DGEST ITM SEP

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MORELIA

“José María Morelos y Pavón”

INGENIERÍA BIOQUÍMICA

5to SEMESTRE

MARÍA CRISTINA VIEYRA BRAVO

No control: 09120036

1
Contenido
INTRODUCCIÓN .............................................................................................................................. 3

Historia ............................................................................................................................................ 4

Clasificación de los métodos cromatográfico ................................................................................. 6

Aplicación de la Cromatografía ...................................................................................................... 7

Clasificación de la cromatografía .................................................................................................... 7

Cromatografía en columna abierta .............................................................................................. 7

Cromatografía en columna cerrada ............................................................................................. 7

Cromatografía en columna cerrada ............................................................................................. 8

Bases de la Cromatografía............................................................................................................... 8

DETECTORES UTILIZADOS EN LOS CROMATÓGRAFOS ....................................................... 9

DETECTORES ............................................................................................................................... 9

Las características de un detector ideal son: ............................................................................. 10

Clasificación de los detectores .................................................................................................. 10

Cromatografía de Gases .................................................................................................................... 12

Detector de Cromatografía de Gases ............................................................................................. 13

Cromatografía de líquidos de alta eficiencia ..................................................................................... 14

Detectores de Cromatografía de líquidos ...................................................................................... 15

Cromatografía con fluidos supercríticos ........................................................................................... 16

Características de los fluidos supercríticos ............................................................................... 16

Detectores de los fluidos supercríticos .......................................................................................... 17

APLICACIÓN Y DESEMPEÑO CIENTÍFICO DE LA CROMATOGRAFÍA .............................. 18

2
 INTRODUCCIÓN

La Cromatografía, es una técnica de separación, empleada principalmente en el análisis

químico. Sin embargo, en cierto punto, también se utiliza con fines de preparación, especialmente
para el aislamiento de cantidades relativamente pequeñas de materiales, básicamente es una técnica
de gran espectro, la cual es aplicable en todas las ranas de la ciencias. La cromatografía es
probablemente la técnica más potente y versátil disponible para el analista moderno. En un único
procedimiento se puede separar una mezcla en sus componentes individuales y al mismo tiempo
proporcionar una estimación cuantitativa de cada componente. Las muestras pueden ser un gas,
líquido o sólido y pueden variar en complejidad desde una simple mezcla de dos enantiómeros a
una mezcla de varios componentes que contienen diferentes especies químicas. El empleo de la
técnica para la separación de diferentes muestras permite y abre paso a un avance más fuerte dentro
de todos los estudios.

La Cromatografía implica una muestra (o extracto de la muestra) la cual se disuelve en una fase
móvil (que puede ser un gas, un líquido o un fluido supercrítico). La muestra se desplaza en una fase
móvil, y esta fase móvil se hace pasar a través de una fase estacionaria con la que es inmiscible, y
que se fija a una columna o a una superficie solida. Las dos fases se eligen de tal forma, que los
componentes de la muestra se distribuyen de modos distintos entre la fase móvil y la fase
estacionaria, es decir se eligen de modo que los componentes de la muestra tienen diferentes
solubilidades en cada fase. Un componente que es muy soluble en la fase estacionaria se tarda más
en llegar a través de él que un componente que no es muy soluble en la fase estacionaria, pero muy
soluble en la fase móvil. Como resultado de estas diferencias en la movilidad, los componentes de
la muestra se separan unos de otros a medida que viajan a través de la fase estacionaria.

Un detector de cromatografía es un dispositivo que localiza en las dimensiones de espacio y

tiempo, las posiciones de los componentes de una mezcla que ha sido sometido a un proceso
cromatográfico y, por tanto, nos permite apreciar la naturaleza de la separación. Esto es
consecuencia de las distintas movilidades de los compuestos; al tener los componentes separados en
bandas o zonas nos es posible el análisis cuantitativo y/o cualitativo de una especie a estudiar o
investigar (es decir de nuestro analito).

3
El detector, además de ser un dispositivo de apoyo esencial para el cromatógrafo, también ha
desempeñado un papel fundamental en el desarrollo de la técnica en su conjunto. Ha habido una
estrecha relación entre el desarrollo de la columna y el desarrollo del detector. La necesidad de
desarrollar una mayor eficiencia en la columna ha exigido una mayor sensibilidad por parte del
detector, provocado así el desarrollo de detectores más sensibles. Y a su vez, los detectores más
sensibles han favorecido la mejora de las características de la columna. De hecho, el rápido
desarrollo de la Cromatografía de Gases en la década de 1950 fue posible por el hecho o la rápida
introducción de detectores de alta sensibilidad lineal.

Historia

El primer científico en reconocer la cromatografía como un método eficiente de la separación fue el

botánico ruso Tswett1, que utiliza una forma simple de cromatografía líquido-sólido para separar
una serie de pigmentos vegetales. Empleando una técnica para la separación de pigmentos
vegetales, tales como clorofila y xantofilas, haciendo pasar disoluciones de esotos compuestos a
través de una columna de vidiro rellena con carbonato de calsio finamente dividido. Las especies
separadas a parecían como bandas coloreadas en la columna, lo cque justifica el nombre que elijio
para el método (del griego chroma que significa <<color>>, graphein que significa
<<escribir>>.)2. Aunque el color no tiene mucho que ver con la cromatografía moderna, el nombre
ha persistido y, a pesar de su irrelevancia, se utiliza para todas las técnicas de separación que
emplean un una fase móvil y una fase estacionaria.

Aparato que Tswett utilizo para la separación

cromatografica
1 Archer JP Martin (1952). "El desarrollo de la cromatografía de partición", Conferencia Nobel, 12 de diciembre de 1952. Conferencias
Nobel, de Química 1942-1962 , Elsevier Publishing Company, Amsterdam, 1964.
2 Skoog Holler Nieman, “Principios de Análisis Instrumental”, Mc Graw Hill/Intermericana de España ed, S. A. U., pag. 730, 2001

4
Lo descrito por Tswett fue ignorado en gran medida por un largo tiempo y no fue hasta que en
1952, los británicos Martin y Synge reciben el premio Nobel de química “por su invención de la
cromatografía de partición”. Aunque la contribución de Martin y Synge fue esencial para
comprender las bases teóricas de la cromatografía, por aquel entonces dicha técnica distaba mucho
de ser una novedad.
Martin y Synge recibieron en 1952 el premio Nobel de química por la invención de la cromatografía
de partición. El trabajo de Martin y Synge mereció el siguiente comentario en la prestigiosa revista
científica Nature

“Los métodos desarrollados por Martin y Synge son probablemente únicos en

virtud de su sencillez y elegancia de concepción y ejecución, y también por el
extenso alcance de su aplicación. Es probable que su invención sea considerada
por las futuras generaciones como una de las más importantes piedras angulares
en el desarrollo de las ciencias químicas”.

En su artículo, se recomienda sustituir la fase móvil líquida por un gas adecuado, y asi la
transferencia de la muestra entre las dos fases sería más rápido, y proporcionaría las separaciones
más eficientes. De esta manera, el concepto de gas cromatografía fue creado.

A finales de los años 50 y principio de los 60 se propone una nueva modalidad de separación
cromatográfica basada en el uso de geles porosos como relleno de la columna, que permite
separaciones en función del tamaño de los solutos: la cromatografía de exclusión molecular,
desarrollada por Jerker Olof Porath en la Universidad de Upsala y Per Flodin en los laboratorios de
la empresa farmacéutica Pharmacia de la misma ciudad sueca.

A partir de los años 80 comenzaron a emplearse los fluidos supercríticos (fluidos sometidos a
condiciones de presión y temperatura por encima de su punto crítico, con lo que adquieren un
estado diferente del líquido y del gaseoso) con fines analíticos. La cromatografía de fluidos
supercríticos presenta algunas ventajas definidas sobre la cromatografía de gases y la cromatografía
de líquidos de alta resolución, pero su uso no ha llegado a generalizarse.3

Hoy en día, la cromatografía es una técnica extremadamente versátil, ya que permite la separación
de sustancias volátiles (por cromatografía de gases), productos químicos volátiles y en materiales de
peso molecular muy alto (incluyendo biopolímeros).

3
Guillermo López Cueto, “Química Analítica y Premio Nobel”, Universidad de Alicante.

5
 Clasificación de los métodos cromatográfico

Los métodos de cromatografía se pueden clasificar de dos medos distintos, los cuales son:
 Cromatografía en columna, se basa en que la fase estacionaria y móvil se pongan en
contacto, esto por medio de un tubo estrecho que contiene la fase estacionaria a través de la
cual se hace pasar la fase móvil por presión.
 Cromatografía en plano, aquí la fase estacionaria se fija a una placa plana o a loa
intersticios de un papel; en este caso la fase móvil se desplaza a tevés de la fase estacionaria
por capilaridad o por gravedad.
A continuación se presenta una tabla de la clasificación de los métodos cromatográfico en columna,
esta tabla tiene el fin de que resumir la clasificación de la cromatografía en columna, y de forma
breve ver sus métodos y su fundamento de función.

Clasificación General Método especifico Fase estacionaria Tipo de equilibrio

Liquido-liquido o Liquido absorbido Distribución entre

CROMATOGRAFIA DE
LIQUIDOS
(LC) (Fase móvil: liquida)
CROMATOGRAFIA DE
GASES
(GC) (Fase móvil: gas)
reparto sobre un solido líquidos inmiscibles
Especie orgánica Distribución entre el
Líquido- fase unida
enlazada a una liquido y la superficie
químicamente
superficie sólida enlazada
Líquido-solido, o
Sólido Absorción
absorción
Resina de intercambio
Intercambio iónico Intercambio iónico
iónico
Líquido en los
Exclusión por
intersticios de un Distribución/exclusión
tamaño
solido polimérico
Líquido absorbido Distribución entre un
Gas-liquido
sobre un sólido gas y un líquido
Especie orgánicas Distribución entre el
Gas-fase unida
enlazadas a una líquido y la superficie
químicamente
superficie sólido enlazada
Gas-sólida Solido Absorción

CROMATOGRAFIA DE
Especies orgánicas Distribución entre el
FLUIDOS SUPERCRITICOS
enlazadas a una fluido y la superficie
(SFC) (Fase móvil: fluido
supercrítico)
superficie sólida enlazada

6
 Aplicación de la Cromatografía

Es por medio de la cromatografía se llegan a separa especies

químicas estrechamente relacionadas, esta gran propiedad
también suele venir a acompañada del hecho que nos indica de
que especies se está tratando, o bien nos guía al rededor de que
compuesto se trata; es decir tiene un carácter cualitativo. Y con
el avance de la tecnología en la última década, existen
mecanismos e instrumentos que nos permiten con gran
precisión saber de que compuesto hablamos, pero también nos
indica en que proporciones encontramos a este.

Su empleo presenta notables ventajas:

1. Es sencilla, rápida y no requiere aparatos complicados.
2. Abarca escalas microanalíticas hasta escalas industriales.
3. Es una técnica poco o nada destructiva que puede aplicarse a sustancias lábiles.

Clasificación de la cromatografía

Cromatografía en columna abierta

Cromatografía en columna cerrada

7
Cromatografía en columna cerrada

Bases de la Cromatografía

La cromatografía se vasa en in conjunto de

técnicas asociadas al principio de retención
selectiva.
Permite separa los distintos componentes de
una mezcla, permitiendo identificar y
determinar las cantidades de dichos
componentes.

Dentro de una cromatografía siempre se

tendrá:
 Una fase móvil: la cual consiste en
un fluido (este puede se un gas,
liquido o bien un fluido súper
critico).
 Una fase estacionaria: esta se trata
de un sólido o un liquido fijado en
dolido.
Los componentes de la mezcla interaccionan en forma diferente con la fase estacionaria y con la
fase móvil. Es decir, los componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van
separando.

8
 DETECTORES UTILIZADOS EN LOS CROMATÓGRAFOS

En 1906 Tswett definió la cromatografía como:

“Método en el cual los componentes de una mezcla son separados en una

columna adsorbente dentro de un sistema fluyente”

Recientemente la I.U.P.A.C define la cromatografía de forma más amplia como:

“Método usado principalmente para la separación de los componentes de una

muestra, en el cual los componentes son distribuidos entre dos fases, una de
las cuales es estacionaria, mientras que la otra es móvil. La fase estacionaria
puede ser un sólido o un líquido soportado en un sólido o en un gel (matriz).
La fase estacionaria puede ser empaquetada en una columna, extendida en
una capa, distribuida como una película, etc...”
”

DETECTORES

El detector es la parte del cromatógrafo que se encarga de determinar cuándo ha salido el analito
por el final de la columna Existe una amplia gama de detectores disponibles tanto para GC y LC
cada uno con sus propias áreas específicas de aplicación. En general los que cuentan con mayor
respuesta catalítica y tiene mejor sensibilidad son los detectores con mejor respuesta específica.
El rendimiento de todos los detectores debe estar debidamente especificado con el fin de que el
operador, o bien la persona que haga uso de esta técnica, pueda determinar cuál es la más adecuada
y efectiva para una aplicación específica.

9
Las características de un detector ideal son:
 Sensibilidad: Es necesario que pueda determinar con precisión cuándo sale analito y cuando
sale sólo el gas portador. Tienen sensibilidades entre 10-8 y 10-15 g/s de analito.
 Respuesta lineal al analito con un rango de varios órdenes de magnitud.
 Tiempo de respuesta corto, independiente del caudal de salida.
 Intervalo de temperatura de trabajo amplio, por ejemplo desde temperatura ambiente hasta
unos 350-400 °C, temperaturas típicas trabajo.
 Estabilidad y reproducibilidad, es decir, a cantidades iguales de analito debe dar salidas de
señal iguales.
 Alta fiabilidad y manejo sencillo, o a prueba de operadores inexpertos.
 Respuesta semejante para todos los analitos, o
 Respuesta selectiva y altamente predecible para un reducido número de analitos.

Clasificación de los detectores

Detectores según su Grado de Selectividad:
 Universales. Responde a la mayoría de los solutos que pasan por él.
 Específicos ó Selectivos.
Exhibe una gran respuesta a un grupo particular de substancias con un mínimo de respuesta a otras.
Detectores en referencia a si la muestra es destruida o no.
 Destructivos
 No destructivos.
Detectores según su Modo de Respuesta:
 Dependientes del Flujo Másico. Producen una señal que es proporcional a la cantidad de
soluto que pasa a través de él en la unidad de tiempo pero es independiente del volumen
de gas portador requerido para la elución.
 Dependiente de la Concentración. Dan una señal proporcional a la cantidad de soluto por
unidad de volumen de gas portador que pasa a través de él.
Detectores según el proceso de detección:
 Ionización,
 Óptico-espectroscópico,
 Electroquímico, etc.

10
Estas especificaciones son también esenciales para comparar el rendimiento de los diferentes
detectores de las diversas compañías de fabricación de tales instrumentos. Las especificaciones del
detector deben ser presentadas en un formulario estándar y en las unidades estándar, por lo que los
detectores permiten así la facilidad de su uso. Las especificaciones de los detectores más
importantes se resumen a continuación.

Especificaciones Unidades
Rango dinámico
Ancho de detectores populares: FID, (DR) g/ml (e.g. 3 x 10-9 to 6 x 10-5 )
TCD, NPD, ECD y FPD

Índice de Respuesta (r) Sin Dimensiones

Rango Lineal dinámico (DLR) g/ml (e.g. 1 x 10-8 to 2 x 10-5 )

Detector de respuesta (RC) Voltios / g o (unidades de medición / g)

(ND), por lo general en milivoltios, pero puede

Detector de Nivel de Ruido
Sensibilidad o mínima concentración
detectable
ser en unidades específicas (por ejemplo, índice
de refracción unidades)
(XD) g / ml (por ejemplo de 3 x 8.10), pero se
puede en unidades específicas (por ejemplo, la
absorción unidades)

Sistema de Detección de Total ( ) (ml2 often ml2) D2

Dispersión

(longitud (l), y el radio (r)), (cm) Volumen de la

Dimensiones de la célula
célula (VD), ml.

Constante de tiempo (TD), Segundos

(DP) por lo general en el p.s.i EE.UU., en
Sensibilidad a la presión
Europa MPa

Tasa de flujo de sensibilidad (DQ) Por lo general, en ml / min

Rango de temperatura °C, °K

11
 Cromatografía de Gases

Dentro de la cromatografía de gases (GC) la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una

columna cromatográfica. La elución se produce por el flujo de una fase móvil de un gas inerte. A
diferencia de la mayoría de los potros tipos de cromatografías, la fase móvil no interacciona con las
moléculas del analito; su única función es la de trasportar el analito a través de la columna.

CROMATOGRAFIAS DE GASES

Cromatografia gas-sólido cromatografia gas-

(GSC) liquído (GLC)

Se basa en la
Se produce la relación distribucion del analito
de los analitos en una entre una fase móvil
fase estacionaria sólida gaseosa y una fase
como consecuencia de líquida inmovilizada
la adsorción fisica sobre la superficiede un
solido inerte.

Tiene gran aplicacion en

Ha tenido una aplicacion todos los campos de la
limitada debido a la ciencia y se denominación
retención generalmente como
semipermanente de las Cromatografía de gases
moleculas activas o (GC). En1985, se estimó
polares y a la obtencio de que unos 200 000
picos de elucion con colas. cromatografos de gas
estaban en uso.

12
 Detector de Cromatografía de Gases

Las características que tendría una detector ideal para la cromatografía de gases son las siguientes:
 Adecuada sensibilidad. Aquello que constituye una adecuada sensibilidad no puede
evaluarse de forma cuantitativa. En general, las sensibilidades de los detectores actuales se
encuentran en el intervalo de 10-15 a 10-8 g de soluto/s.
 Buena estabilidad y reproducibilidad.
 Respuesta lineal para los solutos que se extienda a varios órdenes de magnitud.
 Intervalo de temperaturas de trabajo comprendido desde la temperatura ambiente hasta al
menos 400 °C.
 Tiempo de respuesta corto que sea independiente del caudal.
 Alta fiabilidad y manejo sencillo. Hasta el punto de que el detector debería estar a prueba
de la impericia de operadores inexpertos.
 Respuesta semejante para todos los solutos o, por el contrario, una respuesta selectiva y
altamente predecible para uno o más tipos de solutos.
 No destructivo de la muestra.

Actualmente no existe un detector que reúna todas estas características, pero para que tener un buen
funcionamiento mínimo se tiene que contar con la mayoría de estas características.

Ionización de llama

Conductividad Térmica (TCD)

Detectoteres Quimioluminiscencia de azufre (SCD)

de...

Captura de Electrones (ECD)

Emision Atómica (AED)

13
 Cromatografía de líquidos de alta eficiencia

Hay cuatro tipos básicos cromatografía en los que la fase móvil es un líquido
(1) La cromatografía de reparto;
(2) La cromatografía de adsorción, o cromatografía líquido-sólido;
(3) La c cromatografía iónica
(4) La cromatografía de exclusión por tamaño, o c cromatografía en geles.

En una primera etapa, la cromatografía de líquidos se llevaba a cabo en columnas de vidrio con
diámetros de 1 a 5 cm y longitudes de 50 a 500 cm; en este tipo de columnas realizó Tswett sus
trabajos originales. Pero, los tiempos de separación eran largos, a menudo de varias horas. Sin
embargo, los intentos para acelerar el procedimiento clásico mediante la aplicación de vacío o por
bombeo no resultaron efectivos, puesto que el aumento de caudal originaba un aumento de la altura
de plato por encima del mínimo característico
En las primeras etapas del desarrollo de la cromatografía de líquidos, los científicos se dieron
cuenta que se podían conseguir grandes aumentos en la eficacia de la columna disminuyendo el
tamaño de las partículas de los rellenos. Sin embargo, no fue hasta finales de los años sesenta
cuando se desarrolló la tecnología adecuada para producir y utilizar rellenos de tamaño de partícula
tan pequeños como los del orden de 3 a 10 µm. Esta tecnología requiere una instrumentación
sofisticada para poder trabajar a altas presiones, lo que contrasta notablemente con las simples
columnas de vidrio de la c cromatografía de líquidos clásica cuyo caudal se debe a la gravedad.

14
 Detectores de Cromatografía de líquidos

Un detector ideal para c cromatografía de líquidos debería poseer todas las propiedades
relacionadas en la página 765, para la cromatografía de gases, con la excepción de que un detector
para cromatografía de líquidos no es necesario que sea sensible en un intervalo tan grande de
temperaturas. Además, un detector de HPLC debe tener un volumen interno mínimo a fin de reducir
el ensanchamiento de banda.

Sin embargo una de las mayores deficiencias para la cromatografía de líquidos es el definid en
aplicación universal por parte de los detectores y su fiabilidad de resultados. Esto debido al bajo
desarrollo con respecto al perfeccionamiento de los detectores.

LOD de masa
Disponible LOD de masa
Detector LC (detectores
comercialmente (estado actual)b
comerciales)a
Absorbancia Síc 100 pg-1 ng 1 pg
Fluorescencia Síc 1-10 pg 10 fg
Electroquímica Síc 10 pg-1 ng 100 fg

Índice de refracción Sí 100 ng-1 µg 10 ng

Conductividad Sí 500 pg-1 ng 500 pg
Espectrometría de
Síd 100 pg-1 ng 1 pg
masas
FT-IR Sí 1 µg 100 ng

Dispersión de la luze Sí 10 µg 500 ng

Actividad óptica No - 1 ng
Selectivo de
No - 10 ng
elementos
Fotoionización No - 1 pg-1 ng

Los detectores en cromatografía de líquidos son de dos tipos básicos.

 Los detectores que se basan en la medida de una propiedad de la disolución responden a
una propiedad del efluente, tal como el índice de refracción, la constante dieléctrica, o la
densidad, que se modifica por la presencia de los analitos.
 Los detectores basados en una propiedad del soluto responden a alguna de las propiedades
del soluto, como la absorbancia en el UV, fluorescencia, o corriente límite, que no son
inherentes a la fase móvil.

15
 Cromatografía con fluidos supercríticos

Durante las dos décadas pasadas se han desarrollado dos técnicas nuevas y prometedoras basadas en
el empleo de fluidos supercríticos, que desempeñaran un papel importante en el análisis de muestras
ambientales, biomédicas y de alimentos. Estos métodos son la cromatografía de fluidos
supercríticos (SFC) y la extracción con fluidos supercríticos (SFE). En la última década se han
comercializado equipos instrumentales para ambas técnicas y su empleo parece estar creciendo
rápidamente en la comunidad analítica. En este capítulo se describe el fundamento, la
instrumentación y las aplicaciones de ambos métodos.

Características de los fluidos supercríticos

La temperatura crítica de una sustancia es la temperatura por encima de la cual no puede existir en
fase líquida independientemente de la presión. La presión de vapor de una sustancia a su
temperatura crítica es supresión crítica. Una sustancia a temperaturas y presiones por encima de su
temperatura y de su presión crítica (punto crítico) se denomina fluido supercrítico. Los fluidos
supercríticos tienen densidades, viscosidades y otras propiedades que son intermedias entre las
características de esa sustancia en estado gaseoso y en estado líquido. Las propiedades
seleccionadas son aquellas que son significativas para la cromatografía de gases, líquidos y fluidos
supercríticos, así como para la extracción con fluidos supercríticos.

Gas Fluido supercrítico Líquido

Densidad (g/cm3) (0,6-2) x 10-3 0,2-0,5 0,6-2

Coeficiente de
(1-4) x 10-1 10-3-10-4 (0,2-2) x 10-5
difusión (cm2/s)

Viscosidad (g
(1-3) x 10-4 (1-3) x 10-4 (0,2-3) x 10-2
cm-1 s-1)

Una propiedad importante de los fluidos supercríticos, que está relacionada con sus densidades
elevadas (de 0,2 a 0,5 g/cm3), es su notable capacidad para disolver moléculas grandes no volátiles.
Por ejemplo, el dióxido de carbono supercrítico disuelve fácilmente n-alcanos que poseen entre 5 y

16
30 átomos de carbono, ftalatos de di-n-alquilo en los cuales los grupos alquilo contienen entre 4 y
16 átomos de carbono y diversos hidrocarburos aromáticos policíclicos que presentan varios anillos.
Una segunda propiedad notable de los fluidos supercríticos es que los analitos disueltos en ellos
pueden ser fácilmente recuperados por el procedimiento simple de permitir que las disoluciones se
equilibren con la atmósfera a temperaturas relativamente bajas. Así, un analito disuelto en dióxido
de carbono supercrítico, que es el usado más frecuentemente como disolvente, puede ser recuperado
sencillamente reduciendo la presión y dejando que el fluido se evapore en las condiciones
ambientales del laboratorio. Esta propiedad es particularmente importante en el caso de que los
analitos termolábiles. Otra ventaja de muchos de los fluidos supercríticos es que son baratos,
inocuos y no son sustancias tóxicas, por lo que se pueden dejar evaporar libremente en la atmósfera
sin efectos ambientales dañinos.

Temperatura Presión Densidad en el Densidad a

punto crítico,
Fluido crítica, °C crítica, atm 400 atm, glmL
g/mL

CO2 31.3 72.9 0.47 0.96

N2O 36.5 71.7 0.45 0.94
NH3 132.5 112.5 0.24 0.4
n-Butano 152 37.5 0.23 0.5

Detectores de los fluidos supercríticos

Se pueden utilizar como en la cromatografía de gases,

detectores de ionización de llama este detector es de respuesta
universal a compuestos orgánicos, de elevada sensibilidad y
exento de problemas, en general. Los espectrómetros de
masas también se pueden adaptar como detectores más
fácilmente para SFC que para HPLC. Muchos de los
detectores utilizados en cromatografía de líquidos se emplean
también en SFC, entre ellos detectores de absorción en el
ultravioleta y en el infrarrojo, de emisión de fluorescencia,
termoiónico y fotométrico de llama.

Detector de ionización de llama

17
 APLICACIÓN Y DESEMPEÑO CIENTÍFICO DE LA CROMATOGRAFÍA

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Information (NCBI) es parte de la Biblioteca Nacional de Medicina de Estados Unidos (National
Library of Medicine), una rama de los Institutos Nacionales de Salud (National Institutes of
Health o NIH). Está localizado en Bethesda, Maryland y fue fundado el 4 de noviembre de 1988
con la misión de ser una importante fuente de información de biología molecular. Almacena y
constantemente actualiza la información referente a secuencias genómicas en GenBank, un índice
de artículos científicos referentes abiomedicina, biotecnología, bioquímica, genética y genómica en
PubMed, una recopilación de enfermedades genéticas humanas en OMIM, además de otros datos
biotecnológicos de relevancia en diversas bases de datos.

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