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TEMA 1

BACTERIAS
Tema 2.- Bacterias

1.- Introducción

Se denominan bacterias a los organismos procariotas, es decir, que no


contienen un núcleo definido.
Pertenecen al Reino Monera según la clasificación de los cinco reinos de
Whittaker.
En general las bacterias son microorganismos unicelulares mucho más
simples que las células eucariotas.
Su tamaño, refiriéndonos a las patógenas para el ser humano, puede
fluctuar entre 0,2 y 5 micras aproximadamente.
Fueron visualizadas por primera vez por Antón van Leeuwenhoek, que ya
en el siglo XVII, gracias a su microscopio simple consigue observarlas en la
naturaleza.
A lo largo del siglo XIX y XX, se ha ido desarrollando el su actividad,
desde las beneficiosas hasta las patógenas, no cerrándose las puertas a nuevos
descubrimientos durante el siglo actual.
A lo largo de este capítulo vamos a dar un breve repaso sobre su
morfología, estructura, diferenciación con las células superiores o eucarióticas,
así como intentaremos establecer los motivos de su gran variabilidad genética.

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2.- Morfología bacteriana

Las bacterias tienen en su gran mayoría una envoltura rígida o pared


bacteriana que determina su forma, pudiéndonos encontrar en relación con ella
a:
• Formas esféricas o cocos
• Formas cilíndricas o bacilos
• Formas helicoidales o espiroquetas
Algunas bacterias pueden carecer de pared celular, presentando
entonces un gran polimorfismo. Podemos encontrarnos con:
• Esferoplastos. Bacterias que han perdido la capacidad de
sintetizar la pared celular
• Protoplastos. Bacterias sin pared que pueden recuperar la
capacidad de sintetizar la pared.
• Formas L. Bacterias que de manera transitoria dejan de
sintetizar la pared celular
• Micoplasmas. Bacterias que carecen de pared celular, pero que
viven y se multiplican en condiciones normales sin necesidad de
ella.
En ocasiones, sobre todo dependiendo de las condiciones de cultivo (edad
del cultivo, tipo de medio sólido, o líquido, presencia de antimicrobianos, ….),
una misma especie puede presentar morfología variable. A este fenómeno se le
denomina pleomorfismo.

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3.- Agrupación microscópica

Las bacterias pueden agruparse microscópicamente en


• Conjunto de dos, denominados diplos
• Conjunto de varios formando cadenas, denominados estreptos
• Conjunto de varios formando masas, denominados estafilos
• Agrupaciones especiales, como son las de empalizada, letras
chinas, ….

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4.- Agrupación macroscópica

Al sembrar las bacterias sobre medios sólidos, al cabo de un tiempo se


puede observar masas de crecimiento, procedente de una unidad formadora de
colonias (U.F.C.) o bacteria, denominadas colonias. El estudio de dichas
colonias nos permite acercarnos a la identificación de las bacterias. Deberemos
estudiar en ellas:
• Tamaño
• Textura
• Bordes
• Aspecto
• Color
• ….

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5.- Elementos de la célula bacteriana

5.1.- Pared celular

La pared bacteriana además de dar la forma a la bacteria, la


protege, por su rigidez, de los cambios osmóticos. Es permeable y permite el
paso de sustancias de bajo peso molecular.
Químicamente, la parte rígida de la pared bacteriana es un
compuesto llamado peptidoglicano, polímero en forma de red formada por
largas cadenas lineales de moléculas (N-acetilglucosamina, ácido N-
acetilmurámico) unidas por enlaces cruzados (pentapéptidos originados en las
móléculas de N-acetilmurámico) entre ellas. Esta especie de red envuelve toda
la célula bacteriana y le da su forma.
En las bacterias gramnegativas, la pared está formada por dos
capas y la capa externa contiene unas moléculas llamadas lipopolisacáridos.
Estos lipopolisacáridos son sustancias extraordinariamente tóxicas
denominadas endotoxinas (L.P.S.).
En las bacterias grampositivas, la capa de peptidoglicano es mucho
más gruesa y la pared solo contiene una capa. Presenta dentro de sus
componentes, moléculas únicas en la naturaleza, como son los ácidos teicoicos.
El peptidoglicano no existe en las células eucarióticas y su
destrucción por medio de antimicrobianos es un excelente método de lucha
contra las infecciones bacterianas.
Estructura básica pero no fundamental.

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5.2.- Membrana celular

Se trata de una fina estructura compuesta de lípidos y proteínas,


formando una estructura trilaminar.
Permite el paso de solutos del exterior al interior y viceversa.
Puede presentar invaginaciones dentro del citoplasma denominadas
mesosomas que permiten aumentar la superficie de la membrana y participa en
la división celular (ver multiplicación bacteriana).
Estructura básica y fundamental.

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5.3.- Pilis o fimbrias

Son filamentos cortos, rígidos y muy finos de carácter proteico


(no visibles al microscopio óptico). Se originan a partir de la membrana
citoplasmática.
Son responsables de la capacidad adherente de algunas bacterias
a los tejidos (pilis adherentes). Algunos de ellos están relacionados con el
intercambio de material genético entre bacterias (pilis sexuales) (ver genética
bacteriana).
Estructura no básica ni fundamental.

5.4.- Cápsula

Capa de material amorfo usualmente de naturaleza polisacárida


que rodea la pared en muchas bacterias. Su presencia es factor importante de
virulencia, pues dificulta la fagocitosis.
Estructura no básica ni fundamental.

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5.5.- Órganos de locomoción

Son filamentos largos, que se originan en el citoplasma, de


carácter proteico.
A través de ellos podemos clasificar a las bacterias en:
• Atricas, que carecen de flagelos (normalmente inmóviles)
• Monotricas, que presentan un solo flagelo en uno de sus
extremos
• Lofotricas, que presentan un penacho de flagelos en uno de sus
extremos
• Anfitricas, que presentan un flagelo o un penacho de flagelos
en cada uno de sus extremos
• Peritricas, con flagelos a lo largo de toda sus superficie

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5.6.- Citoplasma

Es mucho más simple que el de las células eucarióticas,


conteniendo fundamentalmente
• Vacuolas y elementos nutritivos
• Cromosoma desnudo
• Ribosomas 70S
Es una estructura básica y fundamental.
5.7.- Núcleo bacteriano
Constituido por una doble cadena de ADN de carácter circular
(ver genética bacteriana).
Es una estructura básica y fundamental.

6.- Células procarióticas y células eucarióticas

Tabla 1.- Diferencias entre células procarióticas y eucarióticas

PROCARIOTICAS EUCARIOTICAS
Grupos Bacterias Algas y Hongos
Algas verde-azuladas Protozoos
Plantas
Animales
Pared celular Peptidoglicano Normalmente ausente
Citoplasma Simple Complejo
Movilidad Flagelos (simples) Flagelos (complejos)
Seudópodos
Otros órganos de
locomoción
Generación de energía Asociada a la membrana Mitocondrias
citoplasmática
Reproducción sexual Ausente Presente
Membrana nuclear No Si
Número de cromosomas Uno Múltiples
Tipo de cromosomas Circular Lineal
División por mitosis NO SI
Mitocondrias NO SI
Ribosomas 70S 80S

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7.- Esporas

Son formas de resistencia producidas por bacterias de los géneros


Bacillus y Clostridium por ejemplo, que les permiten sobrevivir en condiciones
adversas. Las esporas son unas estructuras densas en las que se transforman
las bacterias para resistir el calor o la desecación. Son muy resistentes a la
acción de los desinfectantes, al calor y frío. Cuando las condiciones vuelven a
ser favorables, las esporas germinan y dan de nuevo lugar a bacterias en forma
vegetativa.
El tamaño, la forma y la localización son útiles para la caracterización de
los microorganismos esporulados.
Pueden dividirse en razón de:
o Su forma en esféricas, ovales
o Su localización en centrales, terminales o subterminales
o Deformar la célula en deformantes y no deformantes
Son numerosos los estímulos que producen la inducción de la
esporulación. Entre ellos podemos citar:
o Agotamientos de nutrientes como glucosa, nitrógeno,
fosfatos,...
o Exposición a temperaturas no óptimas
o Potenciales redox subóptimos
El proceso simplificado se produce según las siguientes etapas:
o Aparición de un septo que rodea al material nuclear
o Formación de una capa cortical (peptidoglicano)
o Acumulación de iones en dicha cortical (debido a la
presencia del ácido dipicolínico)
o Aparición de varias capas más
o Liberación de la espora
Cuando las espora se coloca en condiciones ambientales favorables, se
produce la germinación. Bajo este estímulo, las enzimas son activadas,
degradan la corteza de la espora y liberan el material peptidoglicano, los iones
calcio y el ácido dipicolínico. Comienza la síntesis de ARN, seguido por la
síntesis de proteínas y, finalmente, la síntesis de ADN, obteniéndose una nueva
célula vegetativa.

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8.- Multiplicación bacteriana

Las bacterias se multiplican por fisión binaria.


En una primera fase la bacteria se alarga aumentando la síntesis de
pared y membrana celular. A la vez se separan las dos cadenas de ácido
nucleico, quedando cada una anclada a un mesosoma. Una vez realizada la
separación cada una de ellas da lugar a otra complementaria, mientras que se
comienza a estrechar la zona de crecimiento de la pared y membrana, dando
lugar más tarde a la separación de las dos células hijas.

9.- Curva de crecimiento microbiano

Cuando una población bacteriana es transferida a un nuevo medio de


cultivo líquido, comienza a multiplicarse de acuerdo con la dinámica que a
continuación se cita.
Pueden distinguirse 4 fases principales en el crecimiento de una
población bacteriana:
• Fase lag (1), período de adaptación antes de comenzar a
multiplicarse
• Fase exponencial (2), en la que la multiplicación bacteriana se
acelera enormemente y en cada generación se produce un
número de bacterias proporcional a las existentes
• Fase estacionaria (3), se alcanza cuando se consumen los
elementos nutritivos y el número de bacterias se mantienen
estable (equiparación entre la lisis y la multiplicación de la
población)

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• Fase de declive (4), en la que el número de bacterias viables


empieza a decrecer (se producen más muertes que divisiones)

ufc/ml

10.- Taxonomía bacteriana

Es la ciencia que identifica y nombra a los seres vivos y los ordena en


categorías llamadas taxones. Tiene tres componentes:
• Clasificación, o división de los microorganismos por grupos
ordenados
• Nomenclatura, es la asignación de nombres a estos grupos y la
asignación de un nombre a cada uno de los miembros
individuales del grupo
• Identificación o investigación, que es le proceso que permite
decidir a que taxón determinado pertenece a un ser vivo.
Para nombrar científicamente las bacterias se utiliza el sistema binomial
de nomenclatura o nomenclatura linneana (propuesta por Carl von Linne en
1750), utilizando como nombre de cada especie dos términos:
• El primero de ellos corresponde al nombre del género
(conjunto de especies muy parecidas). La primera letra se
escribe con mayúscula
• El segundo es el epíteto de especie y siempre se escribe con
minúscula

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Un conjunto de especies constituyen un género. Un conjunto de géneros


relacionados constituyen la familia y un conjunto de familias relacionadas
constituyen un orden.
Los nombre científicos de especies, géneros, familias, etc…, se escriben
en cursiva o subrayados. La primera vez que se cita una especie bacteriana
debe escribirse su nombre completo (p.e. Escherichia coli). Las veces sucesivas
que aparezcan el nombre de la especie, el apelativo de género puede escribirse
abreviado (p.e. E. coli). Las bacterias más comunes tienen, además, uno o varios
nombres coloquiales, relacionadas con alguna característica llamativa o con su
descubridor (Escherichia coli se denomina también coli o colibacilo,
Mycobacterium tuberculosis también se le conoce como bacilo de Koch).
Dentro de las especies podemos encontrar:
• Subconjuntos de microorganismos que llamamos subespecies
• Cepas, o microorganismos de una especie, que presentan una
diferencia con respecto a la especie convencional
• Biovariaciones, o grupos con caracteres bioquímicos comunes
• Serovariaciones o grupos con antígenos comunes
Estas subdivisiones dentro de las especies permite identificar
(tipificación) y trazar el recorrido (entre diversos hospedadores), así como la
capacidad de diseminación de determinadas cepas bacterianas, lo que es de
gran interés en Epidemiología para descubrir, por ejemplo, el origen y evolución
de brotes y epidemias.

11.- Cromosoma bacteriano

11.1.-Material genético en las bacterias. Ácidos Nucléicos

Los cromosomas son las estructuras físicas de las células donde se


sitúa y almacena la información que es transmitida por herencia entre las
sucesivas generaciones de seres vivos.
Cada bacteria presenta un solo cromosoma, constituido por una
doble cadena de ADN (Ácido desoxrribonucleico) en forma de círculo cerrado.
Los ácidos nucléicos son grandes moléculas que se encuentran en
todas las células y que deben su nombre a su abundancia en los núcleos de las
células eucariotas.
Los ácidos nucléicos están compuestos por unas unidades
denominadas nucleótidos. Cada nucleótido es formado por:

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• Un azucar de tipo pentosa


o Desoxirribosa en el ADN
o Ribosa en el ARN
• Una base nitrogenada
o Bases púricas
ƒ Adenina (A)
ƒ Guanina (G)
o Bases pirimidínicas
ƒ Citosina (C)
ƒ Timina (T)
ƒ Uracilo (U), que sustituye a la citosina
en el ARN
• Un grupo fosfato
La base se une al carbono 1´ de la pentosa mientras que y el
fosfato al carbono 5´.
Los nucleótidos se unen en grandes moléculas, denominadas
polinucleótidos.
11.2.- Tipos de ADN

11.2.1.- ADN cromosómico

El cromosoma de las células bacterianas consiste en una sola


molécula de ADN, covalentemente cerrada y dispuesta de modo compacto en
una zona nuclear, aunque a diferencia de las células eucarióticas, no se
encuentra rodeado por una membrana nuclear.
La morfología del cromosoma depende de la base de
desarrollo del microorganismo, aunque generalmente adopta una disposición
redondeada y está unido a la membrana citoplasmática directamente o por
medio de los mesosomas.
El ADN se encuentra dividido en unidades funcionales u
genes. Estos genes pueden ser de dos tipos:
• Aquellos cuya secuencia de bases codifica cadenas
polipeptídicas o moléculas de ADN (genes
estructurales).
• Los que únicamente tienen una función reguladora
en la expresión de los anteriores (genes
reguladores). Es decir los genes reguladores
actúan activando o deteniendo la actividad de los

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genes estructurales de acuerdo con las


necesidades de la célula.

11.2.2.- ADN extracromosómico

Los plásmidos son moléculas circulares de ADN, de carácter


extracromosómico, que llevan genes no esenciales para la bacteria y que se
replican independientemente del cromosoma bacteriano. Su tamaño es mucho
menor que el del cromosoma y en una misma célula bacteriana pueden coexistir
varios plásmidos. La información que reside en los plásmidos no es vital para la
célula bacteriana, aunque su presencia puede suponer ventajas en condiciones
adversas. Los plásmidos pueden transferirse entre bacterias (ver intercambio
genético) o recombinarse (integrarse) en el ADN cromosómico o en otros
plásmidos. La cadena de ADN del plásmido se abre y se suelda a la cadena de
ADN del cromosoma o de otro plásmido, que evidentemente se hace más
grande al integrarse el plásmido.
Análogamente, los plásmidos integrados en el cromosoma
pueden separarse de éste y convertirse de nuevo en plásmidos libres. Cuando
un plásmido integrado en el cromosoma de una bacteria lo abandona para
convertirse de nuevo en un plásmido libre, puede arrastrar pegado a él otros
genes contiguos del cromosoma o dejar alguno de sus genes en el cromosoma.
De este modo puede producirse un intercambio de genes dentro de una misma
bacteria entre el cromosoma y los plásmidos.
La clasificación comúnmente seguida de los plásmidos está
en función de los caracteres fenotípicos que originan:
• Determinantes de patogenicidad, que codifican toxinas o
factores de virulencia. Como ejemplos tenemos el
plásmido inv que confiere invasividad en mucosa
intestinal por microorganismos enteroinvasivos. Otro
ejemplo sería el plásmido ent que codifica enterotoxinas.
• Plásmidos sexuales, que codifican pilis sexuales,
permitiendo la transferencia de material genético.
• Plásmidos R (determinantes de resistencia), que
codifican enzimas responsables de resistencia de
bacterias gramnegativas a antimicrobianos. Como
ejemplo tenemos las betalactamasas que inactivan a los
betalactámicos (penicilinas y derivados).
• Plásmidos crípticos, de los que se desconoce su función.

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11.3.- Tipos ARN


Encontramos 3 tipos de ARN monocatenario en las bacterias y en
las células eucarióticas. Estos 3 tipos son:
• ARN mensajero (ARNm) actúa como portador de la
información contenida en el ARN
• ARN de transferencia (ARNt), transporta los
aminoácidos y traduce el mensaje del ARN
• ARN ribosómico (ARNr). Es constitutivo del ribosoma

11.4.- Variaciones genéticas bacterianas

11.4.1.- Variaciones fenotípicas

Solo afectan a sus caracteres fenotípicos (no heredables),


generalmente como consecuencia de la influencia del medio ambiente externo
(expresión o represión de operones). Como ejemplo podemos poner el aumento
de producción del enzima penicilinasa por algunos estafilococos en respuesta a
la presencia de penicilina en el medio.

11.4.2.- Variaciones genotípicas

11.4.2.1.- Concepto

Son las que afectan al genoma y son por tanto


heredables. Pueden ser a su vez sin transferencia de material genético
(mutación) o con intercambio de material genético (transferencia).

11.4.2.2.- Mutación bacteriana

Son cambios en la secuencia de nucleótidos del ADN


de la bacteria, no relacionados con la transferencia de material genético. La
mutación produce un cambio en el patrón del ADN (secuencia de bases), lo que
lleva a que se sintetice un ARN anómalo. Este ARN alterado produce la síntesis
de proteínas alteradas. Estas proteínas alteradas pueden originar un cambio
observable (bacteria de fase L a fase R), mientras que otras veces son
proteínas no funcionales y en este caso no se observan alteraciones aparentes.

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Si la proteína afectada es vital para la bacteria, la mutación lleva a la muerte


de esta última.
Las mutaciones pueden producirse espontáneamente
(baja frecuencia) o pueden inducirse por agentes mutágenos (bromouracilo,
hidroxilamina, mitomicina C, radiación UV, etc…). Es importante señalar que la
gran mayoría de los agentes mutágenos para las bacterias, lo son también para
las células eucarióticas, por lo que son potencialmente cancerígenas o
teratógenas.
La mutación puede afectar a un solo par de bases
complementarias (mutaciones puntuales) o a fragmentos de ADN. Las
mutaciones puntuales pueden originarse por sustitución (cambio de una base
por otra) o por adición o pérdida de un nucleótido.
Otro mecanismo de mutación es la traslocación
(escisión e integración) de trasposones o secuencias de inserción. Las
secuencias de inserción son secuencias cortas y repetitivas presentes en el
cromosoma bacteriano o en los plásmidos. Los trasposones son fragmentos de
ADN limitados por dos secuencias de inserción con una elevada movilidad
dentro de la misma molécula de ADN (plásmido o cromosoma) o entre moléculas
distintas. El desplazamiento de trasposones es uno de los principales
mecanismos de los que dispone un microorganismo para la adquisición de nuevas
actividades metabólicas o resistencias a antimicrobianos.

11.4.2.3.- Intercambios genéticos

11.4.2.3.1.- Transformación

Consiste en la incorporación de material


genético (ADN) libre por parte de una bacteria, el cuál está presente en el
medio procedente de la lisis de otras bacterias.

Una vez dentro de la bacteria receptora, el


ADN ha de integrarse en el cromosoma receptor, replicándose y expresándose
como este. Este fenómeno se conoce a través del experimento de Griffitt.

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A- Al inocular una cepa de neumococo capsulado a un


lote de ratones, al cabo de 24 horas estos mueren.
Al realizarles la autopsia, se observa lesiones en los
tejidos y al sembrar dichos tejidos se obtiene un
cultivo de neumococo capsulado.
B- Al inocular una cepa de neumococo no capsulado a
un lote de ratones, al cabo de 24 horas estos
sobreviven. Al sacrificarlos y hacerles la autopsia,
no se observan lesiones y los cultivos de los tejidos
resultan negativos.
C- Al inocular una cepa de neumococo no capsulado
muerto a un lote de ratones, al cabo de 24 horas
estos sobreviven. Al sacrificarlos y hacerles la
autopsia, no se observan lesiones y los cultivos de
los tejidos resultan negativos.
D- Al inocular una mezcla de cepas de neumococo
vivos no capsulados y neumococos muertos
capsulados a un lote de ratones, al cabo de 24
horas estos mueren Al realizarles la autopsia, se
observan lesiones en los tejidos y al sembrar dichos
tejidos se obtiene un cultivo de neumococo
capsulado.

11.4.2.3.2.- Transducción

Consiste en la transferencia de ADN cromosómico o


plasmídico de una bacteria a otra a través de un bacteriófago. En algunos casos
el material genético incorporado es el propio virus infectante, que queda en
estado de latencia, marcando una característica a la bacteria a partir de ese
momento. A este fenómeno se le conoce como conversión lisogénica y es un
fenómeno inestable ya que en cualquier momento el virus puede activarse y
producir la lisis de la bacteria.

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11.4.2.3.3.- Conjugación

Es el intercambio de material genético entre


dos bacterias (donante y receptora) mediante contacto físico entre ambas. La
unión entre donante y receptor se efectúa mediante los pilis conjugativos o
pilis sexuales (estructuras microtubulares de origen proteico) que posee el
donante. Los pilis conjugativos son estructuras en forma de tubo hueco que
unen al donante con el receptor y a través de las cuales pasa el material
genético (plásmidos).
La bacteria que contienen el plásmido (plásmido
F) capaz de producir esos pilis se denomina F+, mientras que la receptora no
contiene dicho plásmido y se denomina F-. Durante la conjugación, el plásmido F
se replica en la bacteria donante y una copia pasas a la bacteria F-, que al
terminar el proceso habrá pasado a ser F+. Muchos plásmidos aprovechan que la
bacteria tiene ese plásmido F para, una vez replicados se incorporan a la célula
receptora. Pueden ser capaces de transmitir resistencias múltiples a
antimicrobianos, actividades metabólicas,….

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En algunas ocasiones el plásmido F, se encuentra integrado al


cromosoma bacteriano. A estas células se las reconoce como Hfr y su posible
transferencia a la célula receptora, suele llevar consigo la transferencia de
parte del cromosoma de la célula donadora.

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