Sunteți pe pagina 1din 2

Dozarea lipidelor totale din snge

Metoda extraiei la cald


Principiul metodei
Lipidele totale din ser sunt extrase la cald cu amestec alcool eter, extractul
este evaporat la sec, dup care rezidul este cntrit.
Mod de lucru
Se adaug cu pictura, agitnd continuu 1 ml ser peste 20 ml amestec alcool
eter, ntr-un balon Erlenmeyer. Se agit 10 minute la temperatura camerei,
dup care se va ine pe baie de ap fierbinte timp de 1 minut i agitnd. Se
filtreaz apoi printr-un filtru cantitativ plisat i degresat n prealabil cu alcooleter. Se spal cantitativ balonul cu precipitat de dou ori cu cte 5 ml eter
uor nclzit. Filtratul i eterul de splare se trec ntr-o capsul, dup care se
evapor coninutul capsulei pe o baie de ap la sec. Reziduul se reia cu eter
i se filtreaz prin filtru cantitativ plisat ntr-o capsul tarat n prealabil
(greutatea = G). Se evapor eterul pe baie de ap, se rcete capsula, apoi
se cntrete i se menine n exicator pn la pond constant. Se noteaz
greutatea cu G.
Calculul
(G G) 1000 = g lipide / 1000 ml ser
n care: G = greutatea capsulei;
G = greutatea capsulei i lipide.
Metoda cu fosfovanilin
Principiul
Lipidele serice n prezena fosfovanilinei formeaz la fierbere, n mediu acid,
un complex colorat n rou. Intensitatea coloraie obinute se estimeaz
fotometric i este proporional cu concentraia acizilor grai nesaturai,
respectiv cu concentraia lipidelor totale din ser.
Mod de lucru
Se realizeaz urmatoarea schem experimental:
Reactivi
Ser
Soluie etalon
Ser fiziologic
H2O)
Ac. Sulfuric

Proba
0,1
(sau
4

Etalon
0,1
4

Martor
0,1
4

Se fierbe 10 minute pe baie de ap. Se rcete imediat sub curent de ap.


Probe
Soluie de fosfovanilin

0,1
2

0,1
2

0,1
2

Se agit puternic i se rcesc sub curent de ap. Se las n repaus 20-30 de


minute pentru dezvoltarea culorii. Intensitatea culorii, respectiv extincia se
determin fotometric la 530 nm.
Calcul
Se aplic relaia:
mg lipide totale/100 ml ser = (EP EM)/(EE EM) CE
unde: EP = extincia probei de analizat
EM = extincia martorului
EE = extincia etalonului
CE = concentraia soluiei etalon de triolein