Genoma Humano y

Biotecnología
Liceo San Pedro Poveda
Prof.: Ma. José Espinoza A
4to medio
 Genoma:
 Conjunto de todos los genes de un organismo y de
todo el patrimonio genético almacenado en el
conjunto de su ADN o de sus cromosomas.
 Proyecto Genoma Humano
 Este proyecto se puso en marcha el 1 de Octubre de
1990. Es considerado el proyecto científico más
importante de todos los tiempos y se reconoce
internacionalmente a ese día como el de su nacimiento.

 Participan en el mismo 18 países, entre ellos:

ALEMANIA, ESTADOS UNIDOS, FRANCIA, GRAN
BRETAÑA E ITALIA. La inversión ha alcanzado los
3.000 millones de dólares.

 El PROYECTO GENOMA HUMANO intenta determinar

en qué cromosoma, y dentro de éstos en qué lugar se
encuentra ubicado cada gen (unidad principal en la
transformación de las características hereditarias).
 Finalidad
 obtener informaciones para el futuro
desarrollo de la medicina y de la biología
posibilitando la invención de una nueva
generación de medicamentos y el
advenimiento de una planificación
estratégica de prevención.
La secuenciación del genoma humano abre
posibilidades, pero también nos enfrenta a
interrogantes éticos:

 El diagnóstico prenatal será más certero y

alcanzará un número muy amplio de
enfermedades. Esto agudizará la discusión ética
sobre el aborto y el derecho a la vida del no
nacido.
 Se podrá modificar la base genética de las
células somáticas (generales) responsables de
determinadas enfermedades.
 Sería posible la modificación del óvulo, del
huevo (cigoto) o del embrión de pocas células,
éticamente inaceptable.
 Debemos considerar el genoma humano como
un bien público y el capital genético individual
como una información de orden privado,
garantizando la justicia y la imparcialidad en las
decisiones que incluyen personas así como la
confidencialidad en la información obtenida, y la
libertad a no saber si se es o no portador de una
enfermedad genética.

 Tomar éstas medidas así como la creación de

estructuras jurídicas, administrativas, sanitarias
y sociales adecuadas evitará los abusos
discriminatorios a portadores de enfermedades
genéticas por parte de empresas laborales o de
salud.
Finalmente, ¿EL GENOMA
HUMANO ES PATENTABLE?

 El 11 de Noviembre de 1997, la UNESCO aprobó la

DECLARACIÓN UNIVERSAL SOBRE GENOMA HUMANO Y
LOS DERECHOS DEL HOMBRE, fijando tres principios:
 La dignidad del individuo cualesquiera sean sus
características genéticas.
 Rechazo al determinismo genético.
 El Genoma Humano es PATRIMONIO DE LA HUMANIDAD.
 Como se puede ver el descubrimiento del mapa genético
moviliza hasta los cimientos mismos de la cultura, nuestras
creencias y valores, afectándonos directa o indirectamente
a todos.
Genoma Humano:
 Describe el total de la información (Contenido
de ADN) en las células humanas.
 Genoma Nuclear:
33000Mb: 80 mil genes (25% implica genes y
secuencias que están relacionados, con lo
que se distribuye en un 10% ADN Codificante
y 90% ADN No Codificante.
ADN no codificante: (Pseudogenes (Deriva de un
gen por mutación, es inactivo), Intrones, genes
fragmentados)
 Genoma Mitocondrial:
 16,6 Kb. Aprox. 37 genes codificantes para 2
ARNr, 22 genes ARNt y 13 genes que
codifican para 13 polipéptidos
 Biotecnología
 Disciplina que engloba conocimientos de
microbiología, bioquímica, genética
molecular, ingeniería industrial, inmunología,
farmacología, ciencias medioambientales e
informática.
 Estos conocimientos se aplican para
transformar una sustancia en un producto de
interés.
 Esta transformación se realiza por la acción
de un ser vivo.
 Uso en la obtención de cerveza a
partir de cereales utilizando
levaduras desde antes del año
6.000 a.C.

 Con la aplicación de la
Biotecnología no sólo se persigue la
obtención de alimentos
elaborados. También se consiguen Ingeniería genética:
medicamentos, mejora de
Manipular el ADN, obtener fragmentos
especies vegetales y animales,
del mismo, secuenciarlos e identificar
regeneración de medio ambiente los genes del genoma de un individuo,
dañado e, incluso, proteínas modificar su secuencia e, incluso,
humanas que ayudan a paliar introducir nuevos genes en el genoma
enfermedades como anemia, de un ser vivo, obteniendo con ello una
enanismo o diabetes. nueva variedad biológica con nuevas
 La consecución de estos logros se características.
está llevando a cabo gracias a la
aparición de las técnicas de
ingeniería genética.
 Técnicas Básicas en Biología
Molecular
 El ADN tiene la particularidad de NO Hidrolizarse
,pero si se abre la hebra. Con un aumento de la
temperatura o en presencia de NaOH (Hidróxido de
Sodio) se separan las 2 cadenas, este proceso se
llama Desnaturalización o Melting.
 Si saco los agentes denaturantes (Bajando la
temperatura lentamente evitando aberraciones,
bajando la concentración de iones y removiendo el
alca) vuelvo a Renaturar.
 Proceso de crear una hebra híbrida de ADN/ARN
 Las dos hebras de la molécula de ADN son denaturadas por la
aplicación de calor, aproximadamente, a 100°C (Figs. a-b). A esta
temperatura los pares de bases complementarios que mantienen el
duplex se disocian en dos hebras simples.
 La denaturación del ADN es reversible cuando se mantienen las dos
hebras simples de ADN durante cierto tiempo a 65°C (Figs. b-a).
Este proceso se llama renaturación del ADN o hibridización.
 Hibridizaciones similares pueden ocurrir entre cadenas únicas de
cualquier ácido nucleico: ADN/ADN, ARN/ARN, ADN/ARN. Si un
transcripto de ARN se adiciona durante el proceso de renaturación,
la molécula de ARN competirá con la hebra de ADN codificante y
formará una molécula híbrida doble hebra de ADN/ARN (Figs. c-d).
 Estas reacciones pueden ser usadas para detectar y caracterizar
secuencias nucleotídicas usando una secuencia nucleotídica
particular como una sonda o prueba radioactiva.
 Tecnologías de ADN
recombinante
 Las tecnologías de ADN recombinante constituye
una mezcla de técnicas, que permiten, la
fragmentación, la separación, secuenciación,
hibridación de ácidos nucleicos, clonaje de ADN y
la ingeniería genética .
 Fragmentación de moléculas de
ADN
 Es la parte esencial del proceso, ya que el ADN debe separarse y
concentrarse.
 Partimos de células con núcleo, que deben ser lisadas (rotas).
 El ADN se puede fragmentar mecánicamente, si se hace pasar varias
veces la suspensión de ADN a través de la aguja de una jeringa, pero
por este medio la ruptura se produce al azar. La obtención de
fragmentos específicos será posible tras el descubrimiento de las
enzimas de restricción (endonucleasas).
 Estas enzimas pueden aislarse de bacterias, cortan la molécula de
ADN de doble cadena en lugares definidos por la secuencia de
nucleótidos, produciendo fragmentos de ADN de doble hebra de
tamaños bien definidos.
 Distintas especies de bacterias fabrican diferentes endonucleasas, su
función dentro de la célula bacteriana es degradar moléculas de ADN
extrañas.
 Algunas enzimas de restricción producen cortes de la molécula de ADN que
dejan extremos rectos o romos (Fig. a ).
 Otras cortan de manera escalonada, dejando extremos pegajosos o
cohesivos (Fig. b) que luego pueden unirse, por apareamiento de bases
complementarias, con otros fragmentos producidos por la misma enzima (o
con otra que genere los mismos extremos ), estas moléculas de ADN
producidas se denominan moléculas de ADN recombinante. Esto hace
posible combinar segmentos de ADN de fuentes diferentes
 El primer paso consiste en identificar y aislar el
DNA responsable de un determinado fenotipo (es
decir, que codifique para la producción de una cierta
proteína).
 Una vez obtenido, el gen (o genes) responsable del
fenotipo se fusiona con otros fragmentos de DNA
para formar moléculas de DNA recombinante.
 El DNA recombinante se multiplica (clonación de
genes) para lo cual se inserta en una célula,
generalmente bacterias. Este proceso permite
sintetizar grandes cantidades, tanto de genes
aislados como de los productos de ellos
(proteínas).
 La producción de moléculas de DNA recombinante
se basa en la propiedad de las enzimas microbianas
llamadas enzimas de restricción (o endonucleasas)
de escindir (separar, cortar) las dos cadenas del
DNA en sitios específicos.
 En condiciones normales, protegen la célula
huésped destruyendo el DNA extraño tras su
penetración en la célula.
 Actualmente los científicos disponen de múltiples
variedades de enzimas de restricción que reconocen
muchas secuencias específicas diferentes, que se
utilizan para preparar fragmentos de DNA que
contienen genes o porciones de genes específicos.
 Los retrovirus, son virus cuya información genética
esta contenida en ARN, ellos no poseen DNA, pero
para utilizar la maquinaria celular, deben generar algo
así como un lenguaje tipo DNA.
 En 1970 se descubrió que los retrovirus poseen un tipo
especial de enzima, llamada transcriptasa reversa,
que permite al virus producir una copia tipo DNA de su
información genética. Este especial DNA se denomina
DNA complementario (cDNA). Este descubrimiento
permitió sintetizar genes o porciones principales de
genes también a partir del RNA mensajero (mRNA).
 Separación o aislamiento de fragmentos de ADN
 La electroforesis en gel es
una técnica que se utiliza
para determinar con
exactitud la longitud y la
pureza de las moléculas de
ADN.
 Para el caso de fragmentos
de ADN menores de 500
nucleótidos de largo, se
usan geles de
poliacrilamida.
 En el caso de moléculas de
mayor tamaño, se utilizan
geles mucho más porosos
formados por agarosa.
  En la electroforesis, se
colocan partículas cargadas
en un campo eléctrico y se
les permite que migren
hacia los polos positivo o
negativo.
 Las moléculas se separan
porque se mueven a
diferentes velocidades en
función de su carga y su
tamaño.
 Las bandas de ADN serán
invisibles a menos que el
ADN esté marcado o teñido
de alguna manera.

Un método sensible de tinción del ADN consiste en sumergir el gel

después de la electroforesis en el colorante bromuro de etidio que
cuando se encuentra unido al DNA, es fluorescente con luz
ultravioleta.
Para marcar moléculas de ADN aisladas se utiliza la enzima
polinucleótido quinasa para transferir un P 32 hasta el extremo 5’ de
cada hebra de ADN.
 Secuenciación de una
molécula de ADN
 A finales de los años 70 se desarrollaron métodos que
permitieron determinar de manera simple y rápida la
secuencia nucleotídica de cualquier fragmento de ADN
purificado. Uno de los métodos más utilizados es el de
Maxam y Gilbert o también conocido como el método
químico.
 Este proceso se inicia con la obtención de un conjunto de
moléculas de ADN de doble hebra marcadas en un extremo
con P 32. en la primera etapa las hebras de ADN se disocian
y se someten a un tratamiento suave con un agente químico
que destruye una de las cuatro bases. Solo se destruye una
de las bases, al azar. Esto genera distintos fragmentos de
ADN de distintas longitudes, que reflejan los lugares en que
se produjo la destrucción de la base.
 Los fragmentos se separan
en un gel y se detectan por
autorradiografía.
 Para determinar la
secuencia completa, se
realizan procedimientos
similares a cuatro muestras
separadas de la misma
molécula de ADN, utilizando
compuestos químicos que
rompan el ADN de forma
preferente por T en la
primera muestra, por C en
la segunda, por G en la
tercera y por A en la cuarta.
 T C G A
3’ ___
___
___
___
___
___
___
___
___
___
___
___
___
___
5
’

Los fragmentos resultantes son separados en carriles

paralelos del mismo gel, obteniéndose un patrón de
bandas de ADN radiactivas a partir de las cuales se
lee la secuencia de ADN.
Actividad: a partir del siguiente esquema determine, la secuencia de la
molécula de ADN, recuerde que se lee en dirección 5’ 3’.
Transferencia Fármacos
de genes en Anti-cáncer
animales Cultivo de
Diagnósticos
Células
Vegetales

s Annticu
A
o ticueerrppos
CCuultltivivoess MM oonnooclon os
r
a s clonaaleles
lul lare
Solución de
CCeelu s
crimenes
Biología
Biología
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Síntesis de Nuevas Clonación ADN
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Proteínas Producción de
Nuevas Localización
Proteínas humanas de desórdenes
Mapas de Plantas y
Animales genéticos
Genomas Recursos humanos
completos químicos raros
Nuevos
Alimentos Nuevos Terapia
Antibióticos Génica
 Células Madres
 Muchos tejidos, especialmente los que tienen un desgaste y una
proliferación rápida, tales como el revestimiento intestinal, la capa
epidérmica de la piel y los tejidos hematopoyéticos, se renuevan
mediante células madres.
Las propiedades que las define son las siguientes:
 No está totalmente diferenciada
 Se puede dividir sin límites, por lo menos durante el ciclo vital del
animal.
 Cuando se divide, cada célula hija puede permanecer como célula
madre, o puede iniciar una vía que conduce irreversiblemente hacia la
diferenciación.

 Las células madres son necesarias en aquellos tejidos

que se requiere un reemplazo de células diferenciadas,
las cuales no pueden dividirse por si mismas.
 La misión de la célula madre no consiste en llegar a diferenciarse sino que
producir células que se diferencien.
 Las células madres se clasifican de acuerdo al número de células que dará
origen en:
 Unipotenciales: dará origen a un solo tipo de célula diferenciada.
 Pluripotenciales: dan lugar a muchos tipos celulares.
 Célula pluripotente del sistema hematopoyético

Auto-renovación

Línea linfoide Línea mieloide

Biotecnología:
Hoy el término engloba todo tipo de producción industrial de “bienes y
servicios” por medio de procesos que utilizan organismos, sistemas o
procesos biológicos. Contribuyen a la medicina, la industria y la
agricultura, además al campo de la investigación básica.

 Aplicaciones de la biotecnología:
Aplicaciones en la medicina.
 Terapia génica:
 Se refiere al uso de la manipulación genética
para la corrección /curación de
enfermedades genéticas y no genéticas.
 Existen dos tipos de terapia génica: en
células germinales y en células somáticas.
 La terapia génica germinal: implica la
transfección de un embrión, es decir, la inyección
de genes en cigotos. La inserción de estos genes
en el genoma del cigoto provocará un cambio
genético en el embrión, el cual será transmitido a
las generaciones futuras. Este tipo de terapia
génica no ha sido aplicada en seres humanos.

 La terapia génica en células somáticas: se

trata a un individuo, un órgano o tejido específico
de esa persona, sin afectar a las células
germinales. Por lo tanto, no se tienen
consecuencias en las siguientes generaciones.
Dependiendo del tratamiento requerido
existen varias formas de terapia génica,
estas incluyen:
 La introducción de genes supresores, para controlar
la acción de genes que se sobre expresan, como
aquellos relacionados con el cáncer.
 Para el tratamiento de infecciones virales, la
introducción de genes que codifiquen para una
proteína viral mutante podría ser de gran utilidad,
pues la proteína defectuosa, sintetizada por el
huésped, “competería” con la proteína viral normal,
impidiendo por ejemplo la producción del virus.
 El reemplazo de genes defectuosos por genes
funcionales, en el caso de enfermedades genéticas
dominantes, al ser dominante, la única alternativa
de cura implica la remoción del gen defectuoso.
 Trangénesis
 Se puede definir como la introducción de ADN extraño en un
genoma, de modo que se mantenga estable en forma
hereditaria y afecte a todas las células en los organismos
multicelulares.
 La introducción de genes se ha practicado tanto en plantas
como animales.
 Generalmente en animales, el ADN extraño, llamado transgén,
se introduce en cigotos, y los embriones que hayan integrado el
ADN extraño en su genoma, previamente a la primera división,
producirán un organismo transgenico, de modo que el transgén
pasará a las siguientes generaciones a través de la línea
germinal (gametos).
 Hoy se tienen una gran cantidad de vegetales y animales
trangénicos entre los que se pueden nombrar vegetales como, el
tomate , el tabaco, algodón, arroz, cítricos, maíz, papas, etc.
 Entre los animales transgénicos se encuentran las siguientes
especies: ratón , rata, conejo, cerdo, vaca, cabra y oveja.
2. Transgénesis por manipulación de
células embrionarias.
 Esta implica la introducción de ADN extraño en
células embrionarias madres.
 Estas células se toman del interior de la blástula en
desarrollo y se pasan a un medio dónde se tratan
con distintos productos con lo que conseguirá que
las células no se diferencien, y se mantienen en
estado embrionario.
 El ADN extraño se introduce en las células madre
de diversas técnicas, posteriormente las células
transfectadas son reintroducidas en una blástula y
ésta reimplantada en una hembra.
3. Transgénesis por genes
clonados en vegetales.
 Primero se requiere clonar en un
vector (plásmido) el gen de interés.
Ese vector debe asegurar la
integración estable de los genes
deseados en los cromosomas de las
células vegetales, y luego mediante
técnicas de cultivo de tejidos
finalmente se obtienen las plantas
transgénicas.
 Las plantas transgénicas obtenidas
hasta la fecha se desarrollan a partir
de diversos métodos de
transformación genética. Un método
muy empleado es el basado en
cepas bacterianas agrobacterium
tumefaciens , este microorganismo
puede transferir ADN proveniente de
uno de sus plasmidos, llamado
plasmido Ti (ADN circular) al genoma
de las células vegetales.
El segundo procedimiento utilizado para la
transformación de plantas es la biobalística. Esta
es una técnica basada en principios físicos que
permite literalmente disparar genes a las plantas.
Para ello, el ácido nucleico que codifica los genes
de interés se deposita en minúsculas partículas
de oro , las que posteriormente son impulsadas
por una fuerte columna de un gas (generalmente
helio), hasta impactar los tejidos blanco de la
especie a transformar. De esta manera, al
penetrar las micropartículas en la célula blanco,
éstas alcanzan el núcleo y depositan el DNA que
portan transformando la célula con un nuevo gen.
4.Transgénesis por
microinyección de cigotos
 Se realiza de la siguiente forma:
 En la primera fase, se aíslan un número grande de óvulos fertilizados.
Se consigue sometiendo a las hembras a un tratamiento hormonal
para provocar una superovulación. La fertilización puede hacerse in
vitro o in vivo.
 En la segunda fase, los cigotos obtenidos se manipulan uno a uno y
con una micropipeta a modo de aguja, se introduce una solución que
contiene ADN.
 En la tercera fase, estos óvulos son reimplantados en hembras que
actuarán como nodrizas permitiendo la gestación hasta término.
 Ejemplos.
 El primer alimento completo desarrollado mediante ingeniería
genética el tomate Flavr Savr. En este tipo de tomate el gen que
codifica la poligalacturonasa no se expresa. Esta enzima degrada
la pectina, lo que ablanda el tomate. Este tomate resiste
aproximadamente 10 días más de lo normal antes de pudrirse y
por lo tanto puede dejarse más tiempo en la planta para madurar y
desarrollar más sabor.
 Se ha invertido un esfuerzo considerable en la
transferencia a otras plantas de cultivo de las
capacidades fijadoras de nitrógeno de las bacterias
asociadas a las legumbres. Los principales genes
responsables de este proceso se han clonado y se
han transferido al genoma de las células de plantas;
sin embargo, las células receptoras no han sido
capaces de fijar el nitrógeno. Si se tuviera éxito en
este proyecto, los beneficios potenciales para
plantas de cultivo tales como el maíz serían
importantes.
 No obstante, existe cierta preocupación en torno al
hecho de que las nuevas variedades fijadoras de
nitrógeno pudieran propagarse de forma
indiscriminada como malas hierbas o alterar el ciclo
de nitrógeno del suelo.
 Los intentos de conferir a las plantas resistencia a las
condiciones ambientales adversas han tenido más éxito. Por
ejemplo, se aislaron de mutantes de Salmonella typhimurium
los genes responsables de la detoxificación de los herbicidas
a base de glifosato, y se introdujeron en células de la planta
del tabaco utilizando el plásmido Ti. Las plantas regeneradas
a partir de las células recombinantes eran resistentes al
herbicida. También se han desarrollado variedades de
algodón y de maíz fértil transgénico resistentes a los
herbicidas. Este hecho tiene una importancia considerable,
ya que numerosas plantas sufren efectos adversos al ser
tratadas con herbicidas. Las plantas de cultivo resistentes no
sufrirían ningún efecto derivado de los agentes químicos
empleados para el control de las malas hierbas, y las
cosechas probablemente serían mucho mayores.
 Se están explorando muchas otras aplicaciones en
agricultura. Un buen ejemplo lo constituye una cepa
alterada de Pseudomonas syringae, que protege a las
plantas de los daños por congelación porque no
puede producir la proteína que induce la formación de
cristales de hielo. Se está invirtiendo un gran esfuerzo
en la protección de las plantas frente a plagas sin el
uso de pesticidas químicos y se está estudiando una
cepa de Pseudomonas fluorescens que contiene el
gen que codifica la toxina de Bacillus thuringiensis .
Esta toxina destruye muchas plagas de insectos.
Finalmente, se están desarrollando cepas de soja,
papa, arroz y otras plantas resistentes frente a virus.
 Se ha utilizado en la producción de proteínas
como la hemoglobina, la somatostatina, la insulina,
la somatotrofina ( hormona del crecimiento). Las
cuales pueden potencialmente ser usadas en el
tratamientos de enfermedades. Llegando a producir
grandes cantidades de cualquier proteína.
 En principio es posible producir grandes cantidades
de una proteína pura si se sintetiza una gran
cantidad de RNAm que codifica dicha proteína.
 Para la producción de RNAm, se utilizan vectores
de expresión, el cual esta diseñado para producir
grandes cantidades de RNAm que será traducido
eficientemente en una proteína en el interior de una
bacteria, levadura, célula de mamífero, a fin de
evitar la elevada síntesis de la proteína extraña
interfiera con el crecimiento de la célula
transfectada.
 El ganado parece estar destinado a desempeñar un papel importante en
la biotecnología de orientación médica mediante el uso de un enfoque
que en ocasiones ha recibido el nombre de ganadería molecular. Los
embriones de cerdo a los que se inyectan genes que codifican la
hemoglobina humana se convierten en cerdos que sintetizan
hemoglobina humana. Los planes actuales consisten en purificar la
hemoglobina y utilizarla como sustituto de la sangre. Un solo cerdo
podría aportar 20 unidades de sangre humana al año. Técnicas
relativamente similares a ésta han producido cabras cuya leche
contiene hasta 3 gramos de activador tisular del plasminógeno
humano por litro. El activador tisular del plasminógeno (TPA) disuelve
los coágulos sanguíneos y se utiliza en el tratamiento de los pacientes
con cardiopatías.

 La somatostatina, una hormona polipeptídica de 14 residuos

sintetizada en el hipotalamo, hoy se produce artificialmente fusionándola
con el gen para la beta-galactosidasa de un plásmido bacteriano.
Introducido en E. coli, este plásmido dirige la síntesis de una proteína
híbrida, que comienza como betagalactosidasa, pero termina como
somatostatina. El bromuro de cianógeno escinde la proteína, liberando
así la hormona intacta.
 Esta hormona es utilizada en el tratamiento de la acromegalia.
 La enzima renina, que se extrae del estómago de terneros y se usa en
la industria láctea para elaborar queso, ha sido producida por
tecnología de DNA recombinante. Más recientemente se ha logrado
inducir la síntesis bacteriana de la enzima celulasa, producida en la
naturaleza por ciertos hongos. Esta enzima convierte a la celulosa, que
no es digerible por la mayoría de los organismos, en glucosa, la
molécula alimenticia de gran importancia.
 Un avance especialmente interesante es el uso de maíz para producir
anticuerpos monoclonales para uso médico. También puede ser posible
utilizar plantas desarrolladas mediante ingeniería genética para
producir vacunas orales. Los ratones manipulados mediante ingeniería
genética pueden en la actualidad producir anticuerpos monoclonales
completamente humanos. También se están desarrollando vacunas
sintéticas (por ejemplo, vacunas contra el paludismo y la rabia)
mediante técnicas recombinantes. Ya se encuentra disponible en el
mercado una vacuna contra la hepatitis B.
 La somatotrofina, la llamada hormona del crecimiento se
requiere para el tratamiento del enanismo hipofisiario, esta se
obtenía de la hipofisis de cadáveres, estando disponible solo en
cantidades limitadas hoy Por ejemplo, se combinó el gen de la
hormona de crecimiento somatotrofina humana con la porción
reguladora de un gen de ratón y se inyectó en óvulos
fecundados de ratón. Los ratones transgénicos resultantes
crecieron hasta el doble del tamaño normal, indicando que el
gen humano se había incorporado al genoma del ratón y estaba
produciendo hormona de crecimiento. Dado que el DNA se
había inyectado en los óvulos, apareció en todas las células,
incluyendo las células germinales, y así pudo ser transmitido a la
generación siguiente.
 Después de la integración, el nuevo gen en el genoma de la
hembra de ratón se transmitió a su progenie. En promedio, los
ratones que expresan el nuevo gen crecen de 2 a 3 veces más
rápido que los ratones que carecen de él y, como adultos, tienen
el doble del tamaño normal
 Aplicaciones industriales
 Entre las aplicaciones industriales se encuentra: la fabricación
de productos proteicos utilizando bacterias, hongos y células de
mamíferos cultivadas como verdaderas fábricas; Se han
desarrollado bacterias que metabolizan petróleo y otros
materiales tóxicos. Estas bacterias pueden construirse
ensamblando los genes catabólicos necesarios en un único
plásmido y a continuación transformando el microorganismo
adecuado.
 Aplicaciones en agricultura
 Recientemente se ha utilizado hormona del crecimiento bovina
para aumentar la producción de leche al menos un 10 %. Es
posible que también puedan mejorarse la resistencia a la
enfermedad y la tolerancia a condiciones ambientales extremas
de los animales de granja.
 Incrementado el sabor
dulce Resistentes a las
heladas

.Prolongado el carácter
crujiente en el momento Resistentes a las
de corte.
plagas
Mejorado la resistencia
a los insectos. Mejorado Conseguidas nuevas
su rendimiento. variedades, sin pepitas.
Mejorado el aroma.
Disminuido el contenido
en cafeína.

Mejorada la resistencia a virus.

Ampliada la vida
Aumentar resistencia a insectos.
media del fruto (más
duradero). Disminuir su capacidad de
absorber aceite durante la fritura.
Obtener variedades más dulces.
Terapia génica
El virus infecta a
la célula

Gen bueno

El gen es
transportado por un
Miles de células con el gen
vector incorporado (corrección
génica)
¿En qué consiste la Terapia Génica?
Obtención de organismos genéticamente idénticos

En el campo de la Ingeniería genética consiste

en aislar y multiplicar un gen, o en general,
un trozo de ADN

En Animales superiores consiste en obtener un

individuo a partir de una célula o de un nucleo
de otro individuo
Conjunto de técnicas nacidas de la Biología molecular
que permiten manipular el genoma de un ser vivo cromosoma
gen

Homo sapiens

Mediante la ingeniería
Escherichia coli genética se pueden introducir genes
en el genoma de un individuo que carece de ellos
 Aislamiento y manipulación de fragmentos
de ADN de un organismo para introducirlo
en otro (ADN recombinante)

Nathans D., Arber W., y Smith H. (premio Nobel de Fisiología

y Medicina en 1978 por el descubrimiento de las enzimas de
restricción y su aplicación en Genética Molecular)
Molécula A Molécula B

Digestión de ambas moléculas con la

misma enzima de restricción, BamHI

Extremos
cohesivos

Mezclar

Tratar con ADN-ligasa

ADN recombinante
En 1983 Kary Mullis da a conocer esta técnica y en 1993 recibió el Premio Nobel de Química por este descubrimiento

Es un proceso cíclico
(cada ciclo consta de 3 pasos)

94ºC desnaturalización (separación

de las dos hebras de ADN)

50ºC Anillamiento de "cebadores"

72ºC copia de cada una de las

hebras de ADN por la ADN
polimerasa

35 ciclos 236= 68 billones de copias

1

Plásmido
Plásmidos
gen de resistencia
a la ampicilina

2 3

Extremos cohesivos

Molécula de ADN recombinante

Plásmido
1

Virus

2 3
Ciclo lisogénico

Ciclo lítico
(f) (g) (h)
Genoma de hongos: 44 millones de pares de bases
Huesped: Escherichia coli
Vector: Bacteriófagos
capacidad: 20 mil pares de bases

Genoma humano: 3000 millones de pares de bases

Huesped: Saccharomyces cerevisiae
Vector: YAC (cromosoma artificial de levadura)
MegaYAC (capacidad: 1 millón de pares de bases)
 ACTTTGTCCACGGCCTAAGCGTTTTTTGCCC
Secuenciación AGTGACTTTGTCCAAC
GTCCAACAGTTACCAAGTGACTTTGTCCAC TTTTGCCC
de genomas AGTGACTTTGTCCA ACGGCCTAAGCGTTTTTTTT

ALINEAMIENTO DE TODAS LAS SECUENCIAS Y RECONSTRUCCIÓN DEL CROMOSOMA

•Detección de mutaciones
Método de diagnóstico rutinario (relación entre enfermedad y mutación puntual)

•Secuenciación de ADNs fósiles

Posibilidad de aislar secuencias de ADN a partir de unas pocas copias (la mayoría
están dañadas o degradadas)

•Diagnóstico de enfermedades genéticas

Diagnóstico prenatal / Diagnóstico preimplantación de enfermedades hereditarias o
determinación del sexo del feto previamente a su implantación en procesos de
fecundación in vitro

•Identificación de especies y control de cruces entre animales

Para descubrir fraudes comerciales, tales como vender carne de una especie más
barata a los precios de otra más cara, o el comercio ilegal de especies en peligro

•Secuenciación de genomas
Conocimiento básico y aplicado de diferentes organismos (incluido el genoma humano)
16 de Febrero de 2001
Celera Genomics

Proyecto genoma humano

La secuencia del genoma es un atajo valioso: ayuda a los
científicos a encontrar los genes más fácil y rápidamente
y sienta las bases para averiguar la función de los genes
identificados

Beneficios médicos tras el conocimiento de la

estructura de cada gen humano

1. Diagnóstico en individuos con riesgo de ser

portadores del gen de alguna enfermedad

2. Marco de trabajo para el desarrollo de

nuevas terapias, además de nuevas
estrategias para la terapia génica

15 de Febrero de 2001
Consorcio público internacional
Obtención de proteínas de interés médico, comercial, etc...
(insulina, hormona del crecimiento, factores de coagulación antes se obtenían
a partir de los tejidos que las producen o fluidos corporales)
Obtención de vacunas recombinantes
(aternativa al uso de organismos patógenos inactivos)
Extracción del ADN
del virus

Integración del
plásmido híbrido
en el núcleo de una
ADN célula de levadura

plásmido
bacteriano

La levadura fabrica las

proteínas víricas
con poder inmunológico

Inyección de proteínas
víricas en un chimpancé
 Mediante ingeniería genética
se construye una sonda de
Diagnóstico de enfermedades de origen genético ADN, marcada (marcaje
fluorescente), con la
secuencia complementaria del
ADN enfermo
ADN sano

ADN enfermo
ADN complementario
del ADN enfermo
Conocimiento previo de
la secuencia de ADN DIAGNÓSTICO
enfermo

Si aparecen bandas
fluorescentes
demuestra que la
persona presenta la
Biochip anomalía
Microarray
¿Hibridación? Renaturalización Desnatura ADN de la
DNAchip
¿No hibridación? del ADN con la lización persona que se
sonda del ADN quiere diagnosticar
fluorescente
Plantas transgénicas Agrobacterium tumefaciens es patógena de plantas.Produce tumores

Agrobacterium
núcleo
Plásmido Ti
inductor de tumores cromosoma
contiene oncogenes
Transgénesis= introducción de (genes onc)
ADN extraño en un genoma, de
modo que se mantenga estable de
forma hereditaria y afecte a
todas las células en los organismos cromosoma
multicelulares.
célula
Ingeniero vegetal
genético
natural tras
sutitución de tumores
genes onc por Proliferación de
genes de hormonas
interés crecimiento. Se
forman tumores en
las zonas de la
lesión
•Resistencia a herbicidas, insectos y enfermedades microbianas
El maíz transgénico de Novartis es resistente al herbicida Basta y también es
resistente al gusano barrenador europeo (contiene el Gen de resistencia a la
toxina Bt de Bacillus thuringiensis) produce su propio insecticida

Problemas:La toxina Bt en las plantas transgénicas tiene propiedades

sustancialmente diferentes a la toxina Bt en su forma natural.
La toxina puede ser transmitida a través de la cadena alimenticia, un
efecto que nunca ha sido observado en la toxina Bt en su forma natural.
Larvas de especies de insectos predadores benéficos (larvas verdes de
crisopa) murieron cuando fueron alimentadas con el gusano barrenador
europeo

Gold rice de Monsanto con color amarillo por los altos niveles de vitamina A

Mejora de la calidad de los productos agrícolas

Producción de aceites modificados

•Síntesis de productos de interés comercial

Anticuerpos animales, interferón, e incluso elementos de un poliéster destinado a la fabricación
de plásticos biodegradables
Transgénesis en animales (por microinyección de zigotos)

Secuencia promotora para

la síntesis de una proteína
Gen humano de la leche

Gen híbrido

humano rata

Ovulos de cerda
fecundados

Desarrollo de una cerda transgénica

Clonación de animales
(TRANSFERENCIA NUCLEAR DE CÉLULAS EMBRIONARIAS)
Clonación de animales
(TRANSFERENCIA DEL NÚCLEO DE UNA CELULA SOMATICA: CÉLULA DIFERENCIADA)
Clonan terneros en EE UU para producir anticuerpos
humanos

efe- Washington - agosto 2002 

Terneros clonados y manipulados genéticamente (fábrica de anticuerpos humanos)

genes para anticuerpos células dérmicas clonación

humanos recombinantes

Objetivo: Tratamiento de enfermedades inmunológicas

Futuro: Tratamiento de una amplia gama de enfermedades ocasionadas por

bacterias y virus, como hepatitis, ántrax (utilizada como arma biológica)
Clonan cerdos destinados a trasplantar sus órganos a
humanos

La empresa escocesa PPL Therapeutics logra

retirar de los cerditos el gen que provoca el
rechazo en transplantes a humanos "alfa 1,3
galactosil transferasa"

Enero 2002. AP Photo/Roanoke Times, Gene Dalton (IDEAL-EFE)

Paso importante en favor del xenotrasplante (transferencia de células u

órganos de una especie a otra)

Ayudará a superar la escasez de órganos humanos para hacer trasplantes de

todo tipo
Un laboratorio de Texas clona al primer animal
doméstico
"Copycat" es el primer gatito nacido mediante clonación"

El experimento abre las puertas de la clonación masiva de

animales domésticos, un fin sin explorar cuya sola
posibilidad había desencadenado ya el almacenamiento
de células de mascotas por parte de sus ricos propietarios

febrero 2002 Universidad College Station (Texas)

El sexto día

El ataque de los clones

La clonación humana ya se
esté intentando de forma
clandestina por varios
La clonación reproductiva no arroja
laboratorios en el mundo
los resultados suficientes, no existen
garantías como para decir 'Vamos a
clonar un ser humano'

Por cada intento de clonación

hay detrás miles de fallos, Para obtener a Dolly: 277 fusiones
abortos y malformaciones de ovocitos con células mamarias, solo
genéticas 29 embriones fueron aptos. De estos
solo uno resultó un éxito
 CREACIÓN DE UN EMBRIÓN ARTIFICIAL
(con células adultas)

-embrión somático-

OBJETIVO ÚLTIMO: TRATAMIENTO de ENFERMEDADES OBJETIVO ÚLTIMO: AUTOTRASPLANTES

(no hay rechazo)
1 Cultivo de blastocisto

Fecundación

2 Eliminación de la capa externa

Embrión temprano

3 Adición de sustancias Fusión de célula somática

que disgregan la masa y ovulo enucleado
celular interna

En caso de existir deficiencias a nivel

genético se puede hacer terápia génica
6 Adición de factores de a nivel de células madre
4 Transferencia de los agregados diferenciación
celulares a un nuevo pozo seleccionados

7 Administración de
células diferenciadas a
tejidos dañados
5 Formación de células
diferenciadas a tejidos
dañados
 Las células madre abren la posibilidad a un nuevo mundo en
las terapias de los trasplantes

Calificada como una técnica "ineficaz e imperfecta" por científicos

como Iam Wilmut, "padre" de la oveja Dolly, la clonación ha encontrado
en las células "madre" su primera razón de ser.

Retos técnicos

1. Las células embrionarias de ratón originan teratomas y

teratocarcinomas en animales adultos

2. Conocimiento de las señales implicadas en el desarrollo y

diferenciación

3. Asegurar la salud a largo plazo de las células a transplantar

(edad biológica de las células)
Declaración Universal de Derecho Humanos y Genoma Humano de la UNESCO (1997),
adoptada en 1998 por la Asamblea General de ONU ( busca un balance entre una
continuación en las investigaciones y la salvaguarda de los derechos humanos)

Frente a los múltiples beneficios de la ingeniería genética

pueden surgir algunos problemas

Problemas sanitarios nuevos microorganismos patógenos,

efectos secundarios de nuevos fármacos de diseño, etc...

Problemas ecológicos desaparición de especies con consecuencias

desconocidas, nuevas contaminaciones debidas a un metabolismo incontrolado, etc...

Problemas sociales y políticos en el campo de la producción industrial, agrícola y

ganadera,
pueden crear diferencias aún más grandes entre países ricos y pobres. El sondeo génico en
personas puede llevar a consecuencias nefastas en la contratación laboral, por ejemplo, y atenta contra
la intimidad a que tiene derecho toda persona (empleo, agencias de seguros, discriminación..).

Problemas éticos y morales Poder conocer y modificar el patrimonio genético humano

puede ser una puerta abierta al eugenismo "Eugenesia: la ciencia del incremento de la felicidad humana
 GLOSARIO
 ADN recombinante: Molécula de ADN formada por combinación de
fragmentos de ADN de orígenes diferentes. La proteína que codifica éste es
una proteína recombinante.
 Bioética: Disciplina científica que estudia los aspectos éticos de la medicina y
la biología en general, así como las relaciones del hombre con los restantes
seres vivos. Se basa en cuatro principios fundamentales: beneficencia,
autonomía, no maleficencia y justicia.
 Biomedicina: Área de investigación que sigue un camino ascendente desde
el fenotipo hasta el genotipo, desde la expresión de un gen en una proteína
hasta el papel que ésta desempeña en una vía metabólica. la Biomedicina
fundamenta su existencia en el soporte que proporciona el conocimiento de
los procesos biológicos a nivel molecular para entender las manifestaciones
clínicas de una patología.
 Biotecnología Moderna: Toda aplicación tecnológica que utilice sistemas
biológicos y organismos vivos o sus derivados para la creación o modificación
de productos o procesos en usos específicos. (Convenio sobre Diversidad
Biológica de las Naciones Unidas, 1992).
 Biotecnología Tradicional: Uso de organismos vivos o de compuestos
obtenidos de organismos vivos para obtener productos de valor para el
hombre. Son las tecnologías y procedimientos fruto del conocimiento y
experimentación realizada de forma colectiva y acumulativa de generación en
generación por agricultores y productores que involucran el uso y
procesamiento de plantas, animales y microorganismos, partes de ellos o sus
derivados, para la obtención de diferentes productos utilizados en la
alimentación, medicina y otros usos culturales
 Células Madre: Célula precursora que sufre división y da lugar a
diferentes linajes de células diferenciadas.
 Células Somáticas: Cualquier célula del cuerpo, excepto los gametos.
 Clonación: El proceso de producción asexual de un grupo de células
(clones), genéticamente idénticas, a partir de un mismo ancestro.
 Clonación Terapéutica o transferencia de núcleo de célula
somática: Procedimiento en que el paciente suministra células
somáticas, se transfiere el núcleo a un ovocito desnucleado, se crea un
“embrión artificial” (embrión somático) hasta la fase de blastocisto, luego
se toman las células de su masa interna, se cultivan como células
madre, y finalmente se diferencian al tipo de célula o tejido para la
terapia celular o el injerto, sin los problemas del rechazo
(autotrasplante).
 Genoma: Conjunto de todos los genes de un organismo y de todo el
patrimonio genético almacenado en el conjunto de su ADN o de sus
cromosomas.
 Genómica: Área de investigación que estudia los genomas completos
de los organismos vivos y que busca comprender la estructura, función y
evolución de los genes para responder a cuestiones biológicas
fundamentales.
 Ingeniería Genética: Conjunto de técnicas utilizadas para modificar el
material genético de un organismo vivo, a través de la introducción de
uno o más genes provenientes de otra especie o de origen artificial o
mediante la manipulación o recombinación genética de sus propios
genes.
 Manipulación Genética: Formación de nuevas combinaciones de
material hereditario por inserción de moléculas de ácido nucleico
obtenidas fuera de la célula, en el interior de cualquier virus, plásmido
bacteriano u otro sistema vector.
 Marcador Genético Molecular: Secuencia de ADN que es utilizada
para identificar una localización particular en un cromosoma de un gen o
característica genotípica o detectar la presencia de un agente infeccioso
(bacteria, hongo o virus).
 Organismos Genéticamente Modificados, OGM: Cualquier organismo
cuyo material genético ha sido modificado de una manera que no se
produce de forma natural en el apareamiento (multiplicación) o en la
recombinación natural, también se pueden producir manipulando las
cruzas
 Organismos Transgénicos: Animal o planta en el que se ha
introducido un gen perteneciente a otra especie. La alteración del
contenido genético tiene como objetivo que la especie modificada
adquiera unas propiedades que por ella misma no posee.
 Proteómica: Área de investigación que busca identificar y
caracterizar un conjunto completo de proteínas y la interacción
entre ellas en una especie dada.
 Terapia Génica: Conjunto de los procesos destinados a la
introducción in vitro o in vivo de un gen normal en células en las
que el mismo gen, anormal, provoca una deficiencia funcional o
es el origen de una enfermedad.
 Transgénesis o Transgenia: Conjunto de procesos que
permiten la transferencia de un gen (que se convierte en
transgen) a un organismo receptor (llamado transgénico), que
generalmente puede transmitirlo a su descendencia. Esta
técnica permite la asociación de genes que no existe en la
naturaleza, saltándose las barreras entre especies y entre
reinos.
 Silenciamiento y Activación de Genes: Proceso que permite
"conectar" o "desconectar" genes, haciendo que ciertos genes
se activen o se silencien para producir o dejar de producir ciertas
proteínas.