GLUCOSA Procedimiento - Aplicar por separado sobre la
placa 2 µl de la Solución estándar A y B, y 2 µl de
HO la Solución muestra. Dejar secar las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el frente O del solvente haya recorrido aproximadamente tres OH cuartas partes de la longitud de la placa. Secar la OH OH placa bajo una corriente de aire caliente, desarrollar OH nuevamente los cromatogramas con Fase móvil renovada y secar la placa bajo una corriente de aire C6H12O6 PM: 180,2 caliente. Pulverizar sobre la placa con Revelador y 50-99-7 calentar a 130 °C durante 10 minutos: en el C6H12O6 . H2O PM: 198,2 5996-10-1 cromatograma obtenido a partir de la Solución Sinonimia - Dextrosa. muestra, la mancha principal debe ser similar en color, tamaño y valor de Rf, a la obtenida con la Definición - Glucosa es D-(+) glucopiranosa. Solución estándar A. El ensayo sólo es válido si el Es anhidra o puede contener una molécula de agua cromatograma obtenido a partir de la Solución de hidratación. Debe cumplir con las siguientes estándar B presenta cuatro manchas claramente especificaciones. separadas. Caracteres generales - Polvo cristalino blanco, B - Disolver 100 mg de Glucosa en 10 ml de de sabor dulce. Fácilmente soluble en agua; agua, agregar 3 ml de tartrato cúprico alcalino (SR) moderadamente soluble en alcohol. y calentar: se debe observar un precipitado rojo. Sustancias de referencia - Fructosa SR-FA. Acidez y alcalinidad Glucosa SR-FA. Lactosa SR-FA. Disolver 6 g de Glucosa en 25 ml de agua libre Sacarosa SR-FA. de dióxido de carbono y agregar 0,3 ml de fenolftaleína (SR1): la solución debe ser incolora y CONSERVACIÓN no debe consumir más de 0,15 ml de hidróxido de En envases de cierre perfecto. sodio 0,1 N (SV) para virar el indicador a rosa.
ENSAYOS Determinación de la rotación óptica <170>
Rotación específica: entre + 52,5° y + 53,3°, Identificación determinada sobre la sustancia en base anhidra. A - Aplicar la siguiente técnica cromatográfica. Solución muestra: pesar exactamente alrededor Fase estacionaria - Emplear una placa para de 10 g de Glucosa, disolver en 80 ml de agua, cromatografía en capa delgada (ver 100. agregar 0,2 ml de amoníaco diluido, dejar reposar Cromatografía) recubierta con gel de sílice para durante 30 minutos y diluir con agua a 100 ml. cromatografía, de 0,25 mm de espesor. Diluyente - Metanol y agua (3:2). Azúcares extraños, almidón soluble y Fase Móvil - 1,2-dicloroetano, ácido acético dextrinas glacial, metanol y agua (50:25:15:10). [NOTA: Disolver 1 g de Glucosa en 30 ml de alcohol al medir exactamente los volúmenes, ya que un ligero 90 % v/v a ebullición: el aspecto de la solución no exceso de agua puede producir turbidez.] debe cambiar al enfriar. Solución estándar A - Transferir 10 mg de Límite de sulfitos Glucosa SR-FA a un matraz de 20 ml, disolver y Solución estándar - Disolver 76 mg de completar a volumen con Diluyente. metabisulfito de sodio en agua y diluir a 50 ml con Solución estándar B - Transferir 10 mg de agua. Transferir 5 ml a un matraz aforado de Fructosa SR-FA, 10 mg de Glucosa SR-FA, 10 mg 100 ml y completar a volumen con agua. Transferir de Lactosa SR-FA y 10 mg de Sacarosa SR-FA a 3 ml de esta solución a un matraz aforado de un matraz aforado de 20 ml, disolver y completar a 100 ml, agregar 4 ml de hidróxido de sodio 0,1 N y volumen con Diluyente. completar a volumen con agua. A 10 ml de esta Solución muestra - Transferir 10 mg de solución agregar 1 ml de ácido clorhídrico al 31 %, Glucosa a un matraz aforado de 20 ml, disolver y 2 ml de fucsina decolorada y 2 ml de solución de completar a volumen con Diluyente. formaldehído al 0,5 % v/v y dejar reposar durante Revelador - Emplear una solución de 0,5 g de 30 minutos. timol en una mezcla de 5 ml de ácido sulfúrico y Solución muestra - Disolver 5,0 g de Glucosa 95 ml de alcohol. en 40 ml de agua, agregar 2 ml de hidróxido de sodio 0,1 N y diluir a 50 ml con agua. A 10 ml de esta solución, agregar 1 ml de solución de ácido Solución muestra - Disolver 10 g de Glucosa en clorhídrico al 31 %, 2 ml de fucsina decolorada y agua y diluir a 100 ml con agua. Diluir 5 ml de la 2 ml de solución de formaldehído al 0,5 % v/v y solución anterior a 15 ml con agua. dejar reposar durante 30 minutos. Procedimiento - A 0,2 ml de solución de Procedimiento - Determinar las absorbancias de calcio (100 ppm) (SL1), agregar 1 ml de oxalato de la Solución muestra y la Solución estándar (ver amonio al 4 %, dejar reposar 1 minuto y agregar 470. Espectrofotometría ultravioleta y visible) con una mezcla de 1 ml de ácido acético diluido y 15 ml un espectrofotómetro ajustado a 583 nm, de Solución muestra. Proceder del mismo modo empleando una solución tratada del mismo modo con un control preparado con 10 ml de una solución que la Solución muestra pero a partir de 10 ml de de calcio (10 ppm) (SL), 1 ml de ácido acético agua, como blanco. La absorbancia de la Solución diluido y 5 ml de agua. Luego de 15 minutos, si la muestra no debe ser mayor que la de la Solución Solución muestra presenta opalescencia, esta no estándar (15 ppm de SO2). debe ser más intensa que la del control (200 ppm). Límite de cloruro Límite de metales pesados <590> Solución muestra - Disolver 10 g de Glucosa en Método I. Disolver 4,0 g de Glucosa en agua agua y diluir con agua a 100 ml. Diluir 4 ml de la hasta 25 ml. El límite es 5 ppm. solución anterior a 15 ml con agua. Determinación de agua <120> Procedimiento - A 15 ml de Solución muestra Titulación volumétrica directa. Cuando en el agregar 1 ml de ácido nítrico al 12,5 %. Transferir rótulo se indique que Glucosa es anhidra no debe esta mezcla a un tubo de Nessler que contenga 1 ml contener más de 1,0 %, determinado sobre 0,5 g. de nitrato de plata (SR) y proteger de la luz. Cuando en el rótulo se indique que Glucosa es Proceder del mismo modo con 15 ml de una monohidrato debe contener entre 7,0 y 9,5 %, solución control preparada agregando 5 ml de agua determinado sobre 0,5 g. a 10 ml de solución de cloruro (5 ppm) (SL). Luego de 5 minutos, si la Solución muestra presenta Determinación del residuo de ignición <270> opalescencia, esta no debe ser más intensa que la Disolver 5 g de Glucosa en 5 ml de agua, del control (125 ppm). agregar 2 ml de ácido sulfúrico, evaporar a sequedad en un baño de agua y someter a ignición Límite de sulfato hasta peso constante. De ser necesario, calentar Solución muestra - Disolver 10 g de Glucosa en nuevamente con ácido sulfúrico. No debe contener agua y diluir a 100 ml con agua. Diluir 7,5 ml a más de 0,1 %. 15 ml con agua. Procedimiento - A 1,5 ml de solución de Ensayo de endotoxinas bacterianas <330> sulfato (10 ppm) (SL1) agregar 1 ml de cloruro de Cuando la Glucosa esté destinada a la bario al 25 %, agitar y dejar reposar durante preparación de formas farmacéuticas inyectables 1 minuto. Agregar 15 ml de Solución muestra y debe cumplir con los requisitos del ensayo. No 0,5 ml de ácido acético. Proceder del mismo modo debe contener más de 5,0 Unidades de Endotoxinas con 15 ml de solución de sulfato (10 ppm) (SL) por g. para obtener una solución control. Luego de 5 minutos, si la Solución muestra presenta ROTULADO opalescencia, esta no debe ser más intensa que la Indicar en el rótulo si Glucosa es anhidra o del control (200 ppm). monohidrato. Indicar en el rótulo cuando Glucosa Límite de arsénico <540> esté destinada a la preparación de formas Método I. No más de 1 ppm. farmacéuticas inyectables. Límite de bario Disolver 10 g de Glucosa en agua y diluir a 100 ml con el mismo solvente. A una porción de 10 ml de esta solución, agregar 1 ml de ácido sulfúrico diluido (Solución muestra) y a otra porción igual agregar 1 ml de agua (Solución blanco). Luego de 1 hora la Solución muestra no debe presentar mayor opalescencia que la Solución blanco. Límite de calcio