Examenul fizic al sngelui

Volemia cantitatea total de snge circulant

Normovolemia
- normovolemia simpl cu raport normal ntre plasm i elementele figurate
- normovolemia oligocitemic cantitatea de elemente figurate sub valoarea
normal
- normovolemia policitemic o cantitate normal de snge i elemente figurate
peste valoarea normal (poliglobulie)
Hipovolemia
- simpl (oligohemie - hemoragii)
- oligocitemic (scade cantitatea de snge, dar n special nr. elementelor figurate
afeciuni ale organelor hematoformatoare)
- policitemic (scade cantitatea de snge, crete concentraia elementelor figurate
deshidratare)
Hipervolemia (pletora)
- simpl (polihemia)
- oligocitemic crete hidremia pletora adevrat
- policitemic crete cantitatea de elemente figurate policitemie vera
Hemostaza capacitatea de coagulare a sngelui i oprirea hemoragiei
3 componente:
- vascular leziunea vasului
- plachetar aderarea trombocitelor la peretele vascular lezat
- plasmatic (factorii coagulrii)
Timpul de sngerare n urma unei nepturi produse la nivel cutanat cu laneta.
Timpul de coagulare total
Retracia coagulului
Numrtoarea de trombocite
Aspecte semiologice:
- sindroame hemoragipare apariia spontan de hemoragii pe mucoase, piele,
pierderi de snge epistaxis, hematurie, melen, lipsa de coagulare a sngelui n cazul
plgilor accidentale sau chirurgicale
- trombozele coagulri intravasculare
Culoarea snge, plasm, ser
Normal sngele arterial rou aprins, sngele venos rou nchis
- plasma i serul incolore sau glbui, cu diferite nuane n funcie de specie
Modificri: - snge de culoare neagr asfixii, antrax
- plasma i serul verzui n icter, opalescente cnd sunt bogate n lipide
VSH-ul crescut n nefroze, anemii, boli infecioase, tumori evolutive
- sczut n afeciuni hepatice, hemoconcentraie, colaps, alergii

Determinarea hemoglobinemiei
Hemoglobinemia se determin n laborator prin metoda colorimetric
semicantitativ Sahli-Wert i prin metoda colorimetric standardizat care
utilizeaz reactiv Drabkin. Reactivul Drabkin are urmtoarea compoziie: fosfat
monopotasic 0,14 g + cianur de potasiu 0,05 g + fericianur de potasiu 0,20 g + ap
distilat ad 1000 ml, pH-ul soluiei 7,2-7,5. Principiul acestei reacii colorimetrice const
n faptul c fericianura de potasiu oxideaz fierul feros din molecula hemoglobinei n fier
feric, acesta intr n reacie cu toate tipurile de hemoglobin din snge (formnd
methemoglobina) cu excepia sulfhemoglobinei. Methemoglobina format se combin cu
cianura de potasiu, rezultnd cianmethemoglobina (cianhemiglobina), compus stabil
fotocolorimetrabil.
Metoda Sahli-Wert
Principiu: hemoglobina n contact cu HCl formeaz clorhidratul de hematin de
culoare maroniu-ciocolatie care se dilueaz cu ap distilat pn la nuana celor 2
etaloane ale hemoglobinometrului Sahli-Wert.
Materiale necesare:
- Hemoglobinometrul Sahli-Wert care are o eprubet gradat n uniti
hemometrice Sahli-Wert de la 0 la 140 i o scal de la 0 la 22 g hemoglobin/dl snge
- pipet Hagedorn cu o singur gradaie (0,02 cm3, 0,02 ml sau 20 l)
- acid clorhidric N/10
Mod de lucru:
- se pune HCl n eprubeta hemocitometrului cu o pipet Pasteur pn la
diviziunea 10 de pe scala Sahli-Wert
- se aspir n pipeta Hagedorn pentru hemoglobin snge pn deasupra
gradaiei
- se terge pipeta cu hrtie de filtru i se aduce coloana de snge la
diviziunea de 0,02 cm3, 0,02 ml sau 20 l
- se introduce sngele din pipet n fundul eprubetei unde se afl HCl N/10,
se agit i se las n repaus 5 minute, timp n care se formeaz clorhidratul de hemin
(hematin) de culoare maroniu-ciocolatie
- apoi cu o pipet Pasteur ce conine HCl N/10 sau ap distilat, pictur cu
pictur se dilueaz coninutul eprubeti pn la culoarea etaloanelor
- se citete la nivelul meniscului inferior pe scala uniti hemometrice SahliWert i se face calculul n vederea exprimrii n g Hb/dl snge
Calcul:
100 uniti hemometrice Sahli-Wert 16 g
60 uniti hemometrice Sahli-Wert .. x
x=

60 16
= 9,6 g Hb/dl snge
100

Cnd cantitatea de hemoglobin este sczut fenomenul poart numele de

oligocromie, iar cnd este crescut de pleocromie.

Determinarea hematocritului (PCV volum celular procentual)

Hematocritul exprim cantitatea de mas celular din 100 ml snge, se exprim
procentual (%).
Determinarea se face prin:
- macrometoda Wintrobe-Rmer
- micrometoda Guest
Mod de lucru:
Se recolteaz snge pe anticoagulant (EDTA sau heparin).
Cu o pipet Pasteur efilat se introduce sngele n prealabil omogenizat n tuburi,
care sunt sudate la un capt, cu grij pentru a nu rmne goluri de aer.
Se centrifugheaz 30 minute la 3.000 turaii/minut
Se msoar nlimea total (H) i cea a masei celulare (h).
De exemplu la o nlime total a coloanei de snge de 90 mm, nlimea masei
celulare este de 40 mm.
H: 90 .100%
h: 40 x
x=

h 100
=
H

40 100
90

= 44,4%

Ht = 44,4%
Cnd hematocritul este crescut vorbim de poliglobulie, iar cnd hematocritul este
sczut este vorba de anemie, hemodiluie.
Rezistena globular a hematiilor
pH-ul sangvin uor alcalin

Semnificaia modificrii unor constante biochimice ale sngelui

Modificrile sodiului:
Distribuia sodiului n organism difer de cea a potasiului. Sodiul este predominant
extracelular datorit pompelor de sodiu din membran. Funcia renal este cel mai
important mecanism homeostatic pentru corelarea concentraiilor de sodiu i potasiu.
Eliminarea sodiului este controlat de aldosteron.
creterea (hipersodemia, hipernatremia) poate avea loc n diabetul zaharat, n
diabetul insipid, hiperadrenocorticism, aport crescut de sodiu, deshidratare, diet
hiperproteic, diurez osmotic, restricie hidric, efort fizic exagerat, administrare de
corticosteroizi, hipokalemie sever.
scderea (hiposodemia, hiponatremia) reprezint scderea osmolaritii plasmei
i apare n hipoadrenocorticism, deshidratare sever (vom, diaree), diabet zaharat,
rupturi ale vezicii urinare, administrarea de lichide fr sodiu, faza final a
insuficienei renale, tratament cu diuretice, polidipsie psihogen, insuficien renal
acut (faza poliuric), hipertensiune (insuficien cardiac congestiv),
hipoalbuminemie, tratamente cu antiinflamatorii nesteroidiene, diurez osmotic.
Modificrile potasiului:
Nivelul potasiului nu este ntotdeauna un indicator al spaiului intracelular. n acidoz
schimbul ionic de H+ i K+ duce la depleia potasiului intracelular i creterea
concentraiei plasmatice, determinnd alcaloz. Eliminarea potasiului este controlat de
aldosteron, prin mpiedicarea reabsorbiei la nivelul tubilor renali distali.
creterea (hiperpotasemia, hiperkalemia) apare n insuficiena renal acut, n
hiperadrenocorticism, iatrogen (administrare de clorur de potasiu), distrugeri tisulare
masive, acidoz metabolic, aport sczut de sodiu, obstrucie uretral, aciunea unor
medicamente (de ex. digital), ruptura vezicii urinare, diabet zaharat.
scderea (hipopotasemia, hipokalemia) reprezint alcaloz metabolic
extracelular, acidoz metabolic intracelular: terapie cu diuretice, diabet zaharat,
afeciuni nsoite de poliurie, vom, diaree, insuficien renal cronic (n special la
pisici), tratamente cu insulin, administrare de steroizi, exces de bicarbonat n
tratamentul acidozei, administrare de fluide fr potasiu n perfuzie, tratament cu
mineralocorticoizi n cantitate excesiv, insuficien renal cronic (faza terminal),
afeciuni hepatice cronice, trombocitoz, hiperadrenocorticism, insuficien renal
acut (faza poliuric), alcaloz (respiratorie sau metabolic), hipotermie,
hipomagneziemie.
Modificrile calciului:
Calciul este un mineral esenial implicat n multe procese din organism. Intr n
componena scheletului, particip la activarea unor enzime, este implicat n metabolismul
muscular, n coagularea sngelui i n reglarea osmozei. n snge calciul se gsete 50%
sub form ionizat, 40% legat de proteine i 10% complexat cu anioni cum ar fi citratul i
fosfatul. Numai calciul ionizat este biologic activ n formarea oaselor, n activitatea
neuromuscular, n procesele biochimice din celule i n coagularea sngelui. Factorii
care guverneaz concentraiile plasmatice totale sunt complexe i implic alte elemente

chimice, proteine i hormoni. Metabolsimul calciului, fosforului i albuminei sunt

interdependente. Valorile calciului seric trebuie ajustate innd cont i de eventualul nivel
al albuminei.
creterea (hipercalcemia) apare n aport excesiv pe diferite ci (oral, injectabil), n
excesul de parathormon, la animalele tinere, n cretere rapid, n anumite tipuri de
cancer, n unele afeciuni osoase.
scderea (hipocalcemia) apare n hiperfuncia paratiroidian, n hipovitaminoza
D, n aport nutriional sczut, n adsorbia intestinal redus (diaree), n intoxicaia cu
antigel (etilen glicol). Influeneaz timpul de coagulare, excitabilitatea
neuromuscular, apar tulburri cardiace, este favorizat apariia fenomenelor alergice
(calciul mpiedic degranularea mastocitelor).
Modificrile magneziului:
Magneziul este al patrulea cation ca abunden n organism. Aproape 50% din el este
sechestrat n oase i nu poate fi trecut n alte compartimente. n lichidul extracelular se
gsete aproximativ 1% din magneziul total al organismului, restul fiind n
compartimentul intracelular.
creterea (hipermagnezemia) determin adinamie, aritmie cardiac, hiporeflexe,
hipotensiune, tulburri respiratorii
scderea (hipomagnezemia) duce la creterea excitabilitii neuro-musculare,
tulburri cardiace, hipertensiune arterial.
Modificrile fosforului:
Fosforul seric este n principal reglat de rinichi prin aciunea hormonului paratiroidian.
Nivelele anormale sunt cauzate de variaiile din alimentaie, excreiei renale sczute i de
dereglrile hormonale care afecteaz calciul seric.
fosforul crete n hiperazotemia prerenal, renal i postrenal, la animalele tinere
(sub 1 an), n hiperparatiroidism la pisic, n hipoparatiroidismul primar, n
hipervitaminoza D, n necroze tisulare, n neoplazii osoase.
fosforul scade n unele neoplazii maligne, n terapia cu glucocorticoizi, n
hiperparatiroidismul primar, n administrarea de substane ce chelateaz fosforul, n
osteomalacie, n hiperadrenocorticism, n hipovitaminoza D, n afeciuni ale tubilor
renali.
Modificrile clorului:
Clorul se gsete n principal n spaiul extracelular i tinde s nsoeasc sodiul n
micrile pasive ale acestuia.
crete n deshidratare, acidoz, disfuncii renale.
scade n regim hiposalin, afeciuni gastrointestinale, n obstrucia esofagian.
Modificrile cuprului:
Implicat n procesele de hematogenez. Crete n infecii i tumori, scade n carene,
nefroze.
Modificrile glicemiei:

Glucoza este sursa de energie a organismului i este reglat de insulin i glucagon.

Glucoza trece prin glomerulii renali i este reabsorbit n totalitate de tubulii renali. Dac
nivelul plasmatic al glucozei crete acest mecanism este saturat i pragul renal este
depit, atunci glucoza apare n urin.
creterea (hiperglicemia) apare postprandial, n diabetul zaharat, n urma
tratamentul cu medicamente hiperglicemiante (ex. corticosteroizi)
scderea (hipoglicemia) apare n malnutriie, n malabsorbie intestinal, n
hiperinsulinemii (administrri de insulin, insulinoame), n leziuni ale sistemului
nervos central
Acidul lactic - apare n urma glicolizei anaerobe, crete n hepatopatii, dup efort
susinut i n urma consumului de porumb n faza de lapte.
Corpii cetonici acetona, acidul acetoacetic, acidul betahidroxibutiric
Rezult din oxidarea n exces a acizilor grai datorit utilizrii reduse a glucidelor.
Prezena n cantitate mare n snge poart denumirea de cetonemie, boala numindu-se
cetoz (acidocetoz). Apare n inaniie, exces de grsimi, diabet zaharat i renal,
hipertiroidism, boala Cushing.
Acidul piruvic provine din metabolismul glucidic, crete n hipovitaminoza B1.
Modificrile proteinemiei:
Proteinele serice variaz mult ca structur i funcie. Nivelele anormale ale acestora
poart numele de disproteinemii. Concentraiile proteinei totale i ale albuminei sunt
determinate, iar globulinele sunt calculate prin scderea albuminelor din proteina total.
Nivelul proteinelor totale este afectat de factori fiziologici sau patologici. Pot fi sczute la
natere, crescnd pn la nivelele adulilor ntre 6 luni i 1 an. La animalele n vrst
nivelul proteinei totale este crescut n special pe baza IgG. Nivelul proteinei serice este
aproximativ cu 5% mai mic dect al celei plasmatice datorit pierderii fibrinogenului n
procesul de coagulare.
creterea (hiperproteinemia) poate fi relativ (datorit deshidratrii) sau absolut,
cnd are loc pe seama unuia dintre componenii proteici sangvini.
scderea (hipoproteinemia) poate fi relativ n hemodiluie sau absolut n stri
de malnutriie, malabsorbie, n insuficiena hepatic (deficit de sintez), n afeciuni
cronice cu pierderi de substan (infecii cronice)
Modificrile albuminemiei:
Albumina seric, principalul determinant al presiunii oncotice, transport numeroase
substane. concentraia sa seric este determinat de rata dintre sintez i degradare sau
pierdere, de distribuia n patul intra- i extravascular i de volumul plasmei.
creterea (hiperalbuminemia) poate fi relativ (datorit deshidratrii)
scderea (hipoalbuminemia) poate fi relativ n hemodiluie sau absolut n stri
de malnutriie, malabsorbie, n insuficiena hepatic (deficit de sintez), n afeciuni
cronice cu pierderi de substan (infecii cronice), n ciroz, n diet sczut n
protein, n pierderea de la nivel renal (sindrom nefrotic), n gastroenteropatii cu
pierdere de protein, n arsuri.

Modificrile globulinelor serice:

creterea (hiperglobulinemia) apare n infecii (datorit componentei gamma-), n
afeciuni alergice, n sindromul nefrotic (pe baza componentei alfa2)
scderea (hipoglobulinemia) n afeciunile hepatice (fraciunea alfa2), n stri de
inaniie, n boala de iradiere
1-globulinele cresc n stri inflamatorii, n colagenoze sau boli degenerative.
2-globulinele cresc ca o reacie nespecific la ageni stresani din mediu de diferite
origini i n amiloidoz.
1- i 2-globulinele cresc n afeciuni renale - glomerulonefrit i pielonefrit.
-globulinele se modific n special n diferite stri anemice, fiind crescute n anemia
feripriv i sczute n anemia aplastic sau hipoproteinemic.
-globulinele sunt n special anticorpi. Hipergamaglobulinemia apare n diferite afeciuni
inflamatorii, compensator n hipoalbuminemie (afeciuni hepatice cronice) i n afeciuni
neoplazice. Hipogamaglobulinemiile apar la animalele areactive, cahectice, epuizate
fizic, n afeciuni ale timusului, n boala de iradiere, n unele intoxicaii etc.
Agamaglobulinemia apare ca maladie ereditar.
Fibrinogenul:
Fibrinogenul este sintetizat n ficat i are roluri n coagulare i n inflamaie. Nivelul
fibrinogenului crete n inflamaii, n supuraii i scade n afeciuni hepatice, n tumori, n
intervenii chirurgicale importante i n CID.
Hemoglobina:
Creterea hemoglobinei poate s fie absolut n poliglobulii i relativ n
hemoconcentraie de diferite naturi. Scderea hemoglobinemiei poate s apar fie datorit
scderii numrului de eritrocite, fie n urma reducerii concentraiei hemoglobinei n
eritrocite. Poate fi efectul pierderilor de snge, al hemolizei sau al insuficientei producii
de hemoglobin (anemie feripriv, cupripriv, proteopriv, hipovitaminoza B12, deficit
de acid folic).
Colesterolul:
Colesterolul este produs n ficat i obinut prin diet. Colesterolul plasmatic ajunge la
concentraii mari sub form esterificat i mai puin n forma liber. mpreun formeaz
colesterolul total. Esterificarea colesterolului are loc n ficat. Este precursorul hormonilor
steroizi. Este de asemenea fragmentat n ficat pentru a se transforma n acizi biliari.
Surplusul de colesterol este excretat n cile biliare.
Colesterolul total crete n colestaz, n glomerulo-nefrita cronic, n nefroza lipoidic, n
scleroza renal, n diabetul zaharat i scade n hipofuncia hepatic (hepatit-hepatoz),
tulburri ale suprarenalelor, n decompensri cardiace, n sindroame anemice, stri de
inaniie etc.
Colesterolul liber crete n cazul scderii capacitii de esterificare a acestuia de ctre
ficat.
Trigliceridele:

Trigliceridele pot fi ingerate sau sintetizate de ctre ficat. Sunt complexate cu

colesterolul, cu fosfolipidele i proteinele plasmatice pentru a forma lipoproteine.
Trigliceridele sunt principalul constituient al chilomicronilor i al lipoproteinelor cu
densitate foarte sczut (very low density lipoproteins VLDL), care sunt responsabile
pentru particulele lipide observabile cu ochiul liber n probele de ser sau plasm.
Chilomicronii se separ i formeaz un strat superficial prin refrigerare, pe cnd VLDL
rmn dispersate. Dac proba prezint particule lipidice dup o diet de 16 ore, atunci se
consider c este vorba de o hiperlipemie patologic.
Creterea trigliceridelor poate s fie: postprandial, n hipotiroidism la cine, n diabetul
zaharat, n flmnzire, n hiperadrenocorticism, n obstrucia canalelor biliare, n
pancreatit, n glomerulopatii, n acromegalie, n obezitate, n terapia cu medicamente
antitiroidiene.
Bilirubina:
Este un pigment biliar provenit din catabolismul hemoglobinei; se gsete sub form
conjugat i neconjugat. Bilirubina conjugat se dozeaz direct, iar bilirubina
neconjugat se dozeaz indirect. Nivelul bilirubinei conjugate (directe) sub jumtatea
bilirubinei totale (bilirubina conjugat mpreun cu bilirubina neconjugat) sugereaz o
hemoliz. Afeciunile intra-hepatice Afeciunile hepato-celulare i obstrucia canalului
coledoc antreneaz de obicei niveluri ale bilirubinei conjugate superioare jumtii
bilirubinei totale.
Ureea:
Ureea este principalul produs al dezaminrii aminoacizilor n ficat. Este excretat de
rinichi i este folosit n principal ca test al funcionrii renale.
crete n insuficiena renal acut i cronic (hiperazotemie renal), n
deshidratare, oc, n diet hiperproteic, n febr, n hipertiroidism la pisici, n
hipofuncii ale corticosurparenalei, n hemoragii gastrointestinale, n efort prelungit,
n terapia cu corticosteroizi (hiperazotemie prerenal), n calculoza urinar, n ruptura
vezicii urinare, n neoplasme, n hernierea perineal a vezicii urinare, n hipertrofiile
de prostat.
scade n polidipsie/poliurie, n insuficiena hepatic, n malnutriia proteic, n
perioada final a gestaiei, n untul portosistemic (ntre vena port i vena cav), n
administrarea de steroizi anabolizani.
Creatinina:
Creatinina este produs n cantitate relativ constant datorit catabolismului muscular i
nu este reabsorbit de ctre tubulii renali dup filtrare. Msurarea creatininei indic
indirect capacitatea de filtrare renal. Relaia dintre filtrarea renal i nivelul creatininei
nu e linear, se poate ca un pacient s aib valori aproape normale ale creatininei la un
nivel de distrugere de aproape 75% al nefronilor, pentru ca o pierdere ulterioar mic s
determine creterea substanial a nivelului creatininei. Spre deosebire de uree, nu este
afectat foarte mult de diet sau alte aspecte legate de funcionarea renal, fiind astfel
considerat un test destul de specific pentru disfuncia renal. Poate s mai creasc i n
urma exerciiilor fizice prelungite, n miozita acut, n traumatismele musculare i n
hrnirea cu carne gtit.

Acidul uric:
Rezult n urma metabolismului purinic la nivelul ficatului poate fi crescut
(hiperuricemie) n gut i n afeciuni renale la reptile, psri, dalmaian i primate.
GPT (ALT, ALAT)
Se gsete n cantitate mare n celulele hepatice. Afeciunile hepatice provoac eliberarea
acestei enzime, care trece n snge. Creterea nivelului GPT se poate datora unei necroze
hepatice, unei tumori hepatice, unei suprancrcri grase a ficatului, n hepatite i n
anemie. Nivelul GPT rmne crescut o sptmn de la aciunea nociv asupra celulelor
hepatice.
GOT (AST, ASAT)
Este prezent n mai multe tipuri de esuturi, concentrndu-se n ficat, n muchii
scheletici i cardiaci. O cretere a GOT se produce n infarctul miocardic, n necroze ale
musculaturii scheletice i n necroze hepatocelulare.
GGT
Se gsete n special n celulele canalelor biliare. Creterea nivelului GGT indic
colestaz, fiind la pisic un indicator mai sensibil dect fosfataza alcalin.
Amilaza
Aceast enzim este un constituent al secreiei exocrine a pancreasului i transform
amidonul alimentar n maltoz. Necroza pancreasului sau obstrucia canalului su
antreneaz o eliberare de amilaz n cavitatea peritoneal i o cretere a nivelului
amilazei serice atingnd dublul sau chiar triplul valorilor normale n 24-48 ore. Nivelurile
amilazei serice cresc i n inflamaii ale intestinului subire datorit creterii absorbiei i
n afeciuni renale datorit scderii excreiei.
Lipaza
Lipaza este un constituent al secreiei exocrine a pancreasului care hidrolizeaz acizii
grai cu lan lung n acizi grai cu lan scurt i colesterol. Necroza pancreatic crete
nivelul lipazei de 2-7 ori fa de valoarea normal n 24-48 ore. Dup o afeciune
pancreatic, nivelul lipazei rmne ridicat mai mult timp dect amilaza. Nivelul lipazei
serice poate crete i n afeciuni ale intestinului subire datorit creterii absorbiei i n
afeciuni renale datorit scderii excreiei.
Fosfataza alcalin
Aceast enzim se gsete n concentraie mare n ficat i os. Remanierile osoase
antreneaz o cretere moderat a nivelurilor fosfatazei alcaline din ser, colestaza i
obstrucia canalului coledoc provoac o cretere spectaculoas a acesteia. O cretere a
nivelului seric al fosfatazei alcaline i a bilirubinei sugereaz un edem sau o congestie
hepatic. O cretere a fosfatazei alcaline se produce de asemenea la cinii cu cretere
rapid i n strile ce antreneaz osificare, de exemplu repararea fracturilor.
Creatin fosfokinaza (creatin kinaza, CPK, CK)

Dei se gsete i n ficat, cea mai mare concentraie a acestei enzime se observ n
sistemul nervos central, n musculatura scheletic i n cea cardiac. Cauzele obinuite ale
creterii nivelului acestei enzime sunt infarctul miocardic i necroza musculaturii
scheletice. Uneori i leziunile cerebrale pot determina creterea CPK.
LDH (lactatdehidrogenaza)
Se gsete n cantiti mari n toate organele i esuturile (inclusiv n eritrocite). Se
gsete n citoplasma celular i este eliberat n snge n modificrile permeabilitii
membranei celulare i n necroze.
Crete n distrugeri hepatocelulare, n afeciuni ale muchilor scheletici, n ischemia
cardiac, la efort, postprandial i n afeciunile neoplazice.

Examenul microscopic
Determinarea constantelor eritrocitare directe:
Determinarea eritremiei:
Se efectueaz prin 2 metode:
- numrtoare direct la microscop dup o prealabil diluie a sngelui;
- determinri cu ajutorul aparatelor automate de numrare a eritrocitelor:
Coulter-Counter, Celloscop
Pentru numrtoarea direct sunt necesare urmtoarele materiale:
- pipet Potain pentru globule roii
- lichide de diluie pentru mamifere: lichidul Marcano; lichidul Hayem;
pentru sngele de pasre i poikiloterme: lichidul Natt-Herrick modificat de
Prochazka; lichidul Cosma
- reea Thoma, care se gsete n hemocitometrele Thoma, Trk i BrkerTrk.
- microscop cu obiectiv 10 i ocular 10
Hemocitometrul Thoma are o suprafa de 1 mm 2 mprit n 400 ptrele,
grupate n 16 ptrele mijlocii delimitate de linii triple. Un ptrat mijlociu are 16
ptrele mici a cror suprafa este de 1/400 mm2.
Hemocitometrele Trk i Brker-Trk sunt identice. Au 9 mm 2 mprii n 9
ptrate de cte 1 mm2 (3x3 mm). n ptratul din centru se gsete reeaua Thoma, iar n
cele 4 ptrate din coluri se gsesc reele Trk pentru numrarea leucocitelor.
Mod de lucru:
Se recolteaz snge pe EDTA sau heparin.
Se pregtesc materialele necesare: flaconul cu snge, pipeta Potain i
hemocitometrul cu lamel, borcanul cu ap de robinet pentru splarea hemocitometrului,
sticl de ceas cu lichid de diluie, hrtie de filtru, vat cu spirt i o lavet curat.
Pipeta Potain de globule roii are un capilar cu 10 diviziuni gradate (0,5 la
mijloc i 1 sub ampul) i o ampul; raportul volumetric ntre capilar i ampul este de
1/100
Se trece la efectuarea diluiei astfel:
- se agit flaconul cu snge de minimum 30 de ori, din articulaia radiocarpo-metacarpian
- cu pipeta Potain de globule roii, curat i uscat, se aspir snge pn
deasupra diviziunii 0,5. Cu ajutorul hrtiei de filtru se aduce la diviziune.
- din sticla de ceas se aspir lichidul de diluie pn la diviziunea 101 care
se afl deasupra ampulei
- se omogenizeaz coninutul pipetei prin micri de rsturnare
Se regleaz microscopul:
- diafragma de condensor trebuie s fie aproape nchis
- se prinde reeaua Thoma

se spal lamela i se fixeaz la 0,5 cm de marginea teit a

hemocitometrului
- se agit din nou pipeta Potain
- se vars 3 picturi care constituie n mare parte coninutul din capilar
- urmtoarea pictur se las suspendat i se depune n anul de lng
reea, sub lamel
- n 1-2 minute eritrocitele se linitesc pe suprafaa hemocitometrului i se
poate ncepe numrtoarea
Numrtoarea se face astfel:
- se numr 80 ptrele mici grupate n 5 ptrate mijlocii
- se pot numra 4 ptrate mijlocii din coluri i unul din mijloc sau 4 ptrate
mijlocii de pe diagonal i un ptrat dintr-un col
- se numr elementele de pe 2 laturi i din interiorul fiecrui ptrat mic
- nu intereseaz celulele care sunt tangente n afar.
- se numr cele 5 ptrate mijlocii i se noteaz valoarea pentru fiecare
ptrat
- se adun valorile ptratelor mijlocii i se nmulete cu 10.000; astfel se
afl numrul de eritrocite/mm3 (sau microlitru)
-

NSID
n
X = nr. de eritrocite/mm3
N = nr. de eritrocite gsite pe cele 80 ptrele (5 ptrate mijlocii)
S = suprafaa (1 ptrel are 1/400 dintr-un mm2, deci se nmulete cu 400)
I = nlimea (nlimea coloanei de lichid dintre lamel i suprafaa reelei este de
1/10 mm, deci se nmulete cu 10)
D = diluia (de 1/200; deci se nmulete cu 200)
n = numrul de ptrele numrate (80)
N 400 10 200
N 800.000
X=
=
= N 10.000
80
80
X = N 10.000
Calculul: X =

Determinarea cantitativ a leucocitelor

Se efectueaz prin 2 metode:
determinri cu ajutorul aparatelor automate de numrare a leucocitelor:
Coulter-Counter, Celloscop
numrtoare direct la microscop dup o prealabil diluie a sngelui
Pentru numrtoarea direct sunt necesare urmtoarele materiale:

pipet Potain pentru globule albe care are: un capilar cu 10 diviziuni gradate (0,5 la
mijloc i 1 sub ampul) i o ampul, deasupra creia se gsete gradaia 11; raportul
volumetric ntre capilar i ampul este de 1/10
lichid de diluie Trk (acid acetic glacial 1 ml + 2 picturi violet de genian sau
albastru de metilen ad 100 ml ap distilat)

reea Trk, care se gsete n hemocitometrele Trk (identic cu Brker-Trk) i

Brker.
microscop cu obiectiv 10 i ocular 10
Hemocitometrul Brker conine o suprafa de 9 mm 2 mprit n 9 ptrate de
1 mm2 delimitate prin linii triple; acestea la rndul lor sunt grupate n 16 ptrate mici
delimitate de linii duble.
Hemocitometrele Trk (identic cu Brker-Trk) au 9 mm 2 mprii n 9 ptrate de
cte 1 mm2 (3x3 mm). n ptratul din centru se gsete reeaua Thoma, iar n cele 4
ptrate din coluri se gsete reeaua Trk pentru numrarea leucocitelor.

Mod de lucru:

Se recolteaz snge pe EDTA sau heparin.

Se pregtesc materialele necesare: flaconul cu snge, pipeta Potain i hemocitometrul
cu lamel, borcanul cu ap de robinet pentru splarea hemocitometrului, sticl de ceas
cu lichid de diluie, hrtie de filtru, vat cu spirt i o lavet curat.
Se trece la efectuarea diluiei astfel:

se agit flaconul cu snge de minimum 30 de ori, din articulaia radio-carpometacarpian

cu pipeta Potain de globule albe, curat i uscat, se aspir snge pn deasupra
diviziunii 0,5. Cu ajutorul hrtiei de filtru se aduce la diviziunea 0,5.
din sticla de ceas se aspir lichidul de diluie Trk pn la diviziunea 11 care se afl
deasupra ampulei
se omogenizeaz coninutul pipetei prin micri de rsturnare, timp n care are loc
distrugerea hematiilor
Se regleaz microscopul:

diafragma de condensor trebuie s fie aproape nchis

se prinde reeaua Trk
se spal lamela i se fixeaz la 0,5 cm de marginea teit a hemocitometrului
se agit din nou pipeta Potain
se vars 3 picturi care constituie n mare parte coninutul din capilar
urmtoarea pictur se las suspendat i se depune n anul de lng reea, sub
lamel
n 1-2 minute leucocitele se linitesc pe suprafaa hemocitometrului i se poate ncepe
numrtoarea
Numrtoarea se face astfel:

Dac hemocitometrul este Trk (identic Brker-Trk) se numr toate cele 4 ptrate
de 1 mm2 din coluri
se numr 1 mm2, ce cuprinde 16 ptrele mici mprite de linii duble i delimitate
pe dou laturi de linii triple.

Calculul: X = M S I D

X = nr. de leucocite/mm3
M = Media numrului de leucocite gsite pe cele 4 ptrate de 1 mm2
S = suprafaa (1 mm2)
I = nlimea (nlimea coloanei de lichid dintre lamel i suprafaa reelei este de
1/10 mm, deci se nmulete cu 10)
D = diluia (de 1/20; deci se nmulete cu 20)
X = M 1 10 20 =

M 200

De exemplu: 48 + 42 + 46 + 51.
Media: 187/4 = 46,75 200 = 9350 leucocite/l snge
Modificrile formulei leucocitare
1. Definirea formulei leucocitare: Formula leucocitar reprezint raportul procentual al
diferitelor categorii de elemente figurate albe (din 100 leucocite cte sunt neutrofile, cte
eozinofile, cte bazofile, cte limfocite i cte monocite).
Cunoaterea raportului ofer informaii privitoare la:
stabilirea diagnosticului
evoluia bolii
eficiena terapeutic
prognosticul bolii
2. Prepararea frotiului de snge
Pe lame de sticl obinuit, splate, degresate i uscate, cu ajutorul unei lame
trgtoare, care prezint capetele lefuite i marginile teite, nclinat la 45 o, cu pictura
de snge napoi, se ntinde pictura printr-o micare uniform, n aa fel nct frotiul s se
termine pe lam.
Frotiul nu trebuie s fie prea gros, pentru c se decoleaz la splare, nici prea
subire, pentru c nu se pot numra pe un frotiu 100 sau 200 elemente figurate albe,
cantitatea de snge fiind insuficient. Dup tragere se usuc lama prin micri rapide; nu
se usuc la surs de cldur. Temperatura n ncpere trebuie s fie de 20-25 oC, s se evite
ncperile reci i cele cu mute sau pulberi. Frotiurile se pot pstra maxim 24 ore pn la
efectuarea colorrii.
3. Colorarea panoptic May-Grmwald Giemsa: Se aeaz lamele pe un suport din
baghete de sticl cu faa n sus i se acoper cu reactiv May-Grmwald, ntr-o cantitate
cunoscut (1,5 ml sau 15 picturi).
Se las 3 minute n repaus, avnd grij ca ntreaga suprafa s fie acoperit cu
colorant; n aceast perioad se face o mai bun fixare a frotiului de ctre alcoolul metilic
pe care l conine reactivul May-Grmwald. Se adaug 15 picturi de ap tamponat (pH
neutru), care se amestec cu colorantul suflndu-se prin pipeta Pasteur n vederea unei
omogenizri corecte. Se las 3 minute, timp n care are loc precolorarea. Se vars
amestecul de colorant i lamele se introduc imediat ntr-o baie Laweran, n care se gsete

reactivul Giemsa preparat din 80 ml ap distilat i 120 picturi reactiv Giemsa mam.
Lamele se las n baia Laweran timp de 30 minute, cnd are loc colorarea elementelor
figurate ale sngelui: globulele albe, globulele roii i trombocitele, eventualele larve de
parazii sau bacterii etc. Se scot, se spal la jetul de ap de robinet, avnd grij s nu se
produc decolarea frotiului n cazul n care lamele nu au fost bine degresate sau stratul de
snge a fost prea gros. Se usuc lsndu-se sprijinite cu un capt al lamei pe o baghet,
iar cellalt pe o fie de hrtie de filtru care s absoarb apa. Uscarea rapid se poate face
ntre dou straturi de hrtie de filtru la termostat reglat la 37oC.
4. Citirea frotiului se face la microscopul optic, folosind obiectivul de imersie, care se
afl n pictura de oleum de cedru, folosindu-se ocularul 10. Citirea elementelor albe, ct
i aprecierile calitative ale elementelor albe, roii i trombocitelor se face n zig-zag pe
marginile frotiului de la baza sa ctre partea terminal. Fiecare globul alb trebuie
recunoscut i nregistrat.
5. nregistrarea globulelor albe se face n mod obinuit folosind un sistem tabelar sau o
nregistrare mecanic care necesit un leucodif (mecanic sau electronic). Se are grij
deosebit pentru completarea pe vertical a fiecrei coloane cu cte 20 elemente, astfel c
la citirea unui numr de 100 globule albe, adunnd pe orizontal, obinem exprimarea
procentual. Cel mai corect este s se fac citirea a 200 globule albe, fcndu-se media
pentru fiecare tip de leucocit.
6. Interpretarea rezultatelor
Granulocitemia: eozinefilemia, bazofilemia i neutrofilemia.
a. Eozinofilemia: eozinopenia (aneozinofilia) se constat n faza clinic manifest a
unor boli infecto-contagioase, cnd se poate ajunge chiar la aneozinofilie, care are
semnificaia unei evoluii nefavorabile a bolii, precum i n strile de stres;
eozinofilia: m bolile parazitare cu evoluie larvar ca: ascaridoz, echinococoz,
fascioloz, boli alergice.
b. Bazofilemia: bazocitopenia scderea capacitii de elaborare a heparinei,
serotoninei i histaminei; bazofilia: n leucoza mieloid, n stri de hemofilie, n
bronhopneumonii cronice, tricofiie, nefrit cronic.
c. Neutrofilemia: neutropenia se ntlnete n infecii nsoite de focare de necroz n
organele parenchimatoase i piele, precum i n tratamentul cu unele medicamente
cum ar fi sulfamidoterapia n morv la cal sau n tratamentul cloramfenicol n infecii
bacteriene; neutrofilia: n infeciile acute, procese supurative, boli neoplazice.
Agranulocitemia: limfocitemia, monocitemia
d. Limfocitemia: limfopenia indic o inhibiie a organelor limfoide cu consecine
nefavorabile asupra reaciei imune, fie c apar limfocite calitativ modificate, aa cum
se ntmpl n SIDA; limfocitoza - n boli infecioase cu evoluie cronic ca
tuberculoza, bruceloza, listerioza, salmoneloza, n hiperpituitarism (acromegalie),
hipertiroidism, insuficien corticosuprarenal (boala Addison), babesiose etc.
e. Monocitemia: monocitopenia indic tulburri grave ale SRH ntlnite n cursul
reticulo-endoteliozelor; monocitoza n septicemii cronice, boli parazitare, n faza de
vindecare a maladiilor asociat cu hiperfuncia SRH.

Examenul fecalelor
a.
b.
c.

Examenul macroscopic se face din punct de vedere al:

cantitii de fecale emise la o defecare,
cantitii de fecale emise n 24 ore,
formei i aspectului fecalelor,
consistenei fecalelor,
culorii fecalelor,
mirosului fecalelor,
compoziiei fecalelor.
Examenul chimic al fecalelor const n mod curent n decelarea n fecale a:
sngelui,
pigmenilor biliari,
proteinelor
Examenul microscopic al fecalelor se execut pe preparate proaspete, ntre lam i
lamel, simple sau colorate. La examenul microscopic al frotiului de fecale se
poate examina compoziia, putnd decela:
- amidonul (se coloreaz evident n albastru cu soluie Lgol)
- grsimile (se coloreaz n rou portocaliu cu Sudan III, sau n negru intens cu acid
osmic)
- celule epiteliale,
- leucocite,
- hematii,
- mucin etc...
d. Examenul bacteriologic i parazitologic al fecalelor

Analiza urinei
a. Examenul fizic al urinei, sub aspectul:
- culorii n funcie de specie
- transparenei,
- mirosului,
- vscozitii,
- densitii,
- punctului crioscopic.
Examenul biochimic al urinei, prin:
- reacia (pH-ul urinei)
- albuminuria
- ureouria
- creatinuria
- corpi purinici
- indicanuria
- glicozuria
- cetonuria
- hemoglobinuria
- choluria pigmenii biliari
- cholaluria srurile biliare
- porfirinuria
- ionuria i srurile minerale
c. Examenul microscopic al sedimentului urinar:
- sedimentul neorganizat mineral
- sedimentul neorganizat organic
- sedimentul organizat.
d. Examenul bacteriologic al urinei

Examenul coninutului ruminal

Presupune urmtoarele operaii:
-

Recoltare (prin sondaj, puncie sau ruminotomie) a 300-500 ml de suc ruminal

Examenul fizic
- Culoarea verzuibrun, n funcie de furajul ingerat
- Mirosul normal aromat influenat de compoziie
- Componena 3 straturi spumos la suprafa, suspensie rar cu particule
grosiere la mijloc i un sediment bogat n furaje triturate
- Consistena apoas, poate deveni filant n cazul cantitii mari de saliv
- Determinarea vitezei de sedimentare a particulelor coninute se apreciaz dup
30 minute, la intervale de 3, 10, 20, 30 minute se urmrete suspensia, tendina
de clarificare, spumozitatea i depozitul
- Vscozitatea se apreciaz cu vscozimetrul Ostwald, la 39 oC, urmrind timpul
de scurgere al coninutului comparativ cu cel al apei distilate
Examenul biochimic
- pH-ul coninutului ruminal cu hrtia indicatoare de pH normal 6,5-7,8
- Proba reducerii nitriilor (reacia Hoflund) viteza cu care sunt metabolizai
nitriii dintr-o soluie ce conine filtrat de coninut ruminal i nitrit de potasiu.
- Puterea de fermentaie a glucozei se apreciaz cantitatea de dioxid de carbon
produs de fermentaia glucozei dintr-o soluie ce conine glucoz 16% i suc
ruminal
- Digestia celulozei timpul necesar pentru a digera fibra de celuloz, n
comparaie cu un martor sintetic. Normal 48-56 ore.
Examenul microscopic
- Aprecierea calitativ a infuzorilor ruminali: intereseaz mobilitatea i abundena
infuzorilor, ncadrnd sucul la urmtoarele categorii:
o foarte bine infuzori numeroi cu micri rapide
o bine infuzori numeroi, printre care i infuzori cu micri lente i mori
o satisfctor infuzori n pri egale mobili i mori
o infuzori mobili foarte puini, majoritatea mori coninut ruminal
depreciat
o infuzori imobili n totalitate coninut ruminal compromis
- Determinarea numrului de infuzori n sucul ruminal: se face numrtoarea pe
camera de numrat Burker, dup fixarea acestora cu formol 4%