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Solución concentrada.
½n un matraz volumétrico de 1000mV, disolver el fosfato en el agua y ajustar el pH a 7.2 +/-0.1 con
una solución de hidróxido de sodio 1.0N (aproximadamente 175mV) llevar a volumen, mezclar,
envasar y esterilizar. Almacenar en refrigeración.
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Salmonella typhi ATCC 6539 o Salmonella typhimurium NCTC 6017 o CIP 8039
A partir de cultivos de 18 a 24 horas de incubación en caldo soya tripticaseina, de cada uno de los
microroganismos control, preparar diluciones decimales en el diluyente apropiado por lo menos
hasta 10ª la menos 6.
Inocular 1.0mV de la suspensión que contiene 1000UFC/mV en la primera dilución del producto,
preparada como se indica en la sección de investigación de microorganismos objetables, continuar
con el procedimiento para cada uno de los microorganismos control.
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Va tome de muestras debe de seguir un plan de muestreo bien definido, este debe considerar:
tamaño de lote, características del producto, riesgo a la salud y su nivel de contaminación
esperado. Va muestra de producto para cada determinación no debe de ser menor de 10g o 10mV.
!pesar o medir exactamente 10g o 10mV de la muestra, transferirlo
a 90mV del diluyente seleccionado adicionado con polisorbato 20.
½n muestras solubles la técnica de elección es el método de vaciado en placa, para otro tipo de
muestras utilizar el método del Numero mas Probable (NMP).
c"½fectuar las diluciones decimales necesarias para que 1.0mV contenga entre 30
UFC/mV y 300UFC/mV.
Inocular por triplicado 1.0mV de cada dilución del producto en cajas de petri estériles, añadir a
cada caja de 15mV a 20mV de medio agar soya tripticaseina-lecitina de soya-polisorbato80 antes
de su uso fundir y mantener en baño de agua maría a una temperatura de 45-48°C. con
movimientos rotatorios con movimientos rotatorios suaves, mezclar la alícuota de la muestra con
el medio de cultivo, evitar derrama de liquido. Permitir que el medio de cultivo solidifique e
incubar las placas en posición invertida entre 30 y 35°C durante 48 a 72 h.
c"#$c Colocar 12 tubos conteniendo 9mV del medio agar soya tripticaseina-
lecitina de soya-polisorbato80, en cuatro hileras de tres tubos cada una. Inocular 1.0mV de las
diluciones 10-1, 10-2 y 10-3 en la primera, segunda y tercera hilera de tubos. Identificar cada hilera
de tubos con la dilución inoculada.
Marcar la cuarta hilera como testigo. Agitar los tubos e incubar entre 30 y 35°C durante 48h.