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GelRed Nucleic Acid Gel Stain, 10.

000X in water
Número de Catálogo: 41003 (0,5 ml) ou 41003-UNI (0,4 ml)

Solução 1x ou 3x concentrada (estável por até 1 ano à temperatura ambiente). Evite exposição
prolongada à luz. Se a solução for armazenada durante longos períodos à +4ºC, há probabilidade
de formação de precipitados. Caso isto ocorra, aqueça a solução em banho-maria durante 2
minutos entre 45-50ºC.

Coloração pré-PCR (GelRed adicionado diretamente no gel)


Solução 1x concentrada
Obs: Este protocolo não é recomendado para géis de poliacrilamida.

1. Prepare o gel de agarose com seu protocolo padrão de laboratório.

2. Dilua o GelRed 10.000x diretamente na solução de agarose na proporção 1:10.000 (5 ul de


GelRed concentrado para 50 ml da solução de agarose).

3. Certifique-se de homogeneizar completamente a solução.

4. Permita a solidificação e após a eletroforese efetue a visualização em transiluminador (302-


312 nm), o mesmo utilizado para o brometo de etídeo.

De acordo com a necessidade do laboratório, alguns usuários vêm utilizando esta solução com eficiência até
na concentração mínima de 0,3x. A diluição excessiva pode acarretar atraso na migração e formação dos
tradicionais “sorrisos”. Não é uma diluição recomendada pela Biotium.

Coloração pós-PCR
Solução 3x concentrada
Obs: Este protocolo é recomendado para géis de poliacrilamida.

Após a eletroforese o gel deve ser banhado em solução 3x preparada a partir da solução estoque
de GelRed 10.000x diluída em NaCl 0,1M.

Modo de preparo:

1. Adicione 15 ul d GelRed 10,000X em 45 mL H2O

2. Acrescente 5 ml de NaCl 1M;

3. Deposite o gel de agarose em uma cuba de polipropileno e adicione a solução contendo GelRed
diluído;

4. Aguarde 30 minutos de incubação sob agitação leve e constante. Efetue a leitura em


transiluminador convencional;

5. Para géis de poliacrilamida 3,5-10% recomenda-se aguardar 30-60 minutos antes da


visualização;

6. Armazenar a solução protegendo-a da luz. Esta solução pode ser reaproveitada no máximo 3
vezes.

Protocolo padronizado por clientes, não recomendado pela Biotium.

PROTOCOLO ECONÔMICO para corar bandas em géis de agarose e poliacrilamida

1. Diluir uma parte de GelRed 10.000X em 500 partes água livre de contaminações (1:500).
Exemplo: 1ul de GelRed em 500ul de água livre de contaminações.

2. Pipetar 1ul do GelRed diluído diretamente na amostra (inclusive no marcador).


Exemplo: 1ul de GelRed, 2ul de tampão de carregamento e 2ul de DNA.

3. Aplicar as amostras no gel e perfazer a eletroforese com seu protocolo padrão.

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