03.04.

2008

DEFINIłIE, ÎNCADRARE

GENUL BACILLUS
germeni ubicuitari

sporulaŃi → rezistenŃă crescută în mediu

se găsesc
 în sol (principalul rezervor),
 în apa mării,
 în apa dulce,
 pe plante

DEFINIłIE, ÎNCADRARE DEFINIłIE, ÎNCADRARE

bacili lungi,

sporulati,

Se găsesc de asemenea

Gram pozitivi,
 în produsele alimentare
cei mai mulŃi mobili,

 în produsele medicamentoase
cu cili peritrichi,

cu sau fără capsulă

chiar şi în cele care poartă inscripŃia „sterilizate”

aerobi, facultativ anaerobi,

datorită termorezistenŃei sporilor bacterieni.

oxidază pozitivi

majoritatea catalază pozitivi

DEFINIłIE, ÎNCADRARE DEFINIłIE, ÎNCADRARE

familia Bacillaceae, Genul Bacillus
mod artificial - convenabil de organizare a

 heterogen, membrilor genului Bacillus
 număr foarte mare de specii (cel puŃin 36),
 în patologie sunt mai frecvent implicate  încadrare în grupe ecofiziologice cum ar fi:

B. anthracis,

B. cereus

B. subtilis.

1
 03.04.2008

DEFINIłIE, ÎNCADRARE DEFINIłIE, ÎNCADRARE

specii alcalifile:
specii halofile:

 B.alcalophilus,  B.pantothenticus,

 B.pasteurii  B.pasteurii

 au pH-ul optim de dezvoltare de 8 sau pentru

unele tulpini cresc la concentraŃii de 10% NaCl;
unele tulpini chiar de 11;

DEFINIłIE, ÎNCADRARE DEFINIłIE, ÎNCADRARE

specii producătoare de antibiotice:

specii psichrofile:
specii termofile:
B.globisporus, B. acidocaldarius,
 

B.brevis
 B.insolitus, B.marinus,  B. stearothermophilus;
B.subtilis
 gramicidina
 B.megaterium,  polimixina
 tyrotricina
 B.polymyxa;
limita temperaturii maxime de  subtilina
65°C
B.cereus  mycobacilina

specii care reduc nitriŃii în  cerexin
nitraŃi:

B.pumilus

specii fixatoare de azot:  zwittermicina
 pumulina

B.azotoformans,  B.macerans,
B.licheniformis

B.cereus, B.polymyxa;

B.laterosporus
  bacitracina

B.licheniformis,  laterosporina

B.polymyxa

B.pasteurii,
 polimixina

B.stearothermophilus;
 colistina

DEFINIłIE, ÎNCADRARE DEFINIłIE, ÎNCADRARE

Antibioticele secretate de diferite specii din genul Bacillus au specii patogene pentru insecte şi larve:
un spectru larg de activitate antimicrobiană. :

pentru albine

sunt patogeni invazivi,

active pe bacterii Gram
eficienŃă asupra bacteriilor  B.larvae,
pozitive Gram negative  B.popilliae,
sporulează în larvele
 bacitracina,  colistina  B.lentimorbis, insectelor,
 pumulina,  polimixina  B. thuringiensis
sunt catalază negativi,
 laterosporina,
 gramicidina
antifungice
nu cresc în bulion nutritiv,

pentru cărăbuşi, gândaci
 mycobacilina
necesită tiamină ca factor
 zwittermicina  B.popilliae
 B.lentimorbis de creştere.
Producerea de antibiotic este însoŃită de oprirea
creşterii formei vegetative şi a sporulării;

2
 03.04.2008

DEFINIłIE, ÎNCADRARE DEFINIłIE, ÎNCADRARE

specii patogene pentru insecte şi larve: specii patogene pentru animale:

B.thuringiensis B. anthracis
 produce cristale proteice parasporale toxice pentru
Lepidoptera, B.cereus
 poate sporula

B.alvei,
B.circulans,

în larvele insectelor

pe plante sau în sol
B.megaterium,
B.brevis,

B.coagulans,
B.licheniformis,

Sporii unor specii entomo-patogene sunt utilizaŃi
B.laterosporus,
B.macerans,
sub formă de pulbere care se răspândeşte pe
suprafaŃa apelor stătătoare pentru a distruge larvele
B.subtilis,
B. thuringiensis,
de ŃânŃari.
B.sphaericus,
B.pumilus

DEFINIłIE, ÎNCADRARE

Genul Bacillus - două specii cu importanŃă BACILLUS ANTHRACIS

medicală:
 B. anthracis, agentul cauzal al antraxului,
 B. cereus, agentul cauzal al unor toxiinfecŃii alimentare

Celelalte specii de Bacillus

 = antracoizi
 pot cauza o mare varietate de procese infecŃioase
 în prezent recunoscute tot mai des ca patogeni umani

Habitat Caractere morfotinctoriale

bacili Gram pozitivi,

agentul etiologic al unei zoonoze care afectează
mari: 3-5 µm lungime/1-1,2 µm grosime,
ierbivorele (vite, oi, cai, catâri, capre)

cu capetele tăiate drept sau uşor concave,

se găseşte în Ńesuturile şi umorile animalelor
bolnave.
imobili

eliminat în mediu prin dejecŃiile acestora

pe sol – condiŃii nefavorabile – sporulează -
supravieŃuire zeci de ani

sporii - extrem de rezistenŃi

rezervorul principal pentru B. anthracis - reprezentat
de sol
Source Library:PHIL, 1977

3
 03.04.2008

Caractere morfotinctoriale

frotiuri din Ńesuturile animalelor bolnave:
 dispuşi în lanŃuri scurte
 în perechi înconjuraŃi de o capsulă unică

Anthrax due to Bacillus

anthracis (blood smear) © McFadyean's reaction showing short chains of Bacillus anthracis
Bristol Biomedical Image
cells lying among amorphous, disintegrated capsular material. White
Archive, University of Bristol.
blood cells can also be seen. (TODAR MYCROBIOLOGY)

Caractere morfotinctoriale

frotiuri din cultură bacilii
 dispuşi în lanŃuri paralele
 sunt sporulaŃi

COLORAłIE NEGATIVĂ – IMUNOFLUORESCENłĂ; 1000X

TUŞ DE CHINA; 1000X

Bacillus anthracis - capsula TODAR MYCROBIOLOGY Source Library:PHIL, 1977

Col Gram, B. anthracis de pe mediu lichid. (x1000)

Caractere morfotinctoriale
 sporul

format numai în prezenŃa oxigenului

are diametrul egal sau mai mic decât grosimea bacilului

este oval

este dispus central

Bacillus species Malachite

Green spore stain.
(2002)

Source Library:PHIL

4
 03.04.2008

Bacillus anthracis. Gram stain. 1500X.

capete retezate; endospori elipsoizi, centrali, necoloraŃi
Caractere de cultură

bacterie aerobă facultativ anaerobă,

nepretenŃioasă nutritiv,

se dezvoltă pe medii simple,

la temperatura 35-37°C.

Limitele de temperatură la care se poate dezvolta

sunt foarte largi: 12-40°C.

TODAR

Sporularea are loc la temperatura camerei.
MYCEOBIOLOGY

Caractere de cultură Colonies of Bacillus cereus on the left; colonies of Bacillus anthracis on the right.
B. cereus colonies are larger, more mucoid, and this strain exhibits a slight zone of
hemolysis on blood agar. Todar's Online Tex tbook of Bacteriology

mediul cu agar formează
 colonii relativ mari (2-3 mm diametru),

 alb-cenuşii,

 de tip R, rugoase.

Examinate la stereomicroscop,
 periferia coloniilor are aspect de şuviŃe de păr
împleti - „cap de Medusa”.

geloza sânge - nu produce hemoliză!!

În bulion, lasă mediul limpede şi formează flocoane

care se depun la fundul eprubetei.

B. anthracis pe G-sg.
Coloniile sunt mari, neregulate, opace şi granulare, cu
Impresiunea unei colonii este
margini neregulate. Aceste caracteristici sunt valabile pentru colorată cu albastru de metilen
multe alte specii din Genul Bacillus
„cap de Medusa”

(x1000)

5
 03.04.2008

Caractere biochimice Caractere biochimice

catalază pozitivă
produce acetil-metil-carbinol (reacŃia Vogues-Proskauer

pozitivă)

are activitate proteolitică
 proprietate utilă în clasificarea speciilor de Bacillus

lichefiază gelatina

nu produce urează

reduce nitraŃii

fermentează unele zaharuri

hidrolizează cazeina
 glucoza

este indol negativ
 maltoza
 zaharoza

RezistenŃa faŃă de factori fizici şi chimici RezistenŃa faŃă de factori fizici şi chimici

RezistenŃa formelor vegetative este similară cu a celorlalte
supravieŃuiesc câteva săptămâni în dezinfectantele pe
bacterii bază de fenol
 distruse de exemplu în 30 minute la 60°C c ăldură umedă

la temperaturi de -5°C pot rezista pân ă la 10 ani

Sporii sunt deosebit de rezistenŃi la acŃiunea
s-a reuşit germinarea sporilor păstraŃi la întuneric şi la
 acizilor, temperatura camerei după mai mult de 30 ani
 dezinfectantelor,

sunt distruşi la temperatura de fierbere în circa 10 minute
 radiaŃiilor,
şi prin autoclavare
 temperaturilor înalte

rămân viabili şi după fierbere timp de câteva ore
în frotiuri fixate şi colorate nu îşi pierd viabilitatea

Structură antigenică Structură antigenică

Bacillus anthracis posedă diverse structuri antigenice:
Bacillus anthracis posedă diverse structuri antigenice:
1. componente ale complexului exotoxinic (componenta B):
• antigenul capsular polipeptidic (antigenul K):

Exotoxina  toate tulpinile virulente formează un singur tip de antigen

 determinată plasmidic (plasmidul pOX1) polipeptidic capsular (poli-D-glutamat)
 constă dintr-un amestec de trei proteine imunogene:
 producerea antigenului capsular este codificată de plasmida
 componenta A a toxinei pOX2 a cărei transfer la tulpini necapsulate este posibil prin
 factorul edematos
 şi factorul letal transducŃie

 componenta B = antigenul protectiv, capabil să inducă

producerea de anticorpi.

6
 03.04.2008

Structură antigenică Răspuns imun

apariŃia de anticorpi faŃă de

Bacillus anthracis posedă diverse structuri antigenice:
• antigenul somatic polizaharidic din peretele celular  componenta B a exotoxinei
 responsabil de reacŃia de precipitare în inel
anticorpi care împiedică endocitarea factorilor
 care are loc în prezenŃa anticorpilor specifici (reacŃia edematogen şi letal
Ascoli).

este suprimată activitatea toxică a complexului

 polipeptidul capsular

Caractere de patogenitate Caractere de patogenitate

patogen prin

Formarea capsulei
 VirulenŃă – capsula
 este codificată plasmidic (plasmidul pOX2);

în primele faze ale constituirii focarului infecŃios
 are proprietăŃi antifagocitare,

 Toxigeneză - exotoxina cărbunoasă  protejează microorganismul de anticorpii litici

 în fazele avansate şi terminale ale bolii

Componenta A
Caractere de patogenitate

 alcătuită din 2 părŃi cu efecte distincte:

exotoxina cărbunoasă  factorul edematogen (FE; factorul I)
 producerea exotoxinei este mediată de o plasmidă  o adenilat-ciclază a cărei efecte biologice include
termolabilă, pOX1
 edemul local
 2 componente
 şi inhibiŃia funcŃiilor polimorfonuclearelor,

A
 procese mediate de AMPc.

B
 factorul letal (FL; factorul III)
 responsabil de efectele letale ale exotoxinei.

7
 03.04.2008

Componenta B = factorul (antigenul) protector (AP; Patogenie şi patologie specifică

factorul II).
 antigen protector pentru că induce experimental
antrax, cărbune sau popular dalac
formarea de anticorpi antitoxici protectori la cobai
 iniŃiază pătrunderea factorului letal şi a celui
Boala la animal
edematogen în celule ceea ce determină moartea  afectează

mamiferele ierbivore
acestora, mecanismul fiind însă necunoscut.
unele păsări
 se manifestă ca

septicemie rapid mortală

Pierderea plasmidelor pOX1 sau pOX2 care codifică
cu edem hemoragic al mucoaselor
producerea exotoxinei respectiv formarea capsulei atrage
după sine pierderea patogenităŃii.
cu eliminarea de sânge negru prin orificiile naturale

Patogenie şi patologie specifică Antrax cutanat

la om, în funcŃie de localizarea manifestărilor
forma cea mai frecventă la om

cunoscută sub numele de "pustulă malignă"
clinice vorbim despre:

apare după contactul direct cu
 Antrax cutanat
 animalul bolnav

 obiecte contaminate
 Antrax respirator

BOALĂ CU CARACTER PROFESIONAL
 Antrax digestiv  cele mai expuse - persoanele care vin în contact cu
animalele bolnave:

fermieri,
 Forma septicemică
veterinari,

personalul din abatoare etc.

Antrax cutanat Antrax cutanat

SoluŃie de continuitate a tegumentului de pe
incubaŃie de 2-5 zile
 faŃă,

locul inoculării - papulă care se transformă în veziculă
 gât,

 membre superioare
lichidul din veziculă

 la hamali pe faŃa posterioară a toracelui

pătrund sporii bacteriei, germinează, celulele vegetative se
multiplică rezultând un edem gelatinos local
 iniŃial seros, transparent
 devine hemoragic

vezicula se sparge

crustă de culoare neagră, înconjurată de o zonă de edem
considerabilă

periferia crustei este încojurată de o coroană de noi vezicule cu
conŃinut clar sau hemoragic care vor avea aceeaşi evoluŃie

în această fază boala este curabilă.

8
 03.04.2008

Antrax cutanat Antrax pulmonar

Netratată
datorat inhalării de praf conŃinând spori de Bacillus
 infecŃia poate disemina
anthracis

pe cale limfatică

pneumopatie acută adesea mortală
 iniŃial simptome uşoare şi nespecifice

sau sanguină

similare cu cele ale unei infecŃii de căi aeriene

determinând septicemie mortală
superioare
 bacteria este prezentă în toate organele mai ales în  după 1-3 zile apar semne de insuficienŃă respiratorie
splină care este negricioasă şi plină de bacili acută

febră,

dispnee,

hipoxie,

Există şi forme grave de antrax cutanat în care predomină

hipotensiune
edemul care deformează complet zona anatomică interesată,
forme numite „edem malign”.  evoluează spre septicemie, meningită, edem pulmonar
hemoragic, decesul putând surveni în 24 de ore.

Antrax pulmonar Antrax gastro-intestinal

BOALĂ PROFESIONALĂ
 lucrătorii din industria lânii, a pâslei, a pielăriei,
 la cei care confecŃionează obiecte din os
 la cei care folosesc praful de oase pentru obŃinerea
cleiului sau a gelatinei

datorat consumului de carne insuficient preparată termic,
provenită de la un animal infectat.

foarte rar astăzi fiind mai frecventă în zonele deşertice.

analog antraxului cutanat doar că leziunile apar pe mucoasa
intestinală

Manifestările clinice sunt variabile
 febră,

 greaŃă,

 vărsături,

Răspândirea sporilor prin inhalare şi gravitatea  dureri abdominale,
antraxului pulmonar au făcut din Bacillus  diaree sanguinolentă cu deshidratare
anthracis o armă bacteriologică de temut.  uneori ascită formată brusc

Rata mortalităŃii este foarte crescută în această formă de boală.

Forma septicemică Tratament

poate fi
sensibil la o gamă largă de antibiotice:
 penicilină,
 primitivă
 eritromicină,

 tetraciclină.
 sau o complicaŃie a uneia din formele clinice

este bine să ne asigurăm că tulpina izolată nu
enumerate mai sus.
este producătoare de β-lactamază!

cloramfenicolul poate fi de asemenea util în terapia
acestei afecŃiuni.

Este însoŃită de afectare meningeală, apare mai

Antibioticoterapia trebuie să fie precoce şi asociată în
frecvent la imunodeprimaŃi şi este mortală. formele severe cu serul anticărbunos.

9
 03.04.2008

Profilaxie Profilaxie

pot fi imunizaŃi cu un vaccin preparat din antigenul capsular

LA ANIMALE protectiv:
 lucrătorii din sectorul veterinar
 vaccinare cu vaccinuri atenuate
 din alte sectoare cu risc crescut pentru antrax

 sacrificarea animalelor bolnave

importantă aplicarea măsurilor de igienă în aceste locuri de muncă,
 cadavrele de animale moarte din cauza infecŃiei pentru a păstra incidenŃa bolii la un nivel scăzut.

cărbunoase se îngroapă la mare adâncime, acoperite
În spital - suficiente măsurile standard întrucât nu există transmitere
inter-umană a infecŃiei cărbunoase.
cu var nestins sau mai bine se incinerează.

Un vaccin pentru administrare umană este disponibil în SUA unde

este produs în cantităŃi mici administrarea lui fiind limitată şi totodată
obligatorie pentru soldaŃi.

Cutaneous Anthrax
DOD Anthrax Program Development of cutaneous anhtrax; CDC

Cutaneous anthrax
CDC

Anthrax skin lesion on face of man CDC

10
 03.04.2008

FEMEIE, 53 ANI, angajată de 10 ani la departamentul de toarcere al fabricii de

prelucrare al părului de capră
antrax cutanat, ziua a 4-a
CDC
Anthrax skin lesion on neck of man CDC

lesion as seen on 5th day CDC

11