Tema 12 Tema 12

Tema 12 Fundamentos de inmunohematología

métodos generales de estudio
Conceptos generales
FUNDAMENTOS DE Antígenos eritrocitarios y anticuerpos de
grupo sanguíneo: Tipos y características
INMUNOHEMATOLOGÍA Anticuerpos naturales e inmunes:
características
MÉTODOS GENERALES Sistema A B O: Antígenos y anticuerpos
DE ESTUDIO Determinación del grupo ABO
Sistema Rh: Antígenos y anticuerpos
Determinación del antígeno D (Rh)
Bioquí
Bioquímica Clí
Clínica i Hematologia Prueba de Coombs indirecta
Prueba de Coombs directa
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Tema 12 Tema 12

Conceptos generales Anticuerpo de clase IgM

ANTIGENOS
Toda sustancia que introducida en el
organismo provoca una reacción inmune
De tipo humoral: Formación de anticuerpos
De tipo celular
ANTICUERPOS
Proteínas plasmáticas (γ-globulinas) producidas
como respuesta a la entrada de un antígeno.
Clasificación por la cadena pesada:
IgG(γ), IgM(µ), IgA(α), IgD(δ), IgE(ε)
Subclases según cadena ligera: κ, λ
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 Tema 12 Antígenos eritrocitarios y anticuerpos de grupo Tema 12

sanguíneo: Tipos y características

Conceptos generales
ANTIGENOS ERITROCITARIOS
Tipos
Grupo sanguíneo: Sistema bien definido de Antígenos ABO: Glucolípidos
antígenos de los hematíes, controlado por un Sistema antigénico Rh: Lipoproteínas de la membrana
locus que posee un número variable de genes Otros: Lewis, grupo P, grupo MMSs, Kell, Duffy,
Lutheran,etc
alélicos
ABO, Rh Características antígenos ABO
Lewis, P, I, MNS, Kidd, Kell, Duffy, Lutheran Antígenos A i B: Carbohidratos unidos a sustancia H
La herencia de los antígenos A y B es mendeliana
Determinan el grupo ABO y depende de la presencia de
Grupo sanguíneo personal: fenotipo uno (homocigota) o dos (heterocigota) de los tres alelos:
antigènico de los genes de grupo sanguíneo A, B y H cuyos genes están en el cromosoma 9p
heredados. Genes codifiquen para glicosil transferasas
Si se heredan transferasas tipo A i B > grupo AB
Si se heredan transferasas tipo A> grupo A
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No se hereda ninguna transferasa > grupo O

Antígenos eritrocitarios y anticuerpos de grupo Tema 12 Antígenos eritrocitarios y anticuerpos de grupo Tema 12

sanguíneo: Tipos y características sanguíneo: Tipos y características

ANTICUERPOS DE GRUPO SANGUÍNEO
ANTIGENOS ERITROCITARIOS
Tipos
Características del sistema antigénico Rh
Heteroanticuerpos (de otras especies animales o vegetales)
Segundo en importancia en la práctica ALOANTICUERPOS (de otros individuos misma especie)
transfusional Autoanticuerpos (contra los propios antígenos)
Muy polimorfo, pero sólo 5 son comunes:DCcEe
La herencia de los antígenos es mendeliana Naturales (A,B,O) ( sin estímulo previo)
codominante.Tres alelos: D y d, C y c, E y e Inmunes (Rh) ( ha habido estímulo antigénico)
Los genes se localizan en el cromosoma 1
Regulares (presentes aunque no halla antígeno)
La designación Rh positivo indica la presencia Irregulares (no necesariamente existen en ausencia de
del antígeno D : 85% de los individuos (42% antígeno)
homocigótico:DD, 58% heterocigótico: Dd)
El antígeno D es muy inmunogénico y es causa Aglutinantes en solución salina (completos)
relevante de la “enfermedad hemolítica del recién Sensibilizantes (incompletos)
nacido” (EHRN)
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 Tema 12 Tema 12

Anticuerpos naturales e inmunes: características Anticuerpos naturales e inmunes: características

ANTICUERPOS DE GRUPO SANGUINEO Naturales Inmunes

Características
Inmunoglobulinas específicas de grupo sanguíneo Generalmente Generalmente
Inmunoglobulina
Naturales: IgM IgG
Congénitas; sin estimulaciones antigénicas Aglutinación
Todos los individuos tienen anticuerpos contra antígenos que no
poseen (isoaglutininas): grupo A> anticuerpos B eritrocitaria en Importante Escasa
Dirigidos contra carbohidratos: por ejemplo sistema ABO solución salina
IgM
Anticuerpos frios
Puedan activar el complemento >hemólisis intravascular aguda Temperatura óptima 4ºC 37ºC
Inmunes o Reactivos:
Adquiridos; como reacción a transfusiones o embarazos Fijación
Dirigidos contra proteinas ; Rh (D,C,c,E,e) complemento “in La mayoría Pocos
IgM→IgG
Anticuerpos calientes
vitro”
Hemólisis predominantemente extravascular
Pasan la barrera
Atraviesan la barrera placentaria No SI
enfermedad hemolítica del recién nacido placentaria
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Tema 12 Tema 12
Sistema A B O – antígenos A1, A2, B, O (alelo
Sistema A B O – antígenos A1, A2, B, O (alelo silencioso)
silencioso) Frecuencia
Genotipos Fenotipos
%
OO O 53,5
Grupo A Grupo B Grupo AB Grupo 0
A1 A1
Antigeno A Antigeno B Antigenos
AB No antígenos A1 A2
A1 O A1 *
RBC A2 A2
A2 O A2 (2% con anti-A1) 34
BB
Plasma BO B 9
No
A1 B A1 B
Anticuerpos Anticuerpos
Anticuerpos
Anti-B Anti-A anticuerpos
AyB
A2 B (25% con anti-
A2 B 3,5
Bioquímica Clínica i Hematologia – curs 2006-07 * El 80% de los sujetos A son A1 A1) Bioquímica Clínica i Hematologia – curs 2006-07

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Sistema A B O Sistema A B O – anticuerpos

diferenciacion entre A1 y A2
aglutinacion por las lectinas Aloanticuerpos naturales y generalmente regulares
Los anticuerpos irregulares (anti-A1) interfieren las
pruebas cruzadas pretransfusionales pero sin
Dolichos Ulex importancia clínica, excepto si actúan a 37ºC
biflorus europaeus (hemolizantes)
Predominantemente IgM
Aglutinan en solución salina
A1 + - Temperatura óptima: 4ºC pero son activos y
hemolizantes a 37ºC
Inmunización fetomaterna rara (madre O que desarrolla
anticuerpos IgG contra eritocitos A o B del feto)
A2 - +

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Tema 12
Combinaciones de alelos que determinanTema 12
Combinaciones de alelos que determinan los fenotipos ABO y sus anticuerpos
los fenotipos ABO y sus anticuerpos
Genotipo Fenotipo Antigenos de Anticuerpos
hematies séricos
Parejas de Fenotipos ABO Isoaglutininas: 1
AA 1
A1 A1, H Anti-B
alelos A1A2
anticuerpos A1O
A2A2 A2 A2, H Anti-B
A,A A Anti-B A2O (Anti A1)
BB B B, H Anti A, A1
A,O A Anti-B BO
A1B A1B A1, B, H
A, B AB cap
A2B A2B A2, B, H (Anti-A1)
B, B B Anti-A
OO O H Anti-A, A1
B, O B Anti-A Anti-B
hh Oh - Anti-A, A1
O, O O Anti-A, Anti-B, Anti-B
Anti-H
Anti-AB
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•Sistema A B O – determinación del grupo A B O •Sistema A B O – determinación del grupo A B O

CON SANGRE TOTAL SOBRE PLACA CON SANGRE TOTAL

Sangre total problema
Sueros anti-A, anti-B y anti-AB SOBRE PLACA
Mezclar y observar la aglutinación o su ausencia Sangre total problema
CON SANGRE TOTAL EN TUBO Sueros anti-A, anti-B y
Suspensión de eritrocitos problema al 5% anti-AB
Sueros anti-A, anti-B y anti-AB
Mezclar y centrifugar 1 min. a 1000 rpm y observar la aglutinación o Mezclar y observar la
su ausencia
aglutinación o su ausencia
CON SUERO SOBRE PLACA
Eritrocitos A y B lavados (de donante) en solución salina al 10%
Suero del paciente
Mezclar y observar la aglutinación o su ausencia

CON SUERO EN TUBO

Eritrocitos A y B lavados (de donante) en solución salina al 10%
Suero del paciente
Mezclar y centrifugar 1 min. a 1000 rpm y observar la aglutinación o
su ausencia

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Tema 12 Tema 12
Sistema Rh- Anticuerpos
Sistema Rh
Antígenos C, c, D, d (alelo silencioso), E, e Aloanticuerpos inmunes
Tipo IgG, generalmente
Genotipo Frecuencia
Fenotipo Sensibilizantes (incompletos): detectables en el suero
probable genotípica %
por el test de Coombs indirecto
CcDee CDe / cde 34 No activan el complemento
CCDee CDe / CDe 20 Los más importantes: anti-D (luego anti-c y anti-E)
Transfusionales: En el 50% de casos de incompatibilidad
cc”dd”ee cde / cde (Rh-) 15
para D (muy raros actualmente)
CcDEe CDe / cDE 13 Inmunización fetomaterna: 1 de cada 6 mujeres D(-)
con 2 hijos D(+) (muy raro actualmente: inmunoglobulina
ccDEe cDE / cde 12
anti-D preventiva administrada posparto)
Otros (Cde, cdE) 6 La incompatibilidad ABO protege de la sensibilización
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 Tema 12 Tema 12
Ac anti-D, via i.m.
Primer
embarazo 0-72 h postparto Sistema Rh- determinacion del antigeno D (Rh)

Destrucción de eritrocitos METODO SOBRE PORTAOBJETOS

⇒ No hay sensibilización
niño: Rh + Sangre total problema
madre: Rh - Segon Suero anti-D
embaràs Mezclar durante 2 min. y observar la aglutinación
o su ausencia, a 40ºC

METODO EN TUBO
Suspensión de eritrocitos problema al 2-5%
Eritrocitos Suero anti-D y albúmina bovina
pasan a la Madre
circulación desarrolla Anticuerpos Mezclar y centifugar 1 min. a 1000 rpm y
materna anticuerpos anti-D de la observar la aglutinación o su ausencia
anti-D madre pasan al
hijo
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Tema 12 Tema 12

Grup ABO y D Prueba de coombs indirecta

Sistema de tipaje en tarjeta
Investigación en el suero de la existencia de
anticuerpos sensibilizantes
Se trata generalmente de anticuerpos inmunes o
reactivos por previa transfusión o previo embarazo
con feto que posee un antígeno del que carece la
madre. Ejemplo: madre Rh negativa (D-) con un
hijo D+.
Realización:
Incubar eritrocitos de donante que contienen el
antígeno y el suero problema durante 1 h a 37ºC
lavar 3 veces los eritrocitos
añadir una gota de suero antiglobulina humana y
centrifugar 1 min. a 1000 rpm
Ver si hay aglutinación
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 Tema 12 Tema 12

Prueba de coombs indirecta

lavados

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Tema 12 Tema 12

Prueba de coombs directa Prueba de coombs directa

Investigación de anticuerpos sensibilizantes

fijados a la membrana eritrocitaria:
Anemia hemolítica auto o aloinmune.
Realización
Lavar los eritrocitos cuatro veces con solución
salina y preparar una suspensión al 2-5%.
Una gota de suspensión de eritocitos + una gota
de suero antiglobulina humana en un tubo
Centrifugar 45 segundos a 1000 rpm
Leer si hay aglutinación

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 Tema 12 Tema 12

Prueba de coombs directa

Aglutinación en tubo

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