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INTRODUCCIÓN
Fragilidad osmótica
Si una membrana separa dos soluciones que se encuentran en diferentes concentraciones de solutos,
la diferencia de presión osmótica causa un flujo en sentido opuesto al de la presión.
El intercambio catiónico que produce la célula esta determinado por las propiedades de la membrana del
hematíe, que controla el flujo pasivo de iones y la competencia metabólica de la célula, que determina a su
vez el bombeo activo de los cationes contra los gradientes de concentración.(2)
Tanto el liquido intracelular como extracelular contienen proteínas no difusibles a través de la membrana
debido a su gran tamaño. En condiciones normales no hay movimiento transmembranal de agua debido a
que la osmolaridad total y la concentración de solutos no difusibles es igual a ambos lados de las
membranas, en otras palabras, los líquidos intra y extracelulares son isoosmoticos e isotónicos entre si. Esta
situación sin embargo, se puede alterar cuando disminuye la concentración de proteínas en el plasma
sanguíneo como consecuente perdida de proteínas en la orina. Al disminuir la concentración de proteínas,
este se hace hipotónico respecto del líquido circundante, el que a su vez se hace hipertónico respecto al
anterior. (2)
Los términos hipertónico, hipotónico e isotónico, se refieren a los movimientos de agua que causan las
perspectivas soluciones.
La fragilidad osmótica de los hematíes refleja su capacidad de captar una cierta cantidad de agua antes de la
lisis. Viene dada por el cociente volumen/área de superficie. La capacidad del hematíe normal para soportar
la hipotonicidad se debe a su forma bicóncava, que permite que la célula incremente su volumen en cerca de
un 70% antes de que la superficie de su membrana se distienda; una vez que se alcanza este limite se
produce lisis.(1)
Cuando existe una alteración de la forma, como por ejemplo, en la esferocitosis hereditaria, este limite
disminuye y la hemolisis ocurre en presencia de soluciones salinas mas concentradas.(3)
El aumento de la fragilidad osmótica de los hematíes normales que se produce se debe a la hinchazón de las
células asociadas con una acumulación de sodio que excede la perdida de potasio. Otra causa está
relacionado con el incremento de la osmolaridad interna de los eritrocito por el reemplazo del polianión 2,3-
DPG por Cl-, que ejerce aproximadamente 3.7 veces más efecto osmótico.(1)
El test de fragilidad osmótica que consiste en mezclar sangre del paciente con soluciones decrecientes de
NaCL y medir la hemolisis que se produce para cada una de alas. Prueba se basa en la pobre capacidad del
esferocito para soportar la hipotonía del medio externo.
La medición de la fragilidad osmótica eritrocitaria nos da una información valiosa sobre la normalidad de los
hematíes del paciente, ya que un resultado anormal indica la presencia de una anomalía.(4)
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FRAGILIDAD OSMOTICA
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FRAGILIDAD OSMOTICA
El mecanismo exacto de destrucción de los glóbulos rojos por estos fármacos todavía no está esclarecido.
Compuestos como el azul de metileno y el monosulfato de fenacina oxidan directamente el NADPH a
NADP+. Otros como el ascorbato, la nitrofurantoína y el doxorubicina oxidan el GSH. Hay otros
compuestos químicos como la primaquina y el daunorubicina que oxidan tanto al NADPH como al GSH.
Los episodios típicos de hemólisis se producen de 1 a 3 d después de la administración del fármaco.
FUNDAMENTO
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FRAGILIDAD OSMOTICA
La membrana eritrocitaria es semipermeable, es decir, permite el libre paso de agua a través, pero
restringe el de ciertos solutos iónicos (Cl, K, Na). La medida de la capacidad de una población de eritrocitos
para resistir el efecto hipotónico del medio se denomina fragilidad osmótica eritrocitaria. Por lo tanto ciertas
soluciones producen cambios en los eritrocitos.(3)
Hipertonía
Si se colocan glóbulos rojos en una solución hipertónica, es decir, de concentración iónica superior en el
exterior de la célula, a la del interior de esta misma, se produce un flujo de agua desde el interior de la célula
hacia el exterior, por lo tanto pierde agua y de deshidrata, esto produce el efecto conocido como crenación
de las células, lo que significa que adquiere un aspecto dentado por diminución de su volumen.
Isotonía
Si las células son colocadas en una solución hipotónica con respecto a la concentración interna se produce el
efecto contrario, es decir el ingreso de agua a la célula y por consecuencia, una hidratación del eritrocito.
Hipotonía
Si la hipotonía del medio supera cierto límite, las células se hinchan por efecto del aumento de volumen
llegando eventualmente a romper la membrana, se aprecia una alteración de la membrana por la cual se
produce una salida masiva de la hemoglobina hacia el medio. El proceso de ruptura de la pared celular se
denomina hemolisis, cuando la hipotonía es absoluta la hemolisis es del 100%.
Por estos motivos es importante cuando una persona requiere que se le suministran soluciones intravenosas
están sean isotónicas con los fluidos intracelulares. Si esta precaución no es tenida en cuenta se puede
producir la crenación o la hemolisis con graves consecuencias para la salud del paciente.(4)
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MATERIAL Y REACTIVOS
• Espectrofotómetro
• Tubos de ensaye
• Material para venopuncion.
• Pipetas
• Puntillas
• Muestra hematológica
• Solución salina amortiguadora NaCl.
0.9%
0.85%
0.55%
0.50%
0.45%
0.33%
0.10%
PROCEDIMIENTO
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2.- preparar las soluciones salinas con sus respectivas concentraciones y colocando 5 ml de las
diferentes concentraciones en 7 tubos.
Se preparan las
soluciones a diferentes
concentraciones.
Se coloca 5 ml de
solución salina a
diferentes
concentraciones en
Nota: se coloco 5 ml de solución salina 0.9% en un tubo de ensaye el cual se utilizo como blanco para
la calibración del espectrofotómetro.
3.- agregar a cada tubo 0.05 ml de la muestra hematológica, mezclando inmediatamente y dejar
reposar por 30 minutos.
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Respectivamente se
coloco 0.05 ml de
muestra biológica a
cada tuvo con las
diferentes
Nota: este paso se realizo por duplicado, ya que se tomo muestra de otro compañero, para observar
posteriormente la diferencia de absorbancia.
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5.- aspirar el sobrenadante (no decantar), y leer la absorbancia de cada tubo en el espectrofotómetro.
RESULTADO
ABSORBANCIA
CONCENTRACIONES % DULCE X
0.9%
0.85% 0.043 0.032
0.55% 0.048 0,059
0.50% 1.029 1.050
0.45% 1.093 1.061
0.33% 1.116 1.068
0.10% 0.514 0.510
OBSERVACIONES
La concentración 0.33% se utilizara como el 100% de hemolisis, ya que la concentración 0.10% no dio
la absorbancia requerida, seguramente por contaminación el momento de preparar la solución salina
con su respectiva concentración.
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FRAGILIDAD OSMOTICA
CONCLUSION
El test puede realizarse por investigación medica de salud, sospecha de enfermedad o toxicidad, de igual
manera para determinar la efectividad del ciertos medicamentos, algunos antes mencionados.
Este test tiene un papel importante en la identificación de ciertas enfermedades, donde la mas recurrente es la
esferocitosis, aunque el incremento en la fragilidad es una propiedad de la forma relativamente esferoide de
la célula y es independiente de la causa de la esferocitosis, aunque conociendo las concentraciones de la
solución a la que se exponen los glóbulo rojos, se determina con veracidad la presencia de esta enfermedad o
de algún otro padecimiento.
Existen otras pruebas que se basan en principio similares, como el test de autohemolisis, la lisis en glicerol
acidificado o el estudio de la deformabilidad eritrocitaria. (5)
BIBLIOGRAFIA
1) Lewis, S. “ Dacie And Lewis Hematologia Practica”.(10ª Edición).Edit. Elsevier España. Pag 183.
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FRAGILIDAD OSMOTICA
2) Julio, E. & Garcia, J.(1998). “Fisiologia I. Celulas, Organos Y Sistemas”. Impreso En Mexico.
Pag. 121.
3) Lluis, J. & Corrons, J.(2006). “Manual De Tecnicas De Laboratorio En Hematologia”.(3ª
Edición). Edit. Elsevier Masson. Pag. 469.
4) Eduardo, J.; Hector, S. &Oscar, H. (2006).“Qumica General”.(2ª Edicion). Edit. Universidad
Nacional De Litoral.
5) Jesus, F. & Fermin, M.“ Hematología, Manual Básico Razoinado”. (3ª Edición). Edit. Elsevier
España. Pag. 31
6) Miale, J. “Hematologia: Medicina De Laoratorio”.(6ª Edición). Edit. Reverte. Pag, 650.
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