ACIZII NUCLEICI

Tagadiuc Olga,
dr.hab. t. med.,
conferen iar universitar

Tipurile (1)

ADN
Localizarea nucleoid procariote;
nucleu, mitocondrii - eucariote
Func ia conservarea i transmiterea
informa iei genetice ntre genera ii
Componen a chimic 1. Bazele azotate A, G, C, T
2. Pentoza dezoxiriboza
3. Restul fosfat

Tipurile (2)

ARN
Localizarea
procariote - citoplasm , ribozomi
eucariote nucleu, citoplasm , ribozomi
Func ia realizarea informa iei genetice
Componen a chimic 1. Bazele azotate A, G, C, U
2. Pentoza riboza
3. Restul fosfat

Nivelurile organiz rii structurale

a ADNului:
1. dublul helix
2. superhelixul ADNului
3. nucleozomul
4. cromatina i cromozomii

Succesiunea nucleotidic
a ADN i ARN

STRUCTURA ADNului

STRUCTURA ADNului

Zamudio N M et al. Reproduction 2008;136:131-146

Ierarhia structural a ADN

Source: http://www.nature.com/scitable/topicpage/dna-packaging-nucleosomes-and-chromatin-310

The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1962

was awarded jointly to Francis H.C. Crick,
James D. Watson and Maurice H.F. Wilkins
"for their discoveries concerning the molecular
structure of nucleic acids and its significance for
information transfer in living material.
http://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1962/

Nivelurile organiz rii structurale

a ARN
1. Primar succesiunea ribonucleo-

tidic n catena polinucleotidic

2. Secundar 3. Ter iar n func ie de
4. Cuaternar tipul ARNului

Structura tARN
1. Primar succesiunea ribonucleo-

tidelor n catena polinucleotidic

(n medie 95 nucleotide)
1. Secundar n forma foiii de
trifoi
2. Ter iar n forma literei L

Structura
secundar a
ARNt

Structura
ter iar a
ARNt

Structura ARNr

Structura ribozomilor

Structura ribozomilor

Realizarea informa iei genetice

1.
2.
3.
4.
5.

Replicarea sau biosinteza ADNului

Transcrierea sau biosinteza ARNului
Transcrierea invers
Replicarea ARNului
Transla ia sau biosinteza proteinelor

REPLICAREA
1.
2.
3.
4.

Semiconservativ
Matri a molecula integr de ADN
Substraturile dATP, dGTP, dCTP, dTTP, ATP, GTP,
CTP, UTP
Complexul polienzimatic:
Helicaza
Topoizomerazele I i II
Primaza sau ARN-polimeraza-ADN-dependent de
ini iere
ADN-polimeraza I, II i III
Ribonucleaz H
ADN-ligaza

REPLICAREA
semiconservativ

ETAPELE REPLIC RII

1.
2.
3.

Ini ierea
Elongarea
Terminarea

Replicarea la procariote
replicare

ETAPELE REPLIC RII Ini

1.
2.

3.
4.
5.

ierea

Mediat de proteinele dnaA, dna B i dna C

Situsul de ini iere:
Punctul ORI
boxa dna A 5-TTATCCACA-3
boxa dna B 5' - GATCTNTTNTTTT - 3
Topoizomeraza
Proteinele SSB (Single-stranded DNA-binding protein)
dnaG Primaza ARN-polimeraza-ADN dependent de
ini iere

ETAPELE REPLIC RII

Ini ierea formarea furcii replicative

ADN-polimerazele
Gena

II

III

polA

polB

polC

Subumit i

> 10

Viteza polimeriz rii

16-20

40

250-1000

Activ. exonucleazic
3' 5'

Activ. exonucleazic
5' 3

Rolul

Repara ie

Repara ie

Sintez

ADN-polimeraza III
Principala enzim a
sintezei ADN la procariote

are activitate
polimerazic 5 3
are activitate
exonucleazic 3

: men ine structura

heterodimeric

MECANISMUL REPLIC RII ELONGAREA

http://themedicalbiochemistrypage.org/images/replicationforkdetail.jpg

MECANISMUL
REPLIC RII
ELONGAREA
sinteza catenei
ntrziate

http://www.slideshare.net/mbarshan/dna-replication-in-eukaryotes-and-prokaryotes

MECANISMUL REPLIC RII TERMINAREA

ter - situsurile de terminare a replic rii la procariote

Repara ia
ADN-ului

Repara ia
ADN-ului

10

Xeroderma
pigmentosum

TRANSCRIEREA
Matri a un fragment al unei catene a ADN
transcriptonul
2. Substraturile ATP, GTP, CTP, UTP
3. ARN-polimeraza-ADN-dependent
1.

TRANSCRIEREA
Transcriptonul sau unitatea de transcrip ie

11

ETAPELE TRANSCRIERII

3.

Ini ierea
Elongarea
Terminarea

4.

La eucariote
Modific rile posttranscrip ionale

1.
2.

ETAPELE TRANSCRIERII
Ini ierea

http://course1.winona.edu/sberg/ILLUST/promoter.gif

MECANISMUL
TRANSCRIERII

12

Mecanismele termin rii transcrip iei

BIOSINTEZA PROTEINEI TRANSLA IA

13

TRANSLA IA
1. Matri a molecula ARNm
2. Substratele moleculele activate ale
aminoacizilor - aminoacil~ARNt
3. Complexul polienzimatic:
Aminoacil-ARNt-sintetazele
Peptidiltransferaza
Proteinele specifice IF, EF, RF

Etapele transla iei

1.
2.
3.
4.
5.

Activarea aminoacizilor
Ini ierea
Elongarea
Terminarea
Modific rile posttransla ionale

Activarea aminoacidului

E aminoacilARNt sintetaza

14

Ini ierea
biosintezei
proteinei
pasul I

Ini ierea biosintezei proteinei

pasul II

Ini ierea biosintezei proteinei

pasul III

15

Ini ierea
pasul IV

Elongarea catenei polipeptidice

Elongarea catenei polipeptidice

16

Elongarea catenei polipeptidice

Elongarea catenei polipeptidice

http://themedicalbiochemistrypage.org/images/translation-elongation.png

Terminarea
biosintezei
proteinei

17

Particularit ile biosintezei colagenului

Etapa I.
Sinteza lan urilor polipeptidice primare
se produc peste 28 tipuri de colagen
(fibrilare i nefibrilare) n baza informa iei din
cca 34 gene specifice COL
tipurile catenelor polipeptidice primare se
noteaz (I), (II), (III) etc.
subtipurile catenelor polipeptidice primare se
noteaz 1(I), 2(I), etc.

Particularit ile biosintezei colagenului

Etapa I.
Sinteza lan urilor polipeptidice primare
toate catenele au succesiune aminoacidic
similar (Gli-X-Y)n
se asambleaz cca 200 AA/min.
catenele se produc n form de precursori pro- , ce posed secven e aminoacidice
suplimentare la ambele capete

Particularit ile biosintezei colagenului

Etapa II. Hidroxilarea radicalilor Pro i Liz

18

Particularit ile biosintezei colagenului

Etapa II. Hidroxilarea radicalilor Pro i Liz

Enzimele prolil hidroxilaza i lizil hidroxilaza

Fac parte din Oxidazele Microzomiale cu Func ii
Mixte (OMFM)
Sunt active doar n prezen a O2 , vit. C (acid
ascorbic) i Fe2+
Reac ia are loc cu consum de -cetoglutarat
Hipovitaminoza C scorbutul diminueaz rata
hidroxil rilor i rezisten a colagenului

1.
2.

3.

4.

Particularit ile biosintezei colagenului

Etapa III.
Formarea helixului triplu protropocolagenului
1.
2.

Se asociaz trei catene primare

Se formeaz helixul triplu
protropocolagenul con ine fragmente
nespiralizate la ambele capete ce sunt
unite prin leg turi disulfurice

Particularit ile biosintezei colagenului

Etapa IV. Glicozilarea protropocolagenului

1.
2.

Se glicozileaz radicalii hidroxilizinei

Se fixeaz resturi glucozil-galactoz la
gruparea -OH

19

Particularit ile biosintezei colagenului

Etapa IV. Glicozilarea protropocolagenului

Particularit ile biosintezei colagenului

Etapa V.
Expulzarea protropocolagenului din celul
n matricea extracelular
i transportul la fibra n cre tere
1. Moleculele se concentreaz n aparatul Golgi.
2. Se formeaz vezicule secretoare.
3. Veziculele migreaz spre membrana celular i
fuzioneaz cu ea.
4. Con inutul veziculelor se elimin n spa iul
extracelular.

Particularit ile biosintezei colagenului

Etapa VI. Maturizarea protropocolagenuluiI
1.

2.

3.

Scindarea fragmentelor n exces de la capetele

N- i C-terminal
Enzimele procolagen-N-peptidaza i
procolagen-C-peptidaza
Se formeaz unitatea structural a colagenului TROPOCOLAGENUL

20

Particularit ile biosintezei colagenului

EtapaVI. Maturizarea protropocolagenuluiI

Particularit ile biosintezei colagenului

EtapaVII. Oxidarea radicalilor Liz i Hyl
1.
2.
3.

Este catalizat de enzima Lizil oxidaza

Necesit prezen a ionilor de cupru
Se formeaz alizina i hidroxializina

Particularit ile biosintezei colagenului

EtapaVIII. Formarea leg turilor covalente ncruci ate n
cadrul asambl rii microfibrilelor

Are loc prin:

Condensarea radicalilor alizinei cu cei ai lizinei
Condensarea a 2 radicali de alizin
Condensarea radicalilor alizinei cu histidina

21

Particularit ile biosintezei colagenului

EtapaVIII. Formarea leg turilor covalente
ncruci ate n cadrul asambl rii microfibrilelor

Particularit ile biosintezei colagenului

EtapaVIII. Formarea leg turilor covalente
ncruci ate n cadrul asambl rii microfibrilelor

Particularit ile biosintezei colagenului

EtapaIX. Asamblarea fibrilelor din microfibrile
Etapa X. Asamblarea fibrelor din fibrile

22

Sinteza colagenului

http://www.oulu.fi/biocenter/groups/myllyharju/details

Deregl rile ereditare ale

biosintezei colagenului
Osteogenesis imperfecta (OI)
Cauza muta ii n gena ce codific catenele
1 i 2 ale colagenului tip I
Tip I OI defect cantitativ diminuarea cu 50% a
sintezei colagenului normal
Tipurile II, III i IV OI defect structural cel mai
frecvent substitu ia unui radical Gli cu
un aminoacid cu radical nc rcat sau
polar, ce afecteaz formarea helixului

Deregl rile ereditare ale biosintezei colagenului

Osteogenesis imperfecta
Semne clinice:
1.
Craniul nepropor ional de mare, fa de trunchi,
insuficient osificat
2.
Fa triunghiular , aplatizat
3.
Oase tubulare lungi, osteoporotice
4.
Fracturi multiple pe parcursul vie ii
5.
Scolioz
6.
Sclere albastre
7.
Diminuarea acutit ii auzului
8.
Dentinogenesis imperfecta

23

Deregl rile ereditare ale biosintezei colagenului

Osteogenesis
imperfecta
a.
b.

Colagen normal
Colagen anomal
specific OI

OSTEOGENESIS IMPERFECTA
Click to add an outline

OSTEOGENESIS IMPERFECTA

24

Deregl rile ereditare ale biosintezei colagenului

Dentinogenesis imperfecta

Deregl rile ereditare ale biosintezei colagenului

Sindromul Ehlers-Danlos
Tipurile: clasic, hipermobil, vascular, kifoscoliotic,
artrohalazic, periodontal (tipul VIII)
Cauze: modific ri structurale ale colagenului tip III, V,
caren a ereditar a lizil oxidazei, procolagen-Npeptidazei i procolagen-C-peptidazei

Sindromul Ehlers-Danlos
a. hiperelasticitatea pielii
b. hipermobilitatea articula iilor

25