Repere iatro-istorice

J.M.B.

ISTORICUL DIAGNOSTICULUI BACTERIOLOGIC

Conf. univ. dr. Mihaela Idomir, prof. univ. dr. Codrua Nemet,
prof. univ. dr. Liliana Rogozea, ef lucr. dr. Alexandru Blescu, ef lucr.dr. Pascu Alina
Universitatea Transilvania din Braov, Facultatea de Medicin
Abstract:
The study of the historical sources showed that, until the 18th century, medicine was dominated by
idealist concepts. In the second part of the 19th century, microbiology became a independent science.
Microbes have been observed the first time by Antoni van Leeuwenhoek, but a huge step forward was done by
the epochal discoveries of the French scientist Louis Pasteur, who could determine the relation of causality
between microbes and infections, founding the theory of germs. A very important contribution was also that of
the German doctor Robert Koch who has confirmed, in his postulates, the observations of Pasteur, has
discovered and cultivated agents of some infectious diseases and has introduced new techniques of diagnosis.
In this period several researchers have contributed to the development of the scientific bacteriology. In the 20th
century, there were made important progresses regarding the introduction of the electronic microscopy and the
techniques with radioactive isotopes. Also, the use of genetic engineering has opened new perspectives. In our
days, a tendency for the modernization and standardization of the bacteriological diagnostic can be observed.
Keywords: bacteriological diagnoses, theory of germs

Bacteriile au constituit primele forme de

via de pe Terra, cele mai vechi rmie
fosilizate descoperite pn n prezent datnd de
circa 3,5 miliarde de ani. Este demonstrat n
prezent faptul c a fost necesar o perioad
ndelungat, de aproximativ 1,5-2 miliarde de
ani, pn la apariia organismelor superioare.
Prin urmare, specia uman i-a dus existena,
nc de la nceputurile evoluiei sale, ntr-o lume
populat de microorganisme.
Din cele mai vechi timpuri, omenirea a
fost apsat de povara unor mari flageluri ca
variola, ciuma, tifosul exantematic, holera, febra
galben, difteria, etc. care au decimat-o secole dea rndul. Exist dovezi c oameni celebri din
diverse perioade istorice i-au gsit sfritul din
cauza unor boli identificate astzi ca fiind cu
etiologie infecioas. Dintre acetia fac parte
faraonii Ramses I, mort din cauza unei infecii a
urechii i Ramses V, rpus de variol, mpratul
roman Marcus Aurelius Antoninus, victima unei
epidemii de variol, Alexandru cel Mare, decedat
din cauza unei infecii pulmonare i bunul su
prieten, Hephaistion, care a suferit de febr
tifoid. De asemenea, de-a lungul secolelor,
multe personaliti artistice au fost afectate de
sifilis sau de tuberculoz.
nc din antichitate, teama de aceste boli
necrutoare i-a determinat pe oameni s ncerce
s previn izbucnirea unei epidemii chiar n
contextul n care nivelul redus al cunotinelor lor
nu le permitea nelegerea cauzelor acestora.

Astfel, cadavrele i obiectele contaminate erau

incinerate iar n case ardeau sulf.
Medicina antic era dominat de empirism, bolile fiind abordate mai mult din perspective mitologice sau filozofice. Unii oameni luminai ai epocii s-au situat totui pe poziii materialiste, bazndu-se pe observaiile personale
asupra naturii, dar din cauza inexistenei mijloacelor tehnice de obiectivare, interpretarea acestora
a fost adeseori eronat. Aristotle (384-322 .Ch.), a
observat c materia organic n descompunere
este populat de vieuitoare mrunte (mute,
viermi) i a considerat c acestea apar n mod
spontan. El a enunat teoria generaiilor spontane, care, dei eronat, a dominat secole de-a
rndul. Unii medici sau filozofi au intuit existena unor particule vii, posibil implicate n producerea sau transmiterea unor boli, pentru care au
folosit denumiri diferite: Tucidide - contagium
animatum, Hippocrat - miasme morbide.
Lucretius Carus - germeni ai bolii i ai morii.
n anul 50 .Ch., Marcus Terentius Varro vorbea
despre existena, n vecintatea mlatinilor, a unor
mici creaturi, pe care le numea animalis minuta,
care nu sunt vizibile, dar pot pluti n aer, ptrund
n corp prin nas i gur i pot cauza boli grave. n
30 .Ch., Columella spunea c febra poate fi
cauzat de insecte de mlatin. n lucrarea sa
Canoanele medicinei, n anul 1010, Avicenna
scria c secreiile corpului uman sunt contaminate cu corpi strini nainte de debutul unor
infecii.

124

Repere iatro-istorice

J.M.B.

Pn la sfritul secolului al XVI-lea, nu

au fost realizate progrese importante n ceea ce
privete bolile contagioase. n 1546, omul de
tiin italian Girolamo Fracastoro a sugerat c
unele boli epidemice sunt produse de forme de
via invizibile pe care le numea seminaria
prima. n anii care au urmat, ali cercettori au
ncercat s explice contagiozitatea unor boli prin
existena unor particule invizibile (Kircher
1646, Hauptmann 1650, Langius 1650,
Boghurst 1665, Diemerbroeck 1665, Hooke
1665, Redi - 1668).
Un uria pas nainte n aprofundarea
cunoaterii naturii a constat n construirea primelor microscoape. Majoritatea autorilor i
consider constructori ai primului microscop pe
opticienii olandezi Zacharias i Hans Jansen. n
1590, acetia au plasat o lentil n spatele alteia
realiznd un microscop cu un tub de 2 metri
lungime. Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723),
un lefuitor de lentile olandez, a reuit s obin
lentile cu putere de mrire de pn la 270 de ori
i distan focal de 1mm. A fost primul care,
analiznd apa rezidual i diverse produse biologice, a observat microorganisme pe care le-a desenat i tiprit, ntre 1675 i 1708, numindu-le viva
animalcule. n 1667, Robert Hooke, n lucrarea
Micrographie, a tiprit desene ale unor celule
vegetale pe care le-a vzut la microscop. n a
doua jumtate a secolului al XVIII-lea, utilizarea
microscopiei a fost restrns datorit concepiilor
conservatoare din epoc i a faptului c interpretrile erau adesea greite din cauza aberaiilor
cromatice. n 1695, Gregory D. a introdus
combinaii de lentile cu dispersii diferite pentru a
corecta aceast deficien. n 1774, matematicianul Euler L. a explicat tiinific aberaiile
cromatice i a calculat ce obiective trebuie s se
construiasc pentru a le diminua, fapt pus apoi n
practic de Beeldsnyder F. G. (1735-1808). Din
1821, pe parcursul activitii sale, Amici G. D. a
dezvoltat sistemele de lentile acromatice i n
1855 a inventat obiectivul cu imersie ce a permis
observarea detaliilor de structur ale bacteriilor. n
1854, Ridell a realizat microscopul binocular iar
n 1878, Ernst Karl Abb E. (1840-1905) a
formulat teoria formrii imaginii n microscop,
care a condus la reproductibilitatea rezultatelor
i la creterea performanelor, a introdus condensatorul ce i poart numele i examinarea microscopic cu imersie.
Studierea microorganismelor a devenit

preocuparea unei pleiade de cercettori (Francesco

Redi, John Needham, Lazzaro Spallanzani,
Theodore Schwan, Georg Friedrich Schroder,
Theodor van Dusch, Felix Pouchet, John
Tyndall, Ferdinand Cohn, etc.).
Momentul culminant care a marcat
nceputurile microbiologiei ca tiin i a deschis
era diagnosticului bacteriologic a constat n
descoperirile epocale ale marelui savant francez
Louis Pasteur (1822-1895), considerat printele
microbiologiei. Acesta a stabilit relaia de
cauzalitate ntre microb i infecie i a elaborat
teoria germenilor. Unele dintre contribuiile sale
eseniale se refer la practica diagnosticului
bacteriologic. A recomandat folosirea flacoanelor
sterile, acoperite cu dopuri de vat. De asemenea a
introdus procedeul de sterilizare cu aer cald (la
temperatur de 180C, timp de 2 ore), n cuptorul
Poupinel i flambarea instrumentelor i recipientelor din sticl. Prin urmare, Pasteur a propus
modul de lucru aseptic n bacteriologie fiind
iniiatorul asepsiei. El sugera 3 metode prin care
pot fi ndeprtate bacteriile aflate dintr-un produs:
filtrarea, prelucrarea termic i expunerea la
soluii chimice. Ca urmare a studiilor efectuate
asupra bolilor epidemice umane i animale
(holera ginilor, antraxul, ciuma, tuberculoza,
febra tifoid, difteria, etc.) i asupra fermentaiei
alcoolice, lactice sau butirice, a furnizat informaii
importante despre proprietile fiziologice ale
bacteriilor i despre diversitatea lor, care au stat
la baza ncercrilor ulterioare de sistematizare a
bacteriologiei. n anul 1877 a descoperit specia
Clostridium septicum iar n 1880 a nsmnat
puroi extras dintr-un furuncul ntr-un mediu lichid
i a reuit s cultive pentru prima dat in vitro
stafilococii, germeni descoperii microscopic n
1878 de o alt personalitate marcant din epoc,
Robert Koch (1843-1910).
n 1884 Hans Christian Gram a introdus
coloraia care i poart numele, folosit cel mai
frecvent n bacteriologie i n zilele noastre.
Microbiologul
francez
Charles
Chamberland (1851-1908), colaborator al lui
Louis Pasteur, a dezvoltat, n 1884, un filtru din
porelan care astzi i poart numele, cu pori de
dimensiuni mai mici dect bacteriile, putnd
astfel introduce metoda sterilizrii prin filtrare.
De asemenea, un proiect de cercetare pe care l-a
coordonat a condus la inventarea autoclavului.
Medicul german Robert Koch, printele
colii germane de microbiologie, laureat al

125

Repere iatro-istorice

J.M.B.

premiului Nobel pentru Fiziologie sau Medicin

n 1905, cunoscut mai ales pentru postulatele ce
fundamenteaz teoria germenilor enunat de
Pasteur, a demonstrat c infeciile specifice sunt
cauzate de germeni patogeni specifici. Una dintre
contribuiile sale la diagnosticul bacteriologic a
constat n introducerea frotiului n practica
microscopiei. De asemenea, a fost preocupat de
cultivarea bacteriilor in vitro i de izolarea
agentului patogen n cultur pur. Folosind
aceste metode, el a observat agentul antraxului
(1876), stafilococii (1878), bacilii tuberculoi
(1882) i vibrionii holerei (1883). n 1883, Koch a
descoperit hemofili pe frotiurile din secreii
conjunctivale.
nainte de Louis Pasteur, au existat puine
tentative de cultivare a bacteriilor. n 1823, Bizzi
reuise s izoleze i s transfere bacterii pe
materiale finoase. n anul 1872, Schroeter, a
reuit s separe bacterii cromogene folosind ca
substraturi solide cartof, albu de ou coagulat,
paste, carne. Nu a reuit acest lucru n cazul
bacteriilor acromogene, mai ales al celor cu culori
apropiate de cea a mediului de cultur. Mai trziu
Klebs (1873), Lister (1878), Salomonsen (1876) i
alii au ncercat s obin culturi bacteriene pure,
cu grade diferite de succes. Folosirea mediilor
lichide ridica greuti insurmontabile din acest
punct de vedere. Gsirea unei metode de izolare a
bacteriilor din produsele bolnavilor i cultivarea
lor n cultur pur devenise dezideratul microbiologilor, preocupai de descoperirea unui
substrat solid.
Meritul de a introduce tehnica cultivrii
bacteriilor pe medii solide i se atribuie lui Robert
Koch. El izolase agenii antraxului (1876) i
streptococii din puroi (1881). A neles c
mediile pentru obinerea unor culturi pure
trebuie s fie solide, transparente i sterile.
Cuta un agent de solidificare eficient. Un
colaborator al su cu contribuii valoroase n
domeniul bacteriologiei a fost naturalistul german
Ferdinand Julius Cohn. Este unanim recunoscut
meritul colaboratorilor si, Walter i Fannie
Hesse. Walter Hesse lucra n laboratorul lui
Koch, n poziie postdoctoral, fiind preocupat
de cultivarea florei bacteriene din aer. n acest
scop folosea medii cu gelatin, agentul de
solidificare utilizat de microbiologii din perioada
sa. Dezavantajele acesteia constau n faptul c la
37C era fluid i era lichefiat de unele bacterii.
Soia sa, Fannie Eilshemius Hesse, i prepara

mediile de cultur. Vznd eecul experimentelor

lui Walter, Fannie a propus folosirea, ca agent de
solidificare, a unui extract de alge numit agaragar, pe care l folosea la prepararea gemurilor.
n anul 1881, i-au comunicat printr-o scrisoare lui
Robert Koch rezultatele, acesta a preluat metoda
i, n 1884, a reuit s obin agenii tuberculozei n cultur pur.
Pasteur i Koch, sunt considerai fondatorii
microbiologiei, dar obiectul cercetrilor lor au fost
bacterii de importan medical. Fondatorii
microbiologiei generale pot fi considerai Martinus
Beijerinck (1851-1931) i Sergei Winogradsky
(1856-1953). Martinus Beijerinck a contribuit la
diagnosticul bacteriologic prin punerea la punct
a unor tehnici de mbogire a culturilor iar
Sergei Winogradsky a reuit s izoleze
bacteriile nitrificatoare.
n 1887, microbiologul german Richard
Julius Petri (1852-1921), concomitent cu tehnicile
de cultivare nou introduse de Robert Koch, a
propus n acest scop un recipient din sticl care
permitea creterea bacteriilor pe suprafaa unui
mediu solid, n condiii de sterilitate, care este i
astzi denumit placa Petri. Aceste plci puteau
fi sterilizate prin cldur uscat. n prezent,
aceste plci sunt fcute din materiale plastice i
sunt de unic folosin.
Cultivarea bacteriilor n condiii de
laborator a nceput s fie practicat din secolul
al XIX-lea ns primele ncercri de testare n
condiii de laborator a sensibilitii bacteriilor la
antibiotice precum i de determinare a eficienei
antibioticoterapiei n practica clinic au nceput
s se realizeze din anul 1940. Ulterior, pentru
eliminarea sau diminuarea aciunii unor factori
perturbatori, pentru antibiogram s-au adoptat
proceduri standardizate, care au crescut eficiena
acestei tehnici i valoarea sa n practica
medical.
Dup 1950, principalele momente n
dezvoltarea diagnosticului bacteriologic au constat
n introducerea microscopiei electronice i a
tehnicilor cu izotopi radioactivi, ce au permis
observarea infrastructurii bacteriene i identificarea unor noi specii patogene. n laboratoarele
performante, pentru diagnosticul bacteriologic
sunt utilizate teste genetice i P.C.R. (polymerase
chain reaction).
n anul 1977, Gilbert W. i Sanger F. au
determinat secvena bazelor n acizii nucleici iar
n 1983, Kary Mullis a inventat P.C.R.

126

Repere iatro-istorice

J.M.B.

n medicina modern este de neconceput

stabilirea diagnosticului infeciilor fr utilizarea
investigaiilor microbiologice care pot confirma
suspiciunile clinicianului. n contextul perioadei
actuale, caracterizat printr-o dinamic continu a
etiologiei i modalitilor de manifestare a bolilor
infecioase, dezvoltarea diagnosticului bacteriologic rmne o problem mereu actual.
Bibliografie
1. Alcamo E. Fundamentals of microbiology. The
Benjamin/Cummings Publishing Company,
USA, 1994.
2. Baron S. Medical Microbiology (4th edition),
University of Texas Medical Branch, 2003.
3. Blbe V., Pozsgi N. Bacteriologie medical
- vol. II. Ed. Medical, Bucureti, 1985.
4. Lucia Debeleac, Popescu-Drnda M. Microbiologie. Ed. Amaltea, Bucureti, 1994.
5. Kaiser G. Microbiology. The Community
College of Baltimore County , 2003.

6. Kathleen Talaro, Talaro A. Foundations in

microbiology, basic principles. Wm. C.
Brown Publishers, USA, 1996.
7. Nester E., Roberts E., Nancy Pearsall,
Denise Anderson, Martha Nester
Microbiology, a human perspective, WCB/
McGraw-Hill, USA, 1998.
8. Paustian T. Microbiology Webbed Out.
University of Wisconsin-Madison, 2003.
9. Prescott L., Harley J., Klein D. Microbiology, WCB/McGraw-Hill, USA, 1999.
10. Todar K. Procaryotic microbiology.
University of Wisconsin-Madison, 2003.
11. Highlights in the History of Microbiology,
http://users.stlcc.edu/kkiser/History.page.html
12. MicrobiologyBytes,
http://microbiologybytes. wordpress.com
13. A History of Microbiology, http://microbes.
historique.net/history.html

127