Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Definitie: APC sunt celule ce joaca un rol esential pentru declansarea sau
initierea in organele limfoide secundare (ganglioni si splina) a unor RIU/RIC
fata de antigenele timodependente (majoritare) prezente intratisular (fie din
sursa exogena, fie din sursa endogena)
Accesul antigenului in tesut
-dpdv imunologic, tesutul este reprezentat de parenchim, impreuna cu
circulatia sangvina si limfatica
-circulatia limfatica este reprezentata de ganglionii loco-regionali si vasele
care converg la acest nivel
-ganglionii prezinta o circulatie dubla: vasculara (arteriola aferenta si arteriola
eferenta poate fi denumita venula daca se deschide intr-un capilar-) si
limfatica (aferenta si eferenta)
-limfaticele aferente: foarte numeroase; se deschid pe fata convexa a
ganglionului
-limfaticele eferente: foarte numeroase; iau nastere la nivelul medularei
ganglionului, in vecinatatea hilului
-patrunderea Ag timodependente determina activarea LB sau LT de la nivel
local
-aceste limfocite pot fi prezente in vasele capilare locale, aflate in pasaj intre
doua statii ganglionare, unde stationeaza un timp mai indelungat in
asteptarea antigenului
-in cazul in care limfocitele nu sunt stimulate in timpul petrecut in ganglion,
acestea trec inapoi in vasele locale, intrand ulterior in urmatoarea grupa
ganglionara
-din ganglionii loco-regionali, acestea pot trece si catre splina, unde
manifesta acelasi comportament
-limfocitele pot fi prezente in ganglionii loco-regionali, aici aflandu-se
reprezentantele tuturor clonelor limfocitare; acestea nu sunt circulante,
stationand mult timp in ganglioni pentru a intampina un evenetual Ag
-separarea dintre limfocitele circulante si cele stationare este o separare
relativa, pentru ca antigenele declansatoare patrund in lichidul interstitial
local si ii urmeaza cursul, fiind antrenate in diverse circuite
-lichidul interstitial se formeaza local datorita filtrarii continue de la nivelul
capatului arteriolar, care impinge apa si sarurile in spatiul extravascular;
dupa un anumit interval de timp, acesta este drenat in circulatia sangvina, pe
doua cai:
1. trecerea lichidelor din tesuturi inapoi in vasele locale, la nivelul capatului
venular al capilarului; aceasta nu este o modalitate de contact intre Ag si
limfocitele circulante, pentru ca structura Ag nu ii permite traversarea
peretelui vascular si nici limfocitele nu pot trece in lichidul interstitial
(trecerea limfocitelor in tesuturi are loc doar in conditii speciale)
2. drenajul lichidului interstitial prin vasele limfatice; aceasta este principala
cale de contact intre Ag si limfocite, pentru ca vasele limfatice se deschid in
spatiile interstitiale, drenand lichidul de la acest nivel => are loc contactul
dintre Ag si limfocitele aflate intraganglionar;
Inconvenientele drenajului limfatic
-este un proces foarte lung, astfel ca pe parcurs unele Ag pot ramane
sechestrate in parenchim
-se realizeaza un proces de dilutie in LI a antigenelor
-Ag ajunse in ganglion pot stimula direct limfocitele B, dar niciodata nu pot
stimula direct limfocitele T(fie c, fie h)
-nu toate antigenele declansatoare sunt si antigene mobilizante
-pentru a combate aceste inconveniente este necesara participarea APC
Celulele APC
-capteaza antigenele declansatoare si le transporta catre ganglionii locoregionali intr-o forma concentrata
-ajunse la nivelul ganglionilor, incep sa prezinte antigenul intr-o forma
adecvata (cantitate suficient de mare si intr-o forma procesata)
Clasificarea APC
-in functie de eficienta, se impart in APC profesionale (macrofagele, celulele
dendritice, limfocitele B in anumite conditii-) si APC ocazionale (PMN in
special neutrofilele-, celulele endoteliale, celulele epiteliale)
Macrofagele
-sunt produse in maduva hematogena, sub forma de elemente nematurate
(monocite), care dupa un scurt tranzit intracirculator (24 36h) trec in
tesuturi sub actiunea unor factori chemoatractanti, care atrag monocitele si
le activeaza intens (astfel ca monocitele se transforma in macrofage activate)
-in stadiul de macrofag activat, ele indeplinesc functia de APC, care trece
obligatoriu prin 5 etape: captarea antigenelor, endocitarea antigenelor,
prelucarea antigenelor, conservarea epitopilor imunodominanti si prezentarea
epitopilor imunodominanti
Captarea antigenelor
-are 3 caracteristici definitorii:
1. capteaza doar antigenele corpusculate (bacterii, virusuri, paraziti
unicelulari, celule sangvine sau somatice devenite antigenice au devenit
celule canceroase sau sunt implicate intr-un proces autoimun sau sunt
colonizate bacterian-); niciodata nu capteaza antigenele solubile
2. este un proces mediat receptorial
3. este un proces imunologic nespecific
-cel mai frecvent, MF capteaza bacteriile opsonizate (acoperite de opsonine
factori solubili care favorizeaza captarea si fagocitarea antigenelor-; opsonine
mai importante sunt elementele complementului si anticorpii); MF poate
capta si Ag neopsonizate, dar mai putin eficient
Componenta C3b
-componenta C3b a complementului rezulta din liza partiala a fragmentului
C3 ce se realizeaza ca urmare a activitatii permanente si cu intensitate
redusa a caii alternative a complementului => generarea permanenta a unor
cantitati de C3b in lichidul interstitial
-odata generat, C3b nu ramane niciodata in faza fluida, depozitandu-se pe
membranele celulare
-C3b nu se poate depozita niciodata pe membranele self, care sunt protejate
=> se depoziteaza sub forma unui strat unic de molecule, de jur imprejurul
bacteriei (non-self), acoperind-o
-macrofagul exprima receptori membranari (CR = complement receptors)
care pot face legaturi cu fragmentul C3b deja legat
Imunoglobulinele IgG
-sunt singurele Ig cu rol de opsonizare
rol in distrugerea proteinelor); aceste unitati se dispun sub forma unor colaci,
alcatuind in interior un canalicul intern prin care patrund DRIPS-urile, care
patrund ca si polipeptid depliat si ies ca si fragmente peptidice mici care se
numesc epitopi
-epitopii ajung in RER si sunt incarcati de moleculele MHC I; trecerea acestor
epitopi in RER se face printr-un sistem transportor denumit TAP
-acest transport este facilizat prin formarea unor punti de legatura intre
proteazom si TAP, punti alcatuite din 2 molecule denumite LMP-2 respectiv
LMP-7 (low mass proteins)
Antigenele exogene
-provenite din proteine citoplasmatice ale bacteriilor intracelulare sau ale
virusurilor
-aceste proteine sunt trecute in RER si se ataseaza MHC I
-primul lant al MHC care este elaborat este lantul alfa, care initial este imatur;
acesta este adus la conformatia necesara prin actiunea unei saperonine
(calnexina), care inveleste in totalitate molecula si o forteaza sa adopte
conformatia spatiala necesara
-odata stabilita conformatia, lantul alfa capata afinitate pentru lantul beta =>
cele doua se asociaza, constituind molecula MHC I
-initial, lanturile se asociaza instabil, astfel ca asupra lor actioneaza o a doua
saperonina (calreticulina), care solidarizeaza legatura dintre cele doua lanturi
-intre lantul beta si TAP se realizeaza o legatura mediata de tapasina (care
creste afinitatea lantului fata de TAP si favorizeaza incarcarea moleculelor
MHC I)
-lantul alfa are afinitate pentru o enzima denumita ERAP (aminopeptidaza
reticulului endoplasmatic), care cliveaza epitopii atasati daca au peste 12
AA-)
-in final MHC I impreuna cu epitopii sunt adusi la suprafata si vor fi ulterior
recunoscuti de catre limfocitele Tc (si eventual supresoare)
Moleculele MHC II
-cele doua lanturi ale MHC se formeaza aproape simultan
-la acestea se asociaza initial un al treilea lant denumit lantul 2I (2 de la MHC
II si I de la inhibitor)
-lantul 2I inhiba, prin capatul sau N-terminal, obtureaza situsul moleculelor
MHC II
-aceste molecule sunt trecute din RER in endozomi, unde sufera modificari
succesive care se concretizeaza in indepartarea majoritatii lantului 2I de catre
catepsina); totusi, la nivelul situsului ramane portiunea N-terminala a lantului
inhibitor (denumit CLIP portiunea de clivare a lantului inhibitor)
-odata cu eliminarea CLIP, situsurile devin libere pentru a incarca diversi
epitopi, care provin din Ag corpusculare care au fost endocitate
-in endozomi respectivele Ag sunt scindate si in final se incarca pe moleculele
MHC II
-in acest moment tot complexul este adus la suprafata si epitopul astfel
exteriorizat este recunoscut de LTh
-in RER are loc cuplarea MHC I cu antigenele endogene
-dintre cele doua categorii de molecule MHC, singurele care au situsul
prezentator liber sunt MHC I
-in endozomi are loc cuplarea Ag corpusculare cu moleculele MHC II pentru ca
aceste Ag se formeaza in endozom, iar pe de alta parte moleculele MHC II
sunt singurele care tranziteaza endozomii
(prima vilozitate prezinta CDR1, a doua CDR2 etc. aceasta numerotare este
valabila si pe alfa si pe beta)
-CDR1 si CDR2 angajeaza legaturi cu MHC, iar CDR3 este singurul care
realizeaza legaturi cu epitopul => are loc o recunoastere antigenica
asociativa monoreceptoriala
-cele 6 CDR-uri realizeaza un paratop => substructura situsului combinativ
pentru antigen, ce este direct responsabila de recunoasterea antigenica
-secventele care nu sunt implicate in recunoasterea antigenica se numesc FR
(framework regions)
Zona balama
-aflata intre domeniile constante si membrana
-reprezinta zona din TCR dotata cu maximum de flexibilitate, executand
miscari de baleiaj in toate planurile, miscari care sunt importante in
recunoasterea Ag
-la acest nivel exista punti disulfurice care solidarizeaza cele doua lanturi
Segmentul transmembranar
-format doar din 20 25AA
Segmentul intracitoplasmatic
-are ca particularitate ca este scurt sau foarte scurt (8 12 AA) =>
segmentul intracitoplasmatic iese foarte putin din planul membranei
Rolurile TCR
-rol esential in recunoasterea antigenica asociatia
-rol important in generarea unor semnale activatoare care iau nastere in
urma adaptarii conformationale a situsului combinativ pentru antigen, la
formarea complexului MHC-epitop
-nu poate realiza transmiterea (transductia) semnalelor catre sistemele
enzimatice de profunzimea citoplasmei => transductia semnalelor este
realizata de CD3, care se asociaza intotdeauna la CD3
Complexul CD3
-complex pentameric, cu primele trei lanturi (alfa, beta, delta) scurte si doua
(zeta) lungi
-lanturile scurte sunt transmembranare, de 21kDa, elaborate dupa gene
prezente pe cromozomul 11; la aceste lanturi se asociaza doua lanturi
frecvent identice intre ele care sunt lungi, efilate, care patrund adanc in
citoplasma limfocitului
-lanturile lungi au 16kDa si sunt elaborate dupa gene prezente pe
cromozomul 1
-lanturile se asociaza intre ele prin punti disulfurice, formand pentamerul si in
plus toate se asociaza lui TCR => formeaza un complex heptameric
-CD3 realizeaza transductia semnalului
CD4
-este un coreceptor de recunoastere antigenica
-ca distributie, CD4 este absolut caracteristic pe suprafata limfocitelor Th =>
limfocitele Th sunt LT CD4+
Structura
-glicoproteina transmembranara, care in segmentul extramembranar prezinta
4 domenii diferite ca lungime
conformationali de pe fragmente
-antigenele corpusculare, fie native fie fragmentate, sunt acoperite de
opsonine (C3b a complementului), care se depun ca un strat unic de molecule
pe membrana Ag (sau fragmentelor de Ag)
-opsonina C3b este recunoscuta de un coreceptor (CD21)
-CD21 este un monomer cu un segment extramembranar foarte lung si un
segment intramembranar scurt (deci nu poate transmite semnalele
activatoare)
-transductia se face prin CD19, o glicoproteina asociata prin punti disulfurice
cu CD21, care are un segment extramembranar scurt si unul intramembranar
lung
-ca urmare a recunoasterii determinantilor antigenici are loc activarea P60fyn
si ulterior transmiterea semnalelor prin cale scurta si lunga; in plus, P60fyn
fosforileaza tirozinele segmentului intramembranar al CD19
-fosforilarea tirozinelor CD19 permite atasarea unor enizme (ex: PI3K =
fosfatidil inozitol-3 kinaza)
-enzima PI3K este activata de semnalele transmise prin calea CD21-CD19 =>
incepe sa fosforileze MAP-kinazele, activandu-le
-activarea MAP-kinazelor determina mai ales stimularea genelor pentru CK
(kinazele ciclin-dependente), cu un efect mitogen foarte pronuntat
Consecintele morfofunctionale ale activarii limfocitelor B
-in faza de repaus, LB se afla in faza G0 a ciclului mitotic
-odata stimulat, LB trece in interfaza (G1, S, G2); prin trecerea din G0 in
interfaza, LB isi modifica aspectul si functia => se formeaza limfoblastul B
(limfocit B activat)
-limfoblastii B au talie mare, nucleu limfocitoid, mitocondrii multe si cu multe
criste, RER bine dezvoltat si prezinta modificari fenotipice (+ receptori de
adeziune celulara, + molecule MHC II) => pe durata stadiului de limfoblast,
functioneaza ca APC !
-celulele care depasesc faza G2 a interfazei, trec in etapa M, a diviziunilor
mitotice; cel putin 95% din celulele rezultate devin limfocite B efectorii
(plasmocite => produc Ig), restul de sub 5% recapata aspectul de limfocit
mic, dar nu revin niciodata in faza Go, ramanand intr-o etapa intermediara
(intre Go si G1) => limfocite B preactivate (cu memorie)
-plasmocite: mari, ovale, nucelu neregulat, RER foarte abundent)
-limfocitele B cu memorie: la un nou contact cu acelasi antigen, acestea vor
reactiona foarte scurt si foarte energic; acestea au o viata scurta (cateva
saptamani)
-transformarea in limfoblast se realizeaza la distanta de locul in care s-a
realizat recunoasterea antigenica, la fel ca si in cazul transformarii in
plasmocit (tot la distanta) => migrarea si distantarea limfocitelor se
realizeaza pentru a permite o eliberare eficienta a Ig
-daca plasmocitele s-ar forma chiar la locul patrunderii/recunoasterii Ag,
acestea ar fi inhibate, pentru ca ele expun initial Ig pe membrana si ulterior ii
elibereaza in circulatie => daca Ag ar fi preluat de Ig in curs de exocitare, sar declansa semnale inhibitorii
TCR au timp sa difuzeze in lateralul membranei, pana cand apar fata in fata
in fanta dintre cele doua celule
-> cooperarea dintre cele doua complexe declanseaza semnale activatoare
ce determina activarea LTh, caracterizata printr-o intensificare a fosforilarilor
-> se fosforileaza lantul beta al LFA1, ceea ce determina modificari ale
conformatiei sale; acest lucru creste intens si brusc afinitatea LFA1 pentru
ICAM
Etapa non-cognitiva
-importanta pentru ca simpla recunoastere a epitopului de catre TCR nu este
suficienta pentru activarea LTh la un nivel corespunzator pragului declansarii
RIU
-se realizeaza prin IL1 secretata de APC
-IL1 exista intr-o forma solubila (complet exocitata; fara functii imunologice,
fiind doar un mediator proinflamator) si intr-o forma membranara (expusa pe
membrana APC), care nu este situata pe orice versant al APC, pentru a se
evita activarea intamplatoare a unor LT antigen-nespecifice prezente local
-la contactul dintre IL1 membranar si LTh apar semnale activatoare care
stimuleaza genele pentru factori mitotici si pentru IL 2 si receptorul IL2
-LTh incep sa produca si sa elibereze IL2 si expune si receptorul pentru IL2
(CD 25) pe membrana => celula se autoactiveaza in sens autocrin, de tip
TCR-like
-principala consecinta a activarii LTh este transformarea in clase de LTh
(Sub)clasele de LTh
-nu sunt celule preformate
-fenotipic, sunt identice intre ele => exprima CD4 si CD28
-se diferentiaza prin tipurile de IL secretate
-LTh nave: LT imature, aflate la primul contact cu antigenul; contin in
genomul lor toate genele necesare sintezei IL, dar toate, inafara de IL2, sunt
inhibate => produc doar IL2, in cantitati foarte mari => LTh-p (producatoare
de IL2); LTh-p raman in contact cu APC si se transforma intr-o forma maturata
intermediar => LTh-zero- (produc cantitati reduse din toate IL: IL2, IL3, TNF,
IFN-gamma, IL4, IL5, IL6IL10 etc. => cantitatile sunt prea mici pentru a
putea fi folosite in RIU); LTh-zero- se matureaza in mai multe forme, in functie
de natura antigenului si mai ales dupa prezenta/absenta LB in cadrul
cooperarilor celulare
-daca LB nu sunt prezente in nicio etapa, LTh-0 se transforma in LTh-1, care
amplifica RIC prin cantitati mari de IL2,3 TNF-alfa, IFN-gamma etc.
-daca LB sunt prezente in cadrul cooperarii, LTh-0 se transforma in LTh-2, care
amplifica RIU, prin cantitati mari de IL4,5,6,10 etc.
-transformarea LTh-0 se realizeaza prin excludere reciproca (LTh-1 si 2 se
inhiba reciproc)
-LTh-1 are efect apoptotic pe LTh-2 prin IFN-gamma
-LTh-2 are efect apoptotic pe LTh-1 prin IL 10
-aceasta inhibitie reciproca este foarte importanta, pentru ca fiziologic, RI
este fie umoral, fie celular
Interleukinele
a.IL2:
-> pe langa efectele autocrine pe LTh-p, are si efecte paracrine pe LB, LTc,
Lnk prin efectele TCR-like (pe LT) sau BCR-like (prin LB)
-> poate determina doua tipuri de raspunsuri, in functie de sursa de IL2
-> daca este produsa de LTh-1, atunci activeaza doar RIC
-> daca este produsa de LTh-p, atunci e posibil sa stimuleze RIU primare (RIU
ce apar la primul contact cu antigenul)
b.IL4
-> stimuleaza RIU secundare, la contacte ulterioare cu acelasi antigen
-> stimuleaza activarea unui numar mai mare de LB
-> stimuleaza cresterea numarului de MHC II de pe APC
-> stimuleaza productia de IgG si inhiba productia de IgM, prin mecanismul
de switch (comutare izotipica)
c.IL5
-> stimuleaza RIU secundar in mucoase
-> determina producerea IgA, inhiband IgM, prin mecanismul de switch
Cooperarea dintre limfoblastii T si B
-are loc in zonele bursodependente ale OLS
-are o etapa cognitiva si non-cognitiva
Etapa cognitiva
-contacte Ag-specifice realizate prin prezentarea si recunoasterea antigenica
-rol de APC este limfoblastul B care, prin moleculele MHC II, prezinta Ag, prin
partea lui carrier, catre TCR
-acest contact determina semnale activatoare ce activeaza gene pentru
interleukine
-in stadiul de limfoblast, celulele stabilesc contacte si prin receptori
caracteristici pentru acest stadiu => CD40 de pe LB si CD40L de pe LT
-semnalele se transmit dinspre LTh catre LB, determinand activarea genelor
pentru receptori ai diverselor IL
-astfel, LB va ajunge sa exprime receptori pentru IL produsi de LT
Etapa non-cognitiva
-realizata prin atasarea IL produse de LT pe membrana LB
-determina activarea completa a LB la stadiul de plasmocit, care produce
anticorpi
-tipul anticorpilor depinde de 3 elemente care se conditioneaza reciproc:
1. numarul de contacte cu Ag
2. tipul de limfoblast Th (care conditioneaza tipul de IL eliberata) => la primul
contact cu antigenul, LTh este de tip p => se produce doar IL2 => se fac
anticorpi IgM / la un contact ulterior, LTh este de tip 2 => se produce IL4 =>
se fac anticorpi IgG
CURS 9 IMUNOGLOBULINELE
Definitie
-Ig sunt glicoproteine prezente in plasma, lichidele extracelulare, secretii si
sunt molecule dotate cu proprietati de anticorpi, avand capacitatea de a se
combina specific cu antigenul inductor al raspunsului imun
-sunt implicati si in RIU si in RIC
-in RIU: implicati in finalizarea acestuia (impreuna cu participarea
complementului)
-in RIC: implicati in initierea acestuia (rol de opsonine, favorizand endocitarea
Ag)
Structura de principiu a Ig
-indiferent de clasa, toti Ac sunt constituiti din aceeasi unitate
morfofunctionala: monomerul de Ig
-un monomer este format din asocierea a doua perechi de lanturi: o pereche
de lanturi grele (lanturi H) si o pereche de lanturi usoare (lanturi L)
-lanturile grele se asociaza intre ele prin punti disulfurice
-lanturile usoare se asociaza la cele grele prin punti disulfurice
-desi cele 2 tipuri de lanturi sunt diferite intre ele, prezinta totusi cateva
asemanari: sunt uniderectionale (toate au N-terminal si C-terminal in aceeasi
directie), sunt paralele intre ele (acest paralelism nu este niciodata liniar, ci
spiralar => fiecare lant infasurandu-se in jurul lantului cu care se asociaza
prin punti disulfurice)
-lanturile grele se spiraleaza reciproc, unul in jurul celuilalt, pe distanta unui
arc de 180o (o hemitura)
-lanturile usoare se spiraleaza in jurul lanturilor grele => lanturile grele devin
dublu spiralate (si intre ele, dar si cu cele usoare)
-spiralarea determina adoptarea unei forme globuloase, datorita condensarii
lanturilor
-ambele tipuri de lanturi sunt constituite din doua tipuri de secvente
peptidice: variabile si constante
Secventele variabile
-secventele de AA dispuse catre capetele N-terminale (100 - 110 AA) sunt
variabile sau hipervariabile de la molecula la molecula, respectiv de la clona
la clona LB => secvente clonotipic specifice; secventele sunt identice ptr
lanturile H si L, dar diferite intre ele (H = H / L = L / H diferit de L)
-secventele variabile ale H si L se asociaza intre ele, determinand 2 situsuri
(identice intre ele) pentru determinantii antigenici conformationali (fie ca
antigenele sunt solubile sau corpusculare); deoarece prin ambele situsuri
este recunoscut un singur determinant antigenic => Ac sunt monospecifici
-functiile secventei variabile: recunoastere antigenica; functional se numesc
Secventele constante
-secventele de AA situate catre capetele C-terminale; sunt constante sau
aproape constante
-secventele constante ale lanturilor usoare sunt identice la toate clasele de Ig
=> secvente constanet panizotipice
-secventele constante ale lanturilor grele sunt constante doar in cadrul
aceleiasi clase (izotip) de imunoglobulina => se disting 5 izotipuri de Ig: IgG,
IgM, IgA, IgD, IgE
-functiile secventei constante: functii biologice => activarea cascadei
complementului (pe calea clasica),
favorizeaza fagocitoza de catre
macro/microfage, pasajul transplacentar al Ac de la mama la fat; functional
se numesc
-IgA (?) si IgD au rol de BCR
Anticorpii IgG
-anticorpi cu forme monomere
-se afla in concentratiile plasmatice cele mai mari (1000 1500 mg/dL)
-sunt 75% din totalul Ac din circulatie
-sunt distribuiti in cote aproximativ egale intre sectorul intravascular si cel
extravascular
-anticorpii IgG sunt prezenti intravascular, in concentratii mari/foarte mari
-pot trece usor bariera endoteliala => trec usor din vas in tesuturi, unde se
acumuleaza
-au cea mai lunga durata de viata (4 saptamani); exceptie fac IgG3 care
dureaza 5-7 zile
Structura IgG
Lanturile grele
-constituite din aproximativ 450 de AA, au 130A si 45kDa (exceptie fac
lanturile grele ale IgG3, care au valori mai mari)
-lanturile sunt organizate in 4 bucle (domenii) continand intre 100-110 AA;
acestea sunt create datorita existentei unor punti disulfurice intracatenare
-domeniile au pozitii extrem de diferite, deoarece lanturile H sunt dublu
spiralate
-organizarea domeniilor: primul domeniu este in apropierea capatului Nterminal, cu bucla in exterior; al doilea domeniu este situat dupa infasurarea
H-L, avand bucla in interior; domeniile 3 si 4 se situeaza spre C-terminal,
dupa infasurarea H-H, avand buclele in exterior, pe versantul opus al
moleculei
-domeniile dinspre capatul N-terminal sunt variabile sau hipervariabile (VH)
-celelalte domenii sunt constante (CH); se numeroteaza CH1,2,3, pornind
dinspre N-terminal
-portiunea dintre CH1 si CH2 se numeste zona balama => zona lanturilor H
cu maximum de flexibilitate, favorizand contactul Ac cu Ag si recunoasterea
antigenica
-in zona balama, lanturile H se asociaza prin punti disulfurice; numarul si
pozitionarea puntilor difera de la subizotip la subizotip de IgG => se
diferentiaza 4 subizotipuri (subclase) de IgG
-IgG 1: 2 punti disulfurice situate intre punctul de intersectie si CH2
-IgG 2: 4 punti disulfurice situate in pereche , de-o parte si de alta a punctului
de intersectie
-IgG 3: 15 punti disulfurice situate intre punctul de intersectie si CH2 =>
explica diferentele IgG3
-IgG 4: 2 punti disulfurice situate de-o parte si de alta a punctului de
intersectie
Lanturile usoare
-constituite din 215 AA, au 60A si 22kDa
-sunt organizate in 2 domenii, care sunt pozitionate diferit (deoarece si
lanturile L se spiraleaza)
-organizarea domeniilor: primul domeniu este spre N-terminal, cu bucla la
interior; al doilea domeniu se afla dupa zona de spiralare avand bucla la
exterior
-domeniul N-terminal: variabil sau hipervariabil (VL)
-domeniul C-terminal: domeniu constant (CL); exista cateva AA care pot varia
=> se impart in lanturi kappa si lanturi lambda
-functional, lanturile usoare si domeniile variabile ale celor grele constituie
fragmentul ab / partile constante ale lanturilor grele constituie fragmentul
constant
Fragmentul antigen-binding
-contine situsurile combinative pentru Ag
-situsul: cavitate de dimensiuni mici (30 x 10 x 6A) ce rezulta din plicaturarea
VH si VL, ce permite acomodarea si recunoasterea acestuia prin potrivire de
forma sau complementaritate
Anticorpii IgM
-anticorpi pentamerici
-C1s cliveaza initial C4, la nivelul capatului N-terminal al lantului alfa =>
eliberarea C4a si generarea de modificari conformationale care expun
gruparile tiol-esterice prin care se ataseaza de membrana celulara, in
apropierea complexelor imune => atasarea determina modificari transmise
alfa-beta-gamma, care se finalizeaza cu expunerea AA capabili sa lege C2,
crescand afinitatea C4b pentru C2 =>C2 este rapid atasat lantului gamma al
C4b, neavand initial contact cu membrana
-C1s activeaza ulterior C2, scindandu-l in C2a si C2b; C2b este atasat de C4,
dar si de membrana => se formeaza C3-convertaza
Generarea C5-convertazei
Schema de principiu
-C3 convertaza scindeaza C3 in C3a si C3b
-C3b poate sa intre in contact cu complexul C4b-C2b, formand un complex
trimolecular C4b-C2b-C3b denumit C5-convertaza, partea enzimatica fiind
reprezentata de C2b
-atasarea C3b determina comutarea specificitatii de substrat, astfel incat C2b
nu mai actioneaza pe C3, ci pe C5
-C3b se poate atasa individual pe membrana bacteriana => opsonizare
Generarea MAC
Schema de principiu
-C5-convertaza cliveaza, prin proteoliza limitata, fragmentul C5 => C5a
(ramane fluid si are efecte proinflamatorii mai intense decat cele ale C3a) si
C5b
-C5b se ataseaza rapid la C6 si C7, formand un complex trimolecular C5b-C6C7, care activeaza C8
-C8 activat devine polimeraza, determinand, in prezenta Ca, polimerizarea
C9, care formeaza structuri tubulare ce perforeaza membrana
Schema de detaliu
-C5 se ataseaza la secventa AA de pe lantul beta al C3b si este clivat de catre
C2b
-C5b se detaseaza de C5-convertaza si de membrana, revenind in faza fluida
(pentru ca C5b nu are grupare tiol-esterica)
-C5b ataseaza C6, iar C6 leaga C7 => formeaza un complex trimoleculara in
faza fluida, care in final se ataseaza de membrana non-self
-atasarea se face prin intermediul C7, care are proprietati lipofile => C7
sufera modificari conformationale care ii permit atasarea C8 => complex
tetramolecular
-C8 se ataseaza si de complexul trimolecular, dar si de membrana, devenind
o polimeraza membranara => polimerizeaza (in prezenta Ca) placutele de C9
-se formeaza structuri tubulare care perforeaza membrana, permitand
intrarea Na si apei => hiperhidratare supraacuta (liza osmotica)
-in cazul caii clasice, liza osmotica porneste de la o recunoastere imunologicspecifica a Ag membranare (real de Ig)
-in cazul caii alterne, liza osmotica porneste de la o recunoastere imunologicnespecifica
-nomenclatura: unii autori denumesc C2a fragmentul mare si C2b fragmentul
mic
generate
pe
calea
alterna
Nivelul amplificat
-se formeaza, pe membrana Ag, complexul bimolecular C3b-factor B
-complexul bimolecular este clivat de factorul D => se elibereaza Ba, astfel
ca pe membrana va ramane complexul C3b-Bb (C3 convertaza intermediara a
caii alterne)
-C3-convertaza intermediara: (1) se formeaza pe membranele non-self, (2) se
formeaza episodic, (3) are o actiune enzimatica slaba (deoarece complexul
este relativ instabil, avand tendinta la o disociere-reasociere permanenta)
-la C3-convertaza intermediara se ataseaza factorul P (properdina),
formandu-se un complex trimolecular (C3b-Bb-P) denumit C3-convertaza
adevarata a caii alterne a complementului
-C3-convertaza finala: partea enzimatica este Bb; se constituie doar pe
membrane non-self; se formeaza doar episodic; are o actiune intensa
(echivalentul C3-convertazei din calea clasica) => cliveaza intens factorul C3,
formand cantitati mari de C3a (se genereaza un intens proces inflamator acut
local) si C3b (reintra in calea alterna, amplificand-o)
-amplificarea caii alterne este exponentiala => duce foarte rapid la epuizarea
properdinei aflata local => nu se mai formeaza C3-convertaza adevarata =>
se acumuleaza C3b in exces, care intra in contact cu C3b-intermediara => se
formeaza un complex trimolecular C3b-Bb-C3b denumit C5-convertaza caii
alterne a complementului, partea enzimatica fiind reprezentata de Bb (care
isi schimba specificitatea de substrat)
-C5-convertaza scindeaza factorul C5 in C5a (ramane fluid si amplifica
raspunsul inflamator) si C5b, care intra in reactie cu ceilalti factori,
constituind intr-un final MAC
MECANISME DE PROTECTIE ANTICOMPLEMENT
-se realizeaza prin 3 categorii de receptori, ubiquitari pe membranele self
(anti-factori atasabili, anti-C3-convertaze, anti-MAC)
Receptori anti-factori atasabili (C3b si C4b)
-se numesc atasabili datorita gruparii tiol-esterice, prin care se pot atasa
nespecific de orice membrana acceptoare de complement
-MCP (cofactorul proteic membranar): glicoproteina transmembranara, cu un
segment extramembranar lung, la care ataseaza C4b si C3b; prezinta inspre
capatul N-terminal o secventa care fixeaza enzima I, care proteolizeaza total
C4b si C3b legati la MCP
Receptori anti-C3-convertaze
-utili in cazul in care functia MCP este depasita de intensitatea crescuta a
reactiilor complementului
-CR1 (complement receptor 1): prezinta situsuri receptoare pentru factorii
atasabili ai complementului si pentru factorul H, care impiedica eventuala
formare a C3-convertazelor pe membranele self (impiedica legarea factorului
B la C3b si legarea C2b la Bb)
-DAF (decay accelerating factor): alcatuit din doua componente => o
glicoproteina extramembranara si un rest PIG fosfatidil inozitol glican-, care
leaga glicoproteina de membrana; este foarte mobil; repereaza si disociaza
C3 convertazele constituite accidental pe membranele self
Receptori anti-MAC
-MIRL/CD59 (inhibitorul membranar al lizei reactive): glicoproteina
transmembranara care impiedica activarea factorului C8 de catre C5b-C6-C7,
opunandu-se legaturii dintre C7 si C8
-HRF /C8bp (factorul restrictiei omoloage / C8 binding protein): glicoprteina
transmembranara care fixeaza factorul C8 (fie nativ, fie activat)
Rolul protectiei anti-complement: asigura o protectie anti-citotoxica a
celulelor self si are un rol esential in realizarea recunoasterii imunologic
nespecifice a structurilor non-self, de catre complement
cele prezente prin intermediul MHC II- ele sunte recunoscute de LTH, nu
de LTC
Recunoasterea lor se face direct prin TCR caruia I se asociaza CD3 =>
Recunoastere imunologica specifica..
Mecanismul realizat de LTC e clonotipie specifica fiecare particula
elementara de Ag prezentata prin MHC I poate fi recunoscuta de o
singura clona de LTC : Ag X e recunoscut de LTC X iar AgY este
recunoscut de LTC Y
CITOTOXICITATEA CELULARA
Mecanism comun: produc si elibereaza un mediator = PORFIRINA care:
seamana structural si functional cu C9 a complem
CD 45 (PTP)
R de adeziune cu 3 subtipuri:
LTM adera la EVP prin LFH1 ce angajeaza legaturi cu ICAM prin ULA4 ce
angajeaza legaturi cu VCAM, CD44 ce angajeaza legaturi cu adresina.
Receptorii endoteliali de adeziune : ICAM, VLA4, CD44 au o expresie
strict zonala. Expresia zonala de ICAM,VLA4 e mai mare sub actiunea
unor Il produse in focaril inflamator: IL1, TNF, IFN, ce cresc ICAM,VLA4
si ADR.
ETAPELE RIC
LTN se afla in circulatie, ajunge langa focarul Ag, unii realizeaza modificarea
fenotipica a EVP si trec in ggl luand calea aa si trec in paracortex si
stationeaza un timp f lung si unii intra in contact cu APC si daca limf poate
recunoaste Ag prezentat se activeaza si se transforma in situ in LTM, devenit
LTM parasesc ggl pe calea LY e si ajung in circulatia sanguine.
La sf inductiei sunt induse:
memoria imunologica LTM in ggl locoregionalo
patrunderea lor in focarul Ag. LTM care trece in circulatie si ajunge si in vasele
locale unde recunosc modificarea fenotipica locala, adera intens la acest
endotelui modificat si trec prin diapedeza in focarul Ag si aceste celule unii in
contact cu macrofagele si => demararea propriu-zisa a RIC ce evoluaza ca o
inflamatie acuta indusa immunologic.