Sterilizarea

Dr Geta Hilma
Medic primar laborator
Doctor in stiinte medicale
 Definitii
Sterilizarea este procedeul
prin care sint indepartate sau
distruse toate
microorganismele vii de pe
suprafata si din interiorul
unor obiecte.
 Definitii
Dezinfectia= distrugerea
unor grupe de
microorganisme, mai ales
patogene prin metode
chimice.
 Definitii
Asepsia este ansamblul
masurilor luate prin care se
previne contaminarea unor
materiale si organisme, in
primul rind omul, cu
microorganisme.
 Metode de sterilizare
 Pentru sterilizare se folosesc mai ales
metode fizice.
 In alegera metodelor folosite trebuie
sa se tina seama de sensibilitatea
microorganismelor fata de actiunea
unor factori de mediu extern si de
calitatile fizice si chimice ale
materialului supus sterilizarii.
 Metodele fizice
 1. Sterilizarea prin caldura ( uscata
sau umeda )
 Caldura uscata:

 a.Incalzirea la incandescenta

 b.Flambarea

 c.Sterilizarea cu aer supraincalzit

( cuptorul Pasteur = Poupinel)
 Metode fizice
 Caldura umeda:
a Fierberea
b Pasteurizarea
c Tindalizarea
d Sterilixarea cu vapori curenti
e Sterilizarea prin vapori sub presiune
( autoclavare )
 Pregatirea materialelor in vederea
sterilizarii
 Materialele care vor fi sterilizate necesita o
curatire prealabila, spalare, uscare.
 Materialul infectios care a rezultat din
activitate va fi neutralizat prin sterilizare,
indepartat de pe sau din obiectele folosite
si apoi acestea vor fi curatate, spalate,
uscate si sterilizate in vederea unei noi
utilizari.
 Metode de sterilizare prin caldura
uscata
 Incalzirea la incandescenta
 Ex. Ansa bacteriologica se mentine in
flacara pana se inroseste, iar apoi se
lasa sa se raceasca. Se repeta la
fiecare utilizare.
 Flambarea

 Trecerea rapida a obiectelor prin

flacara. Ex. Eprubetele, baloanele
Sterilizarea cu aer supraincalzit
 Se face in cuptorul Pasteur (sau Poupinel)
 Sterilizarea se face la 180°C timp de o
ora, determinind carbonizarea
microorganismelor, forme vegetative sau
spori. Temperatura de 180°C este
necesara deoarece caldura uscata are o
putere redusa de patrundere.
 Se aplica pt. obiecte din sticla si portelan
(nu obiectelor cu parti metalice, a celor
din cauciuc, lichide)
Cuptorul cu aer cald (Poupinel)
Cuptorul Pasteur-Poupinel- Etuva-
Cuptor cu aer cald
 Este metalic, are peretii dublii si este
prevazut cu rafturi in interior
 Intre peretii dublii circula aerul cald

 Incalzirea se face electic

 Monitorizarea temperaturii se face cu

ajutorul termometrelor.
 Metode de sterilizare prin caldura
umeda
 Fierberea= sterilizare incompleta
deoarece nu actioneaza asupra
tuturor sporilor. Timpul de sterilizare
este de minimum 30 min., din
momentul inceperii fierberii. Se
foloseste pentru sterilizarea
instrumentelor ce se utilizeaza
imediat.
 Pasteurizarea
 Pasteurizarea = sterilizare partiala, fiind
distruse doar formele vegetative prin
coagularea proteinelor la temp. sub 100°C.
 Incalzirea se face in baia de apa la 60-65°C
timp de 30 min., 70-75°C timp de 15 min.,
sau 85-90°C citeva secunde urmata de
racirea brusca la 4°C.
 Metoda reduce nr. microorganismelor si
opreste trecerea sporilor in forme vegetative.
 Se utilizeaza in special pt conservarea unor
produse alimentare ( produse lactate,
alcoolice).
Equipment for the high-temperature short-time
pasteurization of milk.
 Tindalizarea
 Tindalizarea=sterilizare fractionata
sau discontinua. Se incalzesc
produsele in baia de apa consecutiv
3-8 zile, timp de 1-3 ore intre 60-
100°C. Intre incalziri materialul este
pastrat la temperatura camerei.
 Metoda este aplicata in special pt
lichidele care peste 100°C se
altereaza ( unele medii de cultura).
 Autoclavarea
 Sterilizare prin vapori de apa sub presiune.
 Caldura umeda sub presiune fiind mai
penetranta, este cea mai sigura metoda de
sterilizare.
 Ridicind presiunea vaporilor de apa la 1
atm., se realizeaza o temp. de 120°C care
in 30 min. distruge atit formele vegetative
cit si sporii. La ½ atm. corespunde o temp.
de 115o C, iar la 2 atm. corespunde o
temp de 134oC.
 Autoclavul
 Este un recipient metalic cu peretii dublii
rezistenti. Este prevazut cu un capac care-
l inchide ermetic. Pe capac sunt 3
dispozitive: manometru, robinetul de
vapori pentru indepartarea aerului si a
vaporilor de apa si supapa de siguranta.
Lateral exista un robinet de scurgere. In
interior este un gratar pe care se pune
recipientul cu obiectele care urmeaza sa
fie sterilizate.
 Autoclavarea
 In autoclav se introduce apa distilata
pana sub nivelul gratarului.
 Se introduc materialele care urmeaza
a se autoclava. Se inchide capacul
strangand suruburile si se
programeaza autoclavarea la
parametrii doriti. Dupa terminarea
autoclavarii nu se deschide capacul
pana cand presiunea nu scade la 0.
 Obiecte care se pot autoclava
 Materialulinfectios
 Obiecte de cauciuc

 Aparate de filtrat

 Casoletele cu materilale folosite in

chirurgie
 Nu se autoclaveaza lichidele care isi
modifica structura la temp. peste
100oC.
Autoclave
 Autoclav
Interior
 Autoclavarea
 In autoclav se sterilizeaza medii de
cultura, material infectios, obiecte de
cauciuc, aparate de filtrat, caserole
cu material chirurgical, etc.
 Nu se sterilizeaza lichide alterabile la
peste 100°C.
 Controlul sterilizarii in autoclav
 Teste chimice
 Se folosesc tuburi din sticla ce contin
substante sub forma de pulbere cu punct
de topire cunoscut, in jur de 120°C
( parachinona, sulf, acid benzoic); se
aseaza in autoclav odata cu obiectele de
sterilizat; daca in autoclav s-a ajuns la
temp. de topire a acestor substante,
dupa deschiderea autoclavului se va
observa ca sint solidificate in bloc.
 Controlul sterilizarii
 Teste biologice
 Se folosesc cuturi sporulate de Bacillus
Stearotermophylus cu care se
impregneaza niste benzi din material
poros. Aceste benzi se introduc in autoclav
odata cu materialul care urmeaza sa fie
autoclavat. Ele se pun dupa terminarea
autoclavrii in mediu de cultura lichid si
daca nu se dezvolta cultura bacteriana
inseamna ca sporii au fost distrusi prin
autoclavare si s-a atins temperatura de
120oC .
 Filtrarea
 Este o sterilizare prin care
microorganismele sint retinute de o
substanta poroasa. Se realizeaza la
temp. camerei si se aplica unor
lichide biologice sau solutii
injectabile, care se altereaza prin
tratare termica.
 Filtre
 Din portelan poros notate dupa
dimensiunile porilor L1, L2, L3
 Din sticla notate dupa dimensiunea
porilor G0, G1...G5
 Filtre Seitz din azbest si celuloza

 Membrane filtrante din nitroceluloza,

acetat de celuloza.
Filtru de apa
Sistem de filtrare
Lampa de ultraviolete
 Sterilizarea prin radiatii ionizante
 Cele mai penetrante si microbicide radiatii
ionizante sint razele gama.
 Razele gama se obtin dintr-o sursa
radioactiva de cobalt-60 sau cesiu-137, dar
materialul sterilizat nu devine radioactiv.
 Aceasta metoda se foloseste pt sterilizarea la
rece, in ambalaje, pt. produse
medicamentoase, instrumentar medical si in
general pt. materiale degradabile la caldura.
 Obs.
 Una dintre cele mai severe limitari in cazul
sterilizarii cu oxid de etilena este cea data de
concentratia maxima de oxid de etilena (EtO)
rezidual in materialul obiectului sterilizat,
stiut fiind ca acesta este un produs
cancerigen.
 In antiteza, sterilizarea cu radiatii ionizante
nu produce radioactivitate in materialul
iradiat si nici reziduuri chimice, care sa
necesite operatii suplimentare (aerare)
inainte de punerea pe piata a produsului.
 Substante antiseptice si
dezinfectante
 Ethanol (50-70%)  Antiseptic used on skin

 Antiseptic used on skin

 Isopropanol (50-70%)

 Formaldehyde (8%)  Disinfectant, kills

endospores
 Tincture of Iodine (2%
I2  Antiseptic used on skin
in 70% alcohol)

 Chlorine (Cl2) gas  Desinfect drinking water;

general disinfectant
 Substante antiseptice
 Silver nitrate (AgNO3)   General antiseptic and used in
the eyes of newborns
 Disinfectant, although
 Mercuric chloride occasionally used as an
antiseptic on skin
 Detergents (e.g.
quaternary  Skin antiseptics and
disinfectants
ammonium compounds)
 Antiseptics at low
 Phenolic compounds (e.g. concentrations;
carbolic disinfectants at high
acid, lysol, hexylresorcinol, concentrations
hexachlorophene)
 Ethylene oxide gas   Disinfectant used to sterilize
heat-sensitive objects such as
rubber and plastics
 Ozone  Purification of water
Controlul sterilizarii suprafetelor
Materiale utilizate la controlul
sterilizarii