yang khas (Tika, 2010).
Asam amino adalah monomer dari
protein. Asam-asam amino yang secara
alami menyusun protein mempunyai gugus
fungsi karboksil (-COOH) dan amina (-NH2)
yang terikat pada atom karbon yang sama,
yaitu atom karbon alfa. Gugus karboksil
dalam asam amino memberikan sifat asam
dan gugus amina memberikan sifat basa.
Gugus lain yang terikat pada C adalah
atom hydrogen dan rantai samping yang
bervariasi (gugus R).
Berikut adalah
struktur umum dari asam amino.

H
N
H

C
R

OH

Gambar 1. Struktur Umum Asam Amino

Dari ke-20 asam amino, 19
merupakan asam -amino, sedangkan satu
asam amino yang menyimpang dari struktur
umum adalah asam amino prolin karena

asam amino ini mempunyai gugus amino

sekunder. Dalam bentuk larutan, asam
amino bersifat amfoterik yaitu cenderung
menjadi asam pada larutan basa dan menjadi

basa pada larutan asam. Prilaku ini terjadi

karena asam amino mampu membentuk
zwitter-ion. Zwitter-ion merupakan molekul
yang mempunyai gugus polar dengan
muatan yang berlawanan. Karena adalah
Zwitter-ion, maka asam amino mempunyai
sifat senyawa ion (Redhana,2004).
Dalam tubuh manusia asam amino
dikelompokkan menjadi dua bagian, yaitu
asam amino esensial dan asama amino non
esensial. Asam amino esensial adalah asam
amino yang tidak dapat disintesis oleh
tubuh. Contoh asam amino esensial : asam
amino Triptofan, Treonin, Metionin, Lisin,
Leusin, Isoleusin, Fenilalanin dan Valin.
Sedangkan asam amino non-esensial adalah
asam amino yang dapat disintesis oleh
tubuh. Contoh asam amino non-esensial
adalah asam amino Tirosin, Sistein, Serin,
Prolin, Glisin, Asam Glutamat, Asam
aspartat, Arginin, Alanin, Histidin, Glutamin
dan Asparagin.
Variasi yang terjadi antara asamasam amino terletak pada gugus R atau
rantai sampingnya. Berdasarkan gugus Rnya akan dapat diramalkan sifat-sifat suatu
asam amino. Asam-asam amino ini dapat
dibagi menjadi tiga kelompok. Kelompok
asam amino dengan gugus R polar
bermuatan positif atau negatif terdiri dari
Lisin, Arginin, dan Histidin yang bermuatan
positif, sedangkan asam amino yang
bermuatan negatif adalah Asam Aspartat dan
Asam Glutamat. Kelompok asam amino
dengan gugus R polar tak bermuatan teridiri
dari Serin, Treonin, Asparagin, Glutamin,
Tirosin, dan Sistein. Kelompok asam amino
dengan gugus R non polar terdiri dari
Glisin, Alanine, Valin, Leusin, Isoleusin,
Prolin, Metionin, Fenilalanin, dan Triptofan.
Selain
klasifikasi
berdasarkan
kemiripan sifat rantai sampingnya, asam

amino juga dapat diklasifikasikan menjadi

delapan kelompok berdasarkan strukturnya.
Klasifikasi ini didasarkan pada sifat kimia
dari
gugus
R-nya
sehingga
akan
memudahkan dalam mengingat sifat-sifat
umum dari setiap asam amino. Kelompok
alifatik terdiri dari Glisin, Alanin, Valin,
Leusin, dan Isoleusin. Kelompok Aromatik
terdiri dari Fenilalanin, Tirosin, Triptofan.
Kelompok hidrosiklik terdiri dari Serin dan
Treonin. Kelompok karbosiklik terdiri dari
Asam Aspartat, dan Asam Glutamat.
Kelompok yang mengandung sulfur terdiri
dari Sistein dan Metionin. Kelompok imino
terdiri dari Prolin dan Histidin. Kelompok
amino terdiri dari Lisin dan Arginin.
Aspargin dan Glutamin termasuk ke dalam
kelompok amida (Tika, 2010).
Asam amino memiliki peranan
penting bagi kehidupan terutama dalam
metabolisme. Salah satu fungsi penting
terutama adalah sebagai bangunan blok
protein yang linear dari rantai asam amino.
Asam amino juga penting dalam banyak
molekul
biologi
lainnya,
seperti
pembentukan bagian koenzim atau sebagai
prekursor untuk biosintesis dari molekul
seperti hemoglobin. Banyaknya manfaat
dari asam amino tersebut, maka perlu
diadakan
suatu
analisis
untuk
mengidentifikasi keberadaan asam amino
tersebut dalam suatu larutan protein.
Analisis asam amino dapat dilakukan
dengan dua metode yaitu metode kualitatif
dan metode kuantitatif. Metode kualitatif
dilakukan untuk mengetahui keberadaan
asam amino dalam protein, sedangkan lebih
lanjut dilakukan anlisis kuantitatif untuk
mengetahui jumlah asam amino dalam
protein. Analisis asam amino dengan
metode kualitatif dapat dilakukan dengan
cara melakukan uji-uji seperti berikut.

Tabel 1. Reaksi untuk mendeteksi asam amino

Reaksi Uji

Reaksi/Reagen

Uji Millon

HgNO3 dalam asam nitrat

dengan sedikit asam nitrit
Uji Hopkins-Cole Asam Glioksilat dalam H2SO4
pekat
Ninhidrin
Triketohidrin Hidrat

PbS

PbS (Timbal Sulfat)

Nitroprusida

Asam amino yang

dideteksi
Tirosin

Warna

Triptofan

Cincin
ungu
Biru

Asam -amino dan

peptide yang
memiliki gugus amino yang bebas.
Asam amino yang
dapat melepaskan
unsr S.
Sistein

Natrium nitroprusida dalam

NH3 encer
sumber: Tika, 2010 : 24 Buku Penuntun Praktikum Biokimia

Uji Millon
Uji Millon dilakukan untuk
mengidentifikasi adanya asam amino tirosin
pada suatu zat. Pereaksi Millon berupa
larutan merkuro dan merkuri nitrat dalam
asam nitrat. Jika kedalam larutan yang
mengandung asam amino dengan rantai
samping
gugus
fenolik
(tirosin)
ditambahkan reagen Millon, maka akan
segera terbentuk endapan putih yang jika
dipanaskan akan berubah menjadi warna
merah. Endapan yang terbentuk merupakan
garam kompleks dari tirosin yang ternitrasi
(Frieda,2002).
Uji Hopkins-Cole
Larutan protein yang mengandung
triptofan dapat direaksikan dengan pereaksi
Hopins-Cole yang mengandung asam
glioksilat (HOOC-CHO). Pereaksi ini dibuat
dari asam oksalat dengan serbuk magnesium
dalam air. Setelah dicampur dengan pereaksi
Hopkins-Cole, asam sulfat dituangkan
perlahan-lahan sehingga membentuk lapisan
di bawah larutan protein kemudian akan
terbentuk cincin ungu pada batas antara
kedua lapisan tersebut. Cincin ungu yang
tampak pada bidang batas antara kedua
cairan adalah hasil kondensasi triptofan
dengan gugus aldehida dari asam glioksilat
dalam suasana asam sulfat.
Uji Ninhidrin

Merah

Hitam
Merah

Apabila ninhidrin (triketohidrin

hidrat) dipanaskan bersama asam amino,
maka akan terbentuk kompleks berwarna.
Reagen yang digunakan pada uji ninhidrin
yaitu triktohidrin hidrat. Asam amino yang
dideteksi dengan uji ninhidrin yaitu asam amino dan peptida yang memiliki gugus amino bebas. Untuk mengetahui bahwa uji
ini positif akan dihasilkan warna biru.
Keseluruhan reaksi asam amino dengan
ninhidrin adalah sebagai berikut. (a)
dekarboksilasi oksidatif dari asam amino
dan produksi ninhidrin tereduksi, amoniak
dan karbondioksida (b) reaksi ninhidrin
tereduksi dengan molekul ninhidrin yang
lain dan dengan molekul amoniak yang
dibebaskan (c) pembentukan kompleks
berwarna biru. Untuk prolin dan hidroksi
prolin yang gugus aminonya tersubstitusi
memberikan hasil berwarna kuning.
(Frieda, 2002).
Uji PbS
Uji
PbS
dilakukan
untuk
mengidentifikasi adanya asam amino sistein
pada suatu zat. Pada uji ini, belerang yang
terdapat dalam asam amino sistein akan
dibebaskan sebagai ion sulfida dengan
kehadiran NaOH. Ion sulfida selanjutnya
akan bereaksi dengan ion Pb 2+ membentuk
endapan berwarna hitam. Reaksi yang
terjadi adalah sebagai berikut.
S2-(aq) + Pb2+(aq) PbS(s)
Uji Nitroprusida

Protein yang mengandung gugus

SH bebas seperti sistein memberikan warna
kemerah-merahan jika direaksikan dengan
natrium nitroprusida, Na2Fe(CN)5NO.2H2O
dalam larutan amoniak. Hal ini disebabkan
selain mengandung gugus COOH dan
gugus NH2, pada gugus R pada asam
amino mengandung gugus tiol (gugus
sulfidril) atau peptida (glutat ion). Reaksi
antara gugus sulfidril dari asam amino
(sistein),
peptida
(glutation)
dapat
direaksikan dengan natrium nitroprusida
dalam amonia berlebih menghasilkan
kompleks berwarna merah, dengan reaksi
sebagai berikut.
[Fe3+(CN)5NO]2- + NH3 + R-SH (NH4)2+
[Fe2+(CN)5NOSR]2-

Sebanyak 3 mL larutan protein

(albumin telur), larutan sampel unknown A
dan larutan asam amino (larutan tirosin,
glisin, triptofan, fenilalanin, sistin dan
sistein) ditambahkan 5 tetes reagen Millon
kemudian dipanaskan. Perubahan yang
terjadi kemudian diamati.
Uji Hopkins Cole
Sebanyak 2 mL larutan protein,
larutan sampel unknown A dan larutan asam
amino (larutan tirosin, fenilalanin, triptofan
dan glisin) ditambahkan 2 mL reagen
Hopkins-Cole, kemudian ditambahkan
sedikit demi sedikit H2SO4 pekat. Warna
yang terbentuk pada pertemuan kedua cairan
diamati dengan memutar perlahan-lahan
hingga terbentuk cincin berwarna ungu.
Uji Ninhidrin

METODE
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam
praktikum ini terdiri atas 8 buah tabung
reaksi, 3 buah pipet tetes, 2 buah gelas ukur
5 mL, 1 buah lampu spiritus, 1 kotak korek
api, 2 buah penjepit kayu, 1 buah pemanas,
2 buah gelas kimia 50 mL, 1 buah gelas
kimia 100 mL, 1 buah gelas kimia 250 mL,
1 buah kaca arloji, 1 buah spatula, 1 buah
batang pengaduk, 1 buah corong, dan 1 buah
gelas ukur 10 mL. Bahan-bahan yang
digunakan adalah 13 mL albumin telur,
larutan Pb-asetat, 2 mL reagen Millon, 12
mL reagen Hopkins-Cole, 3 mL reagen
Ninhidrin 0,1%, 20 mL larutan natrium
nitroprusida 1%, 30 mL larutan asam sulfat
pekat, 20 mL aquades, 2 mL ammonium
hidroksida, 10 mL larutan NaOH, 18 mL
sampel unknown A, asam amino tirosin,
triptofan, glisin, dan fenilalanin masingmasing 8 mL, 10 mL sistein dan 10 mL
sistin.

Prosedur Kerja
Uji Millon

Sebanyak 0,5 mL larutan ninhidrin

0,1% ditambahkan ke dalam 3 mL larutan
protein, larutan sampel unknown A dan
larutan asam amino (larutan tirosin,
fenilalanin, triptofan dan glisin), kemudian
dipanaskan hingga mendidih.
Uji PbS
Sebanyak 2 mL larutan NaOH dan 2
tetes Pb-asetat ditambahkan ke dalam 5 mL
larutan protein dan larutan sampel unknown
A kemudian dipanaskan dalam penangas air.
Perubahan warna yang terjadi diamati.

Uji Nitroprusida
Sebanyak 0,5 mL larutan natrium
nitroprusida 1% dan 0,5 mL larutan
amonium hidroksida ditambahkan ke dalam
5 mL mL larutan protein, larutan sampel
unknown A dan larutan sistein.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Berdasarkan percobaan identifikasi
asam amino pada larutan protein (albumin
telur) dan sampel unknown yang telah
dilakukan
diperoleh
hasil
seperti
tabelberikut :

Tabel 2. Hasil uji identifikasi asam amino pada larutan protein (albumin telur) dan
sampelunknown.

Sampel

Uji Millon

Albumin
Tirosin
Triptofan

+
+
-

Uji HopkinsCole
+
+

Glisin

Fenilalani
n
Sistin

Sistein

A
F
G
Uji Millon

Tidak
dilakukan
Tidak
dilakukan
-

Uji Ninhidrin

Pada uji Millon, larutan protein

(albumin telur) menunjukkan hasil uji
positif adanya asam amino. Asam amino
yang memberikan hasil positif pada uji
Millon adalah tirosin. Larutan albumin telur
ketika ditambahkan reagen Millon terbentuk
endapan putih (lihat gambar 3a). Endapan
putih yang terbentuk merupakan reaksi
antara Hg+ dengan asam amino tirosin.
Endapan putih tersebut mengalami reaksi
lebih lanjut dengan pemanasan.Selanjutnya,
pada proses pemanasan, HNO3 yang mulamula bertindak sebagai pelarut yang
mengoksidasi ion Hg+ menjadi Hg2+.
Endapan yang terbentuk merupakan garam
kompleks dari tirosin yang ternitrasiyang
berwarna merah (gambar 3b). Terbentuknya
larutan yang berwarna merah menunjukkan

HO

N
H

Tirosin

O
C

+
+
+

Uji natrium
nitroprusida
+
Tidak dilakukan
Tidak dilakukan

+
Tidak
dilakukan
+
Tidak
Tidak dilakukan
dilakukan
+
Tidak
Tidak dilakukan
dilakukan
Tidak
Tidak
Tidak dilakukan
dilakukan
dilakukan
Tidak
Tidak
+
dilakukan
dilakukan
+
+
bahwa dalam albumin telur mengandung
asam amino tirosin.

Uji selanjutnya yang dilakukan

adalah uji terhadap sampel unknown A,
F dan G menunjukkan hasil negatif (t
gambar 4). Hal ini menandakan bahwa
diantara ketiga sampel ini tidak ada
sampel yang mengandung asam amino
tirosin. Pengujian juga dilakukan
terhadap asam amino glisin, triptofan,
tirosin,fenilalanin, sistin, dan sistein
(gambar 5). Penambahan reagen Millon
pada zat yang mengandung asam amino
tirosin akan menyebabkan terbentuknya
endapan merah yang merupakan garam
kompleks dari tirosin yang ternitrasi
sesuai persamaan reaksi berikut:

O
Hg+(aq)

OH (aq)

Uji PbS

C
-

OH Hg+

(s)

Tirosin Ternitrasi

H
HO

N
H

O
C

+ OHg
2N

+
(aq)

C C
HNO3(aq)

OH

Tirosin

O-

N
H

H (aq)

Hg2+

(s)

Kompleks tirosin ternitrasi

(warna merah)

Gambar 2. Reaksi pembentukan kompleks tirosin ternitrasi

(a)
(b)
Gambar 3. (a) terbentuknya endapan putih pada albumin telur (b) terbentuknya
endapan merahpada albumin telur.

(a)
(b)
(c)
Gambar 4.Tidak terbentuk endapan merah pada sampel A (a)
sampel F (b) sampel G(c)

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

Gambar 5.Terbentuk endapan merah pada reaksi reagen Millon dengan tirosin (d), tidak terbentuk
endapan merah pada Glisin (a), Triptofan (b), Fenilalanin (c), Sistin (e), Sistein (f)
Uji Hopkins-Cole
hasil yang negatif karena tidak terbentuk
Pada pengujian ini, ketika larutan
cincin ungu (gambar 8). Dengan demikian
albumin
telur
ditambahkan
reagen
dapat disimpulkan bahwa sampel unknown
Hoppkins-Cole dan H2SO4 pekat terbentuk
A, F dan G bukan asam amino triptofan.
cincin berwarna ungu pada lapisan bawah
Pengujian juga dilakukan terhadap asam(gambar 7). Warna ungu tersebut merupakan
asam amino seperti: asam amino triptofan,
hasil kondensasi triptofan dengan gugus
larutan glisin, larutan fenilalanin, dan
aldehida dari asam glioksilat dalam suasana
tirosin. Dari pengujian tersebut hanya asam
asam sulfat. Hal ini mengindikasikan
amino triptofan yang menghasilkan cincin
bahwa dalam albumin telur mengandung
ungu (gambar 9). Berikut adalah persamaan
asam amino triptofan.
reaksi yang terjadi antara asam amino
Selanjutnya dilakukan pengujian
triptofan dengan reagen Hopkins-cole:
sampel unknown A, F dan Gmenunjukkan
O
H2
C

H
C

NH2

O
OH (aq)

Triftopan

OH

H
C

H2SO4

C
O

OH

O
NH (aq)

H2O

(l)

N
H (aq)

H H

asam glioksilat

asam 2,3,4,5-tetrahidro-Karbolin-4-karboksilat
Gambar 6. Reaksi pembentukan asam 2,3,4,5-tetrahidro-- Karbolin-4-karboksilat

Gambar 7. Terbentuk cincin ungu pada reaksi antara reagen Hopkins-Cole

dengan larutan albumin telur

Gambar 8.Tidak terbentuk cincin ungu pada rekasi antara reagen HopkinsCole dengan ketiga sampel unknown(A, F, G)

(a)

(b)

(c)

(d)

Gambar 9. Terbentuk cincin ungu pada reaksi antara reagen Hopkins-Cole dengan triptofan(c),
tidak terbentuk cincin ungu pada Glisin (a), Fenilalanin (b), dan tirosin (d).
Uji Ninhidrin
Uji ninhidrin merupakan uji yang
dilakukan untuk menentukan ada atau
tidaknya asam- amino bebas pada suatu
sampel yang akan diidentifikasi. Pengujian
larutan albumin telur menggunakan reagen
Ninhidrin menunjukkan hasil positif, yang
mana pada pengujian ini, ketika albumin
ditambahkan larutan Ninhidrin terbentuk
larutan berwarna biru setelah dipanaskan
(gambar 11). Pembentukan larutan

Pengujian
sampel
F
juga
menunjukkan hasil yang positif yang
ditandai dengan terbentuknya larutan
berwarna biru tua, sedangkan untuk sampel
A dan G uji bernilai negatif karena larutan
tetap berwarna bening dan tidak berubah
warna (gambar 12). Hal ini menunjukkan
sampel F mengandung asam amino
bebas, sedangkan sampel A dan G
tidak.Pengujian juga dilakukan terhadap
asam amino tirosin, triptofan, glisin dan
fenilalanin. Dari pengujian keempat asam
amino menunjukkan hasil positif yang
ditandai dengan terbentuknya larutan
berwarna biru keunguan (gambar 13). Hal
ini menunjukkan bahwa asam amino tirsin,
triptofan, glisin dan fenilalanin merupakan
asam amino. Berikut adalah reaksinya.

kompleks berwarna biru ini terjadi

karena dekarboksilasi oksidatif dari
asam amino dan produksi ninhidrin
tereduksi, NH3 dan CO2. Kemudian
terjadi reaksi antara ninhidrin tereduksi
dengan molekul ninhidrin yang lain dan
dengan molekul NH3 yang dibebaskan
sehingga terbentuk kompleks berwarna
biru.
O

O
H

OH
H2N

OH

(aq)

NH3(aq) CO2 R

(g)

OH (aq)

OH

C
H(aq)

(aq)

asam amino

Ninhidrin

Ninhidrin tereduksi

O
OH

Ninhidrin

N
OH (aq)

aldehid

3H2O(l)

H2O

H (aq)

(aq)

Ninhidrin tereduksi

(aq)

Kompleks berwarna biru

Gambar 10. Reaksi pembentukan kompleks berwarna biru pada uji Ninhidrin

Gambar 11.Terbentuk larutan berwarna biru pada reaksi Ninhidrin dengan

albumin telur

(a)
(b)
(c)
Gambar 12.Terbentuk larutan berwarna biru pada reaksi Ninhidrin dengan sampel F
(b), tidak terbentuk larutan berwarna biru pada reaksi Ninhidrin dengan
Sampel A (a) dan sampel G (c).

(a)
(b)
(c)
(d)
Gambar 13. Terbentuk larutan berwarna biru pada reaksi Ninhidrin dengan asam
aminoTirosin (a), Triptofan (b), glisin (c) , dan fenilalanin (d)
Uji PbS
Pengujian PbS dilakukan untuk
menguji ada atau tidaknya unsur S dalam
suatu zat. Ketika
albumin telur
ditambahkan larutan NaOH dan Pb-asetat
awalnya tidak berwarnaNamun, setelah
dipanaskan dalam penangas air, larutan
berubah warna menjadi hitam (gambar 15).

Endapan hitam tersebut merupakan PbS.

Adanya endapan hitam ini menandakan
bahwa albumin telur mengandung asam
amino sistein.Uji terhadap sampel A, F dan
G memberikan hasil negatif yang ditandai
dengan tidak terbentuknya endapan hitam
(lihat gambar 16). Reaksi yang terjadi pada
uji PbS adalah sebagai berikut:

S2-(aq)+ 2NaOH(aq)Na2S(aq) + 2 OH-(aq)

Na2S(aq) + Pb(CH3COO)2(aq) PbS(s) + 2CH3COONa(aq)
Endapan hitam
Gambar 14. Reaksi Uji PbS

Gambar 15.Terbentuk endapan hitam setelah

albumin telur direaksikan dengan NaOH, pb-asetat
dipanaskan
Uji
Nitroprusida

Natrium

Reaksi antara gugus sulfidril dari

asam amino (sistein), peptida, atau protein
dengan natrium nitroprusida dalam amonia
berlebih menghasilkan kompleks berwarna
merah. Kompleks berwarna merah tersebut
merupakan
Na2Fe(CN)5NO.2H2O.
Berdasarkan percobaan yang dilakukan,
larutan asam amino yaitu sistein yang telah
diuji nitroprusida, menghasilkan larutan
yang berwarna merah (gambar 18). Hal ini
menunjukkan bahwa dalam sistein memang
terdapat gugus SH bebas, karena reaksi ini
spesifik untuk gugus SH bebas.
Dalam albumin telur didapatkan
hasil uji positif terhadap nitroprusida yang

Gambar 16. Tidak tebentuk

endapan hitam setelah
ketiga sampel direaksikan dengan
NaOH, Pb-asetat dan dipanaskan

ditunjukkan dengan terbentuknya larutan

berwarna merah keunguan (gambar 19). Hal
ini mengindikasikan bahwa dalam albumin
terdapatasam amino sistein.
Uji
sampel F dan G memberikan hasil negatif
dengan natrium nitroprusida karena tidak
terbentuk kompleks berwarna merahgambar,
sedangkan untuk sampel A memberi hasil
positif yang ditandai dengan terbentuknya
kompleks berwarna merah (lihat gambar 20)
. Dengan demikian dapat disimpulkan
bahwa sampel F dan G bukan asam amino
sistein. Sedangkan sampel A adalah asam
amino sistein. Adapun reaksi yang terjadi
adalah sebagai berikut.

[Fe3+(CN)5NO]2-(aq)+ 2NH4OH(aq) + R-SH(aq) (NH4)2+[Fe2+(CN)5NOSR]2-(aq)

Gambar 17. Reaksi natrium nitroprusida dengan asam amino

Gambar 18.Terbentuk larutan merah pada reaksi antara natrium

nitroprusida dengan larutan sistein

Gambar 19.Terbentuk larutan merah pada reaksi antara natrium nitroprusida

dengan larutan Albumin telur.

(a)
(b)
(c)
Gambar 20.Terbentuk larutan merah pada reaksi antara natrium nitroprusida dengan larutan
sampel A (a), tidak terbentuk larutan merah pada reaksi antara natrium nitroprusida dengan
larutansampel F (b) sampel G (c)
SIMPULAN
Berdasarkan hasil percobaan yang
diperoleh dapat disimpulkan bahwa pada
albumin telur mengandung asam -amino
dan peptida yang memiliki gugus -amino
bebas, asam amino tirosin, asam amino
triptofan,
dan
asam
amino
yang
mengandung unsur belerang yaitu sistein.
Sampelunknown A merupakan asam amino
sistein karena menunjukkan hasil yang
positif pada uji Nitroprusida, sampel
unknown F merupakan asam asam -amino
bebas karena menunjukkan hasil positif
pada uji Ninhidrin. Sedangkan untuk sampel
G tidak mengandung asam amino karena

semua uji yang dilakukan menunjukkan

hasil yang negatif.
UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih penulis
sampaikan kepada Dr. I Nyoman Tika,
M.Si., sebagai dosen pengampu mata kuliah
Praktikum Biokimia atas bimbingan dan
masukan selama praktikum ini, Made
Wirahadi Kusuma selaku asisten dosen, dan
I Dewa Subamia selaku laboran di Jurusan

Pendidikan Kimia atas bantuan dalam

memberikan
segala
keperluan
yang
berkaitan dengan praktikum sehingga
percobaan ini dapat dilaksanakan dengan
baik.
DAFTAR PUSTAKA
Ariwulan, Dyah R. 2012. Reaksi Uji
terhadap Asam Amino. Dapat diakses
pada
:
http://nightray13kuro.blogspot.com/2012/01/biokimiaperc2-reaksi-terhadap-uji.html. diakses
pada tanggal 12 Maret 2016.
Fessenden, F dan Fessenden. 1994. Kima
Organik Jilid 2. Jakarta : Erlangga
Frieda Nurlita, dkk. 2002. Kimia Organik II.
Singaraja : IKIPNegeri Singaraja
Redhana, I Wayan. 2004. Biokimia Jilid 1.
Singaraja: IKIP Negeri Singaraja.
Tika, I Nyoman. 2010. Penuntun Praktikum
Biokimia. Singaraja: UNDIKSHA.